Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.

Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathion) trong đất trồng chè.LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan các nội dung nghiên cứu trong luận văn “Tuyển chọn và đánh giá khả năng sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu cơ (Hợp chất Parathi.

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung nghiên cứu luận văn “Tuyển chọnvà đánh giá khả sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu (Hợp chất Parathion) đất trồng chè” công trình nghiên cứu tơi dựa tài liệu, số liệu tơi tự tìm hiểu nghiên cứu Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực sai tơi hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2022 Học viên Lê Thị Hà Trang LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Phượng Minh chỉđạo, hướng dẫn tận tình sâu sát, giúp đỡ tơi suốt q trình thực hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn ban lãnh đạo, thầy cô Học ViệnKhoa Học Công Nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam môn Công nghệ Môi trường tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian tham gia học tập, nghiên cứu hồn thành luậnvăn Tơi xin chân thành cảm ơn anh, chị Viện Môi trường nôngnghiệp giúp đỡ nhiều sở vật chất, trang thiết bị thí nghiệm, kỹ thuật phân tích, kiến thức thực nghiệm,… để tơi hồn thành chương trình nghiên cứu củamình Tơi xin chân thành cảm ơn Thủ trưởng Binh chủng Hóa học, Thủtrưởng Viện Hóa học Mơi trường qn sự, đồng nghiệp Phịng Cơng nghệ xử lý mơi trường/Viện Hóa học Mơi trường qn nơi công tác quan tâm, tạo điều kiện, hỗ trợ mặt để tơi hồn thành luậnvăn Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới người thân giađình, bạn bè ln động viên mặt để tơi có động lực công việc nghiên cứu khoa học Mặc dù cố gắng trình thực luận văn trìnhđộ kinh nghiệm cịn hạn chế nên khơng tránh khỏi thiếu sót Rất mong nhận dẫn đóng góp thêm thầy cô bạn để rút kinh nghiệm hoàn chỉnh luận văn Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2022 Học viên Lê Thị Hà Trang MỤC LỤC LỜI CAMĐOAN i LỜI CẢMƠN ii MỤCLỤC iii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮVIẾTTẮT vi DANHMỤCBẢNG vii DANHMỤC HÌNH .viii MỞĐẦU CHƯƠNG 1.TỔNG QUANTÀILIỆU 1.1 Khái niệm thuốc bảo vệ thực vật gốc lânhữucơ .3 1.2 Tác động hóa chất BVTV gốc OP với môi trường, sinh vật conngười 1.2.1 Sựchuyển hóacủahợp chấtOPtrongcơthểconngườivàsinhvật 81.2.2 Tác động tớiconngười 1.2.3 Tác động tới môi trường hệsinh thái 12 1.3 HiệntrạngsửdụnghóachấtBVTVtrênthếgiớivàtạiViệtNam .14 1.3.1 Hiện trạng sử dụng hóa chất BVTV trênthếgiới 14 1.3.2 Tình hình sử dụng hóa chất BVTV tạiViệt Nam 16 1.4 Tổngquanvềứngdụngvaitrịcủavisinhvậttrongnơngnghiệp .20 1.5 Tình hình nghiên cứu, ứng dụng xử lý hóa chất BVTV nhóm OP thếgiới tạiViệt Nam 22 1.5.1 Tình hình nghiên cứu trênthếgiới 22 1.5.2 Tình hình nghiên cứu tạiViệt Nam .23 CHƯƠNG 2.ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU 25 2.1 Đối tượng vật liệunghiên cứu .25 2.1.1 Đối tượngnghiêncứu 25 2.1.2 Vật liệunghiêncứu .25 2.2 Phương phápnghiêncứu 26 2.2.1 Phương pháp lấy mẫu[33][36] .26 2.2.2 Phương pháp phân lậpchủng VSV .26 2.2.3 Phương pháp nuôicấyVSV 27 2.2.4 Phương pháp xác định mật độ visinhvật 27 2.2.5 Phương pháp đánh giá khả phângiải OP 27 2.2.6 Phương pháp xác định trình tự gen16s rRNA 28 2.2.7 Phương pháp đánh giá yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh trưởng vàphát triểncủa VSV 29 2.2.8 Phương pháp đánh giá khả xử lý OP chủng VSV đấtin vitro - phịngthínghiệm 29 2.2.9 Phương pháp sắc kí khốiphổ(GC-MS) 30 2.2.10 Phương pháp xử lý, phân tích thống kêsố liệu .30 CHƯƠNG 3.KẾT QUẢ VÀTHẢO LUẬN 31 3.1 Phân lập vi sinh vật có khả phân giải hóa chất BVTV gốc OP(Parathion) 31 3.2 Đánh giá khả phângiải OP 33 3.3 Xác định tên chủngVSVP1 .35 3.4 Đặc điểm hình thái chủngMicrobacteriumparaoxydansP1 37 3.5 Đánh giá ảnh hưởng yếu tố đến sinh trưởng phát triển củachủngMicrobacteriumparaoxydansP1 39 3.5.1 Đánh giá ảnh hưởng củanguồnCacbon 39 3.5.2 Đánh giá ảnh hưởng củanguồnNito .40 3.5.3 Đánh giá ảnh hưởngcủapH 41 3.5.4 Đánh giá ảnh hưởng củanhiệt độ 42 3.6 Đánh giá khả phân giải Parathion chủngMicrobacteriumparaoxydans P1trong đấtinvitro 43 CHƯƠNG 4.KẾT LUẬN VÀKIẾNNGHỊ 45 4.1 Kếtluận 45 4.2 Kiếnnghị 45 TÀI LIỆUTHAMKHẢO 47 DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BVTV : Bảo vệ thựcvật NN&PTNT : Nông nghiệp phát triển nông thôn LB : Luria-Bertani MSM : Minimal salt medium - Mơi trường muối khống tối thiểu OD : Độ hấp thụ quang : Organophosphate - Lân hữucơ rpm : Revolutions per minute - Vòng phút VSV : Vi sinhvật OP DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Phân loại theo cơng thức hóa học chất BVTV nhómOP[5] .5 Bảng 2: LD50 số hợp chấtOP[13] 11 Bảng 1: Vị trí chủng VSV sống mơi trường có chứa Parathionxuất hiệnmẫu đất 31 Bảng 2: Mật độ vi sinh vật theothời gian 33 Bảng 3: Dư lượng Parathion sử dụng cácchủng VSV 33 Bảng 4: Độ tương đồng gen 16s rARN với cácchủngVSV 36 Bảng 5: Điều kiện nhân sinh khối chủng Microbacterium paraoxydansP1 .43 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Hình ảnh số loại hóachấtBVTV Hình 2: Cơng thức hóa học hợp chấtOP[4] Hình 3: Cơng thức hóa học củaparathion [5] Hình 4: Những đường hóa chất BVTV xâm nhập vào thể người[11] .10 Hình 5: Chu trình phát tán hóa chất BVTV hệ sinhthái[12] .12 Hình 6: Quymơsử dụng thuốc bảo vệ thực vật số nước pháttriển [21] .15 Hình 7: Hình ảnh phun thuốc trừ sâu trêncâychè 19 Hình 1: Vị trí lấymẫuđất 32 Hình 2: Dư lượng Parathion mẫu sau khoảngthời gian 34 Hình 3: Hình thái khuẩn lạc mơitrường LB 37 Hình3.4:Câyphátsinh chủngloạichủngMicrobacteriumparaoxydans P138 Hình 5: Chủng Microbacterium paraoxydans P1 quan sát kinhhiển viđiệntử 38 Hình 6: Ảnh hưởng nguồn Cacbon tới sinh trưởng phát triển củachủng MicrobacteriumparaoxydansP1 39 Hình 7: Ảnh hưởng nguồn Nito tới sinh trưởng phát triển củachủng MicrobacteriumparaoxydansP1 .40 Hình 8: Ảnh hưởng pH đến tới sinh trưởng phát triển chủngMicrobacteriumparaoxydansP1 41 Hình 9: Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình sinh trưởng phát triển củachủng MicrobacteriumparaoxydansP1 42 Hình 10: Đánh giá dư lượng Parathion thay đổi mậtđộVSV .44 MỞ ĐẦU Thuốc trừ sâu phần thiếu việc canh tác nông nghiệp tăng suất trồng, đóng vai trò quan trọng việc đáp ứng nhu cầu lương thực ngày tăng nhân loại Tuy nhiên, thời gian gần đây, việc đẩy mạnh sử dụng loại phân bón hóa học, thuốc bảo vệ thực vật hoạt động nông nghiệp để giúp trồng phát triển nhanh, diệt trừ sâu bệnh nâng cao sản lượng khiến cho đất đai bị bạc màu, thối hóa, làm cân sinh thái đất, ảnh hưởng tiêu cực tới môi trường sức khỏe người Trong số loại hóa chất bảo vệ thực vật, hợp chất phốt hữu cơ, chất độc hại biết tới sử dụng nhiều sản xuất nông nghiệp Sau thời dài tiếp xúc, chất tích tụ trongmơmỡ động vật tham gia vào chuỗi thức ăn, tích lũy sinh học Có thể thấy tác động nguy hại OP mắt xích cao chuỗi thức ăn, lồi chim săn mồi hay người OP nhiều nghiên cứu chứng minh loại chất độc nguy hiểm, khơng tác động đến số loại trùng, động vật hoang dã, mà cịn mối nguy hại tiềm tàng sức khỏe người, đặc biệt trẻ nhỏ phụ nữ có thai Những tác động OP lên người hệ sinh thái nguyên nhân lý giải cho việc nhiều quốc gia giới, đặc biệt quốc gia phát triển việc sử dụng loại hóa chất BVTV ngày bị ngăn cấm Hầu hết quốc gia hạn chế cấm việc sản xuất sử dụng loại hóa chấtnày Tại nhiều tỉnh, thành phố Việt Nam, chè dần trở thành loại công nghiệp phát triển ổn định, mang đến hiệu kinh tế cao, tạo nhiều việc làm mang đến nguồn thu nhập ổn định cho nhiều người dân Hiện nay, theo số liệu thống kê Hiệp hội chè Việt Nam, nước ta đứng thứ diện tích thứ sản lượng chè giới Tính đến năm 2020, nước có 34 tỉnh, thành phố trồng chè, tổng diện tích lênt i 123.000 Nhu cầu sử dụng sản phẩm từ chè giới lớn, Việt Nam làquốcgia cóthếmạnh sản lượng chè Tuy nhiên, chất lượng vệ sinh, an toàn thực phẩm sản phẩm chè nước ta chưa đáp ứng yêu cầu chất lượng thị trường quốctế,đặc biệt quốcg i a p h t t r i ể n D o q u t r ì n h t r n g v c h ă m s ó c c â y c h è , b c o n l m dụng hóa chất BVTV, khi, quy định dư lượng hóa chất BVTV chè thị trường lớn ngày nghiêm ngặt Hiện nay, việc ứng dụng khả phân huỷ sinh học VSV hóa chất BVTV trở thành phương án hữu ích để xử lý dư lượng hóa chất BVTV đất Vì vậy, đề tài nghiên cứu“Tuyển chọn đánh giá khả sử dụng chủng vi sinh vật xử lý dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật gốc lân hữu (Hợp chất Parathion) đất trồng chè”đã thực nhằm phân lập tuyển chọn chủng VSV có tác dụng phân giải chuyển hóa hóa chất BVTV gốc lân hữu cơ, giúp giảm thiểu ô nhiễm OP đất giúp nâng cao suất chất lượng trồng, cải thiện chất lượngđất Mục tiêu nội dung nghiên cứu: Mục tiêu nghiên cứu: Nghiên cứu tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả xử lý lượng hóa chất BVTV gốc lân hữu (Hợp chất Parathion) đất trồng chè, điều kiện cho sinh trưởng phát triển chủng khả sử dụng Nội dung nghiên cứu: - Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân giải hóa chất BVTV có chứa gốc lân hữu (hợp chấtParathion) - Nghiên cứu lựa chọn điều kiện tối ưu cho sinh trưởng phát triển chủng vi sinhvật - Đánh giá, xác định khả phân giải Parathion chủng VSV đất in vitro - phịng thí nghiệm Ý nghĩa khoa học đề tài: Luận văn cung cấp thông tin, kết nghiên cứu chủng vi sinh vật có khả xử lý dư lượng hóa chất BVTV gốc lân hữu đất trồng chè (Hợp chất Parathion) Nghệ An đánh giá tiềm ứng dụng chủng vi sinh vật để xử lý khu vực đất nhiễmOP