Bài giảng vi sinh vật học chương 7 pgs ts nguyễn đức hoàng

Chương 7: Vi sinh vật gây bệnh người Quan hệ vật chủ – ký sinh Cơ sở miễn dịch học Vi sinh y học Dịch tễ học vi sinh vật học cộng đồng Bệnh vi sinh vật Quan hệ vật chủ – ký sinh Tương tác vi sinh vật với động vật - Động vật môi trường sống nhiều vi sinh vật: vi sinh có lợi, gây bệnh trung tính - Ký sinh (parasitism): tăng trưởng VSV (ký sinh vật, parasite) sinh vật khác, không mang lại ích lợi làm hại cho sinh vật chủ hay (hay vật chủ host) - Khả ký sinh VSV lên vật chủ chiụ ảnh hưởng tương tác phức tạp ký sinh vật với vật chủ: + Khả xâm nhập VSV vào vật chủ (thường bắt đầu màng nhày) + Tương tác hệ thống tự vệ vật chủ với khả đáp ứng thích nghi ký sinh gây bệnh + Đặc điểm giải phẫu học vật chủ Hệ vi sinh vật tự nhiên da - Độ ẩm thấp pH acid - Hệ VSV chủ yếu vi khuẩn Gram dương, diện nơi có độ ẩm cao tuyến mồ hôi, tuyến nhờn: Staphylococcus, Coryne-bacterium, Acetinobacter, Pityrosporum, Propionibacterium, Micrococcus Hệ vi sinh vật vùng miệng - Streptococcus, Lactobacillus, Fusobacterium, Veillonella, Coryne-bacterium, Neisseria, Actinomyces - Sâu hoạt động VSV: + Streptococcus sobrinus S mutans hình thành lớp polysaccharide (glycocalyx) giúp gắn vào bề mặt tạo thành vết tan (dental plaque), tăng trưởng làm cạn kiệt ôxi + Vi khuẩn lactic acid tạo acid hữu làm giảm pH bề mặt răng, làm tan thành phần calcium phosphate răng, gây sâu Hệ vi sinh vật đường tiêu hóa - Lactobacillus, Streptococcus, Bacteroides, Bifidobacterium, Eubacterium, Peptococcus, Peptostreptococcus, Ruminococcus, Clostridium, Escherichia, Klebsiella, Proteus, Enterococcus, Staphylococcus - VSV kỵ khí kỵ khí tùy ý - VSV có lợi - VSV lên men thối - VSV có lợi: cung cấp vitamin, hỗ trợ biến dưỡng vật chủ Hệ vi sinh vật khác - Hệ VSV đường hô hấp: + Streptococcus, Staphylococcus, Corynebacterium, Neisseria + Hiện diện bên màng nhày quan hô hấp - Hệ VSV đường niệu - sinh duïc: + Escherichia, Klebsiella, Proteus, Neisseria, Lactobacillus, Corynebacterium, Staphylococcus, Candida, Provotella, Clostridium, Peptostreptococcus - Hệ VSV tự nhiên có lợi: + Giúp quan hoạt động bình thường + Ngăn cản xâm nhiễm VSV gây bệnh + Một số có khả xâm nhiễm gây bệnh phận khác thể Một số thuật ngữ chế gây bệnh VSV gây bệnh lên vật chủ - Nhược độc (attenuation): giảm khả gây bệnh VSV - Tạo khuẩn lạc (colonization): sinh sản VSV gây bệnh sau gắn lên mô vật chủ - Lây nhiễm (infection): nhiễm tăng trưởng VSV bên vật chủ - Xâm nhiễm (invasion): xâm nhập lan truyền VSV vào vật chủ - Tính xâm nhiễm (invasiveness): tính gây bênh khả xâm nhập VSV gây bệnh lan truyền bên vật chủ - Sinh độc tố (toxigenicity): tính gây bệnh độc tố tạo VSV gây bệnh - Mức gây bệnh (pathogenicity), mứùc ác tính (virulence) ký sinh vật: khả gây bệnh (tổng hợp tính xâm nhiễm sinh độc tố) ký sinh vật vật chủ Xét nghiệm ELISA - ELISA: hấp phụ miễn dịch liên kết enzyme (enzyme-linked Immunosorbent assay) + Kháng thể gắn cộng hóa trị với enzyme + Phát liên kết kháng nguyên kháng thể phát hoạt tính enzyme (peroxidase, alkaline phosphatase galactosidase) dựa phản ứng tạo màu + Ứu điểm: độ nhạy cao, dễ tự động hóa + ELISA trực tiếp: dùng để phát kháng nguyên mẫu bệnh phẩm + ELISA gián tiếp: dùng để phát kháng thể chuyên biệt huyết người bệnh Xét nghiệm miễn dịch phóng xạ - Sử dụng kháng thể đánh dấu phóng xạ 125I - Dùng để đo lượng protein dạng vết (kích thích tố tăng trưởng, hormone) máu - Qui trình thường gồm bước: + Kháng nguyên cố định giếng microplate lượng định, kháng thể đánh dấu bổ sung lượng phóng xạ ghi; lập đường chuẩn lượng kháng nguyên theo lượng phóng xạ + Mẫu chứa kháng nguyên bất động lên giếng bổ sung kháng thể; tính lượng phóng xạ, suy lượng kháng nguyên Xét nghiệm ngưng kết - Kháng nguyên kháng thể lên hạt nhựa - Nếu có diện kháng nguyên phản ứng kháng nguyên kháng thể hình thành ngưng kết - Ưu điểm: nhanh, rẽ tiền, thích hợp cho chương trình sàng lọc diện rộng, không cần thiết bị đắc tiền Xét nghiệm immunoblot (immunohybridization) - Dựa phản ứng lai màng kháng nguyên kháng thể - Protein mẫu phân đoạn điện di gel polyacrylamid - Các vạch protein chuyển thẩm (blot) lên màng nitrocellulose (màng lai) - Thực lai kháng nguyên mục tiêu kháng thể chuyên biệt đánh dấu đồng vị phóng xạ phát huỳnh quang - Vạch lai phát ảnh phim vệt màu màng lai - Ưu điểm: độ nhạy tính chuyên biệt cao, có nhược điểm qui trình phức tạp thời gian - Thường sử dụng cho xét nghiệm khẳng định, không dùng cho mục đích tầm soát sàng lọc diện rộng Xét nghiệm dựa nucleic acid - Lai in situ (in situ hybridization): + Sử dụng mẫu dò nucleic acid (nucleic acid probe) có trình tự chuyên biệt, đánh dấu phóng xạ chất phát quang + Chuyển khuẩn lạc lên màng lai chuyển mẫu lên lam kính + Xử lý mẫu, biến tính DNA + Thực lai với mẫu dò phát vệt lai + Ưu điểm: độ nhạy tính chuyên biệt cao - Vân tay DNA (DNA fingerprinting): + Hầu hết vi khuẩn chứa plasmid có chủng loại số lượng khác + Sự đa hình phân tích điện di gel agarose + Kiểu vạch tạo thành dùng chẩn đoán xác định mối quan hệ chủng nghi bệnh phân lập + Định danh đến mức loài - Phản ứng PCR (polymerase chain reaction): + Dựa khả nhân trình tự gen mục tiêu VSV gây bệnh phản ứng PCR cặp mồi chuyên biệt + Được ứng dụng nhiều phát VSV gây bệnh, đặc biệt virút Dịch tễ học vi sinh vật học cộng đồng Bệnh vi sinh vật ... hệ vật chủ – ký sinh Tương tác vi sinh vật với động vật - Động vật môi trường sống nhiều vi sinh vật: vi sinh có lợi, gây bệnh trung tính - Ký sinh (parasitism): tăng trưởng VSV (ký sinh vật, ... vật, parasite) sinh vật khác, không mang lại ích lợi làm hại cho sinh vật chủ hay (hay vật chủ host) - Khả ký sinh VSV lên vật chủ chiụ ảnh hưởng tương tác phức tạp ký sinh vật với vật chủ: + Khả... xâm nhập VSV vào vật chủ (thường bắt đầu màng nhày) + Tương tác hệ thống tự vệ vật chủ với khả đáp ứng thích nghi ký sinh gây bệnh + Đặc điểm giải phẫu học vật chủ Hệ vi sinh vật tự nhiên da -