ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ĐÀO THỊ VÂN KHÁNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH QUINOLON TRONG TÔM VÀ NƢỚC NUÔI TÔM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) LU[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ĐÀO THỊ VÂN KHÁNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH QUINOLON TRONG TÔM VÀ NƢỚC NUÔI TÔM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI, 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ĐÀO THỊ VÂN KHÁNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ KHÁNG SINH QUINOLON TRONG TÔM VÀ NƢỚC NUÔI TÔM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) CHUN NGÀNH: HĨA PHÂN TÍCH MÃ SỐ: 60440118 NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS LÊ THỊ HỒNG HẢO HÀ NỘI, 2015 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian nghiên cứu học tập tơi hồn thành luận văn cao học với đề tài: “Xác định đồng thời số kháng sinh quinolone tôm nước nuôi tôm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)” hướng dẫn bảo PGS TS Lê Thị Hồng Hảo thầy cơ, anh chị, bạn mơn Hóa phân tích Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc xin chân thành cảm ơn PGS TS Lê Thị Hồng Hảo người giao đề tài tận tình dẫn tơi q trình hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS TS Kazuo HARADA khoa Dược Trường ĐH OSAKA Nhật Bản Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy Bộ mơn hóa phân tích, ban học viên lớp cao học K24 tạo điều kiện, giúp đỡ thời gian thực đề tài Đồng thời xin cảm ơn tới Ban Giám đốc Viện Pasteur Nha Trang, Giám đốc Trung tâm Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh Thực phẩm khu vực miền Trung bạn đồng nghiệp Xin cám ơn lãnh đạo nhân viên chi Cục Nuôi trồng Bảo vệ nguồn lợi thủy sản Khánh Hịa giúp tơi thực việc thu thập mẫu thực đề tài Trong q trình thực khóa luận, nỗ lực cố gắng khơng tránh khỏi thiếu sót kính mong ý kiến bảo, phê bình q thầy Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng 11 năm 2015 Học viên Đào Thị Vân Khánh i MỤC LỤC MỞ ĐẦU -1 Chƣơng I TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU -3 1 Tổng quan kháng sinh nhóm quinolon 1.1.1 Cấu tạo kháng sinh nhóm quinolon -3 1.1.2 Cơ chế tác dụng độc tính 1.2 Tình hình sử dụng tồn dƣ kháng sinh nhóm quinolon 1.2.1 Tình hình sử dụng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon nước -6 1.2.2 Tình hình sử dụng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon giới 1.3 Các phƣơng pháp xác định hàm lƣợng chất nhóm quinolon 10 1.3.1 Phương pháp miễn dịch enzym (ELISA) - 10 1.3.2 Phương pháp vi sinh vật 11 1.3.3 Phương pháp hóa lý 13 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 21 2.2 Đối tƣợng nội dung nghiên cứu - 22 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 22 2.2.2 Nội dung nghiên cứu 22 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 21 2.3.1 Khảo sát quy trình tối ưu phân tích đồng thời quinolon - 21 2.3.2 Phương pháp lấy mẫu 23 2.3.3 Xử lý số liệu 23 2.4 Thiết bị, dụng cụ hóa chất dùng nghiên cứu 23 2.4.1 Thiết bị dụng cụ - 23 2.4.2 Hóa chất, chất chuẩn - 24 ii CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 3.1 Tối ƣu điều kiện thiết bị HPLC 25 3.1.1 Khảo sát bước sóng kích thích phát xạ chất - 27 3.1.2 Khảo sát pha động 29 3.1.3 Khảo sát khoảng tuyến tính chất chuẩn -36 3.2 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu phân tích 36 3.2.1 Giai đoạn làm mẫu sử dụng cột chiết pha rắn (SPE) - 36 3.2.2 Khảo sát giai đoạn chiết mẫu - 42 3.3 Thẩm định phƣơng pháp - 45 3.3.1 Độ đặc hiệu 46 3.3.2 Giới hạn phát hiện(LOD), giới hạn định lượng (LOQ) 48 3.3.3 Độ lặp lại, độ thu hồi 50 3.4 Kết phân tích đánh giá dƣ lƣợng kháng sinh 52 3.4.1 Thu thập mẫu tôm nuôi nước nuôi tôm 52 3.4.2 Kết phân tích mẫu - 53 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 iii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Công thức cấu tạo pKa chất .4 Bảng 1.2: Giới hạn cho phép kháng sinh nhóm quinolon theo EEC No.2377/1990 .6 Bảng 1.3: Giới hạn hàm lượng kháng sinh quinolon theo Thông tư 08/VBHNBNNPTNT Bảng 1.4: Giới hạn hàm lượng kháng sinh quinolon theo Quyết định số 46/2007/QĐ-BYT Bảng 1.5: Lượng kháng sinh tiêu thụ sản phẩm thịt phát có chứa kháng sinh quinolon Bảng 3.6: Bước sóng kích thích phát xạ 07 chất phân tích 29 Bảng 3.7: Chương trình gradient dung mơi pha động tối ưu .36 Bảng 3.8: Phương trình hồi qui hệ số tương quan chất phân tích 37 Bảng 3.9 : So sánh diện tích píc dung dịch chuẩn bay không bay 39 Bảng 3.10: So sánh độ thu hồi cột SPE C18 cột HLB 40 Bảng 3.11: Độ thu hồi theo thể tích mẫu nước ban đầu .43 Bảng 3.12: Kết xác định giới hạn phát mẫu nước 51 Hình 3.13: Sơ đồ chiết mẫu dự kiến 52 Bảng 3.14 : Độ thu hồi, độ lặp lại mẫu nước thêm chuẩn 53 Bảng 3.15: Độ thu hồi, độ lặp lại mẫu tôm thêm chuẩn .54 Bảng 3.16: Danh sách mẫu nước phát chứa tồn dư kháng sinh 55 iv DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Cơng thức cấu tạo chung quinolon Hình 1.2: Cân acid - base nhóm acidic quinolon Hình 1.3: Cân acid base nhóm piperazinyl quinolon Hình 2.4: Sơ đồ quy trình xác định quinolon nước tôm 23 Hình 3.5: Phổ hấp thu phát xạ 07 chất phân tích 28 Hình 3.6: Kết khảo sát với hệ dung môi 30 Hình 3.7: Sắc ký đồ OA FMQ tốc độ dòng: 1,0; 1,5; 2,0mL/phút 32 Hình 3.8: Sự phụ thuộc diện tích píc sắc ký theo pH dung dịch đệm pha động .33 Hình 3.9: Sắc ký đồ 07 chất phân tích nồng độ đệm .34 Hình 3.10: Sắc ký đồ tách 07 chất nhóm quinolon 35 Hình 3.11: So sánh diện tích pic chất dùng dung dịch rửa cột SPE 41 Hình 3.12: Độ thu hồi theo thể tích rửa giải 42 Hình 3.13: Sơ đồ chiết mẫu dự kiến 44 Hình 3.14: Sắc ký đồ mẫu trắng chiết loại dung môi 45 Hình 3.15: Biểu đồ so sánh dung dịch chiết 45 Hình 3.16: Khảo sát pH dung dịch chiết 46 Hình 3.17: Mẫu trắng nước nuôi tôm nước nuôi tôm thêm chuẩn 49 Hình 3.18: Nền mẫu tơm thêm chuẩn mẫu tôm 49 Hình 3.19: Sắc ký đồ mẫu nước xác định LOD 51 Hình 3.20: Sắc ký đồ mẫu tôm xác định LOD 52 Hình 3.21: Sắc ký đồ mẫu tơm có phát nhiễm ERFX 56 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AOAC Hiệp hội nhà phân tích hóa học (Association of Official Analytical Chemists) ATVSTP An toàn vệ sinh thực phẩm BYT Bộ Y tế CPFX Ciprofloxacin DFLX Difloxacin DNFX Danofloxacin DAD Diot Array Detector DNA Deoxyribo Nucleic Acid EDTA Ethylene diamine tetraacetic acid ELISA Phương pháp miễn dịch enzym (enzyme-linked immunosorbent assay) ERFX Enrofloxacin HLB Hydrophilic Lipophilic Balanced (cột cân ưa nước ưa dầu) FMQ Flumequine FDA Hiệp hội thuốc thực phẩm (Food and Drug Administration) FLD Deetecor huỳnh quang (Fluorescence detector) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High-pressure liquid chromatography) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of quantitaion) MPC Chiết cation hỗn hợp (Mixed-phase cation) NRFX Norfloxacin vi MRL Mức dư lượng tối đa (Maximum Residue Levels) MeOH Methanol MeCN Acetonitrile MS Khối phổ (Mass Spectrophotometer) MBFX Marbofloxacin OFLX Ofloxacin OA Oxolinic acid SRFX Sarafloxacin SDS Sodium Dodecyl Sulfate SPE Chiết pha rắn (Solid Phase Extraction) QuEChERS Đơn giản, Dễ dàng, Rẻ, Hiệu quả, Ổn định, An toàn (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe) RT Thời gian lưu (Retention Time) UPLC Sắc ký lỏng siêu hiệu (Ultra performance liquid chromatography) WHO Tổ chức Y tế giới (World Health Organisation) Ex Bước sóng kích thích (ExcitationWavelenght) Em Bước sóng phát xạ (EmissionWavelenght) vii MỞ ĐẦU Vệ sinh an tồn thực phẩm ln vấn đề quan tâm toàn xã hội, quốc gia tồn giới Thực phẩm khơng đảm bảo vệ sinh ảnh hưởng đến sức khỏe người mà liên quan chặt chẽ đến suất lao động, hiệu phát triển kinh tế, thương mại, du lịch an sinh xã hội Trong năm gần xuất dư lượng kháng sinh thủy hải sản thịt gia súc, gia cầm nhiều ảnh hưởng đến sức khỏe người dân Tác hại thực phẩm có tồn dư kháng sinh sức khỏe người nhiều nghiên cứu như: tạo vi khuẩn kháng kháng sinh, gây dị ứng, gây quái thai, gây rối loạn nội tiết gây ung thư người Theo thống kê Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), Việt Nam nằm danh sách nước có có tỷ lệ sử dụng kháng sinh cao giới nay, không sử dụng cho người, chất kháng sinh sử dụng rộng rãi ngành chăn ni Quinolon (hay cịn gọi fluoroquinolone) họ kháng sinh có phổ tác dụng diệt khuẩn rộng, hiệu cao nên chúng sử dụng rộng rãi khơng để chữa bệnh cho người mà cịn dùng để chữa bệnh cho gia cầm thủy sản công nghiệp Hậu giảm hiệu kháng sinh quinolon chủng vi khuẩn gây khó khăn tốn điều trị cho người bệnh Theo thơng báo WHO năm 1999 có tới 11.000 người bị nhiễm khuẩn Campylobacter kháng quinolon ăn thịt gà có chứa quinolon (năm 1998 8.000 người) Có nhiều phương pháp để xác định tồn dư kháng sinh nhóm quinolon như: phương pháp miễn dịch enzym (ELISA); phương pháp vi sinh vật (test vi sinh vật), phương pháp lý hóa Phương pháp lý hóa sử dụng nhiều kỹ thuật khác sắc ký lỏng, điện hóa hịa tan, điện di mao quản, phương pháp có độ xác, độ chọn lọc cao, phát lượng nhỏ kháng sinh tồn dư thực phẩm Phương pháp sử dụng nhiều phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) sử dụng loại detector detector UV, detector huỳnh quang (FLD) detector khối phổ (MS) Việc ứng dụng phương pháp HPLC phân tích nhóm quinlon mẫu môi trường thực phẩm làm nhiều giới Việt Nam sử dụng phương pháp HPLC với detector huỳnh quang hạn chế đặc biệt tách đồng thời nhiều chất với Việt Nam chưa có quy trình thống Xuất phát từ tình hình thực tế, sở nghiên cứu khoa học nước cơng bố, với mục đích gia tăng số lượng chất xác định, sử dụng thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao với detector huỳnh quang tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xác định đồng thời số kháng sinh nhóm quinolon tơm nước nuôi tôm phương pháp sắc lỏng hiệu cao” Chƣơng I TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1 Tổng quan kháng sinh nhóm quinolon 1.1.1 Cấu tạo kháng sinh nhóm quinolon Cơng thức cấu tạo chung nhóm quinolon hợp chất vịng thơm có chứa nitơ, vị trí thứ có gắn nhóm keton, vị trí thứ có gắn nhóm carboxylic Các dẫn xuất quinolon gồm hợp chất vị trí 1, 2, 6, gắn thêm nhóm Vị trí 1: gắn thêm nhóm alkyl aryl; Vị trí 6: gắn thêm F; Vị trí 2, 6, gắn thêm nguyên tử N [38, 39, 47, 52, 54] Hình 1.1: Cơng thức cấu tạo chung quinolon Do có nhóm carboxylic vị trí số nên chất nhóm quinolon mang tính acid Một số quinolon có thêm nhóm amin khác nên có thêm tính base Chúng tan lipid thấm qua màng tế bào Có thể chia nhóm quinolon thành hai loại dựa pKa: acidic quinolon (AQ) piperazinyl quinolon (PQ) - Acidic quinolon: có giá trị pKa khoảng 6,0 đến 6,9 Trong nước chúng tồn dạng trung hòa dạng anion Thường AQ gồm quinolon thuộc hệ thứ - Piperazinyl quinolon: có hai giá trị pKa, pKa1 khoảng 5,5–6,6 pKa2 khoảng 7,2–8,9 Trong nước chúng tồn ba dạng khác nhau: dạng cation, dạng trung hòa dạng anion; số PQ danofloxacin, difloxacin, norfloxacin, ofloxacin, benofloxacin, marbofloxacin, acid pipemidic Hình 1.2: Cân acid - base nhóm acidic quinolon Hình 1.3: Cân acid base nhóm piperazinyl quinolon Bảng 1.1: Công thức cấu tạo pKa chất STT Tên chất Ciprofloxacin Công thức cấu tạo pKa pKa1: 6,09 pKa2: 8,62 Danofloxacin pKa1: 6,20 pKa2: 9,40 Erofloxacin pKa1: 6,1 pKa2: 7,7 Sarafloxacin pKa1: 5,6 pKa2: 8,2 pKa1: 5,7 – 6,1 Difloxacin pKa2: 7,2 – 7.6 Oxolinic acid pKa: 6,9 Flumequine pKa: 6,5 1.1.2 Cơ chế tác dụng độc tính Kháng sinh nhóm phân bố đồng dịch nội ngoại bào, phân bố hầu hết quan: phổi, gan, mật, xương, tiền liệt tuyến, tử cung, dịch não tủy qua hàng rào thai Fluoroquinolon đào thải chủ yếu qua đường tiết niệu dạng nguyên hoạt chất tái hấp thu thụ động thận [16, 52] Cơ chế tác động fluoroquinolon lên vi khuẩn ức chế tổng hợp acid nucleic Sự nhân đôi DNA bắt đầu phản ứng tách chuỗi DNA làm hai, bên khn để gắn nucleotid thích hợp theo ngun tắc bổ sung Enzym DNA polymeras xúc tác tổng hợp liên kết nucleotid; enzym DNA gyrase nối DNA trình tổng hợp tạo thành vòng xoắn Các quinolon (nalidixic acid fluoroquinolon) ức chế mạnh tổng hợp DNA giai đoạn nhân đôi ức chế enzym DNA gyrase Cơ chế tác động hiệu vi khuẩn gram dương gram âm Nhưng chế ức chế tổng hợp acid nucleic mà kháng sinh nhóm fluoroquinolon cho có nguy gây đột biến gen, gây sẩy thai sử dụng cho động vật mang thai khuyến cáo khơng nên sử dụng kháng sinh nhóm fluoroquinolon cho động vật mang thai, động vật sinh sản làm giống Ngồi nghiên cứu động vật cịn non cho thấy kháng sinh thuộc nhóm gây hủy hoại khớp sụn [34, 54] kháng sinh nhóm quinolon khơng sử dụng điều trị bệnh cho trẻ em 1.1.3 Giới hạn cho phép kháng sinh nhóm quinolon Ngày 26/6/1990 Uỷ ban An tồn thực phẩm Châu Âu thức ban hành Quyết định 2377/1990[26] qui định mức giới hạn tối đa chất kháng sinh thực phẩm có nguồn gốc động vật giới hạn nhóm quinolon sản phẩm có nguồn gốc động vật bao gồm: Bảng 1.2: Giới hạn cho phép kháng sinh nhóm quinolon theo EEC No.2377/1990 Tên kháng sinh Lợn (ppb) Bò, dê, cừu(ppb) Danofloxacin 100 200 Difloxacin 400 400 Enrofloxacin 100 100 Flumequin 200 200 Marbofloxacin 150 150 Oxolinic acid (*) 100 (*) Giới hạn cho phép cá 100ppb Gà(ppb) 200 300 100 400 100 Tại Việt Nam, Thông tư số 08/VBHN-BNNPTNT ngày 25 tháng 02năm 2014 quy định Danh mục loại kháng sinh cấm sử dụng hạn chế sử dụng [1], theo kháng sinh fluoroquinolon bị cấm sử sản xuất, kinh doanh thuỷ sản xuất vào thị trường Mỹ Bắc Mỹ, ciproxacin ofloxacin bị cấm sử dụng chăn nuôi thú y, chất nằm danh mục hạn chế sử dụng bao gồm: Bảng 1.3: Giới hạn hàm lượng kháng sinh quinolon theo Thông tư 08/VBHN-BNNPTNT Tên kháng sinh Danofloxacin Difloxacin Flumequin Tên kháng sinh Ciprofloxacin Oxolinic Acid Sarafloxacin MRL (ppb) 100 300 600 MRL (ppb) 100 100 30 Hiện nay, theo Quyết định số 46/2007/QĐ-BYT ngày 19 tháng 12 năm 2007 quy định mức giới hạn nhiễm hóa học vi sinh vật thực phẩm, Bộ Y tế đưa mức giới hạn kháng sinh nhóm quinolon danofloxacin, enrofloxacin, flumequine, sarafloxacin Bảng 1.4: Giới hạn hàm lượng kháng sinh quinolon theo Quyết định số 46/2007/QĐ-BYT Tên kháng sinh ADI (μg/kg thể trọng/ngày) MRL (μg/kg) Danofloxacin - 20 50 (gan lợn); 100 (thịt) Enrofloxacin 0-3 100 Flumequine - 30 500 (thịt, gan, cá) Sarafloxacin - 0,3 10 (thịt); 80 (gan, thận) 1.2 Tình hình sử dụng tồn dƣ kháng sinh nhóm quinolon 1.2.1 Tình hình sử dụng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon nước Mặc dù kháng sinh nhóm quinolon quan chức quản lý chặt nhiều nghiên cứu thực phẩm nước thực phẩm xuất bị phát có chứa tồn dư loại kháng sinh Việc tồn dư kháng sinh hàm lượng cao cho thấy thực trạng sử dụng kháng sinh thời gian dài với hàm lượng lớn đồng thời người chăn nuôi không đảm bảo thời gian cách ly hợp lý vật nuôi trước thu hoạch Nhiều nghiên cứu nước khảo sát tình hình sử dụng loại kháng sinh chăn ni, hầu hết nghiên cứu cho thấy lạm dụng kháng sinh phổ biến tồn dư thực phẩm (kể chất bị cấm sử dụng) chiếm tỷ lệ đáng kể [4, 5, 6, 8, 9] Người chăn nuôi sử dụng nhiều hình thức khác phối trộn trực tiếp vào thành phần thức ăn đưa vào mơi trường ni hình thức phịng bệnh Theo nghiên cứu Takahiro Yamaguchi mẫu lợn, bị, gà, tơm cá ni thu thập tỉnh Thái Bình, Hà Nội, Khánh Hịa, TP HCM năm 2012-2013 cho thấy có tới 7,7% số mẫu kiểm nghiệm phát nhiễm enrofloxacin (ERFX) với hàm lượng từ 12–77ppb điều cho thấy bị cấm đường kháng sinh vào mẫu thực phẩm để đến với người tiêu dùng [57] Theo báo cáo phủ Úc năm 2008, thủy sản nhập Việt Nam vào thị trường nước giám sát chặt chẽ phát lô hàng nhiễm kháng sinh quinolon bao gồm ERFX ciprofloxacin (CPFX) với mức nhiễm 8,5 – 35 2,0 – 33ppb [12] Các nghiên cứu cho thấy thực trạng sử dụng kháng sinh chăn nuôi tồn dư chất sản phẩm thực phẩm khơng có dấu hiệu cải thiện, theo báo cáo kết cơng tác quản lý chất lượng an tồn thực phẩm tháng đầu năm 2015 Bộ Nông nghiệp phát triển nơng thơn có tới 1,01% mẫu thủy sản nhiễm dư lượng hóa chất, kháng sinh cấm sử dụng vượt ngưỡng cho phép 7,6% mẫu thịt có dư lượng hóa chất, kháng sinh vượt ngưỡng Đối với mẫu mơi trường, Việt Nam có nghiên cứu đánh giá thực trạng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon mơi trường Theo nghiên cứu năm 2006 TS Dương Thị Hồng Anh phân tích đánh giá có mặt kháng sinh họ fluoroquionolon nước thải bệnh viện, phát thấy hàm lượng kháng sinh ciproxacin norfloxacin nước thải chưa xử lí xử lí bệnh viện Hữu Nghị với nồng độ từ 3,5 tới 50,3 µg/L nồng độ ciproxacin cao norfloxacin từ 3-5 lần [2] Năm 2014, theo nghiên cứu TS Dương Thị Hồng Anh cộng sự, mẫu nước, bùn, tôm lấy điểm ao nuôi, dọc kênh rừng ngập mặn tiếp giáp khu vực nuôi tôm quảng canh thuộc xã Giao An, Giao Thủy, Nam Định vào hai thời điểm thả tôm giống thu hoạch Dư lượng kháng sinh CPFX norfloxacin (NRFX) phân tích mẫu sử dụng phương pháp chiết pha rắn, chiết lỏng áp suất cao xác định sắc ký lỏng hiệu cao với detector huỳnh quang Chỉ có dư lượng ciprofloxacin tìm thấy nước bùn khoảng nồng độ 0,06 – 0,35 µg/L 0,22 – 0,40 µg/g Kết phân tích thời điểm đầu vụ nuôi tôm cho thấy người nuôi trồng sử dụng CPFX để khử trùng nước môi trường Trong mẫu tôm sản phẩm thu khu vực không phát thấy CPFX NRFX [3] 1.2.2 Tình hình sử dụng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon giới Nhiều nghiên cứu giới cho thấy tình hình sử dụng tồn dư kháng sinh nhóm quinolon mức độ báo động Theo báo cáo năm 2006 Tổ chức đánh giá dược phẩm Châu Âu (European Medicines Evaluation Agency), tổng lượng kháng sinh quinolon tiêu thụ khối lượng sản phẩm thịt có chứa kháng sinh nhóm quinolon số quốc gia thống kê sau [27]: Bảng 1.5: Lượng kháng sinh tiêu thụ sản phẩm thịt phát có chứa kháng sinh quinolon Tên nƣớc Cộng hịa Séc Đan Mạch Phần Lan Pháp Hà Lan Tây Ban Nha Thụy Điển Anh Tổng lƣợng kháng sinh tiêu thụ (tấn) Fluoro Nhóm -quinolon quinolon 0,8 0,1 0,1