(Luận văn) phân lập và nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn aeromonas hydrophila gây bệnh xuất huyết trên cá chép và biện pháp điều trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM lu an n va PHẠM TUẤN ANH p ie gh tn to PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH d oa nl w SINH HỌC CỦA VI KHUẨN AEROMONAS HYDROPHILA GÂY BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ CHÉP VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ oi lm ul nf va an lu z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y z m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM lu an PHẠM TUẤN ANH n va p ie gh tn to PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN AEROMONAS HYDROPHILA nl w GÂY BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ CHÉP VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ d oa Chuyên ngành: Thú y va an lu Mã số: 60 64 01 01 oi lm ul nf LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y z at nh z Người hướng dẫn khoa học: GS.TS NGUYỄN QUANG TUYÊN PGS.TS PHẠM THỊ TÂM m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2016 n va ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc hoàn thành luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ lu nguồn gốc an Thái Nguyên, tháng năm 2016 va n Tác giả p ie gh tn to w d oa nl Phạm Tuấn Anh oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập hoàn thành luận văn, với nỗ lực thân, nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể Tôi xin đặc biệt bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc cảm ơn chân thành tới: Giảng viên hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên, Đại học Nông Lâm Thái Nguyên PGS.TS Phạm Thị Tâm, Viện Đại học Mở lu Hà Nội trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình suốt an trình nghiên cứu hồn thành Luận văn va Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm n Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình học tập p ie gh tn to khoa thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo công tác Viện Đại học w Mở Hà Nội Viện Khoa học sống - Đại học Thái Nguyên giúp đỡ oa nl hoàn thành Luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn lãnh đạo cán nhân viên trạm Thú y Văn Quan, Cao Lộc Đình Lập thuộc Chi cục Thú d an lu y tỉnh Lạng Sơn, giúp tơi q trình thực đề tài va Cuối tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc ủng hộ, động viên, ul nf giúp đỡ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập, oi lm nghiên cứu hoàn thành tốt luận văn z at nh Trong q trình thực luận văn khơng tránh khỏi thiếu sót Kính mong góp ý nhận xét q thầy để giúp Tơi có nhiều kinh z nghiệm bổ ích cho cơng việc sống sau @ Thái Nguyên, tháng năm 2016 m co l gm Tác giả an Lu n va Phạm Tuấn Anh ac th si iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH, BIỂU ĐỒ viii lu MỞ ĐẦU an Tính cấp thiết đề tài va n Mục đích để tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU gh tn to Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài p ie 1.1 Tình hình bệnh vi khuẩn A.hydrophila w 1.1.1 Tình hình giới oa nl 1.1.2 Tình hình nước d 1.2 Một số đặc điểm vi khuẩn A hydrophila, gây bệnh xuất huyết lu an cá chép nf va 1.2.1 Đặc điểm vi khuẩn A hydrophila oi lm ul 1.2.2 Cơ chế gây bệnh 1.3 Yếu tố độc tố gen gây bệnh z at nh 1.4 Biểu bệnh 10 1.6 Mùa vụ xuất bệnh 13 z 1.7 Cơ chế tạo vacin phòng bệnh cho cá 13 @ gm 1.8 Điều trị bệnh xuất huyết cá vi khuẩn A hydrophila gây 13 m co l 1.8.1 Điều trị kháng sinh 14 1.8.2 Sử dụng chất kích thích miễn dịch 15 an Lu Chương 2: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tượng nghiên cứu 16 n va ac th si iv 2.2 Địa điểm nghiên cứu 16 2.3 Thời gian thực 16 2.4 Nội dung 16 2.5 Vật liệu 16 2.5.1 Thiết bị dụng cụ phịng thí nghiệm 16 2.5.2.Mơi trường hóa chất 17 2.6 Phương pháp nghiên cứu 19 lu 2.6.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 19 an 2.6.2 Phân lập vi khuẩn A.hydrophila 19 va n 2.6.3 Phương pháp xác định số đặc điểm sinh vật học chủng 2.6.4 Xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn A p ie gh tn to A.hydrophila phân lập 21 hydrophila phân lập 24 w 2.6.5 Phương pháp xác định độc lực khả gây bệnh oa nl chủng vi khuẩn A hydrophila phân lập 26 d 2.6.6 Phương pháp tách độc tố 27 lu an 2.6.7 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh nf va chủng vi khuẩn A hydrophila phân lập 28 oi lm ul 2.6.8 Phương pháp xử lí số liệu 28 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 29 z at nh 3.1 Kết điều tra tình hình dịch tễ bệnh xuất huyết cá chép số điểm nuôi cá số huyện tỉnh Lạng Sơn 29 z 3.2 Kết phân lập vi khuẩn Aeromonas spp gây bệnh cá chép 31 @ gm 3.3 Kết xác định điều kiện ni cấy thích hợp khả gây dung m co l huyết vi khuẩn A hydrophila 37 3.3.1 Nhiệt độ thời gian nuôi cấy 37 an Lu 3.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả gây dung huyết thạch máu vi khuẩn A hydrophila 40 n va ac th si v 3.3.3 Ảnh hưởng độ pH đến khả sinh trưởng vi khuẩn A hydrophila 41 3.3.4 Ảnh hưởng độ mặn (NaCl) đến khả sinh trưởng vi khuẩn A hydrophila 43 3.3.5 Kết xác định độc lực chủng A hydrophila phân lập động vật thí nghiệm 44 3.4 Kết xác định gen độc tố chủng A hydrophila gây bệnh cho cá chép 46 lu 3.5 Khả gây bệnh cho cá chép chủng vi khuẩn phân lập 47 an 3.5.1 Kết gây nhiễm cá độc tố Aerolysin 48 va n 3.5.2 Gây nhiễm vi khuẩn 49 tn to 3.6 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi gh khuẩn A hydrophila phân lập 50 p ie 3.7 Kết điều trị thử nghiệm điều trị kháng sinh 53 w KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 56 d oa nl TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si vi DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT an n va p ie gh tn to (+) : Dương tính A hydrophila : Aeromonas hydrophila ATC : Aerolysin Cytotoxic enterrotoxin BHI : Brain Heart Infusion BXH : Bệnh xuất huyết KIA : Kligler Iron Agar LB : Lysogeny Broth LPS : Lipopolysacharide Môi trường LB : Môi trường Luria-Bertani Môi trường TSA : Môi trường tryptone casein soy agar MRS : DE MAN, ROGOSA, SHARPE : Nuclear Factor-kappa B : Âm tính w lu (-) : Polymerase Chain Reaction nf va : Polyethylene oi lm ul PE : Plate count agar an PCR lu PCA : Phosphate buffer saline d PBS oa nl NF - Kb : Type III secretion system VAC : Vườn ao chuồng z at nh TTSS z m co l gm @ an Lu n va ac th si vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Điều tra tình hình cá mắc bệnh xuất huyết ao nuôi 30 Bảng 3.2 Kết phân lập vi khuẩn A Hydrophila 33 Bảng 3.3 Một số đặc tính sinh vật học điển hình vi khuẩn A hydrophila phân lập cá chép 34 Bảng 3.4: Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả sinh trưởng lu vi khuẩn A hydrophila chủng C5 38 an Bảng 3.5: Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả sinh trưởng va n vi khuẩn A hydrophila chủng C8 39 tn to Bảng 3.6 Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả gây dung gh huyết thạch máu vi khuẩn A hydrophila C5 C8 40 p ie Bảng 3.7 Ảnh hưởng pH lên khả sinh trưởng phát triển w vi khuẩn 42 oa nl Bảng 3.8 Ảnh hưởng nồng độ muối lên khả sinh trưởng d phát triển vi khuẩn A hydrophila 44 lu an Bảng 3.9: Kết xác định độc lực số chủng vi khuẩn A nf va hydrophila chuột bạch 45 oi lm ul Bảng 3.10 Đặc điểm hai cặp mồi sử dụng phát gen độc tố vi khuẩn A hydrophila gây bệnh cá chép 46 z at nh Bảng 3.11 Kết gây nhiễm vi khuẩn A hydrophila Chủng … (số cá gây nhiễm 30 con/một thí nghiệm nồng độ 50 z Bảng 3.12: Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng @ gm vi khuẩn A hydrophila phân lập 51 m co l Bảng 3.13: Kết thực nghiệm phác đồ điều trị 53 an Lu n va ac th si viii DANH MỤC CÁC HÌNH, BIỂU ĐỒ Hình Hình 3.1: Mổ khám cá chép nghi nhiểm vi khuẩn A hydrophila 29 Hình 3.2 Hình thái khuẩn lạc vi khuẩn A hydrophila mọc môi trường thạch máu 32 Hình 3.3 Hình dạng vi khuẩn A hydrophila vật kính 100X 35 Hình 3.4 Kết phản ứng KIA thạch nghiêng vi khuẩn A hydrophila phân lập 36 lu Hình 3.5 Kết phản ứng sinh Indol vi khuẩn A hydrophila phân an va lập 36 n Hình 3.6: PCR phát hai gen độc tố Aer Hyl vi khuẩn A hydrophila 47 Hình 3.8 Kết đánh giá tính mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn ie gh tn to Hình 3.7: Hình ảnh kết tinh độc tố 48 p A hydrophila phân lập từ cá chép bệnh 52 w oa nl Biểu đồ d Biểu đồ 3.1: Tỉ Lệ ao có cá mắc bệnh huyện tỉnh Lạng Sơn 31 lu an Biểu đồ 3.2: Tỉ lệ phân lập vi khuẩn A hydrophila từ mẫu bệnh nf va phẩm lấy Lạng Sơn 33 oi lm ul Biểu đồ 3.3: Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả sinh trưởng vi khuẩn A hydrophila chủng C5 38 z at nh Biểu đồ 3.4: Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến khả sinh trưởng vi khuẩn A hydrophila chủng C8 38 z Biểu đồ 3.5 Ảnh hưởng pH lên khả sinh trưởng phát triển gm @ vi khuẩn A hydrophila 42 Biều đồ 3.6 Ảnh hưởng nồng độ muối lên khả sinh trưởng l m co phát triển vi khuẩn A hydrophila 43 Biểu đồ 3.7: Hiệu số phác đồ điều trị bệnh xuất huyết cá an Lu chép nuôi tỉnh Lạng Sơn 55 n va ac th si 53 vấn đề phức tạp, tạo điều kiện cho nhiều loài vi khuẩn chống lại tác dụng thuốc để phát triển, gây khos khăn công tác điều trị bệnh ngành thú y Vì yếu tố kháng kháng sinh vi khuẩn ln thay đổi theo thời gian, không gian khác cá thể Vì thời gian định, cần phải làm kháng sinh đồ để xác định khả kháng kháng sinh vi khuẩn gây bệnh, ngồi mục đích lựa chọn kháng sinh mẫn cảm điều trị, lu để kiểm tra khả gây bệnh độc lực vi khuẩn phân lập Do an việc so sánh kết kháng sinh đồ tác giả với tác giả có ý va n nghĩa tham khảo tn to gh Như vậy, kháng sinh Gentamycin, Neomycin Erythromycin p ie sử dụng để điều trị bệnh cá A hydrophila nhiên để đạt hiệu điều trị cao nên sử dụng kháng sinh Norfloxacin, nl w d oa Ceftiofur với kết đạt 100% số chủng A hydrophila kiểm tra an lu mẫn cảm Kết luận sơ kháng sinh có hiệu lực dùng Norfloxacin, Ceftiofur oi lm ul nf va điều trị bệnh xuất huyết đốm đỏ vi khuẩn A hydrophila 3.7 Kết điều trị thử nghiệm điều trị kháng sinh z at nh Trên sơ nghiên cứu tìm vai trị gây bệnh vi khuẩn A z Hydrophila, dựa vào kết kháng sinh đồ để lựa chọn thuốc kháng @ l gm sinh phù hợp điều trị Kết số phác đồ dùng điều trị bệnh xuất huyết cá chép trình bày qua bảng 3.13 biểu đồ 3.7 m co an Lu n va ac th si 54 Bảng 3.13: Kết thực nghiệm phác đồ điều trị Số cá Thời Phác đồ điều trị Loại thuốc Liều lượng gian cách dùng điều trị (ngày) điều trị (con) Kết điều trị Số cá khỏi Tỷ lệ bệnh (%) (con) lu an 200mg/kg/ngày đầu n va 100mg/ kg/ ngày Norfloxacin t2 -t7 gh tn to I 30 28 93,33 30 27 90,00 30 23 76,67 p ie Trộn với thức ăn tinh nl w 200mg/kg/ngày đầu oa Ceftiofur d II 100mg/ kg/ ngày Trộn với thức ăn tinh nf va an lu t2 -t7 Neomycin 100mg/ kg/ ngày z at nh III oi lm ul 200mg/kg/ngày đầu t2 -t7 z Trộn với thức ăn tinh m co l gm @ an Lu n va ac th si 55 Tỉ lệ % 100 90 80 70 60 50 40 30 lu 20 an 10 va Norfloxacin Ceftioful Neomycin n ie gh tn to Biểu đồ 3.7: Hiệu số phác đồ điều trị bệnh xuất huyết cá p chép nuôi tỉnh Lạng Sơn w oa nl Qua bảng 3.13 Cho thấy phác đồ điều trị thử nghiệm, kết số cá d điều trị khỏi bệnh có chênh lệnh định phác đồ Sau an lu ngày điều trị tỷ lệ khỏi bệnh phác đồ I sử dụng kháng sinh Norfloxacin nf va 28/30 số cá, chiếm tỷ lệ cao 93,33% ; phác đồ II sử dụng oi lm ul kháng sinh Ceftiofur số cá khỏi bệnh 27/30 chiếm tỷ lệ 90,00% phác đồ III sử dụng kháng sinh Neomycin tỷ lệ cá khỏi bệnh thấp với số cá z at nh khỏi bệnh 23/30 chiếm tỷ lệ 76,67% Như sở phác đồ điều trị có sử dụng loại kháng sinh z khác nhau, kháng sinh thể rõ rệt khả kìm hãm tiêu diệt @ gm vi khuẩn gây bệnh cho đàn cá chép bệnh Từ kết phác đồ m co l xác định hiệu phác đồ I II (trên 90%) sử dụng để điều trị bệnh xuất huyết cá chép diện rộng Đồng thời đảm bảo vệ sinh thú y cho ao nuôi an Lu qua trình điều trị cần kết hợp tạo chăm sóc tạo môi trường sống tốt n va ac th si 56 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Từ kết nghiên cứu bước đầu có kết luận sau: - Các ao ni cá chép địa bàn số huyện tỉnh Lạng Sơn có tỷ lệ cá mắc bệnh xuất huyết cao, trung bình 31,25% - Từ mẫu bệnh phẩm cá chép mắc bệnh xuất huyết phân lập lu vi khuẩn A hydrophila với tỷ lệ 53,33% an va - Các chủng vi khuẩn A hydrophila phân lập có đặc điểm n hình thái sinh học điển hình giống tài liệu ngồi nước gh tn to mơ tả p ie - Các chủng A hydrophila phát triển đạt mật độ cao sau 36 w nuôi cấy, nhiệt độ 280C môi trường bazơ (pH= 8,5) oa nl - Độ NaCl thích hợp cho chủng vi khuẩn A hydrophila sinh d trưởng 5‰, đạt khoảng 80.107 tế bào/ml sau 36h nuôi cấy 28oC lu va an - Khả gây độc vi khuẩn A hydrophila phân lập oi lm 36 ul nf mạnh, sau công cường độc gây chết 100% số chuột thí nghiệm - Đã xác định chủng vi khuẩn A hydrophila phân lập có z at nh hai gen độc tố aerolysin heamolysin z - Độc tố thu từ canh khuẩn có mật độ vi khuẩn 10 tế @ m co l bệnh xuất huyết gm bào/ml có khả gây bệnh cho cá chép với triệu chứng điển hình - Các chủng vi khuẩn A hydrophila phân lập kháng n va với norfloxacin, ceftiofur an Lu không mẫn cảm với Clindamycin, Amoxycillin Oxacillin mẫn cảm cao ac th si 57 - Sử dụng phác đồ I II điều trị bệnh xuất huyết cá chép cho kết khỏi cao, tương ứng 90,0 93,33% Kiến nghị - Do điều kiện thời gian kinh phí cịn hạn hẹp nên chưa tiến hành nghiên cứu đầy đủ yếu tố gây bệnh A hydrophila nên cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn, toàn diện hệ thống vấn đề - Căn kết thử nghiệm pháp đồ điều trị, đề nghị áp dụng phác đồ lu an điều trị I II điều trị bệnh xuất huyết cá chép A hydrophila gây n va tỉnh Lạng Sơn để tăng hiệu thu nhập cho người chăn nuôi p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bộ môn Sinh học Bệnh Thủy sản - Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ (2007), Tài liệu hướng dẫn thực tập giáo trình chun mơn bệnh học thủy sản Ngô Minh Dung (2007), nghiên cứu khả gây bệnh vi khuẩn edwardsiella ictaluri Aeromonas hydrophỉla cá tra (Pangasius lu an hypophthalmus) Luận văn đại học Khoa Thủy Sản - Đại học cần Thơ n va Từ Thanh Dung (2006), Bài giảng Bệnh vi khuẩn động vật thủy Nguyễn Hà Giang (2008) Tiêu chuẩn hóa phương pháp xác định tiêu sinh hóa vi khuẩn A.hydrophila khoa Thủy sản LVTN gh ie tn to sản Khoa thủy sản - Đại học cần thơ p Khoa Thủy Sản - Đại học cần thơ Nguyễn Hà Giang (2008) Tiêu chuẩn hóa phương pháp xác định oa nl w d tiêu sinh hóa vi khuẩn A.hydrophila khoa Thủy sản LVTN Nguyễn Thị Thúy Hằng (2008) Tiêu chuẩn hóa phương pháp lập kháng nf va an lu Khoa Thủy Sản - Đại học cần thơ oi lm ul sinh đồ vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Aeromonas hydrophila Khoa Thủy sản Luận văn tốt nghiệp đại học- Khoa Thủy sản-Đại z at nh học Cần Thơ Nguyễn Văn Hảo, Ngô Sỹ Vân (2001) Cá nước Việt Nam-Tập1 z NXB nông nghiệp,viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản Hà Nội @ Nguyễn Văn Hảo (2005), Cá nước Việt Nam, Tập 2, 3, NXB Nông m co l nghiệp, Hà Nội gm Đỗ Thị Hoà, Bùi Quang Tề, Nguyễn Hữu Dũng, Nguyễn Thị Muội Trang, Nxb Nông nghiệp, Thành phố Hồ Chí Minh an Lu (2004), Giáo trình Bệnh học thủy sản - Trường đại học Thủy sản Nha n va ac th si 59 10 Đỗ Thị Hịa, Nguyễn Thị Muội (2004), Giáo trình bệnh học thủy sản, NXB Nha Trang 11 Phạm Công Hoạt, Phạm Thị Tâm, Lê Văn Nhương (2011), "Xác định số độc tố gây bệnh vi khuẩn A.hydrophila phân lập từ cá chép bị bệnh xuất huyết đốm đỏ khu vực Đồng Bắc Bộ" Tạp chí Nơng nghiệp PTNT 12 Phạm Công Hoạt (2012), "Xác định đặc tính vi khuẩn Aeromonas lu hydrophia phân lập từ số loài cá nước bị bệnh xuất huyết đốm an đỏ số tỉnh đồng Bắc Bộ", Tạp chí NN PTNT, số va n 13 Lê Văn Khoa, Nguyễn Xuân Quýnh, Nguyễn Quốc Việt (2007), Chỉ thị to 14 Nguyễn Duy Khoát (2005), Sổ tay hướng dẫn nuôi cá nước ngọt, NXB p ie gh tn sinh học môi trường, NXB Giáo dục nông nghiệp Hà Nội nl w 15 Hà Ký (1966, 1976), Một số bệnh thường gặp cá giống cách d oa phịng trị, NXB Nơng thơn, Hà Nội an lu 16 Lê Thị Kim Liên, Nguyễn Quốc Thịnh, Nguyễn Thị Như Ngọc va Phạm Thanh Liêm (2007), Thuốc hóa chất ni trồng thủy ul nf sản, Khoa Thủy sản-Đại học Cần Thơ oi lm 17 Đặng Thị Hồng Oanh (2006), "Đặc điểm sinh hóa kiểu ARN z at nh ribosom vi khuẩn Aeromonas phân lập từ bệnh phẩm thủy sản nuôi Đồng sơng Cửu Long" Tạp chí khoa học z 18 Đặng Thị Hoàng Oanh (2007), Nguyên lý Kỹ thuật Chẩn đoán Bệnh @ gm Thủy sản Khoa Thủy sản-Đại học cần Thơ l 19 Trần Thanh Phú (2009), Phân lập định danh vi khuẩn Aeromonas m co hydrophila gây bệnh xuất huyết cá tra (Pangasianodon khoa Thủy Sản - Đại Học Cần Thơ an Lu hypophthalmus) nuôi Đồng Bằng Sông Cửu Long, Đề tài tốt nghiệp n va ac th si 60 20 Đoàn Nhật Phương (2001), Xác định LD50 thử nghiệm vaccine phòng bệnh vi khuẩn (A.hydrophila) cá chép (Cyprinus carpio) LVTN Khoa Thủy Sản - Đại học cần thơ 21 Nguyễn Thanh Phương, Trần Ngọc Hải Dương Nhật Long (2009), Giáo trình ni trồng thủy sản, khoa thủy sản, Đại học Cần Thơ 22 Bùi Quang Tề (1998) Giáo trình Bệnh học bệnh động vật thủy sản NXB Nông nghiệp, Hà Nội 23 Bùi Quang Tề, Phạm Thị Yên (2002), Báo cáo bệnh cá sông nuôi lu an lồng Vịnh Hạ Long n va 24 Bùi Quang Tề (2006), Bệnh học thủy sản, Đại Học Thủy Sản Nha Trang Trung học chuyên nghiệp, Hà Nội 26 Đặng Ngọc Thanh, Hồ Thanh Hải, Dương Đức Tiến, Mai Đình Yên p ie gh tn to 25 Đặng Ngọc Thanh (1974), Thủy sinh học đại cương, NXB Đại học (2002), Thủy sinh học thủy vực nước nội địa Việt Nam, NXB oa nl w Khoa học kỹ thuật d 27 Nguyễn Như Thanh, Bùi Quang Anh & Trương Quang (2001) Dịch tễ an lu học thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội va 28 Phạm Minh Thành, Nguyễn Văn Kiểm (2009), Cơ sở khoa học kỹ ul nf thuật sản xuất cá giống, NXB Nông Nghiệp oi lm 29 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2005), Nghiệp, Hà Nội z at nh Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn ni, Nxb Nông z 30 Trần Mai Thiên (1995), Nâng cao chất lượng giống cá nuôi nước gm @ ngọt, đề tài viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản Hà Nội m co nước NXB Lao động xã hội, Hà Nội l 31 Nguyễn Hữu Thọ, Đỗ Đồn Hiệp (2004) Hướng dẫn kỹ thuật ni cá 32 Lê Trung Tính (2007), Độ nhạy nồng độ diệt khuẩn kháng sinh an Lu với vi khuẩn Aeromonas hydrophila gây bệnh cá tra giống Thực n va tập tốt nghiệp Đại học-Khoa Thủy sản-Đại học Cần Thơ ac th si 61 33 Phan Thị Vân, Phạm Thị Yên, Trần Thị Kim Chi, Nguyễn Thị Hà, Phạm Văn Khang, Nguyễn Thị Nguyện, Phạm Văn Thư, Kim Văn Vạn (2003), Nghiên cứu xác định tác nhân gây bệnh đốm đỏ bệnh xuất huyết cá trắm cỏ Tuyển tập báo cáo khoa học Nuôi trồng thủy sản hội nghị khoa học toàn Quốc lần thứ (24-25/11/2003) Nhà xuất Nơng nghiệp, 2003 34 Mai Đình Yên (1978), Định loại cá nước tỉnh phía Bắc Việt lu Nam, NXB Khoa học kỹ thuật an 35 Mai Đình Yên, Vũ Trung Trạng, Bùi Lai Trần Mai Thiêm (1979), Ngư va n loại học Nhà xuất Đại học Trung học Chuyên nghiệp, Hà nội tn to 36 Mai Đình Yên (1983), Cá kinh tế nước Việt Nam, NXB Nông ie gh Nghiệp Hà Nội p Tài liệu tiếng Anh nl w 37 Allan, B J., and R M W Stevenson (1981), Extracellular virulence d oa factors of Aeromonas hydrophila in fish infections Canadian Journal of an lu Microbiology 27: 1114 -1122 va 38 Amanda Bremner and Greg Klassen (2001), A review of the index of ul nf biotic intergrity (IBI), New Brunswick (Saint John) University Press oi lm 39 Anbarasu, K., Thangakrishnan, K., Arun, B.V., and Chandran, M.R, (1998), Assessment of immune response in freshwater catfish (Mystus z at nh vittatus Bloch) to different bacterins of Aeromonas hydrophila Indian z Journal of Experimental Biology gm @ 40 Baba, T., Imamura, J., Izawa, K., and Ikeda, K (1988), Immune protection in l carp, Cyprinus carpio L., after immunization with Aeromonas hydrophila m co crude lipopolysaccharide, Journal of Fish Diseases 41 Bach, R., P K Chen, and G B Chapman (1978) Changes in the an Lu spleen of channel catfish Ictalurus punctatus Rafinesque induced by n va infection with Aeromonas hydrophila Journal of Fish Diseases ac th si 62 42 Boulanger, Y., R Lallier, and G Cousineau (1977), Isolation of enterotoxigenic Aeromonas from fish, Canadian Journal of Microbiology 43 Bullock, G L (1961), The identification and separation of Aeromonas liquefaciens from Pseudomonas fluorescens and related organisms occurring in diseased fish Journal of Applied Microbiology 44 Bullock, G L., P K Chen, and H M Stuckey (1972) Studies of motile aeromonads isolated from diseased warmwater and coldwater fishes, lu an Page 21 in Abstracts of the Annual Meeting of the American Society n va for Microbiology, Philadelphia, Pennsylvania, 23 - 28 April tn to 45 Chodyniecki (1965), Comparative serological studies on somatic gh antigens of Aeromonas punctata Zimmerman strains isolated in the p ie course of septicemia in trout, Acta Hydrobiologica w 46 Davis, J W and R K Sizemore (1981), Nonselectivity of Rimler- oa nl Shotts medium for Aeromonas hydrophila in estuarine environments, d Journal of Applied and Environmental Microbiology an lu 47 De Figueredo, J and J A Plumb (1977), Virulence of different isolates va of Aeromonas hydrophila in channel catfish, Aquaculture 11 ul nf 48 Egusa S (1978), Infectious diseases of fish 554p Kouseisha oi lm Kouseikaku, Tokyo (In Japanese) z at nh 49 Erova T.E, Sha J., Horneman A.J., Borchardt M.A., Khajanchi B.K, Fadl A.A, Chopra A.K (2007), Identification of a new hemolysin from z diarrheal isolate SSU of A.hydrophila FEMS Microbiol Lett l California, USA gm @ 50 Eschmeyer W N (1998), Catalog of Fishes, Academy of Sciences, m co 51 Ewing, W H., R Hugh, and J G Johnson (1961), Studies on the Aeromonas group, United States Department of Health, Education, and an Lu Welfare, Public Health Service, Communicable Disease Center, n va Atlanta, Georgia ac th si 63 52 Faktorovich, K A (1969), Histological changes in the liver, kidneys, skin and brain of fish sick with red rot, Pages 83-101 in Infectious diseases of fish and their control Division of Fisheries Research, Bureau of Sport Fisheries and Wildlife Washington, D C Translated from the Russian by R M Howland 53 Fuentes, R J M and H J A Perez (1998), Isolation of Aeromonas hydrophila in the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) Veterinaria Mexico lu 54 Gado, M S M (1998), Studies on the virulence of Aeromonas an hydrophila in Nile Tilapia (Oreochromis niloticus) Assiut Veterinary va n Medical Journal tn to 55 Huizinga, H W., G W Esch, and T C Hazen (1979), Histopathology of p ie gh red-sore disease (Aeromonas hydrophila) in naturally and experimentally infected largemouth bass Micropterus salmoides (Lacépède) Journal of w Fish Diseases oa nl 56 James R Karr (1981), “Assessment of biotic integrity using fish d communites”, Fisheries, Vol.6, No 6, pp lu an 57 Jennings M.J, James R Karr et al (1995), “Biological monitoring of nf va fish assemblages in Tennessee valley reservoirs”, Regulated river oi lm ul research & Management, Vol 11, pp 58 John H Harris (1995), “The use of fish in ecological assessment”, z at nh Autralian Journal of Ecology, Vol 20 59 Karr J.R, Fash K.D, Angermeier P.L, Yant and I.JSchioser (1986), z @ Assesing biological intergrity in running water: A method and its m co l Champaign urbana gm rational, Special publication 5, Illinois nature history survey, 60 Kawakani, H., and H Hoshimoto (1978), Occurrence and distribution an Lu of Aeromonas in surface water and algae in river water, Journal of the Faculty of Fisheries and Animal Husbandry Hiroshima University n va ac th si 64 61 Kingma, D A (1978), Studies on some selected isolates of the fish pathogen Aeromonas hydrophila M.S Thesis University of Georgia, Athens, Georgia 62 Lallier, R., D Leblanc, K R Mittal, and G Olivier (1981), Serogrouping of motile Aeromonas species isolated from healthy and moribund fish Journal of Applied and Environmental Microbiology 63 Liu, P V (1961), Observations on the specificities of extracellular lu antigens of the genera Aeromonas and Serratia Journal of General an Microbiology va n 64 Maurice Kottelat (2001), Freshwater fishes of northern Vietnam, East 65 Mishra, S S (1998), Use of dot immunoassay for rapid detection of p ie gh tn to Asia and Pacific region, the world bank pathogenic bacteria Vibrio alginolyticus and Aeromonas hydrophila w from shrimps and fishes Indian Journal of Marine Sciences oa nl 66 Mittal, K R., G Lalonde, D Leblanc, G Olivier, and R Lallier (1980), d Aeromonas hydrophila in rainbow trout: relation between virulence lu an and surface Mcharacteristics Canadian Journal of Microbiology nf va 67 Moravec F And O.Sey (1988), “Nematoides of freshwater fishes from oi lm ul North Vietnam”, Part 1: “Camallanoidea and Habrobematoidea”, Vĕst čs Spole č Zool, 52, pp z at nh 68 Ogara, W O., P G Mbuthia, H F A Kaburia, H Sorum, D K.Kagunya, D I Nduthu, and D Colquhoun (1998), Motile z @ aeromonads associated with rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) Pathologists m co l gm mortality in Kenya Bulletin of the European Association of Fish 69 Olivier, G., R Lallier, and S Lariviere (1981), A toxigenic profile of of Microbiology an Lu A.hydrophila and Aeromonas sobria isolated from fish Canadian Journal n va ac th si 65 70 Osborne, J.A.; Fensch, G.E.; Charba, J.F (1989), The abundance of Aeromonas hydrophila L at Lake Harney on the St Johns River with respect to red sore disease in striped mullet (Mugil cephalus L.) Florida Scientist 71 Paniagua, C.; Rivero, O.; Anguita, J.; Naharro, G (1990), Pathogenicity factors and virulence for rainbow trout (Salmo gairdneri) or motile Aeromonas spp isolated from a river Journal of Clinical Microbiology 28 lu 72 Parker M W, van der Goot F G, Buckley J T (1996), Aerolysin—the ins an and outs of a channel-forming protein Mol Microbiol va n 73 Pravdin I.F (1973), Hướng dẫn nghiên cứu cá (Bản dịch Phạm Thị to 74 Rahim, Z., K M S Aziz, M I Huq, and H Saeed (1985), Isolation of p ie gh tn Minh Giang), NXB Khoa học Kỹ thuật Aeromonas hydrophila from the wounds of five species of brackish fish of Bangladesh Bangladesh Journal of Zoology nl w water oa (Bangladesh) d 75 Rainboth (1996), Fish of the Cambodian Mekong, FAO, Rome 45 lu for fish culture ul nf va an Swingle (1961), Relationship of pH of pond water to their suitability oi lm 76 Rao, V B and B G Foster (1977), Antigenic analysis of the genus Aeromonas Texas Journal of Science z at nh 77 Roberts R.J (1989), Fish Pathology, Bailliere Tindall, London, Second edition z gm @ 78 Schachte, J H (1978), Immunization of channel catfish, Ictalurus l punctatus, against two bacterial diseases, Marine Fisheries Review fischen, I Beitrage kenntnis der kiemenfanle des an Lu kenpfens.2.Fisch.,27 zur m co 79 Schaperclaus (1929), W nutersuchungen uber die kiemenfaule bri n va ac th si 66 80 Schaperclaus (1967) Probleme der Karpfenimmunitat gegenuber Aeromonas punctata und Fragen der antigenen struktur des bakteriums Z Fisch Hilfswiss 81 Schaperclaus, Ermittlung W der (1970), Experimentelle wirksamsten Untersuchungen Impfantigene fur eine zur aktive Immunisierung von Karpfen gegen Aeromonas punctata z Fisch 82 Sey O (1988), “Description of some new taxa of amphistome (Trematoda: Amphistomida) from Vietnammese Freshwater Fishs”, lu an Acta Zoologica Hunggarica, 32(1-2_, pp 161-168 n va 83 Shieh, H S (1987), Protection of Atlantic salmon against motile to aeromonad septicaemia with Aeromonas hydrophila protease, 84 Shieh, H S (1990), Protection of Atlantic salmon against Aeromonas p ie gh tn Microbios Letters w sobria infection Microbios Letters oa nl 85 T C Hazen (1979), Histopathology of red-sore disease (Aeromonas d hydrophila) in naturally and experimentally infected largemouth an lu bass Micropterus salmoides (Lacepede) nf va 86 Thune, R L and J A Plumb (1982), Effect of delivery method and oi lm ul antigen preparation on the production of antibodies against Aeromonas hydrophila in channel catfish Progressive FishCulturist z at nh 87 Toranzo, A.E., Ledo, A., Santos Y., Romalde, J.L., Bandin, L., Fouz and Barja, J.L (1989), Evolution of the bacterial Ash diseases in z trout, salmon and turbot cultured in northwest of Spain E.A.S Spec gm @ Publ., No 10 l 88 Trust, T J., L M Bull, B R Currie, and J T Buckley (1974) m co Obligate anaerobic bacteria in the gastrointestinal microflora of the an Lu grass carp (Ctenopharyngodon idella), goldfish (Carassius auratus), and rainbow trout (Salmo gairdneri), Journal of the Fisheries Research n va Board of Canada 36: 1174 - 1179 ac th si 67 89 Ventura, M T and J M Grizzle (1988), Lesions associated with natural and experimental infections of Aeromonas hydrophila in channel catfish, Ictalurus punctatus (Rafinesque) Journal of Fish Diseases 11: 397 - 407 90 Ventura, M.T.and J M Grizzle (1987), Evaluation of portals of entry of Aeromonas hydrophila in channel catfish Aquaculture 65: 205 - 214 91 Von Gravenitz, A and A H Mensch (1968), The genus Aeromonas in lu human bacteriology, N English Journal of Medicine 278: 245 - 249 an 92 Wei Hua Chu (2008), In vivo fish models for visualizing Aeromonas va n hydrophilainvasion pathway using GFP as a biomarker.c gh tn to 93 Yambot, A.V.and V Inglis (1994), Aeromonas hydrophila isolated from p ie Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.) with "Eye Disease" International Symposium on Aquatic Animal Health, Seattle, WA (USA), - nl w September 1994 University of California, School of Veterinary d oa Medicine, Davis, CA an lu 94 Zacaria J, Delamare AP, Costa S.O, Echeverrigaray S (2009), Diversity of va extracellular proteases among Aeromonas determined by zymogram analysis ul nf Journal of Applied Microbiology Volume 109, Issue 1, page 212-219 oi lm 95 Zhang, Y L., C T.Ong, and K Y Leung (2000), Molecular analysis of genetic differences between virulent and avirulent strains of Aeromonas z at nh hydrophila isolated from diseased fish Microbiology z m co l gm @ an Lu n va ac th si