Bài giảng Vi sinh vật: Biến nạp, tải nạp, tiếp hợp được biên soạn nhằm giúp các em sinh viên nắm được di truyền học vi sinh vật đóng vai trò giúp hình thành Sinh học phân tử và sự phát triển Sinh học hiện đại cả về phương diện lí thuyết và ứng dụng thực tiễn... Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết bài giảng tại đây.
BIẾN NẠP TẢI NẠP TIẾP HỢP GIỚI THIỆU ! Di truyền học vi sinh vật đóng vai trị “cách mạng hóa” ! Di truyền học vi sinh vật giúp hình thành Sinh học phân tử phát triển Sinh học đại phương diện lí thuyết ứng dụng thực tiễn ! Di truyền học vi sinh vật góp phần chủ yếu cho phát triển di truyền học phân tử, mà đỉnh cao đời kỹ thuật tái tổ hợp DNA hay kỹ thuật di truyền (KTDT) GIẢ THIẾT MỘT GEN Ð MỘT ENZYM Nă m 1941, G Beadle và E Tatum tieι n hà nh thı́ nghiệ m trê n vi naι m Neurospora crassa Giả thuyeι t mộ t gen - mộ t enzym là mộ t lý thuyeι t cho raθ ng: quá trı̀nh di truyeτ n hoặ c quá trı̀nh hı̀nh thà nh tı́nh trạ ng ở theυ sinh vậ t, thı̀ mộ t gen quy định sự tạ o thà nh mộ t enzym GIẢ THIẾT MỘT GEN Ð MỘT ENZYM badi, Amy, "Neurospora crassa" Embryo Project Encyclopedia (2016-10-11) ISSN: 1940-5030 http://embryo.asu.edu/handle/10776/11359 Hai ông chiếu xạ tia X lên bào tử nấm, chia nấm đột biến làm ba nhóm chính: Thí nghiệm: ! Nhóm I ni cấy mơi trường Mm có thêm Ornitine ! Nhóm II ni cấy mơi trường Mm có thêm Citruline ! Nhóm III ni cấy mơi trường Mm có thêm Arginine GIẢ THIẾT MỘT GEN Ð MỘT ENZYM GIẢ THIẾT MỘT GEN Ð MỘT ENZYM ! Thể đột biến khơng thể phát triển mơi trường tối thiểu, gen tổng hợp enzym tương ứng bị "lỗi" chúng "chết hẳn" chúng lại phát triển mơi trường "đầy đủ" ! Tiền chất - gen I → Ornitine - gen II → Citruline - gen III → Arginine ! Từ kết thí nghiệm đột biến gen ảnh hưởng đến hoạt động loại enzym ! Điều trực tiếp dẫn đến giả định: gen quy định tạo enzym, enzym xúc tác phản ứng hóa sinh học cụ thể, từ tính trạng biểu GIẢ THIẾT MỘT GEN Ð MỘT ENZYM Giả thuyeι t nà y mở mộ t trang mới veτ moι i quan hệ chức nă ng giữa gen và enzym đường trao đoυ i chaι t củ a theυ Phá t minh nà y có ý nghı̃a quan trọ ng: đó là bước chuyeυ n tieι p từ di truyeτ n họ c coυ đieυ n sang di truyeτ n phâ n tử Chı́nh vı̀ vậ y, hai ô ng đã được nhậ n giả i thưởng Nobel và o nă m 1958 Các chứng minh trực tiếp DNA là vật chất di truyền DNA LË VẬT CHẤT DI TRUYỀN Tuy nhiê n cho đeι n 1940, va• n chưa có mộ t bước tieι n trieυ n nà o hieυ u bieι t bả n chaι t hoá họ c củ a vậ t liệ u di truyeτ n và chưa hieυ u được baθ ng cá ch nà o gen trê n nhie• m sa‘ c theυ bieυ u hiệ n tı́nh trạ ng Trong mộ t thời gian dà i, mặ c dù có nhieτ u soι liệ u giá n tieι p cho thaι y ADN là vậ t chaι t di truyeτ n, protein va• n được coi là thà nh phaτ n chủ yeι u củ a vậ t liệ u di truyeτ n vı̀ nó có caι u trú c phâ n tử khá phức tạ p Do vậ y, cá c chứng minh trực tieι p trê n cá c Vi sinh vậ t có ý nghı̃a quyeι t định xá c nhậ n vai trò củ a ADN BIẾN NẠP: TRUYỀN THïNG TIN DI TRUYỀN NHỜ DNA Năm 1928, Griffith phát hiện tượng biến nạp (transformation) vi khuẩn Diplococus pneumoniae (nay gọi Streptococus pneumoniae) Mc Leod Mc Carty xác định rõ tác nhân gây biến nạp DNA Hiện tượng biến nạp chứng trực tiếp xác nhận DNA mang thông tin di truyền BIẾN NẠP(TRANSFORMATION) vBieυ n nạ p là hiệ n tượng truye• n thô ng tin di truye• n ba‚ ng DNA vTrong bieυ n nạ p, DNA tra• n từ mộ t teυ bà o vi khuaϖ n (theϖ cho) nà y được truye• n sang teυ bà o vi khuaϖ n khá c (theϖ nhậ n) vBieυ n nạ p xả y ra khi vi khuaϖ n nhậ n DNA ngoạ i lai và haυ p thu và o trong teυ bà o vKhi teυ bà o vi khuaϖ n bị vỡ do bị tan (lysis), DNA củ a chú ng thoá t ra mô i trường thà nh cá c đoạ n tha„ ng với chie• u dà i khá c nhau, có khả nă ng gâ y bieυ n nạ p cho cá c teυ bà o nhậ n khá c BIẾN NẠP(TRANSFORMATION) -TẢI NẠP (TRANSDUCTION ) TẢI NẠP (TRANSDUCTION ) ! Là hiệ n tượng chuyeυ n gen từ vi khuaυ n nà y sang vi khuaυ n khá c nhờ phage! ! Có hai kieυ u tả i nạ p: chung và chuyê n biệ t ! Trong tả i nạ p (transduction), cá c virut mang cá c gen từ teι bà o nà y sang teι bà o khá c ! Ơ↑ chu trı̀nh tan (lytic cycle), mộ t soι bacteriophage gó i nhaτ m DNA vi khuaυ n chủ và o capsid Teι bà o bị nhie• m bởi cá c virut vậ y nhậ n đoạ n DNA củ a vi khuaυ n A khá c, chứ khô ng phả i DNA củ a virut Do vậ y, DNA vi khuaυ n A tá i toυ hợp với DNA nhie• m sa‘ c theυ củ a teι bà o chủ B và bieι n đoυ i thà nh phaτ n di truyeτ n Tải nạp- Transduction ! Tả i nạ p pho∗ bie− n (chung) – generalized transduction ! Ba− t cứ gen nà o củ a vi khua∗ n cũ ng có the∗ được tả i nạ p ! Tả i nạ p do gó i nhaD m DNA củ a vk phage trưởng thà nh Tải nạp- Transduction ! Tả i nạ p chuyê n biệ t – specialized transduction ! Gen được chuyeυ n naθ m sá t chô ̃ prophage ga‘ n và o ! Do keι t quả sự ca‘ t sai củ a prophage tá ch khỏ i NST củ a teι bà o chủ Giao nạ p hay Tieυ p hợp (Conjunction) Là tı̀nh trạ ng 2 teυ bà o VK tieυ p xú c trực tieυ p với ba‚ ng oυ ng giao nạ p và vậ t liệ u di truye• n được chuyeϖ n từ VK cho sang VK nhậ n qua ca• u noυ i pili đó Giao nạ p hay Tieυ p hợp (Conjunction) Là tı̀nh trạ ng 2 teυ bà o VK tieυ p xú c trực tieυ p với ba‚ ng oυ ng giao nạ p và vậ t liệ u di truye• n được chuyeϖ n từ VK cho sang VK nhậ n qua ca• u noυ i pili đó Hiệ n tượng tieυ p hợp liê n quan đeυ n nhâ n toυ sinh sả n F Nhâ n toυ F là mộ t plasmid Teυ bà o chứa F là teυ bà o đực hay teυ bà o F+ đó ng vai trò teυ bà o cho Teυ bà o khô ng chứa F hay là teυ bà o cá i F- đó ng vai trò teυ bà o nhậ n Trong thı́ nghiệ m tieυ p hợp trê n, chủ ng (1) đó ng vai trò chủ ng cho và chủ ng (2) đó ng vai trò chủ ng nhậ n ! Từ cá c teυ bà o F+, Cavalli đã phâ n lậ p được cá c teυ bà o Hfr (High frequency of recombination) có khả nă ng vậ n chuyeϖ n gen với mộ t ta• n soυ cao ! Khi lai Hfr x F- thı̀ thu được cá c teυ bà o tá i toϖ hợp 1000 la• n nhie• u lai F+x F- ! Từ cá c teυ bà o F+, Cavalli đã phâ n lậ p được cá c teυ bà o Hfr (High frequency of recombination) có khả nă ng vậ n chuyeϖ n gen với mộ t ta• n soυ cao ! Khi lai Hfr x F- thı̀ thu được cá c teυ bà o tá i toϖ hợp 1000 la• n nhie• u lai F+x F- Plasmid ! Là phâ n tử ADN ngaΛ n naΜ m ngoà i NST, có khả nă ng tự nhâ n lê n, di truye( n từ the4 hệ nà y sang the4 hệ khá c, có the= chuye( n từ VK nà y sang VK khá c ! Chứa cá c gen mã hoá cho nhie( u đặ c tı́nh có the= giú p VK to( n tạ i dước cá c á p lực chọ n lọ c Mộ t sô ́ plasmid ! Plasmid F (ye4 u to4 giới tı́nh): quye4 t định hiệ n tượng tie4 p hợp ở vi khua= n hı̀nh thà nh pili, thay đo= i tı́nh cha4 t mà ng te4 bà o ! Transposome: chứa gen nhả y: là đoạ n DNA có hai đa( u tậ n cù ng là chuoΞ i nu lặ p lạ i ngược chie( u nhau, có the= chuye= n từ DNA nà y sang DNA khá c ! Plasmid R: chứa mộ t hoặ c nhie( u gen khá ng kha ng sinh DI TRUYN V TờNH KHỗNG THUC Vi khua∋ n trở nê n khá ng thuo2 c qua che2 : độ t bie2 n, tá i to∋ hợp hoặ c thu hoạ ch plasmid khá ng thuo2 c hoặ c thu hoạ ch transposon ! Độ t bie2 n thà nh khá ng thuo2 c ! Sự tá i to∋ hợp ! Thu nhậ n plasmid khá ng thuo2 c ! Thu nhậ n gene nhả y (transposon) ... kháng sinh ! Các khuẩn lạc đột biến kháng phage hay kháng sinh mọc lên Căn vị trí khuẩn lạc không mọc tách đột biến tương ứng BIẾN DỊ Ở VI SINH VẬT BIẾN DỊ Ở VI SINH VẬT BIẾN DỊ Ở VI SINH VẬT... n củ a sự so4 ng BIẾN DỊ Ở VI SINH VẬT ! Biến dị đột biến có ý nghĩa quan trọng nghiên cứu di truyền học ! Các đột biến gồm nhiều loại khác chúng thu nhận dễ dàng từ vi sinh vật nhờ phương... học vi sinh vật đóng vai trị “cách mạng hóa” ! Di truyền học vi sinh vật giúp hình thành Sinh học phân tử phát triển Sinh học đại phương diện lí thuyết ứng dụng thực tiễn ! Di truyền học vi sinh