Bài giảng Kỹ thuật thu hồi và hoàn thiện sản phẩm: Chương 4.1 - Các phương pháp sắc ký

Bài giảng Kỹ thuật thu hồi hoàn thiện sản phẩm: Chương 4.1 tìm hiểu về các phương pháp sắc ký gồm: Sắc ký trao đổi ion, sắc kí ái lực, sắc kí lọc gel, sắc kí đảo pha, sắc kí tương tác kỵ nước. Mời quý thầy cô và các em cùng tham khảo!

Chương IV Các phương pháp tinh sản phẩm 4.1 Các phương pháp sắc ký 4.1.1 Sắc ký trao đổi ion 4.1.2 Sắc kí lực 4.1.3 Sắc kí lọc gel 4.1.4 Sắc kí đảo pha 4.1.5 Sắc kí tương tác kỵ nước 4.2 Phương pháp kết tinh 4.1.Sắc ký trao đổi ion Nguồn protein Tách chiết Enzyme thô Kết tủa Tinh sạch Lọc gel Trao đổi ion 4.1.1Sắc ký trao đổi ion ION EXCHANGE CHROMATOGRAPHY Nguyên tắc trao đổi ion Các dạng sắc ký trao đổi ion Nhựa trao đổi ion - Tính chất của nhựa - Cách lựa chọn nhựa Thao tác thực hiện quá trình - lựa chọn dung dịch đệm Nguyên tắc trao đổi ion • Protein là phân tử tích điện Có thể ở dạng điện tích dương hoặc điện tích âm, cũng có thể trung hòa về điện Cation pH=pI Anion pH tăng Các dạng sắc ký trao đổi ion • Có dạng tích điện (+) và (-) của phân tử protein • Liên kết với nhóm chức tích điện trái dấu - Dạng sắc ký trao đổi anion (anion exchange chromatography) - Dạng sắc ký trao đổi cation (cation exchange chromatography) Nhựa trao đổi ion + + - + Anion exchanger tích điện dương bao quanh - Nhựa trao đổi anion- Anionit The charged groups linked to ion exchange matrices Anion exchangers Functional group diethyl-aminoethyl (DEAE) -OCH2CH2N+H(CH2CH3)2 quaternary aminoethyl (QAE) -OCH2CH2N+(C2H5)2CH2CH(OH)CH3 quaternary ammonium (Q) -CH2N+(CH3)3 Cation exchangers Functional group carboxymethyl (CM) -OCH2COO- sulfopropyl (SP) -CH2CH2CH2SO3- methylsulfonate (S) -CH2SO310 a/ Nhựa sunfon: • Trong dung dịch lỗng ở nhiệt đợ thường : -ái lực của cation với nhựa tăng điện tích của cation tăng: Na+Li+>Na+>K+>Rb+ • Đới với ionit nhóm chức aminoaxetat: Fe2+>Mn2+>Ca2+>Mg2+>Ba2+>Sn2+ Li+Na+>K+ • Đới với anionit bazơ mạnh:F-