Nghiên cứu tỷ lệ, mức độ kháng kháng sinh của Haemophilus influenzae và Streptococcus pneumoniae ở trẻ dưới 60 tháng tuổi lành và bị viêm phổi tại Cần Thơ năm 2007
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TRẦN ĐỖ HÙNG NGHIÊN CỨU TỶ LỆ, MỨC ĐỘ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA HAEMOPHILUS INFLUENZAE VÀ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE Ở TRẺ DƯỚI 60 THÁNG TUỔI LÀNH VÀ BỊ VIÊM PHỔI TẠI CẦN THƠ NĂM 2007 CHUYÊN NGÀNH : VI KHUẨN HỌC MÃ SỐ : 62 72 68 01 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC HÀ NỘI – 2009 Cơng trình hồn thành tại: HỌC VIỆN QUÂN Y Người hướng dẫn khoa học: GS.TS LÊ HUY CHÍNH PGS.TS HỒNG NGỌC HIỂN Phản biện 1: GS.TSKH NGUYỄN VĂN DỊP Phản biện 2: GS.TSKH PHÙNG ĐẮC CAM Phản biện 3: PGS.TS PHẠM VĂN CA Luận án bảo vệ trước hội đồng chấm Luận án cấp Nhà nước họp Học viện Quân y Vào hồi 08 30 ngày 18 tháng 04 năm 2009 Có thể tìm luận án tại: - Thư viện Quốc gia - Thư viện Học viện Quân y DANH MỤC NHỮNG CÔNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ ĐÃ ĐĂNG IN CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Trần Đỗ Hùng (2008), "Nghiên cứu nguyên gây viêm phổi Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae trẻ em tuổi bệnh viện Nhi Đồng Cần Thơ", Tạp Chí y học thực hành, Bộ Y tế xuất bản, (599+600), tr 26 - 27 Trần Đỗ Hùng (2008), "Tình hình nhiễm kháng kháng sinh Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae trẻ 60 tháng tuổi bị nhiễm khuẩn hô hấp cấp tính khoa hơ hấp - bệnh viện Nhi Đồng Cần Thơ", Tạp Chí y học thực hành, Bộ Y tế xuất bản, (604+605), tr 73 - 75 Trần Đỗ Hùng (2008), "Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm, tính kháng kháng sinh Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae gây viêm phổi bệnh nhi đặt ống nội khí quản bệnh viện Nhi Đồng Cần Thơ", Tạp Chí y học thực hành, Bộ Y tế xuất bản, (604+605), tr 110 - 113 Trần Đỗ Hùng, Lê Huy Chính (2008), "Xác định nồng độ ức chế tối thiểu phương pháp Etest số kháng sinh Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae", Tạp Chí y học thực hành, Bộ Y tế xuất bản, (610+611), tr 92 - 95 Trần Đỗ Hùng, Nguyễn Thái Sơn (2008), "Tình hình mang khuẩn, độ nhạy cảm kháng sinh Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae phân lập từ họng mũi trẻ từ đến tuổi số trường mẫu giáo thành phố Cần Thơ năm 2007", Tạp chí y dược học quân sự, 5(33), tr 34 - 39 ĐẶT VẤN ĐỀ Tính cấp thiết đề tài Nhiễm trùng hơ hấp cấp tính nhóm bệnh phổ biến trẻ em Bệnh có tỷ lệ mắc cao, tần suất mắc nhiều lần năm nguyên nhân hàng đầu gây tử vong trẻ em, đặc biệt trẻ em tuổi Tổ chức Y Tế Thế giới (WHO) coi việc xác định phòng chống nguyên gây bệnh nhiễm trùng hơ hấp cấp tính chiến lược nhằm nâng cao sức khoẻ trẻ em Ở nước phát triển, nguyên gây nhiễm trùng hơ hấp cấp tính chủ yếu virus (80,0 – 90,0%) nước phát triển nguyên gây bệnh chủ yếu lại vi khuẩn (75,0%) Các cơng trình nghiên cứu cho thấy vi khuẩn gây nhiễm trùng đường hô hấp trẻ Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Trong năm gần tính nhạy cảm S pneumoniae với penicillin H influenzae với ampicillin ngày giảm Các hệ kháng sinh đời ngày nhiều, việc sử dụng kháng sinh không hợp lý làm tăng kháng kháng sinh vi khuẩn Tại vùng đồng sơng Cửu Long chưa có nhiều nghiên cứu vấn đề Với hy vọng góp phần làm giảm tỷ lệ tử vong trẻ bị nhiễm trùng hơ hấp cấp tính, làm giảm chi phí điều trị bệnh, phù hợp với điều kiện kinh tế khu vực Tây Nam cần thiết cấp bách, tiến hành nghiên cứu đề tài nhằm Mục tiêu: - Xác định, so sánh tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae trẻ 60 tháng tuổi lành bị viêm phổi - Đánh giá, so sánh mức độ kháng kháng sinh hai loại vi khuẩn phân lập Bố cục Luận án Luận án gồm có 136 trang đó: - Đặt vấn đề: trang - Chương 1: Tổng quan tài liệu: 39 trang - Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu: 15 trang - Chương 3: Kết nghiên cứu: 43 trang - Bàn luận: 34 trang - Kết luận kiến nghị: trang Ý nghĩa khoa học đóng góp luận án - Xác định nguyên vi khuẩn gây bệnh quan trọng vai trị Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae - Phát Haemophilus influenzae biotyp I serotyp b có tương quan với tác nhân gây viêm phổi chiếm tỷ lệ cao trẻ em 60 tháng tuổi - Các kết thực trạng sử dụng kháng sinh điều trị tình trạng kháng thuốc chủng vi khuẩn gây bệnh phân lập đóng góp đáng ghi nhận - Đã xác định MIC90 penicillin, amoxicillin, erythromycin, cotrimoxazol chloramphenicol Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae vượt mức cho phép NCCLS - Cung cấp số liệu khoa học quan trọng cho nhà lâm sàng cơng tác dự phịng CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm giải phẫu đường hô hấp Hệ thống đường hơ hấp gồm: Đường dẫn khí có chức dẫn khí từ ngồi vào phổi từ phổi đào thải mơi trường bên ngồi Chức chủ yếu máy hô hấp thở để cung cấp khí O2 cho thể lọai bỏ khí CO2 ngồi thể Về mặt giải phẫu đường hơ hấp người ta chia cách tương đối làm hai phần: đường hô hấp đường hô hấp dưới, lấy nắp quản làm mốc - Viêm đường hô hấp bao gồm: viêm mũi, viêm họng, viêm amidal, viêm tai giữa, viêm xoang - Viêm đường hô hấp bao gồm: viêm quản, khí quản, viêm phế quản, viêm tiểu phế quản, viêm phổi 1.2 Cơ chế miễn dịch bảo vệ đường hô hấp Vi sinh vật xâm nhập đường thở, chúng gặp hệ thống bảo vệ đường hô hấp gồm: Hàng rào niêm mạc (lớp màng nhầy, vi nhung mao, nắp quản, cạnh tranh vi sinh cư trú bình thường vi sinh vật gây bệnh, IgA tiết, ), hàng rào thực bào (đại thực bào, hệ thống võng nội mô, tế bào diệt tự nhiên, tế bào lympho Tc, tế bào lympho Th, ), hàng rào dịch thể (kháng thể, bổ thể, interferon, ) 1.3.Tình hình nhiễm trùng hơ hấp cấp tính trẻ em tuổi 1.3.1 Trên giới Theo WHO hàng năm có khoảng 12 triệu trẻ em tuổi tử vong năm Trong 70,0% liên quan đến nhiễm trùng hơ hấp cấp tính, tiêu chảy, sốt rét, suy dinh dưỡng số 90,0% trường hợp mắc bệnh trẻ em nước phát triển Nhiễm trùng hơ hấp cấp tính nhóm bệnh có tần suất mắc cao, trung bình trẻ mắc – lần/năm, lần kéo dài - ngày Tần suất trẻ mắc nhiễm trùng hơ hấp cấp tính thay đổi phụ thuộc vào lứa tuổi yếu tố liên quan khác như: trẻ đẻ non, trẻ suy dinh dưỡng, điều kiện chăm sóc, mơi trường sống ô nhiễm Tỷ lệ nhiễm trùng hô hấp cấp tính có khác biệt vùng nơng thơn thành thị, miền núi đồng Ở nước phát triển tần suất mắc nhiễm trùng hô hấp cấp tính thành thị 7,1 lần/năm, nơng thơn 4,5 lần/năm Điều giải thích mơi trường sống thành phố bị ô nhiễm, mật độ dân cư đơng đúc, nguy lây nhiễm trẻ lành mang vi khuẩn cao nên tỷ lệ bệnh cao 1.3.2 Tình hình nhiễm trùng hơ hấp cấp tính Việt Nam Tỷ lệ tử vong chung trẻ tuổi bệnh viện tỉnh trung bình 2,57%, NTHHCT 0,74%: có 83,7 % trẻ tử vong tuổi, nam chiếm 56,4%, nữ chiếm 43,6%, với 92,1% trẻ tử vong sống nông thôn Một điều tra khác cộng đồng cho thấy số tỉnh thành tỷ suất tử vong trẻ tuổi NTHHCT/1000 trẻ sinh sống 0,44 đến 7,95 Trong tỷ suất trẻ tử vong NTHHCT/ tổng số tử vong bệnh tật 18,18 - 42,85/100 trẻ, trẻ tuổi tử vong NTHHCT đứng hàng đầu 1.3.3 Tình hình mang vi trùng có khả gây nhiễm trùng hơ hấp cấp tính trẻ em 1.3.3.1 Yếu tố thuận lợi Trẻ em nhỏ phận hơ hấp chưa hồn chỉnh điều kiện thuận lợi cho trẻ dễ mắc NTHHCT đưa đến biến chứng nặng Sau nhiễm virus (cúm, sởi, ), lạnh, nhiễm hóa chất Trẻ em bị suy dinh dưỡng cao, môi trường sống bị ô nhiễm, ẩm thấp, điều kiện vệ sinh thấp kém, thiếu hiểu biết y tế, trình độ hiểu biết chăm sóc trẻ em bà mẹ hạn chế, 1.3.3.2 Yếu tố thời tiết môi trường Việt Nam nước có khí hậu nhiệt đới, gió mùa, nóng ẩm Thời tiết thay đổi thường xuyên đột ngột trẻ mắc bệnh quanh năm Những nghiên cứu gần cho thấy khói thuốc lá, khói bếp, bụi tăng nguy mắc NTHHCT trẻ em Các trẻ nhỏ có bố, mẹ hút thuốc dễ bị viêm đường hô hấp trẻ khác Tình trạng kinh tế xã hội nước phát triển nhà chật chội, đông đúc, điều kiện vệ sinh thấp kém, 1.3.3.3 Các nguyên gây nhiễm trùng đường hô hấp * Virus: Orthomyxovirus(influenzae virus), Paramyxovirus (virus quai bị, virus hợp bào, virus sởi, virus cúm, ), Rubella (Adenovirus, Rhinovirus, SARS, ) RSV đứng hàng đầu nguyên ARI * Vi nấm: Pneumocytis carinii, Candidia albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus * Vi khuẩn thường gây NTHHCT: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Streptococcus viridans, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus haemolytic nhóm A, Klebsiella pneumoniae 1.4 Các vi khuẩn thường gây nhiễm trùng hơ hấp cấp tính trẻ em 1.4.1 Heamophilus influenzae * Đặc điểm hình dạng đặc tính sinh học: Cầu trực khuẩn Gram âm Đôi lúc đa hình dạng Kích thước 0,3 x 0,5 x 3μm Xếp thành chuỗi ngắn dài Vi khuẩn mọc tốt mơi trường thạch chocolate có yếu tố X V: 37oC, 18-24 giờ, 5%CO2 Trên mơi trường thạch chocolate có Bacitracin 37oC/18-24 giờ/5%CO2 Khuẩn lạc nhỏ hạt sương Cấy truyền nhiều lần khuẩn lạc có dạng R M Mọc chậm môi trường dinh dưỡng lỏng VK lên men đường glucose, không lên men đường manit lactose Dựa vào đặc tính sinh hóa: có biotýp Dựa vào kháng ngun serotýp Vỏ có vai trị quan trọng chống thực bào độc lực vi khuẩn Vỏ Hib sử dụng tinh chế vaccine * Khả gây bệnh: gây bệnh nguyên phát, thường thứ phát sau nhiễm virus KN vỏ (polysaccharide) đặc tính gây bệnh H influenzae (Hib) H influenzae gây viêm phổi, viêm phế quản, viêm màng não mủ, viêm tiểu thiệt, nhiễm khuẩn huyết,… * Chẩn đoán xác định: nhuộm soi (trực khuẩn nhỏ, bắt màu Gram âm), khuẩn lạc (dẹt, trong, bờ đều, óng ánh chiếu sáng), thử nghiệm XV (+), Dnase, biotýp (I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII), Serotýp b * Phịng bệnh: Khơng đặc hiệu (cách ly bệnh nhân, uống kháng sinh dự phòng), đặc hiệu (vaccine hệ thứ gây đáp ứng miễn dịch tốt nhờ gắn KN với protein mang) * Điều trị: Tốt dựa vào kháng sinh đồ (khi chưa có kháng sinh đồ, ampicillin, chloramphenicol cephalosporin hệ 3) 1.4.2 Streptococcus pneumoniae * Đặc điểm hình dạng đặc tính sinh học: Cầu khuẩn Gram dương, dạng hình nến, thường xếp thành đơi, đầu trịn quay vào chuỗi ngắn (mơi trường lỏng) ,có thể biến thành Gram âm (trường hợp canh cấy già) Vi khuẩn mọc tốt môi trường thạch máu: 37oC, 18–24 giờ, %CO2, gây tan máu týp α, bị ly giải môi trường muối mật, nhạy cảm với optochin, lên men nhiều loại đường: glucose, lactose, maltose, saccarose, khơng lên men: manit, sorbitol, glycerol Có loại kháng nguyên, KN protein chung, KN vỏ polysaccharide đặc hiệu cho serotýp, có 90 serotýp, serotýp gặp thường 6B, 19F, 23F kể đến 6S, 15, 3, 14, 9V Định týp có ý nghĩa dịch tễ học S pneumoniae sống lâu đờm, mủ khô vài tháng Bị diệt 60oC/30 phút thuốc sát trùng thông thường * Khả gây bệnh: gây bệnh nguyên phát, thường thứ phát sau nhiễm virus KN vỏ (polysaccharide) tính chất gây bệnh S pneumoniae, vi khuẩn gây viêm phế quản, viêm màng não mủ, viêm màng tim, viêm khớp, viêm thận, viêm xoang, viêm tai giữa, nhiễm khuẩn huyết,… * Chẩn đoán xác định: nhuộm soi (vi khuẩn hình cầu, đứng thành đơi, bắt màu Gram dương), khuẩn lạc nhỏ [(0,5 – 1mm), có chóp đầu đinh ghim], xung quanh khuẩn lạc có quầng tan máu màu xanh (tan máu α), thử nghiệm optochin (+): đường kính vùng ức chế ≥ 14mm * Phịng bệnh: phịng bệnh khó khăn S pneumoniae lây bệnh theo đường hơ hấp Phịng bệnh đặc hiệu vaccine polyrsaccharide cộng hợp * Điều trị: S pneumoniae nhạy cảm với nhiều loại kháng sinh Tốt nên làm kháng sinh đồ tính kháng kháng sinh S pneumoniae lúc tăng 1.4.3 Tác động qua lại H influenzae S pneumoniae Cả hai loại vi khuẩn H influenzae S pneumoniae tìm thấy đường hơ hấp người Khi H influenzae bị công S pneumoniae, báo hiệu cho hệ thống miễn dịch công S pneumoniae Sự kết hợp loại với thiết lập báo động hệ thống miễn dịch mà khơng thể hình thành hai riêng biệt Không hiểu H influenzae không bị ảnh hưởng đáp ứng hệ thống miễn dịch 1.4.4 Tình hình kháng kháng sinh số vi khuẩn gây nhiễm trùng hơ hấp cấp tính 1.4.4.1 Tình hình kháng kháng sinh H influenzae Theo nghiên cứu Canada năm 2005, có 33,4% số chủng H influenzae sinh beta-lactamase 67,2% nhạy cảm với penicillin 51,1% nhạy cảm với clarithromycin Ở Việt Nam, nhiều cơng trình nghiên cứu nhạy cảm kháng sinh H influenzae vùng cho thấy, H influenzae giảm nhạy cảm với loại kháng sinh thông thường Trần Thị Biền nghiên cứu trẻ em đến khám bệnh viện Xanh-pôn cho thấy H influenzae kháng ampicillin 35,3% Theo dõi tính kháng kháng sinh H influenzae, chương trình giám sát quốc gia tính kháng kháng sinh vi khuẩn thường gặp cho thấy mức độ kháng kháng sinh gia tăng đến mức báo động Năm 1996 H influenzae kháng ampicillin với tỷ lệ 4,1% đến 1997 tỷ lệ 47,3% (tăng gấp 12 lần), với ampicillin, H influenzae kháng co-trimoxazole từ 12,1% lên đến 64,0% 1.4.4.2 Tình hình kháng kháng sinh S pneumoniae Một nghiên cứu 461 trẻ khỏe mạnh Australia tháng 4-1998 cho thấy S pneumoniae kháng penicillin 12,3%, có 0,6% đề kháng mức độ cao Tỷ lệ đề kháng co-trimoxazole 44,4% kháng erythromycin 18,1% Tỷ lệ S pneumoniae đề kháng đa kháng sinh 19,0% Theo nghiên cứu Nguyễn Tiến Dũng cộng năm 1998 S pneumoniae cịn nhạy cảm 100% với ampicillin, đề kháng 66,0% với co-trimoxazole, 71,0% với erythromycin 36,0% với chloramphenicol Trần Viết Thắng nghiên cứu 203 trẻ lành xã vùng cao Yên Bái từ năm 1993 đến năm 1997 thấy độ nhạy cảm S pneumoniae với co-trimoxazole giảm từ 58,7% xuống 36,6% Trong năm gần nhà nghiên cứu nhận thấy S pneumoniae ngày gia tăng kháng đa kháng sinh, đặc biệt nhóm quinolon CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Ở trẻ lành Tiêu chuẩn lựa chọn: Trẻ lành 60 tháng tuổi số trường mầm non thuộc địa bàn Cần Thơ năm 2007 Tiêu chuẩn loại trừ: Trẻ có biểu NKHHCT: sốt, chảy nước mũi, ho, chảy mủ tai, đau họng, họng viêm đỏ, trẻ mắc bệnh nhiễm khuẩn khác, trẻ suy dinh dưỡng, tim bẩm sinh, điều trị kháng sinh, mắc bệnh nhiễm khuẩn có điều trị kháng sinh khơng vịng tháng trước, phụ huynh không đồng ý hợp tác,… Ở trẻ bị viêm phổi Tiêu chuẩn lựa chọn (WHO năm 1997): Trẻ bị viêm phổi nằm điều trị Khoa hô hấp bệnh viện Nhi Đồng Cần Thơ năm 2007, bác sỹ nhi khoa lựa chọn theo tiêu chuẩn sau: trẻ 60 tháng tuổi, biểu viêm phổi cấp tính (Sốt cao ≥ 380C, nhịp thở ≥ 40 lần/ phút, ho, thở khị khè, có ran ẩm nhỏ hạt, X quang phổi có thâm nhiễm, bạch cầu đa nhân chiếm ưu thế) Tiêu chuẩn loại trừ: NKHHCT trên, NKHHCT kèm bệnh lý khác, trẻ NKHHCT điều trị, gia đình khơng đồng ý hợp tác, trường hợp bệnh phẩm không đạt tiêu chuẩn cần phải lấy lại mà gia đình khơng đồng ý 2.2 Vật liệu nghiên cứu Môi trường nuôi cấy, định danh vi khuẩn làm kháng sinh đồ hãng Biorad (Pháp) cung cấp, khoanh giấy kháng sinh hãng Biorad (Pháp) cung cấp, dải Etest kháng sinh hãng Bio-Disk cung cấp, vi khuẩn kiểm chứng: S pneumoniae (Streptococcus pneumoniae ATCC ® 49619), H influenzae (Haemophilus influenzae ATCC ® 49247, Haemophilus influenzae ATCC ® 49766, Escherichia coli ATCC ® 35218 cho thử nghiệm amox/a.clav) 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu Được tiến hành theo phương pháp mô tả cắt ngang 2.3.2 Cỡ mẫu nghiên cứu Mẫu: n = Z 1−α / (1 − p ) ρ ×ε n: cỡ mẫu tối thiểu p: Tỷ lệ cân đối ε : Sai số tương đối cho phép ε1 = 0,33 → ε12 = 0,1 ; ε2 = 0,25→ ε22 = 0,06 Z1-α/2 : Hệ số tin cậy, chọn độ tin cậy 95% → Z1-α/2 = 1,96 Nhóm cộng đồng: P1 = 10% = 0,1 → - 0,1 = 0,9 → 310 mẫu Nhóm Bệnh viện: P2 = 32% = 0,32 → – 0,32 = 0,68 →131 mẫu Như tổng cộng cho nơi 441 mẫu 2.3.3 Nội dung nghiên cứu Xác định, so sánh tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae trẻ 60 tháng tuổi lành bị viêm phổi Đánh giá, so sánh mức độ kháng kháng sinh hai loại vi khuẩn phân lập 2.3.4 Phương pháp lấy bệnh phẩm Cách lấy bệnh phẩm họng-mũi: Lấy bệnh phẩm họng mũi theo phương pháp ngốy họng mũi tăm bơng mềm (theo phương pháp ARI giới) 2.3.5 Phương pháp nuôi cấy, phân lập xác định vi khuẩn 2.3.5.1 Phân lập xác định H influenzae Bệnh phẩm (cho vào Stuart-Amies), nhuộm Gram (trực khuẩn Gram âm), thạch chocolate có bacitracin 300μg/ml (Ủ 370C, 18-24 giờ, 5% CO2), Chọn khuẩn lạc nghi ngờ nhuộm Gram (Gram âm, que nhỏ, thạch chocolate với khoanh X, V, XV, H influenzae (Biotýp & serotýp b) 2.3.5.2 Phân lập xác định S pneumoniae Bệnh phẩm (cho vào môi trường Stuart-Amies), nhuộm Gram (cầu khuẩn Gram dương), thạch máu có gentamicin 5μg/ml (ủ 18-24 giờ, 10 3.1.3 So sánh tỷ lệ phân lập chủng H influenzae S pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Bảng 3.3 So sánh tỷ lệ phân lập chủng H influenzae S pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi theo giới tính Trẻ lành Trẻ bị viêm phổi H influenzae S pneumoniae H influenzae S pneumoniae Giới tính Dương Dương Dương Dương % % % % tính tính tính tính Nam 62 27,2 79 34,6 37 23,9 59 38,1 Nữ 53 31,4 58 34,3 16 17,6 43 47,3 Tổng số 115 137 53 102 29,0 34,5 21,5 41,5 p p < 0,05 p < 0,05 Bảng 3.4 So sánh tỷ lệ phân lập chủng Haemophilus influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi theo biotýp Biotýp I II III IV V VI VII VIII p Trẻ lành H influenzae Dương tính % 15 13,0 14 12,2 40 34,8 0,0 0,0 44 38,3 0,0 1,7 Trẻ bị viêm phổi H influenzae Dương tính % 39 73,6 14 26,4 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 p < 0,05 Bảng 3.5 So sánh tỷ lệ phân lập chủng Haemophilus influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi theo serotýp Serotýp Serotýp b(Hib) Serotýp không b Tổng cộng p Trẻ lành H influenzae Dương tính % 12 10,4 103 89,6 115 100 Trẻ bị viêm phổi H influenzae Dương tính % 35 66,0 18 34,0 53 100 p < 0,05 11 3.2 Đánh giá, so sánh mức độ kháng kháng sinh hai loại vi khuẩn phân lập 3.2.1 Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae trẻ lành 60 tháng tuổi Bảng 3.6 Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae trẻ lành 60 tháng tuổi (n = 115) STT Tên kháng sinh Amoxicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Mức độ kháng kháng sinh H influenzae Kháng Trung gian Nhạy SL % SL % SL % 65 14 12,2 36 31,3 56,5 7,0 7,8 98 85,2 30 26,0 2,6 82 71,3 60 33 28,7 22 19,1 52,2 6,1 13 11,3 95 82,6 59 26 22,6 30 26,1 51,3 65 31 27,0 19 16,5 56,5 0,9 1,7 112 97,4 Bảng 3.7 Mức độ kháng kháng sinh chủng S pneumoniae trẻ lành 60 tháng tuổi (n = 137) STT Tên kháng sinh Mức độ kháng kháng sinh S pneumoniae Kháng Trung gian Nhạy SL % SL % SL % Penicillin 71 51,8 11 8,0 55 40,2 Amox/a.clav 15 10,9 23 16,8 99 72,3 Co-trimoxazol 23 16,8 11 8,0 103 75,2 Erythromycin 105 76,7 11 8,0 21 15,3 Ceftriaxon 58 42,3 40 29,2 39 28,5 Cefuroxim 15 10,9 22 16,0 100 73,1 Cefotaxim 76 55,5 29 21,2 32 23,3 Chloramphenicol 44 32,1 5,9 85 62,0 Ciprofloxacin 1,5 1,5 33 97,0 12 Bảng 3.8 Kết MIC chủng H influenzae kháng kháng sinh trẻ lành 60 tháng tuổi Tên kháng sinh Amoxicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Kết KSĐ theo PP Etest MIC90 (µg/ml) SL Kháng (%) Kháng(µg/ml) 65/115 56,5 16-192* 8/115 7,0 6-8 30/115 26,0 6-64* 60/115 52,2 4-8 7/115 6,1 4-8 59/115 51,3 16-24 65/115 56,5 8-32* 1/115 0,9 Code AMX AMC SXT CRO CXM CTX CHL CIP Bảng 3.9 Kết MIC chủng S pneumoniae kháng kháng sinh trẻ lành 60 tháng tuổi Tên kháng sinh Penicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Erythromycin Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Kết KSĐ theo PP Etest MIC90 (µg/ml) SL Kháng (%) Kháng (µg/ml) PEN 71/137 51,8 64 128* AMC 15/137 10,9 3-4 SXT 23/137 16,8 32-64* ERY 105/137 76,7 8-32* CRO 58/137 42,3 3-4 CXM 15/137 10,9 3-4 CTX 76/137 55,5 4-16* CHL 44/137 32,1 16-48* CIP 2/137 1,5 2-3 Code 3.2.2 Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Bảng 3.10 Mức độ kháng kháng sinh chủngH influenzae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi (n = 53) STT Tên kháng sinh Amoxicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Mức độ kháng kháng sinh H influenzae Kháng Trung gian Nhạy SL % SL % SL % 43 7,5 11,3 81,1 14 26,4 1,9 38 71,7 42 1,9 10 18,9 79,2 36 0,0 17 32,0 68,0 12 22,6 12 22,6 29 54,7 34 0,0 19 35,8 64,1 33 0,0 20 37,7 62,3 1,9 0,0 52 98,1 13 Bảng 3.11 Mức độ kháng kháng sinh chủng S pneumoniae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi (n = 102) STT Tên kháng sinh Penicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Erythromycin Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Mức độ kháng kháng sinh S pneumoniae Kháng Trung gian Nhạy SL % SL % SL % 79 2,9 20 19,6 77,5 13 12,7 2,9 86 84,4 97 0,0 5,0 95,0 75 6,9 20 19,6 73,5 58 56,9 4,9 39 38,2 14 13,7 19 18,6 69 67,7 55 53,9 5,9 41 40,2 50 49,1 2,9 49 48,0 12 11,8 0,0 90 88,2 Bảng 3.12 Kết MIC chủng H influenzae kháng kháng sinh trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tên kháng sinh Code Amoxicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin AMX AMC SXT CRO CXM CTX CHL CIP Kết KSĐ theo PP Etest MIC90 (µg/ml) SL Kháng (%) Kháng (µg/ml) 43/53 81,1 16-192* 14/53 26,4 6-8 42/53 79,2 6-64* 36/53 68,0 4-8 12/53 22,6 4-8 34/53 64,1 16-24* 33/53 62,3 8-32* 1/53 1,9 Bảng 3.13 Kết MIC chủng S pneumoniae kháng kháng sinh trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tên kháng sinh Penicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Erythromycin Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin Kết KSĐ theo PP Etest MIC90 (µg/ml) SL Kháng (%) Kháng (µg/ml) PEN 79/102 77,5 64 128* AMC 13/102 12,7 3-4 SXT 97/102 95,0 32-64* ERY 75/102 73,5 8-32 CRO 58/102 56,9 3-4 CXM 14/102 13,7 4-6 CTX 55/102 53,9 4-16* CHL 50/102 49,1 16-48* CIP 12/102 11,8 2-3 Code 14 3.2.3 So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Bảng 3.14 So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng Haemophilus influenzae phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi theo phương pháp Kirby - Bauer STT Tên kháng sinh Amoxicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin p Trẻ lành Trẻ bị viêm phổi H influenzae (n=115) H influenzae (n=53) Kháng Kháng SL % SL % 65 43 56,5 81,1 7,0 14 26,4 30 42 26,0 79,2 60 36 52,2 68,0 6,1 12 22,6 59 51,3 34 64,1 65 56,5 33 62,3 0,9 1,9 p < 0,05 Bảng 3.15 So sánh mức độ đa kháng kháng sinh chủng Haemophilus influenzae phân lập trẻ lành (n = 115) trẻ bị viêm phổi(n = 53) 60 tháng tuổi theo phương pháp Kirby - Bauer Mức độ đa kháng Mức độ đa kháng kháng sinh kháng sinh Số Tên kháng H influenzae trẻ H influenzae trẻ bị TT sinh(code) lành viêm phổi SL % % SL 14 AMX + AMC 7,0 26,4 30 42 AMX + SXT 26,0 79,2 60 52,2 68,0 36 AMX + CRO 59 51,3 64,1 34 AMX + CTX 65 56,5 62,3 33 AMX + CHL 30 33 AMX + SXT + CTX + CHL 26,0 62,3 AMX + SXT + CXM + 30 26,0 22,6 12 CTX + CHL AMX + SXT + CRO + 12 6,1 22,6 CXM + CTX + CHL p p < 0,05 15 Bảng 3.16 So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng Streptococcus pneumoniae phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi theo phương pháp Kirby - Bauer STT Tên kháng sinh Penicillin Amox/a.clav Co-trimoxazol Erythromycin Ceftriaxon Cefuroxim Cefotaxim Chloramphenicol Ciprofloxacin p Trẻ lành S pneumoniae (n=137) Kháng SL % 71 51,8 15 10,9 23 16,8 105 76,7 58 42,3 15 10,9 76 55,5 44 32,1 1,5 Trẻ bị viêm phổi S pneumoniae (n=102) Kháng SL % 79 77,5 13 12,7 97 95,0 75 73,5 58 56,9 14 13,7 55 53,9 50 49,1 12 11,8 p < 0,05 Bảng 3.17 So sánh mức độ đa kháng kháng sinh chủng Streptococcus pneumoniae phân lập trẻ lành (n = 137) trẻ bị viêm phổi (n = 102) 60 tháng tuổi theo phương pháp Kirby - Bauer Số TT Tên kháng sinh(code) PEN + SXT PEN + ERY PEN + CRO PEN + CTX PEN + CHL PEN + CRO + CHL PEN + CTX + CHL PEN + AMC + SXT + ERY PEN + SXT + ERY + CHL PEN + AMC + ERY + CTX + 10 CHL PEN + AMC + SXT + ERY + 11 CTX + CHL p Mức độ đa kháng kháng sinh S pneumoniae trẻ lành SL % 23 16,8 71 51,8 58 42,3 71 51,8 44 32,1 44 32,1 44 32,1 15 11,0 23 16,8 Mức độ đa kháng kháng sinh S pneumoniae trẻ bị viêm phổi % SL 79 77,5 75 73,5 56,9 58 53,9 55 50 49,1 50 49,1 50 49,1 12,7 13 50 49,1 15 11,0 12,7 13 15 11,0 12,7 13 p < 0,05 16 Bảng 3.18 So sánh MIC chủng H influenzae kháng với amoxicillin, co-trimoxazol, cefotaxim, chloramphenicol trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tên kháng sinh MIC90 (μg/ml) Amoxicillin 16 45 192 Co-trimoxazol 16 64 Cefotaxim 16 24 Chloramphenicol 16 32 Trẻ lành Trẻ bị viêm phổi SL % SL % n = 65 n = 43 0,0 20 46,5 55 84,6 0,0 10 23 15,4 53,5 n = 30 n = 42 16,7 21,4 21 70,0 11 26,2 22 13,3 52,4 n = 59 n = 34 35 59,3 10 29,4 24 24 40,7 70,6 n = 65 n = 33 12,3 18,2 40 61,5 21,2 17 20 26,2 60,6 p p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 Bảng 3.19 So sánh MIC chủng S pneumoniae kháng với penicillin, co-trimoxazol, erythromycin, cefotaxim, chloramphenicol trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tên kháng sinh MIC90 (μg/ml) Penicillin 64 96 128 Co-trimoxazol 32 48 64 Erythromycin Cefotaxim Chloramphenicol 12 16 24 32 12 16 16 24 32 48 64 Trẻ lành SL % n = 71 39 55,0 23 32,4 12,6 n = 23 8,7 13 56,5 34,8 n = 105 8,6 24 22,8 16 15,3 25 23,8 31 29,5 n = 76 20 26,3 5,3 22 29,0 21 27,6 11,8 n = 44 16,0 20,4 20 45,4 18,2 0,0 Trẻ bị viêm phổi SL % n = 79 45 57,0 0,0 34 43,0 n = 97 2,0 1,0 94 97,0 n = 75 6,7 12,0 9,3 21 28,0 33 44,0 n = 55 7,3 7,3 16,4 13 23,6 25 45,4 n = 50 0,0 0,0 0,0 31 62,0 19 38,0 p p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 17 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Xác định, so sánh tỷ lệ phân lập H influenzae S pneumoniae trẻ 60 tháng tuổi lành bị viêm phổi 4.1.1 Tỷ lệ phân lập H influenzae S pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi * Tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ lành 60 tháng tuổi Kết xác định trẻ lành cộng đồng H influenzae tỷ lệ phân lập 29,0% So với số nghiên cứu nước Tỷ lệ tương đương với tác giả như: Lê Ðăng Hà (1999) TPHCM 30,9%, Ðoàn Mai Phương (1999) Hà Nội 31,6%, Lê Thị Hoa (2001) 31,5%), Nguyễn Hoàng Hiệp (2003) Yên Bái 29,4%, kết ghi nhận lại cao so với tác giả: Lê Hồng Quang (1995) Yên Bái 18,0%, Trần Viết Thắng (1997) Yên Bái 15,1%, Lê Ðăng Hà (1999) Huế 21,7%, Trịnh Tâm Thanh (2001) 14,5%, Nhưng thấp so với tác giả Lê Ðăng Hà (1999) Hà Nội 40,1% Sự khác biệt kết tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ lành cộng đồng này, giải thích khác vùng nghiên cứu như: mật độ dân cư, mức độ ô nhiễm môi trường, tình hình giao lưu kinh tế, phong tục tập quán, Mặt khác, tỷ lệ phân lập H influenzae phụ thuộc vào thời điểm nghiên cứu khác Như vậy, với tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ lành cộng đồng mà ghi nhận 29,0% tỷ lệ khơng nhỏ Bên cạnh đó, chúng tơi xác định 10,4% tổng số H influenzae týp b Nguy tiềm tàng bệnh nhiễm trùng hơ hấp cấp tính, bệnh viêm màng não mủ trẻ nhỏ H influenzae týp b, điểm nghiên cứu đáng kể Tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ nam ghi nhận nghiên cứu 27,2% tương đương với tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ nữ 31,4%, tỷ lệ phân lập chung cho nam nữ 29% Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với (p > 0,05) Trong nghiên cứu ghi nhận tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ 24-36 tháng tuổi 33,3 %, trẻ từ 37-48 tháng tuổi 29,9%, trẻ từ 49 - < 60 tháng tuổi 24,4% Tuy nhiên, khác biệt tỷ lệ có ý nghĩa thống kê với (p < 0,05) Kết tỷ lệ phân lập H influenzae theo biotýp I chiếm tỷ lệ 13,0%, biotýp II chiếm tỷ lệ 12,2%, biotýp III chiếm tỷ lệ 34,8%, biotýp VI chiếm tỷ lệ 38,3%, biotýp VIII chiếm tỷ lệ 1,7% Tỷ lệ phù hợp với tác giả nghiên cứu nước nước 18 * Tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tỷ lệ phân lập H influenzae 21,5% Để xác định loại biotýp chủng H influenzae tiến hành từ thử nghiệm sinh hóa Tỷ lệ phân lập chủng H influenzae biotýp I chiếm tỷ lệ cao 73,6%, biotýp II chiếm tỷ lệ 26,4% Tỷ lệ phù hợp với tác giả nghiên cứu trước (Bệnh viện Nhi Trung ương) giới Bởi vì, biotýp I thường có khả xâm nhập mạnh gây bệnh viêm cấp tính (viêm phổi, viêm màng não, nhiễm khuẩn huyết) biotýp lại gặp người lành mang khuẩn Trong nghiên cứu năm 2007 tỷ lệ serotýp b 66,0% tỷ lệ serotýp khác 34,0% Trong nghiên cứu khác nước tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae týp b viêm phổi chủng Haemophilus influenzae týp b từ 55,0% đến 75,0% Như vậy, kết phù hợp với tác giả nghiên cứu trước * Tỷ lệ phân lập S pneumoniae trẻ lành 60 tháng tuổi Tỷ lệ phân lập S pneumoniae 34,5% So với nghiên cứu nước, kết thấp với kết số tác giả như: Lê Thị Hoa (2001) Lào Cai 60,0%, Ðoàn Mai Phương Hà Nội (1999) 42,0%, Nguyễn Hoàng Hiệp Yên Bái (2003) 39,0%, Nhưng cao so với Trần Viết Thắng Yên Bái (1996) 30,8%, Trịnh Tâm Thanh (2001) Hà Giang - Tây Ninh - Ðăklăk 25,5% So với nghiên cứu nước ngoài, kết nghiên cứu cao so với kết nghiên cứu Mirinda - Woveles cộng nghiên cứu 127 trẻ lành cho kết tỷ lệ mang S pneumoniae 21,3%, thấp tác giả Morrissey cộng Hồng Kông, nghiên cứu 1455 trẻ lành, tỷ lệ phân lập S pneumoniae 36,0% thấp so với tác giả Ronny cộng sự, nghiên cứu 1214 trẻ lành Mỹ (tháng năm 2001) 44,0% Sở dĩ, có khác tỷ lệ phân lập vi khuẩn nghiên cứu với tác giả khác, nghiên cứu lứa tuổi khác nhau, vùng miền khác Chúng ghi nhận tỷ lệ phân lập S pneumoniae theo độ tuổi khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập S pneumoniae trẻ 24 – 36 tháng tuổi chiếm tỷ lệ 19,4%; 37 – 48 tháng tuổi chiếm tỷ lệ 36,0%; 49 < 60 tháng tuổi chiếm tỷ lệ 36,0% 19 * Tỷ lệ phân lập S pneumoniae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Từ kết nghiên cứu Cần Thơ năm 2007 tỷ lệ phân lập vi khuẩn dương tính chung S pneumoniae chúng tơi 41,5%, nhóm tuổi < 24 tháng 44,8%, 24 đến 36 tháng 27,0% 37 60 tháng 25,0%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 4.1.2 So sánh tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi * So sánh tỷ lệ phân lập chủng H influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Theo giới tính: Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae 29,0% trẻ lành trẻ bị viêm phổi 21,5% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae (trẻ lành) nam 27,2%, nữ 31,4% gần nhau, khơng có khác với p > 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae (trẻ viêm phổi) nam 23,9%, nữ 17,6% chênh lệch khơng nhiều, khơng có khác với p > 0,05 Tỷ lệ phân lập trẻ lành thấp tỷ lệ phân lập trẻ bị viêm phổi Haemophilus influenzae Theo biotýp: Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae theo biotýp I trẻ lành 13,0%, trẻ bị viêm phổi 73,6% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae theo biotýp II trẻ lành 12,2%, trẻ bị viêm phổi 26,4% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi Haemophilus influenzae theo biotýp có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae trẻ lành theo biotýp xuất hầu hết biotýp Trong khi, trẻ bị viêm phổi xuất biotýp I II Dựa vào tỷ lệ phân lập theo biotýp nói Hib chủ yếu biotýp I II Theo serotýp: Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae theo seotýp b trẻ lành 10,4%, trẻ bị viêm phổi 66,0% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae theo serotýp không b trẻ lành 89,6%, trẻ bị viêm phổi 34,0% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi Haemophilus influenzae theo serotýp có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Haemophilus influenzae serotýp b trẻ lành thấp nhiều so với trẻ bị viêm phổi * So sánh tỷ lệ phân lập chủng S pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Tỷ lệ phân lập Streptococcus pneumoniae 34,5% trẻ lành trẻ bị viêm phổi 41,5% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập Streptococcus pneumoniae (trẻ lành) nam 34,6%, nữ 34,3% chênh lệch không nhiều, khơng có khác với p > 0,05 Tỷ lệ 20 phân lập Streptococcus pneumoniae (trẻ bị viêm phổi) nam 38,1%, nữ 47,3% có khác biệt với p < 0,05 Tỷ lệ phân lập trẻ lành thấp tỷ lệ phân lập trẻ bị viêm phổi Streptococcus pneumoniae 4.2 Đánh giá, so sánh mức độ kháng kháng sinh hai loại vi khuẩn phân lập 4.2.1 Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae phân lập trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi * Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae phân lập trẻ lành 60 tháng tuổi Tỷ lệ chủng H Influenzae đề tài kháng cefotaxim 51,3%, ciprofloxacin 0,9%, co-trimoxazol 26,0%, amoxicillin 56,5%, cefuroxim 6,1%, chloramphenicol 56,5%, amox/a.clav 7,0%, ceftriaxon 52,2% Kết nghiên cứu tỷ lệ kháng kháng sinh chủng Haemophilus influenzae cao với amoxicillin 56,5%, kết phù hợp với nghiên cứu số nước châu Á: Haemophilus influenzae kháng lại amoxicillin 47,0% Singapore, 56,0% Hàn quốc 38,8% Hồng Kông Một số nước khác Nhật, Malaysia, Newzeland Philippines thấp dao động từ 20,0 – 25,0% Với chloramphenicol chúng tơi nghiên cứu tỷ lệ kháng 56,5% bactrim 26,0% so với tác giả khác tỷ lệ kháng kháng sinh phụ thuộc vào nước khu vực Tóm lại, chủng Haemophilus influenzae phân lập nghiên cứu chúng tơi cịn nhạy cảm cao với ciprofloxacin, cefuroxim amox/a.clav * Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae phân lập trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Theo số liệu chương trình ASTS năm 1999 chủng H influenzae phân lập miền Bắc nhạy cảm với ampicillin 19,0%, chloramphenicol 77,0%, với co-trimoxazol 22,0%, miền Trung tỷ lệ 22,0% - 50,0% cao nhiều so với kết bệnh viện Cần Thơ năm 2007 Nghiên cứu Đoàn Thị Hồng Hạnh cộng năm 1996 chủng H influenzae phân lập từ bệnh nhi đến khám khoa Nhi bệnh viện Vịêt Nam - Thụy Điển cho thấy H influenzae nhạy cảm với amoxicillin 78,5%, với chloramphenicol 63,6%, với co-trimoxazol 51,5%, kháng loại kháng sinh 37,0% trở lên Các nghiên cứu tình trạng kháng kháng sinh H influenzae giới cho thấy tỷ lệ lớn H influenzae đề kháng với loại kháng sinh thông thường Nghiên cứu chương trình WHONET năm 1997 cho thấy 21 Australia tỷ lệ H influenzae kháng amoxicillin 19,8%, kháng chloramphenicol 0,8%, kháng co-trimoxazol 9,4%, Trung Quốc tỷ lệ amoxicillin 40,0%, chloramphenicol 60,0%, co-trimoxazol 71,0% Cũng nước giới, Việt Nam S pneumoniae H influenzae đề kháng cao với co-trimoxazol Trong nghiên cứu tỷ lệ Haemophilus influenzae đề kháng cao với kháng sinh thông thường amoxicillin tỷ lệ 81,1%, co-trimoxazol 79,2%, tiếp đến ceftriaxon 68,0%, cefotaxim 64,1% chloramphenicol 62,3%, ciprofloxacin có tỷ lệ kháng thấp 1,9% Tỷ lệ nhạy cảm cao nhóm quinolon, amox/a.clav Như vậy, tỷ lệ kháng kháng sinh Haemophilus influenzae cao so với tác giả khác Một số kháng sinh đưa vào sử dụng ceftriaxon, cefotaxim tỷ lệ đề kháng mà phân lập vượt 60,0% Tuy nhiên chủng Haemophilus influenzae phân lập chủng gây viêm phổi trẻ 60 tháng tuổi nằm điều trị bệnh viện cịn nhiều tác giả khác nghiên cứu cộng đồng * Mức độ kháng kháng sinh chủng S pneumoniae phân lập trẻ lành 60 tháng tuổi Trong nghiên cứu có 136 chủng Streptococcus pneumoniae phân lập trẻ lành 60 tháng tuổi cộng đồng, ghi nhận tỷ lệ chủng Streptococcus pneumoniae kháng với penicillin 51,8%, ceftriaxon 42,3% Nhìn chung kết chúng tơi có khác biệt so với kết chương trình giám sát quốc gia tính kháng thuốc (ASTS) chủng Streptococcus pneumoniae Chúng nhận thấy kháng kháng sinh chủng Streptococcus pneumoniae tỷ lệ kháng với co-trimoxazol 16,8%, thấp so với số liệu chương trình ASTS năm 1997 – 1998 78,0 – 96,0% Đồng thời thấp so với số nghiên cứu khác trẻ lành sau: Trần Viết Thắng Yên Bái năm 1997 36,6%, Nguyễn Hoàng Hiệp Yên Bái năm 2003 33,3%, Lê Thị Hoa năm 2001 85,3% Sở dĩ có khác biệt này, thời gian, địa điểm, cỡ mẫu đối tượng nghiên cứu khác Tỷ lệ chủng Streptococcus pneumoniae kháng với erythromycin ghi nhận nghiên cứu 76,7% Kết giám sát quốc gia tính kháng thuốc chủng Streptococcus pneumoniae hàng năm cho thấy, mức độ kháng erythromycin chủng Streptococcus pneumoniae ngày gia tăng năm 2000 52,6%, năm 2003 64,6%, năm 2004 70,6% Như kết tỷ lệ chủng Streptococcus pneumoniae kháng với erythromycin 76,7% cao số liệu chương trình 22 Theo báo cáo chương trình ASTS, mức độ chủng Streptococcus pneumoniae kháng với chloramphenicol tăng dần hàng năm Năm 2002 từ 9,4%, năm 2003 31,9%, năm 2004 35,6% Kết 56,6% cao so với số liệu trước Nghiên cứu chúng tơi có trường hợp chủng Streptococcus pneumoniae kháng với ciprofloxacin tỷ lệ 1,5%, kháng sinh thuộc nhóm floroquinolon, có phổ tác dụng mạnh đưa vào để điều trị cho bệnh nhân nhiễm khuẩn Streptococcus pneumoniae Do chúng tơi thấy bắt đầu xuất hiện tượng chủng Streptococcus pneumoniae kháng với ciprofloxacin * Mức độ kháng kháng sinh S pneumoniae phân lập trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Trong nghiên cứu S pneumoniae đề kháng với penicillin 77,5% amox/a.clav 12,7%, erythromycin 73,5% chloramphenicol 49,1% co-trimoxazol 95,0% kết tỷ lệ kháng cịn cao số liệu chương trình ASTS thời gian địa điểm nghiên cứu khác Cotrimoxazol kháng sinh có họat phổ khơng mạnh S pneumoniae, sau thời gian dài sử dụng rộng rãi, độ nhạy cảm ngày giảm điều tất nhiên Trong nghiên cứu nước giới cho thấy tình trạng đề kháng với đa kháng sinh S pneumoniae gia tăng cách nhanh chóng : Australia 19,0%, Canada 10,0% Theo nghiên cứu chúng tơi có tỷ lệ cao chủng vi khuẩn đề kháng số loại kháng sinh, chủng đề kháng 4.2.2 So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi * So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng Haemophilus influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Phương pháp Kirby – Bauer : Tỷ lệ kháng kháng sinh H influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi với số kháng sinh sau: amoxicillin 56,5%/81,1%, chloramphenicol 56,5%/62,3%, cotrimoxazol 26%/79,2%, ceftriaxon 52,2%/68,0%, cefotaxim 51,3% / 64,1% Còn lại kháng sinh khác trẻ lành mức độ kháng thấp trẻ bị viêm phổi Sự khác biệt trẻ lành trẻ bị viêm phổi mức độ kháng kháng sinh có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tỷ lệ đa kháng kháng sinh H influenzae trẻ lành trẻ bị viêm phổi với số kháng sinh sau: Với loại kháng sinh amoxicillin co-trimoxazol 26,0%/79,2% Với loại kháng sinh amoxicillin + co-trimoxazol + cefotaxim + chloramphenicol 23 26,0%/62,3% Với loại kháng sinh amoxicillin + co-trimoxazol + ceftriaxon + cefuroxim + cefotaxim + chloramphenicol 6,1%/22,6% Tỷ lệ đa kháng kháng sinh trẻ lành trẻ bị viêm phổi khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Phương pháp Etest : Ở trẻ lành số lượng chủng đề kháng tập trung nhiều mức từ thấp đến trung bình Trong khi, trẻ bị viêm phổi số lượng chủng tập trung đề kháng từ mức độ trung bình đến mức độ cao MIC90 số lượng chủng trẻ lành trẻ bị viêm phổi có khác biệt với p < 0,05 * So sánh mức độ kháng kháng sinh chủng Streptococcus pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Phương pháp Kirby – Bauer : Tỷ lệ kháng kháng sinh Streptococcus pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi số kháng sinh sau: penicillin 51,8%/77,5%, chloramphenicol 32,1%/49,1%, co-trimoxazol 16,8%/95%, erythromycin 76,7%/73,5%, ceftriaxon 42,3%/56,9%, cefotaxim 55,5%/53,9% Cịn lại kháng sinh khác trẻ lành mức độ kháng thấp trẻ bị viêm phổi Sự khác biệt trẻ lành trẻ bị viêm phổi mức độ kháng kháng sinh có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tỷ lệ đa kháng kháng sinh Streptococcus pneumoniae trẻ lành trẻ bị viêm phổi với số kháng sinh sau: Với loại kháng sinh penicillin cotrimoxazol 16,8%/77,5% Với loại kháng sinh penicillin + cefotaxim + chloramphenicol 32,1%/49,1% Với loại kháng sinh penicillin + co-trimoxazol + erythromycin + chloramphenicol 16,8%/49,1% Tỷ lệ đa kháng kháng sinh trẻ lành trẻ bị viêm phổi khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Phương pháp Etest : Ở trẻ lành số lượng mẫu đề kháng tập trung nhiều mức từ thấp đến trung bình Trong khi, trẻ bị viêm phổi số lượng mẫu tập trung đề kháng từ mức độ trung bình đến mức độ cao MIC90 số lượng chủng trẻ lành trẻ bị viêm phổi có khác biệt với p < 0,05 KẾT LUẬN Xác định, so sánh tỷ lệ phân lập H influenzae S pneumoniae trẻ 60 tháng tuổi lành bị viêm phổi * Haemophilus influenzae: tỷ lệ phân lập H influenzae 29,0% trẻ lành cao tỷ lệ phân lập H influenzae trẻ bị viêm phổi 21,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tần suất xuất biotýp H influenzae trẻ bị viêm phổi chủ yếu týp I II Trong trẻ lành xuất hầu hết biotýp, tỷ lệ cao biotýp III VI, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tần 24 suất xuất serotýp H influenzae trẻ viêm phổi cao trẻ lành (66,0%/10,0%), khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 * Streptococcus pneumoniae: tỷ lệ phân lập S pneumoniae 34,5% trẻ lành thấp tỷ lệ phân lập S pneumoniae trẻ bị viêm phổi 41,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Đánh giá, so sánh mức độ kháng kháng sinh hai loại vi khuẩn phân lập * Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae phương pháp Kirby-Bauer trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi Tỷ lệ kháng kháng sinh trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi số kháng sinh sau: amoxicillin 56,5%/81,1%, chloramphenicol 56,5%/62,3%, co-trimoxazol 26,0%/79,2%, ceftriaxon 52,2%/68,0%, cefotaxim 51,3%/64,1% Tỷ lệ đa kháng kháng sinh H influenzae phương pháp Kirby-Bauer trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi MIC kháng sinh amoxicillin, co-trimoxazol, cefotaxim chloramphenicol H influenzae trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi * Mức độ kháng kháng sinh chủng S pneumoniae phương pháp Kirby-Bauer trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi Tỷ lệ kháng kháng sinh trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi số kháng sinh sau: penicillin 51,8%/77,5%, chloramphenicol 32,1%/49,1%, co-trimoxazol 16,8%/95,0%, erythromycin 76,7%/73,5%, ceftriaxon 42,3%/56,9%, cefotaxim 55,5%/53,9% Tỷ lệ đa kháng kháng sinh S pneumoniae phương pháp KirbyBauer trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi MIC90 kháng sinh penicillin, co-trimoxazol, erythromycin, cefotaxim chloramphenicol S pneumoniae trẻ lành thấp trẻ bị viêm phổi KIẾN NGHỊ Cần tăng cường công tác giám sát mức độ kháng kháng sinh vi khuẩn, nên thường xuyên thông báo cập nhật đến thầy thuốc để điều trị có hiệu quả, tránh lạm dụng kháng sinh Phổ biến rộng rãi việc tiêm phòng vaccine Hib cho trẻ 60 tháng tuổi Hiện bệnh viện Cần Thơ nên xem xét việc sử dụng kháng sinh penicillin, amoxicillin, co-trimoxazol, erythromycin chloramphenicol nguyên nhiễm khuẩn Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae Bởi năm kháng sinh nêu bị Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae kháng lại với tỷ lệ cao, vượt xa ngưỡng cho phép NCCLS ... 3.2.2 Mức độ kháng kháng sinh chủng H influenzae S pneumoniae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi Bảng 3.10 Mức độ kháng kháng sinh chủngH influenzae trẻ bị viêm phổi 60 tháng tuổi (n = 53) STT Tên kháng. .. lại kháng sinh khác trẻ lành mức độ kháng thấp trẻ bị viêm phổi Sự khác biệt trẻ lành trẻ bị viêm phổi mức độ kháng kháng sinh có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tỷ lệ đa kháng kháng sinh H influenzae. .. lại kháng sinh khác trẻ lành mức độ kháng thấp trẻ bị viêm phổi Sự khác biệt trẻ lành trẻ bị viêm phổi mức độ kháng kháng sinh có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Tỷ lệ đa kháng kháng sinh Streptococcus