Bài 15 Thực hành Thí nghiệm phân tích ảnh hưởng của một số yếu tố đến hoạt tính của enzyme và kiểm tra hoạt tính của enzyme amylase 1 Mục đích Thực hiện được các bước thí nghiệm theo quy trình Quan sá[.]
Bài 15: Thực hành: Thí nghiệm phân tích ảnh hưởng số yếu tố đến hoạt tính enzyme kiểm tra hoạt tính enzyme amylase Mục đích - Thực bước thí nghiệm theo quy trình - Quan sát nhận xét hiệu tác dụng enzyme phân huỷ protein; ảnh hưởng pH, nhiệt độ hoạt tính enzyme phân huỷ protein - Quan sát nhận xét hiệu tác dụng enzyme phân huỷ tinh bột ảnh hưởng pH, nhiệt độ hoạt tính enzyme phân huỷ tinh bột Cách tiến hành 2.1 Thí nghiệm phân tích ảnh hưởng số yếu tố đến hoạt tính enzyme phân huỷ protein Bước Gọt dứa, lấy lõi ép lấy nước chia vào ống nghiệm, ống chứa 0,5 ml nước ép lõi dứa Đánh số ống nghiệm từ đến (Nếu dùng đu đủ gọt lấy khoảng g vỏ (có thể thay đu đủ tươi), nghiền nát chày cối, thêm vào ml nước cất nước lọc), khuấy lọc lấy dịch Chia vào ống nghiệm (mỗi ống 0,5 ml dịch) Bước Đặt thí nghiệm: + Ống số cho thêm 0,1 ml nước cất (hoặc nước lọc), để nguyên nhiệt độ phòng + Ống số cho thêm 0,1 ml nước vôi trong, để nhiệt độ phòng + Ống số cho thêm 0,1 ml nước cất chuyển vào cốc nước sôi 10 phút + Ống số cho thêm 0,1 ml nước cất để nước đá Bước Dùng pipet bơm tiêm để lấy ml lòng trắng trứng, trộn với ml nước cất dung dịch lòng trắng trứng Bước Chuyển vào ống nghiệm ml dung dịch lòng trắng trứng, lắc đều, quan sát, nhận xét ghi chép lại thay đổi dung dịch ống nghiệm thời gian xảy thay đổi ống bắt đầu kết thúc thay đổi 2.2 Thí nghiệm kiểm tra hoạt tính thuỷ phân tinh bột enzyme amylase Bước Cho g bột lọc khuấy 100 ml nước đun sôi, đổ đĩa petri để nguội Nồng độ tinh bột tăng giảm chút để đĩa tinh bột nguội vừa đủ đặc để không chảy nghiêng đĩa không bị đặc cứng Bước Tách lấy mầm lúa (hoặc ngô) nghiền nhỏ chày, cối sứ Cho thêm vào ml nước, khuấy gạn lấy phần nước Chia vào ống nghiệm (đã đánh số từ đến 4), ống 0,5 ml dịch mầm lúa (ngô) Bước Đặt thí nghiệm: + Ống số 1, thêm 0,1 ml nước cất (hoặc nước lọc), để nguyên nhiệt độ phòng + Ống số cho thêm 0,1 ml nước vơi trong, để nhiệt độ phịng + Ống số cho thêm 0,1 ml nước cất chuyển vào cốc nước sôi 10 phút để nguội nhiệt độ phòng + Ống số cho thêm 0,1 ml nước cất để nước đá Bước Lấy dung dịch ống nghiệm nhỏ giọt lên vị trí khác đĩa đựng tinh bột (đánh dấu vị trí tương ứng số ống nghiệm) Sau 15 phút, kiểm tra đo đường kính vết lõm vị trí đĩa Kết 3.1 Kết thí nghiệm phân tích ảnh hưởng số yếu tố đến hoạt tính enzyme phân huỷ protein - Ống số 1: dung dịch lòng trắng trứng từ đục chuyển sang sau thêm vào nước ép lõi dứa thời gian ngắn - Ống số 2: dung dịch lòng trắng trứng từ đục chuyển sang sau thêm vào nước ép lõi dứa thời gian chậm ống - Ống số 3: dung dịch lòng trắng trứng từ đục chuyển sang sau thêm vào nước ép lõi dứa thời gian nhanh ống - Ống số 4: dung dịch lòng trắng trứng từ đục chuyển sang sau thêm vào nước ép lõi dứa thời gian dài 3.2 Kết thí nghiệm kiểm tra hoạt tính thuỷ phân tinh bột enzyme amylase + Ống số 1: tạo vết lõm có đường kính lớn + Ống số 2: không tạo vết lõm + Ống số 3: không tạo vết lõm + Ống số 4: tạo vết lõm có đường kính nhỏ Giải thích kết luận 4.1 Giải thích kết luận thí nghiệm phân tích ảnh hưởng số yếu tố đến hoạt tính enzyme phân huỷ protein - Trong lõi dứa có enzyme phân giải protein, lịng trắng trứng có protein albumin Khi cho dung dịch lòng trắng trứng vào dung dịch nước ép lõi dứa xảy trình enzyme phân giải protein làm biến đổi màu dung dịch thành suốt - Thời gian chuyển màu ống khác hoạt tính enzyme ống khác nhau: + Trong ống 1: Tại nhiệt độ thường, enzyme hoạt động phân giải albumin với tốc độ chậm Do đó, ống cần nhiều thời gian ống để dung dịch chuyển sang màu suốt + Ống 2: Trong ống 2, nước vôi làm tăng pH dung dịch thành pH kiềm khoảng pH tối ưu cho hoạt tính enzyme này, khiến enzyme hoạt động so với ống Do ống cần nhiều thời gian ống để dung dịch chuyển sang màu suốt + Ống 3: Nhiệt độ cao nước sôi phù hợp để enzyme hoạt động tốt nhất, albumin bị phân giải nhanh cần thời gian để dung dịch chuyển sang màu suốt + Ống 4: Nhiệt độ thấp nước đá khiến enzyme gần bị bất hoạt, albumin bị phân giải chậm cần nhiều thời gian để dung dịch sang màu suốt 4.2 Giải thích kết luận thí nghiệm kiểm tra hoạt tính thuỷ phân tinh bột enzyme amylase - Trong dịch mầm lúa có enzyme amylase phân giải tinh bột Khi cho dung dịch mầm lúa lên đĩa bột lọc, enzyme amylase phân giải tinh bột tạo thành vết lõm đĩa - Tuy nhiên, kích thước vết lõm khác hoạt tính enzyme amylase ống khác nhau: + Trong ống 1: Tại nhiệt độ thường enzyme amylase cịn hoạt tính nên phân giải tinh bột đựng đĩa nên tạo vết lõm lớn + Trong ống 2: Nước vôi làm tăng pH dung dịch thành pH kiềm khoảng pH tối ưu cho hoạt tính enzyme amylase, khiến enzyme hoạt động hơn, chí hoạt tính so với ống 1, nên không tạo vết lõm đĩa đựng tinh bột - Trong ống 3: Nhiệt độ cao nước sôi làm biến tính protein khiến enzyme amylase hoạt tính, amylase khơng phân giải tinh bột, nên không tạo vết lõm đĩa đựng tinh bột - Trong ống 4: Nhiệt độ thấp nước đá khiến enzyme bị ức chế, hoạt tính enzyme bị giảm tinh bột bị phân giải chậm nên tạo vết lõm nhỏ Trả lời câu hỏi a) Nhận xét thời gian cần để dung dịch ống nghiệm trở nên suốt Giải thích dung dịch protein albumin từ đục chuyển sang sau thêm nước ép lõi dứa Vì lại có giống khác thời gian phản ứng đặc điểm dung dịch ống kết thúc thí nghiệm? b) Giải thích ăn dứa tươi người ta hay gọt bỏ lõi, ăn lôi rát lưỡi c) Giải thích lại xuất vết lõm đĩa tinh bột có giống khác đường kính vết lõm d) Vì bát cháo ăn dở lại thường bị vữa, nhai cơm lâu miệng thường cảm thấy Trả lời: a) • Nhận xét thời gian cần để dung dịch ống nghiệm trở nên suốt: Thời gian cần để dung dịch ống nghiệm trở nên suốt theo thứ tự tăng dần là: ống 3, ống 1, ống 2, ống • Dung dịch protein albumin từ đục chuyển sang sau thêm nước ép lõi dứa enzyme phân giải protein có nước ép lõi dứa phân giải hết protein albumin • Có khác thời gian phản ứng hoạt tính enzyme ống khác nhau: hoạt tính enzyme phân giải albumin ống khác ảnh hưởng yếu tố nhiệt độ (nhiệt độ cao, nhiệt độ thấp, nhiệt độ phòng), độ pH b) Khi ăn dứa tươi người ta hay gọt bỏ lõi, ăn lõi rát lưỡi do: Trong lõi dứa tươi có chứa enzyme phân giải protein Do đó, ăn lõi dứa enzyme phân giải protein màng tế bào lưỡi, dẫn tới phá hủy tế bào lưỡi gây tượng rát lưỡi c) - Xuất vết lõm đĩa tinh bột dịch mầm lúa có enzyme amylase có khả phân giải tinh bột - Có khác đường kính vết lõm hoạt tính enzyme amylase ống khác chịu ảnh hưởng yếu tố (nhiệt độ cao, nhiệt độ thấp, nhiệt độ phòng), độ pH Trong đó, enzyme hoạt động tốt nhiệt độ phịng độ pH trung tính nên tạo đường kính vết lõm lớn d) - Bát cháo ăn dở lại thường bị vữa do: Trong nước bọt người có enzyme amylase giúp phân giải tinh bột thành đường đơn Trong bát cháo ăn dở có nước bọt người có enzyme amylase phân giải tinh bột cháo, làm cháo bị vữa - Nhai cơm miệng lâu thường cảm thấy vị do: Khi nhai cơm lâu tạo điều kiện thời gian cho amylase phân giải tinh bột thành đường Đường có vị nên ta cảm thấy ... có đường kính nhỏ Giải thích kết luận 4.1 Giải thích kết luận thí nghiệm phân tích ảnh hưởng số yếu tố đến hoạt tính enzyme phân huỷ protein - Trong lõi dứa có enzyme phân giải protein, lịng... để dung dịch sang màu suốt 4.2 Giải thích kết luận thí nghiệm kiểm tra hoạt tính thuỷ phân tinh bột enzyme amylase - Trong dịch mầm lúa có enzyme amylase phân giải tinh bột Khi cho dung dịch... trở nên suốt Giải thích dung dịch protein albumin từ đục chuyển sang sau thêm nước ép lõi dứa Vì lại có giống khác thời gian phản ứng đặc điểm dung dịch ống kết thúc thí nghiệm? b) Giải thích ăn