Nghiên cứu đặc điểm thành phần tế bào máu ngoại vi và chỉ thị CA15 3 ở các bệnh nhân được chẩn đoán ung thư vú tại bệnh viện trung ương thái nguyên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌCKHOA HỌC CAO THỊ MINH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THÀNH PHẦN TẾ BÀO MÁU NGOẠI VI VÀ CHỈ THỊ CA15-3 Ở CÁC BỆNH NHÂN ĐƯỢC CHẨN ĐOÁN UNG THƯ VÚ TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG THÁI NGUYÊN LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Thái Nguyên - 2022 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌCKHOA HỌC CAO THỊ MINH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THÀNH PHẦN TẾ BÀO MÁU NGOẠI VI VÀ CHỈ THỊ CA15-3 Ở CÁC BỆNH NHÂN ĐƯỢC CHẨN ĐOÁN UNG THƯ VÚ TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG THÁI NGUYÊN CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số: 8420201 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Kiều Giang PGS- TS Trần Bảo Ngọc Thái Nguyên - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu hướng dẫn TS Nguyễn Kiều Giang PGS- TS Trần Bảo Ngọc Các số liệu kết trình bày luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình Mọi kết thu không chỉnh sửa, chép từ nghiên cứu khác Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Tác giả Cao Thị Minh Phương i LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập thực đề tài luận văn Khoa Công nghệ Sinh học, trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên Em nhận giúp đỡ nhiệt tình Thầy, Cơ giáo cán khoa nhà trường Đầu tiên em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Thầy giáo - TS Nguyễn Kiều Giang, PGS- TS Trần Bảo Ngọc, Trường ĐHY- Dược Thái Nguyên định hướng khoa học, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện tốt suốt trình em tiến hành nghiên cứu hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn Thầy Cô cán Khoa Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên tận tình dạy dỗ, bảo truyền cho em niềm đam mê nghiên cứu khoa học Xin chân thành cảm ơn phận sau đại học nhà trường tạo điều kiện thuận lợi trình em học trường Em xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên phòng ban tạo điều kiện cho em tham gia khóa học, Bác sĩ, Điều dưỡng, kỹ thuật viên Trung tâm Huyết Học- Truyền máu Trung tâm Ung Bướu, phịng Cơng nghệ thơng tin, phịng Kế hoạch tổng hợp Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên giúp đỡ em thu thập hoàn thiện số liệu nghiên cứu Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè, đồng nghiệp nhiệt tình động viên cho em thêm động lực hồn thành tốt q trình học tập nghiên cứu khoa học Thái Nguyên, 20 tháng 12 năm 2021 ii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương ung thư vú 1.1.1 Dịch tễ học ung thư vú 1.1.2 Các yếu tố nguy ung thu vú 1.2 Dấu ấn sinh học tiên lượngung thư vú 1.3 Phân loại ung thư vú 12 1.4 Chẩn đoánung thư vú 14 1.4.1 Chẩn đoán lâm sàng 14 1.4.2 Chẩn đoán cận lâm sàng 15 1.4.3 Chẩn đoán xác định 16 1.4.4 Chẩn đoán giai đoạn khối u (hệ thống AJCC) 16 1.5 Chiến lược điều trị 17 1.5.1 Phẫu thuật 17 1.5.2 Hóa trị 17 1.5.3 Xạ trị 18 1.5.4 Liệu pháp nội tiết 18 1.5.5 Điều trị đích 19 1.6 Chỉ thị ung thư CA15-3 20 1.6.1 Dấu ấn thị ung thư (tumor marker) 20 1.6.2 Dấu ấn thị ung thư CA 15-3 20 1.6.3 Xét nghiệm định lượng CA 15-3 ung thư vú 21 1.7 Xét nghiệm máu ngoại vi ung thư vú 22 1.7.1 Đặc điểm, thành phần chức máu 22 1.7.2 Các dòng tế bào máu ngoại vi 22 1.7.3 Xét nghiệm tế bào máu ngoại vi 25 1.7.4 Sự bất thường thành phần máu ngoại vi ung thư vú 26 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 29 2.2 Chỉ tiêu nghiên cứu ……………………………………………………………………………………… 2.3 Phương pháp nghiên cứu 29 2.3.1 Phương pháp thu thập bệnh nhân 29 2.3.2 Phương pháp thu thập mẫu máu 29 2.3.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Đặc điểm bạch cầu bệnh nhân ung thư vú 33 3.2 Đặc điểm hồng cầu bệnh nhân ung thư vú 36 3.3 Đặc điểm tiểu cầu bệnh nhân ung thư vú 39 3.4 Mối liên hệ số CA15-3 với số số huyết học bệnh nhân ung thư vú 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 Kết luận 46 Kiến nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ viết đầy đủ Tiếng Việt WBC White Blood Cell Số lượng bạch cầu NEU Neutrophil Bạch cầu hạt trung tính LYM Lymphocyte Bạch cầu Lympho MO Monocytes Bạch cầu Mono EO Eosinophil Bạch cầu hạt ưa acid BA Basophil Bạch cầu hạt ưa base RBC Red Blood Cell Số lượng hồng cầu HGB Hemoglobin Lượng huyết sắc tố HCT Hematocrit Thể tích khối hồng cầu MCV Mean Corpuscular Volume Thể tích trung bình hồng cầu Mean Corpuscular Hemoglobin Lượng huyết sắc tố trung bình MCH hồng cầu Mean Corpuscular Hemoglobin Nồng độ huyết sắc tố trung bình Concentration hồng cầu RDW Red Distribution Width Dải phân bố kích thước hồng cầu PLT Platelet Số lượng tiểu cầu MPV Mean Platelet Volume Thể tích trung bình tiểu cầu CA 15-3 Carbohydrate Antigen 15-3 MCHC v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Đặc điểm bạch cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 33 Bảng 3.2 Đặc điểm bạch cầu trung tính nhóm ung thư nhóm đối chứng 33 Bảng 3.3 Đặc điểm bạch cầu Mono nhóm ung thư nhóm đối chứng 33 Bảng 3.4 Đặc điểm bạch cầu lympho nhóm ung thư nhóm đối chứng 34 Bảng 3.5 Đặc điểm bạch cầu ưa acid nhóm ung thư nhóm đối chứng 34 Bảng 3.6 Đặc điểm bạch cầu ưa bazo nhóm ung thư nhóm đối chứng 34 Bảng 3.7 Đặc điểm hồng cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 36 Bảng 3.8 Đặc điểm lượng huyết sắc tố thể tích máu nhóm ung thư nhóm đối chứng 36 Bảng 3.9 Đặc điểm tỷ lệ thể tích khối hồng cầu thể tích máu tồn phần nhóm ung thư nhóm đối chứng 36 Bảng 3.10 Đặc điểm thể tích trung bình hồng cầu thể tích máu nhóm ung thư nhóm đối chứng 37 Bảng 3.11 Đặc điểm lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 37 Bảng 3.12 Đặc điểm nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 37 Bảng 3.13 Đặc điểm dải phân bố kích thước hồng cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 38 Bảng 3.14 Đặc điểm số lượng tiểu cầu thể tích máu nhóm ung thư nhóm đối chứng 39 Bảng 3.15 Thể tích trung bình tiểu cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng 40 Bảng 3.16 Đặc điểm số CA15-3 nhóm ung thư nhóm đối chứng 41 Bảng 3.17 Mối liên hệ số CA15-3 với WBC bệnh nhân ung thư vú 41 Bảng 3.18 Mối liên hệ số CA15-3 với NEU bệnh nhân ung thư vú 41 Bảng 3.19 Mối liên hệ số CA15-3 với LYM bệnh nhân ung thư vú 42 vi Bảng 3.20 Mối liên hệ số CA15-3 với MO bệnh nhân ung thư vú 42 Bảng 3.21 Mối liên hệ số CA15-3 với MCV bệnh nhân ung thư vú 42 Bảng 3.22 Mối liên hệ số CA15-3 với MCH bệnh nhân ung thư vú 43 Bảng 3.23 Mối liên hệ số CA15-3 với MCHC bệnh nhân ung thư vú 43 Bảng 3.24 Mối liên hệ số CA15-3 với PLT ởbệnh nhân ung thư vú 43 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Ước tính số lượng mắc ung thư toàn cầu năm 2020 Bảng 3.15 Thể tích trung bình tiểu cầu nhóm ung thư nhóm đối chứng Số lượng MPV cao Tỷ lệ % Nhóm ung thư vú 80 13 16,25 Không ung thư 80 p 0,0447 Kết phân tích bảng 3.15 cho thấy tỷ lệ bệnh nhân ung thư vú có MPV cao chiếm 16,25% so với 5% nhóm đối chứng Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p = 0,0447 Như vậy, kết nghiên cứu cho thấy khơng có thay đổi số lượng tiểu cầu máu ngoại vi bệnh nhân ung thư vú so với nhóm đối chứng Tuy nhiên, thể tích trung bình tiểu cầu (MPV) lớn bệnh nhân ung thư vú lại có xu hướng tăng lên Ngồi vai trị qua trọng q trình đông máu, tiểu cầu chứa nhiều yếu tố tăng trưởng PDGF, transforming growth factor –β, yếu tố tăng trưởng tế bào nội mô tiểu cầu (platelet -derived endothelial cell growth factor)[65] Các yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu thường sản xuất với số lượng lớn tế bào ung thư góp phần vào phát triển khối u [66] Trong ung thư vú, biểu thụ thể β- PDGF tương quan với đặc điểm bệnh lý lâm sàng khơng thuận lợi khả sống sót thấp [67] Số lượng tiểu cầu tăng cao dấu hiệu liên quan đến tiểu cầu, chẳng hạn PLR, MPV, PDW có liên quan đến tiên lượng xấu[68] Một số nghiên cứu phát nồng độ MPV tăng cao tương quan đáng kể với tiên lượng không thuận lợi thực quản[69], ung thu vú [70] ung thư biểu mô tế bào gan [71] Tuy nhiên, MPV thường không sử dụng yếu tố tiên lượng độc lập cho tình trạng bệnh lý ung thư mà cần sử dụng kết hợp với yếu tố tien lượng khác để chẩn đốn xác tình trạng bệnh nhân [72] 41 3.4 Mối liên hệ số CA15-3 với số số huyết học bệnh nhân ung thư vú Bảng 3.16 Đặc điểm số CA15-3 nhóm ung thư nhóm đối chứng Số lượng CA15-3 cao Tỷ lệ % Nhóm ung thư vú 80 11 13,75 Khơng ung thư 80 0 Tỷ lệ % 0,0012 Chỉ số CA15-3 cao chiếm 13,75% nhóm ung thư so với nhóm đối chứng 0% Sự khác biệt rõ rệt với p = 0,0012 Bảng 3.17 Mối liên hệ số CA15-3 với WBC bệnh nhân ung thư vú CA15-3 bình CA15-3cao thường (n) (n) WBC cao (n) 10 17 WBC bình thường (n) 59 63 Tổng 69 11 80 Tổng p 0,0002 Kết phân tích bảng 3.17 cho thấy, số 11 trường hợp ung thư vú có CA15-3 cao có tới trường hợp có số WBC cao Trong đó, có trường hợp CA15-3 cao số 63 trường hợp có số WBC bình thường Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p = 0,0002 Như thấy CA15-3 cao WBC cao có mối liên hệ với Bảng 3.18 Mối liên hệ số CA15-3 với NEU bệnh nhân ung thư vú CA15-3 bình CA15-3 cao thường (n) (n) NEU cao (n) NEU bình thường (n) 68 77 69 11 80 Tổng Tổng p 0,0482 Kết phân tích bảng 3.18 cho thấy số trường hợp NEU cao có trường hợp CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 66,7% có 42 9/77 trường hợp NEU bình thường có CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 11,7% Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p = 0,0482 Bảng 3.19 Mối liên hệ số CA15-3 với LYM bệnh nhân ung thư vú CA15-3bình CA15-3 cao Tổng p thường LYM thấp LYM bình thường 63 10 73 69 11 80 Tổng Kết phân tích bảng 3.19 khơng có mối liên hệ số Lympho thấp với CA15-3 cao (p = 1) Bảng 3.20 Mối liên hệ số CA15-3 với MO bệnh nhân ung thư vú CA15-3bình CA15-3 thường cao MO cao 10 13 MO bình thường 59 67 69 11 80 Tổng Tổng p 0,374 Kết phân tích bảng 3.20 cho thấy khơng có mối liên hệ tỷ lệ MO cao với CA15-3 cao (p = 0,374) Bảng 3.21 Mối liên hệ số CA15-3 với MCV bệnh nhân ung thư vú CA15-3bình thường CA15-3 cao Tổng MCV thấp 10 16 MCVbình thường 59 64 69 11 80 Tổng p 0,0020 Trong số 16 trường hợp có MCV thấp có trường hợp có CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 37,5%.Trong đó, có 5/64 trường hợp MCV bình thường có CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 7,7% Sự khác biệt rõ rệt với p = 0,0020 43 Như thấy MCV thấp có mối liên hệ với CA15-3 cao Bảng 3.22 Mối liên hệ số CA15-3 với MCH bệnh nhân ung thư vú CA15-3bình thường CA15-3 cao Tổng MCH thấp 17 24 MCH bình thường 52 56 69 11 80 Tổng p 0,0088 Kết phân tích bảng 3.22 cho thấy số 24 trường hợp MCH thấp có trường hợp CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 29,2% có 4/56 trường hợp MCH bình thường có CA15-3 cao chiếm tỷ lệ 7,14% Sự khác biệt rõ rệt với p = 0,0088 Bảng 3.23 Mối liên hệ số CA15-3 với MCHC bệnh nhân ung thư vú CA15-3 bình CA15-3 cao Tổng p thường MCHC thấp 14 17 MCHC bình thường 55 63 69 11 80 Tổng 0,5990 Kết phân tích trình bày bảng 3.23 cho thấy khơng có mối liên quan tỷ lệ MCHC thấp với CA15-3 cao bệnh nhân ung thư vú (p = 0,5990) Bảng 3.24 Mối liên hệ số CA15-3 với PLT ởbệnh nhân ung thư vú CA15-3 bình CA15-3 thường cao PLT cao 10 PLT bình thường 62 70 69 11 80 Tổng Tổng p 0,1107 Kết phân tích bảng 3.24 cho thấy khơng có mối liên hệ tỷ lệ PLT cao với CA15-3 cao (p = 0,1107) 44 Trong nghiên cứu ghi nhận tình trạng tăng số CA15-3 nhóm bệnh nhân ung thư vú Đồng thời, bệnh nhân có tình trạng tăng cao bất thường số CA15-3 đồng thời ghi nhận tăng cao số lượng bạch cầu (WBC) bạch cầu hạt trung tính (NEU) Đồng thời, số CA15-3 tăng cao có liên quan đến tình trạng biểu tỷ lệ thể tích trung bình hồng cầu thể tích máu (MCV) lượng huyết sắc tố trung bình có tế bào hồng cầu thể (MCH) thấp Chỉ số CA15-3 ghi nhận có tăng cao nhiều loại ung thư khác có ung thư vú CA15-3 khơng dùng để chẩn đốn phát sớm ung thư vú có nhiều ý nghĩa theo dõi điều trị tình trạng tiến triển khối u ung thư vú Nồng độ CA15-3 tăng cao bệnh nhân ung thư vú giai đoạn sớm ung thư khu trú, nhiên, bệnh nhân mắc ung thư vú di có biểu tăng cao CA15-3 huyết [43] Wu cộng xác định tăng cao số CA15-3 tăng cao bệnh nhân có tổn thương mơ vú nguyên nhân thất bại liệu pháp điều trị sử dụng [73] Tuy nhiên, số CA15-3 tăng 4-6 tuần đầu áp dụng phương pháp trị liệu sau lại giảm mà khơng có ý nghĩa để xác định hiệu liệu pháp điều trị [74] Mối liên hệ số CA15-3 số huyết học nghiên cứu bệnh lý ung thư Trong nghiên cứu gần đây, Baselice cộng xác định nhóm bệnh nhân ung thư vú có số CA15-3 có tỷ lệ thể tích hồng cầu thể tích máu (HCT) thấp hơn, với đó, tỷ lệ bạch cầu trung tính tế bào lympho cao [75] Tuy nhiên, thành phần tế bào máu chịu ảnh hưởng nhiều yếu tố độ tuổi, tình trạng bệnh lý nền, tình trạng nhiễm trùng với cỡ mẫu nghiên cứu nhỏ nên khó để xác định xác mối quan hệ xác thành phần máu ngoại vi số CA15-3 44 Như vậy, nghiên cứu này, xác định số CA15-3 tăng cao nhóm bệnh nhân ung thư vú, đồng thời, số CA15-3 có liên quan đến gia tăng số lượng bạch cầu bạch cầu hạt trung tính, đồng thời gia tăng số CA15-3 có mối quan hệ với giảm thể tích hồng cầu lượng huyết sắc tố thấp 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Ở nhóm bệnh nhân ung thư vú có tăng số lượng tế bào bạch cầu Mono chiếm tỷ lệ 13,75 % bệnh nhân giảm số lượng tế bào bạch cầu Lympho 8,7 % Nhóm bệnh nhân ung thư vú có suy giảm số lượng tế bào hồng cầu chiếm tỷ lệ 5%, số bệnh nhân giảm lượng huyết sắc tố thể tích khối hồng cầu chiếm tỷ lệ 11,25%, số bệnh nhân có nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu giảm 21,25 % Ở bệnh nhân ung thư vú khơng có thay đổi số lượng tiểu cầu có xu hướng tăng thể tích trung bình tiểu cầu máu ngoại vi chiếm tỷ lệ 16,25% Ở bệnh nhân ung thư vú có gia tăng số CA15-3 máu ngoại vi, đồng thời có gia tăng số lượng bạch cầu bạch cầu hạt trung tính, với giảm thể tích trung bình hồng cầu lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu Kết luận chung: Ở bệnh nhân ung thư vú có thay đổi đáng kể số số huyết học số số huyết học có mối liên hệ mật thiết với số CA15-3 cao Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu thay đổi thành phần máu ngoại vi số CA15-3 bệnh nhân ung thư vú với cỡ mẫu lớn nhiều tiêu chí phân loại bệnh nhân 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lương Ngọc Khuê, et al., Hướng dẫn chẩn đoán điều trị ung thư vú Bộ Y tế 2020 Hanahan, D and R.A Weinberg, The hallmarks of cancer cell, 2000 100(1): p 57-70 Sung, H., et al., Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries CA: a cancer journal for clinicians, 2021 71(3): p 209-249 Ginsburg, O., et al., The global burden of women’s cancers: a grand challenge in global health The Lancet, 2017 389(10071): p 847-860 Sharma, R., Breast cancer incidence, mortality and mortality-toincidence ratio (MIR) are associated with human development, 1990– 2016: evidence from Global Burden of Disease Study 2016 Breast Cancer, 2019 26(4): p 428-445 Porter, P., ―Westernizing‖ women's risks? Breast cancer in lowerincome countries New England Journal of Medicine, 2008 358(3): p 213-216 Łukasiewicz, S., et al., Breast Cancer—Epidemiology, Risk Factors, Classification, Prognostic Markers, and Current Treatment Strategies— An Updated Review Cancers, 2021 13(17): p 4287 Folkerd, E and M Dowsett, Sex hormones and breast cancer risk and prognosis The Breast, 2013 22: p S38-S43 Giordano, S.H., Breast cancer in men New England Journal of Medicine, 2018 378(24): p 2311-2320 10 McGuire, A., et al., Effects of age on the detection and management of breast cancer Cancers, 2015 7(2): p 908-929 11 Brewer, H.R., et al., Family history and risk of breast cancer: an analysis accounting for family structure Breast cancer research and treatment, 2017 165(1): p 193-200 47 12 Çelik, A., et al., Relationship of breast cancer with ovarian cancer A Concise Review of Molecular Pathology of Breast Cancer edn, 2015: p 187-202 13 Shiovitz, S and L.A Korde, Genetics of breast cancer: a topic in evolution Annals of Oncology, 2015 26(7): p 1291-1299 14 Park, D., et al., Rare mutations in XRCC2 increase the risk of breast cancer The American Journal of Human Genetics, 2012 90(4): p 734739 15 Yedjou, C.G., et al., Health and racial disparity in breast cancer Breast cancer metastasis and drug resistance, 2019: p 31-49 16 Verloop, J., et al., Cancer risk in DES daughters Cancer Causes & Control, 2010 21(7): p 999-1007 17 Palmer, J.R., et al., Prenatal diethylstilbestrol exposure and risk of breast cancer Cancer Epidemiology and Prevention Biomarkers, 2006 15(8): p 1509-1514 18 Chen, X., et al., Physical activity and risk of breast cancer: a metaanalysis of 38 cohort studies in 45 study reports Value in Health, 2019 22(1): p 104-128 19 Hoffman‐ Goetz, L., et al., Possible mechanisms mediating an association between physical activity and breast cancer Cancer: Interdisciplinary International Journal of the American Cancer Society, 1998 83(S3): p 621-628 20 Patani, N., L.A Martin, and M Dowsett, Biomarkers for the clinical management of breast cancer: international perspective International journal of cancer, 2013 133(1): p 1-13 21 Iqbal, N and N Iqbal, Human epidermal growth factor receptor (HER2) in cancers: overexpression and therapeutic implications Molecular biology international, 2014 2014 48 22 Nishimura, R., et al., Ki-67 as a prognostic marker according to breast cancer subtype and a predictor of recurrence time in primary breast cancer Experimental and therapeutic medicine, 2010 1(5): p 747-754 23 Caly, M., et al., Analysis of correlation between mitotic index, MIB1 score and S-phase fraction as proliferation markers in invasive breast carcinoma Methodological aspects and prognostic value in a series of 257 cases Anticancer research, 2004 24(5B): p 3283-3288 24 Li, Z., et al., Prognostic value of reduced E-cadherin expression in breast cancer: a meta-analysis Oncotarget, 2017 8(10): p 16445 25 Zhou, S.-y., et al., The emerging role of circular RNAs in breast cancer Bioscience reports, 2019 39(6) 26 Tran, A.M., et al., A new world of biomarkers and therapeutics for female reproductive system and breast cancers: circular RNAs Frontiers in cell and developmental biology, 2020 8: p 50 27 Al Deen, N.N., et al., A risk progression breast epithelial 3D culture model reveals Cx43/hsa_circ_0077755/miR-182 as a biomarker axis for heightened risk of breast cancer initiation Scientific reports, 2021 11(1): p 1-18 28 Williams, A.B and B Schumacher, p53 in the DNA-damage-repair process Cold Spring Harbor perspectives in medicine, 2016 6(5): p a026070 29 Dumay, A., et al., Distinct tumor protein p53 mutants in breast cancer subgroups International journal of cancer, 2013 132(5): p 1227-1231 30 Biganzoli, E., et al., p53 status identifies two subgroups of triplenegative breast cancers with distinct biological features Japanese journal of clinical oncology, 2011 41(2): p 172-179 31 Guthrie, G.J., et al., The systemic inflammation-based neutrophil– lymphocyte ratio: experience in patients with cancer Critical reviews in oncology/hematology, 2013 88(1): p 218-230 49 32 Tavassoli, F.A., Pathology and genetics of tumours of the breast and female genital organs World Hhealth Organization Classification of Tumours, 2003 33 Edition, S., S Edge, and D Byrd, AJCC cancer staging manual AJCC cancer staging manual, 2017 34 Vuong, D., et al., Molecular classification of breast cancer Virchows Archiv, 2014 465(1): p 1-14 35 Rahman, G.A., Breast conserving therapy: a surgical technique where little can mean more Journal of surgical technique and case report, 2011 3(1) 36 Rouzier, R., et al., Breast cancer molecular subtypes respond differently to preoperative chemotherapy Clinical cancer research, 2005 11(16): p 5678-5685 37 Yang, T.J and A.Y Ho, Radiation therapy in the management of breast cancer Surgical Clinics, 2013 93(2): p 455-471 38 Joshi, S.C., et al., Role of radiotherapy in early breast cancer: an overview International journal of health sciences, 2007 1(2): p 259 39 Tremont, A., J Lu, and J.T Cole, Endocrine therapy for early breast cancer: updated review Ochsner Journal, 2017 17(4): p 405-411 40 Group, E.B.C.T.C., Effects of chemotherapy and hormonal therapy for early breast cancer on recurrence and 15-year survival: an overview of the randomised trials The Lancet, 2005 365(9472): p 1687-1717 41 Pegram, M.D and D.M Reese Combined biological therapy of breast cancer using monoclonal antibodies directed against HER2/neu protein and vascular endothelial growth factor in Seminars in oncology 2002 Elsevier 42 Shao, Y., et al., Elevated levels of serum tumor markers CEA and CA153 are prognostic parameters for different molecular subtypes of breast cancer PloS one, 2015 10(7): p e0133830 50 43 Di Gioia, D., et al., Kinetics of CEA and CA15-3 correlate with treatment response in patients undergoing chemotherapy for metastatic breast cancer (MBC) Tumor Biology, 2011 32(4): p 777-785 44 Nisman, B., et al., The Prognostic Significance of LIAISON® CA15-3 Assay in Primary Breast Cancer Anticancer research, 2013 33(1): p 293-299 45 Sturgeon, C.M., et al., National Academy of Clinical Biochemistry laboratory medicine practice guidelines for use of tumor markers in testicular, prostate, colorectal, breast, and ovarian cancers 2008, Oxford University Press 46 Wang, G., et al., Nipple discharge of CA15-3, CA125, CEA and TSGF as a new biomarker panel for breast cancer International journal of molecular sciences, 2014 15(6): p 9546-9565 47 Alberts, B., et al., Molecular biology of the cell 2017: WW Norton & Company 48 Byrnes, J.R and A.S Wolberg, Red blood cells in thrombosis Blood, The Journal of the American Society of Hematology, 2017 130(16): p 1795-1799 49 Sakuragi, S., et al., Reference value and annual trend of white blood cell counts among adult Japanese population Environmental health and preventive medicine, 2013 18(2): p 143-150 50 Kemona, H., et al., Phagocytic activity of human blood platelets examined by electron microscopy Folia Haematologica (Leipzig, Germany: 1928), 1986 113(5): p 696-702 51 Grivennikov, S.I., F.R Greten, and M Karin, Immunity, inflammation, and cancer Cell, 2010 140(6): p 883-899 52 Gordon, S and F.O Martinez, Alternative activation of macrophages: mechanism and functions Immunity, 2010 32(5): p 593-604 51 53 Williams, C.B., E.S Yeh, and A.C Soloff, Tumor-associated macrophages: unwitting accomplices in breast cancer malignancy NPJ breast cancer, 2016 2(1): p 1-12 54 Yang, J., et al., The role of tumor-associated macrophages in breast carcinoma invasion and metastasis International journal of clinical and experimental pathology, 2015 8(6): p 6656 55 Honkanen, T.J., et al., Prognostic and predictive role of tumourassociated macrophages in HER2 positive breast cancer Scientific reports, 2019 9(1): p 1-9 56 Guo, W., et al., Prognostic value of neutrophil‐ to‐ lymphocyte ratio and platelet‐ to‐ lymphocyte ratio for breast cancer patients: An updated meta‐ analysis of 17079 individuals Cancer medicine, 2019 8(9): p 4135-4148 57 Mouchemore, K.A., R.L Anderson, and J.A Hamilton, Neutrophils, G‐ CSF and their contribution to breast cancer metastasis The FEBS journal, 2018 285(4): p 665-679 58 Hu, R.-j., et al., Preoperative lymphocyte-to-monocyte ratio predicts breast cancer outcome: a meta-analysis Clinica chimica acta, 2018 484: p 1-6 59 Goto, W., et al., Predictive value of lymphocyte-to-monocyte ratio in the preoperative setting for progression of patients with breast cancer BMC cancer, 2018 18(1): p 1-9 60 Schlesinger, M., Role of platelets and platelet receptors in cancer metastasis Journal of hematology & oncology, 2018 11(1): p 1-15 61 Zhang, M., et al., High platelet-to-lymphocyte ratio predicts poor prognosis and clinicopathological characteristics in patients with breast cancer: A meta-analysis BioMed research international, 2017 2017 62 Koh, C., et al., Utility of pre-treatment neutrophil–lymphocyte ratio and platelet–lymphocyte ratio as prognostic factors in breast cancer British journal of cancer, 2015 113(1): p 150-158 52 63 Carter, C., Alterations Toxicology, 2018: p 249 in Blood Components Comprehensive 64 Xie, X., et al., Reduced red blood cell count predicts poor survival after surgery in patients with primary liver cancer Medicine, 2015 94(8) 65 Ishikawa, F., et al., Identification of angiogenic activity and the cloning and expression of platelet-derived endothelial cell growth factor Nature, 1989 338(6216): p 557-562 66 Miyazono, K., et al., Latent forms of TGF‐ β: Structure and biology Annals of the New York Academy of Sciences, 1990 593(1): p 51-58 67 Paulsson, J., et al., Prognostic significance of stromal platelet-derived growth factor β-receptor expression in human breast cancer The American journal of pathology, 2009 175(1): p 334-341 68 Takeuchi, H., et al., Comparison of the prognostic values of preoperative inflammation-based parameters in patients with breast cancer PloS one, 2017 12(5): p e0177137 69 Zhang, F., et al., Combination of platelet count and mean platelet volume (COP-MPV) predicts postoperative prognosis in both resectable early and advanced stage esophageal squamous cell cancer patients Tumor Biology, 2016 37(7): p 9323-9331 70 Gu, M., et al., Pre-treatment mean platelet volume associates with worse clinicopathologic features and prognosis of patients with invasive breast cancer Breast cancer, 2016 23(5): p 752-760 71 Cho, S.Y., et al., Mean platelet volume/platelet count ratio in hepatocellular carcinoma Platelets, 2013 24(5): p 375-377 72 Takeuchi, H., et al., The prognostic impact of the platelet distribution width-to-platelet count ratio in patients with breast cancer PloS one, 2017 12(12): p e0189166 73 Wu, S.-g., et al., Serum levels of CEA and CA15-3 in different molecular subtypes and prognostic value in Chinese breast cancer The Breast, 2014 23(1): p 88-93 53 74 Ali, H.Q., N.K Mahdi, and M.H Al-Jowher, The value of CA15-3 in diagnosis, prognosis and treatment response in women with breast cancer J Pak Med Assoc, 2013 63(9): p 1138-41 75 Baselice, S., et al., Impact of Breast Tumor Onset on Blood Count, Carcinoembryonic Antigen, Cancer Antigen 15-3 and Lymphoid Subpopulations Supported by Automatic Classification Approach: A Pilot Study Cancer Control, 2021 28: p 10732748211048612 54