Tỷ lệ nhiễm human papilloma vius và mối tương quan với phết tế bào cổ tử cung bất thường

Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG TỶ LỆ NHIỄM HUMAN PAPILLOMA VIRUS VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI PHẾT TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG BẤT THƯỜNG Mã số: 27/2016/HĐ-NCKH Chủ nhiệm đề tài: ThS Nguyễn Ngọc Lâm PGS.TS.BS Nguyễn Văn Thắng Tp Hồ Chí Minh, 07/2018 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG TỶ LỆ NHIỄM HUMAN PAPILLOMA VIRUS VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI PHẾT TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG BẤT THƯỜNG Mã số: 27/2016/HĐ-NCKH Chủ nhiệm đề tài ThS Nguyễn Ngọc Lâm PGS.TS.BS Nguyễn Văn Thắng Tp Hồ Chí Minh, 07/2018 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ii THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU Chủ nhiệm đề tài: ThS Nguyễn Ngọc Lâm PGS.TS.BS Nguyễn Văn Thắng ĐƠN VỊ PHỐI HỢP Thực xét nghiệm PCR với hỗ trợ giám sát Trung tâm Y sinh học phân tử Kết xét nghiệm phê duyệt Phó giáo sư, Tiến sĩ, Bác sĩ, Hà Thị Anh Trưởng Phịng Xét nghiệm Phó giáo sư, Tiến sĩ, Bác sĩ, Cao Minh Nga – Trưởng Trung tâm Y sinh học phân tử Khoa Phụ sản - Bệnh viện Đại học Y dược sở thực tư vấn vào ngày tái khám sau có kết tế bào học cổ tử cung bất thường Bác sỹ điều trị trực tiếp lấy mẫu Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh iii MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA i MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Human papilloma virus 1.1.1 Cấu trúc phân loại 1.1.2 Chức số gen đặc biệt 1.1.3 Quá trình phát triển 1.2 Phương pháp phát xác định kiểu gen HPV 1.3 Xét nghiệm tế bào học 1.3.1 Lược sử 1.3.2 Chỉ định 1.3.3 Hệ thống Bethesda 2014 1.3.4 Một số nghiên cứu 11 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh iv 2.1 Thiết kế nghiên cứu 12 2.2 Đối tượng nghiên cứu 12 2.2.1 Dân số mục tiêu 12 2.2.2 Dân số chọn mẫu 12 2.3 Cỡ mẫu 12 2.4 Phương pháp chọn mẫu 13 2.5 Tiêu chuẩn chọn mẫu 13 2.5.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 13 2.5.2 Tiêu chuẩn loại trừ 13 2.6 Thu thập kiện tiêu đánh giá 13 2.6.1 Địa điểm thu thập kiện 13 2.6.2 Thời gian thu thập kiện 13 2.6.3 Quy trình kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 13 2.7 Xử lý kiện 19 2.8 Các biện pháp khống chế sai số 19 2.9 Đạo đức nghiên cứu: 20 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 21 3.1 Tỷ lệ bất thường tế bào học cổ tử cung 21 3.1.1 Tuổi phân bố bệnh nhân theo nhóm tuổi 21 3.1.2 Tỷ lệ bất thường TBH CTC nghiên cứu 22 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh v 3.1.3 Mối liên quan bất thường TBH CTC yếu tố tuổi 22 3.2 Tỷ lệ nhiễm HPV phân bố kiểu gen 23 3.2.1 Tỷ lệ nhiễm HPV tình trạng đơn, đa nhiễm 23 3.2.2 Tuổi mối liên quan với tỷ lệ nhiễm HPV 24 3.2.3 Mối liên quan tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV yếu tố tuổi 25 3.2.4 Sự phân bố kiểu gen HPV 25 3.2.5 Mối liên quan kiểu gen HPV tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 26 3.3 Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường TBH CTC .27 3.3.1 Mối liên quan bất thường CTC với tỷ lệ nhiễm HPV 27 3.3.2 Mối liên quan bất thường CTC với tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm HPV 29 3.3.3 Mối liên quan bất thường CTC với phân bố kiểu gen HPV nghiên cứu 31 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 34 4.1 Tỷ lệ bất thường tế bào học cổ tử cung 34 4.1.1 Độ tuổi nghiên cứu 34 4.1.2 Tỷ lệ bất thường TBH CTC nghiên cứu 34 4.1.3 Mối liên quan bất thường TBH CTC yếu tố tuổi 35 4.2 Tỷ lệ nhiễm HPV phân bố kiểu gen 36 4.2.1 Tỷ lệ nhiễm HPV tình trạng đơn đa nhiễm 36 4.2.2 Mối liên quan tỷ lệ nhiễm HPV yếu tố tuổi 37 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh vi 4.2.3 Mối liên quan tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV yếu tố tuổi 38 4.2.4 Sự phân bố kiểu gen HPV 39 4.2.5 Mối liên quan kiểu gen HPV tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 42 4.3 Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường TBH CTC .42 4.3.1 Mối liên quan bất thường CTC với tỷ lệ nhiễm HPV 42 4.3.2 Mối liên quan bất thường CTC với tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm HPV 44 4.3.3 Mối liên quan bất thường CTC với phân bố kiểu gen HPV nghiên cứu 45 Tính ứng dụng nghiên cứu 48 KẾT LUẬN 49 KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh vii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Phân tích mẫu chứng mẫu xét nghiệm Multiplex PCR 16 Bảng 2.2: Phân tích mẫu chứng mẫu xét nghiệm Realtime PCR 18 Bảng 3.1: Phân bố bệnh nhân theo nhóm tuổi 21 Bảng 3.2: Phân bố bệnh nhân theo bất thường TBH CTC 22 Bảng 3.3: Phân bố tình trạng đơn, đa nhiễm HPV 23 Bảng 3.4: Phân bố kiểu gen HPV theo tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 26 Bảng 3.5: Phân bố bất thường TBH CTC theo tình trạng nhiễm HPV 27 Bảng 3.6: Mối liên quan loại bất thường TBH CTC với nhiễm HPV 28 Bảng 3.7: Mối liên quan bất thường TBH CTC nhiễm HPV có hiệu chỉnh 29 Bảng 3.8: Phân bố bất thường TBH CTC theo tình trạng đơn đa nhiễm HPV 29 Bảng 3.9: Mối liên quan loại bất thường TBH CTC với tình trạng đơn đa nhiễm HPV 30 Bảng 3.10: Mối liên quan HPV 16 với loại bất thường TBH CTC 35 Bảng 4.1: Sự phân bố kiểu gen HPV theo số tác giả 40 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh viii DANH MUC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1: Phân bố bất thường TBH CTC theo nhóm tuổi 23 Biểu đồ 3.2: Phân bố tình trạng nhiễm HPV theo nhóm tuổi 24 Biểu đồ 3.3: Phân bố tình trạng đơn đa nhiễm HPV theo nhóm tuổi 25 Biểu đồ 3.4: Sự phân bố kiểu gen HPV 26 Biểu đồ 3.5: Phân bố bất thường TBH CTC theo kiểu gen HPV 31 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Q trình phát triển HPV mơ học Hình 2.1: Kết điện di xét nghiệm PCR định tính 15 Hình 2.2: Kết điện di phát hỗn hợp phản ứng A 16 Hình 2.3: Kết điện di phát hỗn hợp phản ứng B 17 Hình 3.1: Kết PCR định tính mẫu dương tính âm tính với HPV Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ix DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ASC-US : Atypical Squamous Cell of Undetermined Significance BTCTC : Bất thường cổ tử cung CIN : Cervical Intraepithelial Neoplasia CTC : Cổ tử cung DNA : Deoxyribonucleic acid HPV : Human Papilloma Virus (Virút gây u nhú người) HSIL : High-grade squamous intraepithelial lesions LSIL : Low-grade squamous intraepithelial lesions PCR : Polymerase Chain Reaction TBH : Tế bào học UT CTC : Ung thư cổ tử cung Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 23 Nhận xét: - Tỷ lệ ASCUS cao nhóm ≥50 tuổi 78,1%, nhóm 40 – 49 tuổi có tỷ lệ 64,5 %, nhóm 20 – 29 tuổi tỷ lệ 58,3% nhóm 30 – 39 tuổi tỷ lệ 48,4% - Tỷ lệ LSIL: nhóm 0.05: bác bỏ Ho  phân phối chuẩn ♦ Mối liên quan tỷ lệ nhiễm HPV nhóm tuổi Biểu đồ 3.2: Phân bố tình trạng nhiễm HPV theo nhóm tuổi Nhận xét: - Tỷ lệ nhiễm HPV: nhóm 20 – 29 tuổi cao gồm 10/12 ca (chiếm 83.3%), nhóm 30 – 39 tuổi gồm 19/31 ca (chiếm 61,3%), nhóm ≥50 tuổi gồm 19/32 ca (chiếm 59,4%) thấp nhóm 40 – 49 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 25 tuổi gồm 18/31 ca (chiếm 58,1%) - Tỷ lệ nhiễm HPV cao nhóm 20 – 29 tuổi có xu hướng giảm dần nhóm 30 – 39, 40 - 49 tuổi tăng lên nhóm ≥50 tuổi 3.2.3 Mối liên quan tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV yếu tố tuổi Biểu đồ 3.3: Phân bố tình trạng đơn đa nhiễm HPV theo nhóm tuổi Nhận xét: - Tỷ lệ đa nhiễm: nhóm ≥50 tuổi cao gồm 12/18 ca (chiếm 66,7%), nhóm 20 – 29 tuổi gồm 6/10 ca (chiếm 60,0%), nhóm 40 – 49 tuổi gồm 8/18 ca (chiếm 44,4%) thấp nhóm 30 – 39 tuổi gồm 6/19 ca (chiếm 31,6%) - Tỷ lệ đa nhiễm: nhóm ≥50 tuổi 20 – 29 tuổi cao gần gấp 1,5 lần so với nhóm 30 – 39 tuổi 40 – 49 tuổi 3.2.4 Sự phân bố kiểu gen HPV Tiến hành phân tích 66 mẫu HPV dương tính Multiplex PCR Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 26 Nhóm nguy cơ:  thấp  cao Biểu đồ 3.4: Sự phân bố kiểu gen HPV Nhận xét: - Trong 15 kiểu gen HPV nghiên cứu: HPV nhóm “nguy cao” gồm 97/108 kiểu gen xác định (chiếm 89,8 %), HPV nhóm “nguy thấp” gồm 11/108 kiểu gen (chiếm 10,2%) - Trong 66 trường hợp HPV dương tính: HPV 52 cao gồm 15/66 ca (chiếm 22,7%), tiếp đến HPV 58 gồm 14/66 ca (chiếm 21,2%), HPV 16 gổm 13/66 ca (chiếm19,7%) HPV 56 gồm 11/66 ca (chiếm 16,7%) 3.2.5 Mối liên quan kiểu gen HPV tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm Bảng 3.4: Phân bố kiểu gen HPV theo tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm Kiểu gen 11 16 18 n Tình trạng nhiễm Đa nhiễm Đơn nhiễm % n % 60,0 40,0 100,0 0,0 38,5 61,5 40,0 60.0 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Tổng cộng n 10 13 % 9,3 0,9 12 4,6 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 27 31 33 35 39 45 51 52 56 58 59 66 Tổng cộng 10 11 75 100,0 66,7 0,0 90,0 100,0 77,8 66,7 63,6 78,6 80,0 100,0 69,4 2 33 0,0 33,3 0,0 10,0 0,0 22,2 33,3 36,4 21,4 20,0 0,0 30,6 10 15 11 14 5 108 2,8 5,6 9,3 0,9 8,3 13,9 10,2 13 4,6 4,6 100 Nhận xét: Trong kiểu gen HPV chiếm tỷ lệ cao 52, 58, 16, 56: nhóm nhiễm HPV 58 có tỷ lệ đa nhiễm cao gồm 11/14 ca (chiếm 78,6%), HPV 52 gồm 10/15 ca (chiếm 66,7%), HPV 56 gồm 7/11 ca (chiếm 63,6%) HPV 16 gồm 5/13 ca (chiếm 38,5%) 3.3 Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường TBH CTC 3.3.1 Mối liên quan bất thường CTC với tỷ lệ nhiễm HPV ♦ Phân tích chung Bảng 3.5: Phân bố bất thường TBH CTC theo tình trạng nhiễm HPV HPV TBH CTC ASCUS LSIL HSIL Tổng cộng Dương tính Âm tính Tổng cộng n % n % n % 36 53,7 14,3 0,0 31 24 11 46,3 85,7 100,0 67 28 11 100,0 100,0 100,0 40 37,7 66 62,3 106 100,0 Nhận xét: Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 28 - Trong bất thường TBH CTC: tỷ lệ HPV dương tính nhóm HSIL cao gồm 11/11 ca (chiếm 100% ), nhóm LSIL gồm 24/28 ca (chiếm 85,7%) nhóm ASCUS gồm 31/67 ca (chiếm 46,3%) - Mức độ bất thường TBH CTC đối tượng nghiên cứu cao tỷ lệ nhiễm HPV tăng ♦ Mối liên quan cặp bất thường TBH CTC với tình trạng nhiễm HPV Bảng 3.6: Mối liên quan loại bất thường TBH CTC với nhiễm HPV HPV TBH CTC ASCUS LSIL Tổng cộng ASCUS HSIL Tổng cộng LSIL HSIL Tổng cộng Âm tính n % 36 90,0 10,0 40 100,0 36 100,0 0,0 36 100,0 100,0 0,0 100,0 Dương tính n % 31 56,4 24 43,6 55 100,0 31 73,8 11 26,2 42 100,0 24 68,6 11 31,4 35 100,0 Giá trị p PR KTC 95% 0,05; p = 0,455*> 0,05 3.3.3 Mối liên quan bất thường CTC với phân bố kiểu gen HPV nghiên cứu Biểu đồ 3.5: Phân bố bất thường TBH CTC theo kiểu gen HPV Nhận xét: - Trong kiểu gen HPV 52; 58; 16; 56: tỷ lệ HSIL cao nhóm đối tượng nhiễm HPV 16 gồm 6/13 ca (chiếm 46%), nhóm nhiễm HPV 58 gồm 3/14 ca (chiếm 21%), nhóm nhiễm HPV 56 gồm 2/11 ca (chiếm 21%) nhóm nhiễm HPV 52 gồm 0/15 ca (chiếm 0%) - Tỷ lệ đối tượng có tổn thương LSIL HSIL nhiễm HPV 16 cao gồm 12/13 ca (chiếm 92%) so với nhiễm kiểu gen HPV khác Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 32 - Ở đối tượng nhiễm kiểu gen HPV khác bất thường CTC ASCUS nhiều LSIL bất thường HSIL ♦ Mối liên quan cặp bất thường TBH CTC với kiểu gen HPV 16 Bảng 3.10: Mối liên quan HPV 16 với loại bất thường TBH CTC HPV 16 TBH CTC ASCUS LSIL Tổng cộng n 30 18 48 Khơng % 62,5 37,5 100,0 Có n % 14,3 85,7 100,0 ASCUS HSIL Tổng cộng 30 34 88,2 11,8 100,0 14,3 85,7 100,0 LSIL HSIL Tổng cộng 18 22 81.8 18,2 100,0 6 12 50,0 50,0 100,0 Giá trị p PR KTC 95% 0,035* 4,36 1,42 - 3,67