QUY TRÌNH KỸ THUẬT LẤY MẪU XÉT NGHIỆM, BẢO QUẢN VÀVẬN CHUYỂN BỆNH PHẨM I Chuẩn bị 1 Bệnh nhân Nhịn đói trước 12 giờ, nên lấy lúc sáng sớm Không dùng chất kích thích, không vận động nặng Tránh tối đa v[.]
QUY TRÌNH KỸ THUẬT LẤY MẪU XÉT NGHIỆM, BẢO QUẢN VÀVẬN CHUYỂN BỆNH PHẨM I Chuẩn bị : Bệnh nhân: - Nhịn đói trước 12 giờ, nên lấy lúc sáng sớm - Khơng dùng chất kích thích, khơng vận động nặng - Tránh tối đa việc dùng thuốc - Nếu BN cần theo dõi hay nhiều loại XN nhiều ngày nên lấy máu vào với lần truớc Dụng cụ: - Chọn dụng cụ thích hợp cho loại lấy máu - Các dụng cụ lấy máu phải theo tiêu chuẩn Dụng cụ đa số nhựa tổng hợp sử dụng lần, ống chứa máu có nút kín tiêu chuẩn II Tiến hành: LẤY MÁU: 1.1.Vị trí lấy máu: * Lấy máu tĩnh mạch: - Thường lấy tĩnh mạch nếp khửu, mu bàn tay hay mu bàn chân - Đặt dây garô không chặt hay lỏng - Chọc kim xong mở garô - Thời gian từ lúc đặt garô tới lúc chọc kim không 02 phút - Tránh co xoa bóp lấy máu - Có thể dùng bơm tiêm tốt dùng ống chân không hay kim lấy trực tiếp vào ống đựng máu * Lấy máu mao mạch: - Thường áp dụng cho trẻ em số XN làm nhanh - Vị trí lấy máu thường là: dái tai, đầu ngón tay, gan bàn chân * Lấy máu động mạch: - Thường dùng để khí máu, pH - Cần kỹ thuật viên kinh nghiệm, kỹ thuật tốt chống đau, làm yên tâm BN - Tiêu chuẩn hoá vị trí lấy máu: động mạch quay đùi 1.2 Số lượng mẫu cần lấy: + Xét nghiệm huyết học : 02ml + Xét nghiệm huyết học + tốc độ máu lắng: 3,6ml + XN sinh hoá máu (tuỳ theo định số mẫu phân tích): Từ 02 - 03ml + XN HBsAg, HCV, HIV, ASLO, CRP, RF, HP, AFP, Troponin: 02ml + Xét nghiệm định nhóm máu: 01 ml + Phản ứng chéo: 02ml 1.3 Vận chuyển: Không vận chuyển máu toàn phần, muốn vận chuyển phải ly tâm tách huyết Nếu thời gian vận chuyển từ 1- sau ly tâm vận chuyển thùng giữ lạnh, tránh ánh sáng lay động mạnh Nếu lâu 04 nên đơng lạnh (trong nitơ lỏng) 1.4 Bảo quản: - Nhiệt độ: Có thể bảo quản nhiệt độ phịng, tủ lạnh đơng lạnh - Thời gian: Thời gian bảo quản thường kèm với điều kiện nhiệt độ Yêu cầu thời gian bảo quản dài nhiệt độ phải thấp - Chất bảo quản thích hợp cho loại bệnh phẩm thời gian bảo quản - Làm nóng lại bệnh phẩm tới nhiệt độ làm phản ứng - Tránh bay hay làm loãng bệnh phẩm LẤY NƯỚC TIỂU: Nước tiểu : Thường lấy lúc sáng sớm dùng cho xét nghiệm định tính Nước tiểu 24 giờ: Đến quy định, BN tiểu thật hết vứt bỏ phần nước tiểu Từ trở BN tiểu vào bình chứa khơ (lấy đầy đủ khơng bỏ sót kể lúc ngồi) Ngày hơm sau đến quy định đái thật hết vào bình gửi đến phịng XN Những XN định lượng phải làm nước tiểu 24 Bảo quản: Lấy mẫu nước tiểu tốt vào buổi sáng nên XN vòng đầu Không để 18 LẤY PHÂN: Cho BN ngồi vào bơ sạch, khơng có thuốc sát khuẩn Dùng que lấy bệnh phẩm khoảng 01 gam vào lọ thuỷ tinh đường kính khoảng 2cm Bệnh phẩm lấy xong cần XN sớm tốt LẤY CÁC LOẠI DỊCH: Các loại dịch bác sỹ chuyên khoa kỹ thuật viên đào tạo chuyên nghiệp lấy Được hứng vào ống nghiệm Bảo quản loại dịch tuỳ thuộc thời gian (dịch âm đạo đem soi tươi) - Dưới 01 giờ: Nhiệt độ phòng - Trên giờ: Ly tâm loại tế bào, đông lạnh -700C LẤY ĐỜM: - Áp dụng người lớn Lấy lúc sáng sớm ngủ dậy, BN chưa ăn uống , vỗ nhẹ ngực lưng trước lấy BN súc miệng khạc đờm vào lọ rộng miệng có nắp kín, bệnh phẩm không lẫn nước bọt A CÁC QUY TRÌNH KỸ THUẬT CHUN NGHÀNH HĨA SINH ĐỊNH LƯỢNG ACID URIC I NGUYÊN LÝ Acid Uric sản phẩm chuyển hóa cuối base có nitơ nhân purin Acid Uric máu định lượng theo phương pháp enzyme so màu Uric Acid + 2H2O + O2 Uricase Allatoin + CO2 + H2O2 Peroxidase H2O2 + H++ TOOSa + 4-aminophenazone hợp chất màu đỏ + 4H2O Sản phẩm màu đo bước sóng 546nm II CHUẨN BỊ Người thực Bác sỹ kỹ thuật viên đào tạo chuyên ngành Hóa sinh Phương tiện, hóa chất - Máy móc: hệ thống máy sinh hóa - Thuốc thử: sẵn sàng sử dụng R 1: buffer, TOOS R 2: Uricase, POD, 4-AAP Bảo quản 2-8 0C đến hết hạn sử dụng, tuần để máy phân tích Các loại dung dịch hệ thống khác - Chuẩn, nước muối sinh lý - Control: mức - Vật tư tiêu hao: ống lấy máu, kim tiêm, bông, cồn, găng tay … Người bệnh: giải thích trước thực XN, tốt nhịn ăn sáng lấy máu vào buổi sáng Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thơng tin người bệnh bao gồm tên, tuổi, khoa phòng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, loại thuốc sử dụng (nếu có) … III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH Lấy bệnh phẩm: Bệnh phẩm phải lấy kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn Ly tâm trước tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Bảo quản 2-80C vòng ngày, - 200C tháng Rã đông lần Để bệnh phẩm, chuẩn, control nhiệt độ phòng (20-250C) lắc trước tiến hành XN Tiến hành kỹ thuật - Máy móc, hóa chất cài đặt chuẩn trước thực phân tích Control nằm miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử công ty Thông thường chạy control miền: bình thường bất thường Đối chiếu với luật nội kiểm chất lượng đạt tiến hành phân tích mẫu - Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol máy Khi có kết phân tích đối chiếu với phiếu xét nghiệm trả kết IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ - Bình thường: Nam: 202 – 416 µmol/l Nữ: 143 – 399 µmol/l - Acid uric máu tăng trong: Bệnh Goutte Suy thận Nhiễm độc chì, thuỷ ngân - Acid uric máu giảm trong: Bệnh Willson Cơn liệt chu kỳ Xanthin niệu V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ Ngun nhân Bệnh phẩm lấy vào ống chống đơng EDTA Sai sót Xử trí Làm giảm kết khoảng 7% Không sử dụng loại chất chống đơng Ngun nhân Sai sót Bệnh phẩm tăng bilirubin, huyết tán, tăng lipid máu, sử dụng thuốc Nồng độ > dải đo (11,9 –1487 μmol/L) Kết ảnh hưởng khơng rõ Sai lệch kết Xử trí Rất gặp Pha lỗng bệnh phẩm ĐỊNH LƯỢNG ALBUMIN I NGUYÊN LÝ Định lượng lbumin máu người bệnh theo phương pháp so màu pH= 4.1 Albumin + BCG => Albumin BCG complex (BCG: Bromcresol green) Phức hợp lbumin BCG có màu xanh tỷ lệ thuận với nồng độ lbumin mẫu thử đo bước sóng 570 nm II CHUẨN BỊ 1.Người thực 01 cán đại học, kỹ thuật viên chuyên ngành hóa sinh Phương tiện, hóa chất - Phương tiện: Máy xét nghiệm Cobas C501, U 640… - Hóa chất: Hóa chất xét nghiệm albumin, chất chuẩn albumin, chất kiểm tra chất lượng albumin Người bệnh : Người bệnh cần giải thích mục đích việc lấy máu để làm xét nghiệm Phiếu xét nghiệm: Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin tên, tuổi, giới tính, khoa phịng, chẩn đốn người bệnh ghi rõ định xét nghiệm III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH Lấy bệnh phẩm - Lấy ml máu tĩnh mạch vào ống khơng có chất chống đơng hay ống có chất chống đơng Heparin, EDTA , không sử dụng chất chống đông Fluorid Máu không vỡ hồng cầu Bệnh phẩm ổn định tháng 2–8°C, 2.5 tháng 15 - 25°C tháng - 15 đến -25°C - Sau lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết huyết tương - Bệnh phẩm rã đông lần phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước phân tích Để tránh tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chất lượng nên phân tích vòng Tiến hành kỹ thuật - Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực phân tích mẫu: Máy cài đặt chương trình xét nghiệm albumin Máy chuẩn với xét nghiệm albumin Kết kiểm tra chất lượng với xét nghiệm albumin đạt u cầu khơng nằm ngồi dải cho phép không vi phạm luật kiểm tra chất lượng - Người thực phân tích mẫu nhập liệu thông tin người bệnh định xét nghiệm vào máy phân tích hệ thống mạng (nếu có) - Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích - Ra lệnh cho máy thực phân tích mẫu bệnh phẩm - Đợi máy phân tích mẫu theo protocol máy - Khi có kết cần xem xét đánh giá kết sau in báo cáo ghi kết vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ - Trị số bình thường: 34 – 48 g/l - lbumin máu tăng trong: Mất nước (nôn nhiều, tiêu chảy nặng) - Albumin máu giảm trong: Bệnh thận (suy thận, hội chứng thận hư, viêm cầu thận) Bệnh khơng có albumin huyết bẩm sinh Giảm tổng hợp (viêm gan nặng, xơ gan), hấp thu, dinh dưỡng, Mất albumin (bỏng, tổn thương rỉ dịch, bệnh đường ruột protein) Ung thư, nhiễm trùng V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ Những yếu tố gây nhiễu cho kết xét nghiệm Kết xét nghiệm không bị ảnh hưởng khi: - Huyết vàng: Bilirubin < 60 mg/dL hay 1026 µmol/L - Tán huyết: Hemoglobin < 1000 mg/dL - Huyết đục: Triglyceride ĐO HOẠT ĐỘ AMYLASE I NGUYÊN LÝ: a mylase enzyme thủy phân tinh bột, có nguồn gốc từ tụy tuyến nước bọt Xét nghiệm amylase thường định bệnh lý tuyến tụy tuyến nước bọt… Hoạt độ enzym α mylase máu người bệnh xác định theo phương pháp động học enzym α-amylase ethylidene-G7PNP + H2O ethylidene-G5 + G2PNP + ethylideneG4 + G3PNP +ethylidene-G3 + G4PNP α-glucosidase G2PNP + G3PNP + G4PNP + 14 H2O PNP + 14 G Đậm độ màu sắc PNP hình thành tỷ lệ thuận với hoạt độ amylase huyết đo bước sóng 415 nm II CHUẨN BỊ Người thực - 01 đại học, 01 kỹ thuật viên chuyên ngành hóa sinh Phương tiện, hóa chất - Phương tiện: Máy xét nghiệm Cobas C501, U 640, MODUL R P, Hitachi 902, 912… - Hóa chất: Hóa chất xét nghiệm α mylase, chất chuẩn α mylase, chất kiểm tra chất lượng α Amylase Người bệnh - Người bệnh cần giải thích mục đích việc lấy máu để làm xét nghiệm Phiếu xét nghiệm: Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin tên, tuổi, giới tính, khoa phịng, chẩn đốn người bệnh ghi rõ định xét nghiệm III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH Lấy bệnh phẩm - Lấy ml máu tĩnh mạch vào ống khơng có chất chống đơng hay ống có chất chống đơng Li, Na hay NH4-heparin EDTA (nếu dùng EDTA , kết thấp 5-10% so với huyết thanh) Máu không vỡ hồng cầu Bệnh phẩm ổn định tháng 2–8°C, ngày 20°C đến 25°C - Sau lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết huyết tương - Bệnh phẩm rã đông lần phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước phân tích Để tránh tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chất lượng nên phân tích vịng Tiến hành kỹ thuật - Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực phân tích mẫu: Máy cài đặt chương trình xét nghiệm α mylase Máy chuẩn với xét nghiệm α mylase Kết kiểm tra chất lượng với xét nghiệm α mylase đạt yêu cầu khơng nằm ngồi dải cho phép khơng vi phạm luật kiểm tra chất lượng - Người thực phân tích mẫu nhập liệu thơng tin người bệnh định xét nghiệm vào máy phân tích hệ thống mạng (nếu có) - Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích - Ra lệnh cho máy thực phân tích mẫu bệnh phẩm - Đợi máy phân tích mẫu theo protocol máy - Khi có kết cần xem xét đánh giá kết sau in báo cáo ghi kết vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ + Trị số bình thường: < 100 U/L + mylase máu tăng trong: Bệnh tuỵ (viêm tuỵ cấp mạn), Bệnh đường mật, Bệnh ổ bụng bệnh tuỵ (loét thủng dày, tắc ruột ), Quai bị, tắc tuyến nước bọt, Tăng mylase người bình thường (tăng Macro mylase) + mylase giảm tụy bị hoại tử lan rộng, ngồi cịn giảm số bệnh lý như: Viêm tuỵ mạn tính Viêm tụy mạn tính tiến triển Xơ hố ống dẫn tụy tiến triển V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ Những yếu tố gây nhiễu cho kết xét nghiệm Kết xét nghiệm không bị ảnh hưởng khi: - Huyết vàng: Bilirubin < 60 mg/dL hay 1026 µmol/L - Tán huyết: Hemoglobin < 500 mg/dL - Huyết đục: Triglyceride ... - Mẫu bệnh phẩm cần phân tích sớm tốt Có thể bảo quản mẫu huyết huyết tương ngày nhiệt độ 2-80C Người bệnh: Đã tư vấn xét nghiệm, chuẩn bị tư tưởng khám bệnh, nhịn ăn sáng để lấy máu Phiếu xét. .. huyết - Mẫu bệnh phẩm cần phân tích sớm tốt Có thể bảo quản mẫu huyết huyết tương ngày nhiệt độ 2-8 oC Người bệnh: Đã tư vấn xét xét nghiệm, chuẩn bị tư tưởng khám bệnh, nhịn ăn sáng để lấy máu... - Chất bảo quản thích hợp cho loại bệnh phẩm thời gian bảo quản - Làm nóng lại bệnh phẩm tới nhiệt độ làm phản ứng - Tránh bay hay làm loãng bệnh phẩm LẤY NƯỚC TIỂU: Nước tiểu : Thường lấy lúc