Luận án Tiến sĩ Nghiên cứu ứng dụng enzyme protease trong chế biến bột protein thủy phân từ phụ phẩm cá tra sử dụng làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP ĐẶNG MINH HIỀN NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG ENZYME PROTEASE TRONG CHẾ BIẾN BỘT PROTEIN THỦY PHÂN TỪ PHỤ PHẨM CÁ TRA SỬ DỤNG LÀM MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT LUẬN ÁN TỐT NGHIỆP TIẾN SĨ NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM 2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP LUẬN ÁN TỐT NGHIỆP TIẾN SĨ NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM MÃ NGÀNH: 62.54.01.01 NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG ENZYME PROTEASE TRONG CHẾ BIẾN BỘT PROTEIN THỦY PHÂN TỪ PHỤ PHẨM CÁ TRA SỬ DỤNG LÀM MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT NGHIÊN CỨU SINH ĐẶNG MINH HIỀN MSNCS: P1114001 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGS.TS NGUYỄN CÔNG HÀ 2021 Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ LỜI CẢM ƠN Luận án nghiên cứu hồn thành mơn Cơng nghệ thực phẩm, khoa Nông nghiệp, trường Đại học Cần Thơ Để hoàn thành luận án nhờ vào nỗ lực tác giả giúp đỡ vơ quý báo giáo viên hướng dẫn, thầy cô, Cơ quan công tác, Công ty Caseamex, Công ty CP thủy sản Đại Đại Thành, Công ty 404, gia đình bạn bè Tơi thật lịng cảm ơn chân thành sâu sắc đến: PGs Ts Nguyễn Công Hà tận tình hướng dẫn, Trao đổi, động viên giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn để hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp Quý thầy, cô môn Công nghệ thực phẩm, khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ truyền đạt kiến thức suốt trình học tập Các cán phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ thực phẩm phịng thí nghiệm Sinh học đất, mơn Khoa học đất tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Quý Công ty GEPIMEX 404, Công ty CP thủy sản Đại Đại Thành, Caseamex tạo điều kiện cho tơi có ngun liệu để làm thí nghiệm hoàn thành luận văn Cám ơn tất bạn bè, anh chị em lớp cao học Công nghệ thực phẩm khóa 19, 20, 21, em sinh viên đại học Cơng nghệ thực phẩm khóa 38, 39 giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Đặc biệt, cám ơn gia đình q thầy ủng hộ, động viên, khích lệ điểm tựa vững cho suốt thời gian học tập Xin chân thành cám ơn! Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2021 Nghiên cứu sinh Đặng Minh Hiền Ngành Công nghệ Thực phẩm i Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ TÓM TẮT Cá tra dầu (Pangasius hypophthalmus) biết đến mặt hàng xuất chủ lực Việt Nam với phi lê sản phẩm ngành chế biến cá tra ưa chuộng nhiều quốc gia giới Một số nghiên cứu tiến hành trình thủy phân sản phẩm phụ cá cách sử dụng enzyme; nghiên cứu tập trung vào việc cải thiện mức độ thủy phân để cải thiện hoạt động chống oxy hóa chúng; nghiên cứu trình thủy phân sản phẩm phụ cá tra cách sử dụng nhiều protease động học thủy phân Cho đến nay, chưa có thơng tin việc thủy phân thịt vây máu cá tra enzym protease (bromelain, papain, neutrase) để ứng dụng ni cấy vi sinh vật Ngồi ra, nghiên cứu nghiên cứu cho thấy động học thủy phân enzyme hai chất xu hướng thay đổi hàm lượng acid amin trình thủy phân protease liên quan đến phát triển vi sinh vật Vì vậy, nghiên cứu ứng dụng enzyme protease chế biến bột protein thủy phân từ phụ phẩm cá tra sử dụng làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật thực với ba nội dung bao gồm: (1) Nội dung 1: tách hàm lượng mỡ thịt dè cá, tiến hành thí nghiệm thủy phân phụ phẩm thịt dè cá enzyme bromelain, papain neutrase, dung dịch thủy phân đem sấy phun thu sản phẩm bột protein thủy phân; (2) Nội dung 2: thử nghiệm thực tương tự nội dung phụ phẩm máu cá tra; (3) Nội dung 3: tiến hành nuôi cấy vi sinh vật (vi khuẩn Bacillus subtilis nấm mốc Aspergillus oryzae) môi trường sản phẩm tối ưu thử nghiệm thủy phân protein thịt dè cá máu cá Sau trình thực hiện, nghiên cứu ghi nhận kết sau: (1) Nội dung 1: kết cho thấy phụ phẩm thịt dè cá tra tách béo dung dịch NaHCO3 nồng độ 0,2%, có khả tách béo tốt nhất, hiệu suất thủy phân enzyme hiệu tỷ lệ khối lượng enzyme chất 2,25 mg enzyme (mgE)/1,17 g protein (gPro) enzyme bromelain, 1,5 mgE/1,17gPro enzyme papain 0,625 mgE/0,975 gPro enzyme neutrase; bên cạnh đó, hiệu suất thủy phân tyrosin đạm amin enzyme bromelain thời điểm 240 phút tương ứng 65,25% 71,02%, enzyme papain 57,74% 67,22%, enzyme neutrase 42,69% 52,51%; hàm lượng acid amin tự tăng theo thời gian thủy phân đồng thời enzyem, lượng acid amin tự thủy phân bromelain > papain > neutrase (2) Nội dung 2: Đối với phụ phẩm máu cá tra tách béo dung dịch NaHCO3 nồng độ 0,2%, có khả tách béo tốt nhất; hiệu suất thủy phân enzyme hiệu tỷ lệ khối lượng enzyme chất 2,1 mg enzyme (mgE)/0,69 g protein (gPro) enzyme bromelain, 1,2 mgE/0,598 gPro enzyme papain 0,7 mgE/0,690 gPro Ngành Công nghệ Thực phẩm ii Khoa Nơng Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ enzyme neutrase; bên cạnh đó, hiệu suất thủy phân tyrosine đạm amin enzyme bromelain thời điểm 240 phút tương ứng 95,93% 75,65%, enzyme papain 76,62% 70,91%, enzyme neutrase 59,17% 63,65% Hàm lượng acid amin tự tăng theo thời gian thủy phân đồng thời enzyme, lượng acid amin tự thủy phân bromelain > papain > neutrase (3) Nội dung 3: Các sản phẩm thủy phân từ thịt dè máu cá tra sử dụng làm môi trường dinh dưỡng nuôi chủng vi khuẩn Bacillus subtilis nấm mốc Aspergillus oryzae cho thấy hiệu tốt so với môi trường peptone thương mại thông qua đường cong tăng trưởng khả sinh tổng hợp protease vi sinh vật môi trường thử nghiệm Từ khóa: bromelain, papain, neutrase, phụ phẩm cá tra, thủy phân, dịch thủy phân protein Ngành Công nghệ Thực phẩm iii Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ ABSTRACT Catfish (Pangasius hypophthalmus) is known as one of the mainly export products of Vietnam with fillets being the main product of pangasius processing, which is popular in many countries around the world A few studies have been conducted on the enzymatic hydrolysis of fish by-products using enzyme; the studies were focusing on improving degree of hydrolysis in order to improve their antioxidant activity; study the hydrolysis of channel catfish by-products by using multiple proteases and hydrolysis kinetics Until now, no information has been reported on hydrolysis of fin meat and blood of catfish by protease enzymes (bromelain, papain, neutrase) for application of cultural microorganism In addition, this study is the first to show hydrolysis kinetics of enzymes on two substrates and the acid amin content pattern changes during protease hydrolysis connecting to develope of microorganism Therefore, the study on the application of protease enzyme in processing hydrolyzed protein powder from pangasius by-products used as microbial culture medium was carried out with three contents including: (1) Content 1: defatted in fish fin meat, hydrolysis experiment was proceeded on catfish byproducts by enzymes bromelain, papain and neutrase, the hydrolysate was spray-dried to obtain hydrolyzed protein powder; (2) Content 2: the tests were performed similarly to content on catfish blood by-product; (3) Content 3: Culturing microorganisms (Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae) on the media was the optimal product of the experiment of hydrolysis of protein fin meat and fish blood After the conducted experiment, the research has recorded the following results: (1) Content 1: the results showed that pangasius belly by-products were defatted by NaHCO3 solution at a concentration of 0,2%, possibly fat separation the best; the hydrolysis efficiency of enzymes were effective at the enzyme mass to substrate ratio is 2,25 mg enzyme (mgE)/1.17 g protein (gPro) for bromelain enzyme, 1,5 mgE/1,17gPro for papain enzyme and 0,625 mgE/0,975 gPro for neutrase enzyme; besides, the hydrolysis efficiency of tyrosin and amino proteins by bromelain enzyme at 240 minutes to 65,25% and 71,02%, of papain enzyme to 57,74% and 67,22%, enzyme neutrase to 42,69% and 52,51%, corresponding; free amino acid content increases with hydrolysis time at all three enzyems, free amino acid hydrolyzed by bromelain>papain>neutrase (2) Content 2: For pangasius blood by-product, which was defatted by NaHCO3 solution at a concentration of 0.2%, has the best ability to separated fat; the hydrolysis efficiency of enzymes reached optimation at the enzyme and substrate mass ratio to 2,1 mg enzyme Ngành Công nghệ Thực phẩm iv Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ (mgE)/0,69 g protein (gPro) of bromelain enzyme, 1,2 mgE/0,598 gPro of papain enzyme and 0,7 mgE/0,690 gPro of neutrase enzyme; beside that, the hydrolysis efficiency of tyrosin and amino proteins by bromelain enzyme at 240 minutes, respective to 95,93% and 75,65%, the papain enzyme to 76,62% and 70,91%, the enzyme neutrase to 59,17% and 63,65% The content of free amino acids increases with the hydrolysis time simultaneously by enzymes, the amount of free amino acids hydrolyzed by bromelain> papain> neutrase (3) Content 3: Hydrolyzed products from pangasius belly and pangasius blood were used as a nutrient medium for strains of Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae, which showed better efficiency than comercial peptone through growth and protease biosynthesis of these microorganisms on test media Keywords: bromelain, papain, neutrase, catfish by-product, hydrolyzate, Bacillus subtilis, Aspergillus oryzae Ngành Công nghệ Thực phẩm v Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ LỜI CAM ĐOAN Luận án “Nghiên cứu ứng dụng enzyme protease chế biến bột protein thủy phân từ phụ phẩm cá tra sử dụng làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật” tác giả thực hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Công Hà, khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ Tôi xin cam kết kết quả, số liệu luận án hoàn thành dựa kết nghiên cứu kết nghiên cứu chưa dùng cho cơng trình khác Ngành Công nghệ Thực phẩm vi Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iv DANH SÁCH BẢNG xii DANH SÁCH HÌNH xiii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT xv Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết luận án 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Nội dung nghiên cứu 1.4 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 1.5 Ý nghĩa luận án 1.6 Điểm luận án Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan ngành cá tra 2.2 Giới thiệu nguyên liệu cá tra 2.2.1 Giới thiệu chung 2.2.1.1 Đặc điểm phân loại cá tra 2.2.1.2 Đặc điểm sinh học cá tra 10 2.2.2 Thành phần hóa học 11 2.2.3 Thành phần hóa học thịt cá tra phi lê 11 2.2.4 Việc xử lý phụ phẩm cá tra 11 2.3 Tổng quan protein 12 2.4 Tổng quan enzyme 15 2.5 Enzyme bromelain 17 2.5.1 Đặc điểm enzyme bromelain 17 2.5.2 Cấu tạo enzyme bromelain 17 2.5.3 Hoạt tính enzyme bromelain 19 2.5.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme bromelain 20 Ngành Công nghệ Thực phẩm vii Khoa Nơng Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ 2.6 Enzyme papain 21 2.6.1 Đặc điểm enzyme papain 21 2.6.2 Cấu tạo enzyme papain 21 2.6.3 Hoạt tính enzyme papain 23 2.6.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme papain 25 2.7 Enzyme neutrase 26 2.7.1 Đặc điểm enzyme neutrase 26 2.7.2 Cấu tạo enzyme neutrase 26 2.7.3 Đặc điểm phân tử neutrase 27 2.8 Động học enzyme 27 2.9 Cơ chế thủy phân enzyme protease 32 2.10 Các Phương pháp loại bỏ lipid 33 2.11 Giới thiệu công nghệ sấy phun 34 2.12 Giới thiệu vi sinh vật 34 2.12.1 Tổng quan Bacillus subtilis 36 2.12.2 Tổng quan Aspergillus oryzae 38 2.13 Một số nghiên cứu thủy phân protein thủy sản 41 Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 45 3.1 Phương tiện nghiên cứu 45 3.1.1 Thời gian địa điểm 45 3.1.2 Nguyên vật liệu 45 3.1.3 Dụng cụ hóa chất 45 3.1.3.1 Dụng cụ 45 3.1.3.2 Hóa chất 46 3.2 Phương pháp nghiên cứu 46 3.2.1 Phương pháp phân tích 46 3.2.2 Phương pháp đánh giá xử lý số liệu 48 3.3 Nội dung bố trí thí nghiệm 48 3.3.1 Xác định thành phần hóa lý phụ phẩm cá tra 48 3.3.1.1 Xác định thành phần hóa học dè cá tra 48 3.3.1.2 Xác định thành phần hóa học máu cá tra 49 Ngành Công nghệ Thực phẩm viii Khoa Nông Nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ Squares MAIN EFFECTS A:San pham B:Thoi gian ST INTERACTIONS AB RESIDUAL TOTAL (CORRECTED) Square 47,6686 261,278 18 5,95858 14,5154 3371,66 0,0000 8213,57 0,0000 20,5452 0,6044 330,096 144 0,142675 80,73 342 0,00176725 512 0,0000 Table of Least Squares Means for Mat with 95,0 Percent Confidence Intervals Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit GRAND MEAN 513 8,75953 San pham 57 8,96614 0,00556816 8,95519 8,97709 57 9,20561 0,00556816 9,19466 9,21657 57 8,99123 0,00556816 8,98028 9,00218 57 8,8793 0,00556816 8,86835 8,89025 57 8,75895 0,00556816 8,748 8,7699 57 8,7314 0,00556816 8,72045 8,74236 57 8,80702 0,00556816 8,79607 8,81797 57 8,2614 0,00556816 8,25045 8,27236 57 8,23474 0,00556816 8,22378 8,24569 Thoi gian ST 27 6,9 0,00809035 6,88409 6,91591 27 7,17111 0,00809035 7,1552 7,18702 27 7,8963 0,00809035 7,88038 7,91221 12 27 8,34741 0,00809035 8,33149 8,36332 16 27 8,52407 0,00809035 8,50816 8,53999 20 27 8,67593 0,00809035 8,66001 8,69184 24 27 8,81 0,00809035 8,79409 8,82591 28 27 8,92185 0,00809035 8,90594 8,93776 32 27 9,01444 0,00809035 8,99853 9,03036 36 27 9,13481 0,00809035 9,1189 9,15073 40 27 9,24556 0,00809035 9,22964 9,26147 44 27 9,36259 0,00809035 9,34668 9,37851 48 27 9,45593 0,00809035 9,44001 9,47184 52 27 9,4963 0,00809035 9,48038 9,51221 56 27 9,43519 0,00809035 9,41927 9,4511 60 27 9,26889 0,00809035 9,25298 9,2848 64 27 9,10259 0,00809035 9,08668 9,11851 68 27 8,90963 0,00809035 8,89372 8,92554 72 27 8,75852 0,00809035 8,74261 8,77443 San pham by Thoi gian ST 1,0 6,9 0,024271 6,85226 6,94774 1,4 7,2 0,024271 7,15226 7,24774 1,8 7,81 0,024271 7,76226 7,85774 1,12 8,27 0,024271 8,22226 8,31774 1,16 8,45 0,024271 8,40226 8,49774 1,20 8,62 0,024271 8,57226 8,66774 1,24 9,21333 0,024271 9,16559 9,26107 1,28 9,57667 0,024271 9,52893 9,62441 1,32 9,63 0,024271 9,58226 9,67774 1,36 9,77667 0,024271 9,72893 9,82441 1,40 9,82 0,024271 9,77226 9,86774 1,44 9,87 0,024271 9,82226 9,91774 1,48 9,9 0,024271 9,85226 9,94774 1,52 9,93 0,024271 9,88226 9,97774 1,56 9,66 0,024271 9,61226 9,70774 1,60 9,32 0,024271 9,27226 9,36774 Ngành Công nghệ thực phẩm 169 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt 1,64 1,68 1,72 2,0 2,4 2,8 2,12 2,16 2,20 2,24 2,28 2,32 2,36 2,40 2,44 2,48 2,52 2,56 2,60 2,64 2,68 2,72 3,0 3,4 3,8 3,12 3,16 3,20 3,24 3,28 3,32 3,36 3,40 3,44 3,48 3,52 3,56 3,60 3,64 3,68 3,72 4,0 4,4 4,8 4,12 4,16 4,20 4,24 4,28 4,32 4,36 4,40 4,44 4,48 4,52 4,56 4,60 4,64 4,68 4,72 5,0 5,4 Ngành Công nghệ thực phẩm 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 9,04 8,73 8,64 6,9 7,22 7,6 8,32667 8,80333 9,02667 9,08 9,21 9,58333 9,84 9,99 10,04 10,08 10,1233 10,1367 10,0267 9,78 9,66667 9,47333 6,9 7,18333 8,46333 8,64 8,77667 8,86667 9,0 9,04 9,11 9,21 9,3 9,47333 9,65 9,75 9,95 9,71667 9,64 9,24 8,92333 6,9 7,21 7,88667 8,49333 8,59 8,87 8,95333 9,08 9,15 9,24 9,36 9,43 9,53 9,56667 9,62 9,46667 9,41667 9,13667 8,80667 6,9 7,15667 Trường Đại học Cần Thơ 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 170 8,99226 8,68226 8,59226 6,85226 7,17226 7,55226 8,27893 8,75559 8,97893 9,03226 9,16226 9,53559 9,79226 9,94226 9,99226 10,0323 10,0756 10,0889 9,97893 9,73226 9,61893 9,42559 6,85226 7,13559 8,41559 8,59226 8,72893 8,81893 8,95226 8,99226 9,06226 9,16226 9,25226 9,42559 9,60226 9,70226 9,90226 9,66893 9,59226 9,19226 8,87559 6,85226 7,16226 7,83893 8,44559 8,54226 8,82226 8,90559 9,03226 9,10226 9,19226 9,31226 9,38226 9,48226 9,51893 9,57226 9,41893 9,36893 9,08893 8,75893 6,85226 7,10893 9,08774 8,77774 8,68774 6,94774 7,26774 7,64774 8,37441 8,85107 9,07441 9,12774 9,25774 9,63107 9,88774 10,0377 10,0877 10,1277 10,1711 10,1844 10,0744 9,82774 9,71441 9,52107 6,94774 7,23107 8,51107 8,68774 8,82441 8,91441 9,04774 9,08774 9,15774 9,25774 9,34774 9,52107 9,69774 9,79774 9,99774 9,76441 9,68774 9,28774 8,97107 6,94774 7,25774 7,93441 8,54107 8,63774 8,91774 9,00107 9,12774 9,19774 9,28774 9,40774 9,47774 9,57774 9,61441 9,66774 9,51441 9,46441 9,18441 8,85441 6,94774 7,20441 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt 5,8 5,12 5,16 5,20 5,24 5,28 5,32 5,36 5,40 5,44 5,48 5,52 5,56 5,60 5,64 5,68 5,72 6,0 6,4 6,8 6,12 6,16 6,20 6,24 6,28 6,32 6,36 6,40 6,44 6,48 6,52 6,56 6,60 6,64 6,68 6,72 7,0 7,4 7,8 7,12 7,16 7,20 7,24 7,28 7,32 7,36 7,40 7,44 7,48 7,52 7,56 7,60 7,64 7,68 7,72 8,0 8,4 8,8 8,12 8,16 8,20 8,24 Ngành Công nghệ thực phẩm 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 8,2 8,49333 8,58 8,67 8,73333 8,8 8,84667 8,96 9,13667 9,35333 9,42333 9,54333 9,47333 9,32 9,1 8,92333 8,80667 6,9 7,17 8,33333 8,6 8,67 8,76333 8,83 8,86333 8,9 8,94667 9,02667 9,1 9,35333 9,48667 9,22 9,15 8,92667 8,87 8,78667 6,9 7,13333 7,72667 8,64 8,73 8,8 8,84667 8,88333 8,93 9,02667 9,24 9,53667 9,62 9,68 9,56667 9,31333 9,05333 8,87667 8,83 6,9 7,15667 7,55667 7,87667 8,07667 8,27333 8,33333 Trường Đại học Cần Thơ 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 171 8,15226 8,44559 8,53226 8,62226 8,68559 8,75226 8,79893 8,91226 9,08893 9,30559 9,37559 9,49559 9,42559 9,27226 9,05226 8,87559 8,75893 6,85226 7,12226 8,28559 8,55226 8,62226 8,71559 8,78226 8,81559 8,85226 8,89893 8,97893 9,05226 9,30559 9,43893 9,17226 9,10226 8,87893 8,82226 8,73893 6,85226 7,08559 7,67893 8,59226 8,68226 8,75226 8,79893 8,83559 8,88226 8,97893 9,19226 9,48893 9,57226 9,63226 9,51893 9,26559 9,00559 8,82893 8,78226 6,85226 7,10893 7,50893 7,82893 8,02893 8,22559 8,28559 8,24774 8,54107 8,62774 8,71774 8,78107 8,84774 8,89441 9,00774 9,18441 9,40107 9,47107 9,59107 9,52107 9,36774 9,14774 8,97107 8,85441 6,94774 7,21774 8,38107 8,64774 8,71774 8,81107 8,87774 8,91107 8,94774 8,99441 9,07441 9,14774 9,40107 9,53441 9,26774 9,19774 8,97441 8,91774 8,83441 6,94774 7,18107 7,77441 8,68774 8,77774 8,84774 8,89441 8,93107 8,97774 9,07441 9,28774 9,58441 9,66774 9,72774 9,61441 9,36107 9,10107 8,92441 8,87774 6,94774 7,20441 7,60441 7,92441 8,12441 8,32107 8,38107 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt 8,28 8,43 8,32 8,46333 8,36 8,65 8,40 8,67333 8,44 8,75 8,48 8,78333 8,52 8,69 8,56 8,63 8,60 8,54333 8,64 8,48333 8,68 8,40333 8,72 8,29333 9,0 6,9 9,4 7,11 9,8 7,49 9,12 7,78667 9,16 8,04 9,20 8,19333 9,24 8,3 9,28 8,41333 9,32 8,51667 9,36 8,56333 9,40 8,66333 9,44 8,71 9,48 8,76333 9,52 8,69667 9,56 8,66 9,60 8,56333 9,64 8,48333 9,68 8,34 9,72 8,26667 Multiple Range Tests for Mat by San pham Method: 95,0 percent LSD San pham Count LS Mean 57 8,23474 57 8,2614 57 8,7314 57 8,75895 57 8,80702 57 8,8793 57 8,96614 57 8,99123 57 9,20561 LS Sigma 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 0,00556816 Trường Đại học Cần Thơ 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 0,024271 8,38226 8,41559 8,60226 8,62559 8,70226 8,73559 8,64226 8,58226 8,49559 8,43559 8,35559 8,24559 6,85226 7,06226 7,44226 7,73893 7,99226 8,14559 8,25226 8,36559 8,46893 8,51559 8,61559 8,66226 8,71559 8,64893 8,61226 8,51559 8,43559 8,29226 8,21893 8,47774 8,51107 8,69774 8,72107 8,79774 8,83107 8,73774 8,67774 8,59107 8,53107 8,45107 8,34107 6,94774 7,15774 7,53774 7,83441 8,08774 8,24107 8,34774 8,46107 8,56441 8,61107 8,71107 8,75774 8,81107 8,74441 8,70774 8,61107 8,53107 8,38774 8,31441 Homogeneous Groups X X X X X X X X X Hoạt tính B Subtilis Analysis of Variance for Hoat - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value MAIN EFFECTS A:San pham 0,634181 0,0792726 117,81 0,0000 B:Thoi gian 0,0555225 0,0111045 16,50 0,0000 INTERACTIONS AB 0,0723356 40 0,00180839 2,69 0,0000 RESIDUAL 0,072674 108 0,000672907 TOTAL (CORRECTED) 0,834713 161 Table of Least Squares Means for Hoat with 95,0 Percent Confidence Intervals Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit GRAND MEAN 162 0,141605 San pham 18 0,1535 0,00611422 0,141381 0,165619 18 0,158833 0,00611422 0,146714 0,170953 18 0,192222 0,00611422 0,180103 0,204342 Ngành Công nghệ thực phẩm 172 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Thoi gian 12 16 20 24 San pham by Thoi gian 1,4 1,8 1,12 1,16 1,20 1,24 2,4 2,8 2,12 2,16 2,20 2,24 3,4 3,8 3,12 3,16 3,20 3,24 4,4 4,8 4,12 4,16 4,20 4,24 5,4 5,8 5,12 5,16 5,20 5,24 6,4 6,8 6,12 6,16 6,20 6,24 7,4 7,8 7,12 7,16 7,20 7,24 8,4 8,8 8,12 8,16 8,20 8,24 Trường Đại học Cần Thơ 18 18 18 18 18 18 0,201889 0,178722 0,175611 0,157556 0,0247222 0,0313889 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,189769 0,166603 0,163492 0,145436 0,0126027 0,0192694 0,214008 0,190842 0,187731 0,169675 0,0368417 0,0435084 27 27 27 27 27 27 0,136741 0,11463 0,149185 0,174185 0,146148 0,128741 0,00499224 0,00499224 0,00499224 0,00499224 0,00499224 0,00499224 0,126845 0,104734 0,13929 0,16429 0,136253 0,118845 0,146636 0,124525 0,159081 0,184081 0,156044 0,138636 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0,151 0,109333 0,135333 0,144333 0,190667 0,190333 0,149667 0,117 0,159667 0,210667 0,172667 0,143333 0,175 0,154667 0,208667 0,227 0,196333 0,191667 0,177667 0,145667 0,222667 0,273333 0,227 0,165 0,200667 0,15 0,167333 0,228333 0,191667 0,134333 0,194 0,141 0,177 0,207333 0,184667 0,149667 0,135 0,143667 0,183333 0,223667 0,125 0,134667 0,0203333 0,026 0,0466667 0,0156667 0,0126667 0,027 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,121313 0,0796468 0,105647 0,114647 0,16098 0,160647 0,11998 0,0873135 0,12998 0,18098 0,14298 0,113647 0,145313 0,12498 0,17898 0,197313 0,166647 0,16198 0,14798 0,11598 0,19298 0,243647 0,197313 0,135313 0,17098 0,120313 0,137647 0,198647 0,16198 0,104647 0,164313 0,111313 0,147313 0,177647 0,15498 0,11998 0,105313 0,11398 0,153647 0,19398 0,0953135 0,10498 -0,0093532 -0,00368654 0,0169801 -0,0140199 -0,0170199 -0,00268654 0,180687 0,13902 0,16502 0,17402 0,220353 0,22002 0,179353 0,146687 0,189353 0,240353 0,202353 0,17302 0,204687 0,184353 0,238353 0,256687 0,22602 0,221353 0,207353 0,175353 0,252353 0,30302 0,256687 0,194687 0,230353 0,179687 0,19702 0,25802 0,221353 0,16402 0,223687 0,170687 0,206687 0,23702 0,214353 0,179353 0,164687 0,173353 0,21302 0,253353 0,154687 0,164353 0,0500199 0,0556865 0,0763532 0,0453532 0,0423532 0,0566865 Ngành Công nghệ thực phẩm 173 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt 9,4 9,8 9,12 9,16 9,20 9,24 3 3 3 0,0273333 0,0443333 0,042 0,0373333 0,0146667 0,0226667 Trường Đại học Cần Thơ 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 0,0149767 -0,0023532 0,0146468 0,0123135 0,0076468 -0,0150199 -0,00701987 0,0570199 0,0740199 0,0716865 0,0670199 0,0443532 0,0523532 Multiple Range Tests for Hoat by San pham Method: 95,0 percent LSD San pham Count LS Mean 18 0,0247222 18 0,0313889 18 0,1535 18 0,157556 18 0,158833 18 0,175611 18 0,178722 18 0,192222 18 0,201889 LS Sigma 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 0,00611422 Homogeneous Groups X X X X XX XX X XX X Hoạt tính Aspergillus oryzae ANOVA Table for Hoat tinh Aspergillus oryzae TM by Thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,0312509 0,00625019 60,07 0,0000 Within groups 0,00124867 12 0,000104056 Total (Corr.) 0,0324996 17 Table of Means for Hoat tinh Aspergillus oryzae TM by Thoi gian with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Thoi gian Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit 0,135333 0,00588941 0,12626 0,144407 0,169333 0,00588941 0,16026 0,178407 12 0,195333 0,00588941 0,18626 0,204407 16 0,245 0,00588941 0,235926 0,254074 20 0,238 0,00588941 0,228926 0,247074 24 0,149333 0,00588941 0,14026 0,158407 Total 18 0,188722 Multiple Range Tests for Hoat tinh Aspergillus oryzae TM by Thoi gian Method: 95,0 percent LSD Thoi gian Count Mean 0,135333 24 0,149333 0,169333 12 0,195333 20 0,238 16 0,245 Ngành Công nghệ thực phẩm Homogeneous Groups X X X X X X 174 Khoa Nơng nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC C: PHIẾU PHÂN TÍCH ACID AMIN Ngành Cơng nghệ thực phẩm 175 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Cơng nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 176 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 177 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Cơng nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 178 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 179 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Cơng nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 180 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 181 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Cơng nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 182 Khoa Nông nghiệp Luận án tốt nghiệp tiến sĩ Khóa 14 – Đợt Ngành Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Cần Thơ 183 Khoa Nông nghiệp