Kỹ thuật nuôi cấy sơ cấp tế bào động vật Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Khái niệm Nuôi cấy sơ cấp (primary culture) là quá trình nuôi tế bào trực tiếp từ mô trước lần cấy chuyền đầu tiên (subculture[.]
Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Kỹ thuật nuôi cấy sơ cấp tế bào động vật Khái niệm Nuôi cấy sơ cấp (primary culture) q trình ni tế bào trực tiếp từ mô trước lần cấy chuyền (subculture) Sau đó, việc ni cấy gọi thứ cấp (secondary culture) Hai kiểu nuôi cấy sơ cấp KIỂU 1: NUÔI CẤY MẢNH MÔ SƠ CẤP Là việc ni cấy mảnh mơ in vitro Trong q trình nuôi cấy, tế bào từ mảnh mô phát triển lan từ vùng mô trung tâm KIỂU 2: NUÔI CẤY SƠ CẤP HUYỀN PHÙ TẾ BÀO ĐƠN Là việc nuôi cấy tế bào đơn tách từ mảnh mơ Trong q trình ni, tế bào phát triển tăng sinh thành nhiều tế bào NI CẤY MẢNH MƠ SƠ CẤP (mảnh mơ ung thư vú) Thu nhận tế bào đơn nhân tủy xương chuột NUÔI CẤY SƠ CẤP HUYỀN PHÙ TẾ BÀO ĐƠN (thu từ máu cuống rốn) Quy trình ni cấy sơ cấp Thu nhận mẫu Xử lí mẫu Ni cấy tế bào đơn: Tách mô thành tế bào đơn Nuôi cấy Nuôi cấy mảnh mô: Cố định mảnh mô Thu nhận mẫu • Các mẫu thu nhận bao gồm mơ sống thể • Trước hết phải làm mơ vị trí lấy mẫu cồn, cho mơ vào dung dịch PBS, nhanh chóng chuyển phịng thí nghiệm • Tùy loại mẫu mơ thời gian cần thiết vận chuyển phòng thí nghiệm: có kế hoạch vận chuyển chúng điều kiện thích hợp Xử lí mẫu ni cấy huyền phù tế bào đơn Các tế bào động vật khối mô liên kết chặt chẽ với nhờ cầu nối hình thành tế bào với Biện pháp: – (1) tác dụng lực học để bẻ gãy cầu nối – (2) dùng enzym để phân hủy cầu nối nói Cắt nhuyễn Biện pháp học Ép nhuyễn Tách màng lọc Phương pháp cắt nhuyễn Sử dụng lục sơ học bẻ gãy cầu nối liên bào: dùng kéo, dao cắt nhuyễn mảnh mô Huyền phù vào dịch PBS, để lắng, thu dịch Phương pháp ép nhuyễn Ép nhuyễn mô: dùng phiến lame ép chặt mảnh mô để thu tế bào đơn mô có liên kết yếu Phương pháp tách màng lọc Tách màng lọc tế bào (Cell strainer): kích thước lỗ màng từ 70–100 µm, cho tế bào đơn có kích thước tương ứng qua màng Tải FULL (32 trang): https://bit.ly/3z5lEJx Dự phịng: fb.com/TaiHo123doc.net Tách mơ thành tế bào đơn enzym • Quy trình trypsin ấm • Quy trình trypsin lạnh Tải FULL (32 trang): https://bit.ly/3z5lEJx Dự phịng: fb.com/TaiHo123doc.net Quy trình trypsin ấm 4030972 ... MẢNH MÔ SƠ CẤP Là việc nuôi cấy mảnh mô in vitro Trong q trình ni cấy, tế bào từ mảnh mô phát triển lan từ vùng mô trung tâm KIỂU 2: NUÔI CẤY SƠ CẤP HUYỀN PHÙ TẾ BÀO ĐƠN Là việc nuôi cấy tế bào đơn... Trong q trình ni, tế bào phát triển tăng sinh thành nhiều tế bào NUÔI CẤY MẢNH MÔ SƠ CẤP (mảnh mô ung thư vú) Thu nhận tế bào đơn nhân tủy xương chuột NUÔI CẤY SƠ CẤP HUYỀN PHÙ TẾ BÀO ĐƠN (thu từ... Nuôi cấy sơ cấp (primary culture) trình ni tế bào trực tiếp từ mơ trước lần cấy chuyền (subculture) Sau đó, việc ni cấy gọi thứ cấp (secondary culture) Hai kiểu nuôi cấy sơ cấp KIỂU 1: NUÔI CẤY