Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HOA NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA HÌNH CỦA MỘT SỐ GEN LIÊN QUAN ĐẾN LOÃNG XƢƠNG Ở NAM GIỚI LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HOA NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA HÌNH CỦA MỘT SỐ GEN LIÊN QUAN ĐẾN LOÃNG XƢƠNG Ở NAM GIỚI LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HOA NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA HÌNH CỦA MỘT SỐ GEN LIÊN QUAN ĐẾN LOÃNG XƢƠNG Ở NAM GIỚI Ngành đào tạo : Nội Khoa Chuyên ngành : Nội – Xương khớp Mã số : 9720107 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN THỊ THANH HƢƠNG PGS.TS TRẦN THỊ MINH HOA HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực đề tài tơi nhận nhiều giúp đỡ Lãnh đạo quan, đơn vị, Thầy Cô, đồng nghiệp, bệnh nhân, bạn bè gia đình thân yêu Trước hết, tơi xin bày tỏ lịng tri ân sâu sắc tới TS Nguyễn Thị Thanh Hương PGS.TS Trần Thị Minh Hoa người thầy, người hướng dẫn khoa học, tận tình giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình học tập, trực tiếp hướng dẫn tơi thực nghiên cứu, góp ý sửa chữa luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới Viện nghiên cứu y học Đinh Tiên Hoàng, quỹ Nafosted tài trợ nguồn kinh phí tạo điều kiện cho tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn kính trọng tới thày, tồn thể cán bộ, nhân viên Bộ môn Nội Tổng Hợp – Trường Đại hoc Y Hà Nội dạy dỗ giúp đỡ tơi suốt q trình học tập hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn toàn thể cán bộ, nhân viên khoa Cơ Xương khớp bệnh viện Hữu Nghị nơi công tác tạo điều kiện thuận lợi tận tình giúp đỡ tơi suốt q trình học tập hồn thiện luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn kính trọng PGS TS Lê Văn Đơ chủ nhiệm môn Miễn Dịch - Sinh Lý bệnh giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu hoàn thành luận án Xin gửi lời cảm ơn đến bệnh nhân gia đình họ giúp tơi có số liệu luận án Cuối cùng, xin ghi nhớ công ơn sinh thành, dưỡng dục bố mẹ ủng hộ động viên chồng, hai bên tôi, chỗ dựa vững để yên tâm học tập hoàn thành luận án Hà Nội, ngày 20 tháng 06 năm 2023 Nguyễn Thị Hoa LỜI CA ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Hoa, nghiên cứu sinh khóa 35 Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Nội xương khớp, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn TS Nguyễn Thị Thanh Hương PGS.TS Trần Thị Minh Hoa Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam; Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 20 tháng 06 năm 2023 Ngƣời viết cam đoan Nguyễn Thị Hoa DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CSTL Cột sống thắt lưng CXĐ Cổ xương đùi DNA Deoxyribonucleic acid DXA Dual energy X-ray Absorptiometry FTO Fat mass obesity associated GWAS Genome Wide Association Study: Nghiên cứu tương quan toàn hệ gen Hcy Homocystein LDLR Low Density Lipoprotein Receptor: Thụ thể lipoprotein trọng lượng phân tử thấp LRP5 Low Density Lipoprotein Receptor related protein LX Loãng xương MĐX Mật độ xương MTHFR Methylene tetrahydrofolate reductase KLXĐ Peak Bone Mass Density – mật độ xương đỉnh RANKL Receptor active of nuclear factor kappa ligand Rm Reverse mutation primer Rw Reverse wild type primer SNP Single Nucleotid Polymorphism (Đa hình đơn Nucleotid) TGF Transforming Growth Factor: yếu tố tăng trưởng WHO World Health Organization MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đại cương loãng xương 1.1.1 Định nghĩa loãng xương 1.1.2 Dịch tễ học loãng xương nam 1.1.3 Chẩn đốn lỗng xương 1.2 Cơ chế bệnh sinh loãng xương nam giới 1.3 Đa hình đơn nucleotide 1.3.1 Khái niệm đa hình đơn .8 1.3.2 Các loại SNPs 10 1.3.3 Vai trò ứng dụng SNPs Y học 10 1.3.4 Một số phương pháp xác định kiểu gen đa hình đơn nucleotid11 1.4 Vai trò gen MTHFR, LRP5 FTO loãng xương gãy xương 15 1.4.1 Vai trị gen nói chung lỗng xương 15 1.4.2 Vai trị gen LRP5 loãng xương 18 1.4.3 Vai trò gen MTHFR lỗng xương 23 1.4.4 Vai trị gen FTO loãng xương 27 1.5 Một số nghiên cứu lâm sàng gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133), FTO rs1121980 liên quan với loãng xương gãy xương nam giới 29 1.5.1 Các nghiên cứu giới 29 1.5.2 Các nghiên cứu Việt Nam 35 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu .37 2.2 Đối tượng nghiên cứu 37 2.2.1 Nhóm bệnh 37 2.2.2 Nhóm chứng 38 2.3 Phương pháp nghiên cứu .38 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu .38 2.3.2 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 38 2.3.3 Các số, biến số nghiên cứu tiêu chuẩn đánh giá 40 2.3.4 Phương tiện nghiên cứu 43 2.3.5 Các bước tiến hành nghiên cứu .45 2.4 Sơ đồ nghiên cứu 50 2.5 Sai số cách khống chế sai số 51 2.6 Phương pháp phân tích số liệu 51 2.7 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 53 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 54 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 54 3.2 Đặc điểm đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133) FTO rs1121980 58 3.2.1 Kết phân tích đa hình gen 58 3.2.2 Đặc điểm kiểu gen đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133) FTO rs1121980 65 3.3 Mối liên quan đa hình gen nghiên cứu với loãng xương nam giới 72 3.3.1 Mối liên quan đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349) với loãng xương nam giới 72 3.3.2 Mối liên quan đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) với lỗng xương nam giới 74 3.3.3 Mối liên quan đa hình gen FTO rs1121980 với lỗng xương nam giới 76 3.3.4 Sự kết hợp đa hình gen gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133) FTO rs1121980 với loãng xương nam giới 77 3.4 Mối liên quan đa hình gen số yếu tố nguy với loãng xương nam giới 78 3.5 Mối liên quan gen số yếu tố nguy loãng xương nam giới 84 CHƢƠNG BÀN LUẬN 88 4.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 88 4.2 Bàn luận đặc điểm đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133) FTO rs1121980 .94 4.2.1 Bàn luận phân bố tần số alen kiểu gen đa hình gen LRP5 Q89R rs41494349 95 4.2.2 Bàn luận phân bố alen kiểu đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) 99 4.2.3 Bàn luận phân bố alen kiểu đa hình gen FTO rs1121980 103 4.3 Bàn luận mối liên quan đa hình gen yếu tố nguy loãng xương nam giới 106 4.3.1 Mối liên quan đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349), MTHFR C677T (rs1801133) FTO rs1121980 với lỗng xương nam giới mơ hình kiểm định đơn biến 106 4.3.2 Tương tác gen yếu tố nguy với lỗng xương mơ hình kiểm định hồi quy tuyến tính đa biến 115 4.3 Ý nghĩa thực tiễn đề tài .121 4.4 Hạn chế đề tài 122 KẾT LUẬN 123 KHUYẾN NGHỊ 125 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Bảng 2.2 Bảng 2.3 Bảng 2.4 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.16 Phân loại số khối thể .40 Tiêu chuẩn chẩn đốn lỗng xương WHO đề nghị 42 Trình tự mồi phản ứng PCR 44 Những mơ hình di truyền giả định SNP nghiên cứu 52 Đặc điểm tuổi nhóm nghiên cứu 54 Đặc điểm chiều cao cân nặng số BMI nhóm bệnh nhóm chứng 55 Đặc điểm tiền sử hút thuốc, uống rượu, nơi sống trình độ học vấn đối tượng nghiên cứu 56 Đặc điểm tiền sử gãy xương mức độ hoạt động thể lực .57 Đặc điểm MĐX theo nhóm tuổi 57 Phân bố kiểu gen LRP5 Q89R (rs41494349) 65 Phân bố đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349) theo tình trạng lỗng xương vị trí cổ xương đùi 66 Phân bố đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349) theo tình trạng lỗng xương vị trí đầu xương đùi 66 Phân bố đa hình gen LRP5 Q89R (rs41494349) theo tình trạng lỗng xương vị trí cột sống thắt lưng 67 Phân bố kiểu gen MTHFR C677T (rs1801133)) nhóm bệnh nhóm chứng 67 Phân bố đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) theo tình trạng lỗng xương vị trí cổ xương đùi 68 Phân bố đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) theo tình trạng lỗng xương vị trí đầu xương đùi 68 Phân bố đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) theo tình trạng lỗng xương vị trí cột sống thắt lưng 69 Phân bố kiểu gen FTO nhóm bệnh nhóm chứng 69 Phân bố đa hình gen FTO rs1121980 theo tình trạng lỗng xương vị trí cổ xương đùi 70 Phân bố đa hình gen FTO rs1121980 theo tình trạng lỗng xương vị trí đầu xương đùi 70 Bảng 3.17 Phân bố đa hình gen FTO rs1121980 theo tình trạng lỗng xương vị trí cột sống thắt lưng 71 Bảng 3.18 Mối liên quan LRP5 Q89R rs41494349 với lỗng xương nam giới mơ hình di truyền 72 Bảng 3.19 Mối liên quan đa hình gen LRP5 Q89R rs41494349 với loãng xương nam giới theo vị trí 73 Bảng 3.20 Mối liên quan đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) với lỗng xương nam giới mơ hình di truyền 74 Bảng 3.21 Mối liên quan đa hình gen MTHFR C677T (rs1801133) với lỗng xương nam giới theo vị trí 75 Bảng 3.22 Mối liên quan đa hình gen FTO rs1121980 với loãng xương nam giới 76 Bảng 3.23 Sự kết hợp kiểu gen gen liên quan đến loãng xương nam giới 77 Bảng 3.24 Mối liên quan số BMI, chiều cao, cân nặng với loãng xương nam giới 78 Bảng 3.25 Mối liên quan hoạt động thể lực, thói quen hút thuốc, uống rượu với loãng xương nam giới 79 Bảng 3.26 Mối liên quan trình độ học vấn, khu vực sinh sống với loãng xương nam giới 83 Bảng 3.27 Liên quan đa hình gen yếu tố nguy với loãng xương mơ hình kiểm định hồi quy tuyến tính đa biến 84 Bảng 3.28 Mơ hình hồi quy logistic đa biến kiểm định mối liên quan loãng xương cổ xương đùi với đa hình gen yếu tố nguy khác 85 Bảng 3.29 Mơ hình hồi quy logistic đa biến kiểm định mối liên quan lỗng xương đầu xương đùi với đa hình gen yếu tố nguy khác 86 Bảng 3.30 Mơ hình hồi quy logistic đa biến kiểm định mối liên quan loãng xương cột sống thắt lưng với đa hình gen yếu tố nguy khác 87