KHOA HỌC CÔNG NGHỆ N«ng nghiÖp vµ ph¸t triÓn n«ng th«n KỲ 2 TH¸NG 11/2020 3 TUYỂN CHỌN TỔ HỢP CÁC VI SINH VẬT ĐỐI KHÁNG NẤM BỆNH, DIỆT TUYẾN TRÙNG HẠI CÀ PHÊ Nguyễn Thị Hồng Minh1, Đào Thị Thu Hằng1,[.]
KHOA HỌC CÔNG NGHỆ TUYỂN CHỌN TỔ HỢP CÁC VI SINH VẬT ĐỐI KHÁNG NẤM BỆNH, DIỆT TUYẾN TRÙNG HẠI CÀ PHÊ Nguyễn Thị Hồng Minh1, Đào Thị Thu Hằng1, Nguyễn Đức Thành1, Nguyễn Thế Quyết1, Đào Hữu Hiền2, Hồ Hạnh2, Trần Ngọc Khánh3, Nguyễn Thu Hà4, Vũ Thúy Nga5, Phạm Văn Toản6 TĨM TẮT Nhằm kiểm sốt nấm bệnh, tuyến trùng hại cà phê, tập trung nghiên cứu tuyển chọn để xác định tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng hại cà phê Kết tuyển chọn chủng vi sinh vật đối kháng nấm bệnh 02 chủng vi sinh vật diệt tuyến trùng, xác định tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, tiêu diệt tuyến trùng có hiệu kiểm sốt nấm bệnh, diệt tuyến trùng cao chủng đơn lẻ có ảnh hưởng tốt đến sinh trưởng phát triển cà phê Mật độ vi sinh vật tuyển chọn điều kiện tổ hợp không khác biệt so với điều kiện đơn chủng Các chủng nấm ký hiệu TQHT01 Pae định danh Chaetomium cochliodes TQHT01 Purpureocillium lilacinum Pae thuộc nhóm vi sinh vật an tồn sinh học cấp độ Từ khóa: Cà phê, nấm, tuyến trùng, Bacillus velezensis, Streptomyces enissocaesilis, Chaetomium cochliodes, Purpureocillium lilacinum, Arthrobotrys oligospora, tổ hợp vi sinh vật MỞ ĐẦU Trong năm qua, xuất cà phê Việt Nam trì tốc độ tăng trưởng khá, đạt 8,2 %/năm với kim ngạch bình quân 3,13 tỷ USD/năm giai đoạn 2011-2018, chiếm 15% tổng kim ngạch xuất nông sản nước Theo Tổng cục Thống kê, năm 2019 xuất cà phê Việt Nam đạt 1,61 triệu tấn, trị giá 2,785 tỷ USD, giảm 13,9% lượng giảm 21,2% giá trị so với năm 2018 Bên cạnh nguyên nhân giá cà phê xuất giảm, thời tiết, khí hậu bất thuận gia tăng bệnh hại cà phê yếu tố gây ảnh hưởng tiêu cực đến phát triển cà phê Việt Nam năm qua Tác nhân liên quan đến bệnh vàng lá, thối rễ cà phê tuyến trùng Theo Lê Đức Khánh (2015), Pratylenchus coffeae Meloidogyne incognita 02 loài tuyến trùng gây hại quan trọng cà phê tỉnh Tây Nguyên Ngoài tuyến trùng, Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Rhizoctonia solani, Rhizoctonia bataticola xác định lồi nấm hại rễ cà phê, F oxysporum gây hại nặng rễ cọc rễ tơ Điều tra khảo sát Viện Di truyền Nông nghiệp Viện Khoa học Kỹ thuật Nông Lâm nghiệp Tây Nguyên Viện Bảo vệ thực vật Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa Viện Môi trường Nông nghiệp Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam thực địa Nguyễn Văn Tuất (2017) xác định P coffeae với nấm Fusarium thường song song hại rễ cà phê với tỷ lệ vườn bị vàng thối rễ phải nhổ bỏ tái canh Tây Nguyên chiếm 18,9%, số vườn bị bệnh nặng (tỷ lệ bệnh >20%) chiếm tới 75% số vườn cà phê < 20 năm tuổi Kiểm soát sinh học dịch hại trồng việc sử dụng có chủ đích sinh vật sống để ngăn chặn hoạt động quần thể tác nhân gây bệnh thực vật (Pal Gardener, 2006) Nhiều vi sinh vật đối kháng tuyển chọn, sử dụng cho sản xuất chế phẩm sinh học kiểm soát nấm bệnh hại rễ trồng gồm Trichoderma, Chaetomium, Bacillus, Streptomyces, (Ramírez-Delgado et al., 2018; Singh et al., 2014; Nguyễn Văn Thiệp cộng tác viên, 2016; Mardanova et al., 2017; Bubici, 2018) Sử dụng nấm vòng để bẫy tuyến trùng đánh giá tác nhân tiềm kiểm soát tuyến trùng hại thực vật (Niu Zhang, (2011), Singh et al., 2012, Zhang Hyde, 2014; Bakr et.all, 2014; Nguyễn Viết Hiệp Nguyễn Thu Hà, 2014; Nguyen Viet Hiep et al., 2019) Theo Pau et al (2012); Azam et al (2013), Ahmad et al (2019) Paecilomyces lilacinus lồi nấm ký sinh tuyến trùng có tiềm ứng dụng kiểm soát tuyến trùng hại rễ trồng Một số chế phẩm sinh học đăng ký danh mục thuốc bảo vệ thực vật sử dụng Việt Nam (Thông tư số 10/2019/TT-BNNPTNT ngày 20/9/2019 Bộ trưởng Bộ Nơng nghiệp N«ng nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ PTNT) Trong tổng số 563 hoạt chất - nguyên liệu với 1191 tên thương phẩm cấp phép lưu hành, có 16 hoạt chất - nguyên liệu với 20 tên thương mại thuốc bảo vệ thực vật có thành phần hữu hiệu vi sinh vật sống, lồi nấm Trichoderma, Streptomyces, Bacillus, Metarhizium, Paecilomyces Chaetomium sử dụng cho cà phê Theo Ezziyyani et al (2007), Siddiqui Akhtar (2009), Chemeltorit et al (2016) chế phẩm sinh học tổng hợp kiểm soát dịch hại vùng rễ trồng gồm nhiều lồi vi sinh vật khác có tác dụng tốt so với loài riêng lẻ Mục tiêu nghiên cứu tuyển chọn xác định chủng giống vi sinh vật đối kháng nấm bệnh diệt tuyến trùng phục vụ sản xuất chế phẩm sinh học tổng hợp phòng trừ hiệu nấm tuyến trùng hại cà phê chứa vi sinh vật đối kháng nấm bệnh diệt tuyến trùng VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Các chủng nấm bệnh Fusarium, Rhizoctoinia, tuyến trùng Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchulus sử dụng nghiên cứu cung cấp từ nguồn gen vi sinh vật Viện Bảo vệ thực vật Đối tượng trồng sử dụng giống cà phê Tr4 Viện Khoa học Kỹ thuật Nông Lâm nghiệp Tây Nguyên cung cấp Các chủng vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng cung cấp từ quỹ gen Viện Môi trường Nông nghiệp, Bảo vệ Thực vật, Thổ nhưỡng Nơng hóa Di truyền Nơng nghiệp Hoạt tính đối kháng vi sinh vật đánh giá kỹ thuật nuôi cấy đồng thời vi sinh vật đối kháng nấm hại (F oxysporum, R solani ) đĩa petri, khả ức chế nấm bệnh vi sinh vật đối kháng đánh giá thông qua đường kính vịng ức chế, cấy nấm bệnh điểm hộp petri cấy vi sinh vật đối kháng đối xứng hộp petri so với đối chứng không cấy vi sinh vật đối kháng Hoạt lực kiểm soát tuyến trùng vi sinh vật phịng thí nghiệm đánh giá theo phương pháp Tsay et al (2006) tính tỷ lệ phần trăm số tuyến trùng bị chết 200 tuyến trùng thử nghiệm Thí nghiệm nhà lưới thực đất vô trùng lây nhiễm nhân tạo nấm bệnh F oxysporum, vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng với mật độ 104 CFU/g đất tuyến trùng, mật độ 200 con/100 g đất Xác định mật độ vi sinh vật đất theo Rupela et al (2003) vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, theo Burgess cộng (2009) nấm bệnh tuyến trùng Số liệu nghiên cứu xử lý theo chương trình thống kê xử lý số liệu IRRISTAT Các chủng giống vi sinh vật tuyển chọn định danh kỹ thuật sinh học phân tử Tách chiết DNA, giải mã trình tự gen 16S RNA riboxom so sánh theo phần mềm BLAST NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ BLAST/) Tên vi sinh vật xác định với xác xuất tương đồng cao với tên vi sinh vật công bố ngân hàng gen Cấp độ an toàn sinh học vi sinh vật tuyển chọn so sánh xác định theo TRBA 460, 466 Cộng hòa Liên bang Đức (2015, 2016) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tuyển chọn chủng giống vi sinh vật đối kháng nấm bệnh Kết đánh giá khả đối kháng số vi sinh vật từ quỹ gen vi sinh vật Viện Môi trường Nông nghiệp, Viện Bảo vệ Thực vật, Viện Di truyền Nơng nghiệp xác định chủng nấm TQHT01 có khả kiểm soát 78,79% nấm F oxysporum 82,44% nấm R solani (Bảng 1), vi khuẩn P9.1 xạ khuẩn 2P có khả kiểm sốt 71,11% 73,6% nấm F oxysporum (Bảng 2), phù hợp với công bố Nguyễn Văn Thiệp cộng tác viên (2016), Mardanova et al (2017), Bubici (2018) khả đối kháng nấm bệnh vùng rễ trồng Chaetomium, Streptomyces Bacillus Bảng Khả kiểm soát nấm F oxysporum, R solani hại cà phê nấm TQHT01 phịng thí nghiệm Chỉ tiêu theo dõi R oxysporum R oxysporum + R solani R solani + TQHT1 TQHT1 Đường kính tản nấm sau ngày 9,0 1,91 9,0 1,58 thí nghiệm (cm) Hiệu lực kiểm sốt sau ngày thớ 78,79 82,44 nghim (%) Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ Bảng Khả kiểm sốt nấm F oxysporum, R solani hại cà phê vi khuẩn P9.1, xạ khuẩn 2P phịng thí nghiệm Đường kính tản nấm (cm) sau ni cấy Cơng thức thí nghiệm ngày 2,5 2,2 1,9 5,7 0,1 6,5 3,7 3,7 4,3 0,2 Nấm bệnh F oxysporum P9.1+ F oxysporum 2P + F oxysporum CV% LSD 0,05 Nấm bệnh R solani P9.1+ R solani 2P + R solani CV% LSD 0,05 ngày 5,6 2,6 2,1 4,4 0,1 9,0 4,1 3,4 8,1 0,1 ngày 9,0 2,6 2,4 9,0 0,3 9,0 4,3 3,6 9,4 0,2 Hiệu lực kiểm soát sau ngày (%) 71,11 73,6 52,2 60,1 Bảng Khả kiểm soát F oxysporum hại cà phê vi sinh vật đối kháng thí nghiệm nhà lưới Trong điều kiện nhà lưới, mật độ nấm F oxysporum đất trồng cà phê giảm từ 7,8 x 104 Mật độ nấm bệnh (CFU/g đất) sau thời gian lây nhiễm nhân Cơng thức thí nghiệm tạo tháng tháng tháng 4 Nấm bệnh F oxysporum 3,6x10 4,8x10 7,8x104 CFU/g đất xuống 1,8 x 102 CFU/g đất sau tháng sử dụng tổ hợp vi sinh vật đối kháng, tương đương với mức giảm mật độ 97,7% (Bảng 3) tỷ lệ cà phê bị vàng, rụng công thức nhiễm tổ hợp vi sinh vật đối kháng thấp có ý nghĩa so với công thức nhiễm chủng đơn lẻ (Bảng 4) F oxysporum + TQHT01 3,6x103 5,4x102 2,6x102 F oxysporum + 2P F oxysporum + P9.1 7,8x103 2,3x103 5,7x102 3 F oxysporum + 2,8x103 6,7x10 3,1x10 4,1x102 6,2x10 1,8x102 TQHT01+ 2P + P9.1 Bảng Hiệu lực kiểm soát bệnh vàng, rụng tổ hợp vi sinh vật đối kháng điều kiện nhà lưới Công thức thí nghiệm (%) cà phê bị vàng, rụng sau thí nghiệm tháng (%) cà phê bị vàng, rụng sau 3 tháng tháng so với ĐC+ ĐC + (F oxysporum) 27,54 35,26 - F oxysporum + 2P 17,56 18,26 48,21 F oxysporum + P9.1 16,82 18,05 48,81 15,27 16,54 53,09 14,27 15,42 56,27 2,06 10,20 - CV (%) 6,4 4,4 - LSD 0,05 0,63 0,77 - F oxysporum + TQHT01 F oxysporum + P9.1+ 2P+ TQHT01 ĐC- (không nhiễm vi sinh vật) 3.2 Tuyển chọn chủng giống vi sinh vật kiểm soát tuyến trùng Kết đánh giá khả kiểm soát tuyến trùng hại cà phê số chủng nấm bẫy, ký sinh tuyến trùng tổng hợp bảng xác định, chủng nấm ký hiệu NVC 7.4 Pae có khả diệt 69,61 75,63% tuyến trùng M incognita, 61,26 - 69,24% tuyến trùng R reniformis 70,58 - 72,37% tuyến trùng P coffeae điều kiện phịng thí nghiệm Thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo tuyến trùng P coffeae tổ hợp nấm NVC 7.4, Pae xác định sau tháng tổ hợp nấm có khả kiểm sốt 83% mật độ tuyến trùng đất trồng cà phê 3.3 Khả tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng Kết thử nghiệm nuôi cấy đồng thời vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng đĩa petri xác định chủng nấm, vi khuẩn, xạ khuẩn khơng có biểu đối kháng điểm tiếp xúc Kết đánh giá khả tương tác vi sinh vật tuyển chọn, xác định mật độ vi sinh vật khơng có sai khác đáng kể điều kiện đơn lẻ tổ hợp (Bảng 6) Hiệu lực kiểm soát bệnh vàng, rụng cà phê tổ hợp vi sinh vật cao tổ hợp gồm vi sinh vật đối kháng nấm diệt tuyến N«ng nghiƯp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ trùng (Bảng 7) Cơng thức nhiễm tổ hợp vi sinh vật tuyển chọn có tỷ lệ cà phê bị vàng, rụng 41,54% công thức nhiễm nấm bệnh 39,67% công thức nhiễm tuyến trùng Ezziyyani et al (2007), Siddiqui Akhtar (2009), Chemeltorit Mutaqin (2016) cho biết hiệu kiểm soát nấm bệnh, tuyến trùng nâng cao, vi sinh vật sử dụng có tác động tương hỗ Bảng Khả diệt tuyến trùng nấm Pae NVC 7.4 Thí nghiệm phịng Tỷ lệ tuyến trùng chết (%) Công thức xử lý Nhiễm Pae Nhiễm NVC 7.4 Công thức xử lý P coffeae P coffeae + Pae P coffeae + NVC 7.4 P coffeae + NVC 7.4 + Pae M incognita R reniformis P coffeae 75,63 69,24 70,58 69,61 61,26 Thí nghiệm nhà lưới Số lượng tuyến trùng/100 g đất sau xử lý tháng tháng tháng 275 310 365 160 138 107 132 108 86 117 85 62 72,37 Hiệu lực sau tháng (%) 70,7 76,4 83,0 Bảng Mật độ chủng vi sinh vật chất mang điều kiện đơn lẻ tổ hợp Thời gian bảo quản Chế phẩm đơn chủng Chế phẩm tổng hợp Mật độ Chaetomium (CFU/g) Chế phẩm đơn chủng Chế phẩm tổng hợp Mật độ Arthrobotrys (CFU/g) Ban đầu 4,5 x 108 4,4 x 108 4,7 x 108 4,6 x 108 tháng 3,7 x 108 3,8 x 108 4,2 x 108 4,1 x 108 tháng 2,8 x 108 2,7 x 108 3,1 x 108 3,0 x 108 tháng 1,3 x 108 1,3 x 108 1,4 x 108 1,4 x 108 Mật độ Paecilomyces (CFU/g) Mật độ Streptomyces (CFU/g) Ban đầu 4,6 x 108 4,5 x 108 4,9 x 108 4,8 x 108 tháng 3,8 x 108 3,7 x 108 4,1 x 108 4,0 x 108 tháng 2,8 x 108 2,7 x 108 3,1 x 108 3,0 x 108 tháng 1,3 x 108 1,2 x 108 1,6 x 108 1,7 x 108 Mật độ Bacillus (CFU/g) Ban đầu 5,1 x 108 5,1 x 108 tháng 4,7 x 108 4,6 x 108 tháng 3,7 x 108 3,8 x 108 2,5 x 108 Kết đánh giá ảnh hưởng tổ hợp vi đối chứng không nhiễm vi sinh vật 11,16% (Bảng 8) sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng đến Siddiqui Akhtar (2009), Akhtar Panwar (2013), sinh trưởng, phát triển cà phê điều kiện Keswani et al (2019) cho biết vi sinh vật đối kháng nhà lưới cho thấy cà phê nhiễm tổ hợp vi nấm bệnh, diệt tuyến trùng có khả tổng hợp sinh vật tuyển chọn có chiều cao cao so với hoạt chất kính thích sinh trưởng thực vật, qua góp cà phê nhiễm tổ hợp vi sinh vật đối kháng phần tăng cường sinh trưởng thực vật tháng 2,6 x 108 tổ hợp vi sinh vật diệt tuyến trùng cao cà phê N«ng nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ Bảng Khả kiểm soát bệnh vàng, rụng cà phê tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng % cà phê bị bệnh sau thí nghiệm Cơng thức thí nghiệm tháng tháng tháng F oxysporum 27,54 35,26 43,57 P coffeae 28,67 34,74 44,06 F oxysporum + P coffeae + Pae + NVC 7.4 18,36 19,36 20,35 F oxysporum + P coffeae + TQHT01+ 2P + P9.1 13,62 14,02 14,36 F oxysporum + P coffeae + 2P + P9.1+ TQHT01+ Pae + NVC 13,15 13,86 14,05 7.4 CV (%) 6,4 4,4 2,9 LSD 0,05 0,63 0,77 0,75 Bảng Ảnh hưởng tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng đến sinh trưởng phát triển cà phê điều kiện nhà lưới Chiều cao cà phê (cm) sau thí nghiệm Cơng thức thí nghiệm tháng tháng tháng F oxysporum 24,90 31,13 36,43 P coffeae 25,60 32,03 37,46 F oxysporum + P coffeae + Pae + NVC 7.4 26,80 33,76 39,97 F oxysporum + P coffeae + TQHT01+ 2P + P9.1 31,56 37,07 42,60 F oxysporum + P coffeae +2P + P9.1+ TQHT01+ 32,27 38,16 43,83 Pae + NVC 7.4 Đối chứng không lây nhiễm 29,96 34,73 39,43 CV (%) 2,6 1,6 1,6 LSD 0,05 1,27 0,97 1,13 thuộc nhóm vi sinh vật an tồn sinh học cấp độ 3.4 Định danh chủng vi sinh theo TRBA 460, 466 Cộng hòa Liên bang Đức Bằng kỹ thuật sinh học phân tử, xác định (Hình 1-2) Các chủng vi sinh vật đối kháng nấm trình tự gen rARN vùng ITS 28S (đoạn D1D2) bệnh 2P, P9 chủng nấm bẫy tuyến trùng NVC 7.4 chủng TQHT01 tương đồng 99,9% với Chaetomium Hà Minh Thanh cộng (2020) định danh cochliodes, trình tự gen rARN vùng ITS chủng Bacillus velezensis P9.1, Streptomyces enissocaesilis Pae tương đồng 99,8% với loài Purpureocillium 2P Arthrobotrys oligospora NVC7.4 lilacinum (tên gọi khác: Paecilomyces lilacinus) Hình Cây phát sinh dựa trình tự gen ARNr chủng TQHT01 với lồi có quan hệ họ hàng gần Hình Cây phát sinh dựa trình tự gen ARNr chủng Pae với lồi có quan hệ họ hàng gần Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ KẾT LUẬN Các chủng vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm đối kháng nấm bệnh ký hiệu P9.1 2P, TQHT01 tạo vòng đối kháng kiểm soát > 70% nấm Fusarium oxysporum > 50% nấm Rhizoctonia solani điều kiện phịng thí nghiệm Trong điều kiện nhà lưới chủng vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm đối kháng riêng lẻ có tác dụng hạn chế mật độ nấm bệnh đất trồng cà phê thể hiệu lực kiểm soát nấm bệnh, tỷ lệ cà phê bị vàng, rụng tốt tổ hợp Chủng nấm ký hiệu NVC 7.4 Pae có khả diệt 69,61 - 75,63% Meloidogyne incognita, 61,26 - 69,24% Rotylenchulus reniformis 70,58 - 72,37% Pratylenchus coffeae điều kiện phịng thí nghiệm Tổ hợp chủng nấm NVC 7.4 Pae kiểm soát 83% mật độ tuyến trùng Pratylenchus coffeae đất trồng cà phê nhà lưới Tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng có tác dụng kiểm soát mật độ tuyến trùng, nấm bệnh hại cà phê cao tổ hợp vi sinh vật đối kháng tổ hợp nấm diệt tuyến trùng có tác dụng tích cực đến sinh trưởng, phát triển cà phê điều kiện nhà lưới Chủng vi sinh vật đối kháng ký hiệu TQHT01 vi sinh vật diệt tuyến trùng ký hiệu Pae định danh là, Chaetomium cochliodes TQHT01 Purpureocillium lilacinum Pae thuộc nhóm vi sinh vật an toàn sinh học cấp độ TÀI LIỆU THAM KHẢO Ahmad RZ., Sidi BB., Endrawati D., Ekawasti F and Chaerani (2019) Paecilomyces lilacinus and P.variotii as a predator of nematode and trematode eggs IOP Conf Series: Earth and Environmental Science 299(2019) 012056, doi:10.1088/17551315/299/1/012056 Akhtar MS., Panwar J (2013) Efficacy of rootassociated fungi and the growth of Pisum sativum (Arkil) and reproduction of root-knot nematode Meloidogyne incognita J Basic Microbiol 53:318–326 Azam T., Akhtar MS., Hisamuddin A (2013) Histological interactions of Paecilomyces lilacinus with root-knot nematodeMeloidogyne incognitaand their effect on the growth of tomato Adv Sci Eng 5:335–341 Bakr RA., Mahdy ME and Mousa EM (2014) Biological control of root knot nematode meloidogyne incognita by Arthrobotrys oligospora Egyptian Journal of Crop Protection, 9(1), 1-11 Bubici G (2018) Streptomyces spp as biocontrol agents against Fusarium species CAB Reviews 13, No 050 Burgess LW., Knight TE., Tesoriero L Phan Thúy Hiền (2009) Cẩm nang chẩn đoán bệnh Việt Nam Trung tâm Nghiên cứu Nông nghiệp Quốc tế Australia – ACIAR, 2009 Chemeltorit P P and Mutaqin KH (2016) Combining Trichoderma hamatum THSW13 and Pseudomonas aeruginosa BJ10-86: A synergistic chili pepper seed treatment for Phytophthora capsici infested soil European Journal of Plant Pathology, 2016, 1-10 https://doi.org/10.1007/s10658-016-09885 Ezziyyani M., Requena ME., Egea-Gilabert C., Candela ME (2007) Biological control of phytophthora root rot of pepper using Trichoderma harzianum and Streptomyces rochei in Combination J Phytopathol junho de 155(6):342–349 Nguyễn Viết Hiệp, Nguyễn Thu Hà (2014) Nghiên cứu khả bẫy tuyến trùng số chủng nấm vòng phân lập từ đất trồng cà phê hồ tiêu Việt Nam Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam, số 4(50), tr 90 - 96 10 Nguyen Viet Hiep, Nguyen Thu Ha, Tran Thi Thanh Thuy and Pham Van Toan (2019) Isolation and selection of Arthrobotrys nematophagous fungi to control the nematodes on coffee and black pepper plants in Vietnam Archives of Phytopathology and Plant Protection Volume 52 Numbers 7–8 2019, 825843 11 Keswani C., Singh HB., Hermosa R., G.Estrada C., Caradus J., He YW., Aichour SM., Glare TR., Borriss R., Vinale F and Sansinenea E (2019) Antimicrobial secondary metabolites from agriculturally important fungi as next biocontrol agents Applied Microbiology and Biotechnology volume 103, 9287–9303 Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 11/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ 12 Lê Đức Khánh, 2015 Nghiên cứu tuyến trùng hại hồ tiêu, cà phê giải pháp khoa học công nghệ phòng trừ hiệu vùng sản xuất trọng điểm Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Bộ 13 Mardanova AM., Hadieva GF., Lutfullin MT., Khilyas IV., Minnullina LF., Gilyazeva, AG., Bogomolnaya LM and Sharipova MR (2017) Bacillus subtilis strains with antifungal activity against the phytopathogenic Fungi Agricultural Sciences, 8, 1-20 http://dx.doi.org/10.4236/as.2017.81001 14 Niu XM and Zhang KQ (2011) Arthrobotrys oligospora: a model organism for understanding the interaction between fungi and nematodes, Mycology, 2:2, 59-78, DOI: 10.1080/21501203.2011.562559 15 Pal KK and Gardener BMcS (2006) Biological Control of Plant Pathogens The Plant Health Instructor DOI: 10.1094/PHI-A-2006-1117-02 P1-25 16 Pau CG., Leong CTS., Wong SK., Eng L., Jiwan M., Kundat FR., Aziz ZFBA., Ahmed OH., Majid NM (2012) Isolation of indigenous strains of Paecilomyces lilacinus with antagonistic activity against Meloidogyne incognita Int J Agricul Biology 14:197–203 17 Ramírez-Delgado E., Luna-Ruíz1 JJ., Moreno-Rico O., Quiroz-Velásquesz JDC and Hernández-Mendoza JL (2018) Effect of Trichoderma on Growth and Sporangia Production of Phytophthora capsici Journal of Agricultural Science, Vol 10, No 6, 8-15 18 Rupela OP., Gopalakrishnan S., Krajewski M., Sriveni M (2003) A novel method for identification and enummeration of microorganisms with potential for suppressing fungal plant pathogens Biol.Fertil.Soils 39, 131-134 19 Siddiqui ZA and Akhtar MS (2009) Effects of antagonistic fungi and plant growth-promoting rhizobacteria on growth of tomato and reproduction of the root-knot nematode, Meloidogyne incognita Australasian Plant Pathology, 2009, 38, 22–28 20 Singh UB., Sahu A., Sahu N., Singh RK., Renu S., Singh DP., Manna MC., Sarma BK., Singh HB., Singh KP (2012) Arthrobotrys oligospora mediated biological control of diseases of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) caused by Meloidogyne incognita and Rhizoctonia solani https://doi.org/10.1111/jam.12009 21 Singh HB., Singh A and Sarma BK (2014) Trichoderma viride 2% WP (Strain No BHU-2953) formulation suppresses tomato wilt caused by Fusarium oxysporum f sp lycopersici and chilli damping-off caused by Pythium aphanidermatum effectively under different agroclimatic conditions International Journal of Agriculture, Environment and Biotechnology 7, 313–320 22 Nguyễn Văn Thiệp, Nguyễn Hữu La, Phạm Huy Quang, Nguyễn Thị Thu Hà (2016) Nghiên cứu khả ức chế nấm Chaetomium globosum số loại nấm gây bệnh chè Kỷ yếu hội thảo Quốc gia Khoa học trồng lần thứ Nhà xuất Nông nghiệp, 1003-1007 23 Hà Minh Thanh, Trần Ngọc Khánh, Vũ Phương Bình, Nguyễn Thu Hà, Hồ Hạnh, Lương Hữu Thành, Phạm Hồng Hiển, Phạm Văn Toản (2020) Nghiên cứu sản xuất ứng dụng chế phẩm sinh học tổng hợp kiểm soát nấm bệnh, tuyến trùng hại hồ tiêu Nông nghiệp PTNT kỳ 1, tháng 3/2020; 13-21 24 Tsay TT., Chen PC., Wu WS (2006) A New Method for Isolating and Selecting Agents with High Antagonistic Ability Against Plant Parasitic Nematodes Plant Pathology Bulletin 15: 9-16 25 Nguyễn Văn Tuất (2017) Nghiên cứu nguyên nhân gây chết cà phê tái canh đề xuất giải pháp khắc phục Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Bộ 26 Zhang KQ and Hyde KD (2014) NematodeTrapping Fungi Fungal Diversity Research Series Volume 23 Springer Dordrecht Heidelberg New York London 27 TRBA 460 "Einstufung von Pilzen in Risikogruppen" Ausgabe Juli 2016 http://www.gdaportal.de/VorschriftenRegeln/VorschriftenRegeln.ht ml 28 TRBA 466 "Einstufung von Prokaryonten (Bacteria und Archaea) in Risikogruppen", Ausgabe N«ng nghiƯp phát triển nông thôn - K - THáNG 11/2020 ... độ tuyến trùng Pratylenchus coffeae đất trồng cà phê nhà lưới Tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng có tác dụng kiểm soát mật độ tuyến trùng, nấm bệnh hại cà phê cao tổ hợp vi. .. tuyến trùng P coffeae tổ hợp nấm NVC 7.4, Pae xác định sau tháng tổ hợp nấm có khả kiểm sốt 83% mật độ tuyến trùng đất trồng cà phê 3.3 Khả tổ hợp vi sinh vật đối kháng nấm bệnh, diệt tuyến trùng. .. diệt tuyến trùng phục vụ sản xuất chế phẩm sinh học tổng hợp phòng trừ hiệu nấm tuyến trùng hại cà phê chứa vi sinh vật đối kháng nấm bệnh diệt tuyến trùng VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Các chủng nấm