Đặc điểm tinh trùng thu được từ mào tinh ở bệnh nhân vô tinh do tắc

Bài viết Đặc điểm tinh trùng thu được từ mào tinh ở bệnh nhân vô tinh do tắc mô tả đặc điểm vi thể tinh trùng (TT) thu được từ mào tinh bằng phương pháp chọc hút TT từ mào tinh qua da (Percutaneuos Epididymal Sperm Aspiration - PESA) ở bệnh nhân vô tinh do tắc.

TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 518 - THÁNG - SỐ CHUYÊN ĐỀ - 2022 ĐẶC ĐIỂM TINH TRÙNG THU ĐƯỢC TỪ MÀO TINH Ở BỆNH NHÂN VÔ TINH DO TẮC Lê Phúc Linh1, Quách Thị Yến2, Phạm Đức Minh1, Trịnh An Thiên1, Trần Văn Tuấn1 TÓM TẮT 25 Mục tiêu: mô tả đặc điểm vi thể tinh trùng (TT) thu từ mào tinh phương pháp chọc hút TT từ mào tinh qua da (Percutaneuos Epididymal Sperm Aspiration - PESA) bệnh nhân vô tinh tắc Đối tượng phương pháp nghiên cứu: 66 bệnh nhân vô tinh thu TT kỹ thuật PESA Các tiêu nghiên cứu đánh giá bao gồm: mật độ, độ di động, tỷ lệ TT sống, tỷ lệ hình thái TT bình thường dạng hình thái TT bất thường Kết quả: trung vị mật độ TT, tỷ lệ TT sống, hình thái TT bình thường tương ứng 15 triệu/mL, 42% 2% với 95% CI tương ứng 17,87 – 30,09; 37,32 – 49,62 1,62 – 2,32 Có 69,70% bệnh nhân có mật độ TT ≥ 10 triệu/mL Trung vị loại TT di động: tiến tới, chỗ bất động 5%; 17,5% 74% tương ứng Các dạng bất thường đầu bất thường phối hợp chiếm tỷ lệ cao nhất, tương ứng 37,76% 36,77%; bất thường bào tương dư thấp 4,28% Kết luận: Mật độ TT thu từ mào tinh cao; riêng tỷ lệ TT sống, hình thái TT bất thường TT di động so với tiêu chuẩn WHO (2010) Viện Mô Phôi lâm sàng Quân đội - Học viện Quân y Bộ môn Mô phôi thai học - Học viện Y dược học cổ truyền Việt Nam Chịu trách nhiệm chính: Lê Phúc Linh Email: lplivf@gmail.com Ngày nhận bài: 22/7/2022 Ngày phản biện khoa học: 07/08/2022 Ngày duyệt bài: 29/08/2022 Từ khóa: Phương pháp chọc hút tinh trùng từ mào tinh qua da, Kết thụ tinh ống nghiệm bệnh nhân vô tinh tắc SUMMARY CHARACTERISTICS OF SPERM OBTAINED FROM THE EPIDIDYMAL IN OBSTRUCTIVE AZOOSPERMIA PATIENTS Objective: To describe the structure and microstructure characteristics of spermatozoa obtained from the Percutaneous Epididymal Sperm Aspiration - PESA in obstructive azoospermia patients Subjects and research methods: 66 infertility patients were obtained sperm by PESA technique The research criteria evaluated included: density, motility, sperm vitality, normal sperm morphology rate and abnormal sperm morphology types Results: median of sperm density, sperm vitality, normal sperm morphology were, respectively, 15 million/mL, 42% and 2% with 95% CI of 17.87 30.09; 37.32 - 49.62 and 1.62 - 2.32, correspondingly There were 69.70% of patients with sperm concentration ≥ 10 million/mL Median of motile sperm categories: progressive, non-progressive and immotile were 5%; 17.5% and 74%,respectively Head and combined defects accounted for the highest proportion, respectively 37.76% and 36.77%; and excess residual cytoplasm was the lowest at 4.28% Conclusion: The sperm concentration obtained from the epididymis was reasonably high; however, the reseach’s sperm vitality, 185 HỘI NGHỊ KHOA HỌC HÌNH THÁI HỌC TOÀN QUỐC LẦN THỨ XVIII NĂM 2022 abnormality and mobility were lower than WHO standards (2010) Keys words: Azoospermia, Percutaneuos Epididymal Sperm Aspiration, PESA, IVF results in obstructive azoospermia patients I ĐẶT VẤN ĐỀ Vô sinh (VS) vấn đề chiến lược sức khỏe sinh sản Tổ chức y tế giới Theo thống kê, khoảng 40% nguyên nhân VS vợ, 40% nguyên nhân chồng, 10% nguyên nhân hai vợ chồng 10% không rõ nguyên nhân Nguyên nhân VS nam giới tinh trùng (TT) ít, bất thường hình thái TT, nhiễm khuẩn, xuất tinh ngược dịng khơng có TT (vơ tinh) Trong vô tinh nguyên nhân gây vô sinh nặng nề nam giới chiếm khoảng 5% cặp vợ chồng VS Hiện nay, vô tinh chia thành nhóm: (1) nhóm vơ tinh tắc: TT sinh tinh hồn, khơng bên ngồi; (2) nhóm vơ tinh khơng tắc: tinh hoàn giảm sinh tinh nặng hay hoàn tồn khơng sản xuất TT [1] Năm 1992 với đời kỹ thuật tiêm TT vào bào tương noãn mở hội làm cha sinh học nhiều người vô tinh Tinh trùng thụ tinh lấy từ mào tinh từ tinh hoàn Kỹ thuật chọc hút TT từ mào tinh qua da kỹ thuật lựa chọn bệnh nhân vô tinh tắc Việc chọc hút TT từ mào tinh đánh giá chất lượng TT yếu tố tiên lượng cho thành cơng tỷ lệ thụ tinh Chính vậy, chúng 186 tiến hành đề tài nhằm tìm hiểu đặc điểm TT thu từ mào tinh người bệnh vô tinh tắc II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu: - 66 bệnh nhân vơ tinh có TT thu kỹ thuật chọc hút TT từ mào tinh qua da Viện Mô phôi lâm sàng Quân đội, Học viện Quân y từ 5/2017 đến 10/2019 - Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân: người khơng có TT tinh dịch xác định theo tiêu chuẩn WHO (2010), khơng phải xuất tinh ngược dịng - Tiêu chuẩn loại trừ: trường hợp có bệnh cấp tính, bệnh xã hội, bệnh nội tiết, dùng thuốc, hóa chất ảnh hưởng đến q trình sinh tinh Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu mô tả hồi cứu Đánh giá đặc điểm vi thể TT theo tiêu chuẩn WHO (2010) [2]: dịch từ mào tinh hút vào xilanh 1mL pha sẵn 0,3mL môi trường sperm rinse Các tiêu đánh giá gồm: mật độ TT, tỷ lệ TT sống, tỷ lệ loại TT di động hình thái tinh trùng Số liệu xử lý phần mềm spss 20.0 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nghiên cứu Kết nghiên cứu 66 bệnh nhân vô tinh tắc Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng minh họa bảng TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 518 - THÁNG - SỐ CHUYÊN ĐỀ - 2022 Bảng Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh nhân nghiên cứu Đặc điểm X  SD Min - max Trung vị 95%CI Tuổi (năm) Thời gian vô sinh (năm) BMI (kg/m2) Thể tích tinh hồn P (mL) Thể tích tinh hồn T (mL) FSH (mUI/mL) LH (mUI/mL) Testosteron (ng/mL) 31,82  4,77 4,77  4,15 22,79  2,73 10,26  3,07 10,17  2,87 4,61  4,23 4,58  3,96 4,64  2,28 25 – 43 – 20 16 – 29,1 – 20 – 20 0,20 – 31,38 0,1 – 32,12 0,99 – 11,54 31,5 22,81 10,0 10,0 3,80 3,93 4,43 30,65 – 32,99 3,75 – 5,79 22,12 – 23,47 9,50 – 11,01 9,46 – 10,88 3,57 – 5,65 3,61 – 5,55 4,08 – 5,20 Trung vị tuổi, thời gian vơ sinh, số BMI, thể tích tinh hoàn (P) (T) tương ứng 31,5 tuổi; năm; 22,81 10mL bên tương ứng với 95%CI 30,65 – 32,99; 3,75 – 5,79; 22,12 – 23,47; 9,50 – 11,01; 9,46 – 10,88 Trung vị nồng độ FSH, LH Testosterone giới hạn bình thường có giá trị tương ứng 3,8mIU/mL; 3,93mIU/mL 4,43ng/mL với 95%CI tương ứng 3,57 – 5,65; 3,61 – 5,55; 4,08 – 5,20 Trong 66 bệnh vô tinh tắc, 97% bệnh nhân VS nguyên phát 3% bệnh nhân VS thứ phát Có tới 65 bệnh nhân có AZF bình thường (chiếm 98,48%) có bệnh nhân bất thường AZFc (chiếm 1,52%) Đặc điểm vi thể tinh trùng thu từ mào tinh Trong 66 bệnh nhân vô tinh thu TT từ mào tinh, có số lượng mẫu thu mật độ nên chúng tơi đếm 100 TT/mẫu đánh giá tiêu chí Tổng số TT đánh giá 6600 tinh trùng Biểu đồ Phân bố mật độ tinh trùng thu từ mào tinh Biểu đồ Các dạng hình thái tinh trùng bất thường thu từ mào tinh 187 HỘI NGHỊ KHOA HỌC HÌNH THÁI HỌC TỒN QUỐC LẦN THỨ XVIII NĂM 2022 Bảng Đặc điểm mật độ, độ di động, hình thái bình thường, tỷ lệ sống tinh trùng thu từ mào tinh Giá trị X  SD Min - max Trung vị 95%CI Mật độ (triệu/mL) TT di động tiến tới (%) TT di động chỗ (%) TT bất động (%) Hình thái bình thường (%) Tỷ lệ TT sống (%) 23,98  24,85 10,58  10,92 19,68  15,86 69,76  25,2 1,97  1,41 43,47  25,04 0,4 – 100 – 40 – 70 – 100 0–5 – 100 15 17,5 74 42 17,87 – 30,09 7,89 – 13,26 15,78 – 23,58 63,56 – 75,95 1,62 – 2,32 37,32 – 49,62 Trung vị mật độ TT thu 15 triệu/mL với 95%CI 17,87 – 30,09, nhỏ 0,4 triệu/mL lớn 100 triệu/mL, mật độ TT ≥ 10 triệu/mL chiếm tỷ lệ cao 69,70% thấp mật độ từ đến triệu/mL, chiếm 4,55% (biểu đồ 1) Về tỷ lệ di động TT: TT bất động chiếm tỷ lệ cao thấp TT di động tiến tới Trung vị hình thái TT bình thường 2% với 95%CI 1,62 – 2,32 trung vị tỷ lệ TT sống 42% với 95%CI 37,32 – 49,62 Dạng bất thường đầu bất thường phối hợp chiếm tỷ lệ cao thấp dạng bất thường bào tương dư (biểu đồ 2) Trong dạng bất thường đầu TT, dạng bất thường khơng có túi cực đầu chiếm tỷ lệ nhiều (15,06%) thấp dạng bất thường khác (9,17%) Trong dạng tinh trùng bất thường cổ đoạn trung gian, dạng cổ không cân đối chiếm tỷ lệ cao 30% thấp dạng cổ mảnh (17,07%) Đối với tinh trùng bất thường đuôi, dạng cuộn xoắn chiếm tỷ lệ cao 30,43% thấp dạng khác (20,45%) IV BÀN LUẬN Về đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng 188 bệnh nhân vô tinh nghiên cứu minh họa bảng 1: 66 bệnh vô tinh, gặp chủ yếu vô sinh nguyên phát có bệnh nhân bất thường AZFc (chiếm 1,52%); thể tích tinh hồn lớn; cá biệt có bệnh nhân vô sinh với thời gian lên tới 20 năm; nồng độ FSH, LH Testosteron giới hạn bình thường Về mật độ TT: trung vị mật độ TT 15 triệu/mL với 95% CI 17,87 – 30,09, thấp 0,4 triệu/mL cao 100 triệu/mL Trong đó, 69,70% mẫu có mật độ ≥ 10 triệu/mL thấp mật độ từ đến triệu/mL, chiếm 4,55% Cito G cs (2018) thu tinh trùng bệnh nhân OA 0,24 ± 0,01 [3] Các bệnh nhân thu TT từ mào tinh chứng tỏ có tắc ống mào tinh tắc ống dẫn tinh, ống phóng tinh Với kết chứng tỏ bệnh nhân vô tinh tắc có q trình sinh tinh tinh hồn diễn bình thường bị suy giảm phần Một vài nghiên cứu chứng minh tình trạng tắc ống dẫn tinh kéo dài gây biến đổi cấu trúc bên tinh hoàn Tại Ấn Độ, Mehrotra cs (1983) nghiên cứu thay đổi ống sinh tinh sau thắt từ 1,5 - năm 17 bệnh nhân khỏe mạnh nhận thấy: màng đáy dày lên, tế bào dòng tinh thay đổi nhiều, rối loạn xếp tế bào dịng tinh TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 518 - THÁNG - SỐ CHUYÊN ĐỀ - 2022 ống sinh tinh [4] Bairati cs (1986) cho kết luận màng đáy dày lên, số lượng tế bào biểu mô tinh suy giảm thắt ống dẫn tinh [5] Như vậy, rõ ràng việc tắc ống dẫn tinh gây suy giảm trình sinh tinh bên tinh hoàn Tuy nhiên, nghiên cứu chúng tôi, gặp tỷ lệ cao mẫu có mật độ TT ≥ 15 triệu/mL, điều tác nhân gây tắc tác động thời gian ngắn nên chưa đủ gây biến đổi nhiều cấu trúc bên tinh hoàn Về tỷ lệ TT di động: tinh trùng bất động cao thấp di động tiến tới Craft I (1995) tiến hành ICSI – PESA với 16 mẫu TT bệnh nhân vô tinh cho thấy tỷ lệ TT di động từ – 30% [6] Yafi FA (2013) nghiên cứu đặc điểm TT từ mào tinh kỹ thuật PESA thấy có 192/243 bệnh nhân có TT di động 1% (chiếm 79%); 24/243 bệnh nhân có TT di động 1% (chiếm 9,9%) [7] Cito G cs (2018) cho kết tỷ lệ TT di động mào tinh 4,8 ± 0,57 [3] Nghiên cứu tác giả không phân loại khả di động TT khó để so sánh kết nghiên cứu với Về tỷ lệ TT sống: trung vị tỷ lệ TT sống 42% với CI 95% 37,32 – 49,62, thấp so với tiêu chuẩn WHO (2010), thấp 0% cao 100% Như vậy, tỷ lệ TT sống nghiên cứu thấp so với tiêu chuẩn mẫu tinh dịch người bình thường Điều bệnh nhân bị tắc ống mào tinh ống dẫn tinh lâu ngày làm biến đổi cấu trúc bên tinh hồn, ảnh hưởng đến q trình sinh tinh gây nên bất thường nặng nề TT số mẫu chưa đủ thời gian trưởng thành mặt chức mào tinh dẫn đến tỷ lệ TT sống giảm Hình thái TT đánh giá theo tiêu chuẩn WHO 2010 nhuộm phương pháp Papalicolaou Phương pháp phân biệt rõ cực đầu, vùng sau cực đầu, bào tương đoạn cổ, Việc đánh giá xác hình thái TT có giá trị tiên lượng kết IUI, IVF, ICSI, từ định nhiều đến kết thụ thai chất lượng phôi TT thu từ mào tinh nghiên cứu có hình thái bất thường cao Trong loại bất thường, dạng bất thường đầu chiếm tỷ lệ cao nhất, tiếp đến bất thường phối hợp thấp dạng bất thường bào tương dư (biểu đồ 2) Kết tương tự nghiên cứu Phạm Minh Huệ (2012) với tỷ lệ bất thường phối hợp bất thường đầu chiếm ưu [8] Craft I (1995) nghiên cứu 16 mẫu TT thu từ mào tinh thấy hình thái TT bất thường từ 50 – 95% [6] Việc đánh giá hình thái bất thường dựa vào tiêu chuẩn khác WHO nên kết nghiên cứu có khơng tương xứng Trong dạng bất thường đầu, tỷ lệ đầu túi cực đầu cao thấp dạng bất thường đầu khác Đối với bất thường cổ đoạn trung gian, TT có cổ khơng cân đối chiếm tỷ lệ cao thấp cổ mảnh Trong dạng bất thường đuôi, dạng cuộn xoắn chiếm tỷ lệ cao nhất, tiếp đến dạng đuôi ngắn gập góc; thấp dạng khác V KẾT LUẬN Mật độ TT thu từ mào tinh cao Riêng tỷ lệ TT sống, hình thái TT bình thường TT di động so với tiêu chuẩn WHO (2010) Với mật độ trung bình TT 15 triệu/mL, tỷ lệ TT sống, hình thái TT bình thường 42% 2% Trong 69,70% bệnh nhân có mật độ TT ≥ 10 triệu/mL; 12,12% có mật độ 189 HỘI NGHỊ KHOA HỌC HÌNH THÁI HỌC TOÀN QUỐC LẦN THỨ XVIII NĂM 2022 TT < triệu/ml 4,55% có mật độ TT < triệu/ml TT di động tiến tới, chỗ bất động 5%; 17,5% 74% Các dạng bất thường đầu bất thường phối hợp chiếm tỷ lệ cao nhất, tương ứng 37,76% 36,77%; bất thường bào tương dư thấp 4,28% TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Thị Ngọc Phượng (2013) Nội tiết sinh sản, 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội WHO (2010) WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen, 5th ed., Geneva, Switzerland Cito G., Coccia M.E., Picone R., et al (2018) Novel method of histopathological analysis after testicular sperm extraction in patients with nonobstructive and obstructive azoospermia Clin Exp Reprod Med., 45(4):170–176 Mehrotra R, Tandon P, Singh KM Ultrastructural appearances of interstitial tissue of testis in vasectomised individuals Indian J Med Res, 1983, 77: 347 – 52 Bairati A., Morte E.D., Giarola A., et al (1986) Testicular biopsy of azoospermic men with vas deferens malformation using two different techniques Archives of Androl., 17(1):67–78 Craft I., Tsirigotis M., Bennett V., et al (1995) Percutaneous epididymal sperm aspiration and intracytoplasmic sperm injection in the management of infertility due to obstructive azoospermia Fertil Steril., 63(5):1038–1042 Yafi F.A., Zini A (2013) Percutaneous epididymal sperm aspiration for men with obstructive azoospermia: predictors of successful sperm retrieval Urol., 82(2):341– 344 Phạm Minh Huệ (2012) Nghiên cứu hình thái cấu trúc, siêu cấu trúc tinh trùng mào tinh bệnh nhân vô tinh biến đổi môi trường nuôi cấy in vitro, Luận văn Thạc sỹ y học, Học viện Quân Y MỐI LIÊN QUAN GIỮA NỒNG ĐỘ PROGESTERONE HUYẾT THANH TRƯỚC CHUYỂN PHƠI VỚI KẾT QUẢ CĨ THAI Ở CHU KỲ CHUYỂN PHÔI ĐÔNG LẠNH Nguyễn Minh Phương1, Trịnh Thế Sơn1, Nguyễn Thanh Tùng1, Lê Thanh Huyền1, Đỗ Ngọc Lan1, Đoàn Thị Hằng1 TÓM TẮT 26 Học viện Quân y Chịu trách nhiệm chính: Nguyễn Minh Phương Email: minhphuong010996@gmail.com Ngày nhận bài: 22/7/2022 Ngày phản biện khoa học: 05/08/2022 Ngày duyệt bài: 25/08/2022 190 Mục tiêu: Đánh giá liên quan nồng độ progesterone huyết trước chuyển phôi với kết có thai chu kỳ chuyển phơi nang đơng lạnh Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu tiến cứu 120 chu kỳ chuyển phôi đông lạnh giai đoạn phôi nang Viện Mô phôi lâm sàng Quân đội, sử dụng phác đồ nội tiết ngoại sinh để chuẩn bị nội mạc tử cung hỗ trợ ... mở hội làm cha sinh học nhiều người vơ tinh Tinh trùng thụ tinh lấy từ mào tinh từ tinh hoàn Kỹ thu? ??t chọc hút TT từ mào tinh qua da kỹ thu? ??t lựa chọn bệnh nhân vô tinh tắc Việc chọc hút TT từ. .. mật độ từ đến triệu/mL, chiếm 4,55% Cito G cs (2018) thu tinh trùng bệnh nhân OA 0,24 ± 0,01 [3] Các bệnh nhân thu TT từ mào tinh chứng tỏ có tắc ống mào tinh tắc ống dẫn tinh, ống phóng tinh Với... trùng thu từ mào tinh Trong 66 bệnh nhân vô tinh thu TT từ mào tinh, có số lượng mẫu thu mật độ nên đếm 100 TT/mẫu đánh giá tiêu chí Tổng số TT đánh giá 6600 tinh trùng Biểu đồ Phân bố mật độ tinh