KHOA HỌC CÔNG NGHỆ N«ng nghiÖp vµ ph¸t triÓn n«ng th«n KỲ 2 TH¸NG 12/2020 52 ẢNH HƯỞNG MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG HỆ SỢI CỦA CHỦNG NẤM Phellinus PHE67 Nguyễn Văn Giang1*, Tạ Thị Huệ1, Trần Đô[.]
KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ẢNH HƯỞNG MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG HỆ SỢI CỦA CHỦNG NẤM Phellinus PHE67 Nguyễn Văn Giang1*, Tạ Thị Huệ1, Trần Đông Anh1, Nguyễn Duy Trình2, Lê Thanh Un2, Trần Thu Hà2 TĨM TẮT Chi nấm Phellinus spp chi nấm có giá trị dược liệu cao sử dụng nhiều nghiên cứu y khoa Ở Việt Nam, nghiên cứu nấm Phellinus dừng lại phân lập, tuyển chọn Các nghiên cứu tối ưu hóa điều kiện ni cấy cịn sơ khai Nghiên cứu tiến hành nhằm đánh giá ảnh hưởng yếu tố dinh dưỡng đến sinh trưởng hệ sợi chủng nấm Phellinus PHE67 thu thập Hà Nội Mơi trường ni cấy khiết thích hợp cho hệ sợi nấm PHE67 PGA (200 g/l khoai tây, 20 g/l glucose, 15 g/l agar) Trong số nguồn dinh dưỡng cacbon nghiên cứu, fructose phù hợp cho sinh trưởng hệ sợi nấm PHE67, tốc độ phát triển hệ sợi đạt 2,96 mm/ngày Sinh trưởng Phellinus PHE67 nguồn dinh dưỡng lactose Dinh dưỡng NH4NO cho hiệu kích thích tăng trưởng hệ sợi nấm PHE67 cao với tốc độ 3,52 mm/ngày, hệ sợi nấm dày MgSO xác định nguồn dinh dưỡng khoáng tối ưu cho chủng PHE67 Từ khóa: Nguồn cacbon, nguồn nitơ, Phellinus spp ĐẶT VẤN ĐỀ Chi nấm Phellinus thuộc họ Hymenochaetaceae biết đến với khoảng 220 loài khác [10, 19] Lee cs (1996) cho biết nhiều loài nấm thuộc chi Phellinus có tác dụng y học [8] Trong tổng số 70 loài nấm thuộc chi Phellinus mơ tả Trung Quốc, có 26 lồi có đặc tính chữa bệnh [10] Gần 20 chức y học nấm Phellinus mô tả, bao gồm giảm sốc nhiễm trùng, kháng khuẩn, chống viêm, chống oxy hóa, kháng u, tăng cường hệ miễn dịch….[2, 15] Trong số lồi thuộc chi Phellinus P linteus, P baumii P gilvus xem loài phổ biến có hoạt tính kháng u cao [3] Ba loài ni trồng thành cơng Hàn Quốc có khả phát triển thành ngành công nghiệp thực phẩm chức tương lai gần [19] Việt Nam nước có đa dạng tài nguyên nấm lớn nói chung chi nấm Phellinus nói riêng [17] Ngơ Anh (2006) xác định 20 loài nấm thuộc chi Phellinus Vườn Quốc gia Bạch Mã, tỉnh Thừa Thiên - Huế 01 loài nấm thuộc chi Phellinus khu hệ nấm lớn thuộc huyện Xuyên Mộc, tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu [11, 12] Phạm Thị Hà Giang Học viện Nông nghiệp Việt Nam Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nấm, Viện Di truyền Nông nghiệp Email: nvgiang@vnua.edu.vn 52 Alexandrova (2012) ghi nhận loài Phellinus gilvus (Fr.) Pat Vườn Quốc gia Chư Yang Sin, Đắk Lắk có giá trị dược liệu cao [14] PHE67 chủng nấm Phellinus thu thập Cơng viên Bách Thảo, Hà Nội Vì vậy, nghiên cứu xác định điều kiện ni cấy thích hợp cho chủng nấm PHE67 điều cần thiết Kết nghiên cứu góp phần hồn thiện quy trình nhân giống, ni trồng nấm Phellinus Việt Nam Nghiên cứu tập trung lựa chọn nguồn dinh dưỡng phù hợp cho sinh trưởng, phát triển chủng nấm Phellinus PHE67 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Chủng nấm Phellinus PHE67 thu thập từ Công viên Bách Thảo, Hà Nội lưu giữ Trung tâm Đào tạo, Nghiên cứu Phát triển nấm ăn nấm dược liệu, Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam nhiệt độ 4oC môi trường PDA 2.2 Phương pháp nghiên cứu Lựa chọn môi trường nuôi cấy Ba loại mơi trường dinh dưỡng nhóm nghiên cứu chuẩn bị để tìm mơi trường phù hợp cho sinh trưởng hệ sợi chủng giống PHE67 gồm PGA (Potato glucose agar) pha chế từ dịch chiết 200 g khoai tây, 20 g glucose, 15 g agar 1.000 ml nước cất); SPGA (Sweet potato glucose agar) chuẩn bị từ dịch chiết 200 g khoai lang, 20 g Nông nghiệp phát triển nông thôn - KỲ - TH¸NG 12/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ glucose, 15 g agar 1.000 ml nước cất; YGA (Yam glucose agar) pha dịch chiết từ 200 g khoai sọ với 20 g glucose, 15 g agar 1.000 ml nước cất Môi trường hấp khử trùng 121oC thời gian 20 phút chia vào đĩa pettri vô trùng (Ø = 9,0 cm) Mỗi đĩa petri chứa 20 ml môi trường cấy 01 miếng giống gốc PHE67 có kích thước 0,5 x 0,5 cm vị trí trung tâm đĩa Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng cacbon Chủng nấm Phellinus PHE67 nhân nuôi đĩa petri chứa môi trường PA (dịch chiết từ 200 g/l khoai tây, 15 g/l agar) có bổ sung nguồn cacbon khác (glucose, D-fructose, maltose, sucrose, xylose, α-lactose, dextrin) với nồng độ 20 g/l Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng nitơ Chủng nấm Phellinus PHE67 nuôi môi trường PFA (dịch chiết từ 200 g/l khoai tây, 20 g/l fructose, 15 g/l agar) bổ sung thêm nguồn nitơ khác amoni clorua (NH4Cl), amoni sunfat ((NH4)2SO4 ), amoni nitrat (NH4NO3), casein, pepton, natri nitrat (NaNO3), kali nitrat (KNO3) Mỗi nguồn nitơ sử dụng với hàm lượng g/l Ảnh hưởng dinh dưỡng khoáng Chủng nấm Phellinus PHE67 cấy môi trường khoai tây, fructose, amoni nitrat (NH4NO3) có bổ sung loại muối khoáng sau: kali sunfat (K2 SO4), kẽm sunfat (ZnSO4), magie sunfat (MgSO4), mangan sunfat (MnSO4) với hàm lượng 0,5 g/l Điều kiện nuôi sợi nấm Chủng nấm Phellinus PHE67 thí nghiệm ni cấy điều kiện nhiệt độ 30oC, độ ẩm khơng khí 65-70%, khơng cần ánh sáng thời gian 12 ngày [19] Các tiêu theo dõi Theo dõi khả sinh trưởng hệ sợi chủng nấm Phellinus PHE67 thông qua thơng số sau: Đường kính hệ sợi (mm): Là đường kính phần tản nấm sinh trưởng bề mặt mơi trường thạch sau 12 ngày nuôi Thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa (ngày): thời gian tính từ cấy sợi nấm Phellinus PHE67 vào đĩa môi trường tới hệ sợi nấm ăn lan kín bề mặt đĩa Mật độ hệ sợi: Quan sát hệ sợi nấm đánh giá mật độ hệ sợi theo phương pháp Jo cs (2006): C: compact/sợi dày, bám chặt; SC: somewhat/sợi phân bố không đều; T: thin/sợi nấm mỏng [19] Tốc độ sinh trưởng hệ sợi chủng nấm PHE67 đánh giá theo phương pháp Nguyễn Thị Bích Thùy cs (2016), đơn vị tính mm/ngày [13] Phương pháp xử lý số liệu Kết nghiên cứu xử lý thống kê phần mềm Excel 2010 phân tích Anova phần mềm IRRISTAT 5.0 mức ý nghĩa P < 0,05 cho thí nghiệm nhân tố Các giá trị trung bình mang chữ khác cột hay hàng khác có ý nghĩa thống kê KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy Dinh dưỡng nhân tố hàng đầu ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển nấm Khi ni mơi trường dinh dưỡng thích hợp, sợi nấm phát triển nhanh, bám vào môi trường nuôi cấy tăng cường khả cạnh tranh dinh dưỡng với lồi vi sinh vật khác Sử dụng mơi trường SPGA, PGA YGA để nuôi cấy chủng nấm Phellinus PHE67 với mục đích tìm mơi trường nhân giống cấp I thích hợp với chủng nấm Kết thí nghiệm trình bày bảng Bảng Hệ sợi nấm PHE67 sinh trưởng môi trường khác Môi ĐKHS TĐMS TKĐ MĐS trường (mm) (mm/ngày) (ngày) SPGA PGA 40,04a 2,46b 40,67a 2,70a 17,56ab SC 16,00b C YGA 38,49a 2,22b LSD0,05 6,8 0,33 19,44a 2,42 CV% 5,9 7,6 6,1 T Ghi chú: ĐKHS: Đường kính hệ sợi (mm) TĐMS: Tốc độ sinh trưởng hệ sợi (mm/ngày) TKĐ: Thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa (ngày) MĐS: Mật độ hệ sợi C: - compact/sợi dày, bám chặt SCsomewhat compact/sợi phân bố không T thin/sợi nấm mỏng Các chữ cột ứng với giá trị sai khác giá trị trung bình mức ý nghĩa P < 0,05 Đường kính hệ sợi nấm PHE67 mơi trường SPGA, PGA, YGA sau 12 ngày nuôi 40,04; 40,67 38,49 mm Tốc độ mọc sợi chủng PHE67 có khác mơi trường dinh dưỡng nghiên cứu Sợi nấm PHE67 mọc nhanh N«ng nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 12/2020 53 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ mơi trường PGA (2,7 mm/ngày), chậm dần môi trường SPGA (2,46 mm/ngày) chậm môi trường YGA (2,22 mm/ngày) Tương tự, môi trường PGA, thời gian hệ sợi chủng giống PHE67 nấm mọc kín đĩa mơi trường ngắn (16,0 ngày) Thời gian hệ sợi nấm PHE67 mọc kín đĩa thạch mơi trường SPGA YGA 17,56 ngày 19,44 ngày Mật độ hệ sợi chủng PHE67 đánh giá dày môi trường PGA Môi trường SPGA YGA hệ sợi PHE67 mỏng phân bố khơng (Hình 2) Tốc độ sinh trưởng thời gian sinh trưởng hệ sợi có khác biệt thống kê mức ý nghĩa P < 0,05 Dinh dưỡng yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến phát triển hệ sợi nấm Ảnh hưởng thành phần dinh dưỡng nấm Phellinus mô tả rộng rãi [16] Hur cs (2008) nhân nuôi chủng nấm Phellinus công thức môi trường dinh dưỡng khác nhận thấy môi trường dịch chiết khoai tây bổ sung đường glucose thích hợp cho chủng nấm Phellinus sinh trưởng, phát triển hệ sợi [5] Ngoài ra, Gorka cs (2017) so sánh phát triển hệ sợi số loài Phellinus (P igniarius, P pini, P pomaceus, P robustus P torulosus) loại môi trường PDA (potato dextrose agar), MEA (chiết xuất mạch nha, agar), WA (lúa mì, agar) SWA (mùn cưa, lúa mì, agar) kết luận hệ sợi chủng nấm Phellinus sinh trưởng tốt mơi trường PDA [9] Hình Tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm Phellinus PHE67 mơi trường ni cấy Hình Hình thái hệ sợi nấm PHE67 môi trường sau 12 ngày nuôi nhiệt độ 30oC 54 3.2 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng cacbon Nguồn cacbon đóng vai trị quan trọng trình sinh trưởng sản xuất hợp chất có hoạt tính sinh học nấm đảm (Basidiomycetes) [6] Dinh dưỡng cacbon ảnh hưởng đến sinh trưởng hệ sợi mật độ hệ sợi nấm Phellinus spp [19] Kết thí nghiệm cho thấy mơi trường bổ sung glucose, fructose, sucrose, maltose hệ sợi nấm Phellinus PHE67 có đường kính lớn nhất, đạt từ 42,84 đến 44,96 mm Đường kính hệ sợi nấm PHE67 thấp nhân nuôi môi trường chứa đường dextrin (37,79 mm) (Bảng 2) Tốc độ mọc sợi nấm Phellinus PHE67 ghi nhận từ 2,08 đến 2,96 mm/ngày Sợi nấm mọc nhanh môi trường bổ sung fructose maltose (2,96 2,9 mm/ngày), chậm mơi trường có sử dụng lactose (2,08 mm/ngày) Kết sai khác có ý nghĩa thống kê P < 0,05 Bảng Sinh trưởng hệ sợi nấm PHE67 nguồn cacbon khác Nguồn C ĐKHS TĐMS TKĐ MĐS (20 g/l) (mm) (mm/ngày) (ngày) Glucose 42,84a 2,62bc 16,44bc C Fructose 44,96a Succrose Maltose a 43,37 43,57a 2,31 2,90a 18,67 14,89ef T SC Dextrin 37,79b 2,45c 17,78bc SC b b de T a T Xylose 38,89 a 2,96a cd 2,67 d 14,56f b 16,11 Lactose 44,5 2,08 20,67 LSD0,05 CV% 2,61 3,5 0,18 3,9 1,37 4,5 C Ghi chú: ĐKHS: Đường kính hệ sợi (mm) TĐMS: Tốc độ sinh trưởng hệ sợi (mm/ngày) TKĐ: Thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa (ngày) MĐS: Mật độ hệ sợi C: - compact/sợi dày, bám chặt) SCsomewhat compact/sợi phân bố không đều) T thin/sợi nấm mỏng Các chữ cột ứng với giá trị sai khác giá trị trung bình mức ý nghĩa P < 0,05 Thời gian hệ sợi mọc kín bề mặt đĩa mơi trường bổ sung fructose maltose ngắn nhất, 14,56 14,89 ngày có tốc độ mọc sợi nhanh Trên môi trường chứa lactose, thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa dài (20,67 ngày) Mật độ hệ sợi nấm Phellinus PHE67 nuôi môi trường sử dụng fructose, glucose dày, hệ sợi bỏm Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 12/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ chặt (C) Ngược lại hệ sợi nấm Phellinus PHE67 môi trường sucorse, xylose, lactose có mật độ mỏng (T) (Hình 3) Như vậy, kết luận, loại đường đơn nguồn cacbon thích hợp để ni sợi nấm Phellinus PHE67 Theo Xu cs (2017), chủng nấm Phellinus spp có khả sử dụng tốt nhiều nguồn cacbon khác đồng thời glucose nguồn cacbon có khả thúc đẩy trình tạo sinh khối hệ sợi nấm Phellinus cao [1] Li cs (2008) kết luận glucose, glactose, manose, arabinose fructose sử dụng nhân giống nấm Phellinus spp [20] Nghiên cứu tối ưu hóa nguồn dinh dưỡng cacbon cho chủng nấm P linteus ATCC 26710 Hur (2008) ghi nhận sucrose nguồn oligosaccharide hỗ trợ tăng trưởng hệ sợi nấm Phellinus ATCC 26710, tiếp đến mannose, glucose fructose [4] Hình Hình thái hệ sợi nấm PHE67 môi trường chứa nguồn cacbon khác sau 12 ngày nuôi nhiệt độ 30oC (56,74 mm) ni mơi trường có sử 3.3 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng nitơ dụng NH4Cl Khi nuôi môi trường NH4NO3 Bảng Hệ sợi chủng nấm PHE67 sinh trưởng (NH4)2SO4, đường kính hệ sợi PHE67 mơi trường chứa nguồn nitơ khác 54,22 53,83 mm/ngày Trên môi trường sử dụng Nguồn N ĐKHS TKĐ TĐMS nguồn nitơ KNO3 đường kính tản nấm Phellinus MĐS (2,0 g/l) (mm) (mm/ngày) (ngày) PHE67 nhỏ (36,62 mm/ngày) Tốc độ sinh NH4Cl 3,63a 11,89e SC trưởng hệ sợi chủng Phellinus PHE67 đạt từ 2,27 NH4NO3 54,22b 3,52a 12,22d C mm/ngày đến 3,63 mm/ngày Tốc độ mọc sợi nhanh (NH4)2SO4 53,83bc 3,48b 12,44d T môi trường có bổ sung g/l NH4Cl (3,63 NaNO3 38,46e 2,51d 17,11a SC mm/ngày) NH4NO3 (3,52 mm/ngày), sợi nấm KNO3 36,62f 2,48d 17,33a SC PH67 nuôi môi trường sử dụng dinh dưỡng Pepton 45,8d 2,27e 15,89b T peptone mọc chậm (2,27 mm/ngày) Casein 52,89c 3,12c 13,78c C Thời gian hệ sợi nấm PHE67 mọc kín bề mặt đĩa LSD0,05 1,16 0,12 0,63 petri ngắn nuôi mơi trường có bổ CV% 1,3 2,2 2,4 sung NH Cl NH NO (11,89 12,22 ngày) Ghi chú: ĐKHS: Đường kính hệ sợi (mm) TĐMS: Tốc độ sinh trưởng hệ sợi (mm/ngày) TKĐ: Thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa (ngày) MĐS: Mật độ hệ sợi C:- compact/sợi dày, bám chặt) SC: somewhat compact/sợi phân bố không đều) T: thin/sợi nấm mỏng Các chữ cột ứng với giá trị sai khác giá trị trung bình mức ý nghĩa P < 0,05 Dinh dưỡng nitơ có ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp hợp chất nấm nói chung nấm Phellinus nói riêng Nitơ liên quan trực tiếp đến sinh tổng hợp protein, axit amin, khơng có protein mọc nấm khơng diễn [18] Kết thí nghiệm (Bảng 3) cho thấy, đường kính hệ sợi nấm PHE67 sau 12 ngày nuôi sợi đạt giá trị cực đại Ngược lại, môi trường bổ sung NaNO KNO3 thời gian hệ sợi mọc kín đĩa mơi trường dài (17,11 17,33 ngày) Hình cho thấy hệ sợi nấm PHE67 mơi trường có bổ sung NH4Cl, (NH4)2SO4 pepton mỏng, thưa Trên mơi trường có sử dụng NH4NO3, mật độ hệ sợi nấm PHE67 dày, sợi nấm bám chặt vào môi trường phân bố Kết nghiên cứu tương đối phù hợp với kết luận Hur (2008) ông cho nguồn dinh dưỡng nitơ ảnh hưởng đến tốc độ phát triển hệ sợi nấm P linteus phát triển tốt môi trường bổ sung kali nitrat, natri nitrat amoni nitrat (NH4NO3) Đặc biệt khơng có sai khác khả sinh Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 12/2020 55 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ trưởng hệ sợi nấm P linteus có bổ sung natri nitrit (NaNO2) [4] Hình Hình thái hệ sợi chủng nấm PHE67 môi trường chứa nguồn nitơ khác sau 12 ngày nuôi nhiệt độ 30oC 3.4 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng khoáng Các nguyên tố khống đóng vai trị quan trọng việc hoạt hóa enzyme tổng hợp vitamin chất giúp cho phát triển hệ sợi thể nấm diễn bình thường [18] Kết đánh giá đường kính hệ sợi, tốc độ thời gian sinh trưởng hệ sợi chủng nấm Phellinus PHE67 mơi trường bổ sung loại muối khống gồm kali sunfat (K2 SO4), kẽm sunfat (ZnSO4), magie sunfat (MgSO4), mangan sunfat (MnSO4 ) trình bày bảng Bảng Sinh trưởng hệ sợi chủng nấm PHE67 nguồn dinh dưỡng khoáng Nguồn ĐKHS TKĐ TĐMS khoáng MĐS (mm) (mm/ngày) (ngày) (0,5 g/l) K2SO4 38,44b 2,51b 17,33a T b b a ZnSO4 38,12 2,46 17,56 T a a b MgSO4 44,97 2,94 14,67 C MnSO4 35,7c 2,59b 16,67a SC LSD0,05 2,62 0,20 1,39 CV% 3,3 3,8 4,2 Ghi chú: ĐKHS: Đường kính hệ sợi (mm) TĐMS: Tốc độ sinh trưởng hệ sợi (mm/ngày) TKĐ: Thời gian hệ sợi sinh trưởng kín đĩa (ngày) MĐS: Mật độ hệ sợi C: -compact/sợi dày, bám chặt) SC: somewhat compact/sợi phân bố không đều) T: thin/sợi nấm mỏng Các chữ cột ứng với giá trị sai khác giá trị trung bình mức ý nghĩa P < 0,05 Số liệu bảng cho thấy, chủng nấm Phellinus PHE67 nuôi môi trường có sử dụng MgSO4, đường kính tản nấm đạt giá trị lớn (44,97mm) Đường kính hệ sợi nhỏ cơng thức có sử dụng nguồn khống MnSO4 (35,7mm) 56 Hình Hình thái hệ sợi nấm Phellinus PHE67 nguồn dinh dưỡng khoáng sau 12 ngày nuôi nhiệt độ 30oC Tốc độ mọc sợi nấm Phellinus PHE67 ni mơi trường có sử dụng MgSO4 nhanh nhất, đạt 2,94 mm/ngày, hệ sợi nấm dày, bám chặt (Hình 5) Ngược lại, tốc độ mọc sợi PHE67 chậm môi trường sử dụng ZnSO4 (2,46 mm/ngày), hệ sợi nấm mỏng Do thời gian hệ sợi nấm PHE67 mọc kín đĩa mơi trường bổ sung MgSO4 ngắn (14,67 ngày) dài môi trường bổ sung K2SO4 ZnSO4, 17,33 17,56 ngày Kết nghiên cứu sai khác có ý nghĩa thống kê mức ý nghĩa P < 0,05 phù hợp với công bố Jo cs (2006) Chi cs (1996) [7, 19] KẾT LUẬN Chủng nấm Phellinus PHE67 sinh trưởng, phát triển tốt mơi trường PGA, SPGA YGA Trên môi trường PGA, tốc độ mọc sợi nấm, thời gian hệ sợi nấm Phellinus PHE67 mọc kín bề mặt đĩa vượt trội, hệ sợi nấm dày, chắc, sợi bám chặt vào mơi trường ni Các nguồn đường đơn thích hợp dùng để nhân ni sợi nấm Phellinus PHE67, fructose nguồn dinh dưỡng phù hợp cho tăng trưởng hệ sợi nấm PHE67, tốc độ phát triển hệ sợi đạt 2,96 mm/ngày Đường lactose không tạo sai khác sinh trưởng hệ sợi nấm PHE67 Sử dụng NH4NO3 với hàm lượng g/l bổ sung thêm 0,5 g/l muối MgSO4 hệ sợi chủng nấm PHE67 sinh trưởng tốt so với nguồn dinh dưỡng khác sử dụng thí nghiệm ny Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - TH¸NG 12/2020 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ TÀI LIỆU THAM KHẢO - Huế Tạp chí Nghiên cứu Phát triển, 54(1), tr.46- C Xu, J Yu, S Zhao, S Wu, P He, X Jia, Y Liu and D Mao (2017) Effect of carbon source on 52 production, characterization and bioactivity of exopolysaccharide produced by Phellinus vaninii Ljup An Acad Bras Cienc, 89(3), pp.2033-2041 Nghiên cứu khu hệ nấm lớn huyện Sơn Mộc, tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 4, tr.37-43 C J Lin, H M Lien, H J Lin, C L Huang, M C Kao, Y A Chen, C K Wang, H Y Chang, Y K Chang, H S Wu and C H Lai (2016) Modulation of T cell response by Phellinus linteus J.Biosci Bioeng, 121, pp.84-88 13 Nguyễn Thị Bích Thùy, Ngơ Xn Nghiễn, Nguyễn Thế Thắng, Trần Đơng Anh, Nguyễn Xuân Cảnh, Nguyễn Văn Giang, Trần Thị Đào (2016) 12 Ngơ Anh Trần Thị Bích Thùy (2011) H Chen, T Ting Tian, H Miao and Y Y Zhao (2016) Traditional uses, fermentation, Đánh giá sinh trưởng suất nấm sò vua (Pleurotus eryngii) (DC.:Fr.) Quel) ngun liệu ni trồng khác Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, 14, tr.816-823 phytochemistry and pharmacology of Phellinus linteus: A review Fitoterapia, 113, pp.6-26 14 Phạm Thị Hà Giang Alexandrova, A V (2012) Kết nghiên cứu thành phần loài khu hệ H Hur (2008) Cultural characteristics and nấm lớn Vườn Quốc gia Chư Yang Sin, tỉnh Đắk Lắk Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 5, tr.58-64 logmediated cultivation of the medicinal mushroom, Phellinus linteus Mycobiology, 36(2), pp.81-87 H Hur, A Imtiaj, M W Lee, T S Lee (2008) Suitable conditions for mycelial growth of Phellinus spp Mycobiology, 36(3), pp.152- 156 H Vahidi, F Mojab and N Taghavi (2006) Effects of Carbon Sources on Growth and Production of Antifungal Agents by Gymnopilus Spectabilis Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 3, pp.219-222 J H Chi, T M Ha, Y H Kim and Y D Ryo (1996) Studies on the main factors affecting the myceliall growth of Phellinus linteus Kor J Mycol, 24, pp.214-222 J H Lee, S M Cho, H M Kim, N D Hong and I D Yoo (1996) Immunostimulating activity of 15 S J Wu, C C Liaw, S Z Pan, H C aHsingChiaYang and L TeikNg (2013) Phellinus linteus polysaccharides and their immunomodulatory properties in human monocytic cells Journal of Functional Foods, 2(5), pp.679-688 16 S W Kim, H J Hwang, J P Park, Y J Cho, C H Song and J W Yun (2002) Mycelial growth and exo‐biopolymer production by submerged culture of various edible mushrooms under different media Letters in Applied Microbiology, 34(1) pp.5661 17 Trịnh Tam Kiệt (2011) Nấm lớn Việt Nam Tập I Nhà xuất Khoa học Tự nhiên Công nghệ Hà Nội polysaccharides from mycelia of Phellinus linteus grown under different culture conditions J Microbiol, 6, pp.52-55 18 Trịnh Tam Kiệt (2012) "Nấm lớn Việt Nam", tập II, Nhà xuất Khoa học Tự nhiên Công nghệ Hà Nội K Gorka, A P Stachowiak, A Stala, D Miran and S Sokol (2017) Comparision of the mycelial 19 W S Jo, Y H Rew, S G Choi, G S Seo, J M Sung, J Y Uhm (2006) The culture conditions growth of some Phellinus spp Isolates on different agar media Fragmenta naturae, 50, pp.18-27 for the mycelial growth of Mycobiology, 34(4), pp.200-205 10 M Soković, J Glamočlija, A Ćirić, J Petrović and D Stojković (2018) Mushrooms as Sources of Therapeutic Foods Therapeutic Foods, pp.141-178 20 X Li, L Jiao, X Zhang, W Tian, S Chen and L Zhang (2008) Structure of polysaccharides from 11 Ngô Anh (2006) Sự đa dạng khu hệ nấm lớn Vườn Quốc gia Bạch Mã, tỉnh Thừa Thiên Phellinus spp mycelium and culture medium of Phellinus nigricans using submerged fermentation Science in China Series C: Life Sciences, 51(6), pp.513-519 Nông nghiệp phát triển nông thôn - K - THáNG 12/2020 57 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ EFFECTS OF CULTURE MEDIUM ON THE MYCELIAL GROWTH OF Phellinus PHE67 STRAIN Nguyen Van Giang, Ta Thi Hue, Tran Dong Anh, Nguyen Duy Trinh, Le Thanh Uyen, Tran Thu Ha Summary Phellinus spp is the genus which has a great medicinal value and was applied in massive medicinal research In Vietnam, researches on Phellinus have just been only in the step of isolation and selection of new strains from nature, while the fundamental researches in optimizing the cultural conditions, time of incubation, and effects of the mineral on mycelial growth have still lacked This study aims to investigate the influence of nutritional factors on mycelium growth of mushroom Phellinus PHE67 which was collected in Bach Thao park of Hanoi The results show that the suitable medium for growth of PHE67’s mycelia is PGA containing extracts of 200 g/l of potatoes, 20 g/l glucose and 15 g/l of agar Among the carbon sources, fructose was seemed to be the most appropriate for growing of PHE67’s mycelia, the growth was recorded at 2.96 mm/day while the slowest growth of PHE67’s mycelia was observed in the case of lactose source NH4NO3 is demonstrated to stimulate the highest growth of PHE67, at 3.52 mm/day On this media the mycelia are thick, compact and evenly growing in all directions Furthermore, the most optimal mineral source for PHE67 is MgSO4 Keywords: Carbon source, nitrogen source, Phellinus spp Người phản biện: PGS.TS Lê Như Kiểu Ngày nhận bài: 25/8/2020 Ngày thông qua phản biện: 25/9/2020 Ngày duyệt đăng: 02/10/2020 58 N«ng nghiƯp phát triển nông thôn - K - THáNG 12/2020 ... luận hệ sợi chủng nấm Phellinus sinh trưởng tốt môi trường PDA [9] Hình Tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm Phellinus PHE67 mơi trường ni cấy Hình Hình thái hệ sợi nấm PHE67 mơi trường sau 12 ngày nuôi. .. 3.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy Dinh dưỡng nhân tố hàng đầu ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển nấm Khi nuôi môi trường dinh dưỡng thích hợp, sợi nấm phát triển nhanh, bám vào môi trường nuôi. .. Chủng nấm Phellinus PHE67 sinh trưởng, phát triển tốt môi trường PGA, SPGA YGA Trên môi trường PGA, tốc độ mọc sợi nấm, thời gian hệ sợi nấm Phellinus PHE67 mọc kín bề mặt đĩa vượt trội, hệ sợi