Luận án nghiên cứu cơ sở khoa học bảo tồn nguồn gen các loài thuộc chi lan kim tuyến (anoectochilus blume) tại tỉnh thanh hoá

1 MỞ ĐẦU Tí h cấp h ế l ậ Chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume), thuộc họ Lan (Orchidaceae), chi thực vật có giá trị làm thuốc, chúng dùng việc điều trị chứng bệnh đau ngực, đau bụng, tiểu đường, viêm thận, sốt, huyết áp cao, liệt dương, rối loạn gan, lách chứng đau nhói ngực (Nguyễn Tiến Bân, 2005) [6] Theo y học cổ truyền Trung Quốc, Lan kim tuyến dùng làm thuốc để điều trị bệnh tiểu đường, làm tan khối u, giảm lipase máu chữa viêm gan (Đỗ Tất Lợi, 2004) [27] Nghị định 06/2019/NĐ-CP ngày 22/01/2019 Chính phủ xếp lồi thuộc nhóm IA (A setaceus Blume, A.acalcaratus Aver, A.calcareus Aver) lồi cịn lại chi thuộc nhóm IIA[12] Các loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) đứng trước nguy môi trường sống bị mát, suy thoái; bị động vật sử dụng làm thức ăn, việc khai thác cách bừa bãi nhu cầu sử dụng ngày tăng người khiến cho nguồn gen tự nhiên ngày suy giảm (Zhang cộng sự, 2013) [102] Từ thực tế 20 năm công tác liên quan đến nghiên cứu khoa học công tác bảo tồn thân nhận thấy: thực trạng có nhiều cán Kiểm lâm sở cán kỹ thuật đơn vị rừng đặc dụng tỉnh Thanh Hóa chưa nhận biết, phân biệt đến cấp độ loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume), gọi chung Lan kim tuyến cho tất loài, dẫn đến nhiều hạn chế thực thi pháp luật tham mưu, đề xuất giải pháp quản lý, bảo tồn có hiệu nguồn gen quý Từ sở nêu trên, việc “Nghiên cứu sở khoa học bảo tồn nguồn gen loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hoá” cần thiết cấp bách Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu chung: Cung cấp sở khoa học thực tiễn nhằm bảo tồn phát triển loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) họ Lan (Orchidaceae) Thanh Hóa nói riêng Việt Nam nói chung Mục tiêu cụ thể: Đánh giá tính dạng thành phần lồi, đặc điểm phân bố, đặc điểm hình thái, sinh thái giá trị bảo tồn loài thuộc chi (Anoectochilus Blume) tỉnh Thanh Hóa Xây dựng kỹ thuật nhân giống in-vitro, trồng bảo tồn loài Lan kim tuyến (Anoectochilus formosanus Hayata) từ nguồn vật liệu thu từ rừng tự nhiên Thanh Hóa Đề xuất giải pháp bảo tồn loài loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa Nhữ óp mớ ậ Luận án cơng trình nghiên cứu cách hệ thống dạng loài thuộc chi Anoectochilus Blume tỉnh Thanh Hóa, với lồi, gồm: Anoectochilus calcareus Aver, Anoectochilus elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl, Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl , Anoectochilus annamensis Aver Anoectochilus formosanus Hayata Bổ sung loài Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) cho hệ thực vật Việt Nam; 01 loài (Anoectochilus annamensis Aver) cho hệ thực vật khu bảo tồn thiên nhiên Pù Lng Cơng trình nghiên cứu nhân giống In vitro, trồng Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) tán rừng nhà lưới giống ni cấy mơ lồi Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) từ nguồn gen tự nhiên thu Thanh Hố nói riêng Việt Nam nói chung Là cơng trình cơng bố (02 mã vạch trình tự gen nêu trên) lồi Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) nguồn gen thu thập Việt Nam ngân hàng gen quốc tế GenBank Ý hĩa khoa học thực tiễn Luận án 4.1 Ý nghĩa khoa học Cung cấp liệu khoa học cho công tác nhận biết loài, bảo tồn phát triển nguồn gen loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa 4.2 Ý nghĩa thực tiễn Luận án Kết nghiên cứu sở khoa học cho việc đề xuất giải pháp bảo tồn phát triển loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume), đặc biệt loài Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) Thanh Hóa Đố ượng phạm vi nghiên cứu 5.1 Đối tượng Đối tượng nghiên cứu Luận án loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa 5.2 Phạm vi nghiên cứu Phạm vi nội dung: Nghiên cứu thành phần toàn loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa Nghiên cứu lồi lồi thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) đặc điểm hình thái, đặc điểm sinh thái, phân bố địa lý giá trị bảo tồn Luận án nghiên cứu đặc điểm di truyền, kỹ thuật nhân giống trồng loài Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) Trong nhân giống tập trung vào kỹ thuật nhân giống in vitro Phạm vi không gian: Nghiên cứu 11 khu rừng đặc dụng địa bàn tỉnh Thanh Hóa: Vườn Quốc Gia Bến En; Vườn Quốc gia Cúc Phương (trên địa bàn tỉnh Thanh Hóa); Khu BTTN Xuân Liên; Khu BTTN Pù Lng; Khu BTTN Pù Hu; Khu bảo tồn lồi Sến Tam Quy; Khu bảo tồn loài hạt trần Nam Động; Khu di tích lịch sử văn hóa Hàm Rồng; Khu di tích lịch sử văn hóa Lam Kinh; Khu di tích lịch sử văn hóa Trường Lệ; Khu di tích lịch sử văn hóa Đền Bà Triệu Cấ úc l ậ Luận án bao gồm 137 trang, 30 hình 29 bảng, gồm phần: - Mở đầu: 04 trang - Chương 1: Tổng quan vấn đề nghiên cứu: 33 trang - Chương 2: Nội dung, địa điểm phương pháp nghiên cứu: 24 trang - Chương 3: Kết nghiên cứu bàn luận: 61 trang - Kết luận kiến nghị: 03 trang - Danh mục báo tài liệu tham khảo: 12 trang Chươ TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Thô ch ch La k m ế Chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume), thuộc họ Lan (Orchidaceae), mô tả lần vào năm 1825 nhà thực vật học Carlvon Blume Đặc điểm chung loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) địa lan, màu lục hay có màu, có cuống Phát hoa có cán tương đối ngắn với vài hoa không to Lá đài cánh hoa hợp với thành nón Mơi có móng dài có túi khuất đài; có tuyến lớn khơng cọng gần miệng móng hay đáy túi, phần môi hẹp lại, mép gấp lại chạm vào tạo thành cán môi thường có răng, tua, diềm bên, đơi có thùy bên rõ rệt cán mơi; phía trước cán mơi rộng đột ngột thành thùy ngang Trụ có cánh phía trước nhỏ chạy vào túi thành phiến rời song song Nướm thường 2, bên đáy cằm (Nguyễn Thiện Tịch, 2001)[40] 1.2 Thô mộ số o h ộc ch La k m ế q a đế h 1.2.1 Kim tuyến trung (Anoectochilus annamensis Aver) Tên khác: Lan sứa Trung bộ, loài đặc hữu Việt Nam [48] * Đặc điểm hình thái: Lá mọc cách xắn quanh thân, xoè mặt đất Lá hình trứng, gần trịn gốc, đầu nhọn có mũi ngắn, thường dài từ - cm, rộng từ - cm Lá có màu nâu đỏ mặt phủ lông mịn nhung Hệ gân mạng lưới lông chim, thường có gân gốc, gân thường có màu hồng mặt rõ, gân có màu vàng nhạt; mặt có màu nâu đỏ nhạt, nhẵn với gân gốc rõ; gân bên rìa rõ, gân ở không rõ; cuống dài 0,6 - 1,2 cm, thường nhẫn có màu trắng xanh, đơi đỏ tía bẹ lá, bẹ rõ nhẵn; số thay đổi từ - Thân khí sinh thường mọng nước, nhẵn, khơng phủ lơng, thường có màu xanh trắng, đơi có màu hồng nhạt; thân khí sinh thường mọc thẳng mặt đất, mọc nghiêng; chiều dài thân khí sinh từ 4-8 cm, đường kính thân khí sinh từ - mm, thân khí sinh mang nhiều lóng, lóng từ 1-4cm Thân rễ nằm ngang sát mặt đất, nghiêng, bò dài; chiều dài thân rễ từ - 12 cm, đường kính thân rễ từ - mm; chiều dài lóng từ cm Thân rễ thường có màu trắng xanh dương, đơi có màu nâu đỏ, thường nhẵn, không phủ lông Rễ mọc từ mấu thân rễ, rễ mọc từ thân khí sinh Cụm hoa dài 10 - 20 cm, mọc thân, mang - 10 hoa mọc thưa; bắc hình trứng, dài - 10 mm, màu hồng, mảnh bao hoa dài khoảng mm; cánh môi màu trắng dài đến 1,5 cm, bên gốc mang -8 dải hẹp, đầu chẻ đôi Mùa hoa tháng 10 – 12 Mùa chín tháng 12 – năm sau Những đặc điểm nêu mô tả dựa mô tả tác giả: Averyanov LV (2008) [48] Nguyễn Đức Thắng Vũ Quang Nam (2015) [35], Phan Xuân Bình Minh (2019)[28] a Hình 1.1 K m b ế T c (Anoectochilus annamensis Aver) (Nguồn: a - Nguyễn Đức Thắng, Vũ Quang Nam (2015); b,c- L Averyanov(2003) * Phân bố: Trên giới: Loài đặc hữu Việt Nam [48] Ở Việt Nam: Phân bố tỉnh: Phú Thọ (VQG Xuân Sơn), Vĩnh Phúc (VQG: Tam Đảo), Hà Tĩnh (Kỳ Anh), Nghệ An, Quảng Bình (VQG Phong Nha kẻ Bàng), Quảng Trị (KBTTN Bắc Hướng Hóa), Thừa Thiên Huế (VQG Bạch Mã) [28] * Giá trị bảo tồn: Kim tuyến trung (A.annamensis) thuộc Nhóm IIA, Nghị định 06/2019/NĐ-CP Chính Phủ [12] 1.2.2 Kim tuyến đá vơi (A.calcareus Aver) * Đặc điểm hình thái: Cây thân thảo, cao 10-15 cm, lồi có kích thước lớn loài thuộc Chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Lá hình trứng, có lơng, tùy điều kiện sống mà mặt có màu xanh thẩm đậm, xanh phớt tím, xanh nâu sẫm nâu nhạt, mượt nhung, với gân mầu trắng bạc hồng nhạt, mặt màu nâu đỏ Thân khí sinh mập, mọc thẳng nghiêng mặt đất, dài khoảng 3-10 cm, đốt thân từ 0,8-3cm Thân rễ nằm bò mặt đất, lớp mùn, che phủ; thân rễ có mầu xanh Rễ mọc từ đốt thân rễ, mọc từ đốt thân khí sinh, rễ dài đến cm, có lơng hút bám vào đất tơi xốp lá, cành mục Ra hoa tháng – 8, tháng 10,11; cụm hoa dài đến 25 cm, có - bắc, bắc dài - 10 mm Bầu dài - 10 mm, có lơng rậm Lá đài màu lục sáng, mặt có lơng thưa; đài hình trứng rộng dài mm, đỉnh cụt; đài bên hình trứng hẹp, kích thước - 2,6 mm Có - 20 hoa, cánh hoa trắng, xanh nhạt đỉnh, hình liềm, phần dính với đài tạo thành túi Mơi màu trắng, dài khoảng 14 mm từ đỉnh cựa đến đỉnh Quả chín tháng 10-11, chùm có 3-20 nang, mầu nâu đỏ, chứa nhiều hạt, chín nang tách phát tán hạt để tái sinh Những đặc điểm nêu mô tả dựa mô tả tác giả: Nguyễn Tiến Bân (2005) [6], Averyanov VL (2008)[48] Phan Xuân Bình Minh (2019)[28] a b Hình 1.2 K m ế đá vô (Anoectochilus calcareus Aver) (Nguồn: a-Phan Xuân Bình Minh (2019),b-Cao Văn Cường(2017) * Phân bố: Trên giới: Loài đặc hữu Việt Nam Ở Việt Nam: Phân bố Hà Giang (Quản Bạ: Cán Tỷ), Hồ Bình (Mai Châu), Quảng Bình (Kẻ Bàng), Lâm Đồng (Bì Đúp), Khánh Hồ (Hịn Giao) [7] * Giá trị bảo tồn: Kim tuyến đá vôi (A.calcareus) thuộc Nhóm IA, Nghị định 06/2019/NĐ-CP [11]; EN Sách đỏ Việt Nam năm 2007 [7] 1.2.3 Giải thùy Elwes (A.elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl) Tên khác: Lan Sứ bắc Đồng danh: Odontochilus elwesii Hook.f [18] * Đặc điểm hình thái: Thân bị đứng, cao cỡ 10cm, màu nâu Lá – 7, đẹp, phiến xoan, dài – 4cm, mặt nâu đậm, cuống dài 2cm Phát hoa cao 10cm, có lơng tiết dài, hoa; hoa dài bầu noãn Lá đài dài cánh hoa, màu lục chót tím Cánh hoa màu tím có bớt đỏ hay nâu, bất xứng, cạnh sau gần thẳng, cạnh trước cong, to, hẹp dần phía đáy, đỉnh có mũi Mơi màu trắng, cán mơi có bìa rìa với – bên, đầu môi chẻ thùy nằm ngang ra, đầu cụt, dạng tứ giác; đáy túi có tuyến bên Bầu nỗn có lơng Những đặc điểm nêu mô tả dựa mô tả tác giả: Phạm Hoàng Hộ (2000) [19], Nguyễn Tiến Bân (2005)[6] (Nguyễn Thiện Tịch (2001) [40] a Hình 1.3 G b c hù E wes (A.elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl) (Nguồn: a: Cao Văn Cường (2017); b, c: P.X.B.Minh(2019) * Phân bố: Trên giới: Phân bố Sikkim, Bhutan, Assam, Myanmar [40] Ở Việt Nam: Phân bố Lào Cai [19,40], Hà Giang (Khau Cạ), Nghệ An (xã Tam Hợp, H Tương Dương), Vĩnh Phúc (VQG Tam Đảo), Phú Thọ (VQG Xn Sơn), Thanh Hố, Quảng Bình (VQG Phong Nha Kẻ Bàng) [28] * Giá trị bảo tồn: Giải thùy Elwes (A.elwesii) thuộc Nhóm IIA, Nghị định 06/2019/NĐ-CP Chính Phủ [12] 1.2.4 Lan gấm (A formosanus Hayata) * Đặc điểm hình thái: Cây mọc thẳng, cao tới 25 cm Thân rễ leo; rễ có lơng hút dài từ 0,3–0,5 cm, mang chân lông dày Lá mọc xoè cụm từ 2–5 lá; cuống dài 1,5–2,5 rộng 0,8–1 cm, màu nâu đỏ tươi, có bẹ gốc; hình trứng gần trịn gốc, dài 2–5 cm, rộng 2– 3,5 cm, nhọn đỉnh, mép màu trắng nhạt, mặt lưng màu nâu đỏ tươi, mặt màu lục đậm, hệ gân mầu trắng bạc Trục hoa dựng đứng, nhỏ gọn, mảnh mai, lên đến nốt, có lơng, màu nâu đỏ nhạt, dài đến 20 cm, mang 2–3 bắc; bắc hình trứng, 1–1,5 rộng 0,8–1 cm, nhọn đỉnh, có màng, màu nâu đỏ tươi; hoa tự chùm dài 3– 5,5 cm, mang tối đa hoa xếp thành hình xim; bắc hoa hình trứng dài 1–1,5 cm, rộng 0,6–0,8 mm, nhiều lông đỉnh, có lơng mặt lưng, sáng bóng bụng màu nâu đỏ; đài cánh hoa màu nâu xanh lục đến xanh lục đỏ, phần cuối môi màu trắng, ửng vàng bề mặt bên phần môi; buồng trứng cuống dài 12–16mm, rộng 3–5 mm, phủ lơng tuyến; đài mặt lưng hình elip dài 6–6,5 mm, rộng 4,3–4,5 mm, thon dần hai đầu, thuôn nhọn đỉnh, tạo thành mũ trùm với cánh hoa phía trụ, có lơng với lông tuyến mặt lưng, mặt bụng phẳng; đài bên hình trứng xiên dài 7,5–8 mm, rộng 4–4,5 mm, nhọn, có lơng tuyến mặt lưng; cánh hoa nở theo hình xiên, dài 6–7 mm, rộng 3–3,5 mm áp vào mép lưng đài; mơi hình chữ Y, phía đỉnh nhọn, màu trắng đục, nửa suốt; phần cuối môi lan rộng phóng xuống dưới, dài 17–19mm, rộng 12–14 mm bao gồm phần; bên rìa có tối đa răng, dài 0,2–5,5 mm Những đặc điểm nêu mô tả dựa mô tả tác giả Kumar P.* & S.W Gale (2000) [71] Hình 1.4 Câ v phậ hoa La ấm (Anoectochilus formosanus Hayata) (Nguồn: Kumar P.* & S.W Gale, 2000[71]) * Phân bố: Trên giới: Đài Loan, Nhật Bản (quần đảo Ryukyu), Trung Quốc (tỉnh Phúc Kiến) (Anon, 1999) [46], Hồng Kông (Kumar P & S.W Gale [71]) Tại Việt Nam: Chưa có tài liệu đề cập phân bố tự nhiên, số nghiên cứu Yeo-Joong Yoon et.al, 2007) [99] có đề cập đến thông tin tác giả Nguyễn Văn Kết (2003) thu thập Lan gấm (A.formosanus) Lâm Đồng làm vật liệu cho cơng trình nghiên cứu luận án tiến sĩ mình; số tác giả nghiên cứu nhân giống in vitro, ni sinh khối bình chồi, như: Đỗ Đăng Giáp (2015) [17], Phan Xuân Huyên cộng (2015, 2016, 2017, 2018) [22, 23,24,25], Nguyễn Thị Lệ Hà (2017) [18], nhiên báo cáo chưa làm rõ xuất sứ nguồn gen vật liệu nghiên cứu cụ thể đâu * Giá trị bảo tồn: Thuộc Nhóm IIA, Nghị định 06/2019/NĐ-CP Chính Phủ [12] 10 1.2.5 Kim tuyến tơ (A.setaceus Blume) Tên gọi khác: Giải thuỳ tơ, Kim tuyến đỏ, Sứa hồng [7]; Giải thùy roxburgh [19, 7] Đồng danh: Anoectochilus roxburghii Wall ex Lindl [7] Chrysobaphus roxburghii Wall, Anoectochilus siamensis auct Non Schultr, Seidenf & Smitin 1959 [40] * Đặc điểm hình thái: Địa lan 10 – 20cm, thân mập, có lơng Hình thái loài đa dạng, từ màu từ xanh đến xanh đậm màu nâu đỏ; xoan, đáy trịn, đỉnh có mũi, dài 3,5 – 4cm, rộng – 3cm, có gân hồng nhạt nâu mặt trên, cọng dài – 2cm, đáy nở thành bẹ ôm thân Phát hoa cao – 7cm, bên có dạng bắc, xoan, nhọn đột ngột đỉnh, dài 8mm, màu hồng Hoa thưa, – 11 cái, màu trắng, to 2,5 – 3cm; đài sau cánh tạo mũ có mũi, dựng đứng, cao 6mm rộng 7mm, có lơng mặt ngồi; đài bên xoan trịn dài, nhọn, dài 8mm rộng 3,5mm; mơi dài 1,5cm có cán dài 7mm, nở đáy thành phiến tam giác cao 4mm, phần hẹp cịn lại có – tua bên, tua dài 5mm, đầu môi xẻ thành thùy trịn dài, tà, dài 7mm rộng 2mm; móng dài 7mm mở phía dạng phễu Bầu nỗn dài 13mm có lơng, màu lục Những đặc điểm nêu mô tả dựa mô tả tác giả: Nguyễn Tiến Bân (2005) [6], Averyanov LV (2008) [48], Nguyễn Thiện Tịch (2001)[40], Phan Xuân Bình Minh (2019)[28] a b Hình 1.5 K m ế (Anoectochilus setaceus Blume) (Hình: a- Phan Xuân Bình Minh (2019), b-Seidenfaden,1992) Mua Xuan 5.7320 Sig .145 083 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Duongkinh Subset for alpha = 0.05 Mua Duncana N Mua Dong 1.7667 Mua Thu 1.8056 Mua Xuan 1.8826 Mua Ha 1.9069 Sig .130 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 .323 Phụ ục 13 Kế q xử hố k “S h fomorsanus) sa 12 há ưở câ La o h ấm (A ướ ” Descriptives 95% Confidence N Chieucao Duongkinh Mean Std Std Interval for Mean Deviation Error Lower Upper Bound Bound Maximum 1.00 4.3200 0.4551 0.2627 3.1895 5.4505 3.87 4.78 2.00 4.9800 0.4987 0.2879 3.7412 6.2188 4.52 5.51 3.00 5.4667 0.5150 0.2973 4.1873 6.7460 4.95 5.98 4.00 5.6933 0.5200 0.3002 4.4015 6.9852 5.17 6.21 5.00 6.3600 0.4419 0.2551 5.2622 7.4578 5.97 6.84 6.00 6.7433 0.2810 0.1622 6.0454 7.4413 6.45 7.01 7.00 7.0667 0.4124 0.2381 6.0423 8.0910 6.74 7.53 8.00 7.4900 0.3606 0.2082 6.5943 8.3857 7.19 7.89 9.00 8.3933 0.3496 0.2019 7.5248 9.2618 8.13 8.79 10.00 9.1600 0.3831 0.2212 8.2082 10.1118 8.90 9.60 11.00 11.0233 0.4607 0.2660 9.8789 12.1677 10.61 11.52 12.00 12.9067 0.5463 0.3154 11.5496 14.2637 12.34 13.43 Total 36 7.4669 2.4958 0.4160 6.6225 8.3114 3.87 13.43 1.00 1.6800 0.1044 0.0603 1.4206 1.9394 1.56 1.75 2.00 1.7433 0.0896 0.0517 1.5207 1.9660 1.64 1.80 3.00 1.8300 0.0872 0.0503 1.6134 2.0466 1.73 1.89 4.00 1.8900 0.1127 0.0651 1.6101 2.1699 1.76 1.96 5.00 1.9900 0.1044 0.0603 1.7306 2.2494 1.87 2.06 6.00 2.0833 0.0808 0.0467 1.8825 2.2841 1.99 2.13 7.00 2.1733 0.0643 0.0371 2.0136 2.3330 2.10 2.22 8.00 2.2433 0.1250 0.0722 1.9327 2.5539 2.10 2.33 9.00 2.3733 0.0666 0.0384 2.2079 2.5387 2.30 2.43 10.00 2.5400 0.0794 0.0458 2.3428 2.7372 2.45 2.60 11.00 2.6833 0.0666 0.0384 2.5179 2.8487 2.61 2.74 12.00 2.8267 0.0651 0.0376 2.6650 2.9883 2.76 2.89 Total 36 2.1714 0.3701 0.0617 2.0462 2.2966 1.56 2.89 ANOVA Sum of Squares Chieucao Minimum Between Mean df Square 213.323 11 19.3930 4.691 24 0.1955 Groups Within Groups F 99.2210 Sig 3.07E-17 Total Duongkinh Between Groups Within Groups Total 218.014 35 4.603 11 0.4185 192 24 0.0080 4.795 35 52.3997 4.80E-14 Chieucao Subset for alpha = 0.05 Duncana Thang 1.00 N 4.3200 2.00 4.9800 4.9800 3.00 5.4667 4.00 5.6933 5.00 6.00 6.7433 6.7433 7.00 7.0667 7.0667 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 Sig 5.6933 6.3600 6.3600 7.4900 8.3933 9.1600 11.0233 12.9067 080 0.0726 0.0771 075 061 1.000 1.000 1.000 1.000 Duongkinh Subset for alpha = 0.05 Thang Duncana N 1.00 1.6800 2.00 1.7433 1.7433 3.00 1.8300 1.8300 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 2.5400 11.00 2.6833 12.00 Sig 1.8900 1.8900 1.9900 1.9900 2.0833 2.0833 2.1733 2.1733 2.2433 2.2433 2.3733 2.6833 2.8267 062 0.0680 0.1832 213 229 347 087 061 061 Phụ ục 14 Kết qu so sánh trình tự đoạn gen matK Lan gấm nghiên cứu (LKT) với mã gen khác Ngân hàng gen NCBI AJ543911.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA KU687098.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA JN166019.1 CCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA JN166018.1 CCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA EU797512.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA KY966708.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA EU797513.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA LKT AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA **************************************************** AJ543911.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT KU687098.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT JN166019.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT JN166018.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT EU797512.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT KY966708.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT EU797513.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT LKT GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT ***************************************************** ***** AJ543911.1 GGCTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTTTTTCTTTTTCTTCGTAAAA KU687098.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA JN166019.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA JN166018.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA EU797512.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA KY966708.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA EU797513.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA LKT GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA *********************************************************** AJ543911.1 AGTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTCATG KU687098.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG JN166019.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG JN166018.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG EU797512.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG KY966708.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG EU797513.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG LKT ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG * ****************************************************** ** AJ543911.1 TAAAAATGGAATCTATTTTAGTAGTGTATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGCTCC KU687098.1 TAAAAATTGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC JN166019.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCCGGTTCC JN166018.1 TAAAAATTGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC EU797512.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC KY966708.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC EU797513.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC LKT TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC ****** ********* ******* ***************************** *** AJ543911.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGGCTTCAAAGG KU687098.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAATAATTCTGACTTCAAAGG JN166019.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAGGTAATTTTGACTTCAAAGG JN166018.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAATAATTCTGACTTCAAAGG EU797512.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGG-AAAGTAATTCTGACTTCAAAGG KY966708.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG EU797513.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG LKT TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG ************************************ ********************** AJ543911.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGGCAATTTTATT KU687098.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT JN166019.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT JN166018.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT EU797512.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT KY966708.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT EU797513.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT LKT TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT ************************************************ ********* AJ543911.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT KU687098.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT JN166019.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT JN166018.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT EU797512.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT KY966708.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT EU797513.1 TTCACTTTTGGTCTCAACTTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT LKT TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT ****************** **************************************** AJ543911.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC KU687098.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC JN166019.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC JN166018.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC EU797512.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC KY966708.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC EU797513.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC LKT CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC *********************************************************** AJ543911.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTCTGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA KU687098.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA JN166019.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA JN166018.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA EU797512.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA KY966708.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA EU797513.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCGTAGCCCCAGTTA LKT TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCGTAGCCCCAGTTA ********************************************** ************ AJ543911.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA KU687098.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA JN166019.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA JN166018.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA EU797512.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA KY966708.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA EU797513.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA LKT TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA ********************************************** ************* AJ543911.1 GTAAACCAATTTGGACCGATTTATCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT KU687098.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTTTCGGAAAT JN166019.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCTATTTTGTCGGAAAT JN166018.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTTTCGGAAAT EU797512.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCAATTTTGTCGGAAAT KY966708.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCAATTTTGTCGGAAAT EU797513.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT LKT GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT ******* ******* ***** ********************** ***** ******** AJ543911.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA KU687098.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAA - JN166019.1 GTAAAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA JN166018.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA EU797512.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA KY966708.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA EU797513.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA LKT GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA ******************************************* AJ543911.1 AATATATA KU687098.1 JN166019.1 AATATATAT- JN166018.1 AATATATAT- EU797512.1 AATATATATT KY966708.1 AATATATATT EU797513.1 AATATATATT LKT AATATATATT Phụ ục 15 Mộ số hì h h hoạ độ h ậ Mộ số hì h h đ ề a hực địa Mộ số hì h h h mẫ La k m ế Mộ số hì h h h hâ ố in vitro câ nhân in vitro a b c d e f ố La ấm (A.formosanus) Mộ số hì h h h hể La ấm (A.formosanus) (a: Rêu khô, b: hỗn hợp, c: cát vàng, d: dương xỉ, e,f: xơ dừa) a b c d e Mộ số hì h Thườ h hoạ độ hệ ườ h X â , Tha h Hóa ( áp a h vớ vù xã Vạ X â , h õ KBTTN X â L ệ ) (a,b: làm nhà trông coi, bảo vệ trường nghiên cứu; c,d: vận chuyển nguyên vật liệu nghiên cứu giá thể; e: nhà lưới nghiên cứu trồng lan gấm) Mộ số hì h h xã Vạ X â , h h ệ Thườ La ấm (A.formosanus) o h X â , Tha h Hóa ( áp a h vớ vù KBTTN Xuân Liên) a b c d e f ướ õ Mộ số hì h h h La ấm (A.formosanus) dướ (a,b: rừng gỗ tự nhiên, c,d: rừng gỗ - tre nứa tự nhiên, e: rừng trồng luồng, f: rừng trồng keo) Mộ số hì h h Phụ ục 16 b o ồ La ấm (A.formosanus) dướ Ph ế phỏ kh vấ ườ dâ địa phươ đặc dụ có phâ bố o ỗ- e ứa ự h v cá m cô ác h ộc ch La k m ế (Anoectochilus B me) Tha h Hoá Họ tên người vấn:…………………………………………… Địa chỉ:……………………………………………………………………… Nộ d STT phỏ vấ Trên địa bàn có phân bố tự nhiên Lan kim tuyến hay khơng? Có loài Lan kim tuyến? Trên địa bàn người dân có vào rừng thu hái Lan kim tuyến hay không, thời điểm thu hái vào tháng ? Phương thức thu hái nào? Sản lượng thu hái giai đoạn 2000-2010 (bình quân người/ngày)? Sản lượng thu hái giai đoạn 2011-2020 (bình quân người/ngày)? Số vụ vi phạm khai thác Lan kim tuyến trái phép xử lý theo quy định pháp luật? Gh chép hô phỏ vấ Ghi ... gen loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa 4.2 Ý nghĩa thực tiễn Luận án Kết nghiên cứu sở khoa học cho việc đề xuất giải pháp bảo tồn phát triển loài thuộc chi Lan kim tuyến. .. (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa 5.2 Phạm vi nghiên cứu Phạm vi nội dung: Nghiên cứu thành phần toàn loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) Thanh Hóa Nghiên cứu lồi lồi thuộc chi Lan. .. trồng bảo tồn loài Lan kim tuyến (Anoectochilus formosanus Hayata) từ nguồn vật liệu thu từ rừng tự nhiên Thanh Hóa Đề xuất giải pháp bảo tồn loài loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume)