(Luận văn) phân lập và đánh giá khả năng sinh enzyme cellulase của một số vi sinh vật bản địa

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM o0o NGUYỄN THỊ HUYỀN Tên đề tài: lu PHÂN LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SINH ENZYME an n va CELLULASE CỦA MỘT SỐ VI SINH VẬT BẢN ĐỊA p ie gh tn to KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC d oa nl w lu Hệ đào tạo va an : Chính quy : Cơng nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP ll oi m : 2010 – 2014 z at nh Khóa học u nf Chuyên ngành z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, năm 2014 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM o0o NGUYỄN THỊ HUYỀN Tên đề tài: PHÂN LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SINH ENZYME lu CELLULASE CỦA MỘT SỐ VI SINH VẬT BẢN ĐỊA an n va p ie gh tn to KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC oa nl w Hệ đào tạo d : Chính quy lu : Cơng nghệ Sinh học : 2010 – 2014 oi m Khóa học : CNSH - CNTP ll Khoa : K42 - CNSH u nf Lớp va an Chuyên ngành z at nh Giảng viên hướng dẫn : ThS Lương Hùng Tiến z TS Dương Văn Cường m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, năm 2014 n va ac th si LỜI CẢM ƠN Được trí Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài “Phân lập đánh giá khả sinh enzyme cellulase số vi sinh vật địa” Sau tháng thực tập phịng thí nghiệm cơng nghệ vi sinh Khoa Công nghệ sinh học công nghệ thực phẩm đên em hoàn thành xong lu đề tài Để đạt kết ngày hôm em xin chân thành an cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm Khoa thầy cô n va môn tạo điều kiện giúp đỡ em thời gian qua gh tn to Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo Th.S Lương Hùng Tiến ie TS Dương Văn Cường Khoa Công nghệ sinh học công nghệ thực phẩm, p Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình bảo, hướng dẫn em nl w thời gian qua d oa Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn toàn thể gia đình, bạn bè hêt u nf va tập nghiên cứu an lu lòng giúp đỡ, tạo điều kiện vật chất tinh thần cho em trình học Do thời gian thực tập có giới hạn nên đề tài tránh khỏi ll Em xin chân thành cảm ơn! z at nh em hồn thiện oi m sai sót Em mong nhận đóng góp thầy bạn để đề tài z gm @ Thái Nguyên ngày 30 tháng năm 2014 Sinh viên m co l an Lu Nguyễn Thị Huyền n va ac th si DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT Cellulose binding domain CBD lu an CMC Carboxymethyl cellulose E Enzyme EG Endoglucanase HEC Hydroxyethyl cellulose va Nấm mốc n NM Cơ chất VK Vi khuẩn p ie gh tn to S Vi sinh vật d oa nl w XK VSV Xạ khuẩn ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Một số vi sinh vật sản xuất cellulase 13 Bảng 4.1 Kết đặc điểm chủng vi sinh vật phân lập 27 Bảng 4.2 Kết thử hoạt tính 29 Bảng 4.3 Kết ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến khả sinh tổng hợp cellulase chủng NM1, NM3 30 Bảng 4.4 Kết ảnh hưởng nhiệt độ đến khả sinh enzyme lu cellulase từ chủng NM1, NM3 33 an Bảng 4.5 Kết ảnh hưởng pH ban đầu đến sinh tổng hợp cellulase n va chủng NM1, NM3 35 to gh tn Bảng 4.6 Kết ảnh hưởng nồng độ chất cảm ứng đến khả phân p ie giải chất chủng NM1, NM3 37 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Cấu trúc khơng gian phân tử cellulose Hình 2.2 Cấu trúc phân tử cellulose Hình 2.3 Cấu trúc khơng gian enzme cellulase Hình 2.4 Vị trí cắt exoglucanase 10 Hình 2.5 Cơ chế tác dụng cellulase 11 Hình 3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định điều kiện ni cấy thích hợp 26 lu Hình 4.1 Một số hình ảnh phân lập vi sinh bật sinh enzyme cellulase 28 an Hình 4.2 Hoạt tính cellulase chủng ni cấy 29 n va Hình 4.3 Ảnh hưởng thời gian đến khả sinh enzyme cellulase to gh tn chủng NM1, NM3 31 p ie Hình 4.4 Ảnh hưởng thời gian đến khả thu sinh khối enzyme cellulase 31 oa nl w Hình 4.5 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả sinh enzyme cellulase chủng NM1 34 d an lu Hình 4.6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả sinh enzyme cellulase u nf va chủng NM3 34 Hình 4.7 Ảnh hưởng pH ban đầu đến hoạt tính enzyme cellulase đến ll oi m chủng NM1 36 z at nh Hình 4.8 Ảnh hưởng pH ban đầu đến khả sinh enzyme cellulase chủng NM3 36 z Hình 4.9 Ảnh hưởng nồng độ chất cảmứng đến khả sinh cellulase gm @ chủng NM1 38 l m co Hình 4.10 Ảnh hưởng nồng độ chất cảm ứng đến đên khả sinh cellulase chủng NM3 38 an Lu n va ac th si MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2.Mục đích nghiên cứu 1.3.Yêu cầu đề tài 1.4.Ý nghĩa khoa học 1.4.1.Ý nghĩa khoa học lu 1.4.2.Ý nghĩa thực tiễn an Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU n va 2.1 Lịch sử vấn đề nghiên cứu to gh tn 2.2 Giới thiệu cellulose p ie 2.3 Enzyme cellulase 2.3.1 Cấu trúc enzyme cellulase oa nl w 2.3.2 Tính chất enzyme cellulase 2.3.3 Nguồn gốc enzyme cellulase d an lu 2.3.4 Cơ chất enzyme cellulase u nf va 2.3.5 Cơ chế hoạt động 2.4 Hoạt lực enzyme cellulase (cơ chế thủy phân cellulose) 12 ll oi m 2.5 Vi sinh vật sinh tổng hợp cellulase .13 z at nh 2.6 Ứng dụng cellulase 14 2.6.1 Ứng dụng cellulase chế biến thực phẩm .14 z gm @ 2.6.2 Trong công nghệ xử lý rác thác sản xuất phân bón vi sinh 16 2.6.3 Trong xử lý môi trường 16 l m co 2.6.4 Trong sản xuất thức ăn gia súc 17 2.6.5 Trong kỹ thuật di truyền 17 an Lu 2.7 Tình hình nghiên cứu enzyme cellulase .18 n va ac th si 2.7.1 Tình hình nghiên cứu giới 18 2.7.2 Tình hình nghiên cứu nước 19 Phần VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Vật liệu nghiên cứu .20 3.1.1 Mẫu phân lập 20 3.1.2 Thiết bị, dụng cụ hóa chất dung cho ngiên cứu 20 3.2 Môi trường 21 3.3 Phương pháp nghiên cứu .22 lu 3.3.1 Phương pháp phân lập .22 an 3.3.2 Phương pháp thử hoạt tính 24 n va 3.3.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm xác định điều kiện ni cấy thích hợp 25 to gh tn 3.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 26 p ie Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 4.1 Phân lập chủng vi sinh vật sinh enzyme cellulase cao 27 nl w 4.2 Kết thử hoạt tính 28 d oa 4.3 Xác định số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme an lu cellulase chủng NM1, NM3 tuyển chọn 30 u nf va 4.3.1 Ảnh hưởng thời gian 30 4.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ 33 ll oi m 4.3.3 Ảnh hưởng pH ban đầu 35 z at nh 4.3.4 Ảnh hưởng nồng độ chất cảm ứng đến khả phân giải chất chủng NM1, NM3 37 z gm @ PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 Kết luận 39 l m co 5.2 Đề xuất ý kiến .39 TÀI LIỆU THAM KHẢO .40 an Lu n va ac th si Phần MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài Enzyme cellulase hệ enzyme bao gồm loại enzyme: C1, Cx, βclucosidase, có khả hoạt động phối hợp để phân giải cellulose thành glucose Enzyme cellulase ứng dụng nông nghiệp chế biến thức ăn chăn nuôi, lu công nghiệp thực phẩm để chế biến thực phẩm, trình li trích an chất từ thực vật, việc phân hủy phế liệu giàu cellulose….Theo Bhat n va (2000), xấp xỉ 20% số tỷ USD thu từ lượng enzyme công nghiệp to gh tn bán giới gồm enzyme cellulase, hemicelluse pectinase p ie Hằng năm, nước ta phải nhập ngoại lượng lớn nguồn enzyme w cellulase để giải vấn đề sản xuất xử lý ô nhiễm môi trường Việt Nam oa nl nước nhiệt đới có nơng nghiệp phong phú, đa dạng đà phát d triển Vì vậy, lượng phế thải nông nghiệp dồi dào, với cơng nghiệp lu va an hóa đại hóa đất nước, ô nhiễm môi trường ngày trở thành nguy oi m cellulase ll u nf thật Thành phần phế thải rắn có nơng nghiệp, lâm nghiệp z at nh Việc phức hệ cellulase phân giải nguồn thức ăn giàu celluloase rơm rạ, bã mía, gỗ mục triển khai nhiều nước, z lĩnh vực sản xuất protein đơn bào làm thức ăn cho gia súc [3] @ l gm Do đó, vi sinh vật phân giải cellulose có vai trị quan trọng chu trình cellulase số vi sinh vật đia” m co tuần Vì tơi chọn đề tài “Phân lập đánh giá khả sinh enzyme an Lu n va ac th si 1.2 Mục đích nghiên cứu - Phân lập đánh giá khả sinh enzyme cellulose từ số vi sinh vật địa, làm tiền đề cho nghiên cứu xử lí phụ phẩm chứa cellulose 1.3 Yêu cầu đề tài - Phân lập vi sinh vật có hoạt tính sinh enzyme cellulase - Đánh giá vi sinh vật có hoạt tính sinh enzyme cellulase lu - Thử nghiệm vi sinh vật có hoạt tính cellulase phân giải an cellulose n va 1.4 Ý nghĩa khoa học tn to 1.4.1 Ý nghĩa khoa học gh p ie - Xây dựng sưu tập nguồn gene vi sinh vật địa có khả w phân giải cellulose oa nl - Tuyển chọn chủng vi sinh vật phân giải cellulose cao d 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn lu va an - Nghiên cứu đặc điểm hình thái sinh lý sinh hóa phân loại u nf chủng vi sinh vật tuyển chọn Nghiên cứu yếu tố mơi ll trường ảnh hưởng đến q trình phân giải cellulose vi sinh vật oi m chất thải z at nh - Bước đầu ứng dụng vào việc hạn chế ô nhiễm môi trường hạn chế z @ - Giúp sinh viên có hội tiếp cận với quy trình, thao tác kỹ l gm thuật thực tế Qua kết hợp với kiến thức lý thuyết học m co sinh viên có hiểu biết chuyên sâu nhìn tổng quát an Lu n va ac th si Ảnh hưởng thời gian đến khả sinh enzyme cellulase chủng NM3 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE CCCC 6/ 6/** 4:33 PAGE VARIATE V003 HT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= T 10 3650.18 R 181818 lu * RESIDUAL 365.018 229.44 0.000 0.06 0.944 909091E-01 20 31.8185 1.59092 an - n va * TOTAL (CORRECTED) 32 3682.18 115.068 - to BALANCED ANOVA FOR VARIATE SINHKHOI FILE CCCC 6/ 6/** 4:33 tn PAGE gh VARIATE V004 SINHKHOI p ie SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN nl w LN ============================================================================= oa T 10 206240E+09 206240E+08 155.34 0.000 d 109340 lu R 0.41 0.673 20 265526E+07 132763 an * RESIDUAL 54669.9 va - u nf * TOTAL (CORRECTED) 32 209005E+09 653140E+07 ll FILE CCCC 6/ 6/** 4:33 oi m TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS PAGE z at nh MEANS FOR EFFECT T - HT SINHKHOI 0.000000 2232.00 4.00000 3116.00 3 11.0000 5365.00 16.0000 7962.00 25.0000 8875.00 29.0000 9264.00 30.0000 9575.00 an Lu m co l gm @ NOS z T n va ac th si 30.0000 9870.33 29.0000 8506.67 10 28.0000 8374.00 11 24.0000 8157.00 0.728223 210.367 2.14823 620.576 SE(N= 3) 5%LSD 20DF - MEANS FOR EFFECT R - R NOS HT SINHKHOI lu an 11 20.5455 7312.00 11 20.4545 7411.73 11 20.6364 7448.18 0.380302 109.861 1.12188 324.085 n va to SE(N= tn 5%LSD 11) 20DF gh - p ie FILE CCCC ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE 6/ 6/** 4:33 oa nl w PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - d lu GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | DEVIATION 33) | | | | | | | | | TOTAL SS RESID SS 1.2613 6.1 0.0000 0.9443 364.37 4.9 0.0000 0.6727 33 20.545 10.727 SINHKHOI 33 7390.6 2555.7 oi m HT % |R BASED ON ll OBS C OF V |T BASED ON u nf NO va an VARIATE z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si Ảnh hưởng nhiệt độ chủng NM1 BALANCED ANOVA FOR VARIATE C FILE HHHHHH 5/ 6/14 16:20 :PAGE VARIATE V003 C LN SOURCE OF VARIATION PROB DF SUMS OF MEAN F RATIO ER SQUARES SQUARES LN ========================================================================= lu T an 0.000 2614.50 522.900 490.21 5.33334 2.66667 2.50 10 10.6668 1.06668 n va R 0.131 to * RESIDUAL tn gh -17 2630.50 154.735 p ie * TOTAL (CORRECTED) TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HHHHHH 5/ 6/14 16:20 w oa nl :PAGE MEANS FOR EFFECT T d an lu NOS C u nf va T 27.0000 3 37.0000 31.0000 25.0000 ll 33.0000 oi m z at nh 0.000000 z 10DF 1.87893 l 5%LSD 0.596289 gm 3) @ SE(N= an Lu MEANS FOR EFFECT R m co n va ac th si R NOS C 24.8333 25.5000 26.1667 SE(N= 6) 5%LSD 10DF 0.421640 1.32860 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HHHHHH 5/ 6/14 16:20 :PAGE lu an F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - n va GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= SD/MEAN | |R tn to VARIATE | p NO BASED ON BASED ON TOTAL SS RESID SS 12.439 1.0328 % | | | | nl w | | ie gh | 18) oa OBS d | 18 lu C 25.500 4.1 0.0000 0.1306 ll u nf va an oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si Ảnh hưởng nhiệt độ chủng NM3 BALANCED ANOVA FOR VARIATE C FILE AAAAAA 5/ 6/14 19:10 :PAGE VARIATE V003 C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 2632.00 526.400 686.56 0.000 2.33333 1.16667 1.52 0.265 10 7.66720 766720 R * RESIDUAL * TOTAL (CORRECTED) 17 2642.00 155.412 lu - an TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE AAAAAA 5/ 6/14 19:10 n va :PAGE MEANS FOR EFFECT T NOS p T ie gh tn to - w 30.0000 32.0000 33.0000 36.0000 27.0000 oa nl C 0.000000 d 10DF 0.505543 an 3) 5%LSD lu SE(N= 1.59298 va - u nf ll MEANS FOR EFFECT R oi m - NOS C 26.8333 26.1667 26.0000 0.357473 10DF 1.12641 l gm 6) 5%LSD @ SE(N= z z at nh R - FILE AAAAAA 5/ 6/14 19:10 m co ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE an Lu :PAGE n va ac th si F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 18) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 12.466 0.87563 C 18 26.333 C OF V |T % |R | | | | | | | | | 3.3 0.0000 0.2647 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BBBBB 6/ 6/** 0: PAGE lu an F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - va VARIATE n STANDARD (N= SD/MEAN | 24) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS ND 24 4.5000 2.3406 GO p 24 24.500 4.2221 24 30.250 6.4824 ROM C OF V |T % 0.76384E-03 |R | | | | | | | | | 0.0 0.0000 1.0000 1.1877 4.8 0.0000 0.1445 0.64087 2.1 0.0000 0.0000 d oa nl w ie gh tn to GRAND MEAN ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si Ảnh hưởng pH ban đầu đến chủng NM1 BALANCED ANOVA FOR VARIATE D FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 :PAGE VARIATE V003 D LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 84.0000 R 888178E-14 444089E-14 * RESIDUAL 14.0000 ****** 0.000 0.00 1.000 12 256686E-05 213905E-06 * TOTAL (CORRECTED) 20 84.0000 4.20000 - lu BALANCED ANOVA FOR VARIATE K FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 an :PAGE n va VARIATE V004 K SOURCE OF VARIATION DF tn to LN SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN gh ============================================================================= 29.3759 4.89599 334952E-01 167476E-01 p R ie T 12 1.03691 * RESIDUAL 56.66 0.000 0.19 0.827 864090E-01 w 20 30.4463 1.52232 oa nl * TOTAL (CORRECTED) - d BALANCED ANOVA FOR VARIATE C FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 lu :PAGE LN SOURCE OF VARIATION u nf va an VARIATE V005 C DF MEAN SQUARES SQUARES ll SUMS OF F RATIO PROB ER LN oi m ============================================================================= T 466.286 77.7143 96.00 0.000 18.2857 9.14286 11.29 0.002 12 9.71434 809528 * RESIDUAL z at nh R 20 494.286 24.7143 z * TOTAL (CORRECTED) S FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 gm BALANCED ANOVA FOR VARIATE @ - :PAGE SOURCE OF VARIATION DF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN an Lu SUMS OF m co LN l VARIATE V006 S ============================================================================= n va ac th si T 19.4286 R 361525E-01 180762E-01 * RESIDUAL 12 225783 3.23811 172.10 0.000 0.96 0.412 188153E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 19.6906 984529 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 :PAGE MEANS FOR EFFECT T lu an - n va NOS D K C S tn to T 2.00000 8.07000 20.0000 1.70667 3.00000 9.67333 31.0000 2.47000 4.00000 9.67000 31.0000 3.89333 5.00000 9.74333 36.0000 4.24333 9.68000 28.0000 4.18333 7.08000 27.0000 4.05667 7.01667 25.0000 4.36000 0.519464 p ie gh w oa nl 6.00000 7.00000 3 d an lu 8.00000 ll u nf va 3) 0.267024E-03 0.169714 5%LSD 12DF 0.822792E-03 0.522948 0.791944E-01 oi m SE(N= 1.60064 0.244025 z at nh - z gm @ MEANS FOR EFFECT R - D 5.00000 K 8.65286 C 27.1429 S an Lu NOS m co l R 3.61429 n va ac th si 5.00000 8.71143 28.2857 3.54857 5.00000 8.75000 29.4286 3.51429 SE(N= 7) 0.174808E-03 0.111104 0.340069 5%LSD 12DF 0.538644E-03 0.342350 1.04787 0.518449E-01 0.159752 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCCCCC 5/ 6/14 19:55 :PAGE lu an va F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - n STANDARD (N= SD/MEAN | 21) DEVIATION BASED ON BASED ON TOTAL SS RESID SS NO w p ie GRAND MEAN gh tn to VARIATE OBS C OF V |T % |R | | | | | | | | | oa nl 21 5.0000 K 21 8.7048 C 21 28.286 S 21 3.5590 2.0494 0.46250E-03 0.0 0.0000 1.0000 1.2338 0.29395 3.4 0.0000 0.8274 0.89974 3.2 0.0000 0.0018 0.13717 3.9 0.0000 0.4124 d D an lu 4.9713 va ll u nf 0.99223 oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si Ảnh hưởng pH ban đầu chủng NM3 BALANCED ANOVA FOR VARIATE D FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 :PAGE VARIATE V003 D LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 84.0000 R 888178E-14 444089E-14 * RESIDUAL 14.0000 ****** 0.000 0.00 1.000 12 256686E-05 213905E-06 * TOTAL (CORRECTED) 20 84.0000 4.20000 - lu BALANCED ANOVA FOR VARIATE SK FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 an :PAGE n va VARIATE V004 SK SOURCE OF VARIATION DF tn to LN SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN gh ============================================================================= 7.38886 1.23148 643813E-02 321906E-02 p R ie T 12 454629 * RESIDUAL 32.51 0.000 0.08 0.919 378857E-01 w 20 7.84992 392496 oa nl * TOTAL (CORRECTED) - d BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 lu :PAGE LN SOURCE OF VARIATION u nf va an VARIATE V005 HT DF MEAN SQUARES SQUARES ll SUMS OF F RATIO PROB ER LN oi m ============================================================================= T 524.000 87.3333 32.75 0.000 666666 333333 0.12 0.883 12 32.0000 2.66667 * RESIDUAL z at nh R 20 556.667 27.8333 z * TOTAL (CORRECTED) C FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 gm BALANCED ANOVA FOR VARIATE @ - :PAGE SOURCE OF VARIATION DF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN an Lu SUMS OF m co LN l VARIATE V006 C ============================================================================= n va ac th si T 22.0762 3.67937 R 105210 526048E-01 12 171725 143105E-01 * RESIDUAL 257.11 0.000 3.68 0.056 * TOTAL (CORRECTED) 20 22.3532 1.11766 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 :PAGE MEANS FOR EFFECT T - T NOS D SK HT C lu an n va 2.00000 7.24333 18.0000 1.87667 3.00000 8.35000 32.0000 2.55000 3 4.00000 8.25000 31.0000 3.78000 5.00000 8.56667 34.0000 4.75000 6.00000 8.43667 30.3333 4.76000 7.00000 7.44000 28.0000 4.12667 8.00000 7.02667 25.0000 4.25000 tn to 3) 0.267024E-03 0.112377 0.942810 5%LSD 12DF 0.822792E-03 0.346272 2.90512 gh SE(N= 0.690663E-01 0.212817 p ie - MEANS FOR EFFECT R R nl w NOS D HT 7.90286 28.5714 3.66857 7.88000 28.2857 3.68714 5.00000 7.92286 28.1429 3.82714 oa SK 5.00000 5.00000 7 va 0.174808E-03 0.735680E-01 0.617214 u nf 12DF an 5%LSD lu 7) d SE(N= C 0.538644E-03 0.226688 0.452145E-01 1.90185 0.139321 ll - oi m ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE EEEEEE 5/ 6/14 21:53 z at nh :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - z STANDARD (N= SD/MEAN | BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS % | | |R | | | | | | | D 21 5.0000 2.0494 0.46250E-03 0.0 0.0000 SK 21 7.9019 0.62650 0.19464 2.5 0.0000 m co l NO C OF V |T gm GRAND MEAN 21) DEVIATION @ VARIATE HT 21 28.333 5.2757 1.6330 5.8 0.0000 0.8834 C 21 3.7276 1.0572 0.11963 3.2 0.0000 0.0561 1.0000 0.9186 an Lu n va ac th si Ảnh hưởng nồng độ chất cảm ứng khả sinh enzyme cellulase chủng NM1 BALANCED ANOVA FOR VARIATE ND FILE AAAAAA 5/ 6/** 23:40 PAGE VARIATE V003 ND LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 126.000 R 555112E-14 277556E-14 * RESIDUAL 18.0000 ****** 0.000 0.00 1.000 14 816822E-05 583444E-06 lu - an * TOTAL (CORRECTED) 23 126.000 5.47826 n va BALANCED ANOVA FOR VARIATE ROM FILE AAAAAA 5/ 6/** 23:40 to PAGE tn VARIATE V004 ROM ie gh SOURCE OF VARIATION DF p LN SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN nl w ============================================================================= T 38.0893 28.07 0.000 9.00000 4.50000 3.32 0.065 14 19.0000 1.35714 R lu * RESIDUAL d oa 266.625 23 294.625 va * TOTAL (CORRECTED) an 12.8098 GO FILE AAAAAA ll BALANCED ANOVA FOR VARIATE u nf 5/ 6/** 23:40 m PAGE oi LN DF SOURCE OF VARIATION z at nh VARIATE V005 GO SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN z R * RESIDUAL 402.643 203.13 0.000 6.25000 3.12500 1.58 0.241 14 27.7500 1.98215 m co l 2818.50 gm T @ ============================================================================= * TOTAL (CORRECTED) 23 2852.50 124.022 an Lu TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE AAAAAA 5/ 6/** 23:40 n va ac th si PAGE MEANS FOR EFFECT T - T NOS GO 1.00000 ND 20.0000 25.0000 2.00000 22.0000 27.0000 3 3.00000 23.0000 40.0000 4.00000 25.0000 42.0000 5.00000 28.0000 57.0000 6.00000 29.0000 28.0000 7.00000 30.0000 26.0000 8.00000 24.0000 25.0000 0.441000E-03 0.672593 0.812844 lu ROM an n va SE(N= 3) 5%LSD 14DF 0.133765E-02 2.04012 2.46554 - tn to MEANS FOR EFFECT R gh - p ie ROM GO 4.50000 24.3750 33.1250 4.50000 25.1250 33.7500 oa NOS 4.50000 25.8750 34.3750 0.270057E-03 0.411877 0.497763 nl w R ND d 0.819141E-03 1.24932 va 14DF an 8) 5%LSD lu SE(N= 1.50983 ll u nf - FILE AAAAAA 5/ 6/** 23:40 oi m ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE PAGE z at nh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - z GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | NO BASED ON TOTAL SS RESID SS 4.5000 2.3406 ROM 24 25.125 3.5791 GO 24 33.750 11.137 0.76384E-03 | |R | | | | | | | 0.0 0.0000 1.0000 1.1650 4.6 0.0000 0.0652 1.4079 4.2 0.0000 an Lu 24 | m co ND % l OBS BASED ON C OF V |T gm 24) DEVIATION @ VARIATE 0.2406 n va ac th si Ảnh hưởng nồng độ chất cảm ứng đến khả sinh enzyme cellulase chủng NM3 BALANCED ANOVA FOR VARIATE ND FILE BBBBB 6/ 6/** 0: PAGE VARIATE V003 ND LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 126.000 R 555112E-14 277556E-14 * RESIDUAL 18.0000 ****** 0.000 0.00 1.000 14 816822E-05 583444E-06 lu - an * TOTAL (CORRECTED) 23 126.000 5.47826 n va BALANCED ANOVA FOR VARIATE GO FILE BBBBB 6/ 6/** 0: to PAGE tn VARIATE V004 GO ie gh SOURCE OF VARIATION DF p LN SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN nl w ============================================================================= T 54.8571 38.89 0.000 6.25000 3.12500 2.22 0.145 14 19.7500 1.41072 R lu * RESIDUAL d oa 384.000 23 410.000 va * TOTAL (CORRECTED) an 17.8261 ROM FILE BBBBB ll BALANCED ANOVA FOR VARIATE u nf 6/ 6/** 0: m PAGE oi LN DF SOURCE OF VARIATION z at nh VARIATE V005 ROM SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN z R * RESIDUAL 134.357 327.13 0.000 20.2500 10.1250 24.65 0.000 14 5.75000 410714 m co l 940.500 gm T @ ============================================================================= * TOTAL (CORRECTED) 23 966.500 42.0217 an Lu TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BBBBB 6/ 6/** 0: n va ac th si PAGE MEANS FOR EFFECT T - T NOS ND GO ROM 1.00000 19.0000 24.0000 2.00000 20.0000 26.0000 3 3.00000 22.0000 34.0000 4.00000 22.0000 35.0000 5.00000 29.0000 43.0000 6.00000 30.0000 30.0000 7.00000 28.0000 26.0000 8.00000 26.0000 24.0000 0.441000E-03 0.685739 0.370006 lu an n va SE(N= 3) 5%LSD 14DF 0.133765E-02 2.08000 1.12231 - tn to MEANS FOR EFFECT R gh - p ie NOS ROM 23.8750 29.1250 4.50000 24.5000 30.2500 oa GO 4.50000 4.50000 25.1250 31.3750 0.270057E-03 0.419928 0.226582 0.819141E-03 0.687273 nl ND w R d 1.27373 ll u nf va 14DF an 8) 5%LSD lu SE(N= oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si