Tác dụng hiệp đồng của anti hp urease igy và lj88 ức chế sự tăng sinh của vi khuẩn hp in vitro và in vivo Tác dụng hiệp đồng của anti hp urease igy và lj88 ức chế sự tăng sinh của vi khuẩn hp in vitro và in vivo Tác dụng hiệp đồng của anti hp urease igy và lj88 ức chế sự tăng sinh của vi khuẩn hp in vitro và in vivo Tác dụng hiệp đồng của anti hp urease igy và lj88 ức chế sự tăng sinh của vi khuẩn hp in vitro và in vivo
Tác dụng hiệp đồng anti-HP urease IgY LJ88 ức chế tăng sinh vi khuẩn HP in vitro in vivo Nhóm 10 GVHD: GS TS Nguyễn Thị Thanh Mai Hồ Chí Minh, 2021 Tổng quan Cơ sở lý thuyết Tiến hành thí nghiệm Mục lục Kết thảo luận Kết luận Tài liệu tham khảo Tổng quan 80% nguyên nhân loét dày HP Nguy hàng đầu gây ung thư dày Tác dụng phụ kháng sinh Tỉ lệ kháng kháng sinh liên tục gia tăng Cơ sở lý thuyết 2.1 Viêm loét dày gì? - Viêm loét dày xảy lớp bảo vệ niêm mạc dày khỏi axit dày bị phá vỡ, điều tạo điều kiện cho niêm mạc dày bị tổn thương - Điều thường kết của: nhiễm trùng với vi khuẩn Helicobacter pylori (HP) 2.2 Vi khuẩn HP chế gây bệnh 2.2.1 vi khuẩn helicobacter pylori (HP) - Vi khuẩn HP có cấu trúc hình xoắn, với kích thước 0,5μm x 3-5μm.m x 3-5μm x 3-5μm.m - Có gắn chùm lông đầu đảm nhiệm chức di chuyển - Phát triển tốt nhiệt độ từ 30 - 40 độ C, pH từ – 8,5 - Sống phần sâu lớp nhầy bao phủ niêm mạng dày 10 3.1 Chuẩn bị IgY Tinh chế qua bước HP urease Nhũ tương với IFA HP urease tinh khiết Gây miễn dịch cho gà mái Tiêm cho gà mái 18 tuần tuổi IgY đối chứng: KHÔNG gây miễn dịch tuần sau tiêm nhắc lại IgY đặc hiệu với HP urease tích lũy trứng gà miễn dịch Định lượng phương pháp ELISA Kết tủa với (NH4)2SO4 16 LJ88 phân lập từ người Nhật Bản 3.2 Chuẩn bị LJ88 Nuôi môi trường De Man, Rogosa Sharpe (MRS) 18 37oC Định lượng huyết cầu kế Rửa với Phosphate-buffered saline (PBS) Mẫu LJ88 sống Khử trù ng 15 1 o phú C , t Mẫu LJ88 bị tiêu diệt Bảo quản -80oC 17 3.3 Chuẩn bị in vitro Thử nghiệm với chủng HP: No.130, TK007, TI3, TI6, U-12 106 cfu/mL HP Anti-HP urease IgY BHI, 5% huyết ngựa, 37oC Mẫu LJ88 sống Xác định số lượng HP sống 0, 12, 24, 48 18 3.4 Chuẩn bị in vivo Chuột đực germ-free BALB/c Mơ hình germ-free Mơ hình chuột liên quan đến hệ VSV người tuần tuổi Nuôi buồng cách ly nhựa dẻo kiểu trexler với thức ăn, nước uống vô trùng Uống 0.5 mL dung dịch pha từ 10 mg phân người PBS Sau tuần uống 109 cfu HP/ ngày, ngày liên tục uống 109 cfu HP/ngày, ngày liên tục Sau 4 tu u a S t uầ n ần Thử mẫu 19 Định lượng vi khuẩn HP Phương pháp MPN ( most probable number) • A: số tế bào VK g hay mL mẫu N: số khuẩn lạc đếm đĩa chọn ni: số lượng đĩa cấy độ pha lỗng thứ i V: thể tích dịch mẫu (mL) cấy vào đĩa fi: độ pha loãng tương ứng 20 ... tổn thương - Điều thường kết của: nhiễm trùng với vi khuẩn Helicobacter pylori (HP) 2.2 Vi khuẩn HP chế gây bệnh 2.2.1 vi khuẩn helicobacter pylori (HP) - Vi khuẩn HP có cấu trúc hình xoắn, với... mái, thu IgY đặc hiệu lòng đỏ trứng - IgY có tác dụng ức chế vi khuẩn HP chống lại số protein cụ thể urease 13 2.3 Đối tượng nghiên cứu Lactobacillus johnsonii No.1088 (LJ88) - Là loại vi khuẩn. .. 2.2 Vi khuẩn HP chế gây bệnh 2.2.3 chế gây bệnh - Có khả di chuyển nhanh, thâm nhập sát niêm mạc dày - Nhờ enzyme urease, nên môi trường axit xung quanh vi khuẩn trung hịa - Trong q trình sinh