LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP: " ẢNH HƯỞNG CỦA HÀM LƯỢNG SPIRULINA VÀ ASTAXANTHIN TRONG THỨC ĂN ĐẾN TĂNG TRƯỞNG VÀ MÀU SẮC CÁ DĨA (Symphysodon) TRONG GIAI ĐOẠN 20 – 50 NGÀY TUỔI" doc

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN ĐẶNG QUANG HIẾU ẢNH HƯỞNG CỦA HÀM LƯỢNG SPIRULINA VÀ ASTAXANTHIN TRONG THỨC ĂN ĐẾN TĂNG TRƯỞNG VÀ MÀU SẮC CÁ DĨA Symphysodon TRONG GIAI ĐOẠN 20 – 5

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA THỦY SẢN

ĐẶNG QUANG HIẾU

ẢNH HƯỞNG CỦA HÀM LƯỢNG SPIRULINA VÀ ASTAXANTHIN TRONG THỨC ĂN ĐẾN TĂNG TRƯỞNG VÀ MÀU SẮC CÁ DĨA (Symphysodon) TRONG GIAI ĐOẠN 20 – 50 NGÀY TUỔI

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN

2009

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA THỦY SẢN

ĐẶNG QUANG HIẾU

ẢNH HƯỞNG CỦA HÀM LƯỢNG SPIRULINA VÀ ASTAXANTHIN TRONG THỨC ĂN ĐẾN TĂNG TRƯỞNG VÀ MÀU SẮC CÁ DĨA (Symphysodon) TRONG GIAI ĐOẠN 20 – 50 NGÀY TUỔI

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN BÙI MINH TÂM

2009

LỜI CẢM TẠ

Có được kết quả học tập như hôm nay, em xin chân thành cám ơn:

Quý thầy cô trong khoa Thủy Sản – trường Đại học Cần Thơ đã giảng dạy và truyền đạt kiến thức trong suốt quá trình học tập Đặc biệt, em xin gởi lời cám

ơn sâu sắc đến thầy Bùi Minh Tâm đã tận tình hướng dẫn, chỉ dạy và giúp đỡ trong quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp cũng như trong thời gian thực tập trong Trại giống thực nghiệm – khoa Thủy Sản

Xin cám ơn thầy cố vấn và cả các bạn sinh viên lớp Nuôi Trồng Thủy Sản khóa 31, đã luôn giúp đỡ em trong quá trình học tập Cám ơn các thầy cô, anh chị và bạn bè trong Trại giống thực nghiệm, đã luôn bên cạnh và giúp đỡ em rất nhiều trong cuộc sống cũng như trong thời gian hoàn thành luận văn tốt nghiệp

Em xin cám ơn các thầy cô Bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm – khoa Nông Nghiệp đã tận tình hướng dẫn trong quá trình sử dụng máy so màu

Cuối cùng, xin chân thành cám ơn ba mẹ và những người thân trong gia đình,

đã luôn ủng hộ và bên cạnh để tôi đạt được những kết quả như ngày hôm nay

TÓM TẮT

Đề tài “Ảnh hưởng của hàm lượng Spirulina và Astaxanthin trong thức

ăn đến tăng trưởng và màu sắc của cá Dĩa (Symphysodon ) trong giai đọan

20 – 50 ngày tuổi” được thực hiện với mục tiêu là tìm được hàm lượng thích

hợp của Spirulina và Astaxanthin ảnh hưởng đến màu sắc của cá Dĩa, đồng thời còn đánh giá tác động của các chất lên màu này đến tăng trưởng và tỷ lệ sống của cá Qua đó, góp phần vào việc xây dựng quy trình sản xuất giống cá Dĩa có chất lượng cao Đề tài bao gồm 2 thí nghiệm:

Ở thí nghiệm 1, khi bổ sung Spirulina vào thức ăn của cá với hàm lượng 3g, 6g và 9g/kg thức ăn thì kết quả thu được là có sự khác biệt về màu sắc của các nghiệm thức Về độ đậm – nhạt (giá trị L*) thên cơ thể thì NTDC có sự khác biệt với NT 6g và NT 9g, trong đó NT 9g cho kết quả tốt nhất(52,44) Bên cạnh đó, màu xanh lá cây (giá trị a*) trên thân cá cũng thể hiện rõ hơn theo sự gia tăng của hàm lượng Spirulina, cao nhất là NT 9g (-1,12) và thấp nhất ở NTDC (-0,16) là có sự khác biệt giữa NTDC với NT 6g và NT 9g, và cũng có

sự khác biệt giữa NT 3g và NT 9g Đồng thời màu vàng (giá trị b*) trên thân

cá thì có sự khác biệt giữa giữa NTDC với các nghiệm thức còn lại Tuy nhiên lại không có khác biệt lớn ở các nghiệm thức có bổ sung Spirulina vào thức ăn của cá Dĩa Ngoài ra, tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống giữa các nghiệm thức thì không có sự khác

Thí nghiệm 2 là bổ sung Astaxanthin vào thức ăn với hàm lượng là 1g, 2g, 3g/kg thức ăn Kết quả tương tự với thí nghiệm 1, cũng có sự khác nhau giữa các nghiệm thức về màu sắc Trong đó, màu đỏ ( giá trị a*) trên thân cá được thể hiện rõ nhất ở NT 3g (18,33) và thấp nhất là ở NT 1g (9,82) Phân tích kết quả theo phương pháp ly trích carotenoid trong cơ cá cũng cho kết quả tương

tự, NT 3g là 0,252 và 1g là 0,88 Tuy nhiên, với các chỉ tiêu màu sắc khác cũng như tỷ lệ sống và tốc độ tăng trưởng thì không có sự khác biệt giữa các nghiệm thức

DANH SÁCH BẢNG

Trang

Bảng 4.1: Tỷ lệ sống của cá sau khi thí nghiệm 12

Bảng 4.2: Chiều dài của cá Dĩa sau khi thí nghiệm 12

Bảng 4.3: Tăng trưởng của cá khi kết thúc thí nghiệm 13

Bảng 4.4: Giá trị Lab đánh giá máu sắc của cá sau khi thí nghiệm 14

Bảng 4.5: Giá trị hấp thu quang phổ của dung dịch ly trích từ cơ cá 15

Bảng 4.6: Tăng trưởng và tỷ lệ sống của cá Dĩa 15

Bảng 4.7: Giá trị a thể hiện sắc tố đỏ trên thân cá 16

Bảng 4.8: Giá trị L , b đánh giá màu sắc của cá 17

Bảng A.1: Trọng cá trước khi thí nghiệm 21

Bảng A.2: Chiều dài cá trước khi thí nghiệm 21

Bảng A.3: Trọng lượng của cá sau khi kết thúc thí nghiệm 22

Bảng A.4: Chiều dài của cá sau khi kết thúc thí nghiệm (cm) 23

Bảng A.5: Trọng lượng và tỷ lệ sống 24

Bảng A.6: Giá trị so màu L* a* b* 25

Bảng A.7: Độ hấp thu quang phổ sau khi kết thúc thí nghiệm 27

Bảng B.1: Trọng lượng cá trước khi thí nghiệm 28

Bảng B.2: Chiều dài của cá trước khi thí nghiệm 29

Bảng B.3: Giá trị so màu L* a* b* 30

Bảng B.4: Trọng lượng và tỷ lệ sống của cá khi kết thúc thí nghiệm 31

Bảng B.5: Chiều dài của cá sau khi kết thúc thí nghiệm (cm) 32

Bảng B.6: Giá trị so màu L* 33

Bảng B.7: Giá trị so màu a* 34

Bảng B.8: Giá trị so màu b*35 Bảng C.1: Duncan của giá trị a* 36

Bảng C.2: Duncan của giá trị L* 36

Bảng C.3: Duncan của giá trị b* 36

Bảng C.4: Duncan của giá trị hấp thu quang phổ 37

Bảng C.5: Duncan của tỷ lệ sống 37

Bảng C.6: Duncan của trọng lượng 37

Bảng C.7: Duncan của chiều dài 37

Bảng D.1: Duncan của giá trị a* 38

Bảng D.2: Duncan của giá trị b* 38

Bảng D.3: Duncan của giá trị L* 38

Bảng D.4: Duncan của chiều dài 39

Bảng D.5: Duncan của trọng lượng trung bình 39

Bảng D.6: Duncan của tỷ lệ sống 39

DANH SÁCH HÌNH

Hình 3.1 : Bố trí thí nghiệm 09

Hình 3.2 : Máy so màu L* a* b* 10

Hình 3.3 : Máy ly tâm 11

Hình 3.4 : Máy so màu quang phổ 11

Hình 4.1 : Sự khác nhau về màu sắc ở các nghiệm thức 15

Hình 4.2 : Màu sắc của cá Dĩa khi kết thúc thí nghiệm 16

Hình 4.3 : Màu sắc của cơ cá được ly trích trong aceton 18

MỤC LỤC

Chương 1 GIỚI THIỆU 1

Chương 2 LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 3

2.1 Đặc điểm sinh học của cá Dĩa 3

2.1.1 Hình dạng bên ngoài: 3

2.1.2 Đặc điểm phân bố: 3

2.1.3 Đặc điểm sinh trưởng: 3

2.1.4 Đặc điểm dinh dưỡng: 3

2.1.5 Đặc điểm sinh sản: 4

2.1.6 Phân loại cá Dĩa: 5

2.2 Đặc điểm sinh học tảo Spirulina 5

2.2.1 Phân loại: 5

2.2.2 Đặc điểm phân bố, hình thái và sinh trưởng: 5

2.2.3 Thành phần của Spirulina 5

2.3 Astaxanthin: 6

2.3.1 Nguồn gốc và chức năng của astaxanthin 6

2.3.2 Cơ chế tác động lên màu ở cá của astaxanthin 6

2.3.3 Các nghiên cứu về Astaxanthin 7

2.3.2.1 Ảnh hưởng của Astaxanthin lên sự hình thành sắc tố 7

2.3.2.2 Ảnh hưởng của carotenoid đến tỷ lệ sống và tăng trưởng 7

Chương 3 VẬT LIỆU VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 8

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu: 8

3.2 Vật liệu nghiên cứu 8

3.2.1 Cá Dĩa giống : 8

3.2.2 Tảo Spirulina: 8

3.2.3 Astaxanthine 8

3.2.4 Tim bò 8

3.2.5 Một số vật liệu khác 8

3.3 Phương pháp nghiên cứu: 9

3.3.1 Bố trí thí nghiệm: 9

3.3.1.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của tảo Spirulina đến màu sắc của cá Dĩa .9

3.3.1.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của Astaxanthin đến màu sắc của cá Dĩa .9

3.3.2 Thức ăn và chăm sóc : 9

3.3.2.1 Thức ăn: 9

3.3.2.2 Chăm sóc cá: 10

3.3.3 Các chỉ tiêu theo dõi và phương pháp phân tích mẫu .10

3.3.4 Xử lý số liệu 11

Chương 4 KẾT QUẢ THẢO LUẬN 12

4.1 Thí nghiệm bổ sung tảo Spirulina vào thức ăn 12

4.1.1 Tỷ lệ sống, tốc độ tăng trưởng trọng lượng và chiều dài 12

4.1.2 Đánh giá sự lên màu 13

4.1.2.1 Phương pháp L* a* b* 13

4.1.2.2 Hấp thu quang phổ 15

4.2.Thí nghiệm bổ sung Astaxanthin vào thức ăn .16

4.2.1 Tỷ lệ sống, tốc độ tăng trưởng trọng lượng và chiều dài 16

4.2.2 Đánh giá sự lên màu 16

4.2.2.1 Phương pháp L* a* b* 16

4.2.2.2 Phương pháp đo màu quang phổ 18

4.3 So sánh kết quả với một số nghiên cứu khác 18

Chương 6 TÀI LIỆU THAM KHẢO 21

PHỤ LỤC 22

Chương 1 GIỚI THIỆU

Trong xã hội hiện nay, khi đời sống của người dân ngày càng được nâng cao thì cùng với đó là những nhu cầu trong sinh hoạt cũng tăng lên Nếu trước đây, việc “ăn no, mặc ấm” là mục tiêu của nhiều người thì hiện nay, bên cạnh “ăn ngon, mặc đẹp” thì các dich vụ vui chơi, giải trí cũng được phát triển để phục

vụ nhu cầu của người dân Trong đó, nuôi cá cảnh là một hình thức giải trí thu hút được rất nhiều người và nó đang ngày càng phổ biến, không chỉ về mặt số lượng mà ngay cả về chất lượng

Trong các loài cá cảnh được nuôi hiện nay, cá Dĩa là loài được nhiều nghệ nhân ưa thích và chọn nuôi nhiều nhất Cá Dĩa có hình dáng dễ thương, đa dạng cả về màu sắc và giống loài Không chỉ vậy, nuôi cá Dĩa không còn đơn thuần là một việc giải trí đơn giản, mà nó còn là một ngành kinh doanh siêu lợi nhuận Trong những năm gần đây, ở Việt Nam và đặc biệt là ở thành phố Hồ Chí Minh đã không ít người giàu lên từ việc nuôi và sản xuất giống cá Dĩa Tuy nhiên, do việc nuôi cá Dĩa xuất phát chủ yếu dưới hình thức phong trào nên vẫn còn nhiều người chưa nắm bắt được kỹ thuật nuôi, từ đó gặp thất bại

là không tránh được Để có một đàn cá có hình dáng và màu sắc đẹp thì không phải đơn giản

Màu sắc là một trong những yếu tố quyết định đến giá trị của không chỉ

cá Dĩa mà còn đối với hầu hết các loài cá cảnh Thức ăn và môi trường nuôi ảnh hưởng rất lớn đến màu sắc của cá Bên cạnh đó việc nâng cao tỷ lệ sống

và tốc độ tăng trưởng cũng là một trong những vấn đề quan trọng khi nuôi cá Dĩa Trước đây, cũng có rất nhiều tài liệu nói về vấn đề này nhưng chủ yếu mang tính chất trao đổi thông tin kỹ thuật, ít có giá trị khoa học

Từ những nguyên nhân trên, đề tài “Ảnh hưởng của hàm lượng Spirulina và Astaxanthin trong thức ăn đến tăng trưởng và màu sắc của

cá Dĩa (Symphysodon ) trong giai đọan 20 – 50 ngày tuổi” được tiến hành

nghiên cứu

Mục tiêu :

Xác định liều lượng Spirulina và Astaxanthin thích hợp đến sự lên màu

của cá Dĩa Góp phần vào việc xây dựng quy trình sản xuất giống cá Dĩa có chất lượng cao

Nội dung:

Thử nghiệm các nồng độ Spirulina khác nhau trong thức ăn

Thử nghiệm các nồng độ Astaxanthin khác nhau trong thức ăn

Chương 2 LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học của cá Dĩa

2.1.1 Hình dạng bên ngoài:

Cá dĩa có hình dĩa tròn, dẹp ngang, màu sắc rất đa dạng với rất nhiều đốm và hoa văn trên cơ thể ( Đoàn Khắc Bộ, 2007; Nguyễn Thị Thanh Hiền, 1993) Đầu ngắn, mắt khá lớn và linh động Các vi phát triển, vi ngực và vi đuôi là những tia vi mềm Đường bên không hoàn toàn, đường bên phía trên từ nắp mang đến giữa thân, đường bên phía dưới từ giữa thân đến cuống đuôi Trên thân có nhiều sọc đứng, tùy theo loài mà các sọc này có số lượng và độ đậm nhạt khác nhau

2.1.3 Đặc điểm sinh trưởng:

So với một số loài cá khác, thời gian phát triển phôi của cá Dĩa thì khá dài Tính từ lúc cá mẹ vừa đẻ trứng, thì khoảng 60h ở nhiệt độ 300C và 65-72h ở nhiệt độ 260C – 280C thì cá nở ( Đoàn Khắc Bộ, 2007 ) Cá bột mới nở có kích thước khoảng 1,2-2 mm Sau 5-6 tuần tuổi cá có chiều dài khoảng 2,4-2,5cm

và cá từ 5-6 tháng tuổi trở lên thì màu sắc trên cơ thể mới hiển thị đầy đủ Theo một số nghệ nhân ở thành phố Hồ Chí Minh cá Dĩa có thể tuổi thọ trung bình khoảng 8 năm, nhưng có một số con cũng có thể sống từ 12-13 năm

2.1.4 Đặc điểm dinh dưỡng:

Cá Dĩa có dạ dày đặc biệt, phân nhánh và có vách dày Ruột cá dĩa tương đối ngắn, miệng nhỏ và răng hàm gồm một hàng những gai nhỏ hình chóp Từ những đặc điểm trên, có thể nhận định cá Dĩa là loài cá ăn động vật ( Nguyễn Thị Thanh Hiền, 1993 )

Sau khi nở cá con sẽ bám và ăn các chất nhờn trên cơ thể cá bố mẹ Giai đoạn này kéo dài từ 12-14 ngày (Đoàn Khắc Bộ,2007) Lúc này cá con ăn được các thức ăn tự nhiên như Artermia, Moina, Daphnia Cá từ 3 tuần tuổi trở lên có

thể ăn được các loại thức ăn như trùn chỉ, tim bò, lăng quăng, ròng ròng (Thomas A Giovanetti 1991, Nguyễn Minh 1998, Đoàn Khắc Bộ 2007) Thức ăn cho cá Dĩa cần phải được thay đổi thường xuyên, bổ sung đầy đủ các dưỡng chất cần thiết cho sinh trưởng và sự lên màu của cá vì màu sắc của cá Dĩa phụ thuộc rất nhiều vào thức ăn và môi trường nuôi (Bùi Minh Tâm 2008)

Ngoài các loại thức ăn trên, trong quá trình nuôi cũng cần bổ sung thêm các loài vitamin như vitamin A, vitamin D,… Nếu thiếu các loại vitamin này cá có thể bị một số bệnh như kém ăn, chậm phát triển, màu sắc nhợt nhạt, xương bị giòn và mang bị biến dạng

2.1.5 Đặc điểm sinh sản:

Tuổi thành thục của cá Dĩa là khoảng 10 - 12 tháng (Bùi Minh Tâm 2008, Đoàn Khắc Bộ 2007) Trong thời kỳ phát dục cá có màu sắc rất sặc sỡ cá mái thường hung hăng hơn cá trống và hay cắn vào cá trống để báo hiệu đã sẵn sàng cho việc sinh sản Đôi khi cả hai con bơi sát vào nhau, đầu hướng lên trên, thỉnh thoảng giật đuôi về đối phương

Đối với cá Dĩa không có đặc điểm nào đáng tin cậy trong việc phân biệt đực cái Chỉ đến giai đoạn sinh sản mới có thể phân biệt được giới tính dựa trên hình dạng của gai sinh dục Gai sinh dục của cá đực thì ngắn và nhọn hơn, trong khi cá mái thì dài và cùn hơn (Nguyễn Minh 1998) Ngoài ra cũng có thể phân biệt dựa vào một số đặc điểm như cá đực thường có có hình dáng to, đầu hơi gù, vây bụng xệ xuống, dưới bụng vùng giáp vây lõm vào trông rất rõ Cá cái thường nhỏ hơn cá đực, đầu thẳng, phần bụng phía sau vây dưới thẳng theo chiều cong của toàn bộ bụng cá (Bùi Minh Tâm 2008)

Trước khi đẻ vài ngày, cá có hiện tường rùng mình, rung toàn thân, xếp vây lại, đôi lúc đứng yên tại chỗ, ít bắt mồi Cá cái đẻ theo chiều dọc của giá thể,

cá đực cũng theo hướng đó tiết tinh thụ tinh cho trứng Trong tự nhiên, giá thể cho cá đẻ có thể là thực vật thủy sinh có lá to, hoặc những tảng đá ở tầng đáy Sức sinh sản của cá Dĩa khoảng 200-800 trứng Đối với lần sinh sản đầu tiên,

cá Dĩa thường chỉ đẻ khoảng 150-200 trứng và khả năng giữ con cũng rất kém

Cá Dĩa có thể sinh sản quanh năm nhưng vào mùa lạnh thì đẻ ít hơn Thời gian tái phát dục của cá phụ thuộc nhiều vào thức ăn, sự chăm sóc và sức khỏe của

cá bố mẹ Có khi vài ngày là cá có thể sinh sản trở lại, nhưng có khi kéo dài một tháng hoặc hơn Ngoài ra thời gian cá con bám trên cơ thể cũng ảnh hưởng đến thời gian tái phát dục của cá bố mẹ ( Bùi Minh Tâm 2008, Đoàn Khắc Bộ 2007 )

2.1.6 Phân loại cá Dĩa:

Theo Schultz (1960) cá Dĩa được phân loại như sau:

Cá Dĩa đỏ (Symphysodon discus): Cơ thể có các vây lưng, hậu môn có màu đỏ

nâu Chiều dài cá trưởng thành khoảng 15-20cm

Cá Dĩa xanh lá cây (Symphysodon aequifasciata aequifasciata): Thân có màu

xanh lục, các sọc có màu nâu đậm hơn màu trên thân Cá Dĩa xanh lá cây thuộc loài quý hiếm

Cá Dĩa xanh da trời (Symphysodon aequifasciata haraldi): Cá Dĩa xanh da

trời còn được gọi là cá Dĩa nâu đỏ, thân có màu đỏ hoặc nâu đỏ, các sọc có màu xanh sáng Chiều dài cá trưởng thành từ 12 cm trở lên

Cá Dĩa xám (Symphysodon aequifasciata axelrodi): Thân có màu xám, các sọc

trên cơ thể và vây có màu xanh da trời Các vằn dọc chỉ có ở vây lưng, trán và vây hậu môn Chiều dài cá trưởng thành khoảng 14 cm

2.2 Đặc điểm sinh học tảo Spirulina

2.2.2 Đặc điểm phân bố, hình thái và sinh trưởng:

Spirulina phân bố rất rộng, hầu hết trong tất cả các thủy vực chúng đều có thể

sống: đất, bãi rong cỏ, các thủy vực ngọt, lợ, mặn thậm chí ngay cả các suối nước nóng Tảo Spirulina có thể tìm thấy ở cả những thủy vực có độ mặn 65 –

70 ppt (Trần Ngọc Hải và Trần Thị Thanh Hiền, 2000)

Đến giai đoạn thành thục, những chuỗi xoắn dài bị vỡ ra tạo thành nhiều đoạn tảo nhỏ nhờ sự hình thành của những tế bào mắc xích Các đoạn xoắn nhỏ ở mắc xích sẽ hình thành chuỗi ngắn có khả năng trượt gọi là Hormogonia mà sau đó sẽ hình thành những chuỗi dài mới Số lượng tế bào ở Hormogonia tăng lên bởi sự phân chia của tế bào với nguyên sinh chất trở nên có hạt Với tiến trình này, chuỗi được dài hơn và có dạng xoắn đặc thù

2.2.3 Thành phần của Spirulina

Theo Tipnis (1960) thành phần của Spirulina gồm (tính theo trọng lượng khô):

- Protein: 46 – 50%

2.3.1 Nguồn gốc và chức năng của astaxanthin

Là một loại carotenoid, một nhóm sắc tố hiện diện trên một số loài tảo và thủy sản, tạo cho cơ, da, trứng có màu vàng cam hay đỏ, một chất chống oxy hóa ngăn ngừa sự tạo tách các nguyên tử hydro từ axid béo không no đồng thời có tác dụng kích thích chức năng miễn dịch, biểu hiện các thành phần chống vi

khuẩn, ngăn ngừa sự phá hủy của ánh sáng mặt trời đối với tế bào

Trong tự nhiên astaxanthin được tìm thấy trong cá hồi, tôm, ruốc, tảo

Hematococcus pluvialis

Theo Bùi Minh Tâm (2007) astaxanthin được ly trích từ tảo Hematococcus pluvialis Tảo thuộc ngành tảo lục ( Chlorophyceae) trong họ volvocales Hematococcus spp phân bố khắp nơi trên thế giới từ nước ngọt đến nước mặn Khi điều kiện môi trường khắc nghiệt các tế bào Hematococcus trở nên đỏ,

tích tụ lipids và astaxanthin để chống lại sự oxy hóa quang hợp và những chất oxy hóa khác

Astaxanthin (3,3 '-Dihydroxy- β, β-caroten-4, 4'-dione) là sắc tố tự nhiên làm gia tăng sắc tố cá hồi, cá vền, tôm, và đặc biệt trong sự tạo màu cá cảnh Các loại thức ăn chế biến từ tôm, tép là nguồn cung cấp sắc tố chủ yếu cho cá Cantaxanthin xuất hiện trên thị trường vào năm 1964 và trở thành nguồn cung cấp sắc tố quan trọng trong chế biến thức ăn cho cá thương phẩm và cá cảnh Năm 1984, astaxanthin xuất hiện trên thị trường nó dần thay thế cantaxathin với 25% astaxanthin tạo nên sự lên màu tối ưu so với riêng rẻ từng loại

2.3.2 Cơ chế tác động lên màu ở cá của Astaxanthin

Astaxanthin có công thức hóa học là C40H52O4 Hoàn toàn không phải là hormone nên không gây hại đến khả năng sinh sản của cá Cá sẽ chuyển hóa astaxanthin trong thức ăn thành tuaxanthin và tích lũy trong da và cơ làm cho

cá có màu sắc rực rỡ

2.3.3 Các nghiên cứu về Astaxanthin

2.3.2.1 Ảnh hưởng của Astaxanthin lên sự hình thành sắc tố

Nghiên cứu của Choubert và Storebaklen (1989) về liều lượng của Astaxanthin và Canthaxanthin của cá hồi cầu vồng được bổ sung vào thức ăn cho thấy là sự gia tăng sắc tố trong cơ mà nguyên nhân là do sự tăng lên của carotenoid trong khẩu phần thức ăn Một kết quả tương tự được nghiên cứu bởi Storebaklen và ctv (1987) trong thí nghiệm về cá hồi Atlantic

Tuy nhiên, cũng có một số nghiên cứu cho rằng hệ số màu sắc giảm trong những khẩu phần có hàm lượng carotenoid tăng dần Những kết quả này cho thấy hàm lượng tối ưu carotenoid trong thức ăn tạo nên sự tích lũy cao nhất trong cơ Liều lượng carotenoid quá cao sẽ được cá thải ra ngoài và làm tăng chi phí sản xuất (Chien và Jeng, 1992)

2.3.2.2 Ảnh hưởng của carotenoid đến tỷ lệ sống và tăng trưởng

Theo Christiensen và ctv (1994) thì tỷ lệ sống ở cá hồi Atlantic cao hơn khi bổ sung từ 92-96% vào khẩu phần thức ăn so với bổ sung khoảng 5-14% Có mối liên hệ giữa tỷ lệ sống và hàm lượng sắc tố ở nhiều loài tôm và sử dụng carotenoid là một trong những cách bổ nâng cao tỷ lệ sống ( Chien và jeng, 1992) Tuy nhiên, theo Torrissen (1984) thì cho rằng carotenoid thì lại không

có ảnh hưởng đến tỷ lện sống, tỷ lệ nở và cá bột ở cá hồi

Chương 3 VẬT LIỆU VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu:

Thí ngiệm được thực hiện ở Trại Cá – Khoa Thủy Sản – Trường Đại học Cần Thơ từ tháng 2 đến tháng 7 năm 2009

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.2.1 Cá Dĩa giống :

Được bắt từ trại cá cảnh… Cá được 30 ngày tuổi, khỏe mạnh và đạt kích cỡ từ 2.5-4cm Vận chuyển cá bằng bao nilong có bơm oxy Cá bố trí thí nghiệm được bắt ngẫu nhiên từ chung 1 bầy

3.2.2 Tảo Spirulina:

Nguồn tảo sử dụng là tảo Spirulina công nghiệp: Algae – Feast sản xuất bởi

Công ty Earthrise, California, Hoa Kỳ

Tảo Spirulina có hàm lượng Carotenoids là 3.900 mg/kg

Thành phần dinh dưỡng của tảo Spirulina công nghiệp là:

Crude Protein 60%

Crude Lipid 4%

Crude Fiber 7%

Ash 12%

Water 7%

3.2.3 Astaxanthine : Sử dụng dạng bột, có nguồn gốc từ các công ty hóa chất

ở thành phố Hồ Chí Minh

3.2.4 Tim bò : Sử dụng tim bò tươi, có trọng lượng từ 1kg-1.2kg

3.2.5 Một số vật liệu khác

- Bể thí nghiệm: Dùng loại bể 72L (60cm x 40cm x 30cm)

- Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 4 nghiệm thức : NTDC, NT

3g, NT 6g, NT 9g Liều lượng Spirulina trong các khẩu phần thức ăn lần lượt

là 0, 3g, 6g, 9g/kg thức ăn Thức ăn được sử dụng là tim bò xay nhuyễn

- Mỗi nghiệm thức được lặp lại 3 lần

3.3.1.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của Astaxanthin đến màu sắc của cá Dĩa

- Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 3 nghiệm thức: NT 1g, NT 2g, NT 3g Liều lượng Astaxanthin trong các khẩu phần thức ăn lần lượt là 1g, 2g, 3g/kg thức ăn

- Mỗi nghiệm thức được lặp lại 3 lần

Hình 3.1 : Bố trí thí nghiệm 3.3.2 Thức ăn và chăm sóc :

3.3.2.1 Thức ăn:

- Tim bò: được lấy hết phần gân, chỉ để lại phần thịt Sau khi rửa với nước sạch nhiều lần với nước Trộn với tảo spirulina hoặc astaxanthin và xay nhuyễn trong 5 phút Chia ra thành những phần nhỏ và cho vào bọc ni-lon, trữ trong tủ đông

- Trùn chỉ, moina: được mua từ các tiệm cá cảnh ở Cần Thơ Xử lý nước muối trước khi cho cá ăn Riêng trùn chỉ được cắt nhuyễn phù hợp với cỡ miệng của

cá

3.3.2.2 Chăm sóc cá:

- Cá được cho ăn 3lần/ngày vào lúc 7h, 13h và 17h Sau khi cho ăn khoảng 30phút thì siphon thức ăn thừa

- Thay nước 2lần/ngày trước lúc cho ăn 7h và 17h

- Nước được xử dụng trong thí nghiệm là nước máy đã xử lý

- Lượng thức ăn cho ăn là 10% trọng lượng thân

- Nhiệt độ được điều chỉnh bằng heater, dao động từ 30-320C và được kiểm tra ngày 2 lần

- Hàm lượng oxy hòa tan từ 5ppm trở lên và được kiểm tra 1lần/tuần

3.3.3 Các chỉ tiêu theo dõi và phương pháp phân tích mẫu

- Chỉ tiêu tăng trưởng:

Chiều dài: đo một số mẫu đại diện

Trọng lượng: cân tổng trọng lượng cá trong từng bể, từ đó tính giá trị trung bình

Sử dụng aceton để ly trích astaxanthin trong cơ cá 5g cơ cá được ngâm trong

3 x 30 ml dung dịch aceton trong 24h Lượng aceton sử dụng chia đều cho 3 lần vào lúc : làn 1 là giờ đầu tiên khi ly trích, lần 2 cách 2 giờ so với lần đầu

và lần cuối là vào lúc 24h

Sau đó đem dung dịch thu được ly tâm trong 15phút với vận tốc là 5000 vòng Cuối cùng, sử dụng dung dịch sau khi ly tâm so màu quang phổ ở bước sóng 470nm Dung dịch nào có độ hấp thu quang phổ càng lớn thì màu sắc của dung dịch thể hiện càng rõ, tức là hàm lượng carotenoid trong cơ cá càng cao

Chương 4 KẾT QUẢ THẢO LUẬN 4.1 Thí nghiệm bổ sung tảo Spirulina vào thức ăn

4.1.1 Tỷ lệ sống, tốc độ tăng trưởng trọng lượng và chiều dài

Tỷ lệ sống không có sự khác biệt lớn, dao động từ 55.56 – 90%, và cao nhất là

ở nghiệm thức đối chứng Theo Nguyễn Ngọc Linh (2006), tỷ lệ sống của cá Dĩa trong tháng đầu tiên là khoảng 51,3 – 82,9% Ngoài ra, có nhiều nguyên nhân ảnh hưởng tỷ lệ sống của cá trong quá trình thí nhiệm, trong đó chủ yếu

Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0.05)

Chiều dài của cá tăng lên từ 2.79 – 3.37g cho các nghiệm thức Sự gia tăng này cao nhất ở nghiệm thức 6g (3.37g) và thấp nhất là ở nghiệm thức đối chứng (2.79g) Sự khác biệt giữa 2 nghiệm thức 6g và nghiệm thức đối chứng

về chiều dài là có ý nghĩa, còn giữa các nghiệm thức còn lại thì không có sự khác biệt với nhau về chiều dài ( p> 0,05 ) Theo Đoàn Khắc Bộ (2007), sau 5-

6 tuần tuổi thì cá có Dĩa có chiều dài từ 2.4–2.5 cm, thì tăng trưởng của cá trong thí nghiệm này lớn hơn Điều này có thể là vì một phần do đặc tính của từng giống cá Dĩa và một phần do mật độ nuôi và điều kiện chăm sóc

Bảng 4.2: Chiều dài của cá Dĩa sau khi thí nghiệm

6g 3,37 ± 0,18b

Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0.05)

Qua Bảng 3 cho thấy, sau thời gian thí nghiệm trọng lượng của cá tăng 0.54 – 0.69 g Trong đó, cao nhất là nghiệm thức 6g và thấp nhất là ở nghiệm thức đối chứng Nhưng sự khác biệt giữa các nghiệm thức thì không có ý nghĩa về mặt thống kê So với tăng trưởng của các loài cá cảnh khác, sau 45 ngày tuổi

cá vàng có trọng lượng khoảng 0.61g (Bùi Minh Tâm, 2008), cá chép Nhật sau

60 ngày là 0.66 g (Nguyễn Quỳnh Quang Thái, 2008) thì tăng trưởng của cá Dĩa cũng nằm trong khoảng thích hợp

Bảng 4.3: Tăng trưởng của cá sau 1 tháng thí nghiệm

0,54 ± 0,13a0,62 ± 0,21a0,69 ± 0,15a0,58 ± 0,17a

0,016 ± 0,0052a0,021 ± 0,0068a0,023 ± 0,0051a0,019 ± 0,0051a

Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0.05)

Tóm lại, khi bổ sung tảo Spirulina vào khẩu phần thức ăn của cá Dĩa thì không

có ảnh hưởng lớn đến sự tăng trưởng và tỷ lệ sống Tăng trưởng về trọng lượng của cá dao động từ 0,65 - 0,85g và cao nhất ở nghiệm thức 6g.Về chiều dài của cá thì cá ở nghiệm thức 6g cũng có giá trị lớn nhất (3,37g) Tuy nhiên, tăng trưởng chiều dài thì có sự khác biệt khi tăng nồng độ từ 0 – 6g/kg, nhưng khi tăng đến 9g thì không có sự khác biệt với các nghiệm thức còn lại

4.1.2 Đánh giá sự lên màu

4.1.2.1 Phương pháp L* a* b*

Giá trị L* thể hiện độ đậm nhạt màu sắc của cá Cá có giá trị L* càng thấp thì

có màu càng đậm và ngược lại, giá trịL* càng cao thì cá có màu càng nhạt Giá trị thể hiện trong bảng 4 cho thấy rằng, khi bổ sung từ 0 – 9 g/kg thức ăn thì có

sự khác biệt về độ đậm nhạt của cá Ở nghiệm thức DC (61.09) là cao nhất và nghiệm thức 6g là 59,02 có sự khác biệt với 9g/kg thức ăn( 52,44 ) Theo

Nguyễn Quỳnh Quang Thái (2008), khi gia tăng nồng độ tảo Spirulina vào

trong thức ăn của cá chép thì độ đậm của màu sắc trên thân cá cũng tăng lên

Khi tăng hàm lượng Spirulina trong thức ăn lên đến 9g/kg thức ăn thì làm cho

cá có màu sắc đậm hơn so với khẩu phần không có bổ sung hoặc bổ sung với

hàm lượng 6g/ kg thức ăn

Quan sát giá trị a* ở Bảng 3 Chỉ số a* biểu thị cho màu sắc của cá thay đổi từ

màu xanh lá cây đến đỏ Giá trị a* ở nghiệm thức DC là -0.16, NT 3g là -0.47,

NT 6g là -0.91, NT 9g là -1.12 Sự khác biệt về màu sắc xuất hiện ở nghiệm

thức DC với NT 6g và NT 9g Ngoài ra còn có khác biệt giữa NT 3g với NT

9g Như vậy, khi bổ sung tảo Spirulina càng nhiều thì màu sắc của cá càng thể

hiện màu xanh lá cây rõ rệt hơn Điều này có thể là do cá có khả năng hấp thu

những carotenoid chứa sắc tố xanh như Lutein tốt hơn những carotenoid chứa

sắc tố đỏ như Astaxanthin hay Canthaxanthin có trong tảo Ngoài ra, tùy vào

từng loài cá Dĩa khác nhau mà màu sắc thể hiện trên cơ thể cũng khác nhau

Hàm lượng carotenoid trong cơ thể chỉ làm cho màu sắc thể hiện rõ hơn chủ

không làm thay đổi được màu sắc đặc trưng của loài

Chỉ tiêu b* thể hiện màu sắc thay đổi từ xanh da trời đến vàng Giá trị b* càng

lớn thì màu vàng càng được thể hiện rõ và ngược lại Giá trị b* tăng dần từ NT

DC là 1.87, NT 3g là 4.88, NT 6g là 5.7 và NT 9g là 5.58 Như vậy, có sự

khác biệt về màu sắc xanh da trời đến vàng giữa nghiệm thức đối chứng với

các nghiệm thức còn lại Màu vàng ở NTDC là nhạt nhất Theo Nguyễn

Quỳnh Quang Thái (2008), khi bổ sung tảo Spirulina vào thức ăn cho cá thì

màu vàng của cá càng thể hiện rõ ràng hơn

Bảng 4.4 : Giá trị L * , a * , b * đánh giá màu sắc của cá sau khi thí nghiệm

-0,16 ± 0,08a-0,47 ± 0,51ab-0,91 ± 0,21bc-1,21 ± 0,48c

1,87 ± 1,6a4,88 ± 1,23b5,70 ± 0,46b5,58 ± 1,37b Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0.05)

Hình 4.1 : Sự khác nhau về màu sắc ở các nghiệm thức

4.1.2.2 Hấp thu quang phổ

Độ hấp thu quang phổ ở bước sóng 470 nm của các dung dịch được ly trích từ

cơ cá thì không có sự khác biệt giữa các nghiệm thức Nguyên nhân là vì khi

bổ sung tảo Spirulina vào thức ăn của cá Dĩa thì làm cho cá có sắc tố xanh rõ hơn sắc tố đỏ Trong khi đó, phương pháp ly trích cơ cá trong dung dịch aceton và đo quang phổ ở bước sóng 470 nm có hiệu quả chủ yếu đến sắc tố

đỏ trong cơ của cá

Bảng 4.5: Giá trị hấp thu quang phổ của dung dịch ly trích từ cơ cá

DC

3g

0,040 ± 0,015a0,057 ± 0,063a

6g

9g

0,046 ± 0,026a0,041 ± 0,028a

Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0,05)

4.2.Thí nghiệm bổ sung Astaxanthin vào thức ăn

4.2.1 Tỷ lệ sống, tốc độ tăng trưởng trọng lượng và chiều dài

Qua Bảng 6, nhận thấy không có sự khác biệt giữa các nghiệm thức về tỷ lệ sống, tăng trưởng về trọng lượng cũng như chiều dài Sau 15 ngày nuôi thí nghiệm, trọng lượng của cá tăng khoảng 0,05 - 0,08 cm đối với các nghiệm thức Chiều dài tăng khoảng 0,21 – 0,24 cm So với các nghiên cứu trước, tỷ lệ sống cũng nằm trong khoảng phù hợp WG của các nghiệm thức dao động từ 0,05 – 0,08, so với thí nghiệm bổ sung tảo Spirulina vào thức ăn thì thấp hơn,

có thể là do trong giai đoạn 15 ngày đầu thí nghiệm cá có tốc độ tăng trưởng thấp hơn 15 ngày tiếp theo và tốc độ tăng trưởng cũng có thể bị ảnh hưởng do

từng giống cá Dĩa khác nhau thì cũng khác nhau

Bảng 4.6: Tăng trưởng và tỷ lệ sống của cá Dĩa sau 15 ngày

Nghiệm thức 1g/kg thức ăn 2g/kg thức ăn 3g/kg thức ăn Trọng lượng 0,17 ± 0,015a 0,19 ± 0,018a 0,21 ± 0,039a

WG 0,06 ± 0,01a 0,0037 ± 0,001a 0,0053 ± 0,002aTLS 83,33 ± 0,00a 66,67 ± 16,67a 55,56 ± 25,46aChiều dài 2,07 ± 0,03a 2,07 ± 0,02a 2,11 ± 0,03a

Giá trị thể hiện là trung bình và độ lệch chuẩn

Các giá trị trên cùng một dòng có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê ( p > 0,05)

4.2.2 Đánh giá sự lên màu

4.2.2.1 Phương pháp L* a* b*

Xét giá trị a* ở bảng 7, ta thấy có sự khác biệt giữa các nghiệm thức Trong đó, sắc tố đỏ thể hiện rõ nhất trong NT 3g (18,33), kế đến là NT 2g (13,19), và thấp nhất là NT 1g (9,28) Như vậy khi hàm lượng Astaxanthin càng cao thì chỉ số a* càng cao, tức là màu đỏ trên da cá càng thể hiện rõ rệt hơn Theo Olsen và Mortensen (1997) nghiên cứu trên cá hồi chấm hồng cũng cho kết quả tương tự, giá trị a* càng cao ở các khẩu phần thức ăn có chứa Astaxanthin càng cao Choubert và Storebaklen (1989) chứng minh rằng khi hàm lượng carotenoid trong cơ thể quá cao, cá hồi cầu vồng sẽ tự đào thải ra ngoài Điều này cũng được Chien và Jeng (1992) khẳng định với thí nghiệm trên tôm Kuruma với các liều lượng là 50mg/100g, 100mg/100g và 200mg/100g, và