Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 39 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
39
Dung lượng
3,34 MB
Nội dung
ĐỀ TÀI: SảnxuấtchếphẩmTrichoderma,BacillusdùngkiểmsoátsinhhọcFusariumsp.vàPythiumsp.vàkíchthíchsinhtrưởngởcây đậu. NHÓM 7 BÀI BÁO CÁO VI SINH ỨNG DỤNG [...]... trong quá trình sảnxuất Bước 4: Cung cấp các điều kiện tối ưu cho sự phát triển của giống để giống sản sinhsảnphẩm QUÁ TRÌNH XỬ LÍ SAU LÊN MEN • Bao gồm: Tách chiết và tinh chế sảnphẩm thành dạng thích hợp cho mục đích nhất định • Các loại sản phẩm: Toàn bộ tế bào, Vaccine, Protein trị liệu, Kháng thể đơn dòng Các sảnphẩm khác nhau đáng kể về kích thước phân tử, thành phần hóa học, yêu cầu về... thí nghiệm Pythium sp Fusarium sp Pythium sp + Fusarium sp Không cấy Không cấy Không cấyCấy Trichoderma Cấy trichoderma Cấy Trichoderma Cấy cùng lúc Ttrichoderma vàBacillusCấy cùng lúc Ttrichoderma vàBacillusCấy cùng lúc Ttrichoderma vàBacillusCấy Trichoderma trước, Bacillus sau Cấy Trichoderma Cấy Trichoderma trước, Bacillus sau trước, Bacillus sau CấyBacillusCấyBacillusCấyBacillus Phương... thử nghiệm: • Mỗi chậu cho vào 1kg đất (đã vô trùng), trộn đều với dịch khoáng • Bổ sung nấm, vi khuẩn vào chậu (2ml) như các lô thí nghiệm • Trồng ở mỗi chậu 10 hạt đậu, quan sát tỉ lệ nảy mầm (đếm hạt nảy mầm) và mức độ cố định đạm (số nốt sần) • Đánh giá kết quả thử nghiệm: đánh giá mức độ kháng Fusaium sp vàPythium sp dựa vào số hạt tỉ lệ hạt nảy mầm và số nốt sần trên rễ cây LÊN MEN CÁC BƯỚC LÊN... trên cây trồng: Tẩm hạt và phun lên cây, khi thấy không có ảnh hưởng xấu với cây mới, thực hiện các thí nghiệm tiếp theo như định danh, xác định khả năng ức chế phát triển các vi sinh vật gây bệnh cây ĐỊNH TÍNH Các bước thực hiện: Chuẩn bị dịch khuẩn: Vi khuẩn được hòa vào nước muối sinh lý nồng độ 0,85% để có mật độ khoảng: 1-2.108 CFU/ml) Chuẩn bị dịch nấm (Fusarium sp, Pythium sp, Trichoderma):... Trichoderma vàBacillus cùng mọc được trên cùng môi trường: không ức chế lẫn nhau Trichoderma mọc lấn ác Bacillus hoặc ngược lại Ức chế lẫn nhau •Chọn ra chủng nấm Trichoderma và chủng Bacillus có khả năng kết hợp nhau tốt nhất ĐỊNH LƯỢNG Khảo sát phần trăm ức chế: Công thức tính phần trăm ức chế: Đường kính đĩa đối chứng - Đường kính đĩa cấy x 100% Đường kính đĩa đối chứng Nếu % ức chế càng lớn... chế càng lớn thì khả năng ức chế của Trichoderma vàBacillus càng mạnh Người ta sẽ chọn những nấm có % ức chế lớn nhất đem thử nghiệm Invivo III THỬ NGHIỆM INVIVO Bước 1: Chuẩn bị Vi khuẩn và nấm: Vi khuẩn được tăng sinh trong môi trường Mật rỉ Đo OD Lựa chọn mật độ 1 - 2.108 CFU/ml Nấm tăng sinh trong môi trường cám, mạt cưa, sau đó đem pha với nước muối sinh lý 0,85% để đạt mật độ 1... trồng đậu Làm mịn đất qua rây 1mm 2 Pha loãng mẫu: Cân 1g đất mịn hòa vào 100ml nước sinh lý có 0,5% tween 80 Đặt lên máy lắc trong 30 phút với tốc độ 110v/p Hòa loãng ở các nồng độ khác nhau 3 Phân lập mẫu: Đem các dung dịch được pha loãng ở các nồng độ khác nhau cấy trên mội trường thạch Phân lập các khuẩn lạc điển hình của Trichoderma, làm thuần các dòng Trichoderma 4 Thử ảnh hưởng độc tố trên cây. .. đơn dòng Các sảnphẩm khác nhau đáng kể về kích thước phân tử, thành phần hóa học, yêu cầu về độ tinh sạch • Cần các phương pháp khác nhau để thu hồi và tinh sạch • Bước 7: Sấy cả 2 sảnphẩm ở: 180oC/30 phút, sau đó phối trộn 2 sản phẩm Trichoderma Và Bacillus lại với nhau • Bước 8: Xử lý những chất thải tạo ra trong qui trình ... trườngdùng trong tăng sinh giống sản xuất Sử dụng phương pháp lên men bề mặt( lên men nổi) MÔI TRƯỜNG LÊN MEN TỐI ƯU HÓA CHO TRICHODESMA Tạo môi trường hiếu khí Tạo môi trường có pH 2-6( pH thích hợp cho nấm Trichoderma tiết ra Enzyme) Môi trường có độ ẩm cao pH thích hợp để hình thành bào tử là 5-5,8 tùy từng mức pH mà cho các loại bào tử khác nhau Nhiệt độ tối ưu là 25-300C Nhiệt độ thích. .. triển bình thường, xâm nhập vào vùng phát triển của nấm, kí hiệu: Chọn chủng Trichoderma kháng nấm mạnh nhất 3 Thử khả năng kết hợp của nấm Trichoderma với chủng Bacillus đã được chọn qua định tính •Từ chủng nấm Trichoderma và chủng Bacillus đã được chọn ra sau khi định tính ta tiến hành thử khả năng kết hợp giữa chúng •Chuẩn bị môi trường nuôi cấy: PGA •Trichoderma vàBacillus được cấy đối xứng nhau . ĐỀ TÀI: Sản xuất chế phẩm Trichoderma, Bacillus dùng kiểm soát sinh học Fusarium sp. và Pythium sp. và kích thích sinh trưởng ở cây đậu. NHÓM 7 BÀI BÁO CÁO VI SINH ỨNG DỤNG