TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG SỐ 10(71) 2013 149 NGHIÊN CỨU MÔI TRƯỜNG THAY THẾ RẺ TIỀN ĐỂ NUÔI CẤY TẢO SPIRULINA LÀM THỰC PHẨM CHỨC NĂNG MASS CULTURE OF SPIRULINA IN THE LOW COST MED[.]
TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 NGHIÊN CỨU MÔI TRƯỜNG THAY THẾ RẺ TIỀN ĐỂ NUÔI CẤY TẢO SPIRULINA LÀM THỰC PHẨM CHỨC NĂNG MASS CULTURE OF SPIRULINA IN THE LOW-COST MEDIUM Nguyễn Thị Thu Thảo, Nguyễn Thị Minh Xuân, Đặng Đức Long Trường Đại học Bách khoa, Đại học Đà Nẵng Email: ntmxuan@dut.udn.vn hoặc ddlong@dut.edu.vn TÓM TẮT Spirulina xem loại siêu thực phẩm hàm lượng chất dinh dưỡng cao thành phần chứa Nó trở thành nguồn thực phẩm vơ giá đặc biệt cho người ăn kiêng, người ăn chay, người bị đái tháo đường Nó sử dụng người Aztecs Bắc Mỹ vào kỷ 16 Từ năm 1969, đưa vào nuôi cấy chủ động Pháp sau mở rộng Nhật Bản, Thái Lan, California, Hawaii Tuy nhiên việc nuôi cấy hạn chế hồ có độ kiềm có hàm lượng vi khống tự nhiên thích hợp cho tảo phát triển, sản xuất môi trường nhân tạo mà chấp nhận mức chi phí đầu tư cao làm tăng giá thành sản phẩm Trong nghiên cứu này, chúng tơi tiến hành tìm kiếm mơi trường thay nuôi cấy tảo Spirulina platensis rẻ tiền từ rỉ đường, khảo sát số điều kiện ni cấy nhằm làm giảm chi phí ni trồng tảo Từ khóa: Spirulina; ni cấy sinh khối; mơi trường nuôi cấy; rỉ đường; vi tảo ABSTRACT Spirulina, an edible blue-green microalgae, has been considered to be super-food because of its nutrient dense Spirulina contains a high amount of protein, vitamins, and minerals They become invaluable food, especially for vegetarians, vegans, anemic, diabetic The Aztecs and North Africans have used Spirulin as food since the 16th century However, until 1969, the first Spirulina processing plant was opened by French, and soon after in Japan, Thailand, California, and Hawaii However, the cost for culturing Spirulina is high in the regions where there are no natural alkaline lakes This is because the medium for mass culture of Spirulina requires a lot of chemicals This is one of the main reasons that low-income people can’t approach the amazing most nutritious products from Spirulina In our study, we have looked for a low-cost medium which can be used in Spirulina platensis culture Besides, some culture conditions are also conducted to reduce the price of Spirulina products Key words: Spirulina; Mass culture; medium culture; molasses; microalgae Đặt vấn đề Spirulina loại vi tảo có màu xanh lục, đơn bào, tự dưỡng quang hợp Chúng giàu protein (chiếm 60-70% trọng lượng khô), vitamin (đặc biệt vitamin B12), sắc tố chlorophyll, caroteinoid chất chống oxy hóa khác mà có khả bảo vệ tế bào khỏi phá huỷ gốc tự Chúng chứa nhiều amino acid không thay thế, loại vi khống acid béo khơng thay có lợi omega-3, gama linolenic acid [4] Vì chúng coi siêu thực phẩm Người ta ước tính hàm lượng dinh dưỡng 1kg tảo Spirulina tương đương với 1000 kg rau Một vài thử nghiệm lâm sàng ban đầu cho thấy Spirulina có ảnh hưởng tích cực đến việc điều trị bệnh [5] làm giảm hàm lượng cholesterol máu, bảo vệ chống lại vài bệnh ung thư, tăng cường hệ thống miễn dịch [2] Một vài nghiên cứu phần chiết nước tảo Spirulina platensis có khả ức chế nhân lên virus HIV-1 dòng tế bào T, tế bào đơn nhân ngoại biên, tế bào Langerhans [1] Cho đến có hàng loạt cơng nghệ nuôi trồng, thu hoạch, chế biến sinh khối vi tảo, loại cơng nghệ khơng ngừng hồn thiện, hạ giá thành nâng cao chất lượng sinh khối Nhìn chung, tảo Spirulina ni ao hồ cạn hoặc bioreactor với yêu cầu mơi trường phải mơi trường có độ kiềm cao (thường sử dụng natri cacbonat) chứa vi khoáng thích hợp, 149 TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 nhiệt độ dao động từ 25-40 độ C, có đủ ánh sáng [6] Hiện môi trường sử dụng để nuôi cấy tảo chủ yếu mơi trường Zarrouk có giá thành tương đối cao Tuy điều kiện khí hậu nước ta tương đối thích hợp cho tảo phát triển có nhiều nghiên cứu loại tảo quy mơ cịn chưa rộng Hiện có sở sản xuất hồ Vĩnh Hảo (Ninh Thuận) có độ kiềm tự nhiên thích hợp cho tảo phát triển Sở dĩ thành phần mơi trường ni cấy cịn sử dụng nhiều hóa chất kinh tế- chi phí đầu tư cao Vì đề tài chúng tơi tiến hành tìm kiếm mơi trường dinh dưỡng rẻ tiền thay hoặc giảm bớt lượng hóa chất cần thiết để nuôi trồng Spirulina platensis Đây điều kiện định để giảm giá thành sinh khối tảo Bên cạnh đó, chúng tơi khảo sát số điều kiện nuôi cấy nhằm làm giảm chi phí sản xuất Vật liệu và phương pháp 2.1 Vật liệu Giống tảo Spirulina platensis cung cấp Phịng Cơng nghệ tảo, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào 15/03/2012 Rỉ đường để làm môi trường thay mua từ Nhà máy đường, Quảng Ngãi Rỉ đường phải xử lý trước sử dụng sau: pha loãng rỉ đường theo tỉ lệ 1:3, bổ sung H2SO4 vào với tỉ lệ 3,5 ml H2SO4 1000 ml rỉ đường Khuấy liên tục giờ, sau để lắng thu phần dịch pha loãng dung dịch xuống phù hợp với tỉ lệ rỉ đường chọn Tất hóa chất dùng để pha môi trường nuôi cấy tảo mua hãng Sigma, USA 2.2 Nuôi cấy sinh khới tảo Spirulina platenesis Giống tảo hoạt hóa môi trường chuẩn Zarrouk, lắc máy lắc hiệu Stuart Obital incubator SI500 35oC, 150 vòng/phút, sử dụng ánh sáng tự nhiên, bảo quản đĩa thạch 4oC Môi trường Zarrouk chuẩn bao gồm: 0,5g/l K2HPO4; 2,5g/l NaNO3; 1g/l K2SO4; 1g/l 150 NaCl; 0,2g/l MgSO4.7H2O; 0,04g/l CaCl2.2H2O; 0,01g/l FeSO4.7H2O; 0,08g/l EDTA; 16,8 g/l NaHCO3; 2.86mg/ml H3BO3; 2,5mg/ml MnSO4.7H2O; 0,22mg/ml ZnSO4.7H2O; 0,079mg/ml CuSO4.5H2O; 0,0021mg/ml Na2MoO4.2H2O Để khảo sát ảnh hưởng loại môi trường nuôi cấy khác lên tăng sinh khối tảo Spirulina, cấy 75 ml từ bình tảo giống Spirulina vào 250ml mơi trường bình serum loại 500ml ni điều kiện môi trường khác bao gồm: môi trường 1: môi trường (Zarrouk), môi trường 2: 0,75ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3, môi trường 3: 1ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3, môi trường 4: 1,5ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 Thí nghiệm lặp lại lần Các điều kiện nuôi cấy giữ ổn định: nhiệt độ: 34- 37 độ C, pH = 8- 11, chiếu sáng ánh sáng tự nhiên, đèn huỳnh quang hoặc đèn Led Đo độ hấp thụ quang (Abs.) bước sóng 420nm để xác định tốc độ sinh trưởng tảo Spirulina platensis 2.3 Xác định hàm lượng sắc tố Hàm lượng chlorophyll phycocyanin có tảo định lượng dựa vào khả hấp thụ ánh sáng loại sắc tố bước sóng định chúng chiết dung mơi thích hợp Trong nghiên cứu sử dụng methanol để chiết chlorophyll đo bước sóng 665 nm mơ tả McKinney, G [7] Và sử dụng đệm phosphate để chiết phycocyanin đo bước sóng 618 nm mô tả Oliveira cộng [3] 2.4 Xác định nồng độ protein Để xác định nồng độ protein, g sinh khối sau lọc đem phá mẫu cách nghiền với đệm phosphate (0,1M, pH 7,4) 4oC Nồng độ protein đo phương pháp Bradford với Bovine serum albumin chất chuẩn Kết nghiên cứu và khảo sát: 3.1 Khảo sát các mơi trường thay 3.1.1 Quan sát hình thái tảo Sau 48h nuôi cấy, tế bào vi tảo hoạt hóa đem quan sát kính hiển vi Kết TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 hình Khơng có vi sinh vật tạp nhiễm khác phát qua kính hiển vi Từ hình ta thấy, tảo có dạng sợi đơn độc, trơi nởi, màu xanh lam khơng có vỏ bao, eo thắt vách tế bào không rõ ràng Tế bào dài khoảng 1,5- 3µm, rộng 4- 5,5µm với nhiều khơng bào chứa khơng khí Như chúng tơi có giống tảo Spirulina platensis hồn tồn khiết sử dụng nghiên cứu sau 3.1.2 Khảo sát môi trường thay Để khảo sát khả thay môi trường đắt tiền Zarrouk, sử dụng rỉ đường nhiều nồng độ khác với lượng Na2CO3 chất tạo mơi trường kiềm thích hợp cho vi tảo phát triển Spirulina có màu xanh có chưa sắc tố Chlorophyll a Sắc tố hấp thụ bước sóng mạnh bước sóng 420 nm 665 nm Vì chúng tơi độ hấp thụ ánh sáng bước sóng 420 nm để biểu thị cho tốc độ sinh trưởng tảo theo thời gian Hình Hình thái tảo sau 48h ni cấy kính hiển vi A Vật kính 10X B Vật kính 40X C Vật kính 100X D Tảo Spirulina platensis phân cắt Kết khảo sát mơi trường thay thể thể Hình Hình Hình Đồ thị đường cong sinh trưởng tảo loại môi trường theo thời gian, Abs đo bước sóng 420 nm MT1: Tảo nuôi trong250ml môi trường Zarrouk MT2: Tảo nuôi 250ml mơi trường có bổ sung 0,75ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 MT3: Tảo ni 250ml mơi trường có bổ sung 1ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 MT4:Tảo nuôi 250ml mơi trường có bổ sung 1,5ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 Hình Trọng lượng sinh khối tảo mẫu tảo thu loại môi trường khác sau 17 ngày A: Tảo nuôi trong250ml môi trường MT1 (Zarrouk) B: Tảo nuôi 250ml môi trường MT2 có bổ sung 0,75ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 C: Tảo ni 250ml mơi trường MT3 có bổ sung 1ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 D: Tảo ni 250ml mơi trườngMT4 có bổ sung 1,5ml rỉ đường + 16,8g NaHCO3 151 TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 Từ hình ta thấy tốc độ sinh trưởng phát triển tảo môi trường Zarrouk cao nhiều so với môi trường khác Các giá trị Abs tăng lên nhanh đạt cao vào ngày thứ 16 với giá trị Abs đạt 2,357, giá trị cao giá trị Abs cao môi trường khác nhiều, cụ thể 1,11 so với môi trường 2, so 1,475 với môi trường 1,706 so với môi trường vào ngày thứ 17 Từ kết khảo sát ta thấy môi trường thay cho sinh khối tảo lớn so với mơi trường thay cịn lại (MT3 MT4) Vì vậy, thí nghiệm sử dụng môi trường để nuôi trồng tảo khảo sát ảnh hưởng từ môi trường thay Đánh giá chất lượng tảo nuôi môi trường nuôi cấy khác Môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến tốc độ sinh trưởng tảo mà ảnh hưởng đến hàm lượng thành phần dinh dưỡng có tảo Để kiểm tra chất lượng tảo nuôi cấy môi trường chuẩn môi trường thay thế, đánh giá qua thông số hàm lượng chlorophyll, phycocyanin, hàm lượng protein có tảo thu hoạch sau 17 ngày nuôi điều kiện môi trường khác 3.1.3 Hàm lượng sắc tố có tảo nuôi cấy môi trường khác Sắc tố yếu tố quan trọng giúp tổng hợp loại hormon cần thiết để điều khiển hoạt động thể Hàm lượng sắc tố sinh khối Spirulina platensis cao, đặc biệt carotenoid, chlorophyll, phycocyanin Trong đó, chlorophyll coi máu xanh giống hemoglobin, khác nhóm kim loại Mg dạng ion (nên có màu xanh) thay Fe hemoglobin (màu đỏ) Có ý kiến cho kim loại chlorophyll thay ion Fe thay hemoglobin mơ bào Chlorophyll có khả lọc máu, làm tăng hàm lượng oxy lưu chuyển máu, kháng oxy hóa Trong sinh khối S 152 platensis có chứa chlorophyll chiếm tỉ lệ cao so với loại thực phẩm tự nhiên khác Ngoài ra, phycocyanin sắc tố đóng vai trị quan trọng Spirulina platensis tồn dạng protein phức hợp, chiếm hàm lượng lớn Trong phycocyanin có nguyên tố Fe, Mg có ý nghĩa dinh dưỡng người nhu cầu bở sung khống dạng hữu Nó chứng minh có khả kháng viêm, kháng oxy hóa kháng ung thư [3] Nhiều nghiên cứu thể chủng khác hoặc chủng ni cấy mơi trường khác hàm lượng phycocyanin khác Vì đây, chúng tơi dựa vào hàm lượng sắc tố chứa vi tảo để đánh giá chất lượng vi tảo nuôi cấy môi trường khác Kết thể bảng Bảng 1: Hàm lượng sắc tố có tảo ni cấy mơi trường Zarrouk (Az) môi trường thay (AR) MT nuôi Nồng độ chlorophyll cấy (mg/g) AZ AR 6,641±0,83 6,023±0,76 Nồng độ phycocyanin (mg/g) 56,75±1,72 53,3±2,81 Qua bảng ta thấy tảo nuôi môi trường khác cho hàm lượng chlorophyll phycocyanin khác Tảo ni cấy mơi trường Zarrouk cho hàm lượng sắc tố cao tảo nuôi mơi trường rỉ đường 3.1.4 Hàm lượng protein có tảo nuôi cấy môi trường khác Protein thành phần quan trọng để đánh giá chất lượng dinh dưỡng tảo Spirulina có hàm lượng protein cao bất kỳ loại thực phẩm khác, nhiều thịt động vật cá tươi Tảo sau 17 ngày nuôi cấy đem phá mẫu đệm phosphate đo độ hấp thụ ánh sáng, qua đường chuẩn tính tồn hàm lượng protein có mẫu tảo nuôi cấy môi trường khác Kết thể Bảng TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 Bảng 2: Hàm lượng protein có tảo nuôi cấy môi trường Zarrouk (Az) môi trường thay (AR) Mẫu nuôi cấy AZ AR Hàm lượng protein (% sinh khối tảo) 60,9±2,8 59,3±3,5 đến ngày thứ đạt 0,191 tới ngày thứ cịn 0,176 Tuy nhiên khảo sát mục 2.1 mơi trường Zarrouk sinh khối tảo đạt cao khoảng ngày nuôi thứ 16 Với số liệu bảng ta thấy rằng: hàm lượng protein tảo Spirulina platensis ni cấy mơi trường khác khác Trong đó, tảo ni mơi trường chuẩn Zarrouk cho hàm lượng protein cao (60,9%) cao so với tảo nuôi môi trường rỉ đường (59,3%) 3.2 Khảo sát các loại ánh sáng ảnh hưởng lên sinh trưởng, phát triển tảo Như ta biết ánh sáng nhân tố quan trọng cho quang hợp yếu tố quan trọng ảnh hưởng trực tiếp đến sinh trưởng phát triển tảo Thông thường ánh sáng mặt trời tận dụng nuôi cấy tảo Tuy nhiên, ngày trời mưa hoặc ánh sáng mặt trời không đủ mạnh kìm hãm phát triển tảo Vì vậy, phải sử dụng nguồn ánh sáng nhân tạo (thông thường đèn huỳnh quang) để thay ánh sáng mặt trời ngày điều kiện khơng thuận lợi Bên cạnh đó, theo TS Dương Tấn Nhựt ánh sáng đèn Led xanh [8] có ảnh hưởng tốt đến sinh trưởng phát triển số loại nuôi cấy mô Việc sử dụng đèn led làm giảm đáng kể điện Vì vậy, chúng tơi tiến hành khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn Led xanh đến sinh trưởng phát triển tảo Tảo nuôi môi trường Zarrouk với điều kiện trên, bình ni tảo chiếu sáng liên tục 24/24 loại ánh sáng khác Qua đồ thị hình ta thấy sinh trưởng phát triển tảo điều kiện ánh sáng khác khác Dưới ánh sáng huỳnh quang Abs thấp vào ngày 0,094 ngày Abs tăng tuyến tính ngày thứ đạt 0,524 Trong mẫu ni ánh sáng Led xanh tốc độ sinh trưởng phát triển chậm, Abs ngày 0,075 Hình Đồ thị biểu diễn đường cong sinh trưởng theo thời gian tảo môi trường Zarrouk điều kiện ánh sáng Huỳnh quang ánh sáng Led; Abs đo bước sóng 420 nm Thảo ḷn Mơi trường Zarrouk mơi trường chứa chủ yếu gồm chất khống vi lượng Để thay môi trường sử dụng rỉ đường, phế thải nhà máy sản xuất đường mà chứng minh chứa nhiều thành phần khoáng vi lượng Kết cho thấy, môi trường Zarrouk môi trường tốt cho sinh trưởng tảo cho chất lượng tảo tốt Sau 16 ngày nuôi cấy, sinh khối tảo đạt cao tất loại môi trường, nhiên môi trường thay sinh khối 2/3 so với sinh khối tảo thu môi trường Zarrouk Tuy nhiên, chênh lệch sinh khối không lớn so sánh chi phí cao cơng sức bỏ lớn cho việc pha chế môi trường Zarrouk để nuôi cấy tảo với môi trường thay đơn giản rẻ tiền từ rỉ đường Bên cạnh rỉ đường phế liệu công nghiệp sản xuất đường, dễ kiếm rẻ tiền Sử dụng rỉ đường đồng thời giúp làm giảm lượng chất thải gây ô nhiễm môi trường từ nhà máy sản xuất đường Vì chọn rỉ đường để ni cấy tảo đường hiệu quả, kinh tế bảo vệ môi trường Hàm lượng sắc tố protein tan tảo thu môi trường thay 153 TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG - SỐ 10(71).2013 môi trường Zarrouk Tuy nhiên, chênh lệch hịan tồn khơng đáng kể Kết cho thấy sử dụng rỉ đường để nuôi cấy tảo nhằm làm thực phẩm chức hồn tồn phù hợp Tảo ni cấy môi trường thay đảm bảo giá trị dinh dưỡng Đây giá trị quan trọng tảo Trong thí nghiệm thể nồng độ rỉ đường cao tốc độ sinh trưởng tảo thấp Điều giải thích nồng độ đường rỉ đường cao, làm tăng áp suất thẩm thấu kìm hãm tốc độ trao đởi chất tảo từ làm giảm gia tăng sinh khối tảo Tuy nhiên, không tiếp tục hạ nồng độ rỉ đường xuống thấp 0,3%, điều làm giảm hàm lượng khống có rỉ đường Vì vậy, việc tiếp tục hạ nồng độ rỉ đường tránh tác dụng đường đến sinh trưởng tảo, ảnh hưởng đến chất lượng tảo Tuy nghiên cứu chúng tơi chưa có điều kiện để phân tích thành phần dinh dưỡng đặc biệt khống có tảo, nghiên cứu trước rõ thành phần dinh dưỡng môi trường ni cấy, đặc biệt chất khống ảnh hưởng đáng kể đến chất lượng dinh dưỡng tảo [6] Thực nghiệm cho thấy dù tảo nuôi môi trường Zarrouk hay môi trường rỉ đường, ánh sáng huỳnh quang cho hiệu cao đáng kể so với đèn Led xanh Điều cho thấy ứng dụng ánh sáng đèn Led xanh nuôi cấy tảo khơng hiệu Các ngun nhân cường độ thời gian chiếu sáng đèn không đáp ứng đủ yêu cầu cho tảo quang hợp, khả hấp thụ ánh sáng xanh từ đèn Led tảo nên hiệu nuôi cấy không cao Kết luận Để giảm lượng hóa chất, rút ngắn thời gian chuẩn bị mơi trường đặc biệt giảm chi phí đầu tư để ni tảo mơi trường rỉ đường + NaHCO3 đáp ứng yêu cầu Rỉ đường phế liệu công nghệ sản xuất đường nên rẻ dễ kiếm, hiệu nuôi tảo môi trường rỉ đường cho kết tương đối tốt Môi trường nuôi cấy tốt qua tiến hành thực nghiệm môi trường chứa 0,3% rỉ đường (v/v) + 6,72% NaHCO3 (w/v) Nhân tố ánh sáng ảnh hưởng nhiều đến khả quang hợp, sinh trưởng, phát triển tảo ánh sáng đèn huỳnh quang đáp ứng yêu cầu Thử nghiệm với ánh sáng đèn Led xanh nhằm làm giảm lượng hiệu không cao TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Ayehunie, S., et al., "Inhibition of HIV-1 replication by an aqueous extract of Spirulina platensis (Arthrospira platensis)" J Acquir Immmune Defic Syndr Human Retrovirol, 1998 18: p [2] Belay, A., et al., " Current knowledge on potential health benefits of Spirulina." J Appl Phycol., 1993 5: p [3] E.G OLIVEIRA, et al., "Phycocyanin content of Spirulina Platensis dried in spouted bed and thin layer" Journal of Food Process Engineering, 2008 31(1): p 34-50 [4] Falquet, J., "The Nutritional aspects of Spirulina" Antenna Technologies, 1996 [5] Fox, R.D., "Spirulina Production and Potential" Edisud, Aix-en-Provence, France, 1996: p [6] Habib, M.A.B., et al., "A review on culture, production, and use of Spirulina as food for humans and feeds for domestic animals and fish." FAO Fisheries and Aquaculture Circular, 2008 1034 [7] McKinney, G., J Biol Chem., 1941 140: p [8] Nhựt, D.T and N.B Nam, "Ảnh hưởng chế độ chiếu sáng đơn sắc lên sinh trưởng phát triển hoa Cúc nuôi cấy in vitro" Tạp chí Cơng nghệ sinh học, 2009 7(1): p (BBT nhận bài: 05/07/2013, phản biện xong: 27/07/2013) 154 ... sử dụng môi trường để nuôi trồng tảo khảo sát ảnh hưởng từ môi trường thay Đánh giá chất lượng tảo nuôi môi trường nuôi cấy khác Môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến tốc độ sinh trưởng tảo mà ảnh... Na2MoO4.2H2O Để khảo sát ảnh hưởng loại môi trường nuôi cấy khác lên tăng sinh khối tảo Spirulina, cấy 75 ml từ bình tảo giống Spirulina vào 250ml mơi trường bình serum loại 500ml nuôi điều kiện môi trường. .. mơi trường khác cho hàm lượng chlorophyll phycocyanin khác Tảo nuôi cấy mơi trường Zarrouk cho hàm lượng sắc tố cao tảo nuôi môi trường rỉ đường 3.1.4 Hàm lượng protein có tảo nuôi cấy môi trường