Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ CẨM LOAN NGHIÊN CỨU BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM (INFECTIOUS BRONCHITIS, IB) TRÊN GÀ NUÔI THEO HƯỚNG CÔNG NGHIỆP ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬ[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ CẨM LOAN NGHIÊN CỨU BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM (INFECTIOUS BRONCHITIS, IB) TRÊN GÀ NUÔI THEO HƯỚNG CÔNG NGHIỆP ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI MÃ NGÀNH: 62 64 01 02 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ CẨM LOAN NGHIÊN CỨU BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM (INFECTIOUS BRONCHITIS, IB) TRÊN GÀ NUÔI THEO HƯỚNG CÔNG NGHIỆP ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI MÃ NGÀNH: 62 64 01 02 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGS.TS TRẦN NGỌC BÍCH 2021 i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, nỗ lực thân Tôi xin gửi lời cảm ơn đến người giúp đỡ tơi suốt q trình học tập Xin đặc biệt trân trọng cảm ơn PGS TS Trần Ngọc Bích tận tâm hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành luận án Xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Phúc Khánh nhiệt tình hỗ trợ tơi suốt q trình thực đề tài Xin gửi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm Khoa Nông nghiệp, quý Thầy, Cô - Khoa Sau đại học, đặc biệt quý Thầy, Cô anh chị Bộ môn Thú Y - Khoa Nông nghiệp Trường Đại học Cần Thơ, người giảng dạy, quản lý giúp đỡ cho tơi suốt q trình học tập, thực phân tích mẫu hồn thành luận án Xin trân trọng cảm ơn Ban chủ nhiệm Chương trình nghiên cứu khoa học A11 thuộc Dự án Nâng cấp Trường Đại học Cần Thơ VN14-P6 nguồn vốn vay ODA từ phủ Nhật Bản, tài trợ cho thực đề tài Cuối cùng, tơi xin dâng lịng biết ơn sâu sắc đến Cha Mẹ người sinh thành, nuôi dưỡng động viên Xin cảm ơn tất người thân gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, chia sẻ, giúp thêm động lực cho phấn đấu, vượt qua khó khăn suốt q trình học tập NGHIÊN CỨU SINH NGUYỄN THỊ CẨM LOAN ii TÓM TẮT Luận án thực nhằm nghiên cứu bệnh viêm phế quản truyền nhiễm (IB) gà số tỉnh Đồng sông Cửu Long, Việt Nam Thời gian thực từ tháng 05 năm 2018 đến tháng 05 năm 2020 Mục tiêu nghiên cứu: Xác định tình hình dịch tễ bệnh lý IB gà thịt nuôi theo hướng công nghiệp; Xác định mối quan hệ di truyền chủng virus lưu hành với chủng virus giới virus vaccine; Đánh giá đáp ứng miễn dịch gà sau chủng ngừa vaccine IB Khảo sát thực trạng công tác phịng chống bệnh 83 trang trại chăn ni thuộc tỉnh Tiền Giang, Vĩnh Long, Sóc Trăng Hậu Giang thông qua điều tra, vấn cho thấy biện pháp sử dụng vaccine thuốc khác để phòng bệnh IB 100% số trại áp dụng Số trại áp dụng biện pháp vệ sinh chuồng trại, định kỳ sát trùng, thay lớp độn chuồng cịn ít, chiếm tỷ lệ từ 43,37% đến 55,42%, có 28,92% số trại áp dụng tất biện pháp Mẫu bệnh phẩm gồm khí quản, phổi thận thu thập từ 249 gà có biểu bệnh hơ hấp nghi nhiễm virus viêm phế quản truyền nhiễm (IBV) IBV xác định kỹ thuật RT-PCR phát gene N virus Kết có 43,37% số mẫu nhiễm IBV Tỷ lệ đàn gà bị bệnh 59,04% Khảo sát đặc điểm dịch tễ bệnh IB cho thấy yếu tố địa lý, nhóm giống gà, lứa tuổi kiểu chuồng không liên quan đến tỷ lệ đàn bệnh IB Đàn gà có khả bệnh IB vào mùa mưa cao 2,78 lần so với mùa nắng Những đàn không chủng ngừa vaccine đầy đủ điều kiện vệ sinh thú y khơng tốt có khả bệnh IB cao so với đàn chủng ngừa đầy đủ vệ sinh thú y tốt 2,88 lần 2,66 lần Khảo sát biến đổi bệnh lý IB thông qua mổ khám 108 gà làm 10 tiêu vi thể Triệu chứng lâm sàng phổ biến âm rít khí quản (91,67%) Ngồi ra, gà ủ rũ, giảm ăn, hắt hơi, khó thở, chảy nước mũi, nước mắt, đơi tiêu chảy nhiều nước sưng đầu Bệnh tích đại thể phổ biến xuất huyết khí quản với nhiều dịch nhầy (92,59%), sung huyết, xuất huyết phổi, viêm túi khí xoang mũi, sưng xuất huyết thận, tích urate niệu quản Bệnh tích vi thể bao gồm thâm nhiễm tế bào viêm (100%), sung huyết, xuất huyết (80%-100%), hoại tử tế bào (20%-60%) phì đại tế bào Goblet (40%) iii Các chương trình Mega 7.0, Bioedit 7.2 RDP4 sử dụng để phân tích trình tự nucleotide, amino acid phần gene S1 10 chủng IBV lưu hành, phân tích tái tổ hợp di truyền xây dựng phả hệ di truyền Kết xác định 10 chủng IBV thuộc 05 kiểu gene gồm TC07-2-Like, QX-Like, Q1-Like, Mass 793/B Tuy 05/10 trình tự gene tương đồng cao với chủng vaccine trình tự amino acid chủng IBV lưu hành có nhiều vị trí sai khác, có tượng xóa chèn thêm amino acid Chủng IBV-VNTG20 Tiền Giang có tiềm kết tái tổ hợp di truyền chủng thuộc Q1-Like QX-Like Kỹ thuật xét nghiệm ELISA gián tiếp thực để phát kháng thể IBV gà Nịi lai gà Tam Hồng 04 quy trình chủng ngừa vaccine IB Tỷ lệ gà có kháng thể thụ động mẹ truyền trước chủng ngừa đạt từ 86,67 đến 100% GMT đạt từ 1.217 đến 1.463,8 Ba tuần sau chủng ngừa lần đầu tiên, tỷ lệ gà có kháng thể GMT giảm thấp 0%-23,33%, 107,8244,9 Gà tất quy trình đạt tỷ lệ bảo hộ đàn (70%-90%) hàm lượng GMT 1.000 sau tái chủng 02 tuần (38 ngày tuổi) giống Tam Hoàng 03 tuần (52 ngày tuổi) giống Nịi lai Đặc biệt, quy trình chủng vaccine hỗn hợp IB-ND vaccine đơn giá 4/91 có số ưu điểm quy trình cịn lại Từ khóa: Đồng sông Cửu Long, gà thịt, viêm phế quản truyền nhiễm iv ABSTRACT The thesis was conducted to study infectious bronchitis (IB) disease in chickens in some provinces in the Mekong Delta, Vietnam Research period: from May 2018 to May 2020 The objectives were: to determine the epidemiology and pathological changes of IB in broiler chickens rearing under industrial trends; to determine genetic relationships of virus strains circulating in the world and vaccine viruses; to evaluate immune response of chickens to IB vaccination programs Surveying disease prevention at 83 farms in Tien Giang, Vinh Long, Soc Trang and Hau Giang provinces through investigation and interviews showed that using vaccines and other drugs to prevent IB was applied by 83/83 (100%) of the farms The rate of farms applying methods such as cleaning barns, disinfecting periodically and replacing the litter represented from 43.37% to 55.42%, only 28.92% of the farms using all of the above methods Tissue samples from the trachea, lungs, and kidneys were collected from 249 broilers showing respiratory signs with a suspected infectious bronchitis virus (IBV) infection IBVs were determined by N gene based on RT-PCR technique The results showed that there were 43.37% of samples infected with IBV The prevalence of infected flocks was 59.04% An epidemiological investigation of IB disease showed that geographical factors, breed groups, chicken stage and house types did not relate to the proportion of infected flocks Chicken flocks were at risk of IB in the rainy season 2.78 times higher than in the dry season The inadequate vaccinated and poor veterinary hygiene flocks were a higher risk of IB than adequate vaccinated and good veterinary hygiene flocks 2.88 times and 2.66 times, respectively A survey of the pathological changes was carried out by gross postmortem examinations on 108 broilers and microscopic examination of 10 tissue samples The most common clinical sign was tracheal rales (91.67%) In addition, infected chickens were depression, reduced feed consumption, sneezing, dyspnea, nasal discharge, watery eyes, sometimes watery diarrhea and swollen head The most common gross lesion was tracheal hemorrhage with excessive mucus (92.59%), followed by lung congestion and hemorrhage, airsacculitis, sinusitis, swollen, hemorrhage kidneys and urate crystal deposition in the ureters The microscopic lesions were inflammatory cell infiltrates v (100%), congestion, hemorrhage (80%-100%), presented necrosis (20%-60%) and hypertrophic goblet cells (40%) Some programs consisting of Mega 7.0, Bioedit 7.2 and RDP4 were used to construct the phylogenetic tree of IBV strains, to analyze the nucleotide and amino acid sequences of the S1 gene, to analyze the recombination of viruses The results identified that there were 10 IBV strains circulating in chicken flocks that belonged to 05 different genotypes including TC07-2-Like, QXLike, Q1-Like, Mass, and 793/B Although 05/10 virus strains were a high similarity to vaccine strains, the amino acid sequence of circulating IBV strains had many variant positions with deletion or insertion of amino acid IBVVNTG20 strain in Tien Giang province was the potential of genetic recombination between Q1-Like strain and a QX-Like strain Indirect ELISA was performed to detect IBV antibodies of Noi hybrid and Tam Hoang chickens in 04 immunization programs with IB vaccines The percentage of chickens with maternal antibodies before vaccination in all treatments was from 86.67 to 100% and GMT was from 1,217 to 1,463.8 Three weeks after the first vaccination, the rate of chickens with antibodies and GMT decreased by 0%-23.33%, 107.8-244.9, respectively Chickens in all programs achieved flock immunity (> 70%) and GMT was over 1,000 after 02 weeks of re-vaccination (38 days old) in Tam Hoang and 03 weeks (52 days old) in Noi hybrid chickens Especially, the vaccination program with IB-ND bivalent and 4/91 monovalent vaccine showed some better advantages than the others Keywords: Mekong Delta, broiler chicken, infectious bronchitis vi MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Abstract v Mục lục vii Danh mục bảng xi Danh mục hình xiii Danh mục từ viết tắt xvi Chương 1: Giới thiệu 1.1 Tính cấp thiết luận án 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa luận án 1.4 Điểm luận án 1.5 Giới hạn luận án Chương 2: Tổng quan tài liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu bệnh IB gà 2.1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh IB giới 2.1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh IB Việt Nam 2.2 Đặc điểm sinh học IBV 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Hình thái học 2.2.3 Thành phần hóa học 2.2.4 Sự chép 11 2.2.5 Sự biến đổi di truyền IBV 12 2.2.6 Sự phân bố IBV 17 vii Trang 2.2.7 Sức đề kháng IBV 18 2.3 Sinh bệnh học IB gà thịt 19 2.3.1 Vật chủ 19 2.3.2 Thụ thể xâm nhập 19 2.3.3 Sự nhiễm bệnh lây lan 20 2.3.4 Tính hướng mô virus 21 2.3.5 Biểu lâm sàng bệnh tích 22 2.3.6 Sự kết hợp IBV với tác nhân lây nhiễm khác 26 2.4 Miễn dịch 27 2.4.1 Miễn dịch qua trung gian tế bào 27 2.4.2 Miễn dịch dịch thể 28 2.5 Một số phương pháp chẩn đoán bệnh IB 29 2.5.1 Chẩn đoán phân biệt dựa vào triệu chứng bệnh tích 30 2.5.2 Phát kháng thể kỹ thuật ELISA 31 2.5.3 Phản ứng trung hòa virus 32 2.5.4 Phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu 33 2.5.5 Phân lập virus 34 2.5.6 Phương pháp chẩn đoán dựa acid nucleic (RT-PCR) 36 2.6 Phịng trị kiểm sốt bệnh IB 39 2.6.1 Phòng ngừa bệnh IB 39 2.6.2 Điều trị 45 2.6.3 Kiểm soát bệnh IB 46 2.7 Qui trình chăm sóc ni dưỡng gà thịt 48 2.7.1 Phương thức chăn nuôi 48 2.7.2 Kiểu chuồng trại 49 2.7.3 Kỹ thuật chăn nuôi gà thịt thương phẩm 49 2.7.4 Kỹ thuật chăn ni gà thịt có chăn thả 51 viii 206 207 208 * So sánh GMT 02 giống gà nghiệm thức 209 210 211 212 * So sánh GMT 02 giống gà nghiệm thức 213 214 215 216 * So sánh GMT 02 giống gà nghiệm thức 217 218 219 220