Nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định hoạt tính của 2 chế phẩm thuốc chưa enzym

BỘ Y TẾ BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH CỦA CHẾ PHẨM THUỐC CHỨA ENZYM Chủ nhiệm đề tài: TS ĐOÀN CAO SƠN Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương Cấp quản lý: Bộ Y tế Thời gian thực hiện: Từ tháng 06/2008 đến tháng 06/2010 Tổng kinh phí thực đề tài: 450 triệu đồng Trong đó: kinh phí nghiên cứu khoa học phát triển công nghệ: 450 triệu đồng 8131 Năm 2010 BỘ Y TẾ BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH CỦA CHẾ PHẨM THUỐC CHỨA ENZYM Chủ nhiệm đề tài: TS ĐỒN CAO SƠN Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương Năm 2010 BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH CỦA CHẾ PHẨM THUỐC CHỨA ENZYM Chủ nhiệm đề tài: TS ĐOÀN CAO SƠN Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Kiểm nghiệm thuốc TƯ, Bộ Y tế 48 Hai Bà Trưng, Hà Nội Cơ quan quản lý đề tài: Bộ Y tế Thư ký đề tài: Hà Thị Minh Châu Danh sách người thực chính: ThS Bùi Thị Hịa DS Hà Thị Minh Châu ThS Nguyễn Đăng Lâm DS Lê Thị Thu Hiền TS Trần Thị Hồng Anh ThS Lục Thị Vân DS Nguyễn Thị Hồng Yến TS Nguyễn Thị Kim Hương DS Trần Thị Thanh Huế Thời gian thực đề tài: Từ tháng 06/2008 đến tháng 06/2010 MỤC LỤC PHẦN A TÓM TẮT CÁC KẾT QUẢ CỦA ĐỀ TÀI 1 Mục đích nghiên cứu Phương pháp sử dụng để nghiên cứu Kết nghiên cứu Kết luận rút từ nghiên cứu 5.Về cải tiến kỹ thuật Những đóng góp khác Tiến độ thực PHẦN B NỘI DUNG BÁO CÁO CHI TIẾT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu TỔNG QUAN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU 2.1 Enzym bromelain 2.1.1 Cấu trúc tính chất enzym bromelain 2.1.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học 10 2.1.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym bromelain 13 2.2 Enzym Trypsin 13 2.2.1 Cấu trúc tính chất enzym trypsin 13 2.2.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học 14 2.2.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym trypsin 18 2.3 Enzym streptokinase 18 2.3.1 Cấu trúc tính chất enzym streptokinase 18 2.3.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học enzym streptokinase 19 2.3.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym streptokinase 22 2.4 Enzym Streptodornase 23 2.4.1 Cấu trúc tính chất enzym streptodornase 23 2.4.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học enzym streptodornase 24 2.4.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym streptodornase 25 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Hóa chất, chất chuẩn, mẫu nghiên cứu 26 3.1.1 Chất chuẩn 26 3.1.2 Dung mơi, hóa chất: 26 3.1.3 Mẫu dùng để nghiên cứu xây dựng thẩm định quy trình 27 3.2 Thiết bị dụng cụ 27 3.3 Phương pháp 28 3.3.1 Bromelain 28 3.3.2 Trypsin 28 3.3.3 Streptokinase 29 3.3.4 Streptodornase 29 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 30 4.1 Xây dựng thẩm định quy trình xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa bromelain trypsin 30 4.1.1 Xây dựng quy trình xác định hoạt tính bromelain trypsin 30 4.1.2 Thẩm định phươn g pháp xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa bromelain trypsin 34 4.2 Xây dựng thẩm định quy trình xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa streptokinase streptodornase 43 4.2.1 Xây dựng quy trình xác định hoạt tính streptokinase streptodornase 43 4.2.2 Thẩm định phương pháp xây dựng để xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa streptokinase streptodornase 50 4.3 Áp dụng quy trình xây dựng để kiểm tra chất lượng số chế phẩm thị trường 67 4.3.1 Kiểm tra chất lượng số chế phẩm chứa bromelain trypsin 67 4.3.2 Kiểm tra chất lượng số chế phẩm chứa Streptokinase Streptodornase 68 4.4 Bàn luận ý nghĩa thực tiễn đề tài 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 5.1 Kết luận 70 5.2 Kiến nghị 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO .72 PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Kết khảo sát ảnh hưởng L-cystein đến khả xác định hoạt tính bromelain 32 Bảng 2: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Tyrosin 34 Bảng 3: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Bromelain .35 Bảng 4: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Bromelain .36 Bảng 5: Khảo sát độ phương pháp định lượng Bromelain .37 Bảng 6: Khảo sát độ đặc hiệu phương pháp định lượng Bromelain 38 Bảng 7: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Trypsin 39 Bảng 8: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Trypsin viên Brolasin 40 Bảng 9: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Trypsin viên Kimoral-S41 Bảng 10: Khảo sát độ phương pháp định lượng Trypsin 41 Bảng 11: Khảo sát độ đặc hiệu phương pháp định lượng Trypsin 42 Bảng 12: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .50 Bảng 13: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .51 Bảng 14: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .52 Bảng 15: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose 53 Bảng 16: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose 54 Bảng 17: Kết khảo sát khoảng tuyến tính phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .55 Bảng 18: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .56 Bảng 19: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông 57 Bảng 20: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .58 Bảng 21: Kết định lượng Streptokinase số chế phẩm thị trường 59 Bảng 22: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptodornase 60 Bảng 23: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase 61 Bảng 24: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase .62 Bảng 25: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase 63 Bảng 26: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase .64 Bảng 27: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase .65 Bảng 28: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase 66 Bảng 29: Hàm lượng bromelain trypsin số chế phẩm 67 Bảng 30: Hàm lượng streptokinase streptodornase số chế phẩm .68 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ độ hấp thụ định lượng Tyrosin 34 Hình 2: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ độ hấp thụ định lượng Bromelain .35 Hình 3: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ chênh lệch độ hấp thụ định lượng Trypsin 40 Hình 4: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 51 Hình 5: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 52 Hình 6: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 53 Hình 7: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit thời gian ly giải khối đông định lượng streptokinase 55 Hình 8: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit thời gian ly giải khối đông định lượng Streptokinase 56 Hình 9: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ hệ số giảm độ nhớt định lượng streptodornase 60 Hình 10: Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn độ giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase 61 Hình 11: Đường tuyến tính biểu diễn giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase 63 Hình 12: Đường tuyến tính biểu diễn giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase 66 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT KDa : Kilo Dalton SK : Streptokinase Arg : Arginin Val : Valin Asp : Asparagin Lys : Lysin Leu : Leucin Plgn : Plasminogen Pm : Plasmin RSD TB : Độ lệch chuẩn tương đối : Trung bình PHẦN A TĨM TẮT CÁC KẾT QUẢ CỦA ĐỀ TÀI Mục đích nghiên cứu: - Xây dựng phương pháp xác định hoạt tính enzym: Bromelain, Trypsin, Streptokinase Streptodornase chế phẩm hỗn hợp chứa enzym Bromelain, Trypsin chế phẩm hỗn hợp Streptokinase, Streptodornase - Áp dụng phương pháp xác đinh hoạt tính enzym Bromelain, Trypsin, Streptokinase Streptodornase để kiểm tra chất lượng số thuốc lưu hành thị trường thẩm định, xét duyệt tiêu chuẩn Phương pháp sử dụng để nghiên cứu: Đề tài Khoa học - Công nghệ “Nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định hoạt tính chế phẩm thuốc chứa enzym” nghiên cứu thực cách có hệ thống để thiết lập quy trình xác định hoạt tính enzym chế phẩm chứa hỗn hợp enzym Những kết nghiên cứu đề tài có ý nghĩa thực tiễn cao Các quy trình xác định hoạt tính thiết lập đề tài thẩm định chu chứng minh phù hợp, độ tin cậy áp dụng xác định hoạt tính thành phần enzyme chế phẩm thuốc chứa hỗn hợp enzym, góp phần nâng cao khả kỹ thuật hệ thống kiểm nghiệm giám sát chất lượng thuốc Các phương pháp định lượng xây dựng hướng tới phù hợp mặt kỹ thuật với điều kiện trang thiết bị Viện kiểm nghiệm thuốc trung ương sở thuộc hệ thống kiểm nghiệm thuốc nói chung Trong số trường hợp, chưa có phương pháp phù hợp, sau q trình khảo sát sơ bộ, nhóm nghiên cứu phải tiến hành cải tiến điều kiện phân tích cho phù hợp với đối tượng mẫu thuốc cần kiểm tra điều kiện trang thiết bị có Cụ thể, số phương pháp xác định hoạt tính enzym có phương pháp xác định hoạt tính enzym Streptokinase (BP CP) Trypsin (USP) có sẵn dược điển chuyên luận thuộc nguyên liệu Còn phương pháp xác định hoạt tính Bromelain chưa có dược điển Phụ lục CÁC TÀI LIỆU LIÊN QUAN - Chứng phân tích chuản chất dùng định lượng - Bài báo khoa học - Danh sách đăng ký đề tài tốt nghiệp thạc sĩ dược học Phụ lục MỘT SỐ DỮ LIỆU NGHIÊN CỨU - Phổ hấp thụ sáng - Đường biến đổi độ hấp thụ Hóa chất, thuốc thử dùng định lượng Bromelain, Trypsin, Streptokinase, Streptodornase Định lượng Streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose A C B D Định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông A : Giai đoạn tạo đông ống thử ống đối chứng B, C, D : Quá trình ly giải Ống mao quản Định lượng Streptodornase phương pháp đo độ nhớt Bể ổn nhiệt Labec BÁO CÁO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH CỦA CHẾ PHẨM THUỐC CHỨA ENZYM Chủ nhiệm đề tài: TS ĐOÀN CAO SƠN Cơ quan chủ trì đề tài: Viện Kiểm nghiệm thuốc TƯ, Bộ Y tế 48 Hai Bà Trưng, Hà Nội Cơ quan quản lý đề tài: Bộ Y tế Thư ký đề tài: Hà Thị Minh Châu Danh sách người thực chính: ThS Bùi Thị Hòa DS Hà Thị Minh Châu ThS Nguyễn Đăng Lâm DS Lê Thị Thu Hiền TS Trần Thị Hồng Anh ThS Lục Thị Vân DS Nguyễn Thị Hồng Yến TS Nguyễn Thị Kim Hương DS Trần Thị Thanh Huế Thời gian thực đề tài: Từ tháng 06/2008 đến tháng 06/2010 MỤC LỤC PHẦN A TÓM TẮT CÁC KẾT QUẢ CỦA ĐỀ TÀI 1 Mục đích nghiên cứu Phương pháp sử dụng để nghiên cứu Kết nghiên cứu Kết luận rút từ nghiên cứu 5.Về cải tiến kỹ thuật Những đóng góp khác Tiến độ thực PHẦN B NỘI DUNG BÁO CÁO CHI TIẾT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI CẤP BỘ ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu TỔNG QUAN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU 2.1 Enzym bromelain 2.1.1 Cấu trúc tính chất enzym bromelain 2.1.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học 10 2.1.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym bromelain 13 2.2 Enzym Trypsin 13 2.2.1 Cấu trúc tính chất enzym trypsin 13 2.2.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học 14 2.2.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym trypsin 18 2.3 Enzym streptokinase 18 2.3.1 Cấu trúc tính chất enzym streptokinase 18 2.3.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học enzym streptokinase 19 2.3.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym streptokinase 22 2.4 Enzym Streptodornase 23 2.4.1 Cấu trúc tính chất enzym streptodornase 23 2.4.2 Cơ chế hoạt động ứng dụng y học enzym streptodornase 24 2.4.3 Các phương pháp xác định hoạt tính enzym streptodornase 25 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Hóa chất, chất chuẩn, mẫu nghiên cứu 26 3.1.1 Chất chuẩn 26 3.1.2 Dung mơi, hóa chất: 26 3.1.3 Mẫu dùng để nghiên cứu xây dựng thẩm định quy trình 27 3.2 Thiết bị dụng cụ 27 3.3 Phương pháp 28 3.3.1 Bromelain 28 3.3.2 Trypsin 28 3.3.3 Streptokinase 29 3.3.4 Streptodornase 29 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 30 4.1 Xây dựng thẩm định quy trình xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa bromelain trypsin 30 4.1.1 Xây dựng quy trình xác định hoạt tính bromelain trypsin 30 4.1.2 Thẩm định phươn g pháp xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa bromelain trypsin 34 4.2 Xây dựng thẩm định quy trình xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa streptokinase streptodornase 43 4.2.1 Xây dựng quy trình xác định hoạt tính streptokinase streptodornase 43 4.2.2 Thẩm định phương pháp xây dựng để xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa streptokinase streptodornase 50 4.3 Áp dụng quy trình xây dựng để kiểm tra chất lượng số chế phẩm thị trường 67 4.3.1 Kiểm tra chất lượng số chế phẩm chứa bromelain trypsin 67 4.3.2 Kiểm tra chất lượng số chế phẩm chứa Streptokinase Streptodornase 68 4.4 Bàn luận ý nghĩa thực tiễn đề tài 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 5.1 Kết luận 70 5.2 Kiến nghị 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO .72 PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Kết khảo sát ảnh hưởng L-cystein đến khả xác định hoạt tính bromelain 32 Bảng 2: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Tyrosin 34 Bảng 3: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Bromelain .35 Bảng 4: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Bromelain .36 Bảng 5: Khảo sát độ phương pháp định lượng Bromelain .37 Bảng 6: Khảo sát độ đặc hiệu phương pháp định lượng Bromelain 38 Bảng 7: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Trypsin 39 Bảng 8: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Trypsin viên Brolasin 40 Bảng 9: Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Trypsin viên Kimoral-S41 Bảng 10: Khảo sát độ phương pháp định lượng Trypsin 41 Bảng 11: Khảo sát độ đặc hiệu phương pháp định lượng Trypsin 42 Bảng 12: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .50 Bảng 13: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .51 Bảng 14: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose .52 Bảng 15: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose 53 Bảng 16: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo đường kính vịng ly giải fibrin agarose 54 Bảng 17: Kết khảo sát khoảng tuyến tính phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .55 Bảng 18: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .56 Bảng 19: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông 57 Bảng 20: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng Streptokinase phương pháp đo thời gian ly giải khối đông .58 Bảng 21: Kết định lượng Streptokinase số chế phẩm thị trường 59 Bảng 22: Kết khảo sát độ tuyến tính phương pháp định lượng streptodornase 60 Bảng 23: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase 61 Bảng 24: Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase .62 Bảng 25: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase 63 Bảng 26: Kết khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase .64 Bảng 27: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase .65 Bảng 28: Thời gian chảy nhớt kế dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase 66 Bảng 29: Hàm lượng bromelain trypsin số chế phẩm 67 Bảng 30: Hàm lượng streptokinase streptodornase số chế phẩm .68 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ độ hấp thụ định lượng Tyrosin 34 Hình 2: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ độ hấp thụ định lượng Bromelain .35 Hình 3: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ chênh lệch độ hấp thụ định lượng Trypsin 40 Hình 4: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 51 Hình 5: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 52 Hình 6: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit đường kính vịng ly giải 53 Hình 7: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit thời gian ly giải khối đông định lượng streptokinase 55 Hình 8: Đồ thị biểu diễn mối tương quan logarit nồng độ logarit thời gian ly giải khối đông định lượng Streptokinase 56 Hình 9: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ hệ số giảm độ nhớt định lượng streptodornase 60 Hình 10: Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn độ giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng streptodornase 61 Hình 11: Đường tuyến tính biểu diễn giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát độ phương pháp định lượng streptodornase 63 Hình 12: Đường tuyến tính biểu diễn giảm độ nhớt theo thời gian dung dịch chuẩn thử nghiệm khảo sát tính đặc hiệu phương pháp định lượng streptodornase 66 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT KDa : Kilo Dalton SK : Streptokinase Arg : Arginin Val : Valin Asp : Asparagin Lys : Lysin Leu : Leucin Plgn : Plasminogen Pm : Plasmin RSD TB : Độ lệch chuẩn tương đối : Trung bình ... streptodornase 43 4 .2. 1 Xây dựng quy trình xác định hoạt tính streptokinase streptodornase 43 4 .2. 2 Thẩm định phương pháp xây dựng để xác định hoạt tính enzym chế phẩm thuốc chứa streptokinase... để nghiên cứu: Đề tài Khoa học - Công nghệ ? ?Nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định hoạt tính chế phẩm thuốc chứa enzym? ?? nghiên cứu thực cách có hệ thống để thiết lập quy trình xác định hoạt tính. .. liệu để xây dựng phương pháp xác định hoạt tính enzym Bromelain chế phẩm chứa hỗn hợp Bromelain Trypsin 2- Tham khảo tài liệu USP để xây dựng phương pháp xác định hoạt tính Trypsin chế phẩm chứa