[Kl-Hup] Nghiên Cứu Bào Chế Và Đánh Giá Organogel Chứa Eutecti Progesteron Dùng Qua Da.pdf

BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU BÀO CHÉ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI 2022 BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI L[.]

BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU BÀO CHÉ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI - 2022 BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG Mã sinh viên: 1701153 NGHIÊN CỨU BÃO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ Người hưởng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thạch Tùng Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết on sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Thạch Tùng, người thầy hướng dẫn em từ ngày đầu chập chững bước vào đường nghiên cứu Em xin cảm ơn thầy ln ln trao đổi động viên em suốt trình thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo, anh chị kĩ thuật viên mơn Bào chế hết lịng quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt để em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu, thầy cô giáo Trường Đại học Dược Hà Nội tâm huyết truyền đạt cho em nhừng kiến thức quý báu trình học tập trường Cuối em xin cảm ơn anh chị em sinh viên K70, K71, K73 nhóm nghiên cứu Em đặc biệt cảm ơn ThS Nguyễn Thị Hòa, DS Nguyễn Như Nam bạn Nguyễn Anh Minh, Đỗ Thị Lan, Nguyễn Hữu Mạnh, Nguyễn Thanh Tùng, em Nguyễn Quốc Hoài, người đồng hành em suốt quãng thời gian làm nghiên cứu khoa học môn Bào chế Em cảm thấy may mắn có gia đình bạn bè bên cạnh giúp đỡ, hỗ trợ, động viên em trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, ngày 25 tháng 06 năm 2022 Sinh viên khóa 72 Lê Thu Hằng MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHŨ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỊ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN 1.1 Tổng quan progesteron 1.1.1 Cơng thức hóa học .2 1.1.2 Tính chất lý hóa 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Chỉ định .2 1.1.5 Một số chế phẩm thị trường 1.1.6 Một số nghiên cứu progesteron dùng qua da 1.2 Vài nét Eutecti 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Đặc điếm hệ eutecti 1.2.2.1 Đặc diêm chung hệ eutecti 1.2.2.2 Đặc điểm điểm eutecti 1.2.3 Cơ chế tăng tính thấm qua màng sinh học (da) 1.2.3 ỉ Theo phương trình Kasting .5 1.2.3.2 Một số chế khác 1.3 Vài nét organogel 1.3.1 Phân loại 1.3.2 Cơ chế hình thành organogel 1.3.2.1 Organogel tạo thành từ tả dược phân tử khối lượng thấp 1.3.2.2 Organogel tạo thành từpolyme .10 1.3.3 Đặc điềm organogel tạo từ lecithin 10 1.3.4 Một sổ nghiên cứu hệ organogel dùng qua da 10 1.4 Tổng quan sinh khả dụng .11 1.4.1 Khái niệm sinh khả dụng 11 1.4.2 Đánh giá sinh khả dụng in vivo 11 1.4.2.1 Các thông số dược động học 12 1.4.2.2 Các phương pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo 12 ỉ.4.2.3 Một số động vật sử dụng nghiên cứu sinh khả dụng dạng thuốc dùng qua da 13 CHƯƠNG 2: ĐÔI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứư 14 2.1 Nguyên liệu thiết bị 14 2.1.1 Nguyên vật liệu 14 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 14 2.1.3 Động vật thí nghiệm 15 2.2 Nội dung nghiên cún 15 2.3 Phương pháp nghiên cún 15 2.3.1 Phương pháp bào chế 15 2.3.1.1 Bào chế hệ eutecti progesteron menthol 15 2.3.1.2 Bào chế organogel chứa eutecti progesteron menthol 16 2.3.2 Phương pháp thiết kế thí nghiệm 16 2.3.2.1 Khảo sát công thức organogel chứa eutecti progesteron 16 2.3.2.2 Thiết kế thí nghiệm 17 2.3.3 Phương pháp đánh giá 17 2.3.3.1 Phương pháp định lượng progesteron sắc kí lỏng hiệu cao 17 2.3.3.2 Phươngphảp đánh giả kích thước tiếu phân phân bố kích thước tiểu phân organogel trắng 18 2.3.3.2 Phương pháp đảnh giả khả giải phóng PGT qua da chuột 18 2.3.3.3 Phương pháp đảnh giả sinh khả dụng in vivo động vật thí nghiêm 19 2.3.3 Phương pháp tính tốn xử lí kết 22 CHƯƠNG 3: KẾT QƯẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Đánh giá phương pháp định lưọng progesteron 23 3.1.1 Đánh giá phương pháp định lượng progesteron sắc kí lỏng hiệu cao HPLC 23 3.1.1.1 Tính tuyến tính 23 3.1.1.2 Độ lặp lại 23 3.1.2 Đánh giá phương pháp định lượng progesteron LC - MS/MS 24 3.1.2.1 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 24 3.1.2.2 Độ lặp lại độ thu hồi 25 3.2 Nghiên cứu bào chế organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da 26 3.2.1 Nghiên cứu bào chế organogel trắng 26 3.2.2 Sàng lọc tỉ lệ thành phần organogel chứa eutecti progesteron 29 3.2.3 Thiết kế thí nghiệm 30 3.2.4 Kết đánh giá biến đầu xử lí kết bảng thí nghiệm 31 3.2.5 Phân tích kết 32 3.2.5.1 Đảnh giả ảnh hưởng biến đầu vào 32 3.2.5.2 Xu hướng ảnh hưởng biến đầu vào tới biến đầu 34 3.3 Đánh giá sinh khả dụng thông số dược động học công thức organogel chứa eutecti tối ưu 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Từ/cụm từ viết tắt PGT Progesteron Diện tích đường cong biểu diễn nồng độ AUCo-00 Cmax thời gian từ thời điểm đến co Nồng độ PGT cực đại huyết tương thời gian để PGT đạt nồng độ cực đại huyết Tmax LMWO Tá dược tạo organogel có khối lượng phân tử thấp LO Organogel tạo từ lecithin PLO Organogel tạo từ pluronic lecithin TCNSX Tiêu chuẩn nhà sản xuất TCCS Tiêu chuẩn sở 10 HPLC Sắc kí long hiệu cao 11 LC-MS/MS Sắc kí lỏng khối phổ lần 12 Flux Thơng lượng khuếch tán 13 Tlag Thời gian trễ 14 USP Dược điển Mỹ tương DANH MỤC CÁC BANG Bảng 1.1 Một số chế phẩm thị trường chứa PGT Bảng 1.2 Các nghiên cứu progesteron .3 Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất nghiên cứu 14 Bảng 2.2 Thiết bị sử dụng trình nghiên cứu 14 Bảng 2.3 Thành phần công thức eutecti - organogel 16 Bảng 2.4 Chương trình dung mơi phương pháp sắc kí lỏng khối phổ 21 Bảng 3.1 Mối tương quan giừa diện tích pic nồng độ PGT 23 Bảng 3.2 Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng PGT sắc kí lỏng hiệu cao HPLC 24 Bảng 3.3 Khảo sát độ lặp lại độ thu hồi phương pháp LC-MS/MS 25 Bảng 3.4 Kích thước tiểu phân số đa phân tán mẫu organogel trắng 26 Bảng 3.5 Khảo sát giới hạn cùa organogel chứa eutecti 29 Bảng 3.6 Khảo sát giới hạn organogel chứa eutecti .30 Bảng 3.7 Các biến đầu vào 30 Bảng 3.8 Kết biến đầu 11 công thức 31 Bảng 3.9 Các giá trị R2 Q2 mơ hình thí nghiệm 32 Bảng 3.10 Hệ số hồi quy ảnh hưởng cùa biến đầu vào đến biến đầu 32 Bảng 3.11 Thông số dược động học cùa PGT mơ hình thỏ 36 DANH MỤC CÁC HÌNH VẺ, ĐỊ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo cùa progesteron Hình 1.2 Phân loại gel Hình 1.3 Co chế hình thành organogel cốt rắn Hình 1.4 Cơ chế hình thành organogel cốt lỏng Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic sắc kí progesteron phương pháp HPLC 23 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ dung dịch chuẩn với tỷ lệ 25 diện tích pic chất chuẩn diện tích pic nội chuẩn phương pháp LC-MS/MS 25 Hình 3.3 Kích thước tiểu phân số đa phân tán hệ organogel trắng 27 Hình 3.4 Kích thước tiểu phân hệ organogel thay đổi thay đổi tỉ lệ pha nước/pha dầu 27 Hình 3.5 Hình ảnh hệ organogel bào chế với tỉ lệ pha nước/pha dầu khác 28 Hình 3.6 Kết thử giải phóng dược chất từ công thức qua màng da chuột 31 Hình 3.7 Mức độ phân tán dừ liệu thử giải phóng 33 Hình 3.8 Đồ thị thể mối liên quan hệ số hồi quy biến đầu 34 Hình 3.9 Ảnh hưởng biến đầu vào lên thông lượng khuếch tán thời gian trễ 35 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc nồng độ PGT huyết tương thở theo thời gian chế phấm thị trường hệ eutecti - organogel 37 ĐẶT VẤN ĐỀ Progesteron hormon nội sinh thuộc nhóm steroid có co người, chứng minh đạt hiệu tốt lâm sàng điều trị bệnh lý vô sinh thiếu hụt hormon, suy buồng trứng, u lành tính tuyến vú Trên thị trường nay, có nhiều dạng bào chế với đường dùng khác chứa progesteron đường uống, đường tiêm, kem đặt âm đạo Khi sử dụng đường uống, sinh khả dụng dược chất thấp (khoảng 2,4%) chuyển hóa mạnh qua gan, độ tan khả thấm [6] Dạng bào chế qua da chứa progesteron xem dạng bào chế phù họp tránh chuyển hóa bước qua gan thuận tiện sử dụng Tuy nhiên, bôi thuốc lên da, progesteron bị chuyển hóa nhanh enzyme 5a-reductase thành 5a-dihydro progesteron lượng nhỏ thuốc dạng cịn hoạt tính vào tuần hoàn [40] Đồng thời, progesteron dược chất có phân tử lượng lớn có khả thấm [43] Do đó, phát triến cơng thức dùng qua da progesteron cịn có nhiều thách thức Trong nghiên cứu trước, Dược sĩ Nguyễn Thị Ngân tiến hành bào chế đánh giá hệ eutecti - hydrogel dược chất mơ hình progesteron Kết cho thấy hệ eutecti chứa progesteron giúp tăng khả thấm qua da thí nghiệm in vitro, nhiên kết đánh giá sinh khả dụng in vivo động vật thí nghiệm cịn thấp Hệ sử dụng để mang eutecti gel Carbopol 1% thân nước, tưong thích với eutecti khơng cải thiện khả thấm qua da Trong đó, hệ organogel cải thiện vấn đề mà hệ hydrogel gặp phải nhờ ưu điểm tương hợp sinh học với da, thành phần có pha dầu pha nước nên tương thích với eutecti cải thiện tính thấm dược chất qua da [46] Vì vậy, nhóm nghiên cứu tiến hành lựa chọn organogel tạo từ lecithin làm hệ mang eu tecti Trên sở đó, đề tài “Nghiên cứu bào chế đánh giá organogel chứa eutectỉ progesteron dùng qua da” thực với mục tiêu: Nghiên cứu bào chế organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da Sơ đánh giá sinh khả dụng organogel chứa eutecti progesteron bào chế so sánh với chế phẩm đối chiếu dùng đường uống thị trường 3.2.5.2 Xu hướng ảnh hưởng biến đầu vào tới biến đầu Coefficients (scaled and centered) - organogel (MLR) Flux Tlag ĩ- X (XỊ X X- X * ĩ- c\l (\J * (\J ĩ- X X * XXX Flux (N=ll; DF=5; R2=0.90), Tlag 01=11; DF=5; R2=0.81), Confidence^ 95 Hình 3.8 Đồ thị thể mối liên quan hệ số hồi quy biến đầu > Như nêu phần trên, biến tỉ lệ PGT ảnh hưởng có ý nghĩa đến thông lượng khuếch tán thời gian trễ Từ hình 3.8, nhận thấy tăng tỉ lệ PGT, thông lượng khuếch tán tăng thời gian trễ giảm Thông lượng khuếch tán tăng tăng tỉ lệ PGT, điều giải thích dựa theo định luật Fick Phương trình định luật Fick mơ tả trình khuếch tán ổn định qua màng sau: KD _ J = h (c° ~ củ Trong J thông lượng khuếch tán đơn vị diện tích, D hệ số khuếch tán thuốc qua lóp da, K hệ số phân bố, h chiều dày lớp màng, Co nồng độ thuốc ban đầu đặt lên bề mặt da, Ci nồng độ thuốc bên da Do đó, tăng tỉ lệ dược chất công thức làm tăng chênh lệch nồng độ thuốc hai mặt màng khuếch tán Từ làm tăng thơng lượng khuếch tán dược chất Trong nghiên cứu bào chế thuốc mềm (kem, gel) chứa ibuprofen dùng qua da, Bolla cộng [15] nhận thấy với dạng bào chế, lượng dược chất thấm sau 24 cơng thức có hàm lượng ibuprofen 5% cao gấp lần công thức có hàm lượng tương ứng 3% Tác giả giải thích tăng cường thẩm thấu ibuprofen cơng thức có nồng độ dược chất cao giúp trì gradient nồng độ khoảng thời gian dài, từ làm tăng lượng dược chất khuếch tán qua màng 34 Khi tỉ lệ PGT tăng thời gian trễ giảm Điều giải thích lượng dược chất tăng làm tăng tốc độ thấm dược chất qua màng, kéo theo thời gian trễ giảm xuống tưong ứng > Đối với biến đầu vào X2 - tỉ lệ pha nước hệ nền, khơng có ảnh hưởng có ý nghĩa thống kê đến biến đầu Khi tăng tỉ lệ pha nước hệ nền, thông lượng khuếch tán có xu hướng giảm Có giải thích cho xu hướng sau, tỉ lệ pha nước hệ tăng đồng nghĩa với tỉ lệ pha dầu hệ giảm, tức tỉ lệ tá dược B tăng tỉ lệ lecithin tá dược A giảm Hệ quan sát chất đặc hơn, tỉ lệ thành phần có tác dụng tăng thấm giảm Ngoài ra, tăng tỉ lệ pha nước, hệ organogel tăng tính phân cực, giảm tương họp với lóp lipid kép da, làm giảm khả khuếch tán dược chất vào tố chức da Một số nghiên cứu đặc tính lưu biến cơng thức bào chế có mối liên quan đến khả giải phóng dược chất Tác giả Wang cộng [48] nghiên cứu hệ gel - vi nhũ tương chứa eutecti paeonol menthol qua da nhận thấy cơng thức có độ nhớt thấp cho khả thấm tốt Độ nhớt thấp tương ứng với tính lun động cao dẫn tới tăng khả giải phóng dược chất Trong nghiên cứu El-Kamel [21] ảnh hưởng Pluronic F127 (PF127) đến khả giải phóng in vitro sinh khả dụng in vivo, tăng nồng độ PF127 độ nhớt tăng lên, cơng thức có độ nhớt thấp cho sinh khả dụng in vivo cao Response Contour Plot - organogel (MLR) Flux [mcg/cm2/hrs] 23456789 Hàm lượng PGT [%] Tlag [hrs] 10 23456789 Hàm lượng PGT [%] Hình 3.9 Anh hưởng biến đầu vào lên thông lượng khuếch tán thời gian trễ 35 1C Ờ mức tỉ lệ PGT lớn hon 5% tỉ lệ pha nước hệ 77%, thông lượng khuếch tán dược chất qua màng da chuột cao Ở mức tỉ lệ PGT lớn hon 9%, thời gian trễ thấp nhất, tỉ lệ PGT nhỏ hon 2% thời gian trễ cao Trong tỉ lệ pha nước khơng có ảnh hưởng đến thời gian trễ, giống với kết trình bày > Dựa mơ hình đà lựa chọn, tiến hành tối ưu chức dự đoán phần mềm MODDE 12.0, cơng thức tối ưu có tỉ lệ PGT 7,37907% tỉ lệ pha nước hệ 72,8745% Công thức tối ưu lựa chọn để đánh giá sinh khả dụng mơ hình thỏ Kết trình bày phần 3.3 3.3 Đánh giá sinh khả dụng thông số dược động học công thức organogel chứa eutecti tối ưu Tiến hành đánh giá sinh khả dụng đường bôi qua da lưng công thức tối ưu sinh khả dụng đường uống chế phẩm Ưtrogestan® thị trường, bước tiến hành trình bày mục 2.3.3.3 Kết thể bảng 3.11 hình 3.10: Bảng 3.11 Thông số dưọc động học PGT mô hình thỏ Chế phẩm thị trường đường Thơng số Hệ eutecti - organogel Liều 10 mg/kg 10 mg/kg Tmax 4,00 + 0,61 9,00 ± 2,45 phút Cmax 72,54 ± 14,79 ng/ml 407,74 ± 322,15 ng/ml AƯCo-00 708,54 + 120,20 ng.giờ/ml 291,01 +224,41 ng.giờ/ml MRT 9,93 + 0,37 1,66 + 0,68 Ầz 0,0794 ± 0,00289 giờ'1 0.395 ± 0,206 giờ-' 36 uống _450 -I I400 r ị 350 Ị I 300 ' Kết đánh giá sinh khả dụng mơ hình thỏ cho thấy cơng thức tối ưu đạt mức độ hấp thu AƯCo-00 cao gấp 2,43 lần chế phẩm thị trường sử dụng đường uống, trì nồng độ dược chất ổn định khoảng thời gian dài KIẾN NGHỊ > Tiếp tục hoàn thiện công thức bào chế eutecti - organogel > Đánh giá số đặc điểm hệ eu tecti - organogel: cấu trúc hóa lý, đặc tính lưu biến 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Bộ môn Bào chế (2021), Bào chế sinh dược học 2, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, pp 31 Bộ môn Bào chế (2020), Bào chế sinh dược học 7, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, pp 42, 60-62 Bộ mơn Vật lý - Hóa lý (2012), Giảo trình hóa lý dược, Đại học Dược Hà Nội, pp 20-23, pp 42-45 Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp 796 Bộ Y tế (2006), Dược lý học, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp 316 Đào Minh Hạnh (2020), So nghiên cứu xây dựng tương quan in vitro - in vivo hệ eutecti - hydrogel chứa progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Thị Ngân (2017), Nghiên cứu phát triển hệ eutecti - hydrogel để tăng tính thấm qua da progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Thị Ngọc Thơ (2018), Tiếp tục nghiên cứu đánh giá hydrogel chứa eutecti progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội 10 Vũ Thị Thanh Thủy (2021), Nghiên cứu bào chế hệ nano tự nhũ hóa chứa progesteron, Luận văn Thạc sĩ Dược học, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh 11 Agrawal V., Gupta V., et al (2010), "Preparation and evaluation of tubular micelles of pluronic lecithin organogel for transdermal delivery of sumatriptan", AAPS PharmSciTech, 11(4), pp 1718-25 12 Alsaab Hashem, Bonam Sindhu Prabha, et al (2016), "Organogels in Drug Delivery: A special Emphasis on Pluronic Lecithin Organogels", Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, pp 13 Biruss B., Valenta c (2008), "The advantage of polymer addition to a non­ ionic oil in water microemulsion for the dermal delivery of progesterone", Int J Pharm, 349(1-2), pp 269-73 14 Biruss B., Valenta c (2006), "Skin permeation of different steroid hormones from polymeric coated liposomal formulations", Eur J Pharm Biopharm, 62(2), pp 210-9 15 Bolla p K., Clark B A., et al (2020), "Evaluation of Formulation Parameters on Permeation of Ibuprofen from Topical Formulations Using Strat-M((R)) Membrane", Pharmaceutics, 12(2), pp 16 Chiou w L., Riegelman s (1971), "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems", J pharm Sci, 60(9), pp 1281-1302 17 Clavier G M., Pozzo J L., et al (2000), "Organogelators for making porous sol-gel derived silica at two different length scales", Journal of Materials Chemistry, 10(7), pp 1725-1730 18 Committee JF (2019), BNF 74 (British National Formulary), Pharmaceutical Press, pp 751 19 Crandall Wilson Trafton, Topical moisturizing composition and method 1995: United States 20 Dumortier G., Grossiord J L., et al (2006), "A review of poloxamer 407 pharmaceutical and pharmacological characteristics", Pharm Res, 23(12), pp 2709-28 21 El-Kamel A H (2002), "In vitro and in vivo evaluation of Pluronic F127-based ocular delivery system for timolol maleate", Int J Pharm, 241(1), pp 47-55 22 Elnaggar Y s., El-Refaie w M., et al (2014), "Lecithin-based nanostructured gels for skin delivery: an update on state of art and recent applications", J Control Release, 180, pp 10-24 23 Godin B., Touitou E (2007), "Transdermal skin delivery: predictions for humans from in vivo, ex vivo and animal models", Adv Drug Deliv Rev, 59(11), pp 1152-61 24 Law D., Wang w., et al (2003), "Properties of rapidly dissolving eutectic mixtures of poly (ethylene glycol) and fenofibrate: the eutectic microstructure", J Pharm Sci, 92(3), pp 505-15 25 Liu K., Yan N., et al (2008), "Supramolecular gels based on organic diacid monoamides of cholesteryl glycinate", J Colloid Interface Sci, 327(1), pp 233-42 26 Lopes L B., Murphy N., et al (2009), "Enhancement of transdermal delivery of progesterone using medium-chain mono and diglycerides as skin penetration enhancers", Pharm Dev Technol, 14(5), pp 524-9 27 Mackay K M., Williams A c., et al (2001), "Effect of melting point of chiral terpenes on human stratum corneum uptake", Int J Pharm, 228(1-2), pp 89-97 28 Mady F M., Essa H., et al (2016), "Formulation and clinical evaluation of silymarin pluronic-lecithin organogels for treatment of atopic dermatitis", Drug Des Devel Ther, 10, pp 1101-10 29 Murdan s (2005), "Organogels in drug delivery", Expert Opin Drug Deliv, 2(3), pp 489-505 30 Murdan s., A review of Pluronic Lecithin Organogel as a topical and transdermal drug delivery system, in Hospital Pharmacist 2005 p 267-270 31 o Gronwald, s Shinkai (2001), "Sugar-integrated gelators of organic solvents", Chemistry, pp 32 Parhi R., Suresh p., et al (2016), "Pluronic lecithin organogel (PLO) of diltiazem hydrochloride: effect of solvents/penetration enhancers on ex vivo permeation", Drug Deliv Transl Res, 6(3), pp 243-53 33 Penzes T., Blazso G., et al (2005), "Topical absorption of piroxicam from organogels—in vitro and in vivo correlations", Int J Pharm, 298(1), pp 47-54 34 Pubchem Progesterone, Truy cập ngày 24/06/2022, https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Progesterone 35 Rahman Md Akhlaquer, Hussain Arshad, et al (2011), "Lecithin­ microemulsion based Organogels as Topical Drug Delivery System", International Journal of Current Research and Review, pp 36 Sagiri s s., Behera B., et al (2013), "Organogels as Matrices for Controlled Drug Delivery: A Review on the Current State", Soft Materials, 12(1), pp 47-72 37 Shaikh I M., Jadhav s L., et al (2009), "Aceclofenac organogels: in vitro and in vivo characterization", Curr Drug Deliv, 6(1), pp 1-7 38 Shchipunov Yu A (2001), "Lecithin organogel: A micellar system with unique properties", Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 183185, pp 541-554 39 Shchipunov Yurii A., Shumilina Elena V (1995), "Lecithin bridging by hydrogen bonds in the organogel", Materials Science and Engineering: c, 3(1), pp 43-50 40 Sitruk-Ware R (1989), "Transdermal delivery of steroids", Contraception, 39(1), pp 1-20 41 Stott p w., Williams A c., et al (1998), "Transdermal delivery from eutectic systems: enhanced permeation of a model drug, ibuprofen", J Control Release, 50(13), pp 297-308 42 Todo H (2017), "Transdermal Permeation of Drugs in Various Animal Species", Pharmaceutics, 9(3), pp 43 Tuleu c., Newton M., et al (2004), "Comparative bioavailability study in dogs of a self-emulsifying formulation of progesterone presented in a pellet and liquid form compared with an aqueous suspension of progesterone", J Pharm Sci, 93(6), pp 14951502 44 Vigato Aryane Alves, Querobino Samyr Machado, et al (2019), "Physico- Chemical Characterization and Biopharmaceutical Evaluation of Lipid-Poloxamer- Based Organogels for Curcumin Skin Delivery", Frontiers in pharmacology, 10, pp 1006-1006 45 Vintiloiu A., Lafleur M., et al (2008), "In situ-forming oleogel implant for rivastigmine delivery", Pharm Res, 25(4), pp 845-52 46 Vintiloiu A., Leroux J c (2008), "Organogels and their use in drug delivery - a review", J Control Release, 125(3), pp 179-92 47 Wang Guijun, Hamilton Andrew D (2002), "Synthesis and Self-Assembling properties of polymerizable organogelators", Chem Eur J., pp 48 Wang w., Cai Y., et al (2017), "Microemulsions based on paeonol-menthol eutectic mixture for enhanced transdermal delivery: formulation development and in vitro evaluation", Artif Cells Nanomed Biotechnol, 45(6), pp 1-6 49 Willimann H (1992), "Lecithin organogels as matrix for transdermal transport of drugs", Journal of Pharmaceutical Sciences, pp 50 Yalkowsky Samuel H., Valvani Shri c (1980), "Solubility and partitioning I: Solubility of nonelectrolytes in water", Journal of Pharmaceutical Sciences, 69(8), pp 912-922 PHỤ LỤC Phụ lục Hình ảnh sắc kỉ đồ phương pháp định lượng HPLC Phụ lục Hình ảnh sắc kỉ đồ phương pháp LC-MS/MS Phụ lục Thông số kĩ thuật phương pháp phân tích LC-MS/MS Phụ lục Độ lặp lại toi đa độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) Phụ lục Bảng thiết kế thí nghiệm phần mềm MODDE 12.0 Phụ lục Kết thử giải phóng qua màng da chuột 11 công thức (n=3) Phụ lục Kết đánh giá sinh khả dụng in vivo mơ hình thỏ PHỤ LỤC Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ phương pháp định lượng HPLC Hình PL 1.1 Hình ảnh sắc kí đồ dung dịch chuẩn PGT 30 pg/ml Hình PL 1.2 Hình ảnh săc kí mâu thử giải phóng PGT qua màng da chuột Phụ lục Hình ảnh săc kỉ phương pháp LC-MS/MS + MRM (315.2 -> 109.0) 4.10h.d 5.608 ễ x10 - + MRM (315.2 -> 109.0) 1000ppb-1.d - x10 p ọ O 1.4- O Õ 1.21- 1.110.90.8 0.80.6- 0.70.6- 0.40.2- 0.50.4 - z I I r 5.5 Acquisition Time (min) - - r 5.5 Acquisition Time (min) Hình PL 2.1 Sắc kí đồ mẫu chuẩn mẫu thử định lượng nồng độ thuốc máu động vật thí nghiệm phương pháp LC-MS/MS Phụ lục Thông số kĩ thuật phương pháp phân tích LC-MS/MS FT11_ Thong so Giá trị _ Nguồn ion ESI _ Dương _ Chế độ ion hóa Chế độ ghi phố MRM _ Nhiệt độ nguồn MS (°C) 100 _ Nhiệt độ nguồn MS (°C) 100 _Nhiệt độ nguồn khí gas (°C) _ 300 Cường độ dịng mao quản (nA) 2678 _ Ấp suất chân khơng (Torr) _ 1,89E Áp suất luồng khí N2 tinh khiết (psi) 20 A —.A Phụ lục Độ lặp lại tối đa độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) Bảng PL 4.1 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác (AOAC) TT Hàm lượng % Tỷ lệ chất Đơn vị RSD % 100 100% 1,3 10 10-' 10% 1,8 10 1% 2,7 0,1 10-3 0,1% 3,7 0,01 10'4 100 pg/ml 5,3 0,001 10'5 10 pg/ml 7,3 0,0001 10'6 pg/ml 11 0,00001 10-7 100 ng/ml 15 0,000001 10'8 10 ng/ml 21 10 0,0000001 10-9 ng/ml 30 Bảng PL 4.2 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) TT Hàm lượng % Tỷ lệ chất Đơn vị• Độ thu hồi % 100 100% 98 - 102 >10 101 10% 98-102 >1 10-2 1% 97-103 >0,1 10-3 0,1% 95 - 105 0,01 10-4 100 Ịig/ml 90-107 0,001 10'5 10 pg/ml 80-110 0,0001 10'6 pg/ml 80-110 0,00001 10-7 100 ng/ml 80-110 0,000001 10'8 10 ng/ml 60-115 10 0,0000001 10 ng/ml 40-120 Phụ lục Bảng thiết kế thí nghiệm phần mềm MODDE 12.0 Biến đầu vào Công thức Tỉ lệ PGT (%) Biến đầu Tỉ lệ pha nưóc Thơng lượng hệ khuếch tán - Flux (%) NI 70 N2 10 70 N3 80 N4 10 80 N5 75 N6 10 75 N7 5,5 70 N8 5,5 80 N9 5,5 75 N10 5,5 75 Nil 5,5 75 (ng/cm2.giờ) Thòi gian trễ Tlag (giờ) r Phụ lục Kêt thử giải phóng qua màng da chuột 11 công thức (n=3) Công thức NI N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8 N9 N10 Nil Lượng dược chất thấm qua da chuột theo thòi gian (pg/cm2) 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 5,292 11,367 0,652 16,620 1,617 5,787 11,728 2,855 8,676 4,668 4,977 12,610 74,757 3,456 82,056 4,821 85,620 34,110 20,649 56,819 67,203 26,733 24 giờ giờ 34,296 51,748 71,545 95,188 1220,201 261,304 405,364 563,470 721,473 4790,863 9,195 18,037 24,244 659,682 13,206 239,927 358,608 478,042 596,875 2068,600 14,919 24,287 34,876 47,995 1330,376 281,637 423,511 583,676 805,853 5186,409 108,667 188,110 300,904 455,417 4047,553 69,962 116,733 173,564 245,498 4145,919 162,073 248,059 348,156 466,175 4197,939 264,691 439,154 650,778 874,768 5390,984 102,105 173,437 273,692 403,028 4852,060 Phụ lục Kêt đảnh giả sinh khả dụng in vivo mô hĩnh thỏ Thòi điểm (giờ) 10 12 26 29 32 Thời gian (phút) 15 30 45 60 90 120 180 240 360 Nồng độ PGT huyết tương (ng/ml) - hệ eutecti - organogel (qua da) Conl Con Con TB SD Con 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 41,8954 73,4563 44,7711 92,4902 63,15325 24,19786 40,0732 39,9016 79,9698 95,2625 63,80178 28,19838 36,48622 31,067 108,2136 32,2466 67,8679 59,84878 39,9072 13,8342 18,6311 50,8006 29,2583 34,6493 17,2031 35,7381 22,4148 28,9463 26,07558 8,03591 16,9897 8,2581 25,1588 24,1435 18,63753 7,816448 9,2925 12,7906 4,0026 8,0446 8,532575 3,627077 6,5674 5,4429 4,1259 7,6873 3,3910 2,020447 3,3658 6,4713 4,7747 5,1986 4,9526 1,280176 Nồng độ PGT huyết tương (ng/ml) - utrogestan (đườn g uống) Con 0,0000 39,8921 17,4442 9,6468 5,2719 3,7973 1,9341 1,2013 1,8382 0,0000 0,0026 Con Con 0,0000 0,0000 — 237,1252 185,8141 1686,59 194,6336 1040,9675 74,7322 565,2657 73,7316 294,8782 31,5579 143,9689 14,6233 97,4029 5,011 52,3666 3,8325 25,3308 2,3872 8,6315 Con Con — 9,2358 7,1949 3,7173 6,1188 8,0533 2,8828 0,7521 1,352 3,1646 1,3556 — 3,0698 33,2159 11,1249 2,8154 0,9667 1,4161 1,4428 7,7791 0,9555 1,3761 TB SD 0,0000 0,0000 72,33073 139,4649 386,0518 918,9418 252,018 549,8672 130,8408 305,2433 76,2854 151,9456 36,3520 74,9307 23,0845 52,1014 13,6694 28,3012 13,6535 6,65668 2,7506 4,4560