Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng lá và mốc sương ở miền Bắc Việt Nam.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM TỐNG VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ TRONG CHỌN TẠO GIỐNG CÀ CHUA KHÁNG BỆNH XOĂN VÀNG LÁ VÀ BỆNH MỐC SƯƠNG Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NƠNG NGHIỆP Chun ngành: Cơng nghệ sinh học Mã số: 9420201 HÀ NỘI - 2022 Cơng trình cơng bố tại: VIỆN KHOA HỌC NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Phan Hữu Tôn Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Viện: Họp tại: Vào hồi phút, ngày tháng năm 2022 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Thư viện Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam MỞ ĐẦU Tính c cấp thiết đề tài nghiên cứu Cà chua rau ăn có tên khoa học Lycopercicum esculentum Mill, trồng hầu giới, có Việt Nam Ở Việt Nam, cà chua trồng tiêu thụ phổ biến nước Số liệu thống kê năm 2020, diện tích trồng cà chua nước năm 2019 23,719 nghìn sản lượng đạt 673.194,5 4 Sản xuất cà chua đem lại hiệu kinh tế cao, 01 cà chua cho thu nhập từ 120-200 triệu đồng/ha/vụ, vụ Xuân hè Thu đông cà chua cho hiệu cao gấp 3-5 lần so với vụ 18, 22 Tuy nhiên, suất chất lượng cà chua Việt Nam bấp bênh chưa cao, nguyên nhân loại bệnh hại gây hại, bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương hai bệnh gây hại nghiêm trọng Bệnh xoăn vàng cà chua có tên tiếng Anh Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV) số loài virus thuộc chi Begomovirus, họ Geminiviridae gây ra, phát lần Israel vào năm 1939 112 Bệnh làm thiệt hại nghiêm trọng đến suất, chất lượng cà chua Năng suất thiệt hại trung bình từ 55 - 90%, chí 100% bị nhiễm nặng bệnh 14, 38 TYLCV lan truyền nhờ loài bọ phấn Bemisia tabaci, lồi trùng có sức sinh sản nhanh mạnh, khó phịng trừ Hiện chưa có loại thuốc phịng trừ hữu hiệu bệnh này, bị nhiễm bệnh nhổ bỏ Bệnh mốc sương cà chua nấm Phytophthora infestants gây ra, bệnh hủy diệt hầu hết vùng trồng cà chua toàn giới Việc kiểm soát bệnh mốc sương chủ yếu dựa vào việc sử dụng thuốc diệt nấm biện pháp canh tác Tuy nhiên, hiệu biện pháp không cao biến đổi chủng P infestants, phát sinh chủng mới, khả kháng thuốc diệt nấm mầm bệnh tăng lên Để phịng trừ hai bệnh việc sử dụng giống cà chua kháng biện pháp hiệu nhất, vừa tiết kiệm chi phí vừa an tồn với người, vật nuôi môi trường 22, 37, 99 Hiện giống cà chua có khả kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Việt Nam khiêm tốn, giống trồng phần lớn bị nhiễm nặng hai bệnh Chính chọn tạo giống kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương nhu cầu cấp thiết Muốn chọn tạo giống cà chua kháng bệnh thành công việc phải xác định số gen kháng gen kháng hữu hiệu Việt Nam Đến nay, nhà khoa học phát gen kháng bệnh xoăn vàng cà chua đặt tên Ty1, Ty2, Ty3, Ty4, ty5 Ty6 Trong Ty1, Ty2, Ty3 gen sử dụng nhiều chương trình chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng 125 Bên cạnh gen kháng bệnh mốc sương Ph1, Ph2, Ph3, Ph4 Ph5 phát 143 Các thị phân tử DNA liên kết với gen phát triển Vì dựa PCR để phát chọn lọc gen kháng sử dụng rộng rãi chương trình chọn giống cà chua, giúp cho việc chọn lọc gen kháng trở nên thuận lợi xác Trong chương trình hợp tác trao đổi nguồn gen, Học viện Nông nghiệp Việt Nam thu thập 230 mẫu giống cà chua nước Để khai thác nguồn gen phục vụ công tác chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng mốc sương việc phải đánh giá nguồn gen, ứng dụng thị phân tử để phát mẫu giống chứa gen kháng bệnh, lai sử dụng thị phân tử để chọn lọc Với mục tiêu chọn giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương tiến hành nghiên cứu “Nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương miền Bắc Việt Nam” Mục tiêu đề tài Bổ sung nguồn vật liệu quý số tính trạng như: suất, chất lượng quả, gen kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương, phục vụ cho chương trình chọn tạo giống cà chua kháng hai bệnh nói Chọn tạo số dòng, giống cà chua ưu tú, suất cao (trên 50 tấn/ ha), mang gen kháng bệnh xoăn vàng gen kháng bệnh mốc sương thị phân tử DNA, đáp ứng nhu cầu giống cà chua kháng hai bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học Bổ sung liệu khoa học nghiên cứu chọn tạo giống cà suất cao, chất lượng tốt, kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương đáp ứng yêu cầu thực tiễn sản xuất Kết đề tài mở khả ứng dụng rộng rãi thị phân tử chọn tạo giống cà chua theo tính trạng mục tiêu, đặc biệt chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Luận án công trình nghiên cứu khoa học khép kín: Từ nghiên cứu, đánh giá nguồn vật liệu khởi đầu, phát gen kháng bệnh xoăn vàng gen kháng bệnh mốc sương thị phân tử, lây nhiễm nhân tạo phát gen kháng bệnh hữu hiệu, lai ứng dụng thị phân tử DNA chọn lọc gen kháng, đánh giá chọn dòng ưu tú, khảo nghiệm bản, khảo nghiệm sinh thái để tuyển chọn dòng/ giống ưu tú, từ phát triển sản xuất 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Tạo nguồn vật liệu đa dạng phong phú phục vụ hiệu chương trình chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Chọn tạo dịng/giống cà chua mới, hai dịng TP130 TP135 có khả kháng bệnh xoăn vàng lá, dịng P7 có khả kháng bệnh mốc sương, dịng cho suất ổn định, từ phát triển sản xuất, đáp ứng nhu cầu thực tiễn Đối tượng phạm vi nghiên cứu 4.1 Đối tượng nghiên cứu 230 mẫu giống cà chua thu thập nước lưu giữ Trung tâm Bảo tồn Phát triển Nguồn gen Cây trồng, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Các thị phân tử liên kết với gen kháng virut xoăn vàng Ty1, Ty2, Ty3, Ty4 ty5, gen kháng bệnh mốc sương Ph2, Ph3 công bố tạp chí ngồi nước 4.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu Các thí nghiệm thực khu thí nghiệm Trung tâm Bảo tồn Phát triển Nguồn gen Cây trồng phịng thí nghiệm Khoa Cơng nghệ sinh học - Học viện nơng nghiệp Việt Nam Các thí nghiệm khảo nghiệm tiến hành Sóc Sơn - Hà Nội, Mộc Châu - Sơn La Vĩnh Bảo - Hải Phòng Thời gian thực đề tài: Từ tháng 4/2016 - 4/2022 Những đóng góp luận án Góp phần xây dựng sở liệu đặc điểm nơng sinh học tập đồn 230 mẫu giống cà chua, phục vụ công tác bảo tồn khai thác nguồn gen cà chua Việt Nam, đặc biệt nguồn gen mang gen kháng bệnh xoăn vàng gen kháng bệnh mốc sương Xác định gen kháng tốt với bệnh xoăn vàng Việt Nam gen Ty1 Ty3, gen kháng tốt với bệnh mốc sương Ph2 Ph3 thông qua lây nhiễm bệnh nhân tạo Đây coi sở khoa học cho chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương miền Bắc Việt Nam Chọn tạo thành cơng dịng cà chua thuần, hai dịng cà chua TP130 mang gen Ty1 TP135 mang gen Ty3 kháng tốt với bệnh xoăn vàng Dòng P7 mang gen kháng Ph3 kháng tốt với bệnh mốc sương Tất dòng cho suất ổn định, đạt 50 tấn/ điều kiện vụ Xuân hè 60 tấn/ha điều kiện vụ Đơng, có chất lượng tốt, kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương, đáp ứng nhu cầu thực tiễn sản xuất miền Bắc Việt Nam Bố cục luận án: Luận án gồm 136 trang (không kể tài liệu tham khảo phần phụ lục): Mở đầu (5 trang), Chương 1: Tổng quan tài liệu nghiên cứu (41 trang); (Chương 2: Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu (14 trang), Chương 3: Kết nghiên cứu thảo luận 75 trang), Kết luận đề nghị (2 trang), Tài liệu tham khảo sử dụng 27 tài liệu Tiếng Việt, 117 tài liệu Tiếng Anh Luận án có 43 bảng, 47 hình 02 phụ lục, 03 cơng trình cơng bố CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU Luận án tham khảo tóm lược tài liệu Tiếng Việt Tiếng Anh, với nội dung liên quan bao gồm: Tình hình sản xuấtt cà chua giới Việt Nam; Những nghiên cứu bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương; Nghiên cứu gen kháng bệnh xoăn vàng lá, bệnh mốc sương thị phân tử ADN liên kết; Chọn tạo giống ứng dụng MAS; Một số nghiên cứu thành tựu chọn tạo giống kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Việt Nam 1.1 Tình hình sản xuất cà chua giới Việt Nam 1.1.1 Tình hình sản xuất cà chua giới Theo số liệu Tổ chức Nông lương Liên hiệp quốc, diện tích cà chua năm 2016-2020 dao động xung quanh 4.900.000 ha, suất giao khoảng 36,0 tấn/ Về sản lượng tăng dần, từ 177.382.876 (năm 2016) lên 186.821.216 (năm 2020) 50 Với sản lượng trên, bình quân tiêu thụ đầu người khoảng 22 kg quả/người/năm Cũng năm từ năm 2016 đến năm 2020, châu Á có diện tích sản lượng cà chua lớn giới giới chiếm khoảng 61,3% tổng sản lượng, tiếp đến châu Mỹ chiểm 13,9% tổng sản lượng Châu Âu khoảng 12,9 %, châu Phi khoảng 11,6 %, nơi khác 0,2 % 1.1.2 Tình hình sản xuất cà chua Việt Nam Ở Việt Nam, theo số liệu thống kê Cục trồng trọt, Bộ nông nghiệp Phát triển Nông thôn, năm từ 2015 đến 2019 diện tích, trồng cà chua dao động khoảng 23-25 nghìn ha, suất dao động xung quanh 25-28 tấn/ Cà chua phần lớn sản xuất tỉnh thuộc đồng sông Hồng khu vực Lâm Đồng Diện tích sản lượng cà chua sản xuất hai khu vực chiếm 62% sản lượng cà chua nước 1.2 Những nghiên cứu bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương 1.2.1 Những nghiên cứu bệnh xoăn vàng 1.2.1.1 Nguyên nhân Bệnh xoăn vàng cà chua (Tomato Yellow Leaf Curl Disease TYLCD) begomovirus gây hại ghi nhận lần giới từ năm 1959 Israel Tại Việt Nam, bệnh xoăn vàng phát lần vào năm 1970 1.2.1.2 Triệu chứng Khi bị bệnh cong xuống vào phía bên trong, giai đoạn sau khơng có hình dạng, nhỏ hẹp, biến vàng từ mép chóp lan vào gân; cong lên phía thành hình thuyền; non biến vàng mạnh, giịn nhỏ hẹp Triệu chứng biến vàng đặc biệt rõ non Cuống xoắn vặn Cây lùn còi cọc, mọc nhiều cành nhánh nhỏ, đốt thân ngắn Cây nhiễm sớm thường không hoa bị rụng 13, 45, 102 1.2.1.3 Tác nhân gây bệnh Tác nhân gây bệnh xoăn vàng cà chua xem phức hợp gồm nhiều begomovirus khác gọi chung virus xoăn vàng cà chua Tomato yellow leaf curl virus 122 Begomovirus chi lớn họ geminivirus Các begomovirus có gen ADN sợi vịng đơn có kích thước 2.6-2.8 kb Chúng có gen kép gồm phân tử DNA gọi DNA-A DNAB có gen đơn tương đương DNA-A 72 vector lan truyền bệnh bọ phấn trắng 1.2.1.4 Vecto lan truyền bệnh Tất begomovirus lan truyền tự nhiên nhờ bọ phấn (Bemisia tabaci) theo kiểu bền vững tuần hồn 45 Hiện nay, có ba loài bọ phấn coi vector virus thực vật bao gồm: Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, T abutilonia Trong đó, B tabaci quan trọng nhất, chứng minh vector 100 bệnh virus (chủ yếu virus thuộc chi begomovirus) khác vùng nhiệt đới cận nhiệt đới 87, 116 1.2.1.5 Cơ chế lan truyền virut TYLCV xâm nhập vào trồng qua bọ phấn trắng (Bemisia tabaci) Khi nhiễm vào tế bào thực vật, phần DNA vòng đơn virus xâm nhập vào nhân tế bào chủ sử dụng nguyên liệu vật chủ để chép tổng hợp protein vỏ, hoàn thiện cấu trúc virus 1.2.2 Những nghiên cứu bệnh mốc sương 1.2.2.1 Nguồn gốc tác hại bệnh mốc sương Bệnh mốc sương cà chua nấm Phytophthora infestans gây ra, bệnh gây hại hủy diệt hầu hết vùng cà chua toàn giới Ở Việt Nam, từ nhiều năm bệnh thường xuyên gây hại vùng trồng cà chua, thiệt hại trung bình 63,7 %, có lên tới 100% không thu hoạch 14 1.2.2.2 Triệu chứng Triệu trứng bệnh mốc sương đa dạng, tuỳ thuộc vào cấp bệnh điều kiện môi trường, cà chua chớm bị bệnh lúc đầu điểm nhỏ (2- 10 mm) khơng có giới hạn rõ rệt, mặt chỗ có vết bệnh có lớp trắng xốp sương muối, xuất rõ trời ẩm ướt, đám cành bào tử phân sinh nấm gây bệnh, vết bệnh tiếp tục lan rộng bề mặt lá, cuống lá, thân cành, 1.2.2.3 Phân loại đặc điểm sinh học nấm bệnh mốc sương P infestans thuộc lớp nấm trứng (Oomycetes), nấm sương mai (Peronosporales), lớp nấm thuộc giới khác với giới nấm thật (true fungi) Một số tác giả cho lớp nấm trứng thuộc giới Protoctista số khác cho thuộc giới Chromista 7 Đặc điểm chủ yếu P infestans sợi nấm đơn bào phát triển, loại nấm có chu kỳ phát triển hoàn toàn, điều kiện nhiệt đới thấy xuất giai đoạn sinh sản vơ tính chúng buộc phải ký sinh ký chủ 1.2.2.4 Phân bố địa lý phạm vi ký chủ bệnh mốc sương P infestans loài nấm dị tản có hai dạng (matin type) A1 A2 tuỳ theo vùng sinh thái vùng trồng cà chua khoai tây giới Trên thực tế nấm gây bệnh coi lồi ký sinh chun tính có phổ ký chủ hẹp, song P infestans ghi nhận gây bệnh nhiều loài 1.3 Nghiên cứu gen kháng bệnh xoăn vàng lá, bệnh mốc sương thị phân tử ADN liên kết 1.3.1 Những nghiên cứu gen kháng bệnh xoăn vàng thị Cho đến nhà khoa học phát gen kháng bệnh xoăn cà chua đặt tên Ty1, Ty2, Ty3, Ty4, ty5 Ty6 Trong Ty1, Ty2, Ty3 gen sử dụng nhiều chương trình chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng 125 Gen Ty1 gen trội, Zamir cộng xác định nằm nhiễm sắc thể số 139 Sau nhà khoa học xác định thị phân tử liên kết với gen Castro & cs (2007) xác định thị JB-1 liên kết với gen Ty1 Tuy nhiên, thị JB1 thị trội nên không phân biệt kiểu gen kháng đồng dị hợp tử Tiếp theo, Han & cs (20120 phát triển thành công thị đồng trội CAPS TG97 cho phép phân biệt kiểu gen kháng đồng dị hợp tử Gen Ty2 Hanson & cs (2006) xác định nằm nhánh dài nhiễm sắc thể 11, nằm thị TG36 TG26 61 Sau Garcia & cs (2007) phát triển thị SCAR T0302 liên kết với gen Sử dụng cặp mồi T0302F/TY2R1, cho phép phát được gen Ty2 ba trạng thái khác nhau, đồng hợp tử trội, dị hợp tử đồng hợp tử lặn 53 Gen Ty3 gen trội nằm nhiễm sắc thể số 73, 78 Theo Ji & cs (2007) gen Ty3 định vị vùng có chứa locus FER (25 cM, dòng vector BAC56B23, AY678298) Các thị phân tử ADN liên kết với gen Ty3 T0507, C2_At3g11210 P6-25 diện gen Ty3 Tuy nhiên thị T0507 C2_At3g11210 trội, P6-25 đồng trội Ngoài số lượng lớn thi liên kết Ty3 tìm ra, cụ thể P169C, TG118, TG590 FERG8, khơng phân biệt dịng 11 mẫn cảm Điện di: Điện di sản phẩm PCR gel agarose 1,5% dung dịch đệm TAE 1X bổ sung thêm chất nhuộm redsafe Quan sát hình ảnh điện buồng UV 2.4.3 Phương pháp xác định gen kháng bệnh xoăn vàng mốc sương hữu hiệu lây nhiễm nhân tạo 2.4.3.1 Lây nhiễm nhân tạo bệnh virut xoăn vàng Chồi bệnh dài 4-5cm tách từ cà chua có triệu chứng bệnh điển hình thu từ Kiến Thuỵ - Hải Phòng, Văn Giang - Hưng Yên Việt Yên - Bắc Giang ghép lên giống mẫn cảm Hồng Lan 50 ngày tuổi để nhân trì nguồn bệnh Cấu trúc xâm nhiễm ToLCHnV (mã GenBank HQ162269) lây nhiễm giống Hồng lan phương pháp tiêm mặt 29 để nhân mẫu bệnh phục vụ lây nhiễm nhân tạo phương pháp ghép Các dòng đánh giá gieo nhà lưới để cách ly côn trùng, sau 30 ngày tuổi tiến hành ghép nêm với chồi bệnh, vị trí ghép phần thân phía thật đầu tiên, dòng ghép 10 cây, sau 10 ngày trồng ruộng Sau 40 ngày ghép tiến hành đánh giá mức độ nhẹ theo thang điểm từ - 83: 2.4.3.2 Lây nhiễm nhân tạo bệnh mốc sương Mẫu nấm P infestans thu thập Sóc Sơn - Hà Nội, Quỳnh Phụ - Thái Bình, Vĩnh Bảo - Hải Phịng, Tứ Kỳ - Hải Dương, Đơng Sơn Thanh Hố, Mộc Châu - Sơn La cà chua bị bệnh sương mai điển hình Nấm bệnh phân lập theo Sobkowiak Śliwka 132 Bệnh sương mai lây bệnh tách rời Sau gieo 30 35 ngày, xuất - thật Ngắt thật thứ (đã phát triển đầy đủ), bệnh ghi thẻ đánh dấu tương ứng với mẫu giống nghiên cứu, giữ giấy ẩm, mát Đặt úp cà chua lên giấy ẩm đĩa Petri, sau dùng micropipet nhỏ vào chét 30 µl dung dịch bào tử (10 105 bào tử/ml) nấm mốc sương Với lây lặp lại lần Sau lây nhiễm, hộp petry đậy kín lại, giữ tủ định ôn 17℃ Đánh giá bệnh sau ngày lây nhiễm dựa theo số bệnh 2.4.4 Phương pháp lai, chọn tạo giống 2.4.4.1 Phương pháp lai chọn lọc tạo dòng, giống cà chua Quần thể lai F1 tạo phương pháp lai đơn, dòng mẹ mẫu giống cà chua tốt đánh giá sàng lọc, dòng bố mẫu giống mang gen kháng Ty gen Ph Quần thể F1 sàng lọc thị phân tử ADN Từ quần thể F2 phương pháp chọn lọc phả hệ thị phân tử ADN sử dụng để chọn cá thể mang gen đồng hợp tử 2.4.4.2 Thí nghiệm so sánh, khảo nghiệm sinh thái Các thí nghiệm so sánh, khảo nghiệm dịng tốt bố trí theo phương pháp khối ngẫu nhiên hồn chỉnh (RCBD), lần nhắc lại, diện tích 10m2/ơ trồng 30 cây/ô Giống đối chứng giống cà chua C155 Các 12 tiêu theo dõi, đánh giá theo QCVN01-63: 2011/BNNPTNT Các dòng cà chua triển vọng khảo sát vùng sinh thái khác nhau: Hà Nội, Hải Phòng, Sơn La 2.5 Phương pháp, kỹ thuật chăm sóc Chăm sóc theo quy trình Viện lương thực vầ thực phẩm 2.6 Phương pháp xử lý số liệu thí nghiệm - Số liệu thống kê sinh học đồng ruộng xử lý chương trình Excell 2011 máy vi tính - Phân tích phương sai ANOVA, hệ số biến động Cv(%), sai khác nhỏ có ý nghĩa LSD0,05, so sánh Duncal, phần mềm IRRISTAT ver 5.0 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Đánh giá nguồn gen phục vụ chọn giống cà chua Để phục vụ công tác chọn tạo giống cà chua, khuôn khổ luận án, 230 mẫu giống cà chua đánh giá đặc điểm nông sinh học, suất yếu tố cấu thành suất, từ chọn mẫu giống tốt sử dụng làm nguồn vật liệu để lai tạo 3.1.1 Kiểu hình sinh trưởng Kết quan sát đặc điểm sinh trưởng chiều cao hoa 230 mẫu giống nghiên cứu, nhận thấy có 112 mẫu giống sinh trưởng bán hữu hạn, 49 mẫu giống sinh trưởng hữu hạn, 69 mẫu giống cịn lại thuộc kiểu sinh trưởng vơ hạn 3.1.2 Các giai đoạn sinh trưởng Theo dõi giai đoạn sinh trưởng nhận thấy: Thời gian từ trồng đến hoa có 104 mẫu giống có thời gian từ trồng đến hoa khoảng từ 26 - 30 ngày 68 mẫu giống có thời gian từ trồng đến hoa 30 ngày Thời gian từ trồng đến thu đợt có 51 mẫu giống chín sớm, 112 mẫu giống chín trung bình, 67 mẫu giống chín muộn Thời gian từ trồng đến kết thúc thu hoạch hay thu hết thương phẩm nhận thấy: Thời gian sinh trưởng dao động từ 81 đến 130 ngày Trong 52 mẫu giống có thời gian sinh trưởng ngắn ( 10 hoa/ chùm) 3.1.5 Năng suất yếu tố cấu thành suất Năng suất yếu tố định đánh giá giống tốt Có nhiều yếu tố cấu thành nên suất như: Số hoa/ chùm, số quả/ chùm, tỷ lệ đậu quả, số chùm quả/ cây, khối lượng trung bình quả, số quả/ Theo dõi số quả/ chùm cho thấy dao động từ 1,3 - 8,8 quả/chùm, có mẫu giống có nhiều quả/chùm nhất, có quả/chùm mẫu giống Is01(7,2 quả/ chùm), AVRDC 164 (7,5 quả/ chùm), Ru02 (7,8 quả/ chùm) Is13 (8,8 quả/ chùm) Nghiên cứu tỷ lệ đậu cho thấy tỷ lệ đậu dao động từ 22,41 - 94,44 % Có 89 mẫu giống cho tỷ lệ đậu thấp 50%, giống lại cho tỷ lệ đậu từ 50 - 86.4% Theo dõi số quả/ chùm dao động từ 1,5 - 15,2 chùm Các mẫu giống có số chùm quả/cây chùm hoa sau thường không đậu thời tiết lạnh, số giống có chùm hoa sau bị thối hóa, số chùm quả/cây thấp Trong tổng số 230 mẫu giống có 78 mẫu giống có số chùm quả/ thấp (< chùm quả), 134 mẫu giống có số chùm quả/ trung bình (6-10 chùm/ quả) 18 mẫu giống có 10 chùm quả/ 14 Theo dõi tổng số quả/ cây: Kết nghiên cứu mẫu giống cho thấy số quả/cây dao động từ 5,3 - 92,7 Trong tổng số 230 mẫu giống nghiên cứu có 17 mẫu giống thuộc nhóm quả, 38 mẫu giống thuộc nhóm trung bình 175 mẫu giống cịn lại thuộc nhóm sai Kết nghiên cứu khối lượng cho thấy khối lượng dao động từ 17,4 - 211 g/quả Dựa vào khối lượng quả, số tác giả chia cà chua thành nhóm: Nhóm nhỏ 100g 5, 20 Theo đó, nhóm nhỏ có 69 mẫu giống, nhóm trung bình có 139 mẫu giống nhóm to gồm 22 mẫu giống lại Về suất cá thể: Qua nghiên cứu nhận thấy có 13 mẫu giống cho khối lượng 2.000 g/ cây, 197 mẫu giống cho khối lượng từ 1000 đến 2000 g/ 20 mẫu giống cho khối lượng nhỏ 1000 g/ Một số mẫu giống cho suất cao 2.000 g gồm mẫu giống: Cà chua Hồng, H1, H2, H3, H5, H6, H8, H9, H10, H12, H13, H14 Cn08 Về suất thực thu: Qua kết nghiên cứu nhận thấy suất thực thu mẫu giống dao động khoảng 15,24 đến 65,2 tấn/ Mẫu giống đạt suất thực thu cao mẫu giống Dòng H6, đạt 62,5 tấn/ Qua theo dõi nhận thấy mẫu giống có suất cá thể cao cho suất thực thu cao dòng: H1, H2, H3, H5, H6, H8, H9, H10, H12, H13, H14 Cn08 Các mẫu giống suất đạt 55 tấn/ Những mẫu giống cho suất cao nguồn gen để lai tạo từ tạo giống suất cao 3.1.6 Một số đặc điểm hình thái, chất lượng Đặc điểm vai quả: Đánh giá 230 mẫu giống màu sắc vai xanh cho thấy có 73 mẫu giống có màu sắc vai không đổi so với màu sắc phần đáy quả, 91 mẫu giống có vai xanh 66 mẫu giống có vai xanh đậm Màu sắc chín hồn tồn: Đánh giá màu sắc chín hồn tồn cho thấy 79 mẫu giống chín đỏ thẫm, 124 mẫu giống đỏ tươi 27 đỏ vàng Hình dạng quả: Qua nghiên cứu nhận thấy có 15 mẫu giống thuộc nhóm dẹt, 105 mẫu giống thuộc nhóm trịn dẹt, 76 mẫu trịn, 24 mẫu giống tròn dài 10 mẫu giống thuộc nhóm dài Độ dày thịt quả: Độ dày thịt việc tăng giá trị sử dụng, tăng khối lượng yếu tố xác định độ quả, giúp cho trình vận chuyển bảo tốt Kết bảng 3.4 cho thấy có 26 mẫu giống có thịt mỏng < 0,5 cm, 145 mẫu giống có thịt dầy từ 0,5 - 0,7 cm 59 mẫu giống có độ dày thịt 0,7 cm Số ngăn hạt: Nhìn chung số ngăn hạt đạt khoảng - ngăn vừa phù hợp cho mục đích vận chuyển đảm bảo chất lượng Xác định có 34 mẫu giống có từ đến nhỏ ngăn hạt, 114 mẫu có từ 3-4 ngăn hạt 83 mẫu giống có từ > ngăn hạt 15 Như vậy, qua kết đánh giá 230 mẫu giống vụ đông xác định 13 mẫu giống triển vọng có hình dạng trịn đến trịn dài (1,0 ≤ I ≤ 1,3), số ngăn hạt từ 2-5 ngăn, cùi dày > 0,7 cm, màu chín đỏ thẫm đỏ, to trung bình 70 g, suất cá thể đạt khoảng 2000 g/cây trở lên, suất thực thu đạt 55 tấn/ (Bảng 3.5) Bảng 3.5 Một số đặc điểm nông sinh học mẫu giống tốt sàng lọc từ 230 mẫu giống điều kiện vụ Đông 3.2 Phát gen kháng bệnh xoăn vàng gen bệnh mốc sương thị phân tử 3.2.1 Phát gen kháng bệnh xoăn vàng 3.2.1.1 Phát gen kháng bệnh xoăn vàng Ty1 Chỉ thị CAPS TG97 sử dụng để phát gen kháng Ty1 Sản phẩm PCR với cặp mồi TG97F/R đoạn ADN dài khoảng 400 bp tất mẫu giống nghiên cứu Sau cắt sản phẩm enzyme TaqI, mẫu giống mang gen Ty1 xuất vạch băng dài khoảng 300bp 100 bp 60 Phát gen kháng Ty1 230 mẫu giống nhận thấy có 11 mẫu giống chứa gen, mẫu giống AVRDC139, AVRDC154, AVRDC188, AVRDC189, AVRDC193, AVRDC198, Fr28, Fr34, Is23, Is34 Ru07 16 3.2.1.2 Phát gen kháng xoăn vàng Ty2 Chỉ thị SCAR T0302 sử dụng để phát gen Ty2 Sản phẩm PCR với cặp mồi T0302F/TY2R1 điện di xuất vệt băng kích thước 600bp mẫu giống mang gen Ty2 53 Qua đó, phát mẫu giống tổng 230 mẫu giống chứa gen kháng bệnh xoăn vàng Ty2, mẫu giống AVRDC135, AVRDC138, AVRDC139, AVRDC142 AVRDC144 3.2.1.3 Phát gen kháng Ty3 Chỉ thị P6-25 sử dụng để phát gen kháng Ty3 Cặp mồi P6-25 F/R khuếch đại tạo sản phẩm băng 660bp alen Ty3b băng 630bp với alen Ty3a, alen mẫn cảm ty3 cho băng 320bp Sử dụng thị SCAR P6-25 với cặp mồi P6-25F/R để phát kháng Ty3 230 mẫu giống cà chua, phát mẫu giống chứa gen là: AVRDC154, AVRDC165, AVRDC166, AVRDC192, AVRDC195, Is11, Is12 Is22 3.2.1.4 Phát gen kháng Ty4 Trong nghiên cứu sử dụng thị C2_AT5g51110 để phát gen Ty4 Những mẫu giống chứa gen Ty4 vệt băng có kích thước khoảng 325 bp, cịn khơng chứa gen khơng có sản phẩm PCR nhân lên Qua phát mẫu giống chứa gen Ty4 AVRDC102, AVRDC115, AVRDC122 AVRDC123 3.2.1.5 Phát gen kháng ty5 Sử dụng cặp mồi nhân thị TM719 PCR phát gen ty5 Kết phát phát mẫu giống chứa gen kháng ty5 Is4 Is5, Fr13, AVRDC139, AVRDC140 AVRDC151 Như vậy, thị phân tử DNA phát 11 mẫu giống chứa gen Ty1, mẫu giống chứa gen Ty2, mẫu giống chứa gen Ty3, mẫu giống chứa gen Ty4 mẫu giống chứa gen ty5 Đặc biệt có mẫu giống chứa 02 gen kháng 03 gen kháng AVRDC154 chứa gen Ty1 Ty3 AVRDC139 chứa gen Ty1, Ty2 ty5 3.2.2 Phát gen kháng bệnh mốc sương 3.2.2.1 Phát gen kháng Ph2 Trong nghiên cứu thị UF-Ph2-1 lựa chọn để phát gen Ph2 Sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi nhân thị UF-Ph2-1 có kích thước khoảng 500 bp mẫu giống kháng nhiễm Sử dụng enzyme cắt giới hạn Hinf I cắt sản phẩm PCR phân biệt trạng thái alen Nếu alen kháng (dạng đồng hợp tử trội) xuất vạch băng kích thước 355, 125 27 bp Điều tra 230 mẫu giống thị UF-Ph2-1 phát được 11 mẫu giống mang gen kháng Ph2, mẫu giống: AVRDC113, AVRDC114, AVRDC150, AVRDC181; AVRDC182; Us03, Us12; Us13; Fr20 Fr23 17 3.2.2.2 Phát gen kháng Ph3 Để phát gen kháng bệnh mốc sương Ph3, nghiên cứu thị SCU602 sử dụng Cặp mồi SCU602F3/R3 nhân thị SCU602, với alen kháng sản phẩm PCR có kích thước 400 bp Trong tổng số 230 mẫu giống điều tra, 17 mẫu phát mang gen kháng Ph3, mẫu: AVRDC124, AVRDC125, AVRDC130, AVRDC131, AVRDC139, AVRDC140, AVRDC152, AVRDC157, AVRDC181, AVRDC182 AVRDC198; Fr18, Fr23; Fr33; Is04, Is05 Is14 3.3 Lây nhiễm nhân tạo xác định gen kháng hữu hiệu 3.3.1 Xác định gen kháng bệnh xoăn vàng hữu hiệu Bốn nguồn gây bệnh xoăn vàng thu thập Hải phòng, Hưng Yên, Bắc Giang cấu trúc xâm nhiễm ToLCHnV dùng để lây nhiễm nhân tạo Từ kết lây nhiễm nhận thấy mẫu giống mang gen Ty1 Ty3 có khả kháng tốt tất nguồn bệnh Đặc biệt mẫu giống chứa đồng thời hai gen Ty1 Ty3 gen Ty1, Ty2 ty5 kháng hoàn toàn với tất nguồn bệnh lây nhiễm 3.3.2 Xác định gen kháng bệnh mốc sương hữu hiệu Đánh giá khả kháng bệnh của hai gen Ph2 Ph3 lây nhiễm nhân tạo isolate nấm bệnh mốc sương theo phương pháp Nelson Trương Văn Dư Kết lây nhiễm cho thấy tất mẫu giống mang gen Ph2 kháng cao (HR) isolate thu thập Thái Bình Hải Phòng kháng (R) với isolate thu thập Hải Dương Nhiễm (S) isolate thu thập Hà Nội, Sơn La Thanh Hoá Các mẫu giống mang gen Ph3 kháng cao (HR) isolate thu thập Sơn La Thanh Hoá, kháng (R) isolate thu thập Hà Nội, Thái Bình, Hải Phòng nhiễm với isolate thu thập Hải Dương Như gen Ph3 có khả kháng tốt gen Ph2 Mẫu giống mang hai gen kháng Ph2 Ph3 kháng tất isolate bệnh mốc sương 3.4 Lai, chọn tạo giống 3.4.1 Lai mẫu giống cà chua chứa gen với mẫu giống tốt Từ mẫu giống tốt mẫu giống mang gen kháng Ty1, Ty3, Ph2 Ph3 lai với Qua đó, 271 tổ hợp lai lai tạo, 135 tổ hợp lai mẫu giống tốt với mẫu giống mang gen kháng Ty1 Ty3 136 tổ hợp lai mẫu giống tốt với mẫu giống mang gen kháng Ph2 Ph3 Đánh giá 135 tổ hợp lai F1 chứa gen kháng bệnh xoăn vàng chọn 19 tổ hợp lai tốt Trong có tổ hợp lai có bố mang gen kháng Ty1, 08 tổ hợp lai có bố mang gen kháng Ty3 03 tổ hợp lai có bố mang đồng thời hai gen kháng Ty1 Ty3 Đánh giá136 tổ hợp lai F1 chứa gen kháng bệnh mốc sương chọn 29 tổ hợp lai tốt, cho ưu lai cao Trong có 19 tổ hợp lai có bố mang gen kháng 18 Ph3, 02 tổ hợp lai có bố mang gen kháng Ph2 08 tổ hợp lai có bố mang đồng thời hai gen kháng Ph2 Ph3 (bảng 3.11a 3.11b) Để chắn tổ hợp lai chọn lai thật (đúng bố mẹ định) thị phân tử ADN áp dụng vào để kiểm tra lai F1 Các tổ hợp chứa gen kháng Ty1, Ty3, Ph2 Ph3 kiểm tra thị TG97, P6-25, UF-Ph2-1 SCU60 Kết kiểm tra cho thấy 100% tổ hợp lai F1 lai thật Bảng 3.11a Danh sách 19 tổ hợp lai F1 tốt, cho ưu lai cao kiểm tra gen kháng bệnh xoăn vàng thị phân tử ADN 19 Bảng 3.11b Danh sách 29 tổ hợp lai F1 tốt, cho ưu lai cao kiểm tra gen kháng bệnh mốc sương thị phân tử ADN 3.4.2 Chọn lọc cá thể quần thể F2 mang gen kháng đồng hợp tử 3.4.2.1 Chọn lọc thể mang gen kháng bệnh xoăn vàng Ty1 Ty3 Trong quần thể F2, thị TG97 tiếp tục sử dụng để chọn lọc gen kháng Ty1 đồng hợp tử trội thị P6-25 chọn lọc gen kháng Ty3 đồng hợp trội Khoảng 50 cá thể F2 tốt tổ hợp cắm thẻ để xác đinh kiểu gen kháng đồng hợp tử Từ 19 quần thể F2, 59 cá thể mang 20 kháng Ty1 đồng hợp tử, 49 cá thể mang gen kháng Ty3 đồng hợp tử cá thể mang đồng thời hai gen kháng Ty1 Ty3 chọn 3.4.2.2 Chọn lọc thể mang gen kháng bệnh mốc sương Ph2 Ph3 Trong quần thể F2 29 tổ hợp, sử dụng thị UF-Ph2-1 để chọn lọc gen kháng Ph2 đồng hợp tử trội thị SCU60 để chọn lọc gen kháng Ph3 đồng hợp trội Kết 65 cá thể mang kháng Ph2 đồng hợp tử, 175 cá thể mang gen kháng Ph3 đồng hợp tử cá thể mang đồng thời hai gen kháng chọn Các cá thể F2 hỗn cho tự thụ liên tục nhiều hệ, sau tách dịng hệ F6 3.4.3 Tách dòng Trên sở quần thể F6, quần thể lựa chọn cá thể tốt đạt suất cao, tối thiểu suất cá thể đạt từ 1,5 kg trở nên Qua đó, 20 dòng mang gen kháng bệnh xoăn vàng Ty1 Ty3 24 dòng mang gen gen kháng bệnh mốc sương Ph2 Ph3 chọn Nguồn gốc đặc điểm dịng chọn lọc mơ tả bảng 3.14a 3.14b Bảng 3.14a Nguồn gốc đặc điểm 20 dòng cà chua hệ F6 mang gen kháng bệnh xoăn vàng Ty1 Ty3 21 Bảng 3.14b Nguồn gốc đặc điểm 24 dòng cà chua hệ F6 mang gen kháng bệnh mốc sương Ph2 Ph3 Để chắn gen Ty1, Ty3, Ph2 Ph3 cố định dòng chọn, thị phân tử DNA tiếp tục ứng dụng để kiểm tra Các dòng chọn lọc mang gen kháng Ty1, Ty3, Ph2 Ph3 kiểm tra thị TG97, P6-25, UF-Ph2-1 SCU60 Kết kiểm tra cho thấy cho thấy 100% dòng chọn lọc mang gen kháng bệnh mục tiêu 3.4.4 Đánh giá so sánh dòng chọn lọc Đến hệ F6, 44 dòng cà chua tốt chọn lọc, 20 dòng cà chua mang gen bệnh xoăn vàng Ty1, Ty3 24 dòng mang gen kháng bệnh mốc sương Ph2 Ph3 Để chọn dòng ưu tú vừa có khả kháng bệnh vừa cho suất cao để tiến hành so sánh, khảo nghiệm, dòng chọn lọc đánh giá điều kiện vụ đông năm 2018 22 Qua đánh giá đặc điểm nông sinh học, yếu tố cấu thành suất suất, dòng ưu tú chọn Chúng có kiểu hình đẹp đặc biệt cho suất cao hẳn đối chứng C155 Trong số dịng mang gen kháng bệnh xoăn vàng dòng TP48-1; TP88, TP90, TP130, P135 dòng mang gen kháng bệnh mốc sương P1, P7, P15 P24 Đặc điểm dòng tổng hợp bảng 3.16 Bảng 3.16 Đặc điểm đòng cà chua ưu tú 3.4.5 Khảo nghiệm dòng cà chua ưu tú 3.4.5.1 Khảo nghiệm dòng cà chua ưu tú Khảo nghiệm tiến hành Gia Lâm Hà Nội hai vụ, vụ Xuân hè vụ Đông năm 2019 nhằm đánh giá khả thích ứng dịng cà chua ưu tú nói miền Bắc Việt Nam Các tiêu đánh giá bao gồm khả sinh trưởng, phát triển, đặc điểm hình thái, khả chống chịu sâu bệnh, suất yếu tố cấu thành suất, tiêu chất lượng Trong hai vụ khảo nghiệm nhận thấy dòng ưu tú thể tính vượt trội so với đối chứng C155, đặc biệt có dịng cho ln cho suất cao đối chứng C155 TP130, TP135, P7 Bên cạnh đánh giá đặc điểm nơng sinh học suất, chúng tơi cịn đánh giá khả kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương đồng ruộng lây nhiễm nhân tạo Kết cho thấy dòng mang gen kháng bệnh Ty1 Ty3 kháng tốt với bệnh xoăn đồng ruộng lây nhiễm nhân tạo Các dịng mang gen kháng Ph2 Ph3 thể tính kháng tốt Trên đồng ruộng khơng có triệu chứng lây nhiễm nhân tạo cho kết tương tự mẫu mang gen kháng đánh giá trước 23 3.4.5.2 Khảo nghiệm sinh thái dòng cà chua ưu tú Để đánh giá khả thích ứng dòng cà chua ưu tú khảo nghiệm tiếp tục trồng khảo nghiệm sinh thái vùng Mộc Châu - Sơn La, Sóc Sơn - Hà Nội Vĩnh Bảo - Hải Phòng, vùng sản xuất cà chua nhiều Khảo nghiệm vụ gồm: Vụ Đông 2019, vụ Xuân hè 2020 vụ Đông 2020, vụ xuân gieo hạt 20/1 vụ Đông gieo hạt 10/9 Riêng Sơn La, vụ Đông gieo hạt sớm hai điểm lại tháng Qua khảo nghiệm vụ liên tiếp điểm khảo nghiệm, ba dòng cho suất cao ổn định chọn, dòng TP130 (mang gen kháng Ty1), TP130 (mang gen kháng Ty3) P7 (mang gen kháng Ph3) Các dòng cho suất cao đối chứng C155 tất vụ tất điểm Ngồi cho suất cao chúng cịn có khả kháng bệnh tốt Các dòng kháng tốt với bệnh xoăn vàng cà chua TP130 mang gen Ty1 TP135 mang gen Ty3 Dòng P7 kháng tốt với bệnh mốc sương mang gen Ph3 Các dòng cần công nhận giống để phát triển thực tiễn mang lại hiệu kinh tế cao cho người nông dân doanh nghiệp KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận 1) Đánh giá 230 mẫu giống cà chua đặc điểm nông sinh học như: kiểu hình sinh trưởng, giai đoạn sinh trưởng, đặc điểm hình thái cấu trúc cây, cấu trúc hoa, đặc điểm nở hoa, suất yếu tố cấu thành suất, số đặc điểm hình thái chất lượng Qua chọn 13 mẫu giống có kiểu hình đẹp, cho suất cao 2,0 kg/ làm nguồn vật liệu cho lai tạo giống 2) Ứng dụng thị phân tử DNA phát gen kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương 230 mẫu giống cà chua Phát 11 mẫu giống mang gen Ty1, mẫu giống mang gen Ty2, mẫu giống mang gen Ty3, mẫu giống mang gen Ty4, mẫu giống mang gen ty5, 11 mẫu giống mang gen Ph2 17 mẫu giống mang gen Ph3 Đặc biệt có 02 mẫu giống AVRDC139 AVRDC 140 mang đồng thời hai gen kháng Ty Ph Các mẫu giống nguồn vật liệu vơ q giá chương trình chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương 3) Lây nhiễm nhân tạo 04 nguồn bệnh xoăn vàng mẫu giống mang gen kháng bệnh xoăn vàng 06 isolate bệnh mốc sương mẫu giống mang gen kháng bệnh mốc sương Xác định 02 gen kháng hữu hiệu với nguồn bệnh xoăn vàng miền Bắc Việt Nam Ty1 Ty3 gen kháng Ph2 Ph3 kháng tốt với bệnh mốc sương, nhiêu gen Ph3 kháng tốt Ph2 24 4) Lai 13 mẫu giống tốt với mẫu giống mang gen kháng bệnh xoăn vàng Ty1 Ty3 gen kháng bệnh mốc sương Ph2 Ph3 Ứng dụng thị phân tử DNA để chọn lọc cá thể mang gen kháng bệnh đồng hợp tử từ hệ phân ly F2 Duy trì, chọn lọc, khảo nghiệm khảo nghiệm sinh thái chọn dòng cà chua tốt cho suất cao, kháng bệnh xoăn vàng bênh mốc sương Các dòng tốt chọn tạo dòng TP130 mang gen Ty1, TP135 mang gen Ty3 P7 mang gen kháng Ph3 cho suất ổn định đạt suất 50 tấn/ vụ Xuân hè, 60 tấn/ha vụ Đông, cao giống đối chứng C155 qua vụ vùng sinh thái Đề nghị 1) Tiếp tục sử dụng nguồn gen đánh giá, đặc biệt mẫu giống tốt, cho suất cao mẫu giống chứa gen kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương nhằm tạo giống kháng đồng thời hai bệnh xoăn vàng mốc sương cho tỉnh phía Bắc 2) Tiếp tục đánh giá mở rộng sản xuất giống dòng cà chua tốt, cho suất cao, kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương TP130, TP135 P7 nhằm đem lại lợi ích kinh tế cho người nông dân doanh nghiệp 3) Tiếp tục nghiên cứu biện pháp kỹ thuật canh tác cho dòng trên, nhằm khai thác hết tiềm chúng để đem lại đạt hiệu kinh tế cao cho người sản xuất doanh nghiệp 25 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Tống Văn Hải, Phan Thị Hiền, Trịnh Thị Thu Thủy, Phan Hữu Tôn, Nguyễn Quốc Trung (2020), Phát gen kháng bệnh xoăn vàng cà chua hữu hiệu thị phân tử DNA lây nhiễm nhân tạo, Kỷ yếu Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc 2020, tr.607-613 Tống Văn Hải, Phan Hữu Tôn, Phan Thị Hiền, Nguyễn Quốc Trung (2021), Chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng thị phân tử DNA, Tạp chí khoa học Nơng nghiệp Việt Nam, Số 19 (3), tr.399-409 Tống Văn Hải, Phan Hữu Tôn, Phan Thị Hiền, Nguyễn Quốc Trung, Trịnh Thị Thu Thủy (2021), Phát gen kháng bệnh mốc sương cà chua thị phân tử đánh giá khả kháng gen lây nhiễm nhân tạo, Kỷ yếu Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc 2021, tr.740-746 ... gen kháng bệnh, lai sử dụng thị phân tử để chọn lọc Với mục tiêu chọn giống cà chua kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương tiến hành nghiên cứu ? ?Nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống cà chua. .. sương; Nghiên cứu gen kháng bệnh xoăn vàng lá, bệnh mốc sương thị phân tử ADN liên kết; Chọn tạo giống ứng dụng MAS; Một số nghiên cứu thành tựu chọn tạo giống kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Việt. .. số nghiên cứu thành tựu chọn tạo giống kháng bệnh xoăn vàng bệnh mốc sương Việt Nam Ở Việt Nam công tác chọn tạo giống cà chua quan tâm từ năm 1970 Tuy nhiên chọn tạo giống cà chua kháng bệnh xoăn