Nhân một trường hợp khó xác định nhóm máu hệ ABO tại Bệnh viện Bạch Mai

Bài viết Nhân một trường hợp khó xác định nhóm máu hệ ABO tại Bệnh viện Bạch Mai đã sử dụng nhiều kỹ thuật hỗ trợ như hấp phụ kháng thể ở nhiệt độ lạnh kết hợp phân tích phả hệ. Kết quả người bệnh có nhóm máu B yếu và có kháng thể chống B.

TạP CHí Y học việt nam tP 520 - tháng 11 - sè ĐẶC BIỆT - 2022 NHÂN MỘT TRƯỜNG HỢP KHÓ XÁC ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ ABO TẠI BỆNH VIỆN BẠCH MAI Phạm Quang Thịnh1,2, Phạm Thùy Dương1, Vũ Minh Tâm1, Phạm Quang Vinh2 TÓM TẮT 30 Để xác định nhóm máu hệ ABO phải thực đồng thời hai phương pháp huyết mẫu hồng cầu mẫu Nhóm máu khẳng định kết định nhóm hai phương pháp đồng Trong thực hành lâm sàng, gặp số ca bệnh khó xác định nhóm máu Trường hợp đây, để xác định nhóm máu hệ ABO chúng tơi sử dụng nhiều kỹ thuật hỗ trợ hấp phụ kháng thể nhiệt độ lạnh kết hợp phân tích phả hệ Kết người bệnh có nhóm máu B yếu có kháng thể chống B Từ khóa: nhóm máu hệ ABO, nhóm B yếu SUMMARY A CASE OF ABO BLOOD GROUP IDENTIFICATION ON DIFFICULTY AT BACH MAI HOSPITAL ABO blood types are based on two methods (direct and indirect method) at the same time and is only confirmed if having similar results In clinical practice, we recorded some difficult cases of blood group determination In the Trung tâm Huyết học Truyền máu – Bệnh viện Bạch Mai Trường Đại học Y Hà Nội Chịu trách nhiệm chính: Phạm Quang Thịnh SĐT: 0349.834.204 Email: phamquangthinh.hmu@gmail.com Ngày nhận bài: Ngày phản biện khoa học: Ngày duyệt bài: 05/9/2022 following case, we used many supporting techniques such as antibody adsorption in cold temperature and pedigree analysis in order to determine ABO blood group The result of this patient was B weak with B antibody Keywords: ABO blood group, B weak antigen I ĐẶT VẤN ĐỀ Để xác định nhóm máu hệ ABO phải thực đồng thời hai phương pháp huyết mẫu hồng cầu mẫu Nhóm máu khẳng định kết định nhóm hai phương pháp đồng [1] Đây xét nghiệm đơn giản với độ xác cao, song thực tế gặp nhiều trường hợp khó xác định nhóm máu Nghiên cứu Viện Huyết học - Truyền máu Trung Ương cho thấy kháng nguyên yếu nguyên nhân hàng đầu dẫn đến khó xác định nhóm máu hệ ABO [2] Huyết đa giá, kỹ thuật cố định tách kháng thể thường sử dụng để xác định nhóm máu trường hợp [2-5] Tuy nhiên, kỹ thuật thường có hiệu với người bệnh truyền máu khác nhóm Trường hợp người bệnh nhóm máu B yếu có kháng thể chống B ghi nhận Bệnh viện Bạch Mai trước truyền khối hồng cầu nhóm O Đây trường hợp khó xác định nhóm máu, phải sử dụng đồng thời nhiều kỹ thuật hỗ trợ 261 KỶ YẾU CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU II BÁO CÁO CA BỆNH 2.1 Thông tin người bệnh - Họ tên: NGUYỄN THÀNH N, 38 tuổi, địa chỉ: Sóc Sơn – Hà Nội - Ngày vào viện: 09/08/2020 - Chẩn đốn: xuất huyết tiêu hóa/xơ gan/suy thận - Tiền sử: người bệnh có tiền sử xơ gan, suy thận điều trị bệnh viện (BV) đa khoa huyện Sóc Sơn BV Saint-Paul từ năm 2018 Trong trình điều trị, người bệnh truyền máu nhiều lần Ngày 08/08/2020, người bệnh nôn máu, nhập viện đa khoa huyện Sóc Sơn, truyền KHC nhóm máu O sau chuyển BV SaintPaul Ngày 09/08/2020, người bệnh chuyển khoa Cấp cứu, BV Bạch Mai Thời điểm vào viện, người bệnh thiếu máu nặng (Hgb: 49g/L) bác sĩ định truyền 700 ml KHC 2.2 Mơ tả q trình xác định nhóm máu hệ ABO 2.2.1 Kết định nhóm máu kỹ thuật ống nghiệm Định nhóm máu người bệnh trước truyền máu cho kết sau: Bảng Kết định nhóm máu hệ ABO nhiệt độ phòng Phương pháp HTM Phương pháp HCM Anti-A Anti-B Anti-AB HCM-A HCM-B (-) (-) (-) (4+) (-) Nhóm máu O Nhóm máu B Nhận xét: kết định nhóm phương pháp bất đồng, không kết luận nhóm máu Tiến hành làm chứng để xác định nguyên nhân gây bất đồng kết định nhóm máu phương pháp, kết thu sau: Bảng 2: Kết xác định nguyên nhân bất đồng nhóm máu phương pháp Chứng Thành phần Kết giọt hồng cầu bệnh nhân 5% Auto (tự thân) Âm tính + giọt huyết bệnh nhân giọt hồng cầu nhóm O 5% + Allo (đồng lồi, O) Âm tính giọt huyết bệnh nhân giọt hồng cầu bệnh nhân 5% AB Âm tính + giọt huyết nhóm AB Nhận xét: Cả chứng âm tính, gây ngưng kết hồng cầu 220 C, nhiên chưa xác định nguyên nhân gây bất 0-40 C kháng thể hoạt động mạnh đồng kết định nhóm máu phương Để tăng khả phát ngưng kết pháp kháng nguyên hồng cầu kháng Phân tích: Cấu trúc kháng thể thể, tiếp tục xác định nhóm máu huyết mẫu kháng thể hệ nhóm máu nhiệt độ 40 C ABO huyết bệnh nhân 2.2.2 Xác định nhóm máu điều kiện IgM Đây kháng thể có khả nhiệt độ 40C 262 T¹P CHÝ Y häc viƯt nam tẬP 520 - th¸ng 11 - sè ĐẶC BIỆT - 2022 Bảng Kết định nhóm máu hệ ABO nhiệt độ 40C Phương pháp HTM Phương pháp HCM Chứng Anti-A Anti-B Anti-AB HCM-A HCM-B (-) (-) (-) (4+) (2+) Auto: (1+) Allo: (1+) Nhóm máu O Nhóm máu O Nhận xét: Chứng auto allo (1+), chưa kết luận nhóm máu Phân tích: Trong huyết người bệnh có kháng thể tự miễn hoạt động nhiệt độ lạnh (chứng auto +) nên chưa khẳng định có mặt kháng thể chống B huyết có phản ứng ngưng kết với HCM-B Để khẳng định có mặt kháng thể chống B, phải hấp phụ hoàn toàn kháng thể tự miễn huyết người bệnh, sau xác định lại nhóm máu phương pháp HCM Bảng Kết hấp phụ kháng thể lạnh Kết chứng Hồng cầu hấp phụ Nhiệt độ Trước hấp phụ Sau hấp phụ Auto: (±) Hồng cầu người bệnh Allo: (±) Auto: (1+) 40C Allo: (1+) Auto: (-) Hồng cầu nhóm O Allo: (-) Nhận xét: Sử dụng hồng cầu nhóm máu O hấp phụ hồn tồn kháng thể tự miễn có huyết người bệnh Sau hấp phụ hết kháng thể tự miễn, chúng tơi tiếp tục xác định nhóm máu hệ ABO người bệnh, kết thu sau: Bảng Kết định nhóm máu hệ ABO sau hấp phụ kháng thể tự miễn Phương pháp HTM Phương pháp HCM Chứng Anti-A Anti-B Anti-AB HCM-A HCM-B (-) (-) (-) (4+) (1+) Auto: (-) Allo: (-) Nhóm máu O Nhóm máu O Nhận xét: Huyết người bệnh kháng thể chống B với hiệu giá thấp Phân tích: Huyết người bệnh có kháng thể chống A kháng thể chống B, nhiên hiệu giá khác nhiều (ngưng kết (4+) với HCM-A (1+) với HCM-B Với kiểu hình nhóm máu trên, chúng tơi nghĩ đến nhóm máu người bệnh B yếu nhóm O [3,6] Tuy nhiên kỹ thuật hỗ trợ để xác định có mặt kháng nguyên B bề mặt hồng cầu hạn chế trước người bệnh truyền KHC nhóm máu O Vì vậy, chúng tơi thu thập mẫu máu người nhà người bệnh để xác định nhóm máu hệ ABO 263 KỶ YẾU CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU 2.2.3 Xác định nhóm máu người nhà người bệnh Bảng Kết định nhóm máu hệ ABO người nhà người bệnh Anti A Anti B Anti AB HCM A HCM B Nhóm máu Em gái Âm 4+ 4+ 4+ Âm B Vợ Âm Âm Âm 3+ 3+ O Con Âm 1+ 1+ 3+ Âm B yếu Con Âm Âm Âm 3+ 3+ O Con Âm Âm Âm 3+ 3+ O Nhận xét: Trong số người giá (polyclonal) chống B lấy từ bệnh, có người nhóm máu B yếu người nhóm máu A khỏe mạnh, khơng có Phân tích: Em gái người bệnh có nhóm kháng thể bất thường để xác định nhóm máu máu B nên bố mẹ BN có gen người bệnh theo phương pháp HTM [2] B Con người bệnh có nhóm máu B 2.2.4 Xác định kháng nguyên B yếu vợ người bệnh có nhóm hồng cầu kháng thể đa giá máu O nên gen quy định kiểu hình B yếu Chúng lấy huyết người nhận từ người bệnh nhóm máu A khỏe mạnh (đánh số thứ tự từ Những phân tích củng cố A1 đến A5) có kết xét nghiệm sàng thêm khả người bệnh có nhóm máu B lọc kháng thể bất thường âm tính cho tiếp yếu Vấn đề khó khăn lúc xác định xúc với hồng cầu người bệnh điều kiện có mặt kháng nguyên B nhiệt độ phòng Kết thu thời hồng cầu Chúng sử dụng kháng thể đa điểm khác sau: Bảng Kết xác định kháng nguyên B huyết đa giá Thời gian đọc kết T1=0 T2=30 phút T3=60 phút Kháng thể đa giá A1 Âm Âm Âm A2 Âm Âm Âm A3 Âm Âm Âm A4 Âm ± + A5 Âm Âm Âm Nhận xét: Hồng cầu người bệnh bị kháng thể đa giá, có khả gây ngưng kết huyết người có ngưng kết hồng cầu mang kháng nguyên B nhóm máu A phát số biến tướng Phân tích: Huyết người nhóm máu kháng nguyên B kháng thể đơn giá A có kháng thể tự nhiên chống B Kháng thể chống B thường không phát Tuy 264 T¹P CHÝ Y häc viƯt nam tẬP 520 - th¸ng 11 - sè ĐẶC BIỆT - 2022 nhiên, khơng phải huyết người nhóm máu A có khả hiệu giá kháng thể trình hình thành kháng thể chống B cá thể có khác biệt Những trường hợp hồng cầu có vị trí kháng ngun B cấu trúc kháng nguyên B thay đổi làm giảm tốc độ phản ứng kháng nguyên kháng thể Vì vậy, xác định nhóm máu trường hợp cần cung cấp thêm thời gian để kháng nguyên hồng cầu phản ứng với kháng thể tương ứng huyết Kết thử nghiệm cho thấy hồng cầu người bệnh ngưng kết (+) sau 60 phút tiếp xúc với mẫu huyết A4 khẳng định bề mặt hồng cầu người bệnh có kháng nguyên B 2.2.5 Kết luận nhóm máu Qua kết thu từ bảng 5, bảng bảng 7, chúng tơi kết luận nhóm máu hệ ABO người bệnh là: B yếu, có kháng thể chống B III BÀN LUẬN Nhóm máu B thuộc hệ ABO gen B nằm NST số quy định đặc trưng xuất kháng nguyên B hồng cầu Thực tế chứng minh có biến tướng kháng nguyên B B3, Bm, Bel,… Đặc điểm người nhóm máu B yếu hồng cầu thường ngưng kết yếu với kháng thể chống B huyết xuất kháng thể chống B [3,6-9] Ở Việt Nam chưa có báo cáo cụ thể tần suất xuất nhóm máu B yếu số nước có thống kê: Ấn Độ, tần suất gặp B yếu 1/86.687 người, Pháp tần suất 1/116.667 người số Đài Loan 1/900 người nhóm máu B [8-10] Vấn đề quan trọng xác định nhóm máu B “yếu” chứng minh có mặt kháng nguyên B bề mặt hồng cầu Có thể làm điều cách thay đổi điều kiện tiến hành xét nghiệm kháng thể hệ nhóm máu ABO hoạt động tối ưu 040C [7,10] Do vậy, thực định nhóm máu hệ ABO điều kiện lạnh thường áp dụng có định hướng nhóm máu yếu [10] Tuy nhiên, điều kiện lạnh kích hoạt kháng thể tự miễn huyết dẫn đến sai số đọc kết Để hạn chế điều đó, phải thực chứng auto allo Khi chứng dương tính cần tiến hành kỹ thuật hấp phụ kháng thể trước xác định nhóm máu [3,6] Ngồi vị trí tồn bề mặt hồng cầu, người ta tìm thấy kháng ngun hệ ABO mô, quan dịch tiết thể [3,6] Có khoảng 80% người tiết - tức có kháng nguyên A, B, H dịch tiết Một số trường hợp khẳng định nhóm máu hệ ABO thơng qua xác định có mặt kháng nguyên tương ứng nước bọt (saliva test) [10] Tuy nhiên, không thực kỹ thuật để xác định nhóm máu hệ ABO trường hợp nước bọt người bệnh khơng có kháng ngun khơng cho phép loại trừ có mặt kháng nguyên bề mặt hồng cầu Đột biến làm thay đổi gen quy định tính kháng nguyên bề mặt hồng cầu, sở xuất trường hợp nhóm máu yếu Các kỹ thuật đại 265 KỶ YẾU CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CHUN NGÀNH HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU giải trình tự gen phát đột biến tạo nhóm (subtype) hệ ABO [11,12] Tuy nhiên, với yêu cầu xác định nhóm máu hệ ABO để lựa chọn chế phẩm máu phù hợp truyền cho người bệnh cấp cứu giải pháp chưa thực phù hợp Hơn nữa, Việt Nam chưa có nhiều sở triển khai kỹ thuật nên việc xác định nhóm máu hệ ABO phải dựa vào đặc điểm huyết học [2] Với trường hợp kháng nguyên B có thay đổi mặt cấu trúc, hồng cầu mang kháng nguyên khơng bị ngưng kết huyết đơn giá chống B Trong đó, khả gây ngưng kết hồng cầu huyết đa giá lại không bị ảnh hưởng thay đổi Do vậy, trường hợp nhóm máu yếu nên sử dụng huyết đa giá, kết hợp thêm với việc ủ nhiệt độ phòng từ 30 đến 60 phút giúp cho kháng nguyên, kháng thể tăng khả tiếp xúc để phản ứng ngưng kết xảy tốt [2,10] Kỹ thuật cố định tách kháng thể thường sử dụng trường hợp xác định nhóm máu người bệnh nghi ngờ nhóm máu B yếu Nguyên lý kỹ thuật lấy hồng cầu người bệnh ủ với kháng thể chống B, sau rửa kháng thể thừa dùng số chất để tách kháng thể cố định hồng cầu Nếu dịch tách có kháng thể chống B tức hồng cầu người bệnh có kháng nguyên B Thực tế chứng minh kỹ thuật có nhiều ý nghĩa [3,6,10] Tuy nhiên, người bệnh có vị trí kháng ngun truyền KHC thay trước xác định nhóm 266 máu việc áp dụng kỹ thuật lại hạn chế Do vậy, tùy theo tình cụ thể mà kỹ thuật hỗ trợ thực phối hợp linh hoạt với Trường hợp khó xác định nhóm máu kết hợp với việc phân tích phả hệ để cung cấp thêm đặc điểm kháng nguyên, kháng thể nhóm máu để khẳng định nhóm máu cho người bệnh [8,11] Đây điều kiện để tư vấn thêm cho người nhà người bệnh ghi nhận trường hợp bất thường tương tự Người bệnh nhóm B yếu báo cáo chúng tơi có kháng thể chống B Đối với người nhóm máu B yếu xuất kháng thể chống B huyết Nghiên cứu Tiwari, Setya, Arora cộng (2020) cho thấy tỉ lệ người nhóm B yếu 35,5%[10] hay gặp người có kiểu hình Bel [3] Việc xác định nhóm ABO có nhiều ý nghĩa lâm sàng liên quan mật thiết đến truyền máu ghép tế bào gốc Hiểu biết đặc điểm kháng nguyên kháng thể loại nhóm hệ ABO giúp lựa chọn chế phẩm máu phù hợp với người bệnh, sở để giải thích phản ứng miễn dịch xảy truyền máu [12] IV KẾT LUẬN Tiến hành kỹ thuật hấp phụ kháng thể định nhóm máu điều kiện nhiệt độ lạnh, kết hợp phân tích phả hệ sử dụng huyết đa giá xác định nhóm máu người bệnh B yếu, có kháng thể chống B T¹P CHÝ Y häc viƯt nam tẬP 520 - th¸ng 11 - sè ĐẶC BIỆT - 2022 V KHUYẾN NGHỊ Xác định nhóm máu hệ ABO trường hợp khó cần phối hợp linh hoạt kỹ thuật hỗ trợ, số trường hợp cần phân tích phả hệ để tìm nhóm máu cho người bệnh TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2013) Thông tư số 26/2013/TTBYT Hướng dẫn hoạt động truyền máu Hoàng Thị Thanh Nga, Nguyễn Quang Tùng, Lại Thị Phương Loan, Phạm Tuấn Dương (2020) Nghiên cứu xác định nhóm máu hệ ABO trường hợp khơng xác định phương pháp thông thường Viện Huyết học – Truyền máu Trung Ương Y học Việt Nam, 496: 190-198 Phạm Quang Vinh (2013) Huyết học – Truyền máu Hệ thống nhóm máu ứng dụng truyền máu Nhà xuất Y học.36-51 Makroo RN, Kakkar B, Agrawal S et al (2019) Retrospective analysis of forward and reverse ABO typing discrepancies among patients and blood donors in a tertiary care hospital Transfusion Medicine, 29(2):103-109 Hayedeh Javadzadeh Shahshahani, Azam Hayati (2020) Blood group discrepancies at a Regional Blood Center Int J Hematol Oncol Stem Cell Res 14(1):38-44 Đỗ Trung Phấn (2009) Kỹ thuật xét nghiệm huyết học truyền máu ứng dụng lâm sàng Kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO 10 11 12 phát máu an toàn Nhà xuất Y học 269276 Subramaniyan R (2016) Diminished expression of B antigen mimicking B3 phenotype in a patient with AML-M3: a rare case report Revista Brasileira de Hematologia e Hemoterapia, 38, 264-266 Lin‐Chu M, Broadberry RE and Chiou PW (1986) The B3 phenotype in Chinese Transfusion, 26(5), 428-430 Salmon C (1976) Proposed practical classification of weak B phenotypes B 3, Bx, B el Revue Francaise de Transfusion et Immuno-hematologie, 19(1), 89-104 Tiwari, Setya, Arora, Mehta, Aggarwal, Mitra (2020) An algorithmic approach to serological work-up of ABO sub-groups which present as ABO discrepancies in resource constraint settings Journal of immunological methods, 487, 112895 Chassaigne M, Lopez M, Krawczynska S and Saint-Paul B (1977) Quantitative and thermodynamic study of B antigen in a family including individuals with phenotypes B3 and AB3 Revue Francaise de Transfusion et Immuno-hematologie, 20(4), 565-573 Fang, Liu, Yang et al (2021) Identification of B antigen weak expression caused by 5873CT mutation in blood group gene based on sequencing technique Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi, 29(5), 1929-1934 267 ... sĩ định truyền 700 ml KHC 2.2 Mô tả q trình xác định nhóm máu hệ ABO 2.2.1 Kết định nhóm máu kỹ thuật ống nghiệm Định nhóm máu người bệnh trước truyền máu cho kết sau: Bảng Kết định nhóm máu hệ. .. Một số trường hợp khẳng định nhóm máu hệ ABO thơng qua xác định có mặt kháng nguyên tương ứng nước bọt (saliva test) [10] Tuy nhiên, khơng thực kỹ thuật để xác định nhóm máu hệ ABO trường hợp nước... mẫu máu người nhà người bệnh để xác định nhóm máu hệ ABO 263 KỶ YẾU CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CHUN NGÀNH HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU 2.2.3 Xác định nhóm máu người nhà người bệnh Bảng Kết định