(Luận văn) nghiên cứu đánh giá chất lượng vắc xin cúm gia cầm h5n1 navet – fluvac 2 trong điều kiện phòng thí nghiệm

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ QUỲNH TRANG lu an Tên đề tài: va n NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG VẮC XIN CÚM GIA CẦM p ie gh tn to H5N1 NAVET - FLUVAC TRONG ĐIỀU KIỆN PHỊNG THÍ NGHIỆM d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC va an lu Hệ đào tạo: ll u nf Chính quy Thú y Khố học: Chăn ni - Thú y z at nh Khoa: oi m Chuyên ngành: 2011 – 2015 z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, năm 2015 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ QUỲNH TRANG lu an Tên đề tài: n va NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG VẮC XIN CÚM GIA CẦM p ie gh tn to H5N1 NAVET - FLUVAC TRONG ĐIỀU KIỆN PHỊNG THÍ NGHIỆM w d oa nl KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC va an lu ll u nf Hệ đào tạo: Chuyên ngành: Khoa: Lớp: Khoá học: Giảng viên hướng dẫn: oi m z at nh Chính quy Thú y Chăn nuôi - Thú y 43 - TY (N02) 2011 – 2015 TS Nguyễn Văn Quang z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, năm 2015 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian nghiên cứu, để hoàn thành khóa luận em nhận đạo tận tình thầy giáo hướng dẫn, giúp đỡ Trường Đại học Nông Lâm, Khoa Chăn nuôi thú y sở nơi thực tập Trung tâm nghiên cứu – Công ty Navetco Tôi nhận cộng tác nhiệt tình bạn đồng nghiệp, giúp đỡ cổ vũ động viên người thân gia đình Nhân dịp tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Quang lu an tận tình trực tiếp hướng dẫn tơi thực hồn thành khóa luận n va Tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn chân thành tới TS Trần Xuân Hạnh – Giám tn to đốc Trung tâm nghiên cứu – Công ty Navetco, ThS Nguyễn Văn Dung Tổ gh trưởng tổ Giống tế bào – Trung tâm nghiên cứu công ty Navetco, p ie toàn thể anh chị em Trung tâm nghiên cứu nhiệt tình giúp đỡ bố w trí thí nghiệm hướng dẫn mặt chun mơn để em hồn thành oa nl khóa luận d Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân, bạn bè đồng lu va an nghiệp giúp đỡ động viên tơi suốt thời gian hồn thành khóa luận u nf Tôi xin chân thành cảm ơn ll Thái nguyên, ngày tháng năm 2015 m oi Sinh viên z at nh z @ m co l gm Phạm Thị Quỳnh Trang an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1:Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin nhũ dầu 36 Bảng 4.2: Kết kiểm tra vô trùng vắc xin Navet – Fluvac 37 Bảng 4.3 : Đánh giá an toàn vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac 37 Bảng 4.4 : Kết kiểm tra hiệu lực vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac gà 38 Bảng 4.5 : Kết kiểm tra hiệu lực vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac vịt 39 lu an Bảng 4.6: Kết kiểm tra trùng sau công cường độc gà 40 n va Bảng 4.7: Kết kiểm tra trùng sau công cường độc vịt 41 p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT lu an n va p ie gh tn to Austraulia Animal Health Laboratory DC: Đối chứng GMT: Geometric Mean Titer HA: Haemagglutinin HI: Hemagglutination inhibition reaction HPAI: Highly Pathogenic Avian Influenza LPAI: Low Pathogenic Avian Influenza M: Protein matrix MD: Miễn dịch MPAI: Moderately Pathogenic Avian Influenza NA: Neuraminidase NP: Nucleoprotein PBS: Phosphate buffer saline nl w AAHL: Receptor Destroying Enzyme TCID50: Tissue Culture Infectious Dose 50 d oa RDE: ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iii MỤC LỤC iv PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu lu an 1.3 Mục tiêu nghiên cứu n va 1.4 Ý nghĩa đề tài 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn ie gh tn to 1.4.1 Ý nghĩa khoa học p PHẦN 2: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU nl w 2.1 Cơ sở khoa học pháp lý đề tài oa 2.1.1 Giới thiệu chung bệnh cúm gia cầm d 2.1.2 Tình hình dịch cúm gia cầm nước giới lu va an 2.1.3 Đặc tính chung virus cúm A u nf 2.1.4 Nuôi cấy virus cúm gia cầm ll 2.1.5 Động vật cảm nhiễm 10 m oi 2.1.6 Phương thức truyền lây 11 z at nh 2.1.7 Cơ chế sinh bệnh 12 z 2.1.8 Triệu chứng bệnh cúm gia cầm 12 @ gm 2.1.9 Bệnh tích 13 l 2.1.10 Chẩn đoán bệnh 13 m co 2.1.11 Kiểm soát bệnh 14 an Lu 2.1.12 Vắc xin phòng bệnh cúm gia cầm 16 2.2 Tổng quan nghiên cứu nước 22 n va ac th si v 2.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 23 2.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 24 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 26 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành 27 3.3 Nội dung nghiên cứu 27 3.4 Phương pháp nghiên cứu tiêu theo dõi 27 3.4.1 Phương pháp kiểm tra tính ổn định vắc xin nhũ dầu 27 3.4.2 Kiểm tra vô trùng vắc xin môi trường 28 lu an 3.4.3 Phương pháp kiểm tra an toàn 29 n va 3.4.4 Phương pháp kiểm tra hiệu lực 29 gh tn to 3.4.5 Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI) 30 3.4.6 Kiểm tra xuất phương pháp Real-time PCR 33 p ie PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 w 4.1 Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin nhũ dầu 36 oa nl 4.2 Kết kiểm tra vô trùng 37 d 4.3 Kết kiểm tra tính an tồn vắc xin 37 lu va an 4.4 Kết kiểm tra hiệu lực vắc xin gà vịt 38 u nf 4.5 Kiểm tra trùng sau công cường độc 40 ll PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 m oi 5.1 Kết luận 43 z at nh 5.2 Kiến nghị 44 z TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 m co l gm @ an Lu n va ac th si PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Bệnh cúm gia cầm gây virus cúm A/H5N1 ảnh hưởng bệnh dịch đến đời sống kinh tế xã hội vấn đề quan tâm hàng đầu nhiều quốc gia giới đặc biệt nước nằm vùng dịch.Theo WHO, 20-30% trẻ em 5-10% người trưởng thành bị nhiễm cúm năm, biến chứng nghiêm trọng gây chết lu 250000 – 500000 người Gánh nặng kinh tế gây dịch cúm ước tính an n va - 6000000 USD 100000 dân số, gánh nặng tỷ lệ tử vong tăng lên tn to đáng kể thời gian đại dịch (Đậu Ngọc Hào, 2014) [1] Điều đáng gh ý virus H5N1 tiếp tục biến đổi tạo chủng p ie nguyên nhân gây khó khăn cho cơng tác phịng chống dịch bệnh w có hiệu oa nl Để phịng bệnh việc phải thực nghiêm ngặt biện pháp d kiểm dịch, vệ sinh phịng dịch, việc sử dụng vắc xin phịng bệnh có vai trị lu va an quan trọng mang lại hiệu phòng bệnh cao Việc tiêm vắc xin không u nf bảo vệ đàn gia cầm ni, mà cịn làm giảm đáng kể xuất ll mầm bệnh cúm mơi trường ngồi từ làm giảm khả lây lan bệnh m oi Vì lý đó, việc tạo loại vắc xin hiệu bảo vệ gia cầm chống z at nh lại virus cúm mối quan tâm hàng đầu cơng tác phịng chống cúm, đứng trước nguy bùng phát z gm @ đại dịch l Ở nước ta từ năm 2005 phải nhập vắc xin từ Trung Quốc Gần Công m co ty NAVETCO Việt Nam sản xuất vắc xin cúm A/H5N1 dùng an Lu virus vắc xin chủng NIBRG-14, với tên gọi Navet - Vifluvac Tuy nhiên, đặc tính virus cúm thường biến đổi tạo thành biến chúng để n va ac th si chủ động có nguồn vắc xin đảm bảo chất lượng, Công ty NAVETCO nghiên cứu vắc xin cúm khác Navet – Fluvac 2, có khả phòng bệnh cho gia cầm chống lại biến chủng bao gồm clade 1.1, 2.3.2.1a, 2.3.2.1b 2.3.2.1c Để đánh giá chất lượng vắc xin sản xuất tạo sở khoa học xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm sử dụng vắc xin, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đánh giá chất lượng vắc xin cúm gia cầm H5N1 NAVET - FLUVAC điều kiện phịng thí nghiệm” 1.2 Mục đích nghiên cứu lu an Đánh giá chất lượng vắc xin Navet – Fluvac mặt: vơ n va trùng, tính vật lý, an tồn hiệu lực, làm sở khoa học để xây dựng quy tn to trình kiểm nghiệm sử dụng vắc xin gh 1.3 Mục tiêu nghiên cứu p ie - Nắm bước phương pháp tiến hành đánh giá chất lượng vắc xin w cúm gia cầm H5N1 Navet – Fluvac phịng thí nghiệm oa nl - Trau dồi kiến thức thực tế, kinh nghiệm chuyên môn sở, tự rèn d luyện, học hỏi nâng cao tay nghề cho thân lu 1.4.1 Ý nghĩa khoa học u nf va an 1.4 Ý nghĩa đề tài ll Cung cấp thông tin khoa học khả bảo hộ gia cầm m oi tiêm vắc xin Navet – Fluvac chống lại biến chủng virus cúm z 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn z at nh gia cầm thể độc lực cao H5N1 gm @ Kết đánh giá chất lượng vắc xin Navet – Fluvac sở để triển m co gia cầm địa phương l khai sử dụng vắc xin thực tiễn sản xuất, nhằm phòng chống dịch cúm an Lu n va ac th si PHẦN TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Cơ sở khoa học pháp lý đề tài 2.1.1 Giới thiệu chung bệnh cúm gia cầm Bệnh cúm gia cầm hay bệnh cúm gà (Avian Influenza – AI), bệnh truyền nhiễm gây virus cúm typ A thuộc họ orthomyxoviridae Trước bệnh gọi dịch tả gà (Fowl plague) Hội nghị lần thứ bệnh cúm gia cầm Beltsville Mỹ năm 1981 thay tên “Bệnh cúm lu an truyền nhiễm cao gia cầm” (Highly Pathogenic Avian Influenza - HPAI) va n Tổ chức thú y giới (OIE) xếp HPAI vào danh mục 15 bệnh nguy hiểm Virus cúm typ A gây bệnh chủ yếu cho gia cầm nuôi loài chim ie gh tn to động vật (Nguyễn Bá Hiên, 2014) [6] p hoang Đến người ta xác định lưu hành rộng virus nl w loài chim hoang chim hoang vật chủ tự nhiên virus d oa cúm A Ngoài gây bệnh cho loài chim, virus cúm typ A cịn gây bệnh u nf va Hiên, 2014) [6] an lu cho số động vật khác bao gồm ngựa, lợn, hải cẩu cá voi (Nguyễn Bá Protein bề mặt virus cúm A có cấu trúc từ glycoprotein, bao gồm ll oi m protein gây ngưng kết hồng cầu (Haemagglutinin - HA), protein enzyme cắt z at nh thụ thể NA (Neuraminidase) protein đệm M (Matrix) Dựa vào khác kháng nguyên bề mặt HA NA người ta phân virus cúm A z gm @ thành nhiều typ khác Hiện xác định đươc 16 type H (H1-H16) type N (N1-N9) (Nguyễn Bá Hiên, 2014) [6] Cúm gia cầm thể độc lực l m co cao (Highly Pathogenic Avian Influenza-HPAI) virus cúm A/H5N1 phân typ nhóm cúm A gây bệnh cấp tính cho gà, gà tây loài chim an Lu khác với tốc độ lây lan nhanh tỷ lệ chết cao n va ac th si 40 4.5 Kiểm tra trùng sau công cƣờng độc Để đánh giá hiệu việc tiêm phòng vắc xin phòng bệnh cúm gia cầm, việc theo dõi tỷ lệ bảo hộ lâm sàng, việc kiểm tra thải virus dùng công cường độc có ý nghĩa quan trọng, cung cấp thêm thông tin để xác nhận chất lượng vắc xin hiệu việc tiêm phòng ảnh hưởng đến khả nhân lên virus cường độc thể gia cầm Để kiểm tra, tất gà, vịt lấy mẫu swab ổ nhớp vào ngày thứ 3, 10 sau công cường độc kiểm tra phương pháp Realtime RT-PCR lu Bảng 4.6: Kết kiểm tra trùng sau công cƣờng độc gà an n va Lơ thí nghiệm Số lƣợng (con) p ie gh tn to Lô vắc xin 10 d oa 01 nl w MD lu DC MD 10 DC oi m 10 ll MD u nf va an DC Kết trùng sau công độc (Realtime PCR) Số Ngày kiểm dƣơng/tổng số Tỷ lệ % tra kiểm tra 1/10 10 1/10 10 10 0/10 0,0 5/5 100 10 2/10 20 3/10 30 10 1/10 10 5/5 100 10 2/10 20 1/10 10 10 0/10 0,0 5/5 100 10 02 z at nh z m co l gm @ 03 an Lu n va ac th si 41 Bảng 4.7: Kết kiểm tra trùng sau công cƣờng độc vịt Lơ vắc xin Số Lơ thí lƣợng nghiệm (con) MD Kết trùng sau công độc (Realtime PCR) Ngày kiểm Số dƣơng/tổng Tỷ lệ % tra số kiểm tra 2/10 20 10 01 1/10 10 10 0/10 0,0 5/5 100 2/10 20 2/10 20 10 1/10 10 5/5 100 3/10 30 1/10 10 10 0/10 0,0 5/5 100 DC 5 lu an 10 n va 10 gh tn to MD 02 p ie 5 w DC d oa nl 10 lu 10 u nf va an MD 03 ll oi m DC z at nh 10 z @ l xem âm tính CT  35 gm Mẫu kiểm tra xem dương tính CT ≤ 35; ngược lại, m co Qua bảng ta thấy mức độ thải lơ gà thí nghiệm qua an Lu ngày lấy mẫu kiểm tra sau ngày, ngày 10 ngày n va ac th si 42 Sau ngày công cường độc virus cúm gia cầm, lô vắc xin có dương tính / tổng số 10 , lơ vắc xin có dương tính/10 con, lơ vắc xin có dương tính/ tổng số 10 Sau ngày cơng cường độc virus cúm gia cầm, lơ vắc xin có dương tính/ tổng 10 con, lơ vắc xin có dương tính/ tổng số 10 con, lơ vắc xin có dương tính/ tổng số 10 Sau 10 ngày công cường độc kết đạt sau: lô vắc xin dương tính, lơ vắc xin có dương tính/ tổng số 10 con, lơ vắc xin khơng có dương tính với virus cúm lu an Gà, vịt tiêm phòng vắc xin có mức độ thải virus thấp so với n va gà, vịt không tiêm vắc xin Gà vịt đối chứng không tiêm vắc xin thường gh tn to có mức độ thải virus cao Từ kết trên, thấy gà, vịt tiêm lơ vắc xin thải p ie virus d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 43 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Theo quy định chung, sản xuất vắc xin cần phải kiểm tra tiêu ổn định, vơ trùng, an tồn hiệu lực Việc kiểm tra tiêu đảm bảo vắc xin xuất xưởng đạt chất lượng sử dụng theo yêu cầu mà thơng qua đánh giá tính ổn định giống, quy trình sản xuất lu an yếu tố liên quan đến hoạt động sản xuất vắc xin va n Qua kết đánh giá chất lượng vắc xin cúm gia cầm, rút - Vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac công ty Navetco sản xuất đạt p ie gh tn to kết luận sau: nl w tính ổn định độ nhớt theo quy định d oa - Vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac công ty Navetco sản xuất đạt an lu tiêu vô trùng u nf va - Vắc xin Navet – Fluvac đạt tiêu chuẩn an toàn sử dụng tiêm cho ll gà , vịt với liều gấp đôi liều sử dụng m oi - Gà tiêm vắc xin cúm gia cầm Navet – Fluvac chống z at nh virus cúm gia cầm H5N1 cường độc với tỷ lệ bảo hộ 80 – 100% z Trong vùng có tình hình dịch tễ phức tạp, nguy bệnh cúm gia @ l gm cầm xảy cao nên tiêm vắc xin cho gà vào thời điểm 14 ngày tuổi nhắc an Lu ngày tuổi lớn tiêm mũi m co lại mũi sau tuần Ở vùng bị dịch uy hiếp tiêm vắc xin cho gà 21 n va ac th si 44 5.2 Kiến nghị Công nhận kết nghiên cứu đề nghị quan có thẩm quyền cho phép sản xuất lưu hành vắc xin Navet – Fluvac Việt Nam Trong vùng có dịch tễ phức tạp, nguy bệnh cúm gia cầm xảy cao nên tiêm vắc xin cho gà, vịt vào thời điểm 14 ngày tuổi nhắc lại mũi sau tuần Ở vùng bị uy hiếp, tiêm vắc xin cho gà, vịt vào ngày tuổi 21 lớn tiêm mũi lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Đậu Ngọc Hào (2014), “Các dạng công nghệ vắc xin cúm A”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập XXI Số 5, tr 84 Trần Xuân Hạnh, Tô Thị Phấn, Đỗ Thanh Thủy, Phạm Sỹ Tú (2013), “Thử hiệu lực vắc xin NAVET – VIFLUVAC phòng bệnh cúm A/H5N1 clade 1.1 2.3.2.1c phương pháp công cường độc tiếp xúc trực tiếp”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y , tập XX Số 5, tr 22 lu Nguyễn Bá Hiên, Trần Xuân Hạnh, Phạm Quang Thái, Hoàng Văn Năm an (2010), Công nghệ chế tạo sử dụng vắc xin Việt Nam, Nxb Nông va n Nghiệp, Hà Nội tn to Nguyễn Bá Hiên (2010), Giáo trình miễn dịch học ứng dụng, Nxb Nông gh Nghiệp, Hà Nội p ie Nguyễn Bá Hiên, Phạm Sỹ Lăng (2014), Bệnh cúm người động vật, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội oa nl w Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Lê Văn Lãnh, Đỗ Ngọc Thúy (2014), d Giáo trình Bệnh truyền nhiễm Thú y, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội an lu Phạm Sỹ Lăng, Lê Thị Tài (1997), Thuốc điều trị vắc xin sử dụng va thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội u nf Nguyễn Hữu Nam, Nguyễn Trọng Kim, Nguyễn Xuân Hùng (2011), Giáo ll trình modun xác định vắc xin phịng bệnh, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội m oi Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (2001), Giáo z at nh trình Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 10 Nguyễn Như Thanh, Phùng Quốc Chướng (2006), Phương pháp thực z gm @ hành vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 11 Nguyễn Ngọc Tiến, Hoàng Văn Năm, Đăng Văn Kỳ, Nguyễn Tùng, Ken l m co Inui (2011), “Lưu hành virus cúm gia cầm độc lực cao H5N1 Việt Nam vắc xin phòng bệnh cúm gia cầm”, Tạp chí Khoa học kỹ an Lu thuật thú y, tập XVIII Số 6, tr 76 n va ac th si 46 II Tiếng Anh 12 Cox N.J., Fuller F., Kaverin N., Klenk H D., Lamb R A., Mahy W., McCauley J W., Nakamura K., Palese P., Webster R G (2000), Orthomyxoviridae Virus taxonomy, Seventh report of the international committee on taxonomy of virus, Academic Press: San Deigo 13 Frederick A., Murphy E., Paul J., Gibbs, Marian C., Horzinek (1999), Veterinary Virology, Third edition, Academic Press 14 Swayne D E., Halvorson D A., (2003), Chapter Influenza In Diseases of Poultry (Eds: Y M Saif, H J BRNAes, A M Fadl, J R Glisson, lu L R Mc Dougald, D E Swayne), 11th edition A Blackwell, Iowa an n va 15 Wang W., (2010), Glycosylation at 158N of the hemagglutinin protein tn to and receptor binding specificity synergistically affect the antigenicity vaccine virus in ferrets, 84, 6570-7 p ie gh and immunogenicity of a live attenuated H5N1 A/Vietnam/1203/2004 16 Webster R., Cox N., Stohr K (2002), WHO manual on animal influenza w oa nl diagnosis and surveillance d III Các tài liệu tham khảo từ Internet 17 http:/www.fao.org/newsroom/en/news/2008/1000775/index.html 2008 18 http:/www.who.int/mediacentre/factsheets/avian_influenza/en/index.html 2008 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 47 MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA ĐỀ TÀI lu an n va tn to Ảnh 2: Ly tâm vắc xin để kiểm tra tính ổn định p ie gh Ảnh 1: Kiểm tra độ nhớt vắc xin d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Ảnh 3: Kiểm tra tính chất nhũ n va ac th si 48 lu an n va to p ie gh tn Ảnh 4: Vắc xin kiểm tra tính ổn định nhiệt độ khác d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Ảnh 5: Vắc xin cúm Navet – Fluvac sau ly tâm vắc xin không đạt chất lượng sau ly tâm n va ac th si 49 lu an va n Ảnh 6: Các mẫu hóa chất dùng để tách chiết RNA p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 7: Tách chiết RNA gà vịt an Lu n va ac th si 50 lu an n va gh tn to p ie Ảnh8: Vortex mẫu để thực tách chiết RNA d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 9: Máy ly tâm sử dụng tách chiết mẫu RNA an Lu n va ac th si 51 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Ảnh 10 - 11: Tiến hành làm phản ứng Realtime - PCR n va ac th si 52 lu an n va to p ie gh tn Ảnh 12: Đặt mẫu vào máy chạy Realtime - PCR d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 13: Hóa chất dùng để thực phản ứng Realtime - PCR an Lu n va ac th si 53 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 14 - 15: Máy chạy Realtime - PCR an Lu n va ac th si 54 lu an n va p ie gh tn to Ảnh 16: Gà khỏe mạnh sau tiêm vắc xin để kiểm tra an toàn vắc xin d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si