(Luận án tiến sĩ) nghiên cứu độc tính và hiệu quả điều trị vết thương phần mềm của cao lỏng lt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QUÂN ĐỘI TRƯƠNG MINH TUẤN NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ VẾT THƯƠNG PHẦN MỀM CỦA CAO LỎNG LT LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC Hà Nội – Năm 2019 luan an BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QUÂN ĐỘI TRƯƠNG MINH TUẤN NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ VẾT THƯƠNG PHẦN MỀM CỦA CAO LỎNG LT Chuyên ngành: Y học cổ truyền Mã số: 62720201 LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC GS.TS Nguyễn Minh Hà PGS.TS Đinh Văn Hân Hà Nội – Năm 2019 luan an LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu đề tài luận án phần số liệu đề tài nghiên cứu có tên: “Nghiên cứu bào chế đánh giá tác dụng điều trị vết thương phần mềm cao lỏng LT” Kết đề tài thành nghiên cứu tập thể mà tơi thành viên Tơi Chủ nhiệm đề tài toàn thành viên nhóm nghiên cứu đồng ý cho phép sử dụng đề tài vào luận án để bảo vệ lấy tiến sĩ Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Nghiên cứu sinh Trương Minh Tuấn luan an LỜI CẢM ƠN Sau thời gian học tập nghiên cứu, trải qua nhiều khó khăn, đến tơi hồn thành luận án tiến sỹ y học Với tất lịng, tơi xin bày tỏ biết ơn sâu sắc tới Đảng ủy, Ban giám đốc, Trung tâm Huấn luyện đào tạo, Ban Khoa học Quân Viện Y học cổ truyền Quân đội tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập thực đề tài Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến GS.TS Nguyễn Minh Hà, PGS.TS Đinh Văn Hân, hai người thầy kính u tận tình bảo, hướng dẫn, động viên, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô, nhà khoa học Hội đồng cho dẫn quý báu giúp hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Trung tâm Liền vết thương Viện Bỏng Quốc gia tạo điều kiện thuận lợi để tơi nghiên cứu hồn nghiệm mơ hình động vật nghiên cứu lâm sàng Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Khoa Nghiên cứu thực nghiệm, Viện Y học cổ truyền Quân đội, với trách nhiệm, tình cảm lực chun mơn cao giúp tơi hồn thành nghiên cứu độc tính thuốc Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Khoa Điều trị tích cực Viện YHCT Quân đội giúp đỡ, tạo điều kiện cho tơi q trình thu thập số liệu lâm sàng, góp phần hồn thành nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn thủ trưởng Viện 69, tập thể cán Khoa Hình thái, Viện 69 BTL Bảo vệ Lăng Chủ tịch Hồ Chí Minh, dành cho tơi điều kiện đặc biệt người trang thiết bị giúp thu kết tốt cho luận án luan an Tơi xin chân thành cảm ơn tới tập thể Khoa Quốc tế, Viện YHCT Quân đội nơi công tác tạo điều kiện động viên, giúp đỡ suốt thời gian học tập Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn bố mẹ, anh chị em gia đình bạn bè Cảm ơn vợ chỗ dựa vững chắc, yêu thương, động viên, tạo điều kiện tốt tình cảm, tinh thần, vật chất cho tơi để hồn thành chương trình học tập thực thành cơng luận án Nghiên cứu sinh Trương Minh Tuấn luan an DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ADP ATP bFGF CAM ĐVDT ECM EGF FGF HO-1 ICAM-1 IL LD50 MBC MIC50 MMPs mRNA NF-E2 OECD OXCA PAF PDGF PRP PVA/BS ROS SEM TEM TGF β TIMPs TNF VAC VCAM-1 VEGF Adenosine Diphosphate Adenosine triphosphat basic Fibroblast Growth Factor: yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi Cell adhesion molecules: phân tử bám dính tế bào Đơn vị diện tích Extracellular matrix: Cấu trúc ngoại bào Epidermal growth factor: Yếu tố tăng trưởng biểu bì Fibroblast growth factors: Yếu tố tăng trưởng ngun bào sợi Enzyme xúc tác thối hóa heme Intercellular Adhesion Molecule 1: Phân tử kết dính tế bào Interleukin Lethal dose 50%: Liều gây chết 50% Minimum Bactericidal Concentration: Nồng độ diệt khuẩn tối thiểu Minimum Inhibitory Concentration 50%: Nồng độ ức chế tối thiểu 50% vi khuẩn ống nghiệm Matrix metalloproteinase: enzym phân hủy protein đệm Messenger RNA: Ribonucleotid acid thông tin Nuclear factor erythroid- 2: yếu tố phiên mã quan trọng quy định kích thích HO-1 Organization for Economic Cooperation and Development: Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế Oxy cao áp Platelet Activating Factor: yếu tố hoạt hóa tiểu cầu Platelet-derived growth factor: Yếu tố tăng trưởng nguồn gốc tiểu cầu platelet – rich plasma: huyết tương giàu tiểu cầu Polyvinyl alcohol/Bletilla striata Reactive oxygen species: Gốc tự oxy hóa Scanning Electron Microscope: Kính hiển vi điện tử qt Transmission Electron Microscope: Kính hiển vi điện tử truyền qua Transforming growth factor β: Yếu tố tăng trưởng chuyển dạng Tissue inhibitors of metalloproteinases: Yếu tố ức chế hoạt động MMPs Tumor necrosis factor: Yếu tố hoại tử khối u Vacuum assisted closure: Trị liệu áp lực âm Vascular cell adhesion molecule-1: Phân tử kết dính mạch máu Vascular endothelial growth factor: Yếu tố tăng trưởng nội mạc luan an mạch máu luan an DANH MỤC BẢNG Bảng Bảng 2.1 Bảng 2.2 Bảng 2.3 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.16 Bảng 3.17 Bảng 3.18 Bảng 3.19 Bảng 3.20 Bảng 3.21 Bảng 3.22 Bảng 3.23 Bảng 3.24 Bảng 3.25 Tên Bảng Trang Thang điểm đánh giá kích ứng da 42 Đánh giá mức độ kích ứng da thuốc 42 Thang điểm đánh giá vết thương RESVECH V2.0 56 Thay đổi trọng lượng thỏ nghiên cứu độc tính cấp 60 da Thay đổi trọng lượng thỏ nghiên cứu độc tính cấp 61 vết thương thực nghiệm Kết thay đổi trọng lượng thỏ nghiên cứu độc 62 tính bán trường diễn Thay đổi số huyết học thỏ thí nghiệm 63 Ảnh hưởng cao lỏng LT tới số enzym gan 64 Ảnh hưởng cao lỏng LT tới số số sinh hóa 64 máu chức gan thận Tác dụng với E.coli tỷ lệ pha loãng khác 67 Tác dụng kháng khuẩn P aeruginosa tỷ lệ pha loãng 68 khác cao lỏng LT1, LT2, LT3 Tác dụng kháng khuẩn S aureus cao lỏng LT 69 Khả kháng dòng vi khuẩn kiểm định LT1, LT2, 70 LT3 Hiệu lực kháng khuẩn cao lỏng LT 70 Trọng lượng thỏ nghiên cứu vết thương thực nghiệm 71 Các số huyết học thỏ nghiên cứu vết thương 71 thực nghiệm Các số xét nghiệm sinh hóa máu thỏ nghiên 72 cứu vết thương thực nghiệm Thay đổi diện tích vết thương thỏ 72 Tốc độ liền vết thương thỏ 73 Thay đổi diện tích vùng biểu mơ thỏ 73 Tỷ lệ cấy khuẩn vết thương dương tính thỏ 74 Mật độ vi khuẩn chỗ vết thương thỏ 74 Phân bố loài vi khuẩn chỗ vết thương thỏ 75 Thay đổi số lượng tân mạch vết thương thỏ 75 Thay đổi số lượng tế bào viêm vết thương thỏ 76 Thay đổi số lượng nguyên bào sợi vết thương thỏ 76 Nhận xét chung thay đổi hình thái mơ vết thương 79 thỏ Độ tuổi bệnh nhân vết thương cấp tính 80 luan an Bảng 3.26 Bảng 3.27 Bảng 3.28 Bảng 3.29 Bảng 3.30 Bảng 3.31 Bảng 3.32 Bảng 3.33 Bảng 3.34 Bảng 3.35 Bảng 3.36 Bảng 3.37 Bảng 3.38 Bảng 3.39 Bảng 3.40 Bảng 3.41 Bảng 3.42 Bảng 3.43 Bảng 3.44 Bảng 3.45 Bảng 3.46 Bảng 3.47 Bảng 3.48 Phân bố giới nhóm vết thương cấp tính Mạch, huyết áp, nhiệt độ nhóm vết thương cấp tính Thay đổi số huyết học nhóm vết thương cấp tính Sự biến đổi số sinh hóa nhóm vết thương cấp tính Biến đổi kích thước vết thương cấp tính Tỷ lệ phần trăm thu hẹp vết thương cấp tính Điểm RESVECH 2.0 nhóm cấp tính Tỷ lệ cấy khuẩn dương tính nhóm vết thương cấp tính Phân bố vết thương cấp tính theo chủng vi khuẩn nhiễm Mật độ vi khuẩn trung bình nhóm vết thương cấp tính Độ tuổi bệnh nhân có vết thương mạn tính Phân bố giới nhóm vết thương mạn tính Mạch, nhiệt độ, huyết áp nhóm vết thương mạn tính Vị trí tổn thương nhóm vết thương mạn tính Phân bố theo ngun nhân tổn thương nhóm vết thương mạn tính Thay đổi số huyết học bệnh nhân vết thương mạn tính Các số sinh hóa bệnh nhân nhóm mạn tính Biến đổi kích thước nhóm vết thương mạn tính Thay đổi theo thang điểm RESVECH 2.0 nhóm vết thương mạn tính Tỷ lệ phần trăm thu hẹp nhóm vết thương mạn tính Phân bố theo chủng vi khuẩn nhiễm nhóm vết thương mạn tính Tỷ lệ cấy khuẩn dương tính nhóm vết thương mạn tính Mật độ vi khuẩn chỗ nhóm vết thương mạn tính luan an 80 80 81 81 82 82 82 83 84 84 84 85 85 85 85 86 86 88 88 89 89 90 90 DANH MỤC HÌNH Hình Hình 1.1 Hình 1.2 Hình 1.3 Hình 1.4 Hình 1.5 Hình 1.6 Hình 1.7 Hình 1.8 Hình 1.9 Hình 1.10 Hình 1.11 Hình 1.12 Hình 2.1 Hình 2.2 Hình 2.3 Hình 2.4 Hình 2.5 Hình 2.6 Hình 2.7 Hình 2.8 Hình 2.9 Hình 2.10 Hình 2.11 Hình 2.12 Hình 3.1 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 Hình 3.5 Hình 3.6 Hình 3.7 Hình 3.8 Tên hình Trang Cấu trúc da Các dạng vết thương nguyên nhân học Vết thương nhiệt hóa chất Các vết lt mạn tính Tổ chức hạt mọc đẹp 10 Q trình biểu mơ hóa 10 Máy điều trị oxy cao áp 15 Hệ thống VAC 16 Tạo vết thương toàn da lưng lợn kìm bấm 27 sinh thiết Elgharably Các bước gây vết thương bỏng thực nghiệm 27 Tạo vết lt mạn tính Adriamycin 28 Q trình LVT da tái tạo 29 Cao lỏng LT 36 Dụng cụ sinh thiết (biopsy punch) dùng nghiên cứu 37 Kính hiển vi điện tử quét JSM 5410LV dùng nghiên cứu 37 Kính hiển vi điện tử truyền qua JEM 1400 dùng nghiên 38 cứu Thỏ cạo làm lơng tồn vùng sống lưng 41 bên sườn Tạo vết thương đắp thuốc nghiên cứu độc tính cấp vết 44 thương da thực nghiệm Đắp thuốc lên vùng lưng hai bên sườn bụng thỏ 45 Lấy máu tĩnh mạch tai thỏ để làm xét nghiệm 46 Đánh dấu vùng tạo vết thương tạo vết thương thỏ 49 Đắp thuốc nghiên cứu thỏ thí nghiệm 50 Tính diện tích vết thương thỏ phần mềm imageJ 51 Đo diện tích vết thương bệnh nhân phần mềm 55 ImageJ chế độ polygon selection Hình ảnh chỗ đắp Cao lỏng LT da thỏ 61 Hình ảnh chỗ đắp Cao lỏng LT vết thương thực 62 nghiệm Hình ảnh đại thể thận thỏ 65 Hình ảnh đại thể gan thỏ 65 Hình ảnh vi thể gan thỏ nghiên cứu độc tính bán trường diễn 66 Hình ảnh vi thể thận thỏ nghiên cứu độc tính bán trường diễn 66 Hình ảnh vi thể da thỏ nghiên cứu độc tính bán trường diễn 66 Khả kháng khuẩn E.coli tỷ lệ pha loãng khác 67 luan an 47 582 McCarty SM, Percival SL (2010), "Proteases and delayed wound 48 healing," Adv Wound Care, vol 2, pp 438–447 Schreml S, Szeimies RM, Prantl L, at al (2010), "Oxygen in acute and 49 chronic wound healing," Br J Dermatol, vol 163, pp 257–268 Schultz GS, Sibbald RG, Falanga V, et al (2003), "Wound bed preparation: a systematic approach to wound management," Wound 50 Repair Regen, vol Suppl 1, pp S1–S28 Ennis WJ, Sui A, Bartholomew A (2013), "Stem cells and healing: 51 impact on inflammation," Adv Wound Care, vol 2, pp 369–378 Nguyễn Văn Trung, Chu Anh Tuấn (2017), "Nghiên cứu tác dụng trị liệu oxy cao áp điều trị vết loét tỳ đè," Tạp chi Y học thảm 52 họa & Bỏng, số 2, tr 30-43 Paweł Jan Stanirowski, Anna Wnuk, Krzysztof Cendrowski, at al (2015), "Growth factors, silver dressings and negative pressure wound therapy in the management of hard-to-heal postoperative wounds in obstetrics and gynecology: a review," Arch Gynecol Obstet, vol 292, no 53 4, pp 757–775 Phạm Trịnh Quốc Khanh, Đinh Phương Đông (2014), "Nhận xét bước đầu kết ứng dụng phẫu thuật cắt mô hoại tử dao thủy lực điều trị vết thương mạn tính," Tạp chí Y học thảm họa & bỏng, số 5, tr 54 170-184 Nguyễn Văn Thanh, Trần Vân Anh, Nguyễn Văn Huệ (2017), "Nghiên cứu ứng dụng điều trị loét cụt mức độ nặng (III,IV) vạt da cân có cuống mạch ni nhánh xun động mạch mơng trên," Tạp 55 chí Y học thảm họa&bỏng, số 3, tr 65-70 George Han, Roger Ceilley (2017), "Chronic Wound Healing: A Review of Current Management and Treatments," Advances in Therapy, vol 34, no 3, pp 599–610 luan an 56 Supaporn Opasanon, Warut Pongsapich, Sitthichoke Taweepraditpol, at al (2015), "Clinical Effectiveness of Hyperbaric Oxygen Therapy in Complex Wounds," J Am Coll Clin Wound Spec, vol 57 6, no 1-2, pp 9-13 Chu Anh Tuấn (2017), "Ứng dụng Oxy cao áp điều trị vết thương, vết 58 bỏng," Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 1, tr 24-31 Nguyễn Văn Thanh, Trần Vân Anh, Nguyễn Văn Huệ (2014), "Nghiên cứu ứng dụng trị liệu áp lực âm điều trị vết loét cụt ," 59 Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 5, tr 133-141 Hoàng Văn Vụ, Nguyễn Ngọc Tuấn (2018), "Tổng quan trị liệu áp lực âm vết thương kiểm soát vết thương bỏng," Tạp chi Y học thảm họa & Bỏng, số 1, tr 63-73.Hoàng Văn Vụ, Nguyễn Ngọc Tuấn, "Tổng quan trị liệu áp lực âm vết thương kiểm soát vết thương bỏng," Tạp chi Y học thảm họa & Bỏng, vol 1, pp 63-73, 2018 60 Nguyễn Trường Giang (2012), "Đánh giá kết chăm sóc, điều trị vết thương liệu pháp hút chân không," Tạp chí Y - Dược học quân sự, 61 số 3, tr 85-90 Trần Đồn Đạo, Lê Nguyễn Diên Minh, Ngơ Đức Hiệp (2011), "Đánh giá hiệu máy hút áp lực âm điều trị vết thương mạn tính kết bước đầu," Y học TP Hồ Chí Minh, số 15, tập 4, tr 198- 62 204 Yukio Sekiguchi (2016), "Conservative therapy for the management of cardiac implantable electronic device infection," J Arrhythm, vol 32, no 63 4, pp 293–296 Tatiana ND, Michael RH, Ira MH (2012), "Acute and Impaired Wound Healing: Pathophysiology and Current Methods for Drug Delivery, Part 2: Role of Growth Factors in Normal and Pathological Wound Healing: Therapeutic Potential and Methods of Delivery," Adv Skin Wound Care, vol 25, no 8, pp 349-370 luan an 64 Noah R Johnson, Yadong Wang (2015), "Coacervate delivery of HBEGF accelerates healing of type diabetic wounds," Wound Repair 65 Regen, vol 23, no 4, pp 591–600 Nguyễn Thị Bích Phượng, Nguyễn Ngọc Tuấn (2017), "Đánh giá hiệu liệu pháp huyết tương giàu tiểu cầu tự thân điều trị chỗ vết 66 loét mạn tính," Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 2, tr 56-64 Meng-Tsan Tsai, Chih-Hsun Yang, Su-Chin Shen, at al (2013), "Monitoring of wound healing process of human skin after fractional laser treatments with optical coherence tomography," Biomed Opt 67 Express, vol 4, no 11, pp 2362–2375 Moore P, Ridgway TD, Higbee RG (2005), "Effect of wavelength on low-intensity laser irradiation-stimulated cell proliferation in vitro," 68 Lasers Surg Med, vol 36, no 1, pp 8-12 Đinh Văn Hân, Nguyễn Mạnh Hùng, Ngô Ngọc Hà (2014), "Đánh giá ảnh hưởng laser bán dẫn vùng ánh sáng đỏ (630-670nm) tới trình liền vết thương cấp tính mạn tính," Tạp chí Y học thảm họa & bỏng, 69 số 5, tr 160-169 Phạm Trịnh Quốc Khanh (2018), "Cập nhật chọn lựa dung dịch rửa vết 70 thương," Tạp chi Y học thảm họa & Bỏng, số 2, tr 80-90 Phạm Trịnh Quốc Khanh (2018), "Đánh giá bước đầu hiệu phân hủy biofilm dung dịch/kem betaine 0,1% - polyhexanide 0,1% điều trị vết thương mạn tính bệnh viện Trưng Vương," Tạp chí Y học 71 thảm họa & Bỏng, số 1, tr 39-46 Blessing Atim Aderibigbe, Buhle Buyana (2018), "Alginate in Wound Dressings," Pharmaceutics, vol 10, no 2, pp.42 doi: 10.3390/ 72 pharmaceutics10020042 Bộ Y tế (2015), Quyết định việc ban hành danh mục bệnh Y học cổ truyền tạm thời để mã hóa thí điểm áp dụng khám bênh, chữa bệnh 73 toán bảo hiểm y tế, Quyết định số 2782/QĐ-BYT Phạm Văn Trịnh, Lê Thị Hiền (2008), Bệnh Học Ngoại – Phụ Y Học Cổ Truyền.: Nhà Xuất Y học luan an 74 Hồng Đơn Hịa (1980), Hoạt nhân tốt yếu Hà Nội: Nhà Xuất Y 75 học 阙华发 , 唐汉钧 , 王林扬 , 代红雨 (2005), "益气化瘀法促进慢性难 愈性创面修复愈合的机制研究 ," 中西医结合学报 , vol 3, no 3, pp 243-246 (Khuyết Hoa Phát, Đường Hán Quân, Vương Lâm Dương, Đại Hồng Vũ (2005) “Nghiên cứu chế tác dụng thúc đẩy liền vết thương mạn tính pháp ích khí hóa ứ”, Học báo đông tây y kết hợp, số 3, tập 76 3, tr 243-246) 冯鑫，周永梅，房德敏 (2015), "中药对伤口愈合干预作用的机理研 究," 辽宁中医杂志, vol 42, no 8, pp 1498-1501 (Mã Hâm, Châu Vĩnh Mai, Phòng Đức Mẫn (2015) Nghiên cứu chế tác dụng liền vết thương thuốc Trung dược Tạp chí Trung y Liêu 77 Ninh, số 42, tập 8, tr 1498-1501) 章敏,王勇 (2009), "中医祛腐生肌理论论治慢性难愈性溃疡创面探 讨," 光明中医, vol 5, pp 794-796 (Trương Mẫn, Vương Dũng (2009) Bàn chế pháp khứ hủ sinh điều trị vết loét mạn tính khó liền Trung y quang minh số 78 5, tr 794-796) 杨秦, 曾莉, 李文林 (2012), "中医外科关于疮疡研究的知识图谱分析 ," 南京中医药大学学报, vol 28, no 6, pp 535-537 (Dương Tần, Tăng Lị, Lí Văn Lâm (2012) Phân tích tư liệu nghiên cứu vết thương vết loét ngoại khoa Trung y Học báo đại học Trung y dược Nam Kinh Số 28, tập 6, tr 535-537) luan an 79 刘胜,唐汉钧,陆德铭 (2000), ""煨脓长肉"法在中医外科中 的应用," 中医杂志, vol 41, no 7, p 443 (Lưu Thăng, Đường Hán Quân, Lục Đức Minh (2000) Ứng dụng pháp “Ôi nùng trưởng nhục ngoại khoa Trung y” Tạp chí Trung y, 80 số 41, tập 7, tr 443) 卢旭亚，张朝晖 (2015), "煨脓长肉在中医外科领域的研究进展," 中 医外治杂志, vol 24, no 4, pp 51-52 (Lô Húc Á, Trương Chiều Huy (2015) Triển vọng nghiên cứu Ôi nùng trưởng nhục lĩnh vực ngoại khoa Trung y Tạp chí Trung y 81 ngoại trị, số 24, tập 4, tr 51-52) 徐杰男, 阙华发 (2011), "中医外科“提脓祛腐”“煨脓长肉”理论与应 用," 上海中医药杂志, vol 45, no 12, pp 24-26 (Từ Kiệt Nam, Khuyết Hoa Phát (2011) Lý luận “Khứ hủ nùng” “Ôi nùng trưởng nhục” ứng dụng Trung y ngoại khoa 82 Tạp chí Trung y dược Thượng Hải, số 45, tập 12, tr 24-26) 冯靖禧 , 李丹彦 (2007), "健脾益气类中药治疗难愈合性伤口及其机 理的探讨," 中华中医药学刊, vol 25, no 1, pp 126-127 (Phùng Tĩnh Hi, Lý Đan Ngạn (2007) Bàn luận thuốc kiện tỳ ích khí điều trị vết thương mạn tính khó liền chế tác dụng Học san Trung y dược Trung Hoa, số 25, tập 1, tr 126-127) 冯靖禧 , 李丹彦, "健脾益 气类中药治疗难愈合性伤口及其机理的探讨 ," 中华中医药学刊 , vol 25, no 1, pp 126-127, 2007 83 Trần Hữu Hiệp, Nguyễn Minh Hà, Nghiêm Đình Phàn (2010), "Đánh giá tác dụng điều trị vết thương phần mềm nhiễm khuẩn cao lỏng BD 84 số tiêu lâm sàng," Y học thực hành, số 5, tr 22-24 Nguyễn Tiến Dũng, Nguyễn Ngọc Tuấn, Nguyễn Thị Vân Anh (2014), "Đánh giá tác dụng điều trị kem berberin 0,1% chỗ vết thương mạn tính," Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 5, tr 67-78 luan an 85 Hồ Hữu Phước (2014), "Nghiên cứu tác dụng điều trị hỗ trợ kháng khuẩn làm vết thương thuốc mỡ Eupolin vết thương 86 bỏng sâu điện," Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 5, tr 120-123 Lương Thị Kỳ Thủy, Lê Thị Cúc, Phạm Viết Dự (2015), "Đánh giá hiệu điều trị loét da mạn tính cao TG lâm sàng," Tạp chí Y 87 dược học cổ truyền Quân sự, tập 2, số 5, tr 34-42 李 允新 , 解玉秀 (2005), "单味党参治疗难愈性伤口 46 例," 中华实 用中西医杂志, vol 18, no 6, p 850 (Lý Doãn Tân, Giải Ngọc Tú (2005) Độc vi đảng sâm điều trị 46 bệnh nhân vết thương mạn tính Tạp chí Trung tây y kết hợp thực hành Trung 88 Hoa, số 18, tập 6, tr 850) 崔魁丽 , 张盼花 , 周爱杰 (2006), "京万红软膏治疗压疮的疗效观察," 中华现代护理杂志, vol 12, no 12, p 1114 (Thôi Khôi Lệ, Trương Phán Hoa, Châu Ái Kiệt (2006) Quan sát hiệu lâm sàng Kinh phương hồng nhuyễn cao điều trị loét tỳ đè 89 Tạp chí hộ lý đại Trung Hoa, số 12, tập 12, tr 1114) 秦丽娜 , 黄少娅 , 罗喜婵 (2006), "新鲜芦荟加生肌膏治疗褥疮的疗 效观察 ," 中华现代护理杂志, vol 12, no 16, pp 1510-1511 (Tần Lệ Na, Hoàng Thiếu Á, La Hỉ Thuyền (2006) Quan sát hiệu điều trị lt mạn tính lơ hội tươi trộn cao sinh Tạp chí hộ lý 90 đại Trung Hoa, số 12, tập 16, tr 1510-1511) Qian Hou, Wen-Jun He, Hao-Jie Hao (2014), "The Four-Herb Chinese Medicine ANBP Enhances Wound Healing and Inhibits Scar Formation via Bidirectional Regulation of Transformation Growth Factor Pathway," 91 Plos one, vol 9, no 12, pp doi: 10.1371/journal.pone.0112274 PE Ogwang, J Nyafuono, Moses Agwaya (2011), "Preclinical efficacy and safety of herbal formulation for management of wounds," African Health Sciences, vol 11, no 3, pp 524–529 luan an 92 Shirin Fahimi, Mohammad Abdollahi, Seyed Alireza Mortazavi, at al (2015), "Wound Healing Activity of a Traditionally Used Poly Herbal Product in a Burn Wound Model in Rats," Iranian Red Crescent Medical 93 Journal, vol 17, no 9, p e19960 Jami R Erickson, Karen Echeverri (2018), "Learning from regeneration research organisms: The circuitous road to scar free wound 94 healing," Dev Biol, vol 433, no 2, pp 144-154 H Elgharably, S Roy, S Khanna, at al (2013), "A Modified Collagen Gel Enhances Healing Outcome in a Pre-Clinical Swine Model of 95 Excisional Wounds," Wound Repair Regen, vol 21, no 3, pp 473-481 H Calum, N Hoiby, C Moser (2014), "Burn Mouse Models," in Pseudomonas 96 Methods and Protocols New York: Springer Science+Business Media, pp 793-802 Johanneke J.J.Akershoek, Katrien M.Brouwer, Marcel Vlig, at al (2018), "Early intervention by Captopril does not improve wound healing of partial thickness burn wounds in a rat model," Burns, vol 44, no 2, 97 pp 429-435 Lương Thị Kỳ Thủy, Đinh Văn Hân, Phạm Viết Dự (2014), "Đánh giá tác dụng điều trị lt da mạn tính cao TG mơ hình thực nghiệm," 98 Tạp chí Y dược học cổ truyền Quân sự, số 4, tập 2, tr 15-22 J Wen, XY Li, X leng, at al (2016), "An advanced mouse model for human skin wound healing," Experimental Dermatology, vol 26, no 5, 99 pp 433-435 Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V-Tập Hà Nội: Nhà Xuất Bản Y 100 Học Phùng Thị Hằng, Nguyễn Bảo Toàn (2011), "Nhân giống tràm (Melaleuca Cajuputi powell) phương pháp ni cấy mơ," Tạp chí 101 Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, số 20b, tr 89-96 Trần Quang Bảo (2012), "Khả cải tạo đất nước rừng tràm vùng lũ đồng sông Cửu Long," Nông nghiệp phát triển nông thôn, số 1, tr 95-100 luan an 102 Nguyễn Đức Vượng, Lê Thị Bạch Liên, Nguyễn Mỹ Duyên, CS (2014), "Nghiên cứu tinh chế dầu tràm từ tràm hoa vàng phường Đồng Sơn, Đồng Hới, Quảng Bình," Tạp chí Thơng tin Khoa học&Cơng 103 nghệ Quảng Bình, số 6, tr 34-36 Huỳnh Kim Diệu (2011), "Đánh giá đặc tính chủng hoạt tính kháng khuẩn Tràm (Melaleuca leucadendra)," Tạp chí Khoa học 104 Trường Đại học Cần Thơ, số 19a, tr 143-148 S Rattanaburi, W Mahabusarakam (2013), "A new chromone from the leaves of Melaleuca cajuputi Powell," Natural Product Research, số 7, 105 tập 3, tr 221-225 Luiz Claudio A.Barbosa, CJ Silva, RR Teixeira, at al (2013), "Chemistry and Biological Activities of Essential Oils from Melaleuca L 106 Species," Agriculturae Conspectus Scientificus, vol 78, no 1, pp 11-23 Nader Pazyar, Reza Yaghoobi, Nooshin Bagherani, at al (2013), "A review of applications of tea tree oil in dermatology," International 107 Journal of Dermatology, vol 52, pp 784-790 赵鑫, 鲍其泠, 张磊, 等 (2012), "互叶白千层精油 GC - MS 挥发性成 分及抗菌活性研究," 山东化工, vol 11, pp 21-23 (Triệu Hâm, Bào Kỳ Linh, Trương Lỗi CS (2012) Nghiên cứu thành phần hoạt tính GC-MC tác dụng kháng khuẩn tinh dầu tràm 108 Hóa cơng Sơn Đơng, số 11, tr 21-23) Udomlak Sukatta, P Rughtaworm, O Tuntawiroon, at al (2011), "Physico-Chemical Properties, Chemical Composition and In Vitro Antimicrobial and Free Radical-Scavenging Capacity of Tea Tree 109 Essential Oil in Thailand," Kasetsart J Nat Sci, vol 45, pp 473 – 480 Phan Dinh Tuan, Hoang Minh Nam, Nguyen Thi Thanh Nga (2008), "study on antibacterian of tea tree oil and its application in cosmetics," Journal of Science and Technology Development, vol 11, no 8, pp 105113 luan an Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, vol Volume 111 2014, Article ID 726341, no DOI: 10.1155/2014/726341, pp 1-6 Nogueira MN, Aquino SG, Rossa Junior C (2014), "Terpinen-4-ol and alpha-terpineol (tea tree oil components) inhibit the production of IL-1β, IL-6 and IL-10 on human macrophages," inflammation Research, vol 63, 112 no 9, pp 769-778 C Brand, A Ferrante, RH Prager, at al (2001), "The water solublecomponents of the essential oil of Melaleuca alternifolia (tea tree oil) suppress the production of superoxide by human monocytes, but not 113 neutrophils, activated in vitro," Inflamm Res, vol 50, pp 213-219 Lee SY, Chen PY, Lin JC, at al (2017), "Melaleuca alternifolia Induces Heme Oxygenase-1 Expression in Murine RAW264.7 Cells through Activation of the Nrf2-ARE Pathway," American Journal of Chinese 114 medicine, vol 45, no 8, pp 1-18 Hart P.H, C Brand, C.F Carson, at al (2000), "Terpinen-4-ol, the main component of the essential oil of Melaleuca alternifolia (tea tree oil), suppresses inflammatory mediator production by activated human 115 monocytes," Inflamm Res, vol 49, pp 619-626 Carson CF, Riley TV, Cooksont BD (1998), "Efficacy and safety of tea tree oil as a topical antimicrobial agent," Journal of Hospital Infection, 116 vol 40, pp 175–178 Homeyer D.C, Sanchez C.J, Mende K, at al (2015), "In Vitro activity of Melaleuca alternifolia (tea tree) oil on filamentous fungi and toxicity 117 to human cells," Medical Mycology, vol 53, no 3, pp 285-294 R Loughlin, BF Gilmore, PA McCarron, at al (2008), "Comparison of the cidal activity of tea tree oil and terpinen‐4‐ol against clinical bacterial skin isolates and human fibroblast cells," Letters in Applied 118 Microbiology, vol 46, no 4, pp 428-433 A N Panche, A D Diwan, S R Chandra (2016), "Flavonoids: an overview," Journal of Nutritional Science, vol 5, no 47, pp 1-15 luan an 119 A Muralidhar, K Sudhakar Babu (2013), "Wound healing activity of flavonoid fraction isolated from the stem bark of Butea monosperma (Lam) in albino wistar rats," European Journal of Experimental Biology, 120 vol 3, no 6, pp 1-6 Wiwik Misaco Yuniarti, Hardany Primarizky, Bambang Sektiari Lukiswanto (2018), "The activity of pomegranate extract standardized 40% ellagic acid during the healing process of incision wounds in albino 121 rats (Rattus norvegicus)," Veterinary World, vol 11, no 3, pp 321-326 Hardany Primarizky, WM Yuniarti, BS Lukiswanto (2017), "Ellagic Acid Activity in Healing Process of Incision Wound on Male Albino Rats (Rattus norvegicus)," in The Veterinary Medicine International 122 Conference, KnE Life Sciences, pp 224-233 Dmitry YK, Raissa AM, Evgenii NK (2014), "Physiological Action of Anthraquinone-Containing Preparations," International Journal of 123 Chemical and Molecular Engineering, vol 8, no 7, pp 458-462 Jin-Hyung Lee, Yong-Guy Kim, Shi Yong Ryu (2016), "Calciumchelating alizarin and other anthraquinones inhibit biofilm formation and the hemolytic activity of Staphylococcus aureus," Scientific Reports, vol 124 6, pp doi: 10.1038/srep19267 Abhishek Adhya, Jayanta Bain, Oindri Ray, at al (2014), "Healing of burn wounds by topical treatment: A randomized controlled comparison between silver sulfadiazine and nano-crystalline silver," Journal of Basic 125 and Clinical Pharmacy, vol 6, no 1, pp 29-34 OECD (1987), "Acute Dermal Toxicity (402)," in OECD Guideline for 126 the testing of chemicals Bộ Y tế (1999), "Phương pháp thử kích ứng da," in Quyết định số 127 3113/1999/QĐ-BYT 卫生部药政管理局（1994）。中药新药研究指南（药学 药理学 毒 理学）。卫生部药政管理局出版社, p 209。 (Cục quản lý dược Bộ Y tế (1994) Hướng dẫn nghiên cứu thuốc Trung dược tân dược (Dược học, dược lý học, độc học) Nhà xuất Cục luan an 128 quản lý dược Bộ Y tế, tr 209) Đỗ Trung Đàm (2014), Phương pháp xác định độc tính thuốc Nhà 129 xuất Y học OECD (1981), "Subchronic Dermal Toxicity: 90 day study (411)," in 130 OECD Guideline for the testing of chemicals Lori O Lim (2004), Hydramethylnon Risk Characterization Document.: 131 California Environmental Protection Agency 杨瑞，李亚洁 (2003), "创伤修复动物模型的建立," 护理研究, vol 17, no 12, pp 1369-1370 (Dương Thụy, Lý Á Khiết (2003) Thiết lập mơ hình vết thương 132 động vật Nghiên cứu hộ lý, số 17, tập 12, tr 1369-1370) Pilar IM, Jose A, J Javier (2012), Conjunto Mínimo Básico de Datos en Registros de Úlceras por Presión (CMDB-UPP), 1st ed., GNEAUPP, Ed 133 Spain: GNEAUPP Chandra SA, Stokes AH, Hailey R (2015), "Dermal toxicity studies: factors impacting study interpretation and outcome," Toxicol Pathol, vol 134 43, no 4, pp 474-481 H.Mielke Strickland, M.N.Jacobs (2017), "Biometrical evaluation of the performance of the revised OECD Test Guideline 402 for assessing acute dermal toxicity," Regulatory Toxicology and Pharmacology, vol 135 89, pp 26-39 OECD (2002), "Acute Dermal Irritation/Corrosion (404)," in OECD 136 GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS Groot AC, Schmidt E (2016), "Tea tree oil: contact allergy and chemical 137 composition," Contact Dermatitis, vol 75, no 3, pp 129-143 董活波,杨美玲,胡帅尔, 等 (2013), "茶树油皮肤消毒液的毒理学安全 性评价," 中国热带医学, vol 13, no 12, pp 1460-1463 (Đổng Hoạt Ba, Dương Mỹ Linh, Hồ Sối Nhĩ CS (2013) Đánh giá tính an tồn tinh dầu tràm dùng sát khuẩn da Y học nhiệt đới Trung Quốc, số 13, tập 12, tr 1460-1463) luan an cộng (2016), "Độc tính bán trường diễn cao xoa bách xà động vật thực nghiệm," Tạp chí Nghiên cứu Y học, số 99, tập 1, tr 32139 39 Edoardo G Giannini, Roberto Testa, Vincenzo Savarino (2005), "Liver enzyme alteration: a guide for clinicians," Canadian Medical 140 Association or its licensors, vol 172, no 3, pp 367–379 P G Bowler, B I Duerden, D G Armstrong (2001), "Wound Microbiology and Associated Approaches to Wound Management," 141 American society for microbiology, vol 14, no 2, pp 244-269 Vũ Ngọc Lộ, Nguyễn Thái An (2010), "Tác dụng sinh học tinh 142 dầu," Tạp chí Dược học, số 414, tập 50, tr 51-54 Huỳnh Thị Ngọc Lan, Hồ Ánh Nguyệt, Lâm Thị Ngọc Phương (2014), "Tính kháng khuẩn tinh dầu tràm trà Úc tinh dầu hương nhu trắng chủng vi khuẩn đề kháng kháng sinh phân lập từ bệnh 143 phẩm," Y học TP Hồ Chí Minh, số 18, tập 2, tr 209-215 Vũ Thu Trang, Nguyễn Thị Hoa (2015), "Nghiên cứu hiệu kháng vi khuẩn satphylococus aureus sử dụng kết hợp loại tinh dầu Việt 144 Nam," Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, số 53, tập 4, tr 417-424 Cowan MM (1999), "Plant products as antimicrobial agents," Clinical 145 microbiology review, vol 12, no 4, pp 564-582 Trøstrup H, Thomsen K, Calum H, at al (2016), "Animal models of chronic wound care: the application of biofilms in clinical research," 146 Chronic Wound Care Management and Research, vol 3, pp 123-132 Wang Jin, Scott W.McCue, Matthew J.Simpson (2018), "The role of initial geometry in experimental models of wound closing," Chemical 147 Engineering Science, vol 179, pp 221-226 Atiyeh BS, Costagliola M, Hayek SN, at al (2007), "Effect of silver on burn wound infection control and healing: review of the literature," Burn 148 J Int Soc Burn Inj, vol 33, no 2, pp 139-148 Chaloupka K, Malam Y, Seifalian AM (2010), "Nanosilver as a new generation of nanoproduct in biomedical application," Trends in luan an 149 Biotechnol, vol 28, no 11, pp 580-588 Chử Thị Thu Huyền, Nguyễn Thị Thanh Bình, Trịnh Ngọc Dương (2014), "Nano tiều phân bạc triển vọng ứng dụng Dược học," Tạp chi Khoa học Đại học Quốc gia Hà Nội: Khoa học Tự nhiên 150 Công nghệ, số 30, tập 2, tr 23-32 Đinh Văn Hân (2005), "Liền vết thương vết bỏng-các yếu tố ảnh hưởng tới trình liền vết thương vết bỏng," Tạp trí y học thảm họa & bỏng, 151 số 4, tr 99-107 Carlos J, Soriano JV (2012), "Development of a wound healing index 152 for chronic wounds," EWMA Journal, số 12, tập 2, tr 39-46 Phan Thị Kim Ngân, Nguyễn Thị Bích Đào (2014), "Vi khuẩn học nhiễm trùng vết loét bàn chân nhóm bệnh nhân đái tháo đường typ 2," 153 Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, số 18, tập 4, tr 60-68 Nguyễn Ngọc Tuấn, Nguyễn Thị Bích Phượng (2017), "Diễn biến mô bệnh học chỗ vết thương mạn tính điều trị liệu pháp huyết tương giàu tiểu cầu tự thân," Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, số 1, tr 154 48-54 Hoàng Văn Quang, Lê Bảo Huy, Nguyễn Thị Thảo Sương (2013), "Đánh giá hiệu sanyrene phịng ngừa lt tì đè," Tạp 155 chí Y học TP Hồ Chí Minh, số 17, tập 3, tr 125-130 Castro B, Bastida FD, Segovia T, at al (2017), "The use of an antioxidant dressing on hard-to-heal wounds: a multicentre, prospective 156 case series," J Wound Care, vol 26, no 12, pp 742-750 Thomas Mustoe (2004), "Understanding chronic wounds: a unifying hypothesis on their pathogenesis and implications for therapy," Am J 157 Surg, vol 187, no 5A, pp 65S-70S C.T.K.H.Stadtländer (2007), "Scanning Electron Microscopy and Transmission Electron Microscopy of Mollicutes: Challenges and Opportunities," Modern Research and Educational Topics in Microscopy, vol Formatex, pp 122-131 luan an 浙江临床医学, vol 12, no 3, pp 921-922 (Đổng Lê Cường, Vương Duy Giai (2001) Triển vọng nghiên cứu chế tác dụng thuốc Trung dược dùng điều trị vết thương Y học lâm sàng Triết Giang, số 12, tập 3, tr 921-922) x luan an PHỤ LỤC Phụ lục 1: Phụ lục 2: Phụ lục 3: Phụ lục 4: Phụ lục 5: Phụ lục 6: Quy trình bào chế cao lỏng LT Phiếu kiểm nghiệm dược liệu đầu vào tràm Tiêu chuẩn sở cao lỏng LT Phiếu kiểm nghiệm cao lỏng LT Kết nghiên cứu độc tính cấp đường ngồi da cao lỏng LT Kết nghiên cứu độc tính cấp vết thương thực nghiệm Phụ lục 7: cao lỏng LT Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn đường da Phụ lục 8: cao lỏng LT Kết nghiên cứu tác dụng kháng vi sinh vật kiểm định cao Phụ lục 9: lỏng LT Kết nghiên cứu tác dụng điều trị vết thương phần mềm thực nghiệm cao lỏng LT Phụ lục 10: Chấp thuận Hội đồng KH&CN Viện YHCT Quân đội khía cạnh đạo đức nghiên cứu y sinh học Phụ lục 11: Chấp thuận Hội đồng Y đức Viện Bỏng Quốc gia Phụ lục 12: Phiếu tình nguyện tham gia nghiên cứu Phụ lục 13: Giấy chứng nhận thực hành tốt Thử nghiệm lâm sàng vấn đề đạo đức nghiên cứu Phụ lục 14: Phiếu nghiên cứu sử dụng lâm sàng Phụ lục 15: Danh sách bệnh nhân nghiên cứu luan an ... vào sử dụng cần phải nghiên cứu cách Vì chúng tơi tiến hành đề tài ? ?Nghiên cứu độc tính hiệu điều trị vết thương phần mềm cao lỏng LT? ?? với hai mục tiêu: 1- Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán... dụng điều trị vết thương phần mềm thực nghiệm 71 3.2.2 Tác dụng điều trị vết thương cao lỏng LT lâm sàng .80 3.2.2.1 Tác dụng cao lỏng LT điều trị số bệnh nhân vết thương phần mềm cấp tính. .. 2.3.1.1 Độc tính cấp tính kích ứng da cao lỏng LT 40 2.3.1.2 Độc tính bán trường diễn đường ngồi da cao lỏng LT 44 2.3.2 Đánh giá hiệu cao lỏng LT thực nghiệm lâm sàng 47 luan an 2.3.2.1 Hiệu cao