Nghiên cứu ảnh hưởng của chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học và tác dụng kháng khuẩn của hoàng cầm radix scutellaria

Đặt vấn đề Từ lâu nhân dân ta đà có nhiều kinh nghiệm sử dụng cỏ thiên nhiên để phục vụ sống cách hữu ích, đặc biệt việc phòng chữa bệnh Ngày nay, để kinh nghiệm đợc chứng minh cách khoa học, việc nghiên cứu đầy đủ, chi tiết theo phơng pháp khoa học điều cần thiết Theo lý luận y học cổ truyền, vị thuốc trớc dùng đợc chế biến nhiều phơng pháp khác Mỗi phơng pháp chế biến đáp ứng mục đích định, làm tăng tác dụng chữa bệnh, có làm giảm độc tính hay thay đổi tính vị quy kinh, tránh mùi vị khó chịu, có tác dụng bảo quản vị thuốc Do ®ã chÕ biÕn thc theo y häc cỉ trun lµ việc làm quan trọng Trong khoá luận này, vị thuốc Hoàng Cầm đợc tiến hành nghiên cứu nhằm mục đích Hoàng Cầm vị thuốc đợc đông y sử dụng từ lâu để chữa bệnh: Sốt cao viêm phổi, viêm phế quản, ho, ngực tức, buồn nôn, kiết lỵ, tiêu chảy, động thai, chảy máu cam.Để góp phần chứng minh cho tác dụng chữa bệnh nói trên, đồng thời góp phần vào việc xây dựng quy tr×nh chÕ biÕn thc cỉ trun cđa Bé y tế Chúng đà tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu ảnh hởng chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học tác dụng kháng khuẩn Hoàng Cầm Radix Scutellaria với mục tiêu sau: Xác định thay đổi thành phần hoá học qua việc chế biến theo phơng pháp cổ truyền khác với nội dung sau: - Xác định tính vị thuốc Hoàng cầm - Tiến hành chế biến vị thuốc Hoàng Cầm theo số phơng pháp cổ truyền - Định tính, định lợng Flavonoid vị thuốc Hoàng cầm sống chế - Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn vị thuốc Hoàng Cầm sống chế Tổng quan 1.1 Mục đích chÕ biÕn thc cỉ trun ChÕ biÕn thc cỉ trun sử dụng phơng pháp tổng hợp để làm biến đổi trạng thái thuốc từ trạng thái tự nhiên ban đầu thành vị thuốc sử dụng cho việc phòng chữa bệnh Hay nói cách khác chế biến để chuyển vị thuốc từ vị thuốc sống trở thành thuốc chín Chế biến để làm cho thuốc có biến đổi, thay đổi định hình dáng mầu sắc, mùi vị, thành phần hoá học, công chủ trị, nhằm mục đích tăng hiệu lực trị bệnh tăng độ an toàn vị thuốc ngời dùng [1], [11], [13] ChÕ biÕn thc cỉ trun nh»m c¸c mục đích sau: + Làm vị thuốc + Làm thay đổi tính, vị thuốc từ tạo tác dụng điều trị + Giảm độc tính thuốc, giảm tác dụng không mong muốn + ổn định thành phần hoá học, góp phần bảo quản thuốc đợc tốt + Tăng hiệu lực trị bệnh + Thay đổi mặt hoá học vị thuốc dẫn đến thay đổi tác dụng vị thuốc + Giảm tính bền vững học, tăng khả giải phóng dợc chất làm tăng hiệu lực thuốc trực tiếp hay gi¸n tiÕp qua c¸c phơ liƯu trung gian nhiệt độ mức độ khác [1],[2],[3] 1.2 Các phơng pháp chế biến cổ truyền [1],[2],[3],[13] Trong phần giới thiệu số phơng pháp chế biến liên quan đến đề tài 1.2.1 Phơng pháp hoả chế Là phơng pháp chế biến sử dụng tác ®éng cđa nhiƯt ®é trùc tiÕp hay gi¸n tiÕp (qua phụ liệu trung gian) mức nhiệt độ khác Mục đích : tăng tính ấm, giảm tính hàn vị thuốc Hoả chế nghĩa đa thêm phần nhiệt, phần dơng vào vị thuốc, làm giảm tính hàn cho vị thuốc - Ví dụ: Đại hoàng tính hàn, tác dụng nhuận tẩy Đại hoàng cháy gây táo bón Khi cháy, anthranoid bị thăng hoa nên tác dụng nhuận tẩy bị giảm, nhng tanin tồn gây táo bón - Ví dụ: Bán hạ nam nhiệt độ 200 độ ngứa hoàn toàn sau 30 phút [1] 1.2.1.1 Sao a) Sao trùc tiÕp (Sao kh«ng cã phơ liệu): Là phơng pháp sao, lửa đợc truyền trực tiếp qua dơng + Sao qua (vi sao): NhiƯt độ khoảng 50 - 80o c, mầu sắc dợc liệu thay đổi không đáng kể so với dợc liệu sống, mục đích làm khô thuốc, diệt nấm mốc sâu mọt, làm cho thuốc trở nên thơm, góp phần ổn định hoạt chất thuốc [1], [2], [3], [13] + Sao vàng: Nhiệt độ khoảng 100 140o C, mặt phiến mầu mầu vàng, bên có mầu phiến sống Mục đích tăng tác dụng quy tỳ, tăng mùi thơm thuốc [1], [2], [3], [13] + Sao vàng xém cạnh: nhiệt độ khoảng 170-200o C, bề mặt phiến mầu vàng , mép mầu đen Mục đích giảm mùi vị khó chịu thuốc [1], [2], [3], [13] VÝ dơ: ChØ thùc, chØ x¸c + Sao vàng hạ thổ: Nhiệt độ khoảng 100 140oC, thành phẩm có mầu sắc giống nh vàng Mục đích điều hoà âm dơng, mïi vÞ khã chÞu cđa thc [1], [2], [3], [13] + Sao ®en ( Sao tån tÝnh): NhiƯt ®é cao khoảng 200-220oC, mặt phiến mầu đen, bên có mầu vàng Mục đích tăng tác dụng huyết, giảm tÝnh m·nh liƯt cđa thc [1], [2], [3], [13] + Sao cháy (Thán sao): Nhiệt độ cao khoảng 220-300oC, mặt phiến mầu đen, bên có mầu nâu đen Mục đích tăng tác dụng cầm máu thuốc [1], [2], [3], [13] b) Sao gi¸n tiÕp (Sao cã phơ liệu)[1], [2], [3], [13] Là phơng pháp sao, lửa đợc trun qua phơ liƯu trung gian C¸c phơ liƯu thêng dùng là: Gạo, cám, cát, hoạt thạch, văn cáp + Sao cách cám: Nhiệt độ thấp, nhằm tăng tác dụng quy tỳ vị thuốc + Sao cách cát: Nhiệt độ cao khoảng 250-300 oC, nhằm làm cho vị thuốc phồng xốp, dễ nghiền tán dễ chiết xuất + Sao cách hoạt thạch, văn cáp: Nhiệt độ cao khoảng 200250oC, nhằm làm cho vị thuốc phồng xốp, dễ nghiền tán mà không bị két dính 1.2.1.2 Các phơng pháp hoả chế khác Nung, lùi, nớng, hoả phi, chế sơng 1.2.2 Phơng pháp thuỷ chế [1], [2], [3], [13] Là phơng pháp chế biến sử dụng tác động nớc dịch phụ liệu mức độ khác điều kiện nhiệt độ tự nhiên nhằm đáp ứng mục đích khác a) Ngâm Là phơng pháp cho dợc liệu ngâm vào níc hay dÞch phơ liƯu mét thêi gian, sau gạn bỏ dịch Tuỳ thuộc vào mục đích điều trị mục đích chế biến khác mà chọn lựa dịch phụ liệu khác Với mục đích: + Loại bỏ tạp chất (vô cơ, hữu ) + Làm mềm dợc liệu, giúp cho việc phân chia đuợc dễ dàng + Giảm độc tính, giảm tác dụng phụ không mong muốn điều trị + Giảm tính bền vững học vị thuốc, tăng khả giải phóng hoạt chất b) ủ Dùng nớc hay dịch phụ liệu tẩm vào vị thuốc vài đến vài ngày, đến đạt yêu cầu kỹ thuật riêng.Với mục đích: + Tăng tác dụng trị bệnh nhờ tác dụng hiệp đồng thuốc phụ liệu + Giảm độc tính, giảm tác dụng phụ thuốc thay đổi tác dụng theo chiều hớng có lợi cho mục đích điều trị + Làm mềm vị thuốc thuận lợi cho việc phân chia thuốc Ngoài có phơng pháp thuỷ chế khác tẩy, rửa, thuỷ phi 1.2.3 Phơng pháp thuỷ hỏa hợp chế Là phơng pháp chế biến phối hợp nớc, lửa, sử dụng tác động nớc nhiệt độ cao nhiệt độ thờng 1.2.3.1 Chích Là phơng pháp tẩm vào vị thuốc hay nhiều loại dịch phụ liệu, ủ đến thấm nớng Tuỳ vào mục đích điều trị mà chích với loại dịch phụ liệu khác a) Chích gừng - Mục đích: Giảm tính hàn tăng tính ấm cho vị thuốc, tăng tác dụng phát tán thuốc, tăng dẫn thuốc vào kinh tỳ, vị, phế - Thờng dùng gừng tơi (Sinh khơng): lợng gừng thờng dùng từ - 20% dợc liệu Già nát, thêm nớc vắt lấy dịch nớc, tẩm đều, ủ 2-4 cho nớc gừng ngấm sâu vào bên dợc liệu đem nhỏ lửa dợc liệu khô có mầu vàng b) Chích mật - Mục đích: Tăng tác dụng kiện tỳ, bổ khí, tăng tác dụng nhuận bổ, hoà hoÃn dợc tính tạo vị ngọt, mùi thơm cho vị thuèc - Cã thÓ dïng mËt ong hay mËt mÝa: Lỵng mËt thêng dïng theo tû lƯ – 10% dợc liệu, mật đặc phải pha loÃng nớc sôi Tẩm vào dợc liệu ủ cho ngấm sau phơi khô dợc liệu vàng c) Ngoài sử dụng phơng pháp chích giấm, chích rợu, chích cam thảo, chích đậu đen 1.2.3.2 Đồ Dùng nớc đun sôi để làm mềm thuốc, phân tán mùi vị khó chịu thuốc làm chín thuốc (diệt mem, mốc, mọt ) - Một số phơng pháp thuỷ hoả hợp chế khác: Chng, nấu sôi, sắc 1.3 ảnh hởng nhiệt độ đến mầu sắc thành phần hoá học vị thuốc Sự tác động nhiệt độ mức độ thời gian khác làm thay đổi mầu sắc ảnh hởng đến thành phần hoá học vị thuốc chất lợng - nhiệt độ dới 100oC ( Tơng đơng phơng pháp vi sao) hầu nh mầu sắc thành phần hoá học vị thuốc không bị ảnh hởng - Khi tác động nhiệt độ từ 100-140oC (Tơng đơng phơng pháp vàng) vị thuốc thờng ngả mầu vàng thành phần hoá học vị thuốc nhiều có thay đổi lợng chất Đặc biệt hàm lợng tinh dầu giảm nhiều thời kỳ - nhiệt độ dới 180-240oC ( Tơng đơng phơng pháp cháy): Vị thuốc thờng có mầu đen có thay đổi nhiều thành phần hoá học, nhiệt độ tạo điều kiện làm thay đổi thành phần dợc chất hàm lợng chất tăng lên giảm [1], [9] 1.4 ảnh hởng nhiệt độ phụ liệu đến tác dụng sinh học vị thuốc Trong y học cổ truyền, vị thuốc đợc bào chế theo phơng pháp khác tuỳ thuộc vào mục đích khác - Dợc liệu sống hay qua đợc sử dụng với tác dụng ban đầu - Dợc liệu chế biến có thay đổi thành phần hoá học dới tác động nhiệt độ phụ liệu, nên tác dụng thuốc có thay đổi định Cùng vị thuốc tuỳ vào cách chế đợc sử dụng để chữa chứng bệnh khác [1], [9] 1.5 Vị thuốc Hoàng Cầm (Radix Scutellariae) 1.5.1 Đặc điểm thực vật, phân bố thu hái Tên khoa học: Scutellaria baicalensis Georgi Họ hoa môi: Lamiaceae Hình 1: Cây hoa rễ Hoàng cầm - Cây thuộc thảo, sống nhiều năm, cao 20-50cm, thân đứng vuông, mọc đối cuống ngắn không có, mép nguyên, cã l«ng Hoa mäc híng mét phÝa ë ngän Hoa hình môi, mầu lam tím, có bốn nhị, bầu bốn ngăn [4], [6], [7], [12], [16] - Hoàng cầm thờng thích hợp với vùng cao nguyên, sờn núi khô tỉnh Hắc long giang, Liên ninh, Hà bắc, Vân nam Trung Quốc Cây đà đợc trồng thí nghiệm Sapa, Lào cai Hiện vị thuốc Hoàng cầm phải đợc nhập từ Trung Quốc [4], [12] Hình Sơ đồ biểu diễn hàm lợng baicalin mẫu Hoàng cầm 2.3.4 Kết nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn vị thuốc Hoàng cầm sống, chế - Tiến hành thực nghiệm kháng khuẩn nh đà mô tả phần c mục 2.1.3.4 - Kết đợc thể bảng hình 9,10 Bảng 7: Kết thử tác dụng kháng khuẩn Hoàng Cầm sống chế Đờng kính vòng vô khuẩn ( mm) Vi khuẩn STT kiểm định Pen Gen HCS HCV HC§ HCM HCG HCR BC 17.63 - 14.97 14.80 - 14.13 15.53 15.07 BS 15.93 - 14.63 13.50 - 13.63 13.93 15.30 BP - - 15.55 15.17 7.90 13.73 14.60 16.43 SL 22.47 - 15.20 15.43 - 12.80 15.20 15.27 sta 16.75 - 15.05 13.16 - 11.05 14.75 14.10 EC - 13.53 - - - - - - Shi - 16.07 16.73 16.30 14.50 17.03 17.30 17.23 pro - 18.37 15.50 14.37 7.36 12.23 15.27 15.83 PSeu - - - - - - - - 10 Sal - 18.00 - - - - - - NhËn xÐt: MÉu sèng cã t¸c dơng víi vi khn thử Mẫu vàng có tác dụng với vi khuẩn thử Mẫu đen có tác dụng với vi khn thư MÉu chÝch mËt cã t¸c dơng víi vi khn thư MÉu chÝch gõng cã t¸c dơng với vi khuẩn thử Mẫu chích rợu có tác dụng với vi khuẩn thử Nh Hoàng Cầm sống chế có tác dụng tốt vi khuẩn Gr(+) số vi khuẩn Gr(-) Riêng Hoàng Cầm đen tác dụng kháng khuẩn giảm nhiều có tác dụng với vi khuẩn Gr(+) vi khuÈn Gr(-) Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa Shigella flexneri Sanmonella typhi Proteus mirabilis Hình 9: Vòng vô khuẩn Gen mẫu thử vi khuẩn GR(-) Bacillus pumilus Bacillus subtilis Bacillus cereus Staphylococcus aureus Sarcina lutea Hình 10:Vòng vô khuẩn Pen mẫu thử vi khuẩn GR(+) 2.4 Bàn luận - Dợc liệu Hoàng cầm Trên thị trờng xuất loại Hoàng cầm Rễ dài nhỏ Hoàng cầm Scutellaria baicalensis, mặt nhẵn mầu vàng nhạt, thớ vặn, chiều dài 15 22 cm, đờng kính trung bình 0,5 1cm Thể chất dòn dễ bẻ Mặt bẻ mầu vàng, lõi mầu nâu Qua tài liệu Trung dợc chí (TQ) có loài Hoàng cầm Vậy Hoàng cầm có khác với Hoàng cầm Scutellaria baicalensis thờng dùng Y häc cỉ trun (Xem phơ lơc) - Qua nghiªn cøu thành phần hoá học hai loại Hoàng cầm Scutellaria baicalensis Hoàng cầm mới, thấy giống flavonoid, SKLM vÕt gièng (Xem phơ lơc) - ViƯc chÕ biến Hoàng cầm Trong Y học cổ truyền dùng Hoàng cầm chế cho bệnh khác Qua việc chế biến, thành phần flavonoid tồn Về hàm lợng baicalin sản phẩm chế đạt với tiêu chuẩn D ĐVN III đề > 4% Do cho phép sở Y học cổ truyền chế biến Hoàng cầm theo phơng pháp đề có sở khoa học - Hoàng cầm vị thuốc thực tế Y học cổ truyền dùng để trị bệnh viêm nhiễm: Viêm phổi, viêm ruột, sốt cao Qua tác dụng kháng khuẩn, thấy loại sản phẩm chế, có tác dụng kháng khuẩn tốt, đặc biệt vi khuẩn đờng ruột, tụ cầu, trực khuẩn mủ xanh vi khuẩn liên quan đến bệnh mà Y học cổ truyền thờng điều trị Phần Kết luận đề xuất 3.1 Kết luận Qua nghiên cứu đà thu đợc số kết sau: * Về dợc liệu: Đà mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm bột loài Hoàng Cầm mà nghiên cứu, thấy phù hợp với đặc điểm loài Scutellaria baicalensis ghi DĐVN III DĐCHND Trung Hoa * Về chế biến: Đà tiến hành chế biến Hoàng Cầm theo số phơng pháp vàng, đen, chích rợu, chích gừng, chích mật, loại cho hiệu suất chế biến khác * Về thành phần hoá học: Hoàng Cầm dạng sống dạng chế có mặt Flavonoid Thành phần Flavonoid mẫu hầu nh không thay đổi Đà tiến hành định lợng hàm lợng baicalin theo phơng pháp DĐVN III, thấy mẫu đạt tiêu chuẩn dợc điển, hàm lợng baicalin > 4%.Tuy nhiên loại HCĐ cho hàm lợng thấp 3,14% * Về tác dụng kháng khuẩn: Hoàng Cầm sống Hoàng Cầm chế có tác dụng kháng khuẩn nh nhau, riêng Hoàng Cầm cháy có tác dụng kháng khuẩn giảm Kết nghiên cứu đà chứng minh việc chế biến Hoàng Cầm điều cần thiết, có ý nghÜa thùc tiƠn cho viƯc b¶o qu¶n, chiÕt xt điều trị Qua phơng pháp chế biến nói qua thử tác dụng sinh học, định lợng Flavonoid rút Hoàng Cầm việc sử dụng phơng pháp chích gừng, chích rợu, chích mật phù hợp dùng phơng pháp để xây dựng tiêu chuẩn cho quy trình chế biến Hoàng Cầm Riêng HCĐ nên chế biến có điều trị bệnh xuất huyết 3.2 Đề xuất Từ kết nghiên cứu, có số đề xuất sau: Hoàng Cầm vị thuốc đợc nhập từ Trung Quốc đà đợc sử dụng lâu năm y học cổ truyền Song việc nghiên cứu thành phần hoá học sau chế biến Việt Nam cha đợc ý nhiều, nên cần sâu nghiên cứu mặt này, để giúp cho việc tiêu chuẩn hoá sản phẩm chế Hoàng cầm đợc xác 5 Phụ lục Trên thị trờng Việt Nam, vài năm gần đây,đà xuất loại Hoàng cầm có nguồn gốc từ Trung Quốc Song hình dáng, mầu sắc,kích thớc rễ có nhiều điểm khác với loài Scutellaria baicalensis Xem hình 11, 12 Hình 11: Rễ Hoàng cầm Radix scutellariae Hình12:Rễ Hoàng cầm mua P LÃn Ông -Về thành phần hoá học : Tiến hành chiết suất flavonoid theo phơng pháp đợc mô tả mục 2.2.3.1, với phản ứng ống nghiệm flavonoid nh trang 16, cho phản ứng dơng tính SKLM: Hệ dung m«i Toluen: Cloroform: aceton=8:5:7 HƯ dung m«i Toluen: Etylacetat: Acidformic = 5:6:1 Sắc ký đồ biểu thị hình 11a, 11b, 12a, 12b Hệ dung môi Toluen: Cloroform: aceton=8:5:7 2 H×nh 11a H×nh 11b HƯ dung m«i Toluen: Etylacetat: acid formic = 5:6:1 2 Hình 12a Hình12b Sắc ký đồ rễ Hoàng cầm Radix Scutellaria rễ Hoàng cầm mua LÃn Ông Ghi chú: 1- Rễ Hoàng cầm Radix Scutellaria 2- Rễ Hoàng cầm mua phố LÃn Ông 3- Hình 11a, 12a hơ amoniac đặc 4- Hình 11b, 12b quan sát UV 254nm Nhận xét: Qua sắc ký đồ lớp mỏng hai loại Hoàng cầm nói thấy loài Hoàng cầm có thị trờng Việt Nam, cho thành phần hoá học tơng tự với Hoàng cầm Scutellaria baicalensis Tài liệu tham khảo Bộ môn Dợc học cổ truyền Trờng Đại học Dợc Hà Nội (2000), Dợc học cổ truyền, NXB yhọc Bộ môn Dợc học cổ truyền-Trờng Đại học Dợc Hà Néi (2000), kü thuËt chÕ biÕn vµ bµo chÕ thuèc cổ truyền, chế in trung tâm thông tin th viện ĐHDHN Bộ môn Dợc học cổ truyền Trờng Đại học Dợc Hà Nội (2003), tóm lợc chế biến ứng dụng thuốc phiến trung dợc, Phạm Xuân Sinh dịch chế in trung tâm thông tin th viện ĐHDHN Bộ môn Dợc liệu- Trờng Đại học Dợc Hà Nộ (1998), Bài giảng Dợc liệu, NXB y học Bộ môn dợc liệu-Trờng Đại học Dợc Hà Nội (1998), thực tập dợc liệu, chế in trung tâm thông th viện ĐHDHN Bộ y tế (2002), Dợc điển Việt Nam III, NXB y học, tr 373 374 Võ Văn Chi, (1997), từ điển thuốc Việt Nam, NXB y học, tr 560-561 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), phơng pháp nghiên cứu hoá học thuốc, NXB y học Phạm Thị Hằng, (2004), Nghiên cứu ảnh hởng chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học tác dụng sinh học cốt toái bổ, khoá luận tốt nghiệp Dợc sĩ - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 10 Đào Hữu Hồ, (1999), xác suất thống kê, nhà xuất Đại học quốc gia Hà Nội 11 Phạm Hoàng Hộ, (1999), cỏ Việt Nam, NXB trẻ, tr 872, tập 12 Đỗ Tất Lợi, (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 311-314 13 Phạm xuân Sinh, (2006), phơng pháp chế biến thuốc cổ truyền, NXB Y học 14 Trờng Đại học Y Hà Nội, (1994), Y häc cỉ trun NXB Y häc Hµ Néi 15 Ngun Thị Thu Thuỷ, (2002), Nghiên cứu thành phần hoá học tác dụng kháng khuẩn phơng thuốc tam hoàng thang, khoá luận tốt nghiệp Dợc sĩ Trờng Đại học Dợc Hà Nội 16 Từ điển bách khoa Dợc học, (1999), NXB từ điển bách khoa, tr 299-300 17 Viện Dợc liệu, (2006), phơng pháp nghiên cứu tác dụng dợc lý thuốc từ thảo dợc, NXB khoa học kỹ thuật 18.Viện y học dân tộc thợng hải, (1990), 380 thuốc đông y hiệu nghiệm, NXB Thanh Hoá 19 Nguyễn Thị Hoài, (2007), Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hoá học số tác dụng hoá học lục thảo hoa tha, luận án tiến sĩ Dợc học 20 Miêu Minh Tam, Lý Chấn Quốc, Thực dụng đại - Kỹ thuật khống chế chất lợng trung dợc, NXB nhân dân vệ sinh, tr 869 21 ... mẫu Hoàng cầm nghiên cứu - Chú thích: 1: Hoàng cầm phiến (sống) 2: Hoàng cầm vàng 3: Hoàng cầm đen 4: Hoàng cầm chích gừng 5: Hoàng cầm chích rợu 6: Hoàng cầm chích mật Bảng 1: Kết chế biến Hoàng. .. thuốc Hoàng cầm - Tiến hành chế biến vị thuốc Hoàng Cầm theo số phơng pháp cổ truyền - Định tính, định lợng Flavonoid vị thuốc Hoàng cầm sống chế - Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn vị thuốc Hoàng Cầm. .. mẫu Hoàng cầm: + Hoàng cầm phiến (đợc coi Hoàng cầm sống) + Hoàng cầm vàng + Hoàng cầm đen + Hoàng cầm chích mật + Hoàng cầm chích gừng + Hoàng cầm chích rợu 2.1.2 Phơng tiện nghiên cứu a) Thiết