Xây dựng hệ thống tái sinh cây hoa cúc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ BÁN CÔNG TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC  Đề Tài : XÂY DỰNG HỆ THỐNG TÁI SINH CÂY HOA CÚC Chrysanthemum morifolium IN VITRO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH : NUÔI CẤY MÔ GVHD : MAI Thạc Só NGUYỄN THANH Kỹ sư MAI VĂN TRƯỜNG SVTH : NGUYỄN HUỲNH MAI KHÓA HỌC : 1999 - 2003 TP HỒ CHÍ MINH - 2004 Lời Cảm Ơn  Để hoàn thành đề tài này, em nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cô Khoa Công Nghệ Sinh Học, nhân viên quản lý phòng thí nghiệm bạn lớp, động viên dạy dỗ gia đình Em chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu Trường Đại Mở Bán Công Thành Phố Hồ Chí Minh Xin chân thành cảm ơn quý thầy cô Trường Đại Học Mở Bán Công, thầy cô Khoa Công Nghệ Sinh Học tận tình dạy dỗ, giúp đỡ cung cấp kiến thức cho em suốt trình học tập, tạo thuận lợi cho em hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp Cảm ơn nhân viên quản lý phòng thí nghiệm, bạn lớp gia đình ủng hộ, động viên em suốt trình làm đề tài Đặc biệt xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: Thạc só : Nguyễn Thanh Mai Cử nhân : Mai Văn Trường Đã tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt trình làm đề tài Vì thời gian thực đề tài có hạn kinh nghiệm hạn chế, nên em tránh khỏi thiếu sót Kính mong nhận góp ý, bảo quý thầy cô để đề tài em hoàn thiện LỜI MỞ ĐẦU Đứng trước vấn đề, kiện qua, diễn ra, hẳn người có cảm nhận, đánh giá riêng khuôn khổ khoa học Và với đánh giá chúng tôi, Alexandre Yersin nhà khoa học đặt móng cho ngành công nghệ sinh học (Biotechnology) đại sau này, mảnh đất Nha Trang – Khánh Hòa Công nghệ sinh học ngành khoa học mũi nhọn giới quan tâm Lý quan tâm thật dễ hiểu Công nghệ sinh học với phát triển nhanh chóng không bùng nổ thông tin tạo cách mạng sinh học không nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, mà thay đổi phương thức sản xuất ngành y dược, vật liệu mới, lïng, khai khoáng bảo vệ môi trường ( trích: Những kiến thức Công nghệ sinh học, NXBGD, Nguyễn Văn Uyển, Nguyễn Tiến Thắng, 2000.) Chúng ta thấy nỗ lực nhà khoa học, bạn sinh viên, nhà doanh nghiệp cho mục tiêu đẩy mạnh ứng dụng tiến ngành Công nghệ sinh học phục vụ cho kónh vực nghiên cứu sản xuất Một ĐH Thủy Sản vươn tầm khu vực Asean, Viện nghiên cứu Bông vươn tầm Châu lục Viện Vaccin đạt tầm giới Tất hối bước theo bước tiến vũ bão khoa học tiên tiến giới Trên bình diện chung Công nghệ sinh học giới, phải thừa nhận tụt hậu xa Và nghó rằng, tự nắm lấy kiến thức, tự làm chủ công nghệ, bước một, theo kịp Công nghệ sinh học tiên tiến Chuyến thực tập Nha Trang phần tất yếu mà mục tiêu nhằm cập nhật kiến thức Công nghệ sinh học cho hệ sinh viên khoa CNSH – nhà khoa học tương lai đất nước Chúng chân thành cảm ơn hướng dẫn nhiệt tình chuyên môn phong cách sống tập thể từ Thầy Phan Hữu Nghóa, Thầy Nguyễn Văn Minh Chúng chân thành cám ơn truyền đạt kiến thực bổ ích từ Thạc sỹ Đỗ Văn Ninh ( Khoa Chế Biến – ĐH Thủy Sản Nha Trang), tiến só Lê Văn Bé (Viện Pasteur Nha Trang), Thầy Trần Trọng Thanh (xí nghiệp chế biến nước mắm), Cô Nguyễn Thị Minh Trí (Xí Nghiệp chế biến Thủy Sản xuất khẩu), Thầy Nguyễn Tấn Văn ( Viện Nghiên cứu Bông có sợi) Chúng đặc biệt cám ơn tiến só Trịnh Minh Hợp (Phòng thí nghiệm Công nghệ gen – Viện nghiên cứu Bông có sợi) nhiệt tình hướng dẫn cung cấp tài liệu quý giá TỔNG QUAN VỀ NHA TRANG – KHÁNH HÒA I Điều kiện tự nhiên Nha Trang, “Thành phố bên bờ biển xanh” trung tâm kinh tế, văn hoá, du lịch tỉnh Khánh Hoà, nơi trung tâm du lịch an dưỡng, nghỉ mát thu hút nhiều du khách nước đến tham quan, du lịch nghiên cứu Nha Trang có vị trí thuận lợi giao thông liên lạc, đầu mối giao lưu lớn trọng điểm nước, với đầy đủ yếu tố “thiên thời địa lợi nhân hoà” đảm bảo xây dựng kinh tế –văn hoá hoàn chỉnh Trong Hồng Đức đồ kỉ XVII – thời chúa Nguyễn, xuất xứ danh từ Nha Trang bắt nguồn từ tiếng Chàm “Ya Trang” dòng sông lau, dòng sông chảy hai bờ lau sậy Trước xứ Kanut-Hara Chiêm Thành Thành phố Nha Trang thuộc tỉnh Khánh Hoà , tỉnh Khánh Hoà tỉnh nằm phía đông Việt Nam, vùng duyên hải có ngư nghiệp phát triển gần vào loại bậc nước ta Khánh Hoà có diện tích : 5258Km2, với dân số lớn 800.000 người(số liệu 1995) Sống tỉnh Khánh Hoà gồm nhiều dân tộc khác : Kinh, Raglai, đê, Giétiêng, Hoa, Chăm,Bana Biển Nha Trang đẹp đầy thơ mộng Biển Nha Trang thiên nhiên ưu đãi nhờ tác dụng hỗn hợp dòng hải lưu Độ dài bờ biển 358Km, bờ biển quan Việt Nam Dọc bờ biển có nhiền vũng, vịnh, bãi bồi, bãi cát mịn, thuận tiện lập cảng, nuôi trồng thuỷ sản, du lịch Tỉnh Khánh Hoà có nhiều đảo bán đảo nằm rải rác khắp nơi Đặc biệt Trường sa quần đảo có vị trí quan trọng lãnh thổ Việt Nam, có vị trí quan trọng an ninh quốc phòng tiềm phát triển kinh tế biển lâu dài Ngoài vùng có dãy núi có độ cao 1000m như: Dốc Mõ, Đại Đa Đa, Hòn Chảo, Hòn Chát Ở vùng quanh biển có núi tương đối thấp, bao lấy bờ biển tạo thành bãi tắm có phong cảnh tuyệt vời Chính sức hấp dẫn sinh thái biển Nha Trang mà ngành công nghịêp không khói phát triển mạnh mẽ, nhiên bên cạnh đó, quan nghiên cứu khoa học vấn đề liên quan đến Hải Dương Học phát triển mạnh mẽ  Vị trí địa lý Nha Trang cách thủ đô Hà Nội 1278 Km, cách thành phố Hồ Chí Minh 450 km, cách Đà Lạt 240km Thành phố Nha Trang nằm gọn lòng thung lũng sát bờ biển Phía bắc phía Nam bao bọc hai dãy núi cao, với đỉnh núi đạt đến độ cao 700-900m thành phố trải dọc theo bờ biển Nằm vị trí 11042’50”-12052’15” độ vó bắc 108 040’33”109027’55” độ kinh đông Tỉnh Khánh Hoà duyên hải miền trung, nằm cuối dãy Nam Trường Sơn, có địa hình chủ yếu núi bán sơn địa Diện tích núi đồi chiếm 90% diện tích tự nhiên, lại dãy đồng nhỏ hẹp, độ nghiêng từ Tây sang Đông  Khí hậu thời tiết Khánh Hoà tỉnh ven biển miền Trung, nằm khu vực nhiệt đới gió mùa, có khí hậu tương đối ôn hoà địa hình núi non biển tạo nên Khánh Hoà thường có hai mùa rõ rệt: mùa khô kéo dài từ đến tháng mùa mưa ngắn từ tháng 10 đến tháng 12 mùa hè có gió mùa Tây Nam, mùa đông có gió mùa Đông Bắc Nhiệt độ tương đối ổn định, nhiệt độ trung bình hàng năm 260C, mùa hạ 28,50C, mùa đông 240C Khí hậu thời tiết có tác động đáng kể đến đời sống sản xuất nhân dân  Hệ động vật thực vật Nha Trang Tỉnh Khánh Hoà có diện tích rừng che phủ ¾ tổng diện tích Do điều kiện Khánh Hoà thích hợp với nhiều loài thực vật từ nhiệt đới ẩm, nhiệt đới ôn đới núi cao nên nơi có nhiều loại q như: mun, cẩm lai, giáng hương, tiêu, Hoàng đàn, lăsng, cẩm xe Hệ động vật Nha Trang phong phú đa dạng, nơi dược mệnh danh “rừng trầm biển yến”, đặc biệt loại sinh vật biển Đây nguồn hải sản xuất lớn nước ta  Thổ nhưỡng - Vùng đồng bằng: diện tích 400km2, diện tích trồng lúa nước chiếm 35000ha, tập trung hai đồng là: Nha Trang-Diên Khánh đồng Ninh Hoà Ngoài có hai dãy đồng hẹp Cam Ranh Vạn Ninh Do đa số đất phù sa bị nhiễm phèn, nhiễm mặn, nên đất phù sa dùng cho việc trồng trọt mà chủ yếu dùng để phát triển nghề cá Núi Khánh Hoà chiếm 90% diện tích đỉnh có đỉnh núi cao chiếm đa số(đều 1000m) Có núi cao 1000mthuộc hệ thống núi Trường Sơn Núi khánh hoà đa số núi đá Sông ngòi Khánh Hoà không lớn mật độ dầy Toàn tỉnh có 40 sông có độ dài từ 10km trở lên Ngoài ra, khánh hoà có nhiều đầm, hồ nhỏ, phần lớn sông ngòi tạo nên hồ nhân tạo Đáng ý hồ Đá Bàn, Ba Hồ(Ninh Hòa), hồ Hoa Sơn, Đồng Điền (Vạn Ninh) II Điều kiện kinh tế xã hội  Phát triển kinh tế - Về kinh tế: Khánh Hoà tận dụng ưu có nguồn thuỷ hải sản thiên nhiên ưu đãi để khai thác cho có lợi tiềm mạnh mình: nghề đánh bắt, nuôi trồng thuỷ sản khia thác du lịch Hiện GDP bình quân đầu người 3,4 triệu đồng/năm (tương đương 310USD), tổng thu cho ngân sách bình quân tăng 48,7%/năm Trong năm vừa qua, Khánh Hoà đầu tư 1400 tỷ đồng để xây dựng mới, nâng cấp hệ thống sở hạ tầng số công trình khai thác trọng điểm Đời sông nhân dân ổn định cải thiện rõ rệt Hướng mời gọi đầu tư theo mũi nhọn thời gian tới : du lịch dịch vụ, nuôi trồng chế biến nông lâm hải sản Một số tiềm tỉnh ý đến, cụ thể hợp tác nuôi ngọc trai cao sản Đầm Vịnh, xây cảng lớn nước sâu phục vụ cho đóng sửa chữa tàu biển, trồng phủ xanh đất trống đồi núi trọc, tận dụng phế liệu nông lâm nghiệp công nghiệp chế biến, khai khoáng, liên doanh lắp ráp địên-điện tử sản xuất hàng gia dụng  Dân cư Nha Trang-Khánh Hoà: Tỉnh Khánh Hoà, dân tộc Kinh chiếm đa số có dân tộc thiểu số khác như: đê, Raglai, Giêtiêng, chăm, Hoa Mỗi dân tộc có ngôn ngữ riêng, khu vực cư trú riêng, phong tục tập quán văn hoá sinh hoạt mang đậm sắc riêng dân tộc họ  Dân tộc Kinh: có khoảng 850000 người, chiếm 95,53% dân số(số liêu 1995) Họ cư trú miền phía đông cuối dãy Trường Sơn rải rác huyện - Người đê: có khoảng 2300người Là dân tộc định cư Khánh Hoà chưa lâu, nhà sàn, cửa đầu hồi, cửa hướng bắc Người đê theo chế độ mẫu hệ, làm rẫy, trồng lúa nước theo kiểu cổ truyền, nét đặc trưng người đê kho tàng văn hoá phong phú với nhiều kiểu lễ nghi nhạc khí độc đáo - Người Giêtiêng: có khoảng 2866 người Là phận người K’ho Lâm Đồng thuộc ngữ hệ Môn Khơme, sống chủ yếu Khánh Vónh - Người chăm: có khoảng 170 người Sống tỉnh Khánh Hoà từ lâu đời, thuộc ngữ hệ Malaysia-polyresich - Người Hoa: có khoảng 5169 người, sống Khánh Hoà từ đầu kỉ 19, qua nhiều lần di cưnhưng giữ truyền thống sinh hoạt với nét riêng địa phương quê hương cũ  Lễ hội dân tộc Nét đặc sắc văn hoá dân gian Khánh Hoà có nhiều lễ hội mang tính tôn giáo độc đáo:  Lễ hội tháp bà Thường tổ chức vào ngày 20-23/03 âm lịch khu di tích tháp Ponaga- thành phố Nha Trang Đây lễ hội lớn khu vực để tưởng niệm mẹ sứ sở Nghi lễ có phần chính: Lễ thay y (ngày 20/03): tháo bỏ xiêm y, mũ miện cũ, tắm rửa tượng nữ thần nước thơm thay xiêm y, mũ miện Lễ cầu cúng (ngày 23/03) tiến hành tôn nghiêm ca ngợi công đức bà Mẹ Xứ Sở cầu cho nhân dân có sống ấm no hạnh phúc Sau phần lễ phần hội Phần hội chủ yếu múa bóng, múa dâng bông, hát bội diễn tuồng cổ trước đền  Lễ Hôị Am Chúa: Tổ chức ngày 22/04 âm lịch để tưởng niệm nữ thần Thiên Y A Na nhân dân vùng tôn Bà Chúa Lễ hội gồm hai phần: sau lễ cầu cúng tôn nghiêm theo nghi thức cổ truyền điệu múa dâng bông, vãn Bà, điệu múa gắn liền với truyền thuyết tích Thiên Y A Na  Lễ hội cá voi: Lễ hội gắn liền với truyền thuyết cá voi cứu vua Gia Long biển Danh lam thắng cảnh: - Hòn Chồng: Khu vực Hòn Chồng quần thể khối đá lớn, nhỏ nhiều tầng, nhiều lớp với hình thù kì dị xếp chồng lên chạy từ bờ cao xuống bờ biển Truyền thuyết kể xưa có người khổng lồ đến xứ ngoạn cảnh, gặp tiên nữ tắm, ông dừng lại say xưa ngắm, vô tình trượt chân ngã, ông vội bám tay vào núi, mạnh sườn núi sụp đổ, đá văng xuống hằn vết tay ông Dấu chân trượt ngã với đủ năm ngón lún vào đá thí để lại dấu tích suối tiên - Hồ Cá Trí Nguyên: Nằm đảo Bồng Nguyên, gọi Miễu, cách cảng Cầu Đá chưa đầy nửa thuyền máy Hồ xây dựng năm 1971, hồ vùng biển hệ thống kè đá, với hàng trăm loại sinh vật biển quý đẹp mắt nuôi thả Hồ cá Trí Nguyên bảo tàng sống biển - Bãi Trũ: Nằm đảo Hòn Tre, trước mặt thành phố Nha Trang Từ đất liền nhìn thấy núi Hòn Tre, đứng sừng sững hình cá sấu khổng lồ bò xuống biển, hình dung nơi lại có bãi tắm tuyệt đẹp, tinh khiết nên thơ Đó bãi tắm tự nhiên lý tưởng, làm hài lòng người khó tính nhất, người phải ngạc nhiện trước độ tinh khiết nước biển, bờ cát môi trường xung quanh Cát trắng mịn lạ lùng, nước xanh nhìn thấu đến tận đáy, bờ cát thoai thoải dần xa  Di tích lịch sử văn hoá: - Đàn đá Khánh Sơn: Khánh Sơn huyện miền núi tỉnh Khánh Hoà, từ lâu biết đến vùng đất cổ tích, huyền thoại, với nhiều chiến công hiển hách qua cuốc kháng chiến chống Pháp chống Mỹ Từ năm 1979, Khánh Sơn phát đàn đá, loại nhạc cụ vào loại cổ xưa loài người Tại người ta phát dấu tích việc chế tác đàn đá chứng tỏ dân tộc Rắclây chủ nhân thực đàn đá - Tháp Bà (Tháp Ponagar): Là di tích lịch sử, công trình tiêu biểu nghệ thuật kiên trúc điêu khắc dân tộc Chăm Tháp Ponagar thường dùng tên chung khu di tích, thực tháp cao bốn tháp khu di tích Tháp bà xây dựng vua Chămpa Harivácman năm 813-817 tu bổ nhiều lần từ kỉ 7- kỉ 12 Khu di tích xây dựng hai mặt Mặt thứ lát gạch, có 14 trụ bậc liên tiếp Trên mặt thứ hai có cụm gồm bốn tháp bố trí hình thước thợ Cả bốn tháp xây dựng theo kiểu tháp người Chăm, gạch xây khít mạch, không nhìn thấy chất kết dính Lòng tháp rỗng tới đỉnh Trên thân tháp có nhiều tượng phù điêu đất nung , có hình Ponagar, thần Tenexa, tiên nữ, loài thú: nai, ngỗng vàng, sư tử tháp thờ thần Ponagar, vợc thần Siva tượng trưng cho sắc đẹp, ca vũ sáng tạo nên cung điện, lúa ngô loại gỗ quý Tượng nữ thần cao khoảng 2,6m đá hoa cương màu đen ngồi bệ đá uy nghiêm hình đài sen, lưng tựa phiến đá lớn hình đề Đó kiệt tác điêu khắc Chămpa., kết hợp hài hoà kỹ thuật tượng tròn chạm Người Pháp lấy đầu tượng - Thành cổ Diên Khánh:thành cổ diên khánh quần thể kiến trúc quân sự, hình mẫu thành quân phổ biến vào kỷ 17,18 Tây u Thành nhà Nguuyễn xây dựng - Chùa Long Sơn: Chùa nằm chân Trại Thuỷ Chùa có tượng Kim Thân Phật Tổ lớn ngự trị đỉnh núi Chùa khởi công xây dựng vào kỷ 19 xây dựng vào năm 1940 ĐẠI HỌC THỦY SẢN NHA TRANG Giới Thiệu - Đại học Thuỷ Sản trường đại học đầu ngành nhiệm vụ đào tạo, bồi dưỡng đội ngũ cán khoa học kỹ thuật quản lý kinh tế có trình độ đại học sau đại học phục vụ ngành thuỷ sản số lónh vực kinh tế khác cho nước - Tiền thân trường ĐH Thủy Sản khoaThủy Sản – Học Viện Nông Lâm, thành lập ngày 02/10/1959, Năm 1966, theo định Nhà nước, Khoa tách khỏi Học Viện, trở thành trường Đại Học chuyển vào Nha Trang năm 1976 - Ngoài sở Nha Trang, trường ĐH Thủy Sản Nha Trang đặt sở II Tp HCM nhằm đào tạo, phục vụ nhu cầu phục vụ nhân lực cho tỉnh miền Nam Mặt khác, Trường đả liên kết đào tạo với nhiều trường, viện nhiều địa phương nước Hiện nay, năm 2004, trường có khoảng 8000 Sinh viên quy 7000 sinh viên phi quy theo học Từ năm 1999 đến nay, theo xu hướng phát triển giới để thích ứng nhu cầu kịp với phát triển đất nước trình công nghiệp hoá – đại hoá, từ chỗ có ngành truyền thống phục vụ ngành thủy sản, đến nay, sau 10 năm đổi mới, có 12 ngành với cấp đào tạo trung cấp, cao đẳng, đại học sau đại học Theo BGH Nhà trường, đến năm 2005, theo chủ trương, mở thêm – ngành Với quy mô đào tạo vậy, năm, Trường chiêu sinh khoảng 1700 sinh viên hệ quy đại học, 500 cao đảng, trung cấp đào tạo liên thông Từ năm 1900 đến nay, mặt trường tiến hành đào tạo bậc thạc sỹ tiến só; mặt khác, trường đào tạo cán công nghệ cho địa phương, chủ yếu nuôi trồng chế biến đông lạnh thủy sản - Khuôn viên đại học Thủy Sản Nha Trang rộng khoảng 20 ha, nằm đồi có mặt giáp biển, phía bắc thành phố Nha Trang cách trung tâm thành phố khoảng km Trường ĐH Thủy Sản có khu giảng đường dùng cho giảng dạy nghiên cứu Thư viện trường có 200.000 đầu sách hàng trăm loại tạp chí với nhiều thứ tiếng khác Các phòng thí nghiệm trương năm gần trang bị nhiều máy móc – thiết bị đại Ký túc xá sinh viên gồm dãy đủ đáp ứng nhu cầu cho 4000 sinh viên, có ký túc xá cho học viên sau đại học xây dựng đại, yên ... khoa học Và với đánh giá chúng tôi, Alexandre Yersin nhà khoa học đặt móng cho ngành công nghệ sinh học (Biotechnology) đại sau này, mảnh đất Nha Trang – Khánh Hòa Công nghệ sinh học ngành khoa... phổ hấp thu nguyên tử + Hệ thống chụp phân tích hình ảnh gen: + Hệ thống Elisa: dùng để xác định dư lượng kháng sinh thực phẩm, chẩn đoán số bệnh tôm, cá người + Hệ thống máy sắc kí khí: mục... đồ hộp - Như vậy, vơi1 hệ thống sở vật chất máy móc thiết bị đại giúp cho trung tâm Công nghệ sinh học môi trừong – cụ thể P TN côgn nghệ sinh học môi trường làm thí nghệim nhiều mẫu thức ăn,