Nghiên cứu đặc điểm hình thái và vi phẫu loài sâm bố chính (abelmoschus sagittifolius (kurz) merr ) ở việt nam

VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 24-31 Original Article Study on Morphological and Microscopic Characteristics of Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr in Vietnam Pham Thanh Huyen1,*, Nguyen Quynh Nga1, Pham Thi Ngoc1, Lai Viet Hung1, Phan Van Truong1, Nguyen Van Hieu1, Dang Minh Tu1, Nguyen Thi Ha Ly1, Duong Thi Phuong Thao2, Pham Thi Hong Nhung2, Dinh Doan Long2 National Institute of Medicinal Materials, 3B Quang Trung, Hoan Kiem, Hanoi, Vietnam VNU University of Medicine and Pharmacy, 144 Xuan Thuy, Cau Giay, Hanoi, Vietnam Received 10 May 2021 Revised 26 May 2021; Accepted 04 June 2021 Abstract: Sam bo chinh (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.) is a precious medicinal plant that has been exploited and planted in Vietnam for a long time However, the morphological characteristics of this plant is easy to confuse with other species of the same genus In addition, the microscopic characteristics and medicinal powder composition of this medicinal plant have not been comprehensively described The present investigation was aimed to determine the morphological and microscopic characters of Sam bo chinh using comparative morphology, anatomical research and medicinal powder analysis The complete description of morphological and microscopic characteristics reported in this study will serve as valuable data for the conservation and development of this species in Vietnam Keywords: Morphology, microscopic characteristics, medicinal plant, Abelmoschus sagittifolius* * Corresponding author E-mail address: huyenptnim@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4322 24 P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 25 Nghiên cứu đặc điểm hình thái vi phẫu lồi Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.) Việt Nam Phạm Thanh Huyền1,*, Nguyễn Quỳnh Nga1, Lại Việt Hưng1, Phạm Thị Ngọc1, Phan Văn Trưởng1, Nguyễn Văn Hiếu1, Đặng Minh Tú1, Nguyễn Thị Hà Ly1, Dương Thị Phương Thảo2, Phạm Thị Hồng Nhung2, Đinh Đoàn Long2 Viện Dược liệu, 3B Quang Trung, Hoàn Kiếm, Hà Nội, Việt Nam Trường Đại học Y dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, 144 Xuân Thủy, Cầu Giấy, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 10 tháng năm 2021 Chỉnh sửa ngày 26 tháng năm 2021; Chấp nhận đăng ngày 04 tháng năm 2021 Tóm tắt: Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.) thuốc nam quý khai thác trồng Việt Nam lâu đời Tuy nhiên phân loại hình thái dược liệu cịn dễ nhầm lẫn với lồi khác chi Bên cạnh đó, đặc điểm vi phẫu thành phần bột dược liệu thuốc chưa mô tả cách toàn diện với đặc điểm đặc trưng lồi Chính vậy, chúng tơi tiến hành đề tài nhằm nghiên cứu đặc điểm hình thái vi phẫu Sâm bố thơng qua phương pháp mơ tả hình thái so sánh, nghiên cứu giải phẫu phân tích bột dược liệu Mơ tả hồn chỉnh đặc điểm thực vật tiến hành nghiên cứu bổ sung liệu, phục vụ cho việc bảo tồn phát triển lồi Sâm bố Việt Nam Từ khóa: Hình thái, vi phẫu, chất lượng bột dược liệu, Sâm bố chính, Abelmoschus sagittifolius Mở đầu* Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.) dược liệu quý sử dụng từ lâu nước ta Cây phân bố tự nhiên khu vực Đông Nam Á (Nam Trung Quốc, Campuchia, Ấn độ, Lào, Malaysia, Myanmar, Thái Lan, Việt Nam) miền bắc Australia [1] Ở Việt Nam, Sâm bố mọc hoang dại trồng nhiều số tỉnh Quảng Bình, Nghệ An, Lâm Đồng, Đồng Nai,… [2] Theo đông y, dược liệu có vị nhạt, có chất nhầy, tính bình; có tác dụng bổ mát, nhuận phế, dưỡng tâm; sử dụng để chữa thể suy nhươ ̣c, đau lưng, đau mình, số t nóng, táo bón, hóa khát, thông tiể u tiê ̣n, điề u kinh, bổ khí, bổ huyết, giảm ho, trừ đờm, chữa các bê ̣nh phổ i, ba ̣ch đới,… * Tác giả liên hệ Địa email: huyenptnim@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4322 [1, 3, 4] Một số nghiên cứu cho thấy dạng củ Sâm bố giàu chất có hoạt tính chống lại tế bào ung thư cổ tử cung Hela ung thư gan HepG-2 người [5], có tác dụng bảo vệ thành dày hồi phục loét dày, [6] Ở Việt Nam, Sâm bố có nhiều tên gọi khác Bố sâm, Sâm báo, Thổ hào sâm, Nhân sâm Phú n Tính khơng thống danh pháp gây khó khăn cho q trình tra cứu thơng tin dễ gây nhầm lẫn phân loại đặt yêu cầu thẩm định tên khoa học Sâm bố mơ tả hình thái dễ gây nhầm lẫn với số loài chi Đậu bắp (Abelmoschus) có đặc điểm tương đồng thân cỏ; chia thùy chân vịt, có lơng nhám; nang, hình thoi, hình bầu dục hay thn dài, thường có chóp nhọn, chín mở 26 P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 lưng thành mảnh quả, có lơng cứng,… [7] Bên cạnh đó, đặc điểm vi phẫu thành phần bột dược liệu lồi chưa mơ tả cụ thể chi tiết Chính vậy, tiến hành nghiên cứu “Nghiên cứu đặc điểm đặc điểm hình thái vi phẫu lồi Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.) Việt Nam” với mục tiêu: i) Mơ tả đặc điểm hình thái vi phẫu đặc trưng lồi Sâm bố chính; ii) Phân tích mơ tả thành phần có bột rễ Sâm bố Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 12 mẫu Sâm bố thu thập địa điểm khác gồm Lâm Đồng, Phú Yên, Thanh Hóa, Hà Nội, TP Hồ Chí Minh, Quảng Bình, Đắc Lắc, Bình Phước, Đồng Nai Địa điểm thu thập cụ thể mẫu nghiên cứu trình bày cụ thể Bảng Bảng Kí hiệu mẫu địa điểm thu mẫu STT Ký hiệu mẫu Địa điểm lấy mẫu AS1 Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội AS2 Trung tâm nghiên cứu Dược liệu Bắc Trung Bộ, Tp Thanh Hóa AS3 Trung tâm nghiên cứu Dược liệu Bắc Trung Bộ, Tp Thanh Hóa AS4 Thơn 2, xã Lý Trạch, huyện Bố Trạch, tỉnh Quảng Bình AS5 Trung tâm nghiên cứu sản xuất dược liệu miền Trung, Phú Yên AS6 Thôn Hà Bắc, xã EaWel, huyện Buôn Đôn, tỉnh Đắk Lắk AS7 Thơn Kim Phát, xã Bình Thạnh, huyện Đức Trọng, tỉnh Lâm Đồng AS8 Thôn Quyết Thắng, xã Phú Sơn, huyện Lâm Hà, tỉnh Lâm Đồng AS9 Ấp 1, xã Lộc An, huyện Lộc Ninh, tỉnh Bình Phước 10 AS10 Trung tâm Sâm Dược liệu Thành phố Hồ Chí Minh 11 AS11 Phú Lập, Tân Phú, Đồng Nai 12 AS12 Mã Đà, Vĩnh Cửu, Đồng Nai 2.2 Phương pháp nghiên cứu Kết nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu hình thái so sánh theo Nguyễn Nghĩa Thìn (2007) [8] áp dụng để thẩm định tên khoa học loài Nghiên cứu vi phẫu phân tích bột dược liệu dựa phương pháp Nguyễn Bá (1977) [9] Nguyễn Viết Thân (2003) [10] thông qua quan sát, mô tả, chụp ảnh vi phẫu rễ, thân, soi tiêu bột rễ kính hiển vi 3.1 Thu thập mẫu thẩm định tên khoa học Mẫu nghiên cứu đối chiếu hình thái với tiêu lưu Khoa Tài nguyên Dược liệu - Viện Dược liệu (NIMM) đối chiếu so sánh với khóa phân loại mơ tả lồi chi Abelmoschus Đỗ Thị Xuyến [7] Peter H Raven cộng (2007) [11] Các mẫu nghiên cứu phân tích, đối chiếu với khóa phân loại chi Abelmoschus Đỗ Thị Xuyến [7], Peter H Raven cộng [11] kết hợp so sánh với tiêu lồi A sagittifolius Dựa đặc điểm hình thái đặc trưng gồm: kèm hình chỉ, rễ thường phình to thành củ, hoa màu đỏ, hồng, dài 4-5 cm, hạt thường có lơng tơ,… chúng tơi nhận thấy tương đồng đặc điểm hình thái 12 mẫu Sâm bố thu thập địa điểm khác Việt Nam Các mẫu nhóm nghiên cứu Khoa Tài nguyên Dược liệu - Viện Dược liệu thẩm định tên khoa học Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 3.2 Đặc điểm hình thái Qua phân tích đặc điểm hình thái mẫu thu thập được, chúng tơi có mơ tả cho lồi A sagittifolius sau: Cây thân thảo, sống lâu năm, mọc đứng cách yếu ớt, có dựa vào xung quanh, cao từ 30-50 cm, có (Hình 1a) Thân cành mọc đứng, có bị lan tỏa mặt đất, cành hình trụ, khơng có lơng Số lượng cành cấp 1, cấp nhiều Rễ phát triển thành củ hình trụ, màu trắng vàng nhạt, đường kính từ 1,5-2 cm (Hình 1b) Lá đơn, mọc cách, có kèm hình Các lên phía phần hẹp, phiến xẻ thùy 3-5 dạng mũi mác, mép có cưa thưa đều, hai mặt có lơng (Hình 1c) Hoa màu đỏ hồng mọc đơn độc kẽ lá, cuống hoa dài từ 5-8 cm, có lơng cứng Đài phụ có từ 7-10 a bản, dài 12-14 mm, có nhiều lơng, có vài nhỏ Đài có dính bị khía rách, cao 15-20 mm Tiền khai hoa vặn, tràng cánh hình nêm, đều, xếp rời, kích thước 5-6 cm, rộng 3-4 cm Bộ nhị có nhị dính hồn tồn tạo thành bó có hình trụ, dài 13-15 mm Bộ nhụy có nỗn dính tạo thành bầu trên, dài 18-20 mm, có vịi nhụy đầu nhụy Bầu ơ, đính nỗn trung trụ Phía ngồi bầu có nhiều lơng che phủ (Hình 2) Quả hình trứng nhọn, dài gấp lần đài, có khía dọc, nang, chín lớp vỏ khơ lại mở đường nứt theo khía dọc thành mảnh vỏ, hai mặt có nhiều lơng hình Quả chín có màu đen nhạt Hạt hình thận, dài 2-3 mm, có lơng tơ, lúc xanh có màu xanh nhạt, chín có màu nâu đen, mặt ngồi có đường vân tạo thành gợn hay ụ màu vàng (Hình 3) b Mặt trước Mặt sau Hình Cây Sâm bố a Cây Sâm bố mang hoa quả; b Rễ củ Sâm bố chính; c Hình dạng Mặt trước Mặt sau 27 b a d c Hình Hình thái hoa Sâm bố a Hình dạng hoa; b Tràng hoa, nhị hoa đài hoa; c Bầu, nhị hoa, nhụy hoa; d Lát cắt ngang bầu c P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 28 b Quả chín Quả non a c d Hình Hình thái hạt Sâm bố a Hình dạng quả; b Lát cắt ngang non; c Quả tự mở chín hạt; d Hình dạng hạt 3.3 Đặc điểm vi phẫu 3.3.1 Thân Mặt cắt ngang thân có hình trịn gần trịn (Hình 4), từ phía ngồi vào có: lớp biểu bì gồm hàng tế bào xếp đặn bên phần thân non lớp bần phần thân già Lớp mô dày gồm 4-6 lớp tế bào hình đa giác, kích thước khơng đều, xếp lộn xộn Lớp mô mềm gồm 3-4 lớp tế bào hình đa giác hay bầu dục, kích thước to tế bào mô dày, xếp lộn xộn Túi tiết xuất nhiều mô mềm phần thân non Mơ cứng 3-5 lớp tế bào hình đa giác hay bầu dục, hóa sợi hay tế bào mơ cứng thành cụm đầu bó libe Libe tế bào đa giác nhỏ, kết tầng xếp lộn xộn, tế bào sát lớp mô cứng xếp dày Gỗ hình đa giác có kích thước khác nhau, xếp lộn xộn Mô mềm gỗ tế bào hình đa giác, xếp xun tâm Mơ mềm ruột thành mỏng, tế bào hình đa giác kích thước to nhỏ khác nhau, xếp lộn xộn Tinh thể canxi oxalat hình cầu gai, rải rác biểu bì, mơ mềm, libe Lông che chở đơn bào lông tiết xuất nhiều Hình Cấu tạo vi phẫu thân Sâm bố Biểu bì; Mơ dày; Mô mềm; Túi tiết ly bào; Mô cứng; 6, Libe; 8, 10 Gỗ; 9, 11 Mô mềm gỗ; 12 Mô mềm ruột; 13 Tinh thể calci oxalat; 14 Lông che chở; 15 Lông tiết 3.3.2 Lá Gân lá: Gân lồi hai mặt (Hình 5) gồm: biểu bì biểu bì gồm lớp tế bào hình chữ nhật xếp sít nhau, đặn, tế bào biểu bì có kích thước bé tế bào biểu bì Rải rác có lơng che chở lơng tiết phía bên ngồi Mơ dày gồm 4-5 hàng tế bào mô dày gồm 2-4 hàng tế bào, tế bào hình đa giác, kích thước khơng đều, xếp lộn xộn Trên lớp mơ dày có lớp mơ mềm, tế bào hình trịn hay bầu dục, chứa lục lạp Mơ mềm mô mềm gồm tế bào gần trịn hay hình đa giác, kích thước khơng Bó libe gỗ xếp thành hình cung: Lớp libe dưới, gỗ Mạch gỗ có hình trịn hay bầu dục, xếp thành dãy Mô mềm gỗ chứa 1-3 dãy tế bào hình đa giác bó gỗ Libe có hình chữ nhật 2-4 lớp, xếp thành hình cung, tế bào cịn lại hình đa giác, kích thước nhỏ, xếp sát Tinh thể canxi oxalat hình cầu gai kích thước từ 12,5-25 µm, có nhiều libe lớp mô mềm sát mô dày Túi tiết có nhiều mơ mềm P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 29 3.3.3 Rễ Hình Cấu tạo vi phẫu Sâm bố 1, 11.Biểu bì; 2, 10.Mô dày; 3, Mô mềm; Gỗ; Mô mềm gỗ; Libe; Tinh thể calci oxalat; Túi tiết; 12 Lông che chở; 13 Lông tiết Mặt cắt ngang rễ có hình trịn gần trịn (Hình 7), từ phía ngồi vào có: lớp bần gồm 3-6 lớp tế bào, có đế n 10-15 lớp tế bào hình chữ nhật, rải rác có lỗ vỏ Mơ mềm vỏ có chứa 2-3 lớp tế bào hình đa giác, xếp lộn xộn Rải rác mô mềm có các tinh thể canxi oxalat hiǹ h cầ u gai và các túi tiế t chấ t nhầ y Bó libe hình nón, rải rác có vài đám sợi xen kẽ với nhiều lớp mô mềm libe Gỗ chứa tế bào hình bầu dục xếp xen kẽ với tế bào hóa gỗ tạo thành bó phân ly từ tâm đến bó libe Tia ruột gồm 2-3 hàng tế bào từ vùng gỗ tới vùng libe thì loe thành phễu Phiến lá: biểu bì biểu bì chứa lớp tế bào hình chữ nhật, nhiều lỗ khí, nhiều lơng tiết Đơi có vài biểu bì phình to Mơ mềm giậu, lớp tế bào thuôn dài chứa nhiều lục lạp, số tế bào phình to chứa tinh thể canxi oxalat hình cầu gai Mơ mềm khuyết gồm tế bào có kích thước lớn, xếp lộn xộn, khoảng cách gian bào lớn (Hình 6) Hình Cấu tạo vi phẫu rễ Sâm bố Lớp bần; Mô mềm; Libe; Gỗ; Tế bào hóa gỗ; Tia ruột; Tinh thể calci oxalat; Túi tiết chất nhầy 3.4 Đặc điểm bột dược liệu Hình Cấu tạo vi phẫu phiến 1, Biểu bì; Mơ giậu; Mơ khuyết; Lông tiết; Tinh thể canci oxalate Bột dược liệu Sâm bố dạng bột mịn, màu trắng ngà vàng nhạt, có nhiều hạt tinh bột riêng lẻ, hình dạng thay đổi, kích thước từ 12 µm đến 34 µm, có đến hạt dính vón nhau, rộng khoảng 20 µm (Hình 8) Mảnh mạch điểm, mạch mạng, mạch vạch xuất nhiều, có dính lấy hay bị vỡ thành mảnh Tinh thể canxi oxalat hình cầu gai rải rác khắp thành phần bột, kích thước 12,5-25 µm Hạt inulin với nhiều hình dạng kích thước khác nhau, nhiều hạt mang màu rõ nét Mảnh mô mềm gồm nhiều tế bào chứa tinh bột, kích thước lớn, nhiều mảnh hóa gỗ 30 P.T Huyen et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 37, No (2021) 24-31 50 µm 50 µm 50 µm 15 µm Hạt inulin Mạch điểm Mơ mềm 15 µm Mạch mạng Mạch vạch Sợi 50 µm 50 µm Tinh thể calci oxalat Tinh bột Hình Thành phần bột rễ dược liệu Sâm bố Bàn luận Năm 1983, Sâm bố ghi vào Dược điển Việt Nam với tên khoa học Hibiscus sagittifolius Kurz var quinquelobus Gagnep Đến năm 2002, Dược điển Việt Nam Sâm bố xác định với tên khoa học Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr Trên giới, loài Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr có 24 tên khoa học đồng danh cơng bố [1] Ở Việt Nam, Sâm bố có nhiều tên gọi khác bố sâm, sâm báo, thổ hào sâm, nhân sâm Phú Yên Sâm bố thu thập vùng khác nước ta có khác biệt nhỏ hình thái kết thẩm định tên khoa học cho thấy chúng thuộc loài Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr Các đặc điểm hình thái đặc trưng cho lồi có khác biệt so với loài chi Abelmoschus màu hoa, rễ phình to thành dạng củ, hạt thường có lông tơ Những đặc điểm tương đồng với nghiên cứu mơ tả trước Phạm Hồng Hộ [2], Đỗ Huy Bích [3] Kết phân tích vi phẫu cho thấy Sâm bố có đặc điểm đặc trưng phần thân có chứa nhiều lông che chở lông tiết, lớp gỗ mơ mềm gỗ mỏng so với lồi A moschatus mơ tả trước [12] Thành phần bột rễ có nhiều hạt inulin với hình dạng khác có mảnh mạch đặc trưng phù hợp với mơ tả bột rễ Sâm bố Dược điển Việt Nam V [4] Tuy nhiên, cần tiến hành nghiên cứu nhiều đặc điểm vi học lồi để sử dụng đặc điểm xác định loài cách hiệu Kết luận Qua nghiên cứu 12 mẫu Sâm bố – Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr Chúng tơi thu kết sau: i) Đã mô tả chi tiết đặc điểm hình thái lồi xác định đặc điểm đặc trưng khác với lồi chi màu hoa, rễ phình to thành dạng củ, hạt thường có lơng tơ; ii) Đã mô tả đặc điểm vi phẫu thân, lá, rễ lồi qua lát cắt mỏng, góp phần bổ sung thêm thông tin làm sở cho việc kiểm nghiệm dược liệu; iii) Đã khảo sát phân tích thành phần bột rễ dược liệu Sâm bố chính, góp phần đánh giá chất lượng bột dược liệu Những kết thu dẫn liệu bổ sung cho mơ tả nước lồi Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr.), đồng thời dẫn liệu khoa học phục vụ công tác tiêu chuẩn hóa dược liệu, tạo tiền đề cho việc phát triển Sâm bố Việt Nam Lời cảm ơn Chúng xin chân thành cảm ơn đề tài “Nghiên cứu bảo tồn nguồn gen thuốc đặc hữu, quý, vùng Đông Nam Bộ Khu bảo tồn thiên nhiên văn hóa Đồng Nai”, mã số: NVQG2017/23 hỗ trợ hoàn thiện nghiên cứu  ... liệu loài chưa mơ tả cụ thể chi tiết Chính vậy, tiến hành nghiên cứu ? ?Nghiên cứu đặc điểm đặc điểm hình thái vi phẫu lồi Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr. ) Vi? ??t Nam? ?? với mục tiêu: i)... Sciences, Vol 37, No (202 1) 24-31 25 Nghiên cứu đặc điểm hình thái vi phẫu lồi Sâm bố (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr. ) Vi? ??t Nam Phạm Thanh Huyền1,*, Nguyễn Quỳnh Nga1, Lại Vi? ??t Hưng1, Phạm Thị... tả đặc điểm hình thái vi phẫu đặc trưng lồi Sâm bố chính; ii) Phân tích mơ tả thành phần có bột rễ Sâm bố Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 12 mẫu Sâm bố thu thập địa điểm