Luận án tiến sĩ nông nghiệp nghiên cứu xác định một số chỉ tiêu sinh sản và thử nghiệm thụ tinh nhân tạo cho lợn rừng trong điều kiện nuôi nhốt tại khu vực phía bắc việt nam

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ PHÙNG QUANG TRƯỜNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH SẢN VÀ THỬ NGHIỆM THỤ TINH NHÂN TẠO CHO LỢN RỪNG TRONG ĐIỀU KIỆN NI NHỐT TẠI KHU VỰC PHÍA BẮC VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÀ NỘI, 2017 H C VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ PHỐNG QUANG TR NG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH SẢN VÀ THỬ NGHIỆM THỤ TINH NHÂN TẠO CHO LỢN RỪNG TRONG ĐIỀU KIỆN NI NHỐT TẠI KHU VỰC PHÍA BẮC VIỆT NAM Chuyên ngành : Sinh sản Bệnh sinh sản gia súc Mã số : 62.64.01.06 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Văn Thanh TS Vũ Như Quán HĨăN I,ă2017 L IăCAMăĐOAN Tôi xin cam đoan đơy lƠ cơng trình nghiên c u c a riêng tôi, k t qu nghiên c uđ c trình bƠy lu n án lƠ trung thực, khách quan vƠ ch a t ng dùng b o v đ l y b t kǶ học v nƠo Tôi xin cam đoan r ng giúp đ cho vi c thực hi n lu n án đư đ n, thơng tin trích d n lu n án nƠy đ u đ cc m c ch rõ ngu n g c Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tácăgi ălu năán PhùngăQuangăTr i ng L IăC Mă N Trong su t th i gian học t p, nghiên c u hoàn thành lu n án, đư nh n đ h c ng d n, ch b o t n tình c a th y cô giáo, giúp đ , động viên c a b n bè, đ ng nghi p vƠ gia đình Nhân d p hồn thành lu n án, cho phép tơi đ c bày t lịng kính trọng bi t n sơu s c đ n PGS.TS Nguyễn Văn Thanh vƠ TS Vũ Nh Quán đư t n tình h ng d n, dành nhi u cơng s c, th i gian t o u ki n cho tơi su t q trình học t p thực hi n đ tài Tôi xin bày t lòng bi t n chơn thƠnh t i Ban Giám đ c, Ban Qu n lý đƠo t o, Bộ môn môn Ngo i ậ S n, Khoa Thú y - Học vi n Nông nghi p Vi t Nam đư t n tình giúp đ tơi trình học t p, thực hi n đ tài hồn thành lu n án Tơi xin chơn thƠnh cám n Lưnh đ o Trung tơm Nghiên c u Bị vƠ Đ ng c Ba Vì, đư t o u ki n cho đ c thực hi n đ tƠi Tôi xin chơn thƠnh c m n TS Tăng Xuơn L u, Giám đ c Trung tơm Nghiên c u Bò vƠ Đ ng c Ba Vì ch trang tr i l n R ng t i huy n Tam Đ o t nh Vĩnh Phúc, huy n L Bình vƠ huy n Ba Vì ThƠnh ph HƠ Nội, đư h ng S n t nh Hòa ng d n, giúp đ vƠ t o u ki n t t nh t cho thực hi n đ tƠi Xin chân thành c m n gia đình, ng i thân, b n bè, đ ng nghi p đư t o u ki n thu n l i vƠ giúp đ v mặt, động viên khuy n khích tơi hồn thành lu n án./ Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tácăgi ălu năán PhùngăQuangăTr ii ng M CăL C L i cam đoan i L i c m n ii M c l c iii Danh m c ch vi t t t vi Danh m c b ng vii Danh m c nh viii Danh m c hình ix Trích y u lu n án x Thesis abstract xii Ph n M đ u 1.1 Tính c p thi t c a đ tài 1.2 M c tiêu nghiên c u đ tài 1.3 Ph m vi nghiên c u 1.3.1 Đ a m 1.3.2 Th i gian 1.4 Nh ng đóng góp m i c a đ tài 1.5 ụ nghĩa khoa học thực tiễn c a đ tài Ph n T ng quan tài li u 2.1 tình hình chăn nuôi l n R ng th gi i Vi t Nam 2.1.1 Ngu n g c c a l n R ng 2.1.2 Chăn nuôi l n R ng th gi i 2.1.3 Chăn nuôi l n R ng t i Vi t Nam 11 2.2 Đặc m, đặc tính, sinh tr ng sinh s n c a l n R ng 13 2.2.1 Đặc m vƠ đặc tính c a l n R ng 13 2.2.2 Kh sinh tr ng c a l n R ng 18 2.2.3 Kh sinh s n c a l n R ng 20 2.2.4 Nuôi d ng chăm sóc l n R ng 22 2.2.5 B nh, t t kh thích ng ch ng b nh c a l n R ng đ i v i môi tr 2.3 ng s ng 25 Vai trò c a kỹ thu t th tinh nhân t o chăn nuôi l n R ng 26 iii Ph n V t li uăvƠăph ngăphápănghiênăc u 27 3.1 Đ a m nghiên c u 27 3.2 Th i gian nghiên c u 28 3.3 Đ it 3.4 Nội dung nghiên c u 28 ng nghiên c u 28 3.4.1 Xác đ nh s ch tiêu sinh s n c a đƠn l n R ng nh p nội t Thái Lan bao g m 28 3.4.2 Th nghi m th tinh nhân t o cho l n R ng nh p nội t Thái Lan 29 3.5 Ph ng pháp nghiên c u 29 3.5.1 Chu ng tr i vƠ ph 3.5.2 Ph ng th c chăn nuôi c a đƠn l n nghiên c u 29 ng pháp theo dõi ch tiêu sinh s n 31 3.5.3 Th nghi m th tinh nhân t o cho l n R ng nh p nội t Thái Lan 33 3.5.4 Ph ng pháp x lý s li u 39 Ph n K t qu th o lu n 40 4.1 Một s ch tiêu sinh s n đƠn l n r ng nh p nội t Thái Lan 40 4.1.1 Tu i thành th c tính d c 40 4.1.2 Chu kǶ động d c 44 4.1.3 Tu i ph i gi ng l n đ u 45 4.1.4 Th i m ph i gi ng thích h p 48 4.1.5 Th i gian mang thai 50 4.1.6 Tu i đ l a đ u 52 4.1.7 S sinh l a 55 4.1.8 Kh i l ng l n l a tu i khác 57 4.1.9 Tỷ l nuôi s ng đ n 24h 61 4.1.10 Tỷ l nuôi s ng đ n 60 ngày 63 4.1.11 Th i gian động d c l i sau cai s a 65 4.1.12 Kho ng cách gi a hai l a đ 67 4.2 K t qu nghiên c u v th tinh nhân t o cho l n R ng 69 4.2.1 Hu n luy n l n R ng nh y giá 69 4.2.2 Đánh giá ch t l ng tinh d ch l n R ng 72 4.2.3 B o t n tinh d ch l n R ng d ng l ng 84 4.2.4 K t qu d n tinh cho l n 88 iv Ph n K t lu n ki n ngh 95 5.1 K t lu n 95 5.2 Ki n ngh 96 Danh m c cơng trình cơng b có liên quan đ n lu n án 97 Tài li u tham kh o 98 Ph l c 105 v DANHăM CăCH ăVI TăT T Ch ăvi tăt t ụănghƿaăc aăch ăvi tăt t A Ho t lực tinh trùng C Concentration: N ng độ tinh trùng CK Chu kǶ cs Cộng ĐVT Đ n v tính FSH Follicle Stimulating Hormone K Tỷ l tinh trùng kǶ hình SE Standard Error: Sai s chu n TCVN Tiêu chu n Vi t Nam TTNT Th tinh nhơn t o V Volume: L VAC T ng s tinh trùng s ng ti n thẳng/l n khai thác ng xu t tinh vi DANHăM CăCỄCăB NGă Tênăb ng STT Trang 4.1 Tu i thành th c tính d c c a l n R ng 40 4.2 Chu kǶ động d c c a l n R ng 44 4.3 Tu i ph i gi ng l n đ u c a đƠn l n R ng 46 4.4 Th i m ph i gi ng thích h p c a l n R ng 49 4.5 Th i gian mang thai c a l n R ng 51 4.6 Tu i đ l a đ u c a l n R ng 53 4.7 S l 4.8 Kh i l 4.9 Th i gian động d c l i c a l n R ng m sau cai s a l n 65 4.10 Kho ng cách gi a l a đ c a l n R ng 67 4.11 K t qu hu n luy n khai thác tinh l n R ng 70 4.12 Màu s c tinh d ch c a l n R ng 72 4.13 L 4.14 Ho t lực tinh trùng c a l n R ng (A, cho điểm từ 0,00 đến 1,00) 76 4.15 N ng độ tinh trùng c a l n R ng (C, triệu/ml) 78 4.16 T ng s ng sinh ra/l a c a l n R ng 55 ng l n R ng t s sinh đ n 10 tháng tu i t i đ a bàn nghiên c u 58 ng xu t tinh đư lọc c a l n R ng (V, ml) 74 tinh trùng ti n thẳng l n xu t tinh c a l n R ng (VAC, tỷ/lần) 80 4.17 Tỷ l kǶ hình c a tinh trùng l n R ng (K, %) 81 4.18 pH tinh d ch c a l n R ng 83 4.19 T ng h p s ch t l 4.20 K t qu b o t n tinh d ch l n R ng môi tr 4.20a Ch s s c s ng t đ i (Sa=∑at) c a tinh trùng l n thí nghi m đ b o t n môi tr 4.21 ng tinh d ch l n R ng 84 ng L.V.C.N 85 c ng L.V.C.N 86 Tỷ l th thai tỷ l đ c a l n R ng l n Móng Cái đ c d n tinh b ng tinh d ch l n R ng 88 4.22 Tỷ l nuôi s ng l n đ n 24 gi 60 ngày tu i sau sinh 91 4.23 Kh i l ng s sinh vƠ kh i l ng 60 ngày tu i (kg) 93 vii DANHăM Că NH Tênă nh STT Trang 4.1 L n R ng nghiên c u thành th c v tính 182 ngày tu i 41 4.2 L n R ng nghiên c u ph i gi ng l n đ u 47 4.3 L n nghiên c u th i kǶ ắmê ìẰ cho k t qu ph i gi ng cao nh t 50 4.4 L n R ng nghiên c u đ l a đ u 54 4.5 S sinh ra/l a c a l n R ng nghiên c u 56 4.6 L n R ng s sinh nghiên c u 59 4.7 L n R ng 60 ngày tu i nghiên c u 59 4.8 L n R ng tháng tu i nghiên c u 60 4.9 L n R ng 10 tháng tu i nghiên c u 60 4.10 Làm quen v i l n đực nghiên c u 69 4.11 Hu n luy n l n đực nghiên c u ti p xúc giá nh y 69 4.12 L n đực nghiên c u ti p xúc giá 71 4.13 Khai thác tinh l n R ng s nghiên c u 71 4.14 Khai thác tinh l n R ng s nghiên c u 71 4.15 Khai thác tinh l n R ng s nghiên c u 71 4.16 Tinh d ch l n R ng có màu tr ng s a 73 4.17 Ki m tra ch t l 4.18 Tinh dich l n R ng nghiên c u sau pha loưng môi tr ng tinh d ch l n 77 ng L.V.C.N, b o qu n vƠ đ a ph i gi ng 87 4.19 D n tinh cho l n R ng nghiên c u 89 4.20 D n tinh cho l n Móng nghiên c u 89 4.21 ĐƠn l n R ng nghiên c u sinh 10 b ng ph ng pháp th tinh nhân t o 90 4.22 ĐƠn l n Móng Cái lai l n R ng nghiên c u sinh 10 b ng ph 4.23 ng pháp th tinh nhân t o 90 ĐƠn l n R ng R ng lai Móng Cái nghiên c u viii 60 ngày tu i 92 47 Aparicio M., M A De Andrés and C Piñeiro (2013) Farrowing interval: how does it affect productivity? Farm data analysis 04-Nov-2013 Downloaded 12.05.2015 from www.pig333.com 48 Chongkasikita N., T Vearasilpa and U Meulen (2001) Effect of breeding on different production parameters in wild pigs (Sus scrofa), crossbred pigs and Meishan pigs in Thailand Deutscher Tropentag - Bonn pp 9-11 Conference on International Agricultural Research for Development 49 Choy Y H., G J Jeon, T H Kim, B H Choi, I C Cheong, H K Lee, K S Seo, S D Kim, Y I Park and H W Chung (2002) Genetic Analyses of Carcass Characteristics in Crossbred Pigs: Cross between Landrace Sows and Korean Wild Boars Anim Sci Vol 15(8) pp 1080-1084 50 Chung K H., I C Kim and J H Son (2013) Effects of Different Concentrations of Escherichia coli and Days of Preservation on Boar Sperm Quality Reprod Dev Biol 37(4) pp 213-217 51 Romera C.A (2008) Better boar training Pig Progress, Vol 24(No 10ậ2008): 30ậ32 52 Dyck G W (1987) Causes of piglet death from birth to weaning Can J Anim Sci Downloaded Oct 02, 2016 from http//www.nrcresearchpress.com pp 543ậ551 53 DziQciolowski R M., C M H Clarke and C M Frampton (1992) Reproductive characteristics of feral pigs in New Zealand Acta Theriologica 37(3) pp 259ậ270 54 Estienne M and A Harper (2001) Techniques for Training Boars for Semen Collection The Pig Site Downloaded 01 January 2001 from http//www.thepigsite.com / /techniques-for-training-boars 55 Farm Diversitification (2010) British wild boar (2010) All you need to know about wild boar Downloaded 10.02.2014 from http://www.sac.ac.uk/consulting/ services/fh/farmdiversification/database/novellivestock/wildboar 56 Fischman M L., J Suhevic, M A Rivolta and H O Cisale (2003) Collection of wild boar semen by electroejaculation The Veterinary record September 20, 2003, pp 365-366 57 Fonseca C., A A Silva, J Alves, J Vingada and A M V M Soares (2011) Reproductive performance of wild boar females in Portugal European Journal of Wildlife Research 57(2) pp 363ậ371 102 58 Fonseca C., P Santos, A Monzón, P Bento, A A Silva, J Alves, A Silvério, A M V M Soares and F F Petrucci (2004) Reproduction in the wild boar (Sus scrofa Linnaeus, 1758) populations of Portugal Galemys, 16(nº especial) pp 53-65 59 Govindasamy K., P Ponraj, S Thulasiraman, J Andonissamy, S Naskar, A Das, D Hasin and S K Baishya (2016) Efficacy of different extenders on sperm characteristics and fertility in crossbred pigs of north-eastern India Vet arhiv 86(4) pp 515-528 60 Henry V G (1968) Length of Estrous Cycle and Gestation in European Wild Hogs The Journal of Wildlife Management, Vol 32(2) pp 406ậ408 61 Hugh S (2010) French hunters urged to declare war on the boar Downloaded 4.7.2014 from http://www.bbc.co.uk/news/world-europe-11948612?print=true 62 Ick D (1980) Deep freeze preservation of wild boar and F1-hybrid semen in plastic tubes Results of an insemination trial Publisher: Tierarztliche Hochschule Hannover, German Federal Republic pp.68 63 Johnson K G., R W Duncan and M R Pelton (1982) Reproductive Biology of European Wild Hogs in the Great Smoky Mountains National Park Proc Annu Conf Southeast Assoc Fish and Wildl Agencies Vol 36 pp.552ậ564 Downloaded 3.5.2015 from http//www.seafwa.org/resource/ /JOHNSON-552-564.pdf) 64 King G J and J W Macpherson (1966) Alkaline and Acid Phosphatase Activity, pH and Osmotic Pressure of Boar Semen Can J Comp Med Vet Sci 1966 Nov 30(11): pp 304-305, 306-307 65 Knox R., K Willenburg and G Miller (2005) The Optimal Time For Breeding Swine In ắSwine Reproduction - Illinois Livestock TrailẰ Downloaded 07.07.2015 from http://livestocktrail.illinois.edu 66 Marchev Y and B Szostak (2013) The season effect on sexual behavior and sperm quality of EastậBalkan boars Acta Sci Pol Zootechnica 12(2) pp 31ậ38 67 Mauget R (2013) Seasonality of Reproduction in the Wild Boar (pp 509-512) In Control of Pig Reproduction, eds Cole D.J.A and Foxcroft G.R (2013) Downloaded 12.05.2015 from https://books.google.com 68 Murta D V F., D S Costa, M D Santos, F J C Faria and T A R Paula (2013) Corporal and testicular biometry in wild boar from birth to 12 months of age Revista Ceres Vol 60(1) pp 001- 006, Viỗosa Jan./Feb 2013 103 69 Orzoờek A., P Wysocki, J Strzeżek, G M Koziorowska, A Dziekońska and W Kordan (2015) Boar sperm quality in relation to presence of sp32-like protein in spermatozoa ậ preliminary studies Bull Vet Inst Pulawy (59): 279-286 70 Petrocelli H., C Batista and J Gosálvez (2015) Seasonal variation in sperm characteristics of boars in southern Uruguay R Bras Zootec 44(1) pp 1-7 71 Reese D E., T G Hartsock and W E M Morrow (2015) Baby Pig Management Birth to Weaning Downloaded December 04, 2015 from articles.extension.org/ / baby-pig-management-birth-to-w ; 72 Rodríguez A L (2012) Fresh boar semen: quality control and production Dissertation submitted in fulfillment of the requirements for the degree of Doctor in Veterinary Sciences (PhD), Faculty of Veterinary Medicine, Ghent University 29th March 2012 73 Selena M (2010) What the French can teach us about wild boar Downloaded 2.15.2015 from http://www.shootingtimes.co.uk/features/385173/ 74 Subalini E., G L L P Silva and C M B Demetawewa (2010) Phenotypic Characterization and Production Performance of Village Pigs in Sri Lanka Downloaded December 12, 2010 from https://www.researchgate.net 75 Taylor R B., E C Hellgren, T M Gabor and L M Ilse (1998) Reproduction of feral pigs in southern Texas Journal of MammPalogy 79(4) pp 1325-1331 76 Vila R M (2013) Welfare and management strategies to reduce preweaning mortality in piglets Tesis doctoral Universitat Autonoma de Barcelona 77 Watthanakun W and U Ratchathani (1999) Preliminary study on the performance of wild boar piglets under intensive management Downloaded December 04, 2015 from www.agris.fao.org/agris-search 78 Wolf J and J Smital (2009) Quantification of factors affecting semen traits in artificial insemination boars from animal model analyses J Anim Sci (87) pp 1620ậ1627 104 PH ăL Că H NGăD NăK ăTHU T KHAIăTHỄCăVĨăS ăD NGăL NăR NGăĐ CăGI NG 1.ăĐ IăT NGăỄPăD NG L n R ng đực s d ng khai thác l y tinh b ng ph ng pháp nh y giá 2.ăYểUăC UăK ăTHU TăVĨăM CăTIểUăC AăQUYăTRỊNH Yêuăc uăk ăthu t Quy trình đ n gi n, dễ thực hi n Đ m b o ch độ khai thác tinh cho xu t ch t l ng cao nh t M cătiêuăquyătrình Hu n luy n khai thác vƠ pha ch tinh d ch l n R ng ph c v công tác th tinh nhơn t o cho l n R ng l n R ng lai l n Móng 3.ăN IăDUNGăQUIăTRỊNH 3.1.ăHu năluy năl năR ng đ căgi ng 3.1.1 Tuổi huấn luyện - L n R ng đực chọn hu n luy n khai thác tinh ph i đ thu t viên t cai s a tháng tu i - L n R ng đực đ 40-60 kg c hu n luy n nh y giá c lƠm quen v i kỹ tháng tu i vƠ đ t kh i l ng 3.1.2 Điều kiện huấn luyện - T o giá nh y: V t li u lƠm giá có th b ng s t, gỗ xi măng Yêu c u giá nh y ph i ch c ch n, bên giá nh y ta lƠm ch i đ cho l n R ng đực gác chơn - N i hu n luy n: có th hu n luy n đực gi ng t i phòng hu n luy n riêng hu n luy n t i chu ng Tuy nhiên c n ph i đ m b o an toƠn cho đực gi ng vƠ ng hu n luy n - Ng i i hu n luy n: Ph i có tính kiên nh n, ch u đựng, kiên trì vƠ có nhi u kinh nghi m hu n luy n khai thác tinh l n đực - D ng c hu n luy n: tinh nguyên, bao b , găng tay 3.1.3 Phương pháp huấn luyện - LƠm quen v i ng i hu n luy n khai thác tinh t l n đực đ tu i - HƠng ngƠy t m cho l n, dùng tay kích thích mát xa d 105 c tháng ng v t c a l n - Cho đực lƠm quen v i n i hu n luy n vƠ giá nh y - T o ph n x vƠ kích thích tính hăng cho l n R ng đực b ng nh ng kích thích nh ti ng động, xoa bóp N u thu n ti n vƠ c n thi t có th dùng l n (th ng dùng l n Móng Cái) đ lƠm m i đ kích thích L n R ng đực - Khi L n R ng đực đư có ph n ng ham mu n đ a lên giá nh y nh t phía d i giá vƠ ti p t c lƠm nh ng động tác hay t o nh ng ơm kích thích tính ham mu n nh y lên giá c a đực Sau L n R ng đực đư nh y giá vƠ l y đ c tinh dựa vƠo l n R ng đực m i nh ng l n sau c g ng h n ch dùng l n m i - Giá nh y có th t m nh ng ch t kích thích tính d c c a đực nh : n c ti u, ch t ti t c a l n động d c hay tinh d ch c a L n R ng đực khác ch t kích thích t ng h p - Khi L n R ng đực đư quanh giá nh y, ng i hu n luy n hưy lƠm nh ng động tác hay t o nh ng ơm kích thích tính ham mu n nh y lên giá c a đực - Th i gian hu n luy n hƠng ngƠy kho ng 20 phút vƠo bu i sáng, n u th i ti t mát l n R ng đực có s c kho t t bu i chi u hu n luy n ti p 20 phút - Không cho l n R ng đực ăn no tr c hu n luy n - TuǶ t ng cá th , th i gian hu n luy n nhanh ch m khác Thông th ng sau - tu n l n R ng đực thƠnh th o 3.2.ăKhaiăthácătinhăđ căgi ng 3.2.1 Chuẩn bị dụng cụ D ng c l y tinh g m có: c c đựng tinh, v i lọc, găng tay 3.2.2 Trình tự thao tác lấy tinh - Đ a L n R ng đực gi ng vƠo n i l y tinh - Đeo găng tay cao su m m vô trùng - Khi đực gi ng nh y vƠ ôm giá nh y, ng i l y tinh nh nhƠng n m l y bao d ng v t vƠ mát xa đ d ng v t thò - Khi d ng v t thò ra, n m l y đ u xo n d ng v t kéo l ch kh i giá nh y - Kích thích L n R ng đực xu t tinh - H ng l y toƠn tinh d ch (B ch t phơn ti t ban đ u vƠ keo phèn) - Đ y c c h ng tinh, ghi s hi u đực gi ng - R a s ch giá nh y, phòng l y tinh vƠ d ng c khác - V sinh cá nhơn vƠ thay qu n áo 106 3.3.ăKi mătra,ăphaăch ăvƠăb oăqu nătinhăđ căgi ng 3.3.1 Kiểm tra tinh dịch Nh ng ch tiêu đánh giá hƠng ngƠy: 3.3.1.1 Lượng xuất tinh Sau l y tinh, lọc b ch t keo phèn (dùng 4-6 l p v i mƠn s ch đư vô trùng) Tinh d ch đư lọc h ng vƠo lọ có kh c độ Khi ki m tra c n đặt ngang t m m t, đọc k t qu đáy mặt cong c a tinh d ch 3.3.1.2 Màu sắc tinh dịch Bình th ng l n R ng đực cho tinh mƠu tr ng s a N u tinh có mƠu khác nh đ (l n máu), vƠng (l n n không s d ng c ti u), xanh (l n m ) lƠ tinh d ch không đ t yêu c u vƠ 3.3.1.3 Mùi tinh dịch Tinh d ch bình th ng có mùi h i đặc bi t c a gi ng l n R ng đực, n u tinh d ch có mùi khai, th i kh m lƠ tinh d ch đư b l n ch t b n ( n phơn ) vƠ không đ c s d ng 3.3.1.4 Hoạt lực tinh trùng (A) c ti u, m , Ho t lực tinh trùng (s c ho t động c a tinh trùng)lƠ tỷ l ph n trăm s tinh trùng có ho t động ti n thẳng vi tr ng Ho t lực lƠ ch tiêu quan trọng, nh n bi t đ c đánh giá ch quan vƠ kinh nghi m c a ng i kỹ thu t Nh ng quan trọng nh t lƠ kỹ thu t viên xác đ nh đ c tinh d ch có đ tiêu chu n đ s d ng hay không Cách ki m tra: B c 1: l y phi n kính r a s ch s y khô B c 2: l y giọt tinh ngun, nh lên phi n kính s ch, sau đ y lên la men, đ a lên kính hi n vi vƠ quan sát độ phóng đ i (100 - 200) B c 3: Xác đ nh t l tinh trùng ti n thẳng vƠ cho m thang m sau: Đi m 1.0 0,9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 % tinh trùng 96-100 86-95 76-85 66-75 56-65 46-55 36-45 26-35 16-25 6-15 ti n thẳng Chú ý: - C n ki m tra tinh sau l y - Phi n kính vƠ lam kính có nhi t độ 37-39oC b o đ m cho tinh trùng ho t động bình th ng Mu n v y, có th s i m lam kính vƠ phi n kính b ng d ng c thích h p h nóng đèn c n 107 NH NG CH TIểU ĐÁNH GIÁ Đ NH Kǵ: 3.3.1.5 Nồng độ tinh trùng (ký hiệu C) N ng độ tinh trùng lƠ s l ng tinh trùng 1ml tinh d ch Có nh ng ph ng pháp khác đ đánh giá n ng độ tinh trùng Ph ng pháp dùng bu ng đ m h ng - b ch c u B c 1: đ a bu ng đ m đư đ y lamen lên kính hi n vi quan sát độ phóng đ i 100 l n đ tìm th y bu ng đ m B c 2: dùng ng pha loưng b ch c u hút tinh nguyên đ n v ch 0,5; sau hút ti p dung d ch Nacl 3% đ n v ch 11 Nh v y, hỗn h p b u thuỷ tinh đ c pha loưng 20 l n B c 3: dùng ngón tay (ngón vƠ ngón tr ) b t đ u ng hút L c nh đ trộn đ u tinh d ch v i dung d ch NaCl b u ng hút B c 4: b - giọt đ u tiên, đ a ng hút lên bu ng đ m, r i đ tinh d ch ch y t t trƠn vƠo bên bu ng đ m tl n R ng đực rưnh bu ng đ m đư chu n b sẵn B c 5: đ m tinh trùng n m khu vực dùng đ m h ng c u Đ m ô nh góc vƠ nh gi a (mỗi nh có 16 con, có di n tích 1/400 mm2 chi u sơu c a bu ng đ m 0,1 mm Nguyên t c đ m: - Trong ô, ch đ m đ u tinh trùng n m c nh, nh ng tinh trùng n m c nh nh ng cho ô khác (đ i v i tinh trùng n m c nh) - Đ m c bên bu ng đ m r i l y s trung bình, n u k t qu bên chênh đ n 30 % ph i lƠm l i - N u tinh trùng t thƠnh t ng đám, không đ m đ c bu ng đ m ph i lƠm l i B c 6: xác đ nh n ng độ tinh trùng Cơng th c tính: C = n V 50000 Trong đó: - C lƠ n ng độ tinh trùng 1ml tinh nguyên, tri u/ ml - V lƠ s l n pha loưng tinh d ch ng hút b ch c u - 50000 lƠ ch s qui n ng độ tinh trùng tr v 1ml tinh nguyên ch a pha loưng v i u ki n có di n tích 1/400mm2 vƠ chi u sơu 0,1mm n lƠ s l ng tinh trùng đ m đ c 108 Chú ý: N u dùng ng pha loưng b ch c u vƠ pha loưng tinh d ch đo n phình 20 l n Cách tính tốn đ n gi n h n nhi u Sau đ m đ c tinh trùng 80 ô ch c n nhơn v i 1.000.000 có s l ng tinh trùng 1ml tinh d ch 3.3.1.6 Độ pH tinh dịch Tinh d ch L n R ng đực có pH h i ki m y u (7,2 - 7,5) N u tinh d ch có pH th p h n cao h n lƠ tinh d ch khơng bình th ng khơng t t cho s c s ng vƠ kh th thai c a tinh trùng Cách ki m tra: Dùng gi y đo pH đ xác đ nh độ pH c a tinh d ch B c 1: Dùng đũa thuỷ tinh l y giọt tinh d ch nh lên gi y đo pH vƠ đ i th i gian kho ng giơy B B c 2: so sánh mƠu c a mặt bên c a gi y v i b ng mƠu chu n c 3: xác đ nh độ pH c a tinh d ch tl n R ng đực b ng so mƠu chu n sau so sánh B c 4: thực hi n l i thao tác ki m tra pH t b sau l y k t qu trung bình c1đ nb c hai l n n a 3.3.1.7 Tỷ lệ sống chết tinh trùng Tỷ l s ng ch t c a tinh trùng liên quan t i m c ho t động s c s ng c a tinh trùng Dựa nguyên lý: Nh ng tinh trùng ch t nhuộm mƠu b t m u c a thu c nhuộm Eosin bi n hoá v t ch t c a t bƠo tinh trùng Cịn nh ng tinh trùng nƠo s ng khơng b t m u Eosin Do ng i ta dùng ph ng pháp nhuộm Eosin đ xác đ nh tỷ l s ng ch t c a tinh trùng Cách ki m tra: B c 1: l y phi n kính khơ, s ch (đư t y m ) B c 2: nh giọt tinh nguyên m i l y lên phi n kính B c 3: Nh - giọt dung d ch Eosin 5% bên c nh giọt tinh d ch vƠ dùng đũa thuỷ tinh trộn đ u vƠ ph t tiêu b n (dƠn m ng m u tinh lên phi n kính) B c 4: đ a lên kính hi n vi, ki m tra độ phóng đ i 400 - 600 l n Nh ng tinh trùng b t m u đ h ng c a Eosin lƠ tinh trùng đư ch t, tinh trùng nƠo tr ng (không b nhuộm mƠu) lƠ tinh trùng s ng (cho đ n lƠm tiêu b n) - Đ m 300 tinh trùng t ng s cách ng u nhiên vƠ tính tỷ l s ng ch t Chú ý: -Tinh d ch ki m tra sau l y tinh -Th i gian ki m tra ph i th t nhanh k t qu m i xác 109 3.3.1.8 Tỷ lệ kỳ hình Tinh trùng kǶ hình lƠ tinh trùng có hình d ng khác th ng so v i tinh trùng bình th ng Cách ki m tra: B c 1: l y phi n kính r a s ch s y khô B c 2: nh giọt tinh nguyên lên đ u c a phi n kính L y c nh c a phi n kính khác dƠn đ u giọt tinh lên mặt phi n kính Chú ý ph t kính ph i nh nhƠng, tiêu b n cƠng m ng cƠng t t Ch ph t l n, ph t đ u không t o thƠnh lƠn sóng B c 3: đ tiêu b n tự khơ; có th c đ nh b ng cách h qua đèn c n B c 4: nh thu c nhuộm lên tiêu b n, có th dùng nhi u lo i thu c nhuộm (eosin, xanh methylen, thu c đ ầ.k c mực vi t nh ng ph i khơng có cặn) B c 5: đ cho tiêu b n ng m thu c nhuộm (mùa hè đ - phút, mùa đông 10 phút) r i r a tiêu b n Cách r a nh sau: Dùng ng hút ng nh giọt, gi nh n c c t xu ng đ u tiêu b n đ cho n c loang nh , lƠm trôi thu c nhuộm, không dội m nh lƠm trôi tiêu b n B c 6: v y khô tiêu b n r i đ a lên kính hi n vi quan sát độ phóng đ i 400 - 600 l n đọc k t qu ; l n l t quan sát đ u kh p tiêu b n đ m kho ng 300 - 500 tinh trùng b t kǶ (đ m ng u nhiên) c bình th ng vƠ kǶ hình, khơng đ m lặp l i Ghi k t qu riêng nh ng kǶ hình vƠ tính tl n R ng đực cơng th c: K = m/n x 100 (m: S tinh trùng kǶ hình đ m đ c, n: T ng s tinh trùng đ c đ m) Ph ng pháp ki m tra ch t l ng tinh trùng b ng máy tính (Computer Assisted Sperm Analysis): Ph ng pháp nƠy s d ng ph n m m đ tự động tính tốn ch tiêu nh : Ho t lực, n ng độ tinh trùng, tỷ l tinh trùng ho t động vƠ không ho t động, độ dƠi nh v n t c v n động c a tinh trùng đ ng th i có th tính tốn tỷ l tinh trùng kǶ hình vƠ tỷ l s ng ch t c a tinh trùng STT 10 Ch ătiêuăch tăl ng Th tích (đư lọc) MƠu s c Mùi pH Ho t lực N ng độ T l tinh trùng s ng/ch t T l kǶ hình S c kháng KỦăhi u V Đ năv ătính ml A C % Tri u/ml % % K R 110 Tiêuăchu n ≥ 150 Tr ng s a 6,8 ậ 8,1 ≥ 75 100 - 300 ≥ 70 ≤ 10 ≥ 3000 Pha loưng tinh l n 1/ Yêu c u đ i v i n c pha môi tr ng N c dùng đ pha môi tr ng ph i lƠ n c c t l n có pH cao h n 6.5 (t t nh t lƠ pH 7); pH sau pha môi tr ng đ t 6.7- 7.2 2/ Quy trình pha tinh D ng c khai thác tinh: c c nhựa (c c th y tinh, túi ni lông kh trùng) m 37oC tr c khai thác Mùa hè: tinh nguyên đ ngoƠi nhi t độ môi tr ng (30- 35 oC) Mùa đông: nhúng túi đựng tinh b ng n c m (34- 35 oC ) Th i gian pha tinh t sau khai thác đ n t i đa gi , không nên đ tinh vƠo nhi t độ mát L y l ng tinh nguyên nh t đ nh pha tỷ l 1:1 v i môi tr ng b o qu n Ph n tinh nguyên l i xác đ nh ch tiêu: n ng độ, mƠu s c, pH, tỷ l tinh trùng v n động Tùy th tích n ng độ c a tinh pha xác đ nh l ng môi tr ng b sung tỷ l 1:1 tr c đó, đ o đ u (nh nhƠng) Sau chia lọ đựng tinh (80 đ n 100 ml / lọ) Có th cl ng 10 đ n 15 ml (10 đ n 15 cc tinh nguyên pha cho li u 100 cc) Đ y kín n p, đánh ký hi u c a m u tinh r i b ng nhi t độ phịng 90 phút, sau đặt lọ tinh vƠo t S d ng môi tr n nhi t 17 oC (dao động t 16 đ n 17 oC) ng L-V.N.N đ pha tinh: Nguyên t c pha tinh: đ môi tr ng vƠo tinh (không đ ng c l i) Đ nh nhƠng môi tr ng vƠo thƠnh lọ đựng tinh, không đ trực ti p vƠo tinh nguyên Ch đ theo tỷ l 1:1 cho đ n th tích c n pha L u ý: + Tránh đ khơng khí có lọ tinh trùng pha loưng b ng cách bóp lọ tinh đ ph n d ch l ng dơng lên sát mép lọ r i đ y chặt l p l i + N u ph i khơng c n b o qu n phòng vƠ cho ph i sau ti ng sau pha tinh nhi t độ th p, có th đ nhi t độ + Tr c ph i, nhúng lọ tinh vƠo n c m 37 oC kho ng - phút (ki m tra nhi t độ b ng nhi t k đ đo n c) + V trí b m tinh: B m tinh sau vƠo c t cung l n 111 M TăS ăHỊNHă NHă BA VÌ L N GIAI ĐO N THẨNH TH C V TệNH D C L NG S N L N GIAI ĐO N THẨNH TH C V TệNH D C TAM Đ O L N GIAI ĐO N THẨNH TH C V TệNH D C BA VÌ L N PH I GI NG T I Đ A ĐI M NGHIểN C U L NG S N L N PH I GI NG T I Đ A ĐI M NGHIểN C U TAM Đ O L N PH I GI NG T I Đ A ĐI M NGHIểN C U BA VÌ L N MANG THAI THÁNG Đ C NUÔI T P TRUNG L NG S N L N MANG THAI THÁNG Đ C NUÔI T P TRUNG TAM Đ O L N MANG THAI THÁNG Đ C NUÔI T P TRUNG 112 BA VÌ L NĐ L AĐ U BA VÌ L N Đ CON L NG S N L NĐ L AĐ U L NG S N L N Đ CON TAM Đ O L NĐ L AĐ U TAM Đ O L N Đ CON L Nă ăCỄCăL AăTU IăT IăCỄCăĐ AăĐI MăNGHIểNăC U BA VÌ L N S SINH L NG S N L N THÁNG TU I BA VÌ L N THÁNG TU I TAM Đ O L N THÁNG TU I TAM Đ O L N THÁNG TU I L NG S N L N THÁNG TU I 113 BA VÌ L N THÁNG TU I BA VÌ L N THÁNG TU I BA VÌ L N THÁNG TU I L NG S N L N THÁNG TU I TAM Đ O L N THÁNG TU I BA VÌ L N THÁNG TU I BA VÌ L N THÁNG TU I TAM Đ O L N THÁNG TU I 114 BA VÌ L N 10 THÁNG TU I HU NăLUY NăKHAIăTHỄCăTINHăVĨăTTNT L N R NG DỐNG KHAI THÁC TINH KHAI THÁC TINH TINH L N R NG Đ C PHA LOẩNG Đ ĐI PH I GI NG ĐÁNH GIÁ CH T L CHU N B PH I GI NG CHO L N R NG C SINH RA B NG PH I GI NG CHO L N R NG ĐẨN L N Đ TTNT T TINH L N R NG 115 NGTINH PH I GI NG CHO L N Đ A PH NG ĐẨN L N Đ C SINH RA B NG TTNT T TINH L N R NG ĐẨN L N Đ C SINH RA B NG TTNT T TINH L N R NG ĐẨN L N Đ C SINH RA B NG TTNT T TINH L N R NG ĐẨN L N Đ C SINH RA B NG TTNT T NGẨY TU I 116 TINH L N R NG 60