Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.Nghiên cứu và ứng dụng xạ khuẩn trong phòng trị bệnh đạo ôn hại lúa do nấm Pyricularia oryzae Cav. trên vùng đất nhiễm mặn.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT Mã ngành: 62620112 ĐẶNG NGUYỆT QUẾ NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG XẠ KHUẨN TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH ĐẠO ÔN HẠI LÚA DO NẤM Pyricularia oryzae Cav TRÊN VÙNG ĐẤT NHIỄM MẶN Cần Thơ, 2023 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ Người hướng dẫn chính: PGS.TS Lê Minh Tường Người hướng dẫn phụ: PGS.TS Trần Thị Thu Thuỷ Luận án bảo vệ trước hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp trường Họp tại: Phòng Bảo vệ luận án tiến sĩ (Phòng họp 3, lầu 2, Nhà điều hành), Khu II – Trường Đại học Cần Thơ) Vào lúc 00 phút, ngày 03 tháng năm 2022 Phản biện 1: PGS.TS Phạm Văn Dư Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Thị Thu Nga Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Trung tâm Học liệu, Trường Đại học Cần Thơ Thư viện Quốc gia Việt Nam DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ Các báo đăng Tạp chí: Đặng Nguyệt Quế, Lê Minh Tường Trần Thị Thu Thuỷ, 2019 Khảo sát đặc tính số chủng xạ khuẩn nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn lúa vùng đất nhiễm mặn Tạp chí Nơng nghiệp & Phát triển nơng thơn Chuyên đề Công nghệ sinh học nông nghiệp Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn Tháng 05/2019, trang 81-86 Đặng Nguyệt Quế, Lê Minh Tường Trần Thị Thu Thuỷ, 2019 Định danh xạ khuẩn có triển vọng phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa vùng đất nhiễm mặn Tạp chí khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Số (103)/2019, trang 125129 Đặng Nguyệt Quế, Lê Minh Tường Trần Thị Thu Thuỷ, 2021 Đánh giá khả phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa canh tác vùng đất nhiễm mặn số chủng xạ khuẩn điều kiện nhà lưới Tạp chí Bảo vệ thực vật Viện Bảo vệ thực vật Số (298)/2021, trang 21-27 CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Lý chọn đề tài Bệnh đạo ôn nấm Pyricularia oryzae (P oryzae) gây ba loại bệnh chủ yếu ảnh hưởng lớn đến suất chất lượng lúa phạm vi toàn giới (Dean et al., 2012; Gao et al., 2019; Chen et al., 2021) Bệnh nấm P oryzae công tất phận lúa, gây thiệt hại lên đến hàng trăm triệu lúa năm (Wang, 2009) Tại Bạc Liêu, bệnh đạo ôn gây thiệt hại diện rộng khắp mùa vụ với nhiều mức độ khác Đặc biệt ruộng nhiễm mặn canh tác lúa tôm, bệnh đạo ôn xuất gây hại tương đối sớm lan nhanh không phun thuốc kịp thời Trong đó, việc sử dụng thuốc hố học ảnh hưởng nhiều đến tơm xanh nuôi ruộng lúa vụ tôm luân canh Với mục tiêu trì phát triển mơ hình canh tác lúa tơm hiệu bền vững, thích ứng với biến đổi khí hậu, hướng đến sản xuất lúa tơm an tồn đạt tiêu chuẩn xuất khẩu, cần phải nghiên cứu tìm giải pháp sinh học để quản lý bệnh đạo ôn hiệu quả, tiến đến xây dựng quy trình quản lý tổng hợp bệnh đạo ơn hại lúa mơ hình canh tác lúa tôm vùng đất nhiễm mặn Về biện pháp sinh học, thời gian qua cho thấy việc nghiên cứu ứng dụng xạ khuẩn xem giải pháp đầy triển vọng có nhiều tiềm thay thuốc hóa học để phịng trị bệnh đạo ơn, hướng đến nơng nghiệp an tồn bền vững Nhiều cơng trình khoa học có giá trị ứng dụng xạ khuẩn để phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa cơng bố tạp chí nước quốc tế (Tường & Em, 2014; Khalil et al., 2014; Lan ctv., 2015, 2016; Awla et al., 2016, 2017; Law et al., 2017; Gao et al., 2019) Tuy nhiên, hầu hết nghiên cứu xạ khuẩn thực phịng thí nghiệm, số nghiên cứu thực nhà lưới đồng chưa có cơng trình nghiên cứu ứng dụng xạ khuẩn phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa đất nhiễm mặn Do đó, đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng xạ khuẩn phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa nấm Pyricularia oryzae Cav vùng đất nhiễm mặn” thực cần thiết 1.2 Mục tiêu nghiên cứu (i) Chọn chủng xạ khuẩn có khả chịu mặn đối kháng tốt với nấm Pyricularia oryzae điều kiện phịng thí nghiệm (ii) Nghiên cứu chế đối kháng thông qua khả tiết enzyme phân giải chitin β-1,3-glucan chủng xạ khuẩn có triển vọng (iii) Định danh chủng xạ khuẩn có triển vọng đến mức độ lồi (iv) Đánh giá khả phịng trị bệnh đạo ơn chủng xạ khuẩn điều kiện nhà lưới (v) Đánh giá hiệu phịng trị bệnh đạo ơn chủng xạ khuẩn chịu mặn chọn điều kiện đồng 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn Đề tài có ý nghĩa khoa học thực tiển cao, kết đạt đề tài tìm chủng xạ khuẩn có khả phịng trị bệnh đạo ôn hại lúa nấm P oryzae gây vùng đất nhiễm mặn Kết nghiên cứu làm tiền đề cho nghiên cứu sau nhằm tìm chế phẩm sinh học từ xạ khuẩn chịu mặn, ứng dụng vào quy trình quản lý tổng hợp bệnh đạo ôn lúa vùng đất nhiễm mặn, vừa hiệu quả, vừa thân thiện với mơi trường, góp phần phát triển mơ hình lúa tơm bền vững 1.4 Tính luận án - Luận án tuyển chọn chủng xạ khuẩn chịu mặn (S06MBL, S09-MBL S17-MBL) có hiệu phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa điều kiện nhà lưới Chọn chủng S09-MBL S17-MBL có hiệu phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa điều kiện ngồi đồng đất nhiễm mặn Bạc Liêu - Khả đối kháng chủng xạ khuẩn S06-MBL, S09-MBL S17-MBL nấm P oryzae có liên quan đến khả tiết hai loại enzyme chủ yếu việc phân huỷ vách tế bào nấm bệnh đạo ôn enzyme chitinase enzyme β-1,3-glucanase - Đã xác định loài chủng xạ khuẩn: S06-MBL loài Streptomyces fradiae, S09-MBL loài Streptomyces bikiniensis S17MBL loài Streptomyces lavendulae, loài khác với loài xạ khuẩn nghiên cứu phịng trừ bệnh đạo ơn trước CHƯƠNG 2: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu - Thời gian: thực từ tháng 10/2015 đến tháng 2/2019 - Địa điểm: Phịng thí nghiệm nhà lưới Bộ môn Bảo vệ thực vật, trường Đại học Cần Thơ; trường Đại học Bạc Liêu ruộng lúa nhiễm mặn Hồng Dân, Bạc Liêu 2.2 Vật liệu thí nghiệm: nấm P oryzae gây bệnh đạo ôn xạ khuẩn 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Nội dung 1: Thu thập, phân lập đánh giá khả gây hại dịng nấm P oryzae gây bệnh đạo ơn hại lúa - Thu thập, phân lập nấm P oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa vùng nhiễm mặn tỉnh ĐBSCL: Điều tra, thu thập mẫu lúa bị bệnh đạo ôn ruộng lúa tôm Bạc Liêu, Cà Mau, Kiên Giang Hậu Giang; phân lập nuôi cấy nấm P oryzae Bộ môn Bảo vệ thực vật, Đại học Cần Thơ theo phương pháp Burgess et al (2009) Xác định nấm P oryzae dựa đặc điểm hình thái dịng nấm so với đặc điểm nấm P oryzae mô tả Agrios (2005), Zhang et al (2014) - Đánh giá khả gây hại dòng nấm P oryzae phân lập điều kiện nhà lưới: Cây lúa giai đoạn 18 ngày sau gieo tiến hành lây bệnh nhân tạo (LBNT) Phun huyền phù bào tử nấm P oryzae ướt tán với mật số 105 bào tử/ml vào buổi chiều mát (lượng phun 10 ml/chậu) Các chậu lúa sau lây bệnh đặt phòng ủ bệnh (nhiệt độ 260C, ẩm độ 96-98%) 24 giờ, sau chuyển nhà lưới có hệ thống phun sương che mát giảm 50% ánh sáng để tạo điều kiện cho nấm bệnh phát triển Chỉ tiêu ghi nhận tỷ lệ diện tích nhiễm bệnh số bệnh thời điểm 4, 6, 8, 10, 12 14 ngày sau LBNT 2.3.2 Nội dung 2: Thu thập, phân lập đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn có nguồn gốc từ đất trồng lúa nhiễm mặn nấm P oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa - Thu thập phân lập xạ khuẩn từ đất trồng lúa nhiễm mặn: Mẫu đất lấy xung quanh vùng rễ lúa, cách bề mặt 10-25 cm phân lập phịng thí nghiệm thuộc Bộ môn Bảo vệ thực vật, Khoa Nông nghiệp, Đại học Cần Thơ theo phương pháp Hsu & Lockwood (1975) - Đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm P oryzae điều kiện phịng thí nghiệm: Cho khoanh giấy thấm trùng vào dung dịch huyền phù xạ khuẩn (mật số 108cfu/ml), lắc dung dịch Dùng kẹp chuyên dụng đưa khoanh giấy thấm lên thành, để Đặt khoanh giấy thấm (Ø = mm) có tẩm xạ khuẩn đối diện với khoanh nấm P oryzae cách thành đĩa cm Ở nghiệm thức đối chứng thay khoanh giấy thấm tẩm xạ khuẩn khoanh giấy thấm tẩm nước cất trùng Chỉ tiêu theo dõi đo bán kính vịng vơ khuẩn thời điểm 3, 5, ngày sau thí nghiệm - Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn có triển vọng nấm P oryzae điều kiện có bổ sung muối NaCl: thực giống thí nghiệm trên, khác mơi trường thí nghiệm có bổ sung muối NaCl (2g/l) Chỉ tiêu ghi nhận là: đo BKVVK thời điểm 3, 5, 7, 11 NSTN - Khảo sát khả ức chế bào tử nấm P oryzae mọc mầm chủng xạ khuẩn triển vọng: Nghiệm thức xử lý xạ khuẩn: Cho 500 µl huyền phù xạ khuẩn (108 cfu/ml) + 500 µl huyền phù nấm (5x105 bào tử /ml) vào ống eppendorft để nhiệt độ 28oC, nghiệm thức với lần lặp lại Nghiệm thức đối chứng: Cho 500 µl nước cất vơ trùng + 500 µl huyền phù bào tử nấm (5x105 bào tử/ml) vào ống eppendorft để nhiệt độ 25oC Ghi nhận tiêu: Tỷ lệ bào tử nấm mọc mầm thời điểm 6, 12 24 sau thí nghiệm quan sát kính hiển vi 2.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu chế có liên quan đến khả đối kháng chủng xạ khuẩn triển vọng nấm P oryzae - Khảo sát khả tiết enzyme chitinase phân giải chitin chủng xạ khuẩn mơi trường thạch: Thí nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với nghiệm thức chủng xạ khuẩn có triển vọng lần lặp lại thực theo phương pháp Dai et al (2011) Nguyễn Thị Hà (2012) - Xác định hàm lượng enzyme chitinase tiết chủng xạ khuẩn thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí hồn toàn ngẫu nhiên nhân tố với lần lặp lại thực theo phương pháp Dai et al (2011) Nguyễn Thị Hà (2012) - Khảo sát khả tiết enzyme β-glucanase phân giải β-glucan chủng xạ khuẩn mơi trường thạch: Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên với nghiệm thức chủng xạ khuẩn triển vọng với lần lặp lại Thí nghiệm thực theo phương pháp Renwich et al (1991) - Xác định hàm lượng enzyme β-glucanase tiết chủng xạ khuẩn: Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên nhân tố, số nghiệm thức số chủng xạ khuẩn với lần lặp lại thực theo phương pháp Renwich et al (1991) 2.3.4 Nội dung 4: Định danh đến lồi chủng xạ khuẩn có triển vọng phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa vùng đất nhiễm mặn - Định danh xạ khuẩn dựa vào đặc điểm ni cấy, đặc điểm hình thái đặc điểm sinh lý sinh hóa * Quan sát màu sắc hệ sợi khí sinh, hệ sợi chất sắc tố tan: tiến hành theo phương pháp Shirling & Gottlieb (1966) * Quan sát cuống sinh bào tử hình dạng bề mặt bào tử: tiến hành theo phương pháp Tresner et al (1961) * Khả tiết enzym protease chủng xạ khuẩn: thực theo phương pháp Mitra & Chakrabartty (2005) * Khả tiết enzym lipase chủng xạ khuẩn: thực theo phương pháp Ertuğrul et al (2007) * Khả tiết enzym amylase chủng xạ khuẩn: thực theo phương pháp Santos et al (2012) * Sự hình thành sắc tố melanin chủng xạ khuẩn: thực theo phương pháp Shirling & Gottlieb (1966) * Khảo sát khả chịu muối chủng xạ khuẩn: thực lấy tiêu dựa theo phương pháp Bùi Thị Hà (2008) - Định danh đến loài chủng xạ khuẩn phương pháp sinh học phân tử Tách chiết DNA xạ khuẩn thực theo phương pháp Weisburg et al., (1991) Cặp mồi sử dụng để khuyếch đại đoạn gen 16S-rRNA chủng xạ khuẩn nghiên cứu là: 1492R: 5’TACGGTTACCTTGTTACGACT-3’và 27F: 5’-AGAGTTTGATCCTGGCTC-3’ Mẫu phân tích giải trình tự hệ thống máy ABI 3130XL Phân tích kết phần mềm sequecing analysis 6.0 so sánh với kết ngân hàng gen để xác định tên xạ khuẩn 2.3.5 Nội dung 5: Đánh giá khả phịng trị bệnh đạo ơn chủng xạ khuẩn triển vọng điều kiện nhà lưới - Địa điểm: thí nghiệm thực nhà lưới khoa Nông nghiệp, trường Đại học Bạc Liêu - Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên gồm 14 nghiệm thức (12 nghiệm thức sử dụng xạ khuẩn nghiệm thức đối chứng) với lần lặp lại - Chỉ tiêu theo dõi: đếm số vết bệnh đạo ôn theo phương pháp Pinnschmidt et al., (1993), đo chiều dài chiều rộng lá, tính tỷ lệ diện tích nhiễm bệnh, số bệnh hiệu giảm bệnh thời điểm 4, 6, 8, 10, 12 14 ngày sau lây bệnh nhân tạo 2.3.6 Nội dung 6: Đánh giá khả phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa hai chủng xạ khuẩn triển vọng điều kiện ngồi đồng Thí nghiệm đồng thực vụ: Vụ mùa 2017 ruộng nông dân xã Ninh Thạnh Lợi, Hồng Dân, Bạc Liêu từ tháng 9/2017 đến tháng 12/2017 với diện tích 2.200 m2, bố trí khối hồn tồn ngẫu nhiêm nhân tố, lần lặp lại Vụ mùa 2018 thực Xã Ninh Hòa, Hồng Dân, Bạc Liêu từ tháng 10/2018 đến tháng 01/2019 với diện tích 2.700 m2, bố trí giống vụ mùa 2017, lần lặp lại Mỗi đơn vị thí nghiệm có kích thước 30 m2 (6m x 5m) Các đơn vị thí nghiệm bố trí cách 0,5 m để hạn chế ảnh hưởng qua lại xử lý xạ khuẩn Ruộng thí nghiệm cách ruộng nơng dân m nhằm hạn chế ảnh hưởng phân bón, thuốc BVTV ruộng canh tác lúa lân cận Các nghiệm thức thí nghiệm Bảng 3.5 ị Ghi nhận tiêu bệnh: Mỗi thí nghiệm đặt khung (40x50 cm2), cố định đường chéo góc, khung ghi nhận tiêu bệnh đạo ôn (27, 34, 41, 48 55 ngày sau sạ) bệnh đạo ôn cổ (67, 74 81 ngày sau sạ), sau tính số: (1) Tỷ lệ bệnh (TLB); (2) Chỉ số bệnh; (3): Hiệu giảm bệnh ò Ghi nhận tiêu thành phần suất suất: + Số bông/m2: thí nghiệm 30 m2, đếm tất ô ghi nhận tiêu (40x50 cm2), từ qui số bơng/m2 + Số hạt bông: chọn ngẫu nhiên 50 ô ghi nhận tiêu (40x50 cm2) Đếm số hạt bơng, sau tính số hạt chắc/ bơng trung bình 50 + Năng suất thực tế (tấn/ha): thu hoạch toàn lúa khung 5m2 Cân trọng lượng đo ẩm độ hạt thời điểm cân, sau quy ẩm độ 14%, từ tính suất thực tế (NSTT) Bảng 3.5 Các nghiệm thức thí nghiệm ngồi đồng Tên nghiệm thức Ký hiệu Biện pháp xử lý Thời điểm xử lý S17-MBL -A NT1 S17-MBL-A, 20 NT2 20 NSS S17-MBL-A, 40 NT3 40 NSS S17-MBL-A, 60 S17-MBL-A, 20, 40 NT4 NT5 S17-MBL-A, 20, 60 NT6 S17-MBL-A, 40, 60 NT7 S17-MBL-A,20,40,60 NT8 S09-MBL -A, Áo NT9 S09-MBL-A, 20 NT10 20 NSS S09-MBL-A, 40 NT11 40 NSS S09-MBL-A, 60 NT12 S09-MBL-A, 20, 40 NT13 S09-MBL-A, 20, 60 NT14 S09-MBL-A, 40, 60 NT15 40 & 60 NSS S09-MBL-A,20,40,60 NT16 20, 40 & 60 NSS Thuốc hoá học - Beam 75WP; NT17 - AmistarTop 325SC -Nhảy chồi -Làm đòng – trổ Đối chứng âm NT18 Áo hat, S17-MBL Áo hạt + Phun S17-MBL lên 12 GTKS 60 NSS 20 & 40 NSS 20 &60 NSS 40 & 60 NSS 20, 40 & 60 NSS Áo hạt, S09-MBL Áo hạt + Phun S09-MBL lên Không phun 12 GTKS 60 NSS 20 & 40 NSS 20 &60 NSS Không xử lý Nồng độ/liều lượng *Huyền phù xạ khuẩn: Mật số 108 cfu/ml * Áo hạt: Lượng vừa đủ ướt hạt giống (12 GTKS) * Phun HPXK lên lá: + Giai đoạn mạ: 25 lít/1000 m2 + Làm địng trổ bơng: 40 lít/1000 m2 * Thuốc hóa học: theo khuyến cáo nhà sản xuất trì ổn định tỷ lệ mọc mầm thấp chứng tỏ khả ức chế bào tử nấm P oryzae tốt so với chủng lại Tuy nhiên, chủng S06-MBL có BKVVK hiệu suất đối kháng cao chủng S31-MCM thí nghiệm mơi trường mặn (NaCl 2g/l) nên chủng xạ khuẩn S06MBL, S09-MBL S17-MBL chọn để thực thí nghiệm Bảng 3.9 Tỷ lệ bào tử nấm P oryzae mọc mầm (%) qua thời điểm khảo sát Nghiệm thức S06-MBL S09-MBL S17-MBL S09-MTV S03-MST S18-MCM S31-MCM ĐC Mức ý nghĩa CV (%) Tỷ lệ bào tử nấm P oryzae (%) mọc mầm GSTN 12 GSTN 24 GSTN d c 5,14 17,6 20,1cd cd c 6,94 16,4 17,5d 0,00e 14,2c 15,9d b b 9,31 24,5 27,4b 8,61bc 18,6bc 24,3bc bc bc 8,61 18,6 25,8b d c 6,11 16,1 17,6d 14,4a 31,5a 35,4a * * * 27,8 12,1 9,6 Ghi chú: Trong cột số có chữ số theo sau giống không khác biệt ý nghĩa qua phép thử Duncan Số liệu GSTN chuyển đổi sang x + 0,5 , 12 24 GSTN chuyển đổi sang arcsin x phân tích thống kê *: khác biệt thống kê mức ý nghĩa 5%; GSTN: sau thí nghiệm 3.3 NỘI DUNG 3: KHẢ NĂNG TIẾT ENZYME CHITINASE VÀ β -1,3-GLUCANASE CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN CÓ NGUỒN GỐC TỪ ĐẤT NHIỄM MẶN 3.3.1 Khả tiết enzyme chitinase của 03 chủng xạ khuẩn điều kiện phịng thí nghiệm Khả tiết enzyme chitinase phân giải chitin thể qua bán kính vịng phân giải chitin (Bảng 3.10) hàm lượng enzyme chitinase tiết (Bảng 3.11) Kết Bảng 3.10 Bảng 3.11 cho thấy chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả tiết enzyme chitinase phân giải chitin 16 chủng S09-MBL S17-MBL cho khả tiết enzyme chitinase cao với bán kính vịng phân giải cao hàm lượng enzyme chitinase tiết cao đến thời điểm ngày sau bố trí thí nghiệm Bảng 3.10 Bán kính vịng phân giải chitin (mm) 03 chủng xạ khuẩn thí nghiệm STT Nghiệm thức S06-MBL S09-MBL S17-MBL Mức ý nghĩa CV (%) Bán kính vịng phân giải chitin (mm) NSTN 3NSTN 5NSTN 7NST N 4,2b 10,1c 15,3b 18,5b 5,2a 13,5a 18,9a 23,3a a b a 5,1 12,8 18,3 23,2a * * * * 6,22% 5,57% 5,3% 4,26% Ghi chú: cột chữ theo sau giống khơng khác biệt mặt thống kê qua phép thử Duncan; *: khác biệt mức ý nghĩa 5%; NSTN: Ngày sau bố trí thí nghiệm Bảng 3.11 Hàm lượng enzyme chitinase (IU/ml) 03 chủng xạ khuẩn thí nghiệm STT Nghiệm thức S06-MBL S09-MBL S17-MBL Mức ý nghĩa CV (%) Hàm lượng enzyme chitinase (IU/ml) NSTN 3NSTN 5NSTN 7NSTN 0,15c 0,20c 0,26b 0,28c 0,27a 0,38a 0,44a 0,51a bc b b 0,18 0,27 0,29 0,33b * * * * 5,81 6,43 6,95 5,36 Ghi chú: cột chữ theo sau giống khơng khác biệt mặt thống kê qua phép thử Duncan; *: khác biệt mức ý nghĩa 5%; NSTN: Ngày sau bố trí thí nghiệm 3.3.2 Khả tiết enzyme β-1,3-glucanase 03 chủng xạ khuẩn điều kiện phịng thí nghiệm Khả tiết enzyme β-1,3-glucanase xạ khuẩn thể qua bán kính vịng phân giải β-1,3-glucan (Bảng 3.12) hàm lượng enzyme β-1,3-glucanase xạ khuẩn tiết (Bảng 3.13) Kết cho thấy chủng xạ khuẩn thí nghiệm có khả tiết enzyme β-1,3glucanase phân giải β-glucan chủng S17-MBL cho khả tiết 17 enzyme β-1,3-glucanase cao với bán kính vịng phân giải cao hàm lượng enzyme tiết cao đến thời điểm 14 ngày sau bố trí thí nghiệm Bảng 3.12 Bán kính vịng phân giải β-1,3-glucan 03 chủng xạ khuẩn thí nghiệm STT Nghiệm thức S06-MBL S09-MBL S17-MBL Mức ý nghĩa CV (%) Bán kính vịng phân giải β-1,3-glucan (mm) 10 NSTN 12 NSTN 14 NSTN b b 9,6 10,6 11,6c c a 9,0 12,2 12,8bc 9,8a 12,0ab 14,0a * * * 6,03 4,12 4,8 Ghi chú: Trong cột chữ theo sau giống khơng khác biệt mặt thống kê qua phép thử Duncan; *: khác biệt mức ý nghĩa 5%; NSTN: Ngày sau bố trí thí nghiệm Bảng 3.13 Hàm lượng enzyme β-1,3-glucanase (IU/ml) 03 chủng xạ khuẩn thí nghiệm STT Nghiệm thức S06-MBL S09-MBL S17-MBL Mức ý nghĩa CV (%) Hàm lượng enzyme β-1,3-glucanase (IU/ml) qua thời điểm 10 NSTN 12 NSTN 14 NSTN 0,28b 0,21bc 0,07b 0,21c 0,18c 0,05b a a 0,46 0,47 0,15a * * * 6,70 13,76 7,50 Ghi chú: Trong cột chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa theo phép thử Duncan mức ý nghĩa 5%; *: khác biệt mức ý nghĩa 5%; NSTN: Ngày sau bố trí thí nghiệm 3.4 NỘI DUNG 4: ĐỊNH DANH ĐẾN LOÀI CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN CĨ TRIỂN VỌNG TRONG PHỊNG TRỊ BỆNH ĐẠO ÔN HẠI LÚA VÙNG ĐẤT NHIỄM MẶN 3.4.1 Định danh xạ khuẩn dựa vào đặc điểm nuôi cấy, đặc điểm hình thái đặc điểm sinh hóa Kết khảo sát đặc điểm ni cấy, đặc điểm hình thái đặc điểm sinh hóa chủng xạ khuẩn thí nghiệm trình bày 18 Bảng 3.14, Bảng 3.15, Bảng 3.16 Hình 3.10 Các đặc điểm hình thái (cuống sinh bào tử, chuổi bào tử, bề mặt bào tử), đặc điểm sinh hóa (màu sắc, sắc tố melanin, khả tiết enzyme, khả chịu muối gram) chủng xạ khuẩn S06-MBL, S09-MBL , S17MBL trình bày Bảng 3.14, Bảng 3.15, Bảng 3.16 so sánh với khóa phân loại xạ khuẩn International Streptomyce Project (Shirling Gottlieb, 1972; Pridham et al., 1958; Waksman, 1961) cho thấy chủng xạ khuẩn xếp vào chi Streptomyces Bảng 3.14 Đặc điểm hình thái đặc điểm sinh hóa 03 chủng xạ khuẩn Đặc điểm Chuỗi bào tử Cuống sinh bào tử Bề mặt bào tử Màu sắc KTKS Sắc tố tan Sắc tố melanin Khả chịu muối Tiết enzyme Gram Chủng xạ khuẩn thí nghiệm S06-MBL S09-MBL S17-MBL Thẳng (R) Thẳng (R) Móc câu (RA) Lượn sóng (F) Thẳng gợn sóng (RF) Thẳng gợn sóng (RF) Dạng trơn Dạng trơn Dạng trơn Trắng Trắng Xám Không Không Không Không Vàng nâu Không ≤ 6% ≤ 8% ≤ 8% Protease, Amylase, Lipase, Cellulase Dương Protease, Amylase, Lipase, Cellulase Dương Protease, Amylase, Lipase, Cellulase Dương Hình 3.10 Hình dạng cuống sinh bào tử dạng thẳng (A; S17-MBL), chuỗi bào tử dạng móc câu (A, S17-MBL), chuỗi bào tử dạng thẳng (B; S09-MBL), bề mặt bào tử dạng trơn (C; S17-MBL) 19 Bảng 3.15 Khả tiết enzyme amylase, protease lipase 03 chủng xạ khuẩn Bán kính vòng phân giải chất (mm) chủng xạ khuẩn (*) Amylase Protease Lipase 9,5 ± 1,29 8,3 ± 0,50 10,8 ± 0,63 10,8 ± 1,16 11,5 ± 0,57 11,2 ± 0,65 8,8 ± 0,96 13,5 ± 0,58 9,8 ± 0,96 Chủng xạ khuẩn S06-MBL S09-MBL S17-MBL (*) Số liệu trung bình ba lần lặp lại ± SD (độ lệch chuẩn) Bảng 3.16 Khả chịu muối NaCl (%) 03 chủng xạ khuẩn Chủng xạ khuẩn Nồng độ muối NaCl (%) S06-MBL S09-MBL S17-MBL +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + ++ + - Ghi chú: (+++) Sinh trưởng tốt: KTKS, KTCC phát triển tốt; (++) Sinh trưởng trung bình: KTCC phát triển tốt khơng có hình thành KTKS; (+) Sinh trưởng yếu: KTCC phát triển yếu khơng có hình thành KTKS; (−) Khơng có sinh trưởng mơi trường 3.4.2 Định danh chủng xạ khuẩn phương pháp sinh học phân tử Dựa vào kết Bảng 3.20 cho thấy chủng xạ khuẩn thí nghiệm có mức độ tương đồng từ 98-100% so sánh với loài chuẩn dựa vào trình tự gen vùng 16S - rRNA Cụ thể chủng S06-MBL có mức tương đồng với lồi Streptomyces fradiae 99%; chủng S09-MBL có mức tương đồng với lồi Streptomyces bikiniensis 99% chủng S17-MBL có mức tương đồng với lồi Streptomyces lavendulae 98% (Hình 3.13) Hình 3.13 Sản phẩm PCR khuếch đại với cặp mồi thuộc vùng 16S-rRNA chủng xạ khuẩn S06-MBL, S09-MBL S17MBL 20 Bảng 3.20 Kết xác định ba mẫu xạ khuẩn dựa trình tự vùng 16S-rDNA Mẫu xạ khuẩn S06-MBL S09-MBL S17-MBL Loài xác định Streptomyces fradiae Streptomyces bikiniensis Streptomyces lavendulae Kích thước trình tự (bp) 1462 Mức độ Mã số chủng tương tương đồng đồng (%) GenBank 99 AB184253.1 1476 99 NR_112436.1 1515 98 DQ645958.1 3.5 NỘI DUNG 5: KHẢ NĂNG PHÒNG TRỊ BỆNH ĐẠO ÔN CỦA CÁC CHỦNG XẠ KHUẨN TRIỂN VỌNG TRONG ĐIỀU KIỆN NHÀ LƯỚI Khả phòng trừ bệnh đạo ôn hại lúa nấm P oryzae gây chủng xạ khuẩn điều kiện nhà lưới thể qua tỷ lệ bệnh (Bảng 3.21), số bệnh (Bảng 3.22) hiệu giảm bệnh (Bảng 3.23) Bảng 3.21 Tỷ lệ diện tích nhiễm bệnh đạo ôn nghiệm thức điều kiện nhà lưới Nghiệm thức S06-MBL-A S06-MBL-A-T S06-MBL-A-S S06-MBL-A-TS S09-MBL-A S09-MBL-A-T S09-MBL-A-S S09-MBL-A-TS S17-MBL-A S17-MBL-A-T S17-MBL-A-S S17-MBL-A-TS Beam 75WP Đối chứng âm Mức ý nghĩa CV(%) Tỷ lệ diện tích nhiễm bệnh đạo ôn (%) qua giai đoạn 4NSLB 6NSLB 8NSLB 10NSLB 12NSLB 14NSLB 4,51a 2,04c 1,98c 2,19c 3,13b 2,12c 2,12c 1,14d 2,45bc 1,96c 2,15c 1,28d 0,64e 4,80a ** 10,73 7,63cd 6,88def 8,89b 6,49def 7,02de 6,09ef 6,06f 2,52gh 7,26de 6,50def 6,60def 3,16g 1,43i 9,98a ** 6,70 6,98b 6,87b 6,06cd 5,49de 6,16c 5,13e 5,12e 4,21f 7,42b 5,85cd 5,18e 4,57f 4,29f 9,52a ** 3,36 6,12b 4,62d 5,88bc 4,54d 5,89bc 4,84d 4,59d 2,86f 6,22b 5,75bc 5,48c 4,08e 2,35g 12,08a ** 3,28 5,41c 5,17bc 5,16bc 4,67de 5,32c 4,61de 4,25e 3,33f 6,95b 4,81bcd 4,88bcd 4,22e 3,48f 12,69a ** 3,62 7,02b 5,84cd 5,88cd 5,16e 6,24c 5,29de 4,25f 2,88h 6,53bc 6,14c 5,90cd 3,48g 3,04h 11,09a ** 3,62 21 Ghi chú: Trong cột chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa theo phép thử Duncan mức ý nghĩa 5% Số liệu chuyển đổi sang x + 0,5 phân tích thống kê; **: khác biệt mức ý nghĩa 1% NSLB: Ngày sau lây bệnh nhân tạo Qua kết Bảng 3.21, Bảng 3.22 Bảng 3.23 cho thấy nghiệm thức xạ khuẩn (S06-MBL, S09-MBL S17-MBL) xử lý kết hợp thời điểm ngày trước ngày sau lây bệnh nhân tạo có tỷ lệ bệnh thấp, số bệnh thấp hiệu giảm bệnh cao kéo dài đến thời điểm 14 ngày sau lây bệnh nhân tạo Bảng 3.22 Chỉ số bệnh đạo ơn (%) nghiệm thức thí nghiệm nhà lưới Nghiệm thức Chỉ số bệnh đạo ôn (%) thời điểm khảo sát 4NSLB 6NSLB 8NSLB 10NSLB 12NSLB 14NSLB S06-MBL-A 13,08a 22,63c 20,38cd 20,19b 18,11c 24,82b c e c cde cde S06-MBL-A-T 5,92 18,14 21,06 17,24 17,56 20,45cde c b def bc cde S06-MBL-A-S 5,74 26,67 18,77 19,41 17,29 20,57cd c ef fg efg def S06-MBL-A-TS 6,35 19,45 17,02 14,98 15,64 18,06e b cde de bc cd S09-MBL-A 8,81 21,07 19,11 19,44 17,81 21,84c c cd gh def e S09-MBL-A-T 6,15 22,28 15,89 15,96 15,43 18,53de S09-MBL-A-S 5,74c 18,17f 15,87gh 15,14efg 14,23f 14,89f S09-MBL-A-TS 3,31e 7,57h 13,05i 9,43hi 11,17g 10,08i bc cde b b b S17-MBL-A 7,12 21,29 23,01 20,52 23,29 22,85bc cd ef efg bc de S17-MBL-A-T 5,17 19,49 18,13 18,97 16,10 21,51c c def gh bcd de S17-MBL-A-S 6,21 19,80 16,07 18,08 16,34 20,67cd de g h fg f S17-MBL-A-TS 3,70 11,99 14,18 13,46 14,14 12,18gh f i i i g Beam 75WP 1,86 4,30 13,31 7,74 11,61 10,63hi a a a a a Đối chứng âm 14,37 32,88 33,31 37,72 39,04 39,36a Mức ý nghĩa ** ** ** ** ** ** CV% 11,04 4,73 4,70 5,53 4,30 4,39 Ghi chú: Trong cột chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa theo phép thử Duncan; Số liệu 4NSLB chuyển đổi sang x + 0,5 , ngày lại chuyển đổi sang (arcsin x ) phân tích thống kê;**: khác biệt có ý nghĩa mức 5% NSLB: Ngày sau lây bệnh nhân tạo 22 Bảng 3.23 Hiệu giảm bệnh đạo ôn nghiệm thức thí nghiệm nhà lưới Hiệu giảm số (%) bệnh đạo ôn qua giai đoạn 4NSLB 6NSLB 8NSLB 10NSLB 12NSLB 14NSLB S06-MBL-A 2,61f 28,89g 30,57fg 48,08g 55,01e 35,87e d d gh fg de S06-MBL-A-T 55,87 43,00 28,29 55,68 56,36 47,18cd d h def gh de S06-MBL-A-S 57,26 16,20 36,06 50,11 57,04 46,84cd d ef cde cd cd S06-MBL-A-TS 52,70 38,80 42,05 61,49 61,15 53,34c e efg efg gh de S09-MBL-A 34,40 33,78 34,92 50,02 55,74 43,55d d fg bc ef cd S09-MBL-A-T 54,16 30,00 45,88 58,98 61,66 52,12c d d bc def bc S09-MBL-A-S 54,58 42,92 45,96 61,08 64,37 61,53b S09-MBL-A-TS 75,33b 76,23b 55,52a 75,76ab 72,25a 73,94a S17-MBL-A 46,99de 33,10efg 21,64i 47,25h 42,13f 40,97de S17-MBL-A-T 61,49cd 38,75ef 38,26def 51,22gh 60,00cde 44,43d d ef bc fgh cde S17-MBL-A-S 53,76 37,77 45,26 53,50 59,40 46,60cd bc c ab bc bc S17-MBL-A-TS 72,48 62,31 51,72 65,40 64,85 68,53ab a a a a ab Beam 75WP 88,71 86,29 54,21 80,44 68,79 71,72a Mức ý nghĩa ** ** ** ** ** ** CV% 11,69 7,05 8,82 6,19 3,52 5,39 Ghi chú: Trong cột chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa theo phép thử Duncan; Số liệu chuyển đổi (arcsin x ) phân tích thống kê;**: khác biệt mức ý nghĩa 5% NSLB: Ngày sau lây bệnh nhân tạo Nghiệm thức 3.6 NỘI DUNG 6: KHẢ NĂNG PHÒNG TRỊ BỆNH ĐẠO ÔN HẠI LÚA CỦA XẠ KHUẨN ĐIỀU KIỆN NGOÀI ĐỒNG Ở HUYỆN HỒNG DÂN TỈNH BẠC LIÊU VỤ MÙA 2017 VÀ 2018 3.6.1 Chiều cao số chồi lúa thí nghiệm Qua kết thí nghiệm đồng ruộng nhiễm mặn cho thấy việc xử lý áo hạt phun huyền phù xạ khuẩn lên không làm ảnh hưởng đến phát triển chiều cao số chồi bụi lúa ruộng thí nghiệm mùa vụ 3.6.2 Khả phịng trị bệnh đạo ơn huyện Hồng Dân, Bạc Liêu 3.6.2.1 Tỷ lệ bệnh đạo ôn Kết thí nghiệm cho thấy hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL có khả quản lý bệnh đạo ôn nấm P oryzae gây thể tất nghiệm thức xử lý xạ khuẩn có tỷ lệ bệnh thấp so với nghiệm thức đối chứng hai mùa vụ 2017 2018 Mặt 23 khác, bệnh đạo ôn thường xuất sớm vào giai đoạn mạ nên việc xử lý xạ khuẩn áo hạt trước sạ phun lên vào giai đoạn 20 40 NSS mang lại hiệu hạn chế gây hại nấm P oryzae tốt 3.6.2.2 Chỉ số bệnh đạo ôn Tương tự tỷ lệ bệnh, số bệnh đạo ôn nghiệm thức xử lý xạ khuẩn thấp so với nghiệm thức đối chứng hai mùa vụ 2017 2018 Kết nghiên cứu cho thấy việc xử lý xạ khuẩn áo hạt trước sạ phun lên vào giai đoạn 20 40 NSS mang lại hiệu hạn chế gây hại nấm P oryzae tốt tương đương nghiệm thức thuốc hoá học Ở vụ mùa 2018, hai nghiệm thức xử lý với chủng xạ khuẩn S09-MBL (S09-MBL-A, 20, 40 S09-MBL-A, 20, 40, 60) có số bệnh thấp hai nghiệm thức xử lý với chủng S17-MBL (S17-MBL-A, 20, 40 S17-MBL-A, 20, 40, 60), khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê nghiệm thức S09-MBL-A, 20, 40, 60 có số bệnh tương đương nghiệm thức thuốc hoá học 3.6.2.3 Hiệu giảm bệnh đạo ôn Kết nghiên cứu cho thấy đa số nghiệm thức xử lý xạ khuẩn áo hạt phun lên vào 20 40 NSS cho hiệu giảm bệnh đạo ôn cao nghiệm thức xử lý áo hạt Nghiệm thức S09-MBLA, 20, 40, 60 S17-MBL-A, 20, 40, 60 cho hiệu giảm bệnh đạo ôn cao hai mùa vụ 2017 2018 (Bảng 3.38) Điều cho thấy hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL có tiềm ứng dụng để quản lý bệnh đạo ôn lúa vùng đất nhiễm mặn 24 Bảng 3.38 Hiệu giảm bệnh đạo ôn (%) nghiệm thức ruộng nhiễm mặn xã Ninh Thạnh Lợi, huyện Hồng Dân, Bạc Liêu vụ mùa 2018 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 Nghiệm thức S09-MBL-A S09-MBL-A,20 S09-MBL-A,40 S09-MBL-A,60 S09-MBL-A,20,40 S09-MBL-A,20,60 S09-MBL-A,40,60 S09-MBL-A,20,40,60 S17-MBL-A S17-MBL-A,20 S17-MBL-A,40 S17-MBL-A,60 S17-MBL-A,20,40 S17-MBL-A,20,60 S17-MBL-A,40,60 S17-MBL-A,20,40,60 Thuốc hóa học Mức ý nghĩa CV (%) 27 NSS 27,9f 67,5b 30,6ef 32,6de 70,8b 70,5b 36,3d 70,4b 21,3g 60,5c 23,1g 20,6g 61,4c 61,5c 28,3f 62,5c 75,9a * 3,93 Hiệu giảm số bệnh đạo ôn (%) 34 NSS 41 NSS 48 NSS 55 NSS 38,6ghi 26,7ij 20,5j 19,8i cd d g 64,9 62,5 36,4 27,3g gh i d 42,2 30,7 49,2 36,7e 42,5fg 39,3 h 24,9i 29,4fg bc bc b 68,0 67,4 63,5 53,0b b cd e 70,2 65,1 44,4 40,7d 47,3f 43,2gh 43,9ef 47,1c 71,4b 71,4ab 65,7ab 56,4a ghi k k 38,8 21,7 15,5 17,3i 57,6e 50,1ef 32,5h 19,7i 36,0i 42,8gh 43,6ef 36,5e hi jk j 36,8 24,6 18,8 22,6h 60,5de 51,1e 56,1c 42,1d 61,1de 49,4ef 42,9ef 30,4f ghi fg fg 40,7 45,9 39,8 40,6d 60,6de 50,7ef 58,2c 43,2d 80,4a 73,8a 67,6a 58,9a * * * * 4,18 4,31 3,92 3,50 Ghi chú: HQGB: Hiệu giảm bệnh so với ĐC-KXL; trung bình cột theo sau ký tự giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 5% phép thử Duncan.*: khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 5%; Số liệu biến đổi dạng 𝑎𝑟𝑐𝑠𝑖𝑛√𝑥 trước phân tích thống kê; A: Áo hạt; 20, 40, 60: Ngày sau sạ (NSS) 3.6.3 Khả phịng trị bệnh đạo ơn cổ huyện Hồng Dân, Bạc Liêu vụ mùa 2017 2018 3.6.3.1 Tỷ lệ bệnh đạo ôn cổ Kết nghiên cứu cho thấy tất nghiệm thức xử lý xạ khuẩn có tỷ lệ bệnh đạo ôn cổ thấp so với nghiệm thức đối chứng mùa vụ Ở vụ mùa 2018, hai nghiệm thức S09-MBL-A, 20, 40, 60 S17-MBL-A, 20, 40, 60 tiếp tục có tỷ lệ bệnh đạo ơn thấp nhất, tương đương nghiệm thức thuốc hố học Qua cho thấy, hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL có hiệu giúp hạn chế bệnh đạo ôn cổ so với nghiệm thức đối chứng âm Như vậy, việc xử lý huyền phù xạ khuẩn giai đoạn 60 NSS làm giảm tỷ lệ bệnh đạo ôn cổ ruộng canh tác lúa nhiễm mặn 25 3.6.3.2 Hiệu giảm bệnh đạo ôn cổ bơng Nhìn chung, hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL góp phần giảm bệnh đạo ơn cổ bơng hai mùa vụ Đặc biệt vụ mùa 2018, nghiệm thức xử lý xạ khuẩn S09-MBL với áo hạt phun lần (20, 40 60 NSS) cho hiệu giảm bệnh đạo ôn tương đương với nghiệm thức thuốc hoá học Điều cho thấy tiềm quản lý bệnh đạo ôn cổ hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL điều kiện đồng ruộng canh tác nhiễm mặn (Bảng 3.31 Bảng 3.40) Bảng 3.31 Bảng 3.40 Hiệu giảm bệnh đạo ôn cổ (%) ruộng nhiễm mặn Hồng Dân, Bạc Liêu vụ mùa 2017 vụ mùa 2018 TT 10 11 12 13 14 15 16 17 Nghiệm thức S09-MBL-A S09-MBL-A,20 S09-MBL-A,40 S09-MBL-A,60 S09-MBL-A,20,40 S09-MBL-A,20,60 S09-MBL-A,40,60 S09-MBL-A,20,40, 60 S17-MBL-A S17-MBL-A,20 S17-MBL-A,40 S17-MBL-A,60 S17-MBL-A,20,40 S17-MBL-A,20,60 S17-MBL-A,40,60 S17-MBL A,20,40, 60 Thuốc hóa học Mức ý nghĩa CV (%) HQGB đạo ôn cổ vụ mùa 2017 HQGB đạo ôn cổ vụ mùa 2018 67 NSSi 74 NSSi 81 NSSi 67 NSSii 74 NSSii 81 NSSii 52,1e 51,7 e 56,8de 57,5de 62,9cd 57,8de 62,6cd 70,7b 46,2c 49,6bc 50,3bc 50,3bc 50,3bc 49,9bc 51,4bc 53,7b 53,7d 54,3d 57,0bcd 55,2bcd 56,9bcd 53,9d 54,7cd 54,4 d 13,2hi 21,2ghi 21,9fghi 35,9de 38,6de 45,4cd 52,7bc 64,2ab 20,2gh 28,2fgh 32,5ef 46,3cd 39,9de 43,9cd 51,2bc 62,1a 17,2f 25,1ef 19,7f 24,8ef 35,1cde 39,9bc 40,7bc 62,9a 50,9e 52,8e 56,8de 57,2de 61,4cd 56,7de 61,1cd 66,3bc 45,4c 46,0c 51,3bc 50,9bc 50,5bc 52,1bc 50,1bc 51,8bc 56,1bcd 53,8 d 57,1bcd 55,7bcd 59,4b 59,2bc 56,4bcd 58,2bcd 17,9hi 32,7def 28,1efgh 31,9efg 30,7efg 35,2de 45,7cd 59,0ab 21,2h 24,8gh 31,9efg 39,3de 30,3de 39,1bcd 49,4bc 56,8ab 14,8f 26,0def 26,1def 37,7bcd 23,7ef 30,9cde 40,4bc 50,1b 74,9a 74,9a 77,2a 68,2a 63,4a 67,3a * 7,29 * 6,65 * 4,14 * * * 9,82 14,3 12,9 Ghi chú: Các trung bình cột theo sau hay chữ giống khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê phép thử Duncan; * khác biệt ý nghĩa thống kê mức 5%; Số liệu biến đổi dạng 𝑎𝑟𝑐𝑠𝑖𝑛√𝑥 (i) A: Áo hạt; 20, 40, 60: ngày sau sạ 26 x + 0,5 (ii) trước phân tích thống kê; 3.6.4 Ảnh hưởng xạ khuẩn đến thành phần suất suất lúa huyện Hồng Dân, Bạc Liêu vụ mùa 2017 2018 Kết vụ mùa 2017 cho thấy, số bơng/m2 khơng có khác biệt nghiệm thức có khác biệt số hạt chắc/bông dẫn đến suất thực tế khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê mức ý nghĩa 5% Số hạt chắc/bông tất nghiệm thức có xử lý xạ khuẩn cao so với đối chứng Trong đó, hai nghiệm thức S09-MBL-A, 20, 40, 60 S17-MBL-A, 20, 40, 60 có số hạt suất thực tế cao (6,41-6,45 tấn/ha) Ở vụ mùa 2018, số bông/m2 tất nghiệm thức có xử lý xạ khuẩn cao so với đối chứng, dao động từ 232-285 bơng/m2 Số hạt chắc/bơng cao tìm thấy hai nghiệm thức áo hạt phun lên xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL mật số 108 cfu/ml thời điểm 20, 40 60 NSS, tương đương so với nghiệm thức phun thuốc hoá học Đồng thời, việc xử lý xạ khuẩn làm gia tăng suất thực tế so với nghiệm thức đối chứng âm Trong đó, hai nghiệm thức có suất cao S09-MBL-A, 20, 40, 60 (6,23 tấn/ha) S17-MBL-A, 20, 40, 60 (6,01 tấn/ha); riêng nghiệm thức S09-MBL-A, 20, 40, 60 có suất cao tương đương so với nghiệm thức phun thuốc hố học Qua cho thấy, việc áp dụng hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL vừa giúp phịng trị bệnh đạo ơn hại lúa vùng đất nhiễm mặn vừa làm tăng suất thực tế so với nghiệm thức đối chứng không xử lý (Bảng 3.32 Bảng 3.41) 27 Bảng 3.32 Bảng 3.41 Thành phần suất suất thực tế nghiệm thức ruộng nhiễm mặn Hồng Dân, Bạc Liêu vụ mùa 2017 vụ mùa 2018 TT Nghiệm thức S09-MBL-A Thành phần suất suất lúa thí nghiệm vụ mùa 2017 Số hạt Số chắc/ NSTT bông (tấn/ha) /m (hạt) 283 87,4fgh 5,51c Thành phần suất suất lúa thí nghiệm vụ mùa 2018 Số hạt Số chắc/ NSTT bông/ (tấn/ha) m (hạt) 236hi 91,5ef 5,13e S09-MBL- A, 20 287 96,7def 5,57c 262cd 91,7ef 5,10e S09-MBL- A, 40 286 106cd 5,38c 249fg 90,0f 5,31e S09-MBL- A, 60 291 89,6fgh 5,84c 262cd 102bcd 5,68cd S09-MBL- A, 20, 40 288 110c 5,73c 252ef 92,5ef 5,20e S09-MBL- A, 20, 60 290 106cd 5,39c 261cd 106b 5,57cd S09-MBL- A, 40, 60 285 109c 5,85c 264c 104bcd 5,69c S09-MBL- A, 20, 40, 60 296 129b 6,41b 285ab 115a 6,23ab S17-MBL-A 288 86,3gh 5,54c 232j 90,3f 5,07e 10 S17-MBL- A, 20 287 93,6efg 5,69c 245g 96,8cdef 5,15e 11 S17-MBL- A, 40 284 88,7fgh 5,88c 243g 96,7cdef 5,12e 12 S17-MBL- A, 60 286 88,5gh 5,83c 257cde 99,1bcde 5,35de 13 S17-MBL- A, 20, 40 293 101cde 5,84c 242gh 95,5def 5,25e 14 S17-MBL- A, 20, 60 288 108c 5,57c 256de 104,5bc 5,65c 15 S17-MBL- A, 40, 60 282 106cd 5,81c 258cde 106,7b 5,60cd 16 S17-MBL-A, 20, 40, 60 291 125b 6,45b 280b 114a 6,01b 17 Thuốc hóa học 294 141,6a 6,98a 289a 118a 6,40a 18 Đối chứng âm 284 79,8h 4,69d 225k 80,7g 4,75f Mức ý nghĩa CV (%) ns * * * * * 7,30 5,27 5,12 6,85 13,56 8,36 Ghi chú: Các trung bình cột theo sau hay chữ giống khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê phép thử Duncan (i): Số liệu biến đổi dạng log10 trước phân tích thống kê.* khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 5%; A: Áo hạt; 20, 40, 60: ngày sau sạ 28 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 Kết luận (1) Đã chọn chủng xạ khuẩn S06-MBL, S09-MBL, S17MBL, S09-MTV, S03-MST, S18-MCM S31-MCM có khả đối kháng cao với nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa tổng số 126 chủng xạ khuẩn phân lập từ đất trồng lúa nhiễm mặn ĐBSCL (2) Ba chủng xạ khuẩn S06-MBL, S09-MBL S17-MBL thể khả đối kháng cao với nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ơn mơi trường có bổ sung muối NaCl nồng độ 2‰, có khả ức chế bào tử nấm bệnh đạo ôn mọc mầm thể khả tiết enzyme chitinase β-1,3-glucanase cao Chủng S06-MBL loài Streptomyces fradiae, chủng S09-MBL loài Streptomyces bikiniensis chủng S17MBL loài Streptomyces lavendulae (3) Hai chủng xạ khuẩn S09-MBL S17-MBL cho hiệu giảm bệnh cao tương đương với thuốc hoá học Beam 75WP xử lý áo hạt phun lên (mật số 108 cfu/ml) vào ngày trước ngày sau lây bệnh nhân tạo thông qua tỷ lệ bệnh thấp (