nghiên cứu ảnh hưởng của chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học và tác dụng kháng khuẩn của hoàng cầm radix scutellaria

ĐẶT VẤN ĐỀ Tõ lâu nhân dân ta có nhiều kinh nghiệm sử dụng cỏ thiên nhiên để phục vụ sống cách hữu Ých, đặc biệt việc phòng chữa bệnh Ngày nay, để kinh nghiệm chứng minh cách khoa học, việc nghiên cứu đầy đủ, chi tiết theo phương pháp khoa học điều cần thiết Theo lý luận y học cổ truyền, vị thuốc trước dùng chế biến nhiều phương pháp khác nhau.Mỗi phương pháp chế biến đáp ứng mục đích định, làm tăng tác dụng chữa bệnh, có làm giảm độc tínhhay thay đổi tính vị quy kinh,tránh mùi vị khó chịu, có tác dụng bảo quản vị thuốc.Do chế biến thuốc theo y học cổ truyền việc làm quan trọng Trong khố luận này, vị thuốc Hồng Cầm tiến hành nghiên cứu nhằm mục đích Hồng Cầm vị thuốc đơng y sử dụng tõ lâu để chữa bệnh: Sốt cao viêm phổi, viêm phế quản, ho, ngực tức, buồn nôn, kiết lỵ, tiêu chảy, động thai, chảy máu cam… Để góp phần chứng minh cho tác dụng chữa bệnh nói trên, đồng thời góp phần vào việc xây dựng quy trình chế biến thuốc cổ truyền y tế Chúng tiến hành nghiên cứu đề tài: “ Nghiên cứu ảnh hưởng chế biến cổ truyền đến thành phần hố học tác dụng kháng khuẩncủa Hồng Cầm Radix Scutellaria” với mục tiêu sau: Xác định sù thay đổi thành phần hoá học qua việcchế biến theo phương pháp cổ truyền khác với nội dung sau: -Xác định tính vị thuốc Hồng cầm -Tiến hành chế biến vị thuốc Hoàng Cầm theo mét sè phương pháp cổ truyền -Định tính, định lượng Flavonoid vị thuốc Hoàng cầm sống chế -Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn vị thuốc Hoàng Cầm sống chế TỔNG QUAN 1.1.Mục đích chế biến thuốc cổ truyền Chế biến thuốc cổ truyền sử dụng phương pháp tổng hợp để làm biến đổi trạng thái thuốc từ trạng thái tự nhiên ban đầu thành vị thuốc sử dụng cho việc phòng chữa bệnh Hay nói cách khác chế biến để chuyển vị thuốc từ vị thuốc sống trở thành thuốc chín Chế biến để làm cho thuốc có biến đổi, thay đổi định hình dáng mầu sắc, mùi vị, thành phần hố học, cơng chủ trị, nhằm mục đích tăng hiệu lực trị bệnh tăng độ an toàn vị thuốc người dùng[1], [11], [13] Chế biến thuốc cổ truyền nhằm mục đích sau: + Làm vị thuốc + Làm thay đổi tính, vị thuốc từ tạo tác dụng điều trị + Giảm độc tính thuốc, giảm tác dụng không mong muốn + ổn định thành phần hố học, góp phần bảo quản thuốc tốt + Tăng hiệu lực trị bệnh + Thay đổi vÒ mặt hoá học vị thuốc dẫn đến thay đổi tác dụng vị thuốc + Giảm tính bền vững học, tăng khả giải phóng dược chất làm tăng hiệu lực thuốc trực tiếp hay gián tiếp qua phụ liệu trung gian nhiệt độ mức độ khác [1],[2],[3] Các phương pháp chế biến cổ truyền [1],[2],[3],[13] Trong phần giới thiệu mét sè phương pháp chế biến liên quan đến đề tài Phương pháp hoả chế Là phương pháp chế biến sử dụng sù tác động nhiệt độ trực tiếp hay gián tiếp (qua phụ liệu trung gian) mức nhiệt độ khác Mục đích : tăng tính Êm, giảm tính hàn vị thuốc.Hoả chế nghĩa đưa thêm phần nhiệt, phần dương vào vị thuốc,làm giảm tính hàn cho vị thuốc - VÝ dơ: Đại hồng tính hàn, tác dụng nhuận tẩy.Đại hồng cháy gây táo bón Khi cháy,anthranoid bị thăng hoa nên tác dụng nhuận tẩy bị giảm,nhưng tanin tồn gây táo bón - Ví dụ: Bán hạ nam nhiệt độ 200 độ ngứa hồn tồn sau 30 phút[1] 1.2.1.1 Sao a) Sao trực tiếp (Sao khơng có phụ liệu): Là phương pháp sao, lửa truyền trực tiếp qua dông cụ + Sao qua (vi sao): Nhiệt độ khoảng 50 - 80 c, mầu sắc dược liệu thay đổi không đáng kể so với dược liệu sống, mục đích làm khơ thuốc,diệt nấm mốc sâu mọt,làm cho thuốc trở nên thơm, góp phần ổn định hoạt chất thuốc [1], [2], [3], [13] + Sao vàng: Nhiệt độ khoảng 100 – 140 C, mặt ngồi phiến mầu mầu vàng, bên có mầu phiến sống Mục đích tăng tác dụng quy tú, tăng mùi thơm thuốc [1], [2], [3], [13] + Sao vàng xÐm cạnh: nhiệt độ khoảng 170 - 200 C, bề mặt phiến mầu vàng , mép ngồi mầu đen Mục đích giảm mùi vị khó chịu thuốc [1], [2], [3], [13] Ví dụ: Chỉ thực, xác + Sao vàng hạ thổ: Nhiệt độ khoảng 100 – 140 C, thành phẩm có mầu sắc giống nh vàng Mục đích điều hồ âm dương, mùi vị khó chịu thuốc [1], [2], [3], [13] o o o o + Sao đen ( Sao tồn tính): Nhiệt độ cao khoảng 200 - 220 C, mặt ngồi phiến mầu đen, bên có mầu vàng Mục đích tăng tác dụng huyết, giảm tính mãnh liệt thuốc [1], [2], [3], [13] o +Giảm độc tính, giảm tác dụng phơ khơng mong muốn điều trị +Giảm tính bỊn vững học vị thuốc, tăng khả giải phóng hoạt chất - Mục đích: Tăng tác dụng kiện tú, bổ khí, tăng tác dụng nhuận bổ, hồ hỗn dược tính tạo vị ngọt, mùi thơm cho vị thuốc 4.Ảnh hưởng nhiệt độ phụ liệu đến tác dụng sinh học vị thuốc Mảnh mô mềm chứa hạt tinh bột, tế bào mơ cứng có thành dày, mảnh mạch vạch, mạch chấm mạch điểm [4], [6], [21], [22] - Rễ phơi khơ Hồng cầm ( Radix scutellariae) nhập tõ Trung Quốc,, mua Viện y học cổ truyền Quân đội -Các mẫu Hoàng cầm: + Hoàng cầm phiến(được coi Hoàng cầm sống) + Hoàng cầm vàng Escherichia coli ATCC 25922 Proteus mirabilis BV108 Shigella fnexneri DT112 (EC) (Pro) (Shi) Kết thực nghiệm nhận xét 2.3.1 Nghiên cứu tính dược liệu Hồng cầm - Mơ tả đặc điểm dược liệu Hồng cầm theo D ĐVN III + Đường kính vịng vơ khuẩn ( mm) STT Vi khuẩn kiểm định Pen Gen HCS HCV HCĐ HCM HCG HCR BC 17 63 - 14 97 14 80 - 14 13 15 53 15 07 BS 15 93 - 14 63 13 50 - 13 63 13 93 15 30 BP - - 15 55 15 17 90 13 73 14 60 16 43 SL 22 47 - 15 20 15 43 - 12 80 15 20 15 27 sta 16 75 - 15 05 13 16 - 11 05 14 75 14 10 EC - 13 53 - - - - - - Shi - 16 07 16 73 16 30 14 50 17 03 17 30 17 23 pro - 18 37 15 50 14 37 36 12 23 15 27 15 83 PSeu - - - - - - - - 10 Sal - 18 00 - - - - - - Nhận xét: Mẫu sống có tác dụng với vi khuẩn thử Mẫu vàng có tác dụng với vi khuẩn thử Mẫu đen có tác dụng với vi khuẩn thử Mẫu chích mật có tác dụng với vi khuẩn thử Staphylococcus aureus Sarcina lutea Hình 10: Vịng vơ khuẩn Pen mẫu thử vi khuẩn GR(+) 2.4 Bàn luận - Dược liệu Hoàng cầm Trên thị trường xuất loại Hoàng cầm Rễ dài nhỏ Hoàng cầm Scutellaria baicalensis, mặt nhẵn mầu vàng nhạt, khơng có thớ vặn, chiều dài 15 – 22 cm, đường kính trung bình 0, – 1cm Thể chất dịn dễ bẻ Mặt bẻ mầu vàng, khơng có lõi mầu nâu Qua tài liệu Trung dược chí (TQ) có lồi Hồng cầm Vậy Hồng cầm có khác với Hồng cầm Scutellariabaicalensis thường dùng Y học cổ truyền (Xem phụ lục) - Qua nghiên cứu thành phần hố học hai loại Hồng cầm Scutellaria baicalensis Hoàng cầm mới, thấy giống flavonoid, SKLM vết giống (Xem phụ lục) - Việc chế biến Hoàng cầm Trong Y học cổ truyền dùng Hoàng cầm chế cho bệnh khác Qua việc chế biến, thành phần flavonoid tồn Về hàm lượng baicalin sản phẩm chế đạt với tiêu chuẩn D ĐVN III đề > 4% Do cho phép sở Y học cổ truyền chế biến Hồng cầm theo phương pháp đề có sở khoa học - Hoàng cầm vị thuốc thực tế Y học cổ truyền dùng để trị bệnh viêm nhiễm : Viêm phổi, viêm ruột, sốt cao… Qua tác dụng kháng khuẩn, thấy loại sản phẩm chế, có tác dụng kháng khuẩn tốt, đặc biệt vi khuẩn đường ruột, tụ cầu, trực khuẩn mủ xanh vi khuẩn liên quan đến bệnh mà Y học cổ truyền thường điều trị Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận Qua nghiên cứu thu mét sè kết sau: *Về dược liệu: Đã mơ tả đặc điểm hình thái, đặc điểm bét lồi Hồng Cầm mà chúng tơi nghiên cứu, thấy nã phù hợp với đặc điểm loài Scutellariabaicalensis ghi DĐVN III DĐCHND Trung Hoa *Về chế biến: Đã tiến hành chế biến Hoàng Cầm theo mét sè phương pháp vàng, đen, chích rượu, chích gừng, chích mật, loại cho hiệu suất chế biến khác *Về thành phần hoá học: Hồng Cầm dạng sống dạng chế đỊu có mặt Flavonoid Thành phần Flavonoid mẫu hầu nh không thay đổi Đã tiến hành định lượng hàm lượng baicalin theo phương pháp DĐVN III, thấy mẫu đạt tiêu chuẩn dượcđiển, hàm lượng baicalin > 4% Tuy nhiên loại HCĐ cho hàm lượng thấp 3,14% *Về tác dụng kháng khuẩn: Hồng Cầm sống Hồng Cầm chế có tác dụng kháng khuẩn nh nhau, riêng Hồng Cầm cháy có tác dụng kháng khuẩn giảm Kết nghiên cứu chứng minh việc chế biến Hoàng Cầm điều cần thiết, có ý nghĩa thực tiễn cho việc bảo quản, chiết xuất điều trị Qua phương pháp chế biến nói qua thử tác dụng sinh học, định lượng Flavonoid rút Hồng Cầm việc sử dụng phương pháp chích gừng, chích rượu, chích mật phù hợp dùng phương pháp để xây dùng tiêu chuẩn cho quy trình chế biến Hồng Cầm Riêng HCĐ nên chế biến có điều trị bệnh xuất huyết Đề xuất Tõ kết nghiên cứu, chúng tơi có mét số đề xuất sau: Hoàng Cầm vị thuốc nhập tõ Trung Quốc sử dụng lâu năm y học cổ truyền.Song việc nghiên cứu thành phần hoá học sau chế biến Việt Nam chưa ý nhiều, nên cần sâu nghiên cứu mặt này, để giúp cho việc tiêu chuẩn hoá sản phẩm chế Hồng cầm xác PHỤ LỤC Trên thị trường Việt Nam, vài năm gần đây, xuất loại Hồng cầm có nguồn gốc từ Trung Quốc Song hình dáng, mầu sắc, kíchthước rễ có nhiều điểm khác với lồi Scutellaria baicalensis Xem hình 11, 12 Hình 11: Rễ Hồng cầm Radix scutellariae Hình12: Rễ Hồng cầm mua P Lãn Ơng -Về thành phần hố học : Tiến hành chiết suất flavonoid theo phương pháp mô tả mục 2.2.3.1, với phản ứng ống nghiệm flavonoid trang 16, cho phản ứngdương tính SKLM: Hệ dung môi Toluen: Cloroform: aceton=8: 5: Hệ dung môi Toluen: Etylacetat: Acidformic = 5: 6: Sắc ký đồ biểu thị hình 11a, 11b, 12a, 12b Hệ dung môi Toluen: Cloroform: aceton=8: 5: 21 Hình 11a Hình 11b Hệ dung mơi Toluen: Etylacetat: acid formic = 5: 6: 1 Hình 12a 2 Hình12b Sắc ký đồ rễ Hồng cầm Radix Scutellaria rễHồng cầm mua Lãn Ơng Ghi chú: 1- Rễ Hoàng cầm Radix Scutellaria 2- Rễ Hồng cầm mua phố Lãn Ơng 3- Hình 11a, 12a hơ amoniac đặc 4- Hình 11b, 12b quan sát UV 254nm Nhận xét: Qua sắc ký đồ lớp mỏng hai loại Hồng cầm nói thấy lồi Hồng cầm có thị trường Việt Nam, cho thành phần hoá họctương tự với Hồng cầm Scutellaria baicalensis TÀI LIỆU THAM KHẢO 1.bộ mơn Dược học cổ truyền –Trường Đại học Dược Hà Nội (2000), Dược học cổ truyền, NXB yhọc 2.bộ môn Dược học cổ truyền - Trường Đại học Dược Hà Nội(2000),kỹ thuật chế biến bào chế thuốc cổ truyền, chế in trung tâmthông tin –thư viện ĐHDHN 3.bộ môn Dược học cổ truyền –Trường Đại học Dược Hà Nội (2003),tóm lược chế biến ứng dụng thuốc phiến trung dược, Phạm Xuân Sinh dịch chế vàin trung tâm thông tin –thư viện ĐHDHN môn Dược liệu- Trường Đại học Dược Hà Né (1998), Bài giảng Dược liệu,NXB y học 5.bộ môn dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội(1998), thực tập dược liệu, chế in trung tâm thông thư viện ĐHDHN 6.bộ y tế (2002),Dược điển Việt Nam III, NXB y học,tr 373 - 374 7.Võ Văn Chi, (1997),từ điển thuốc Việt Nam, NXB y học, tr 560 - 561 8.Nguyễn Văn Đàn,Nguyễn Viết Tựu (1985),phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, NXB y học Phạm Thị Hằng, (2004),Nghiên cứu ảnh hưởng chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học tác dụng sinh học cốt toái bổ, khoá luậntốt nghiệp Dược sĩ - Trường Đại học Dược Hà Nội 10.Đào Hữu Hồ, (1999),xác suất thống kê, nhà xuất Đại học quốc gia Hà Nội 11.Phạm Hoàng Hé, (1999),cây cỏ Việt Nam,NXB trẻ,tr 872,tập 12.Đỗ Tất Lợi, (1999),Những thuốc vị thuốc Việt Nam,NXB Y học,tr 311 314 13.Phạm xuân Sinh, (2006),phương pháp chế biến thuốc cổ truyền,NXB Yhọc 14.Trường Đại học Y Hà Nội, (1994),Y học cổ truyền NXB Y học Hà Nội 15.Nguyễn Thị Thu Thuỷ, (2002),Nghiên cứu thành phần hoá học tác dụng kháng khuẩn phương thuốc tam hồng thang, khố luận tốt nghiệp Dược sĩ – Trường Đại học Dược Hà Nội 16.từ điển bách khoa Dược học, (1999), NXB từ điển bách khoa, tr 299 - 300 17.Viện Dược liệu, (2006),phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ thảo dược,NXB khoa học kỹ thuật 18 Viện y học dân tộc thượng hải, (1990),380 thuốc đông y hiệu nghiệm,NXB Thanh Hố 19.Nguyễn Thị Hồi, (2007), Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hoá họcvà mét sè tác dụng hoá học lục thảo hoa thưa,luận án tiến sĩ Dược học 20.Miêu Minh Tam,Lý Chấn Quốc,Thực dụng đại-Kỹ thuật khống chế chất lượng trung dược  ... 3,14% *Về tác dụng kháng khuẩn: Hồng Cầm sống Hồng Cầm chế có tác dụng kháng khuẩn nh nhau, riêng Hoàng Cầm cháy có tác dụng kháng khuẩn giảm Kết nghiên cứu chứng minh việc chế biến Hoàng Cầm điều... -Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn vị thuốc Hoàng Cầm sống chế TỔNG QUAN 1.1.Mục đích chế biến thuốc cổ truyền Chế biến thuốc cổ truyền sử dụng phương pháp tổng hợp để làm biến đổi trạng... y học, tr 560 - 561 8.Nguyễn Văn Đàn,Nguyễn Viết Tựu (1985),phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, NXB y học Phạm Thị Hằng, (2004) ,Nghiên cứu ảnh hưởng chế biến cổ truyền đến thành phần hoá học