Luận án nghiên cứu một số dạng bất thường nhiễm sắc thể y ở nam giới khám vô sinh tại bệnh viện phụ sản thành phố cần thơ

LỜI CẢM ƠN Trước hết tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới Thầy PGS.TS Nguyễn Trung Kiên tận tình hướng dẫn, động viên tơi lúc gặp khó khăn tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình thực cơng trình nghiên cứu Tơi xin cảm ơn Ban chủ nhiệm, Thầy, Cô anh chị Bộ môn Sinh học Phân tử - Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Thầy Cô Trường Đại học Cần Thơ, người hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Đắc Khoa – Phó trưởng Bộ môn Sinh học Phân tử, PGS.TS Trần Nhân Dũng, PGS.TS Nguyễn Văn Thành, PGS.TS Trương Trọng Ngôn, PGS.TS Nguyễn Minh Chơn, TS Bùi Thị Minh Diệu, KS Trần Văn Bé Năm – Viện Công nghệ Sinh học – Trường Đại học Cần Thơ, PGS.TS Trần Ngọc Dung – Trường Đại học Y Dược Cần Thơ, TS Evguenia - Servicio de Huellas Digitales Geneticas, University of Buenos Aires, Argentina TS Ray Banks – International Society of Genetic Genealogy (ISOGG) nhiệt tình giúp đỡ hỗ trợ số nội dung nghiên cứu luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Khoa Sau đại học – Trường Đại học Cần Thơ tạo điều kiện cho thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Lãnh đạo Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, Lãnh đạo Bệnh viện Phụ sản Thành phố Cần Thơ anh chị em đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Xin chân thành cảm ơn anh, chị, em Khoa Hiếm muộn Khoa Xét nghiệm Di truyền Y học, bạn bè bạn khóa nghiên cứu sinh giúp đỡ động viên suốt thời gian thực luận án Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người bạn ngồi nước giúp đỡ tơi suốt thời gian học tập thực luận án Cuối cùng, xin dâng lên ba, mẹ sinh thành nuôi dưỡng con, ba mẹ chồng giúp đỡ tạo điều kiện cho xin chia sẻ niềm vui đến chồng thương yêu ủng hộ suốt thời gian thực luận án Cần Thơ, ngày tháng năm 2017 Nghiên cứu sinh Cao Thị Tài Nguyên MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN TÓM TẮT SUMMARY DANH SÁCH BẢNG, BIỂU, SƠ ĐỒ DANH SÁCH HÌNH DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT i ii iii v ix CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Giới hạn nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn 1.5 Những đóng góp luận án 1 2 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đại cương vơ sinh q trình sinh tinh 2.1.1 Một số khái niệm vô sinh vô sinh nam 2.1.2 Đại cương trình sinh tinh………… 2.2 Tinh dịch đồ số yếu tố liên quan đến vô sinh nam 2.2.1 Tinh dịch đồ …………………… 2.2.2 Một số yếu tố liên quan đến vô sinh nam 2.3 Nhiễm sắc thể Y số bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới vô sinh 2.3.1 Cấu trúc nhiễm sắc thể Y người 2.3.2 Một số dấu di truyền nhiễm sắc thể Y 2.3.3 Bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới vô sinh 2.4 Một số kỹ thuật dùng để phát nguyên nhân di truyền nam giới vô sinh .……………………… 2.4.1 Kỹ thuật di truyền tế bào 2.4.2 Kỹ thuật lai chỗ huỳnh quang 2.4.3 Kỹ thuật PCR đa mồi…… ……… 2.4.4 Kỹ thuật khuếch đại đầu dò phụ thuộc ghép nối 2.4.5 Kỹ thuật Realtime PCR 2.4.6 Kỹ thuật QF-PCR 2.4.7 Kỹ thuật giải trình tự…………… 2.5 Tình hình nghiên cứu số nguyên nhân vô sinh nam giới 2.5.1 Trên giới 4 9 12 12 16 19 24 24 25 25 26 26 27 29 30 30 2.5.2 Ở Việt Nam 32 34 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát 34 3.2 Đối tượng nghiên cứu 34 3.2.1 Tiêu chuẩn chọn mẫu 34 3.2.2 Tiêu chuẩn loại trừ 35 3.3 Cỡ mẫu 35 3.4 Phương pháp chọn mẫu 35 3.5 Thời gian địa điểm nghiên cứu 35 3.6 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 36 3.7 Phương pháp nghiên cứu 39 3.7.1 Xây dựng kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR để phát số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch 39 3.7.2 Xác định tỷ lệ số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch quy trình kỹ thuật QF-PCR xây dựng kiểm định 43 3.7.3 Mô tả đặc điểm tinh dịch đồ, nội tiết tố số yếu tố liên quan đến bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch 47 3.8 Y đức nghiên cứu 55 56 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Xây dựng kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR để phát số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch 56 4.1.1 Xây dựng quy trình kỹ thuật QF-PCR 56 4.1.2 Kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR 63 4.2 Xác định tỷ lệ số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch quy trình kỹ thuật QF-PCR xây dựng kiểm định 77 4.2.1 Các dạng đoạn AZF nhiễm sắc thể Y 80 4.2.2 Nhân đoạn gen DAZ 85 4.2.3 Hội chứng Klinefelter có bất thường nhiễm sắc thể Y 86 4.3 Mô tả đặc điểm tinh dịch đồ, nội tiết tố số yếu tố liên quan đến bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh có ≤ 5x106 tinh trùng /mL tinh dịch 87 4.3.1 Đặc điểm chung số yếu tố liên quan đến bất thường nhiễm sắc thể Y 87 4.3.2 Đặc điểm tinh dịch đồ 100 4.3.3 Đặc điểm nội tiết trục tuyến yên-tinh hoàn liên quan bất thường nhiễm sắc thể Y với nồng độ hormon 105 111 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận 111 5.2 Kiến nghị 111 112 TÀI LIỆU THAM KHẢO 131 PHỤ LỤC TÓM TẮT Luận án thực từ tháng 11/2014 đến 03/2017 với mục tiêu (1) xây dựng kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR để phát số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch; (2) xác định tỷ lệ số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch quy trình kỹ thuật QF-PCR xây dựng kiểm định (3) mô tả đặc điểm tinh dịch đồ, nội tiết tố số yếu tố liên quan đến bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch Nghiên cứu xây dựng thành cơng kit quy trình kỹ thuật QF-PCR dùng để phát số bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vơ sinh Quy trình kỹ thuật QF-PCR sử dụng kit với 14 dấu di truyền SRY, AMEL, TAF9B, sY84, sY86, sY127, sY134, sY254, sY255, sY1191, sY1192, sY1291, CDY DAZ Kết kiểm định thấy kit với 14 dấu di truyền quy trình kỹ thuật QF-PCR xây dựng tối ưu có độ tin cậy xác cao Tỷ lệ bất thường nhiễm sắc thể Y 35,1% nam giới khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch (113/322 trường hợp) Các bất thường nhiễm sắc thể Y gồm có đoạn AZF chiếm 94/113 trường hợp (83,2%), nhân đoạn gen DAZ chiếm 15/113 trường hợp (13,3%) 4/113 trường hợp nam giới mắc hội chứng Klinefelter có bất thường nhiễm sắc thể Y chiếm 3,5% Điểm luận án kiểu phần đoạn AZFc phát hiện: đoạn sY1191-sY1192, đoạn sY1291, gen DAZ - gen CDY1 gen CDY1 Bên cạnh đó, luận án ghi nhận nam giới vơ tinh chiếm 93/322 trường hợp (28,9%) Tỷ lệ đối tượng nghiên cứu có bất thường nội tiết 41,3% (133/322 trường hợp); tổn thương tế bào mầm nguyên phát gặp nhiều (59/133 trường hợp) Kết cho thấy nam giới tiếp xúc với hóa chất, thuốc trừ sâu có nguy bất thường nhiễm sắc thể Y cao gấp 1,64 lần so với nhóm khơng tiếp xúc, chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Ngồi ra, kết ghi nhận nam giới có bất thường nhiễm sắc thể Y nguy bất thường nồng độ hormon FSH, LH testosteron cao gấp 1,43; 1,2 1,39 lần so với nhóm khơng có bất thường nhiễm sắc thể Y, nhiên khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Từ khóa: AZF, khơng có tinh trùng, nhiễm sắc thể Y, QF-PCR, thiểu tinh nặng, vô sinh nam i SUMMARY The thesis was conducted from November 2014 to March 2017 with the objectives of (1) to set up and to assure the procedure of QF-PCR assay using for detecting some kinds of Y-chromosomal abnormalities in men with sperm concentration ≤ million/ml, (2) to determine the percentage of some kinds of Y-chromosomal abnormalities in men with sperm concentration ≤5 million/ml by the settled up and assured procedure of QF-PCR assay and (3) to describe characteristics of semenogram, endocrines and some factors related to Ychromosomal abnormalities in men with sperm concentration ≤ million/ml The study had been settled up the successful kit and protocol of QF-PCR assay used to detect some kinds of Y-chromosomal abnormalities in men seeking medical care for their fertility The kit and protocol of QF-PCR assay were used fourteenth markers such as SRY, AMEL, TAF9B, sY84, sY86, sY127, sY134, sY254, sY255, sY1191, sY1192, sY1291, CDY and DAZ Assuring results were shown that the protocol of settled up and optimized QFPCR assay with 14 genetic markers was highly reliable and accurate The incidence of Y-chromosomal abnormalities accounted for 35.1% (113/322 cases) Y-chromosomal abnormalities were figured out: AZF deletions were 94/113 cases (83.2%), DAZ duplications were 15/113 cases (13.3%) and 4/113 cases of Klinefelter syndrome having Y-chromosomal abnormalities (3.5%) The highlight in our data was four kinds of de novo partial AZFc deletions were detected as sY1191-sY1192 deletion, sY1291 deletion, two DAZ – one CDY1 deletion and one CDY1 deletion Moreover, azoospermic men accounted for 93/322 cases (28.9%) The percentage of patients had endocrine disruptors was 41.3% (133/322 cases), in which primary germ cell damage was the most common, accounted for 44.3% (59/133 cases) The study found that men exposed to chemicals and pesticides had a 1.64-fold higher risk of the Y-chromosomal abnormalities than those without exposed (p > 0.05) Men with the Y-chromosomal abnormalities had 1.43 times; 1.2 times and 1.39 times higher risk of reducing FSH, LH and testosterone levels than the others, respectively However, it was not statistically significant with p > 0.05 Keywords: A Z F , azoospermia, male infertility, QF–PCR, s e v e r e oligozoospermia, Y chromosome ii DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 2.1 Ngưỡng giá trị bình thường tinh dịch đồ Bảng 2.2 Các dấu di truyền dùng để xác định đoạn AZF 18 Bảng 2.3 Những dấu di truyền khác 19 Bảng 3.1A Các dấu di truyền dùng phát số dạng bất thường 38 nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.1B Một số đặc điểm dấu di truyền sY1291 LAPT 39 Bảng 3.2 Nhiệt độ gắn mồi dấu di truyền tham khảo 40 trang web NEB Bảng 3.3 Thành phần phản ứng QF-PCR set tối ưu để phát 41 số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.4 Thành phần phản ứng QF-PCR set tối ưu để phát 41 số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.5 Thành phần phản ứng QF-PCR set tối ưu để phát 42 số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.6 Thể tích pha lỗng sản phẩm PCR huỳnh quang 42 Bảng 3.7 Một số bất thường di truyền nhiễm sắc thể Y nam giới 46 khám vơ sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch Bảng 4.1 Số lượng vị trí đoạn gen khuếch đại cặp 59 mồi dấu di truyền sử dụng màu FAM Bảng 4.2 Số lượng vị trí đoạn gen khuếch đại cặp 61 mồi dấu di truyền sử dụng màu VIC Bảng 4.3 Số lượng vị trí đoạn gen khuếch đại cặp 63 mồi dấu di truyền sử dụng màu NED Bảng 4.4 Kích thước sản phẩm PCR huỳnh quang so với kích thước 65 sản phẩm PCR tham khảo NCBI Bảng 4.5 So sánh kết với nghiên cứu Plaseska et al (2011) 66 ngân hàng sở liệu NCBI Bảng 4.6 Tỷ lệ nam giới khám vơ sinh có bất thường nhiễm sắc thể Y 78 nhóm nam giới vơ tinh thiểu tinh nặng Bảng 4.7 Một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y đối tượng 79 nghiên cứu Bảng 4.8 Các dạng đoạn AZF đối tượng nghiên cứu 80 Bảng 4.9 Các kiểu phần đoạn AZFc đối tượng nghiên cứu 82 iii Bảng 4.10 Bảng 4.11 Bảng 4.12 Bảng 4.13 Bảng 4.14 Bảng 4.15 Bảng 4.16 Bảng 4.17 Bảng 4.18 Bảng 4.19 Bảng 4.20 Bảng 4.21 Bảng 4.22 Bảng 4.23 Bảng 4.24 Bảng 4.25 Bảng 4.26 Bảng 4.27 Bảng 4.28 Bảng 4.29 Bảng 4.30 Bảng 4.31 Bảng 4.32 Bảng 4.33 Bảng 4.34 Bảng 4.35 Bảng 4.36 So sánh tuổi nam giới khám vô sinh số nghiên cứu Nhóm tuổi đối tượng nghiên cứu Liên quan tuổi với bất thường nhiễm sắc thể Y Nghề nghiệp đối tượng nghiên cứu Liên quan nghề nghiệp có tiếp xúc với hóa chất, thuốc trừ sâu với bất thường nhiễm sắc thể Y Phân loại vô sinh nguyên phát thứ phát đối tượng nghiên cứu Thời gian vô sinh đối tượng nghiên cứu Thói quen để điện thoại di động đối tượng nghiên cứu Thời gian sử dụng điện thoại di động đối tượng nghiên cứu Tiền sử quai bị đối tượng nghiên cứu BMI đối tượng nghiên cứu Liên quan BMI với bất thường nhiễm sắc thể Y Thể tích tinh hồn đối tượng nghiên cứu Bất thường bìu đối tượng nghiên cứu Liên quan giãn tĩnh mạch thừng tinh với bất thường nhiễm sắc thể Y Đặc điểm pH tinh dịch đối tượng nghiên cứu Đặc điểm thể tích tinh dịch đối tượng nghiên cứu Đặc điểm mật độ tinh trùng đối tượng nghiên cứu Tỷ lệ nam giới vô tinh thiểu tinh nặng nghiên cứu Đặc điểm thông số tinh trùng nhóm nam giới thiểu tinh nặng Nồng độ hormon FSH đối tượng nghiên cứu Liên quan bất thường nhiễm sắc thể Y với nồng độ FSH Nồng độ hormon LH đối tượng nghiên cứu Liên quan bất thường nhiễm sắc thể Y với nồng độ LH Nồng độ hormon testosteron đối tượng nghiên cứu Liên quan bất thường nhiễm sắc thể Y với nồng độ testosteron Phân loại kết xét nghiệm nội tiết đối tượng nghiên cứu iv 88 88 89 90 91 91 92 93 93 94 95 96 97 99 99 100 101 102 102 103 105 105 106 107 107 108 110 DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1A Hình 2.1B Hình 2.2 Hình 2.3 Hình 2.4 Hình 2.5 Hình 2.6 Hình 2.7 Hình 2.8 Hình 2.9 Hình 2.10 Hình 2.11 Hình 2.12 Hình 2.13 Hình 2.14 Hình 2.15 Hình 2.16 Hình 2.17 Hình 2.18 Hình 2.19 Hình 3.1 Hình 4.1 Hình 4.2 Hình 4.3 Hình 4.4 Trang Cấu tạo máy sinh dục nam Cấu tạo bên tinh hoàn mào tinh hoàn Thiết đồ cắt ngang tinh hồn Q trình phát triển tế bào mầm nam giới Vị trí vùng hạ đồi, giao thoa thị giác tuyến yên Vai trò trục vùng hạ đồi-tuyến yên-tinh hoàn Ảnh hưởng thuốc đến khả sinh sản nam 11 giới Cấu trúc nhiễm sắc thể Y 12 Vị trí gen đoạn AZFa 13 Các đoạn ADN lặp đối xứng đảo ngược amplicon 14 đoạn AZFb AZFc Nhóm gen có trình tự đơn nhóm gen có trình tự lặp 14 đoạn AZFb Các tiểu amplicon tham gia cấu tạo đoạn AZFc 15 nhóm gen đoạn AZFc Cấu trúc gen DAZ người với màu thể cho 16 trình tự lặp khác Vị trí sản phẩm đoạn ADN khuếch đại cặp 17 mồi 13 dấu di truyền nhiễm sắc thể Y Các kiểu phần đoạn AZFc 22 Cấu trúc dạng đoạn AZF nhiễm sắc thể Y 23 nam giới Kết QF-PCR máy phân tích di truyền ABI 3500 27 Kết QF-PCR người bình thường (A, B) người thể 28 tam nhiễm (C, D) Thể tam nhiễm người có alen đồng hợp tử 28 Nguyên lý giải trình tự 29 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát 34 Kết QF-PCR nhóm dấu di truyền sử dụng màu 58 FAM Kết QF-PCR nhóm dấu di truyền sử dụng màu 60 VIC Sự đa hình chiều dài sản phẩm PCR huỳnh quang 62 khuếch đại cặp mồi dấu di truyền sY1291 Kết QF-PCR nhóm dấu di truyền sử dụng màu 62 v Hình 4.5 Hình 4.6 Hình 4.7 Hình 4.8 Hình 4.9 Hình 4.10 Hình 4.11 Hình 4.12A Hình 4.12B Hình 4.13A Hình 4.13B Hình 4.13C Hình 4.13D Hình 4.14 Hình 4.15A Hình 4.15B Hình 4.15C NED Kết QF-PCR mẫu chứng dương nam giới mắc hội chứng Klinefelter Kết QF-PCR mẫu chứng dương nam giới bị hoàn toàn đoạn AZFc Kết QF-PCR lâm sàng nam giới mắc hội chứng Klinefelter mẫu 97 Nam giới mắc hội chứng Klinefelter có karyotype 47,XXY xác định kỹ thuật nuôi cấy bạch cầu lympho máu ngoại vi Kết kiểm định mẫu ADN nam giới khơng có đoạn AZF kỹ thuật QF-PCR theo kit Devyser Kết điện di gel agarose mẫu ADN 100 207 cặp mồi sY1292 LAPT (M: thang chuẩn) Kết điện di gel agarose sản phẩm PCR mẫu ADN khuếch đại cặp mồi LAPT từ line 1-9, line thang chuẩn Độ tương đồng trình tự nucleotid tham khảo (REF) trình tự nucleotid mẫu (SA100) với kích thước đoạn gen khuếch đại 527 bp Độ tương đồng trình tự nucleotid tham khảo (REF) trình tự nucleotid mẫu (SA207) với kích thước đoạn gen khuếch đại 507 bp Kết giải trình tự đoạn mồi xi đoạn gen khuếch đại sY1291 có kích thước 527 bp Kết giải trình tự đoạn mồi ngược đoạn gen khuếch đại sY1291 có kích thước 527 bp Kết giải trình tự đoạn mồi xi đoạn gen khuếch đại sY1291 có kích thước 507 bp Kết giải trình tự đoạn mồi ngược đoạn gen khuếch đại sY1291 có kích thước 507 bp Trình tự nucleotid đoạn gen dài 527 bp khuếch đại cặp mồi sY1291 Kết giải trình tự đoạn mồi ngược đoạn gen khuếch đại LAPT mẫu 207 Kết giải trình tự đoạn mồi ngược đoạn gen khuếch đại LAPT mẫu 122 Kết giải trình tự đoạn mồi ngược đoạn gen khuếch đại LAPT mẫu 327 vi 67 68 69 69 70 71 72 72 73 74 74 74 74 75 76 76 76 MÃ PHIẾU HỌ VÀ TÊN KẾT QUẢ TỶ LỆ HOẶC VỊ TRÍ CÁC PEAK CỦA SẢN PHẨM PCR HUỲNH QUANG NĂM MÃ SINH DNA AMELX/ SRY TAF9B3/ CDY2/ DAZ/ sY84 sY86 sY127 sY134 sY1192 sY1191 sY254 sY255 sY1291 AMELY TAF9BX CDY1 DAZL KẾT LUẬN XÉT NGHIỆM DI TRUYỀN VS186 Tô Huy C 1984 187 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS187 Trần Ngọc T 1990 188 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS188 Nguyễn Hồi G 1984 189 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS189 Đỗ H 1985 190 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 512 Bình thường VS190 Nguyễn Thái S 1984 191 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS191 Nguyễn Duy L 1980 192 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS192 Lê Thanh B 1976 193 1/1 + 2/1 2/2 6/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS193 Phạm Thanh V 1994 194 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS194 Hồng Đình T 1976 195 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS195 Phan Văn S 1984 196 2/0 - 2/2 0/0 0/2 - - - - - - - - - Nam 46,XX âm tính với SRY VS196 Lý Văn T 1979 197 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS197 Nguyễn Thanh N 1981 198 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS198 Trần Văn U 1989 199 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS199 Lý Trù S 1970 200 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS200 Phạm Thanh P 1990 201 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS201 Vũ Anh T 1986 202 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS202 Nguyễn Thanh L 1976 203 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS203 Nguyễn Lê Anh T 1989 204 1/1 + 2/1 2/2 8/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS204 Dương Xuân V 1988 205 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS205 Huỳnh Công Đ 1989 206 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS206 Huỳnh Thanh L 1995 207 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS207 Ơng Minh T 1982 208 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS208 Nguyễn Văn Đ 1988 209 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + - - + + 507 Mất phần AZFc kiểu b2/b3 VS209 Trần Trung K 1976 210 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + - - + + 512 Mất phần AZFc kiểu sY1191-sY1192 VS210 Mai Trung H 1985 211 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS211 Ngơ Văn T 1987 212 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường MÃ PHIẾU HỌ VÀ TÊN KẾT QUẢ TỶ LỆ HOẶC VỊ TRÍ CÁC PEAK CỦA SẢN PHẨM PCR HUỲNH QUANG NĂM MÃ SINH DNA AMELX/ SRY TAF9B3/ CDY2/ DAZ/ sY84 sY86 sY127 sY134 sY1192 sY1191 sY254 sY255 sY1291 AMELY TAF9BX CDY1 DAZL KẾT LUẬN XÉT NGHIỆM DI TRUYỀN VS212 Phạm Nguyễn T 1980 213 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS213 Nguyễn Việt T 1990 214 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS214 Phạm Quang N 1984 215 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS215 Lê Hồng M 1981 216 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + - - + + 507 Mất phần AZFc kiểu b2/b3 VS216 Trương Ánh S 1989 217 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS217 Phạm Văn X 1975 218 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS218 Nguyễn Hồng P 1991 219 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS219 Nguyễn Văn Q 1985 220 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS220 Đỗ Quốc T 1982 221 1/1 + 2/1 0/0 0/2 + + - - - - - - - Mất hoàn toàn đoạn AZFbc VS221 Nguyễn Lê Minh N 1989 222 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS222 Nguyễn Thành V 1984 223 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS223 Danh Thanh D 1983 224 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS224 Hà Văn L 1984 225 2/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Klinefelter VS225 Bùi Văn H 1987 226 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS226 Trần Vũ Đ 1984 227 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS227 Nguyễn Tấn L 1983 228 1/1 + 2/1 2/0 0/2 + + + + - - - - - Mất hoàn toàn AZFc VS228 Nguyễn Tuấn V 1994 229 2/1 + 2/2 2/2 8/2 + + + + + + + + 507 Klinefelter kết hợp với nhân đoạn DAZ VS229 Trương Hoàng S 1986 230 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần đoạn AZFc kiểu DAZ - CDY1 VS230 Tạ Huy K 1985 231 1/1 + 2/1 2/2 6/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS231 Võ Văn H 1984 232 1/1 + 2/1 2/2 8/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS232 Trần Minh T 1973 233 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS233 Trần Văn H 1984 234 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS234 Đồn Quốc T 1981 235 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS235 Nơng Văn B 1987 236 1/1 + 2/1 2/2 6/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS236 Huỳnh Phước H 1990 237 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS237 Nguyễn Phùng M 1992 238 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường MÃ PHIẾU HỌ VÀ TÊN KẾT QUẢ TỶ LỆ HOẶC VỊ TRÍ CÁC PEAK CỦA SẢN PHẨM PCR HUỲNH QUANG NĂM MÃ SINH DNA AMELX/ SRY TAF9B3/ CDY2/ DAZ/ sY84 sY86 sY127 sY134 sY1192 sY1191 sY254 sY255 sY1291 AMELY TAF9BX CDY1 DAZL KẾT LUẬN XÉT NGHIỆM DI TRUYỀN VS238 Nguyễn Hoàng M 1982 239 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS239 Lê Chí N 1990 240 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ - CDY1 VS240 Quách Thanh P 1988 241 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 527 Bình thường VS241 Trần Văn K 1991 242 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS242 Nguyễn Khánh H 1988 243 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ - CDY1 VS243 Lý Văn T 1991 244 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS244 Trương Văn T 1972 245 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS245 Đinh Hồng M 1986 246 1/1 + 2/1 2/2 6/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS246 Từ Minh Đ 1987 247 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS247 Nguyễn Phú L 1984 248 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS248 Nguyễn Thanh P 1984 249 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS249 Nguyễn Duy T 1986 250 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + - - + + 507 Mất phần AZFc kiểu b2/b3 VS250 Lê Hoài H 1984 251 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS251 Lê Văn H 1984 252 1/1 + 2/1 2/2 8/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS252 Trần Văn Đ 1985 253 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS253 Huỳnh Văn Đ 1985 254 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS254 Nguyễn Thanh N 1987 255 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ -1 CDY1 VS255 Nguyễn Thanh P 1984 256 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS256 Huỳnh Tuấn A 1991 257 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS257 Diệp Minh T 1985 258 1/1 + 2/1 2/0 0/2 + + + + - - - - - Mất hoàn toàn AZFc VS258 Trần Văn T 1978 259 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS259 Bùi Nguyễn Duy K 1991 260 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS260 Huỳnh Minh T 1985 261 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS261 Đậu Đức L 1987 262 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS262 Võ Quốc T 1992 263 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS263 Trần Bảo T 1983 264 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS264 Trần Văn N 1984 265 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường MÃ PHIẾU HỌ VÀ TÊN KẾT QUẢ TỶ LỆ HOẶC VỊ TRÍ CÁC PEAK CỦA SẢN PHẨM PCR HUỲNH QUANG NĂM MÃ SINH DNA AMELX/ SRY TAF9B3/ CDY2/ DAZ/ sY84 sY86 sY127 sY134 sY1192 sY1191 sY254 sY255 sY1291 AMELY TAF9BX CDY1 DAZL KẾT LUẬN XÉT NGHIỆM DI TRUYỀN VS265 Nguyễn Trường G 1981 266 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS266 Nguyễn Thanh B 1972 267 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS267 Nguyễn Văn T 1996 269 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS268 Nguyễn Thành N 1991 270 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS269 Ngũ Thăng K 1982 271 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS270 Nguyễn Hiếu V 1979 272 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ - CDY1 VS271 Nguyễn Minh T 1985 273 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS272 Trần Văn T 1991 274 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS273 Lê Minh D 1993 275 1/1 + 2/2 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS274 Lê Hoàng K 1985 276 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS275 Trần Thanh T 1983 277 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS276 Lê Văn T 1983 278 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS277 Ngơ Hồng V 1976 279 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS278 Huỳnh Hoàng H 1988 280 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + - - + + 507 Mất phần AZFc kiểu sY1191-sY1192 VS279 Nguyễn Thanh C 1988 281 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS280 Nguyễn Công D 1981 282 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS281 Nguyễn Vũ D 1986 283 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS285 Bùi Quốc B 1988 286 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS286 Lm Sung H 1974 287 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + - - + + 507 Mất phần AZFc kiểu sY1191-sY1192 VS287 Tăng Và Q 1990 288 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu sY1291 VS288 Lê Văn P 1981 289 1/1 + 2/2 2/0 0/2 + + + + - - - - - Mất hoàn toàn AZFc VS289 Nguyễn Trọng H 1989 290 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS290 Nguyễn Xuân H 1989 291 1/1 + 2/2 2/2 8/2 + + + + + + + + 507 Nhân đoạn DAZ VS291 Trần Hoàng Khắc C 1993 292 1/1 + 2/2 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS292 Bùi Hữu N 1984 293 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 527 Bình thường VS293 Nguyễn Ngọc P 1989 294 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS294 Nguyễn Công T 1992 295 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS295 Hoàng Hải S KẾT QUẢ TỶ LỆ HOẶC VỊ TRÍ CÁC PEAK CỦA SẢN PHẨM PCR HUỲNH QUANG NĂM MÃ SINH DNA AMELX/ SRY TAF9B3/ CDY2/ DAZ/ sY84 sY86 sY127 sY134 sY1192 sY1191 sY254 sY255 sY1291 AMELY TAF9BX CDY1 DAZL 1983 296 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 VS296 Đặng Chí T 1988 297 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS297 Nguyễn Văn P 1991 298 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS282 Huỳnh Ngọc U 1989 299 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS298 Phù Tiết D 1989 300 1/1 + 2/1 2/0 0/2 + + + + - - - - - Mất hoàn toàn AZFc VS299 Vũ Minh T 1990 301 1/1 + 2/1 2/1 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS184 Trần Thái P 1980 302 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS302 Nguyễn Thành T 1981 303 11 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + - Mất phần AZFc kiểu gr/gr VS284 Trần Chí K 1985 304 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS283 Đào Duy C 1984 305 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS300 Đặng Văn Q 1988 306 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 512 Bình thường VS301 Lê Văn M 1988 307 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS303 Lê Quang N 1977 308 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS304 Lê Thanh G 1992 309 1/1 + 2/2 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS305 Nguyễn Tấn T 1987 310 1/1 + 2/1 2/0 0/2 + + + + - - - - - Mất hoàn toàn AZFc VS306 Trần Tuấn T 1987 311 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS307 Phạm Phước T 1983 312 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS308 Đồng Phương T 1987 313 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS309 Nguyễn Trung H 1993 314 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS310 Phạm Hồng G 1995 315 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường VS311 Nguyễn Nhựt N 1980 321 1/1 + 2/1 0/0 0/2 + + - - - - - - - Mất hoàn toàn đoạn AZFbc VS312 Nguyễn Văn T 1983 322 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS313 Nguyễn H 1975 323 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS314 Huỳnh Ngọc T 1989 324 1/1 + 2/1 2/2 2/2 + + + + + + + + 507 Mất phần AZFc kiểu DAZ VS315 Trần Trung D 1982 325 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS316 Lê Hồng K 1987 326 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 507 Bình thường VS317 Nguyễn Hoàng K 1982 327 1/1 + 2/1 2/2 4/2 + + + + + + + + 523 Bình thường MÃ PHIẾU HỌ VÀ TÊN KẾT LUẬN XÉT NGHIỆM DI TRUYỀN Bình thường ... 2.2.2 Một số y? ??u tố liên quan đến vô sinh nam 2.3 Nhiễm sắc thể Y số bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới vô sinh 2.3.1 Cấu trúc nhiễm sắc thể Y người 2.3.2 Một số dấu di truyền... phát 41 số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.4 Thành phần phản ứng QF-PCR set tối ưu để phát 41 số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y nam giới khám vô sinh Bảng 3.5 Thành. .. thường nhiễm sắc thể giới g? ?y vô sinh cần sử dụng ADN dị nhiễm sắc thể X Y Như v? ?y, nam giới vô sinh có cơng thức nhiễm sắc thể 47,XXY phát tín hiệu huỳnh quang nhiễm sắc thể X nhiễm sắc thể Y màu