Nghiên cứu tính đa hình di truyền ký sinh trùng sốt rét tính kháng thuốc sốt rét Plasmodium falciparum số tỉnh biên giới thuộc khu vực Bắc Trường Sơn, Việt Nam Trương Văn Hạnh Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Luận án TS Chuyên ngành: Di truyền học; Mã số 62 42 70 01 Người hướng dẫn: PGS.TS Trịnh Đình Đạt, Hồ ĐÌnh Trung Năm bảo vệ: 2013 Abstract Xác định thành phần, cấu loài ký sinh trùng gây bệnh sốt rét người tỉnh Quảng Bình, Quảng Trị Thừa Thiên Huế thuộc khu vực Bắc Trường Sơn, Việt Nam Đánh giá tính đa hình di truyền quần thể P falciparum P vivax Xác định tỷ lệ đột biến kháng P falciparum thuốc sốt rét pyrimethamin, sulfadoxin chloroquin Keywords Di truyền học; Ký sinh trùng; Bệnh sốt rét; Tính đa hình Mở Đầu Sốt rét (SR) bệnh phổ biến, ảnh hãởng nghiêm trọng tới sức khoẻ ngãời nhã đời sống kinh tế - xà hội, đặc biệt nãớc nghèo Theo báo c¸o cđa Tỉ chøc Y tÕ thÕ giíi (WHO), hiƯn cã 99 qc gia vµ vïng l·nh thỉ cã SR lãu hành ãớc tính khoảng 3,3 tỉ ngãời sống vùng có nguy SR ngãời dân sống vùng cận sa mạc Sahara Châu Phi có nguy mắc bệnh cao Năm 2010, ãớc tính thÕ giíi cã kho¶ng 216 triƯu ca bƯnh sèt rÐt 655 nghìn ngãời tử vong chủ yếu trẻ em dãới tuổi phụ nữ có thai ë Ch©u Phi [152] ViƯt Nam n»m vïng SR lãu hành, điều kiện thời tiết, sinh cảnh phù hợp cho bệnh phát triển Từ năm 1980, bệnh SR quay trở lại ngày nghiêm trọng với đỉnh cao năm 1991 nãớc có triệu ngãời mắc, có 4.646 ngãời chết, 144 vụ dịch lớn xảy nhiều địa phãơng [3] Việc thực tốt hoạt động phòng chống SR năm qua đà làm giảm rõ rệt tỷ lệ mắc tư vong SR vµ ViƯt Nam trë thµnh mét quốc gia thành công công tác phòng chống SR giới [48] Năm 2011, nãớc có 45.588 bệnh nhân SR 14 ngãời tử vong sốt rét [58] Các tỉnh Nghệ An, Hà Tĩnh, Quảng Bình, Quảng Trị Thừa Thiên Huế nằm khu vực Bắc Trãờng Sơn, có đãờng biên giới với Lào [45] Ngãời dân sinh sống vùng biên giới chủ yếu ngãời dân tộc thiểu số, giao thông khó khăn, kinh tế chậm phát triển, với giao lãu lớn ngãời dân hai vùng biên giới công tác phòng chống sốt rét gặp nhiều khó khăn [17, 32, 46] Theo kết phân vùng dịch tễ sốt rét can thiệp Việt Nam năm 2009, vùng trọng điểm sốt rét khu vực tập trung chủ yếu hai tỉnh Quảng Bình Quảng Trị sốt rét lãu hành nặng huyện có biên giới với Lào nhã huyện Lệ Thủy tỉnh Quảng Bình, huyện Hãớng Hóa tỉnh Quảng Trị [22] Huyện A Lãới tỉnh Thừa Thiên Huế năm 2005 vùng sốt rét lãu hành nặng nhãng đến tình hình SR đà giảm nhiều [21] Ba huyện mang nhiều điểm đặc trãng cho tình hình lan truyền sốt rét khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam nên đãợc lựa chọn làm địa điểm nghiên cứu Các phãơng pháp cổ điển nhã phãơng pháp chẩn đoán ký sinh trùng sốt rét (KSTSR) kỹ thuật xét nghiệm lam máu nhuộm giemsa, đánh giá KSTSR nhạy, kháng với thuốc điều trị sốt rét kỹ thuật in vivo in vitro thực địa đãợc áp dụng công tác phòng chống sốt rét nhiều nãớc giới Việt Nam [55] Tuy vậy, phãơng pháp có số hạn chế nhã kỹ thuật xét nghiệm lam máu nhuộm giemsa khó phát đãợc trãờng hợp ngãời bệnh nhiễm KSTSR với mật độ thấp trãờng hợp bệnh nhân nhiễm phối hợp nhiều loài KSTSR có loài trội hẳn số lãợng [9, 74] Đánh giá KSTSR nhạy, kháng với thuốc điều trị sốt rét kỹ thuật in vivo in vitro thực địa đòi hỏi phải theo dõi dài ngày, tiêu chuẩn lựa chọn bệnh nhân nghiêm ngặt khó phân biệt xác trãờng hợp tái phát hay nhiƠm míi [11, 138, 152] ViƯc ¸p dơng c¸c phãơng pháp sinh học phân tử nghiên cứu thành phần, cấu loài KSTSR [9, 136], tính đa hình di truyền quần thể KSTSR [102, 138], xác định KSTSR mang đột biến gen liên quan đến kháng số loại thuốc điều trị sốt rét [8, 125, 146] khắc phục đãợc khó khăn mà phãơng pháp cổ điển không giải đãợc, cung cấp số liệu xác với độ tin cậy cao, đem lại hiệu cho công tác phòng chống loại trừ SR Để góp phần đánh giá xác tình hình sốt rét, mức độ đa hình di truyền quần thể KSTSR cung cấp số liệu thực trạng KSTSR kháng thuốc số tỉnh thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam tiến hành đề tài: Nghiên cứu tính đa hình di trun cđa ký sinh trïng sèt rÐt vµ tÝnh kháng thuốc sốt rét Plasmodium falciparum số tỉnh biên giới thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam Mục tiêu đề tài: Xác định đãợc thành phần, cấu loài KSTSR tỉnh Quảng Bình, Quảng Trị Thừa Thiên Huế thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam Đánh giá đãợc tính đa hình di truyền quần thể P falciparum P vivax Xác định đãợc tỷ lệ đột biến kháng P falciparum thuốc sốt rét pyrimethamin, sulfadoxin chloroquin Nội dung đề tài: Điều tra cắt ngang điểm nghiên cứu tỉnh Quảng Bình, Quảng Trị Thừa Thiên Huế để thu thập lam máu mẫu máu giấy thấm Whatman 3MM, phát phân biệt KSTSR kỹ thuật xét nghiệm lam máu nhuộm giemsa PCR Phân tích kiểu gen P falciparum dựa locus gen msp1, msp2 vµ glurp; kiĨu gen cđa P vivax dựa locus gen Pvcs Pvmsp1 để đánh giá tính đa hình di truyền quần thể P falciparum P vivax Phân tích vị trí đột biến điểm gen dhfr để xác định tỷ lệ P falciparum mang đột biến kháng với thuốc pyrimethamin Phân tích vị trí đột biến điểm gen dhps để xác định tỷ lệ P falciparum mang đột biến kháng với thuốc sulfadoxin Phân tích đột biến điểm vị trí 76 gen Pfcrt để xác định tỷ lệ P falciparum mang đột biÕn kh¸ng víi thc chloroquin ý nghÜa cđa ln ¸n: ã Về mặt khoa học: Kết luận án cung cấp số liệu khoa học để đánh giá xác thành phần, cấu loài KSTSR; tính đa hình di truyền quần thể KSTSR tính kh¸ng thc sèt rÐt cđa P falciparum ë khu vùc Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam ã Về mặt thực tiễn: Kết thu đãợc nghiên cứu góp phần đánh giá tình hình lan truyền sốt rét, thực trạng KSTSR kh¸ng mét sè thuèc sèt rÐt ë tØnh thuéc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam Đây sở khoa học giúp Chãơng trình Quốc gia phòng chống loại trừ sốt rét lựa chọn biện pháp phòng chống thuốc điều trị sốt rét thích hợp, góp phần bảo vệ sức khỏe cộng đồng Đóng góp luận án: Lần có đãợc số liệu đặc điểm kiểu gen quần thể P vivax tỉnh Quảng Bình Thừa Thiên Huế thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam Lần có đãợc số liệu tỷ lệ đột biÕn kh¸ng cđa P falciparum víi thc pyrimethamin, sulfadoxin chloroquin tỉnh Quảng Bình Thừa Thiên Huế Ngoài ra, luận án đà cung cấp số liệu tãơng đối đầy đủ thành phần cấu loài, đa hình di truyền quần thể KSTSR, kết nghiên cứu kháng thuốc giai đoạn 2008-2012 khẳng định P falciparum có tỷ lệ đột biến kháng cao với thuốc pyrimethamin, sulfadoxin v chloroquin Đây nguồn thông tin quan trọng để Chãơng trình phòng chống loại trừ sốt rét lựa chọn thuốc điều trị sốt rét thích hợp Bố cục luận án: - Luận án có 138 trang có 40 bảng 39 hình - Mở đầu (4 trang) - Chãơng Tổng quan tài liệu (38 trang) - Chãơng - Đối tãợng, vật liệu phãơng pháp nghiên cứu (19 trang) - Chãơng Kết thảo luận (50 trang) - Kết luận kiến nghị (2 trang) - Các công trình khoa học có liên quan đến luận án (1 trang) - Tài liệu tham khảo (23 trang, 59 tµi liƯu tiÕng ViƯt, 95 tµi liƯu tiÕng Anh) - Phơ lơc (tõ trang 138) Danh mơc c¸c công trình khoa học tác giả có liên quan ®Õn néi dung luËn ¸n Le Duc Dao, Shusuke Nakazawa, Truong Van Hanh, Nguyen Duc Giang (2009), “ Genetic diversity of P vivax in Phu Rieng rubber plantation Binh Phuoc province”, The 4th Nagasaki Symposium on Tropical and Emerging Infectious Diseases pp 76 Rie Isozumi, Haruki Uemura, Le Duc Dao, Truong Van Hanh, Nguyen Duc Giang, Ha Viet Vien, Bui Quang Phuc, Nguyen Van Tuan, and Shusuke Nakazawa (2010), “ Longitudinal Survey of Plasmodium falciparum Infection in Vietnam: Characteristics of Antimalarial Resistance and Their Associated Factors” , Journal of Clinical Microbiology 48(1), pp 70-77 Trãơng Văn Hạnh, Nguyễn Đức Mạnh, Lê Đức Đào, Nguyễn Thị Thãơng, Hà Viết Viên, Hoàng Văn Tân, Nguyễn Hồng Hạnh (2012), Nghiên cứu thành phần cấu loài ký sinh trùng sốt rét tỉnh Quảng Bình Quảng Trị kỹ thuật PCR , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng (3), tr 23-30 Trãơng Văn Hạnh, Lê Đức Đào, Trịnh Đình Đạt, Hồ Đình Trung, Hoàng Văn Tân (2012), Tính đa hình di truyền quần thể Plasmodium vivax tỉnh Quảng Bình, Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng (3), tr 31- 39 Trãơng Văn Hạnh, Lê Đức Đào, Hồ Đình Trung (2012), Xác định tỷ lệ P falciparum kháng chloroquin tỉnh Quảng Bình, Quảng Trị Thừa Thiên Huế, Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (6), tr 310 Tài liệu tham khảo Tiếng Việt Nguyễn Thái Bình (2010), Điều tra tình hình sốt rét phân bố quần thể muỗi Anopheles khu vực suối Đót-Hòn Bà, huyện Diên Khánh, tỉnh Khánh Hòa , Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa häc 2005- 2010, ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 361-369 Bộ Y tế (2009), Hãớng dẫn chẩn đoán điều trị sốt rét, Viện Sốt rét Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, 28 trang Lê Đình Công (1997), Đánh giá sơ kết phòng chống sốt rét Việt Nam giai đoạn 1992-1995, Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa häc 1991-1996, ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 7-28 Lê Đình Công (2000), Những kinh nghiệm phòng chống sèt rÐt kh¸ng thc ë ViƯt Nam 1991-2000” , Kû yếu công trình nghiên cứu khoa học 1996-2000, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 273-277 Nguyễn Phãơng Dung, Phạm Thị Xuyến, Ngô Việt Thành (1997), Đáp ứng KSTSR P falciparum (in vitro) víi c¸c nhãm thc antifolat” , Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa học 1996-2000, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng, NXB Y học, tr 242-249 Hồ Huỳnh Thuỳ Dãơng (1997), Sinh học phân tử - khái niệm, phãơng pháp, ứng dụng, NXB Giáo dục, 301 trang Bùi Đại (2002), Ký sinh trùng sốt rét kháng thuốc Việt Nam, thực trạng sách dùng thuốc , Tạp chí Y học Quân (3), tr 51-54 Lê Đức Đào, Nguyễn Duy Sỹ, Ngô Việt Thành (1995), Xác định nhanh độ nhạy kháng cđa ký sinh trïng sèt rÐt Plasmodium falciparum ®èi víi pyrimethamine men phân cắt giới hạn dihydrofolate reductase , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trïng, ViÖn sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng (2) tr 28-34 Lê Đức Đào, Bùi Quang Phúc, Nguyễn Văn Tuấn (1996), Chẩn đoán phân biệt loài ký sinh trùng sốt rét ngãời kỹ thuật phản ứng chuỗi Polymerase lồng (Nested PCR) , Thông tin Phòng chống sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ã ơng (2), tr 26-33 10 Lê Đức Đào, Bùi Quang Phúc, Nguyễn Văn Tuấn (1998), Nghiên cứu cấu ký sinh trùng sốt rét tỉnh Lâm Đồng, Bình Phãớc, §¾c L¾c b»ng kü thuËt PCR lång (Nested PCR)” , Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa học 1996-2000, Viện Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng, NXB Y học, tr 195-200 11 Lê Đức Đào, Trần Quốc Toàn, Nguyễn Mai Hãơng (2001), Phân biệt tái phát tái nhiễm theo kiểu gen Plasmodium falciparum , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét c¸c bƯnh ký sinh trïng, ViƯn sèt rÐt - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (1), tr 48-55 12 Lª Đức Đà o, Nguyễn Văn Tuấn, Bïi Quang Phóc, Ngun Đức Giang, Trương Văn Hạnh (2005), “ Nghiªn cứu nh phần loà i cấu ký sinh trïng sốt rÐt tÝnh đa h×nh di truyền ca P falciparum ti tnh Qung Bình bng k thut sinh hc phân t K yu công trình nghiªn cứu khoa học 2000-2005, Viện Sốt rÐt Ký sinh trïng - C«n Trïng Trung ương, NXB Y học, tr 246-258 13 Lê Đức Đào, Nakazawa S., Trãơng Văn Hạnh, Nguyễn Đức Mạnh, Ngô Thị Kim (2006), Tính đa h×nh di trun locus gen MSP1 cđa Plasmodium falciparum thu thập Công ty cao su Phú Riềng tỉnh Bình Phãớc , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (4), tr 49-57 14 Lê Đức Đào, Nakazawa S., Trãơng Văn Hạnh, Nguyễn Đức Mạnh, Ngô Thị Kim (2007), Tính đa hình di truyền gen circumsporozoite protein Plasmodium vivax Công ty cao su Phú Riềng tỉnh Bình Phãớc , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét c¸c bƯnh ký sinh trïng, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (3), tr 34-41 15 Lê Đức Đào, Nakazawa S., Trãơng Văn Hạnh, Nguyễn Đức Mạnh, Ngô Thị Kim (2007), Tính đa hình di truyền gen Pvmsp1 Plasmodium vivax Công ty cao su Phú Riềng tỉnh Bình Phãớc , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trïng, ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng (3), tr 27-33 16 Trnh ỡnh Đạt (2002), Cơng nghệ sinh học, NXB Gi¸o dơc, TËp IVCông nghệ sinh học động vật, 171 trang 17 Hoàng Hà, Đinh Thị Hòa, Lê Việt, Lê Thanh, Bùi Hữu Núi Trung tâm PCSR tỉnh Savanakhet (2011), Hợp tác nghiên cứu bệnh sốt rét vùng biên giới tỉnh Savanakhet (Lào) Quảng Trị (Việt Nam) , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trïng, ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng (6), tr 9-17 18 Trần Đức Hinh, Nguyễn Đức Mạnh, Lê Đình Công (1997), Bổ sung dẫn liệu điều tra muỗi anopheles thực trạng phân bố vectơ sốt rét Việt Nam giai đoạn 1991-2000 , Kỷ yếu công trình nghiên cứu khoa häc 1996-2000, ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 287-309 19 Nguyễn Võ Hinh, Lãơng Văn Định, Lê Quang Phú, Thân Nguyên Tám, Nguyễn Cao Vĩnh Uyên, Đặng Văn Hãớng, Nguyễn Dung, Dãơng Quang Minh, Hoàng Hữu Nam (2007), Nghiên cứu hình thái giao lãu hành vi phòng, chống sốt rét đối tãợng nguy mắc bệnh, huyện vùng cao, biên giới A Lãới, tỉnh Thừa Thiên Huế năm 20052007 , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (4), tr 17-26 20 Nguyễn Võ Hinh, Lãơng Văn Định, Lê Quang Phú, Thân Nguyên Tám, Nguyễn Cao Vĩnh Uyên, Đặng Văn Hãớng, Nguyễn Dung, Dãơng Quang Minh, Hoàng Hữu Nam (2007), Đánh giá hiệu công tác phòng chống sốt rét sau 15 năm can thiệp biện pháp (từ năm 1991-2005) tỉnh Thừa Thiên Huế , Công trình khoa học báo cáo Hội nghị ký sinh trùng lÇn thø 38, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 55-62 21 Nguyễn Đức Huệ, Nguyễn Dung, Dãơng Quang Minh, Hoàng Hữu Nam, Nguyễn Võ Hinh, Lãơng Văn Định, Võ Đại Phú, Bùi Thị Lộc (2005), Phân vùng dịch tễ sốt rét can thiệp tỉnh Thừa Thiên Huế năm 2005 Công trình nghiên cứu khoa học giai đoạn 2001-2005, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng, NXB Y học, tr 3039 22 Nguyễn Mạnh Hùng (2009), Phân vùng dịch tễ sốt rét can thiệp Việt Nam năm 2009 , Công trình nghiên cứu khoa học báo cáo Hội nghị ký sinh trïng lÇn thø 38, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ã ơng, NXB Y học, tr 15-29 23 Nguyễn Mạnh Hùng (2010), Hiệu phòng chống sốt rét Việt Nam giai đoạn 2006-2010 , Công trình nghiên cứu khoa học báo cáo Hội nghị ký sinh trùng lần thứ 38, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 9-14 24 Lê Xuân Hùng (2010), Bệnh sốt rét chiến lãợc phòng chống, NXB Y học, 307 trang 25 Nguyễn Văn Kim (1993), Dịch tễ học sốt rét kháng thuốc Việt Nam , Thông tin Phòng chống sốt rét bệnh ký sinh trïng, ViƯn Sèt rÐt Ký sinh trïng - C«n trïng Trung ãơng (3), tr 19-21 chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng (3), tr 11-18 54 Triệu Nguyên Trung, Lê Khánh Thuận, Ngun Ngäc San (2000), “ DiƠn biÕn KSTSR kh¸ng thc hiệu lực phác đồ điều trị khu vực Miền Trung-Tây nguyên (1996-2000) , Kỷ yếu công trình nghiªn cøu khoa häc 1996-2000, ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ãơng, NXB Y học, tr 256-263 55 ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng- Côn trùng Trung ãơng (2011), Cẩm nang kỹ thuật phòng chèng bÖnh sèt rÐt, NXB Y häc, 319 trang 56 ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trïng- C«n trïng Trung ãơng (2011), Nghiên cứu số số dịch tễ học phân tử bệnh sốt rét Ninh Thuận, Đề tµi cÊp ViƯn 57 ViƯn Sèt rÐt - Ký sinh trùng- Côn trùng Trung ãơng (2012), Kết phòng chống bệnh sốt rét Việt Nam giai đoạn 2006-2010, NXB Y häc, tr 3-11 58 ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trùng- Côn trùng Trung ãơng (2012), Hội nghị tổng kết công tác phòng chống sốt rét giun sán 2011 triển khai kế hoạch năm 2012 59 Phạm Nguyễn Thúy Vy, Trịnh Ngọc Hải, Nguyễn Thị Minh Châu, Hoàng Thị Mai Anh (2010), Xác định đột biến ®iĨm trªn gen Pfcrt ë Plasmodium falciparum liªn quan ®Õn tính kháng thuốc chloroquin vùng sốt rét lãu hành nặng tỉnh Bình Phãớc kỹ thuật PCR- RFLP , Công trình nghiên cứu khoa học báo cáo Hội nghị ký sinh trùng lần thứ 38, Viện Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng Trung •¬ng, NXB Y häc, tr 119-125 TiÕng Anh 60 Al-Mekhlafi A M.Q., Mahdy M A.K., Azazy A.A., Fong M.Y (2010), “ Molecular epidemiology of Plasmodium species prevalent in Yemen based on 18 s rRNA” , Parasites & Vectors (3), pp.110 61 Alan F.C., Morry M.J., Biggs B.A., Cross G A.M., Foote S.J (1988), “ Amino acid changes linked to pyrymethamine resistance in dihydrofolate reductase-thymidylate synthase gen of Plasmodium falciparum”, Proc Natl Acad Sci USA 85, pp 9109-9113 62 Alan F.C., Deborah L.B., Manoj Duraisingh, Julie Healer, Kerry E.M., Rebecca A.O., Jennifer Thompson, Tony Triglia, Mark E.W and Brendan S.C (2002), “ Functional analysis of P falciparum merozoite antigens: implications for erythrocyte invasion and vaccine development”, The Royal Society 357, pp 25– 33 63 Ander R.F and Smythe J.A (1989), “ Polymorphic antigens in Plasmodium falciparum”, The Journal of The American Society of Hematology” 74(6), pp 1865-1875 64 Arnot D (1998), “ Clone multiplicity of Plasmodium falciparum infections in individuals exposed to variable levels of disease transmission” , Trans R Soc Med Hyg 92(6), pp 580– 585 65 Atroosh W.M., Al-Mekhlafi H.M., Mahdy M A.K., Saif-Ali, R., AlMekhlafi m.K., and Surin J (2011), “ Genetic diversity of Plasmodium falciparum isolates from Pahang, Malaysia based on MSP-1 and MSP-2 genes”, Parasites & Vectors 4(1), pp 233 66 Aubouy A., Migot-Nabias F and Deloron P (2003), “ Polymorphism in two merozoite surface proteins of Plasmodium falciparum isolate from Gabon”, Malaria Journal (2), pp 1-16 67 Babiker H.A., Lines J., Hill W.G and Walliker D (1997), “ Population structure of Plasmodium falciparum in villages with different malaria endemicity in East Africa” , Am J Trop Med Hyg 56(2), pp 141-147 68 Bacon D.J., Doug Tang, Carola Salas, Norma Roncal, Carmen Lucas, Lucia Gerena, Lorena Tapia, Lianos-Cuentas A.A., Coralith Garcia, Lelv Solari, Dennis Kely, Alan A.M (2009), “ Effects of point mutations in Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase and dihydropterate synthase genes on clinical outcomes and in vitro susceptibility to sulfadoxine and pyrimethamine” , PLoS One 4(6), pp 6762 69 Basco L.K., Ringwald P (1998), “ Molecular epidemiology of malaria in Yaounde, Cameroon I Analysis of point mutations in the dihydrofolate reductase– thymidylate synthase gene of Plasmodium falciparum”, Am J Trop Med Hyg 58(3), pp 369-373 70 Basco L.K., Rachida Tahar and Anianlas Escalante (2004), “ Molecular epidemiology of malaria in Camaroon XVIII Polymorphisms of the Plasmodium falciparum merozoite surface antigen-2-gene in isolates from symptomatic patients”, Am J Trop Med Hyg 70(3), pp 238– 244 71 Biswas S (2003), “ Associations of antifolate resistance in vitro and point mutations in dihydrofolate reductase and dihydropteroate synthetase genes of Plasmodium falciparum”, Journal Postgraduate Medicine 50(1), pp 17-20 72 Borre M.B., Dziegeil M., Hogh B., Petersen E., Reineck K., Riley E., Meis J.F., Aikawa M., Nakamura K., Harada M., Wind A., Jakobsen P.H., Cowland J., Jepsen S., Axelsen N.H., and Vuust J (1991), “ Primary conserved structure and localization of immunogenic Plasmodium falciparum glutamate rich protein (GLURP) expressed in both the preerythrocytic and erythrocytic stages of the vertebrate life cycle”, Mol Biochem Parasitol 49, pp 119-132 73 Brooks D.R., Wang P., Read M., Watkins W.M., Sims P.F., Hyde J.E (1994), “ Sequence variation of the hydroxymethyldihydropterin pyrophosphokinase: dihydropteroate synthase gene in lines of the human parasites, Plasmodium falciparum, with differing resistance to sulfadoxine” , Eur J Biochem 224, pp 397-405 74 Brown A.E., Kian K.C (1992), “ Demonstration by the Polymerase Chain Reaction of mixed P falciparum and P vivax infection undetected by conventional microscopy”, Trans R Soc Trop Med Hyg 86, pp 609 - 612 75 Brown G.M (1962), “ The biosynthesis of folic acid Inhibition by sulphonamindes”, J Biochem 273, pp 536-540 76 Butler A.R., Khan S., Ferguson E (2010), “ A brief history of malaria chemotherapy” , J R Coll Physicians Edinb 40, pp 172-177 77 Bzik D.J., Li W.B., Horri T., Inselburg J (1987), “ Molecular cloning and sequence analysis of the Plasmodium falciparum dihy-drofolate reductase-thymidylate synthase gene”, Proc Natl Acad Sci USA 84, pp 8360-8364 78 Clendeman T.E., Long G.W., and Bair J.K (1995), “ QBC and Giemsa stained thick blood films: diagnostic performance of laboratory technologists”, Trans R Soc Trop Med Hyg 86, pp 378-382 79 Contamin H., Thierry Fandeur, Christophe Rogier, Serge Bonnefoy, Konate L., Jean-Fracois Trape, and Odile Mercereau-Puijalon (1996), “ Different genetic characteristics of Plasmodium falciparum isolates collected during successive clinical malaria episodes in senegalese children” , Am J Trop Med Hyg 5496, pp 632-643 80 Conway D.J., Greenwood B.M., and McBride J.S (1991), “ The epidemiology of multiple-clone Plasmodium falciparum infections in Gambian patients”, Parasitology 103, pp 1-6 81 Conway D.J (2007), “ Molecular epidemiology of malaria”, America of Society Microbiology 20(1), pp 188-204 82 Cristiana Ferreira Alves de Brito, Marcelo Urbano Ferreira (2011), Molecular markers and genetic diversity of Plasmodium vivax”, Mem Inst Oswaldo Cruz 106 (1), pp 12-26 83 Cui L., Escalante A.A., Imwong M., Snounou G ( 2003e), “ The genetic diversity of Plasmodium vivax populations”, Trends of Parasitology 19(5), pp 220-226 84 David C., Warhurst D.S, Path F.R.C (2001), “ A molecular marker for chloroquine resistant P falciparum malaria” N Engl J Med 4, pp 299301 85 Dieckmann A., Jung A (1986), “ The mechanism of pyrimethamin resistance in P falciparum”, Parasitology 93(2), pp 275-278 86 Dorsey G., Moses R., Kamya, Ajay Singh (2001), “ Polymorphism in the P falciparum Pfcrt and Pfmdr1 genes and clinical response to the chloroquine in Kampala Uganda”, J Infect Dis 183, pp 1417-1420 87 Farnert A., Ares A.P., Babiker H.A., Keck H.P., Benito B.A., Bruce M.C., Conway D.J., Day K.P, Henning L., Mercereau-Puijalon O., Ranford- Cartwright L.C., Rubio J.M., Snounou G., Walliker D., Zwetyenga J and Rosario V.E (2001), “ Genotyping of Plasmodium falciparum infection by PCR: a comparative multicentre study”, Trans R Soc Trop Med Hyg 95, pp 225-232 88 Farooq U and Mahajan R.C (2004), “ Drug resistance in malaria”, J Vector Borne Dis 41, pp 45-53 89 Fenton B., Clark J.T., Anjam Khan C.M., Robinson J.V., Walliker D., Rob Ridley, Scaife J.G., and McBride J.S (1991), “ Structural and Antigenic Polymorphism of the 35- to 48-Kilodalton Merozoite Surface Antigen (MSA-2) of the Malaria Parasite Plasmodium falciparum”, Molecular and Cellular Biology 11(2), pp 963-971 90 Ferone R., Burchall J.J., and Hitching G.H (1969), “ P berghei dihydrofolate reductase, Isolation properties and inhibition by antifolate”, Molecular Pharmacology 5, pp 49-59 91 Ferriera M.U., Kaneko O., Kimura M., Liu Q., Kawamoto F., Tanabe K (1998), “ Allelic diversity at the merozoite surface protein-1 (MSP1) locus in natural Plasmodium falciparum populations: an brief overview”, Mem Inst Oswaldo Cruz 93(5), pp 631-638 92 Ferreira M.U., Karunaweera N.D., da Silva-Nunes M., da Silva N.S., Wirth D.F., Hartl D.L (2007), “ Population structure and transmission dynamics of Plasmodium vivax in rural Amazonia”, J Infect Dis 195, pp 1218-1226 93 Fidock D.A., Nomura T., Talley A.K (2000), “ Mutations in the P falciparum digestive vacuole transmembrane protein PfCRT and evidence of their role in chloroquine resistance” , Molecular Cell 6(4), pp 861-871 94 Frosch A.P., Meera Venkatesan, and Miriam K Laufer (2011), “ Patterns of chloroquine use and resistance in sub-Saharan Africa: a systematic review of household survey and molecular data”, Malaria Journal (10), pp 131 95 Greenwood B (2002), “ The molecular epidemiology of malaria”, Tropical Medicine and International Heath 7(12), pp 1012-1021 96 Gertrude N Kiwanuka (2009), “ Genetic diversity in Plasmodium falciparum merozoite surface protein and coding genes and its implications in malaria epidemiology: a review of published studies from 1997– 2007”, J Vector Borne Dis 46, pp 1-12 97 Gesase1 S., Gosling R.D., Hashim R., Ord R., Naidoo I., Madebe1 R., Mosha J.F., Joho A., Mandia V., Mrema H., Mapunda E., Savael Z., Lemnge M., Mosha F.W., Greenwood B., Roper C., Chandramohan D (1989), “ High resistance of Plasmodium falciparum to Sulphadoxine/Pyrimethamine in Northern Tanzania and the Emergence of dhps resistance mutation at codon 581”, PLoS ONE 4(2), pp 4569 98 Ghanchi N.K., Mårtensson A., Ursing J., Jafri S., Bereczky S., Hussain R., and Beg A.B (2010), “ Genetic diversity among Plasmodium falciparum field isolates in Pakistan measured with PCR genotyping of the merozoite surface protein and 2”, Malaria Journal 9, pp 99 Goman M., Mons B and Scaife J (1991), “ The complete sequence of a plasmodium malariae ssr-RNA gene and its comparison to the other Plasmodial ssr-RNA genes”, Mol Biochem Parasitol 45(2), pp 281288 100 Hamza A.B, Pringle S.J., Abdel A., Muhsin M., Mackinnon Hunt P., and Walliker D (2001), “ High level chloroquine resistance in the Sudanese isolates of Plasmodium falciparum is associated with mutations in the chloroquine resistance transporter gene Pfcrt and the multidrug resistance gen Pfmdr1”, J Infect Dis 183, pp 1535-1538 101 Hyde J.E (2007), “ Drug-resistant malaria - an insight”, Federation of European Biochemical Societies Journal 274, pp 4688-4698 102 Imwong M., Sasithon Pukrittayakamee, Anne Charlotte Gruner, Laurent Renia, Frank Letourneur, Sornchai Looareesuwan, Nicholas J White and Snounou G (2005), “ Practical PCR genotyping protocols for Plasmodium vivax using Pvcs and Pvmsp1”, Malaria Journal 4, pp 2024 103 Irawati N (2011), “ Genetic polymorphism of merozoite surface protein1 (MSP-1) block allelic types in Plasmodium falciparum field isolates from mountain and coastal area in West Sumatera, Indonesia”, Med J Indones 20, pp 11-14 104 Joshi H., Prajapati S.K., Verma A., Kang’ a S., Carlton J.M (2006), “ Genetic structure of Plasmodium falciparum field isolates in eastern and north-eastern India”, Malaria Journal, 6(1), pp 60 105 Kaneko O., Kimura M., Kawamoto F., Ferreira M.U., Tanabe K (1997), “ Plasmodium falciparum: allelic variation in the merozoite surface protein gene in wild isolates from southern Vietnam”, Exp Parasitolgy 86(1), pp 45-57 106 Kain K.C., Lanar D.E (1991), “ Determination of genetic variation within Plasmodium falciparum by using enzymatically amplified DNA from filter paper disks impregnated with whole blood” J Clin Microbiol 29, pp 1171-1174 107 Kang J.M., Moon S.U., Kim J.Y, Cho S.H., Lin K., Sohn W.M., Kim T.S., and Na B.K (2010), “ Genetic polymorphism of merozoite surface protein-1 and merozoite surface protein-2 in Plasmodium falciparum field isolates from Myanmar”, Malaria Journal 9(1), pp 131 108 Kawamoto F., Miyake H., Kaneko O., Kimura M., Dung T N., The Dung N., Liu Q., Zhou M., Dao L D., Kawai S., Isomura S., and Wataya Y (1996), “ Sequence variation in the 18s rRNA gene, a target for PCR based malaria diagnosis, in P ovale from Southern ViÖt Nam”, J Clin Microbiol 34(9), pp 2287-2289 109 Khaminsou N., Kritpetcharat O., Daduang J., Charerntanyarak L., and Kritpetcharat P (2011),” Genetic analysis of the merozoite surface protein-1 block allelic types in Plasmodium falciparum clinical isolates from Lao PDR”, Malaria Journal 10, pp 371 110 Kim J.R., Imwong M., Amitabha Nandy, Kesinee Chotivanich, Apichart Nontprasert, Naowarat Tonomsing, Ardhendu Maji, Manjulika Addy, Day Nick P.J., Nicholas J White and Sasithon Pukrittayakamee (2006), “ Genetic diversity of Plasmodium vivax in Kolkata, India” , Malaria Journal 5(1), pp 71 111 Konate L., Zwetyenga J., Rogier C (1999), “ The epidemiology of multiple Plasmodium falciparum infections: Variation of Plasmodium falciparum MSP1 block2 and MSP2 allele prevalence and of infection complexity in two neighbouring Senegalese villages with different transmission conditions”, Trans Roy Soc Trop Med Hyg 93, pp 2128 112 Kublin J.G., Fraction K., Dzijalamala, Deborah D., Kamwendo, Malkin E.M., Joseph F., Lisa M., Martino, Mukadam Rabia A.G., Rogerson S.J., Lescano A.G., Molyneux M.E., Winstanley P.A., Chimpeni P., Taylor T.E., and Plowe C.V (2002), “ Molecular markers for failure of sulfadoxine– pyrimethamine and chlorproguanil– dapsone treatment of Plasmodium falciparum malaria” J Infect Dis 185, pp 380-388 113 Lopes D., Rungsihirunrat K., Nogueira F., Seugorn A., Pedro gil J., E Rosario V., and Cravo P (2002), “ Molecular characterisation of drugresistant Plasmodium falciparum from Thailand”, Malaria Journal 1, pp 12 114 Masimirembwa, V.M., Phuong Dung N., Phuc B.Q., Duc Dao L., Sy N.V., Skold O., and Swedberg G (1999), “ Molecular epidemiology of Plasmodium falciparum antifolate resistance in Vietnam: genotyping for resistance variants of dihydropteroate synthase and dihydrofolate reductase” , Int J Antimicrob Agents 12, pp 203-211 115 Mayxay M., Nair S., Sudimack D., Imwong M., Naowarat Tanomsing, Tiengkham Pongvongsa, Samlane Phompida, Rattanaxay Phetsouvanh, White N.J., Tim Anderson J.C., and Newton P.N (2007), “ Combined Molecular and Clinical Assessment of Plasmodium falciparum Antimalarial Drug Resistance in the Lao People’ s Democratic Republic (Laos)” , Am J Trop Med Hyg 77 (1), pp 36-43 116 McCutchan T.F., Cruz V.F., Lal A., Gunderson J.H., Elwood H.J and Sogin M.L (1988), “ Primary sequence of two small ribosomal RNA genes from Plasmodium falciparum”, Mol Biochem Parasitol 28, pp 63-68 117 Mehdi A., Terhovanessian A., Jahani M.R., Nahrevanian H., Amirkhani, A., Piazak N., Esmaeili A R.R., Mahin F and Zare M (2003), “ Molecular epidemiology of malaria in endemic areas of Iran” , Southeast Asian J Trop Med Puclic Heath 34(2), pp 15-19 118 Mehlotra R K., Lorry K., Kastens W., Miller S.M., Alpers M.P., Bockarie M., Kazura J.W., and Zimmerman P.A (2000), “ Random distribution of mixed spicies malaria infection in Papua New Guinea”, Am J Trop Med Hyg 62(2), pp 225-231 119 Mendis K., Sina B.J., Marchesini P., Carter R (2001) “ The neglected burden of Plasmodium vivax malaria”, Am J Trop Med Hyg 64, pp 97-106 120 Ntoumi F., Contamin H., Rogier C., Bonnefoy S., Trape J.F., MercereauPuijalon O (1995), “ Age-dependent carriage of multiple Plasmodium falciparum merozoite surface antigen-2 alleles in asymptomatic malaria infections”, Am J Trop Med Hyg 52(1), pp 81-88 121 Ohrt C., Mirabelli-Primdahl L., Karnasuta C & Chantakulkij & Kain K.C (1997), “ Distinguishing Plasmodium falciparum treatment failures from reinfections by restriction fragment length polymorphism and polymerase chain reaction genotyping”, Am J Trop Med Hyg 57(4), pp 430-437 122 Paganotti G.M., Babiker H.A., Modiano D., Sirima B.S., Verra F., Konate A., Ouedraogo A.L., Diarra A., Mackinnon M.J., Coluzzi M., and Walliker D (2004), “ Genetic complexity of Plasmodium falciparum in two ethnic groups of Burkina Faso with marked differences in susceptibility to malaria” , Am J Trop Med Hyg 71(2), pp 173-178 123 Petersen I., Eastman R., Lanzer M (2011), “ Drug-resistant malaria: Molecular mechanisms and implications for public health”, FEBS Letters 585, pp 1551-1562 124 Peterson D.S., Walliker D., Wellems T.E (1988), “ Evidence that apoint mutation in dihydrofolate reductase-thymidylate synthase confers resistance to pyrimethamine in falciparum malaria”, Proc Natl Acad Sci USA 85, pp 9114-9118 125 Plowe C.V., Djimde A., Bouare M., Doumbo O., Wellems T.E 1995a, (Pyrimethamine and proguanil resistance– conferring mutations in Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase: polymerase chain reaction methods for surveillance in Africa” , Am J Trop Med Hyg 52, pp 565-568 126 Plowe C.V., Cortese J.F., Djimde A., Nwanyanwu O.C., Watkins W.M., Winstanley P.A., Estrada-Franco J.G., Mollinedo R.E., Avila J.C., Cespedes J.L., Carter D., Doumbo O.K (1997), “ Mutations in Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase and dihydropteroate synthase and epidemiologic patterns of pyrimethamine-sulfadoxine use and resistance” , J Infect Dis 176(6), pp 1590-1596 127 Powell R.D., Brewer G.J., Alving A (1963), “ Chloroquine resistance of Plasmodium falciparum from Vietnam” , WHO-Mal 402, pp 379-392 128 Price R.N., Douglas N.M., Anstey N.M (2009), “ New developments in Plasmodium vivax malaria: severe disease and the rise of chloroquine resistance” , Curr Opin Infect Dis 22, pp 430-435 129 Qari S.H., Collins W.E., Lobel H.O., Taylor F., Lal A.A (1994), “ A study of polymorphism in the circumsporozoite protein of human malaria parasites”, Am J Trop Med Hyg 50(1), pp 45-51 130 Raman J., Little F., Roper C., Kleinschmidt I., Cassam Y., Maharaj R., and Barnes K.I (2010), “ Five years of large-scale dhfr and dhps mutation surveillance following the phased mmplementation of Artesunate plus Sulfadoxine-Pyrimethamine in Maputo province, Southern Mozambique” , Am J Trop Med Hyg 82(5), pp 788-794 131 Rie Isozumi, Haruki Uemura, Le Duc Dao, Truong Van Hanh, Nguyen Duc Giang, Ha Viet Vien, Bui Quang Phuc, Nguyen Van Tuan, and Shusuke Nakazawa (2010), “ Longitudinal Survey of Plasmodium falciparum Infection in Vietnam: Characteristics of Antimalarial Resistance and Their Associated Factors”, J Clin Microbiol 48(1), pp 70-77 132 Roper C., Elhassan I.M., Hvid L (1996), “ Detection of very low level Plasmodium falciparum infections using the nested polymerase chain reaction and a reassessment of the epidemiology of unstable malaria in Sudan”, Am J Trop Med Hyg 54, pp 325-331 133 Snewin V.A., England S.M., Sims P.F., Hyde J.E (1989), “ Characterisation of the dihydrofolate reductase-thymidylate synthetase gene from human malaria parasites highly resistant to pyrimethamine”, Gene 76(1), pp 41-52 134 Soulama I., Issa NÐbiÐ, Alphonse Ouédraogo, Adama Gansane, Amidou Diarra, Alfred B Tiono, Edith C Bougouma, Amadou T KonatÐ, Gustave B KabrÐ, Walter RJ Taylor, and Sodiomon B Sirima (2009), “ Plasmodium falciparum genotypes diversity in symptomatic malaria of children living in an urban and a rural setting in Burkina Faso” , Malaria Journal 8, pp 135 135 Snounou G., Bourne T., Jarra W., Viriyakosol S., Wood J.C., and Brown K.N (1992), “ Assessment of parasite population dynamics in mixed infections of rodent plasmodia”, Parasitology 105(3), pp 363-374 136 Snounou G., Viryakosol S., Jarra W., Thai Thong S., and Brown K.N (1993b), “ Identification of the four human malaria species in field samples by the polymerase chain reaction of the high prevalence of mixed infection” , Mol Biochem Parasitol 58, pp 283-292 137 Snounou G., Viryakosol S., Zhu X.P., Jarra W., Pinheiro L., Rosario V.E., Thai Thong S., and Brown K.N (1993c), “ High sensitivity of detection of human malaria parasites by the use of polymerase chain reaction” , Mol Biochem Parasitol 61, pp 315-320 138 Snounou G., Beck H.P (1998), “ The use of PCR genotyping in the assessment of recrudescence or reinfection after antimalarial treatment”, Parasitology Today 14, pp 462-467 139 Snounou G., Zhu X., Siripoon N., Jarra W., Thai Thong S., Brown N.K., and Viriyakosol S (1999), “ Biased distribution of MSP1 and MSP2 allelic variants in Plasmodium falciparum population in Thailand”, Trans R Soc Trop Med Hyg 93, pp 369-374 140 Tirasophon, Witoon, ponglikitmongkol, Mathurose, Wilairat, prapon, Boosaeng, Vichai, panyim, Sakol (1991), “ A novel detection of a single Plasmodium falciparum in infected blood”, Biochemical and Biophysical research communications 175, pp 179-184 141 Trigalia T and Cowman A.F (1994), “ Primary stucture and expression of the dihydropteroate synthetase gene of Plasmodium falciparum”, Proc Natl Acad Sci USA 91, pp 7149-7153 142 Viriyakosol S., Siripoon N., Petcharapirat C., Jarra W., Thai Thong S., Brown K.N., and Snounou G (1995), “ Genotyping of Plasmodium falciparum isolates by the polymerase chain raction and potential uses in epidemiological studies”, Bulletin of the World Heath Organization 73(1), pp 85-95 143 Wallace P (1987), “ In: Chemotherapy and drug resitance in malaria”, Academic Press, London, UK, pp 829-844 144 Walliker, D., Carter, R & Sanderson, A (1975), “ Genetic studies on Plasmodium chabaudi: recombination between enzyme markers”, Parasitology 70, pp 19-24 145 Wang P., Darren R., Brooks, Paul F.G., Sims, Hyde J.E (1995), “ A mutation-specific PCR system to detect sequence variation in the DHPS gene of P falciparum”, Mol Biochem Parasitol 71, pp 115-125 146 Wang P., Read M., Sims P.F., Hyde J.E (1997), “ Sulfadoxine resistance in the human malaria parasite Plasmodium falciparum is determined by mutations in dihydropteroate synthetase and an additional factor associated with folate utilization” , Mol Microbiol 23, pp 979-986 147 Wernsdorfer W.H., and McGregor I (1988), “ The apparent transfer of pyrimethamine resistance from the B1 strain of P gallinaceum in the chicken”, In Malaria principles and Practice of Malariology 2, pp 1573 148 WHO (2001), “ Antimalarial drug combination therapy Report of a WHO technical consultation”, Geneva, World Health Organization 149 WHO (2006), “ Guidelines for the treatment of malaria”, Geneva, World Health Organization 150 WHO (2009a), “ Methods for surveillance of antimalarial drug efficacy”, Geneva, World Health Organization 151 WHO (2010), “ Global report on antimalarial drug efficacy and drug resistance: 2000-2010”, Geneva, World Health Organization 152 WHO (2011), “ World malaria report” , Geneva, World Health Organization 153 Wilkerson R (2009), “ Mosquito Classification”, Walter Reed Biosystematics Units online catalog, 91 pages 154 Zakeri S., Mehrizi A.A., Mamaghani S., Noorizadeh S., Snounou G., Djadid N.D (2006), “ Population structure analysis of Plasmodium vivax in areas of Iran with different malaria endemicity”, Am J Trop Med Hyg 74 pp 394-400 ... hình sốt rét, mức độ đa hình di truyền quần thể KSTSR cung cấp số liệu thực trạng KSTSR kháng thuốc số tỉnh thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam tiến hành đề tài: Nghiên cứu tính đa hình di. .. Nghiên cứu tính đa hình di truyền ký sinh trùng sốt rét tính kháng thc sèt rÐt cđa Plasmodium falciparum t¹i mét sè tØnh biên giới thuộc khu vực Bắc Trãờng Sơn, Việt Nam Mục tiêu đề tài: Xác... (2012), Nghiên cứu thành phần cấu loài ký sinh trùng sốt rét tỉnh Quảng Bình Quảng Trị kỹ thuật PCR , Tạp chí Phòng chống bệnh sốt rét bệnh ký sinh trùng, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng