Nhóm 1- TH4- Báo cáo TVDL buổi 4

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN HỌC: THỰC VẬT - DƯỢC LIỆU BÀI 3: ĐỊNH TÍNH SAPONIN TRONG DƯỢC LIỆU VÀ XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ PHÁ HUYẾT CỦA QUẢ BỒ KẾT Sinh viên thực hiện: Nhóm - Ca chiều thứ Hà Nội, 2022 DANH SÁCH THÀNH VIÊN NHÓM I STT Họ tên Mssv Chu Thị Kim Anh 19100106 Cao Thị Hạnh 19100125 Ngô Thị Huế 19100136 Nguyễn Gia Long 19100156 Mai Nhật Nam 19100164 Nguyễn Đức Phú 19100174 Lưu Thu Phượng 19100176 Trần Thiện Tài 19100181 Lê Hồng Thanh 19100182 10 Ngô Thị Xuân 19100209 CHUẨN BỊ Dược liệu - Quả bồ kết - Máu lợn loại fibrin Dụng cụ: ống nghiệm, cân, pipet, Hóa chất: Dung dịch NaOH 0,1N; HCl 0,1N; đệm phosphat; NaCl đẳng trương Thông tin cần biết 4.1 Saponin - Saponin cịn gọi saponoside, nhóm Glycosyde gặp rộng rãi thực vật, động vật (Hải sâm, Cá sao) - Tính chất: + Tạo bột bền lắc với nước + Có tính phá huyết tạo phức với cholesteron hay dẫn chất 3-β-hydroxy steroid khác (ngoại trừ Sarsaparilloside lồi Smilax khơng có tính phá huyết tạo phức) + Đa số vị đắng (ngoại trừ Glycyrrhizin(cam thảo), Abrusoid(cam thảo dây), Osladin, polypodosid A&B (dương xỉ)) + Khối lượng phân tử lớn + Tan nước, cồn; tan aceton, ete hexan + Độc với cá hay động vật máu lạnh + Có tính kích ứng, gây hắt hơi, đỏ mắt 4.2 Đặc điểm thực vật bồ kết - - - Hệ rễ: Cọc, phân nhiều nhánh nhỏ Rễ sinh trưởng phát triển mạnh ăn sâu từ – m Phát triển mạnh môi trường đất ẩm, giàu dinh dưỡng Thân: Cây gỗ lớn, có chiều cao từ – m Thân thẳng có vỏ nhẵn gai to, cứng Phân nhánh nhiều, dài tù 10 – 25 cm Cành mảnh, hình trụ, khúc khuỷu, lúc đầu có lơng sau nhẵn có màu xám nhạt Lá: kép, mọc so le, hai lần lông chim, cuống chung dài 10 – 12 cm hay hơn, có lơng nhỏ có rãnh Lá chết – đơi mọc so le, hình thn, bóng có lơng mặt trên, nhạt nhẵn mặt dưới, đầu chét tròn, gốc lệch, mép có cưa nhỏ, kèm nhỏ, rụng sớm Bồ kết rụng vào mùa đông Lá non mọc lại vào cuối mùa xuân năm sau Hoa: Cụm hoa mọc thành chùm kẽ lá, dài 10 – 15cm, hoa màu trắng tụ họp – cành ngắn, dài hình ống, tràng 5, hoa đực có 10 nhị khơng có bầu, hoa lưỡng tính có nhị, bầu có nhiều lơng đựng 12 nỗn Mùa hoa từ tháng – dương lịch Quả: Bồ kết có đậu mỏng, dài 10 – 12 cm, rộng 1,5 – cm, thẳng cong Khi cịn tươi mặt ngồi có lớp phấn màu lam, chứa 10 – 12 hạt bao bọc lớp cơm màu vàng, chín màu vàng nâu, để lâu chuyển sang màu đen Mùa tháng – 10 dương lịch Hình 1: Hình ảnh thực vật Bồ Kết II STT Quan sát tượng tạo bọt NỘI DUNG THỰC HÀNH Định tính Saponin dược liệu Nội dung Kết ● Bản chất : Làm tăng sức căng bề mặt, tạo bọt nhiều Sau lắc phút bọt lắc với nước phản ứng Saponin lớn có nhiều, khơng bị tan đầu ưa nước đầu kị nước ● Cách tiến hành : ● Nguyên tắc: Dựa tượng tạo bọt saponin Phân biệt môi trường kiềm môi trường acid Saponin - Nếu cột bọt ống cao ngang bền sterolic sơ xác định dược liệu có saponin Saponin ● Quan sát thấy ống (NaOH) cột bọt cao ống (HCl) triterpenic dựa tượng tạo bọt triterpenoid - Nếu ống kiềm có cột bọt cao ống sơ xác định dược liệu chứa saponin steroid ● Bản chất: + Saponin sterolic chất có tính kiềm → Trong mơi trường acid sinh tương tác hố học: phần Saponin sterolic phản ứng với acid → Saponin bị → cột bọt tạo + Saponin triterpenoid chất trung tính Thêm kiềm acid không bị biến đổi Cột bọt tạo ● Cách tiến hành: => Kết luận: Dược liệu chứa saponin sterolic Xác định số phá huyết bồ kết - Chỉ số phá huyết (CSPH): số ml dung dịch đêm cần thiết để hòa tan 1g dược liệu chứa saponin để gây tượng phá huyết hoàn toàn loại mẫu chọn - Bản chất: Saponin tạo phức với cholesterol ester màng hồng cầu, gây tượng phá huyết - Cách tiến hành + B1: Chuẩn bị dung dịch đệm: Dung dịch NaCl đẳng trương + B2: Pha dung dịch máu bò 2% loại fibrin + B3: Pha dung dịch bồ kết 0,004% + B4: Lấy 20 ống nghiệm nhỏ 5ml, đánh số thứ tự từ đến 20 cho vào ống dung dịch theo bảng sau: STT Dung dịch đệm Dung dịch bồ kết 0,004% Dung dịch máu 2% 0,05 0,05 0,9 0,1 0,85 0,15 0,8 0,20 0,75 0,25 0,7 0,30 0,65 0,35 0,6 0,4 0,55 0,45 10 0,5 0,50 11 0,45 0,55 12 0,4 0,6 13 0,35 0,65 14 0,3 0,7 15 0,25 0,75 16 0,2 0,8 17 0,15 0,85 18 0,1 0,9 19 0,05 0,95 20 1,00 1,00 + B5: Trộn 20 ống nghiệm để yên 12-20 + B6: Quan sát tượng phá huyết tính tốn số phá huyết Cơng thức: CSPH = 2/CX Trong đó: + C: nồng độ dung dịch bỏ kết (0,004%) + X: số ml dung dịch bố kết cho vào ống nghiệm mà có phá huyết hoàn toàn → CSPH = 5000/X - Kết + Từ ống đến ống 12 ống nghiệm có lắng cạn đáy hồng cầu chưa tan hồn tồn (Hình 2) Hình + Từ ống 13 thấy có tan huyết hồn tồn, khơng cịn tủa (Hình 3), Dung dịch màu hồng trong, không thấy xác hồng cầu (những sợi tơ trắng) vẩn đục (Hình ) Hình 3,4: Hình ảnh ống 13 khơng cịn hồng cầu - Số ml dung dịch bồ kết cho vào ống nghiệm số 13: 0,65 ml ... 0,05 0,9 0,1 0,85 0,15 0,8 0,20 0,75 0,25 0,7 0,30 0,65 0,35 0,6 0 ,4 0,55 0 ,45 10 0,5 0,50 11 0 ,45 0,55 12 0 ,4 0,6 13 0,35 0,65 14 0,3 0,7 15 0,25 0,75 16 0,2 0,8 17 0,15 0,85 18 0,1 0,9 19 0,05... B3: Pha dung dịch bồ kết 0,0 04% + B4: Lấy 20 ống nghiệm nhỏ 5ml, đánh số thứ tự từ đến 20 cho vào ống dung dịch theo bảng sau: STT Dung dịch đệm Dung dịch bồ kết 0,0 04% Dung dịch máu 2% 0,05 0,05... SÁCH THÀNH VIÊN NHÓM I STT Họ tên Mssv Chu Thị Kim Anh 19100106 Cao Thị Hạnh 19100125 Ngô Thị Huế 19100136 Nguyễn Gia Long 19100156 Mai Nhật Nam 191001 64 Nguyễn Đức Phú 191001 74 Lưu Thu Phượng