Nghiên cứu khả năng đối kháng của nấmtrichoderma với nấm phytophthora gây bệnh tiêuchết nhanh

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊNTHAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014 - 2015 NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA NẤM Trichoderma VỚI NẤM Phytophthora GÂY BỆNH TIÊU CHẾT NHANH Sinh viên thực hiện: Lư Thị Thu Thảo Lê Văn Thường Trương Thị Hường Nguyễn Trần Ái Nhung Người hướng dẫn: Nguyễn Anh Dũng TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊNTHAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014 - 2015 NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA NẤM Trichoderma VỚI NẤM Phytophthora GÂY BỆNH TIÊU CHẾT NHANH Sinh viên thực hiện: Nguyễn Trần Ái Nhung Nam, Nữ: Nữ Dân tộc: Kinh Lớp, khoa: C13SH01 Năm thứ: 2/3 Ngành học: Sư phạm sinh học Người hướng dẫn: ThS Nguyễn Anh Dũng UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Nghiên cứu khả đối kháng nấm Trichoderma với Phytophthora gây bệnh tiêu chết nhanh - Sinh viên thực hiện: Nguyễn trần Ái Nhung - Lớp: C13SH01 Khoa: Khoa Khoa học tự nhiên Năm thứ: Số năm đào tạo: - Người hướng dẫn: Nguyễn Anh Dũng Mục tiêu đề tài: - Phân lập số chủng nấm Phytophthora gây bệnh tiêu chết nhanh - Sàng lọc số chủng nấm Trichoderma đối kháng với nấm Phytophthora - Giúp sinh viên tiếp cận với số phương pháp nghiên cứu vi sinh phịng thí nghiệm tìm hiểu việc ứng dụng nấm Trichoderma vào phịng trừ nấm Phytophthora gây bệnh chết nhanh tiêu Tính sáng tạo: Khả đối kháng dịch chiết Trichoderma với Phytophthora Kết nghiên cứu: Trong số 10 chủng Trichoderma dùng nghiên cứu Trên môi trường thạch đĩa Các chủng Trichoderma T13, Trichoderma T14 Trichoderma T15 có khả đối kháng tốt với Phytophthora, đạt hiệu từ 81,3 - 84,5% sau thời gian ngày Trên môi trường nước, chủng Trichoderma T15 có khả ức chế hình thành bào tử hậu lẫn bào tử túi Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòngvà khả áp dụng đề tài: - Nâng cao khả kiểm soát bệnh tiêu chết nhanh Công bố khoa học sinh viên từ kết nghiên cứu đề tài Ngày tháng năm Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn trần Ái Nhung Những thành viên tham gia STT Tên Lư Thị Thu Thảo Lê Văn Thường Trương Thị Hường Nguyễn Trần Ái Nhung Lớp C13SH01 C13SH01 C13SH01 C13SH01 Nhận xét người hướng dẫn đóng góp khoa học sinh viên thực đề tài: Xác nhận lãnh đạo khoa (ký, họ tên) Ngày tháng năm Người hướng dẫn (ký, họ tên) UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ LƯỢC VỀ SINH VIÊN: Ảnh 4x6 Họ tên: Nguyễn trần Ái Nhung Sinh ngày:16 tháng 11 năm 1995 Nơi sinh: Bà Rịa-Vũng Tàu Lớp: C13SH01 Khóa:2013 - 2014 Khoa: Khoa Khoa Học Tự Nhiên Địa liên hệ: Điện thoại : 01668577404 Email: Ainhung.spsh@gmail.com II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP(kê khai thành tích sinh viên từ năm thứ đến năm học): * Năm thứ 1: Ngành học: Sư phạm Sinh Học Khoa: Khoa Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học tập: Trung Bình Sơ lược thành tích: * Năm thứ 2: Ngành học: Sư Phạm Sinh Học Khoa: Khoa Khoa Học Tự Nhiên Kết xếp loại học tập: Trung Bình Sơ lược thành tích: Xác nhận lãnh đạo khoa (ký, họ tên) Ngày tháng năm Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn trần Ái Nhung TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014-2015 NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA NẤM Trichoderma VỚI NẤM Phytophthora GÂY BỆNH TIÊU CHẾT NHANH Sinh viên thực hiện: Lê Văn Thường Nam, Nữ: Lớp, khoa: Khoa Học Tự Nhiên Năm thứ: 3/Số năm đào tạo: Ngành học: Sư phạm Sinh học Dân tộc: Nam Kinh Người hướng dẫn: Thạc sĩ Trần Ngọc Hùng Bình Dương – Tháng năm 2015 MỤC LỤC CHƯƠNG MỞ ĐẦU Tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài Lý chọn đề tài 3 Mục tiêu đề tài CHƯƠNG 1: CƠ SỞ LÝ THUYẾT 1.1 Giới thiệu hồ tiêu 1.1.1 Đặc điểm chung hồ tiêu .5 1.1.2 Giá trị kinh tế hồ tiêu .5 1.1.3 Bệnh tiêu chết nhanh 1.2 Giới thiệu nấm Phytophthora 1.2.1 Đặc điểm chung 1.2.2 Đặc điểm sinh trưởng .8 1.2.3 Khả gây bệnh Phytophthora trồng .9 1.3 Giới thiệu Trichoderma 10 1.3.1 Đặc điểm chung 10 1.3.2 Đặc điểm sinh trưởng .11 1.3.3 Khả đối kháng Trichoderma với nấm bệnh .12 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2 Vật liệu 15 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu .15 2.2.2 Phạm vi nghiên cứu 15 2.2.3 Môi trường dùng nghiên cứu 15 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Phương pháp phân lập nấm bệnh Phytophthora .16 2.3.2 Phương pháp kích thích bào tử nang chủng Phytophthora sp 16 2.3.3 Phương pháp xác định hiệu đối kháng Trichoderma nấm bệnh 16 2.3.4 Phương pháp xác định hiệu đối kháng dịch chiết Trichoderma với Phytophthora 17 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Phân lập nấm bệnh Phytophthora 18 3.2 Hiệu đối kháng Trichoderma Phytophthora 19 3.2.1 Đối kháng môi trường thạch đĩa 19 3.2.2 Đối kháng môi trường lỏng .21 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận .25 4.2 Kiến nghị 25 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước 26 Tài liệu nước 27 Tài liệu internet 27 24 Đối chứng T13 T14 T15 100 50 100 50 100 50 (bào tử hậu) + ++ + ++ ++ - + + + + - 25 Ghi chú: +: có xuất bào tử 26 ++: xuất nhiều bào tử 27 -: không xuất bào tử 28 29 a b 30 31 c d 32 33 Hình Khả đối kháng dịch chiết Trichoderma với Phytophthora a,b) Đối chứng Phytophthora c) Phytophthora tao bào tử hậu môi trường chứa dịch chiết Trichoderma T13 d) Phytophthora tạo bào tử túi môi trường dịch chiết Trichoderma T13 e) Phytophthora tạo bào tử hậu môi trường chứa dịch chiết Trichoderma T14 f) Phytophthora không tạo bào tử môi trường chứa dịch chiết Trichoderma T15 Qua thí nghiệm, chúng tơi nhận thấy dịch chiết chủng Trichoderma có khả chủng Phytophthora với mức độ e ức chế hình thành bào tử f khác Chủng Trichoderma T13 khơng có khả ức chế hình thành bào tử túi bào tử hậu Ở hai nồng độ 100% 50%, Phytophthora tạo bào tử hậu bào tử túi nhiều đĩa đối chứng (Hình 7c,7d) Ngun nhân chủng Trichoderma T13 khơng có khả ức chế, kết hợp với môi trường dịch chiết chứa nhiều chất dinh dưỡng so với môi trường nước Ở nồng độ dịch chiết 100%, chủng Trichoderma T14 có khả ức chế hình thành bào tử túi, khơng ức chế khả hình thành bào tử hậu (Hình 7e) Đối với chủng Trichoderma T15 có khả ức chế mạnh Ở nồng độ dịch chiết 50%, chủng Trichoderma T15 có khả ức chế hình thành hai bào tử túi bào tử hậu (Hình f) Chúng tơi nhận thấy chủng Trichoderma T15 có tiềm đối kháng tốt, ức chế khả hình thành bào tử túi bào tử hậu Phytophthora Vì vậy, cần nghiên cứu thêm để ứng dụng vào thực tiễn sống 34 35 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Từ mẫu tiêu bệnh Bà Rịa-Vũng Tàu, Bình Dương Bình Phước sử dụng phương pháp bẫy tiêu để phân lập chủng nấm gây bệnh tiêu, kết thu chủng nấm bệnh Bà Rịa-Vũng Tàu Trên môi trường PGA đường kính khuẩn lạc khoảng 4,3-4,7cm sau ngày ni cấy Bào tử hậu hình cầu, bào tử túi hình chanh Trong môi trường nước, bào tử túi bào tử hậu hình thành sau ngày Trong số 10 chủng Trichoderma dùng nghiên cứu Trên môi trường thạch đĩa Các chủng Trichoderma T13, Trichoderma T14 Trichoderma T15 có khả đối kháng tốt với Phytophthora, đạt hiệu từ 81,3 - 84,5% sau thời gian ngày Trên mơi trường nước, chủng Trichoderma T15 có khả ức chế hình thành bào tử hậu lẫn bào tử túi 4.2 Kiến nghị Phân lập thêm nhiều chủng Phytophthora địa phương khác Cần có thí nghiệm đồng ruộng để đánh giá xác kết đối kháng Trichoderma với Phytophthora 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn (2007), Quản lý bệnh Phytophthora hại trồng Việt Nam, Báo cáo tổng kết dự án Bộ Nông nghiệp Phát triển Nơng thơn (2013), Phịng trừ số bệnh gây hại tiêu Thái Bình (2012), Sử dụng nấm đối kháng Trichoderma Asperellum phòng trừ nấm Phytophthora spp gây hại cao su, Trang thông tin điện tử UBND Thị xã Bình Long Trần Thị Lệ Hằng (2012), Nghiên cứu gây bệnh số chủng vi nấm gây bệnh dứa (Ananas comosua) số khu vực Bắc Quảng Nam, Luận văn Thạc sĩ, Đại học Huế Nguyễn Thị Lan Hương (2011), Nghiên cứu tạo chế phẩm Trichoderma đối kháng với số chủng nấm bệnh Phytophthora gây bệnh tiêu, Khóa luận tốt nghiệp, ĐH Tơn Đức Thắng Nguyễn Bảo Hưng (2010), Tạo dòng biểu gen chitinase từ nấm Trichoderma, Luận văn Thạc sĩ, ĐH Huế Nguyễn Thị Hương, Đồ án Trichoderma reesei: Tìm hiểu gen qui định enzyme cellulose số phương pháp nâng cao khả phân hủy cellulose, ĐH Bách Khoa TP.HCM Lester W Burgess,Timothy E Knight, Len Tesoriero Phan Thuy Hien (2009), Cẩm nang chuẩn đoán bệnh Việt Nam, Trung tâm nghiên cứu nông nghiệp quốc tế Ustralia Nguyễn Đăng Long (1992), Kết nghiên cứu bệnh hại tiêu 19871991, Rhone-Poulenc, TP Hồ Chí Minh 10 Nguyễn Huỳnh Hoàng Minh (2006), Định danh nấm Phytophthora spp Bằng kỹ thuật sinh học phân tử, Luận văn kỹ sư, Đại học Nơng lâm TP Hồ Chí Minh 37 11 Nguyễn Đình Khơi Ngun (2009) Nghiên cứu khả kháng nấm tạo chế phẩm sinh học từ Trichoderma 12 Nguyễn Vĩnh Tường (2008), Kỹ thuật bẫy theo dõi nguồn bệnh Phytophthora gây bệnh thối gốc rễ hồ tiêu đất, Tạp chí BVTV số 13 Tô Thị Nhã Trầm (2007), Khảo sát ảnh hưởng dịch nấm Phtophthora capsici tác nhân hóa lý đến sinh trưởng khả tạo đột biến tiêu (Piper nigrum L.) nuôi cấy mơ, Khóa luận tốt nghiệp, ĐH Nơng Lâm TP.HCM 14 Nguyễn Cảnh Trí (2010), Khảo sát đặc điểm sinh học số chủng nấm sợi thuộc hai chi Trichoderma Fusarium từ rừng ngập mặn Cần Giờ – TP Hồ Chí Minh, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, ĐH Sư Phạm TP Hồ Chí Minh 15 Nguyễn Vĩnh Trường, Edward C.Y Liew Lester W Burgess (2006) Hình thức sinh sản hữu tính Phtophthora capsici Leonian, tác nhân gây bệnh chết héo hồ tiêu Tạp chí BVTV, số 3: 14-18 16 Nguyễn Thị Khả Tú (2007), Định danh phân nhóm nấm Trichoderma spp Phân lập Việt Nam, Đại học Nơng lâm TP Hồ Chí Minh Tài liệu nước 17 Clipson N., Landy E., 2001 European register of marine species: a checklist of the marine species in European ang a bibliography of guides to their identification Collection Patrimoines Naturels, 50, 15-19 Tài liệu internet 18 http://iasvn.org/upload/files/Y2AUQQVNZISan xuat ho tieu.PDF TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014-2015 NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA NẤM Trichoderma VỚI NẤM Phytophthora GÂY BỆNH TIÊU CHẾT NHANH Bình Dương – Tháng năm 2015