Bài viết ''Khảo sát đặc điểm vi học, thành phần hóa học và hoạt tính gây độc trên một số dòng tế bào ung thư của thân rễ Sùng thảo - Rhizoma Stachydis affinis tiến hành phân tích đặc điểm hình thái học, khảo sát sơ bộ thành phần hóa học và thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư của thân rễ Sùng thảo. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Số 01, 57-66, 2022 KHẢO SÁT ĐẶC ĐIỂM VI HỌC, THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TRÊN MỘT SỐ DÒNG TẾ BÀO UNG THƢ CỦA THÂN RỄ SÙNG THẢO - RHIZOMA STACHYDIS AFFINIS Nguyễn Thanh Hoàng1, Nguyễn Thị Vy Phƣơng2, Đặng Thị Xuân Quyên2, Võ Văn Lẹo1, Nguyễn Viết Kình1, Võ Thị Bạch Huệ3, Mã Chí Thành1,* Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 41 Đinh Tiên Hoàng, Quận 1, Thành phố Hồ Chí Minh Cơng ty Cổ phần Dược phẩm Tipharco Đường số 3, Mỹ Tho, Tiền Giang Khoa Dược, Trường Đại học Lạc Hồng 10 Huỳnh Văn Nghệ, Biên Hịa, Đồng Nai * Tác giả chịu trách nhiệm chính: mcthanh@ump.edu.vn Ngày nhận bài: 24.11.2021, Ngày chấp nhận: 20.12.2021, Ngày đăng: 30.03.2022 TÓM TẮT: Thân rễ S ng th o Rhizom Stachydis affinis) d ng thực phẩm vị thuốc y h c cổ truyền nh m điều trị nhiễm trùng, c m lạnh viêm phổi Trong nghiên cứu này, tiến hành phân tích đặc điểm hình thái h c, kh o sát sơ thành phần hóa h c thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư thân rễ Sùng th o Đặc điểm vi phẫu dược liệu làm sáng tỏ, thơng tin góp phần tiêu chuẩn hố ngun liệu Sùng th o cho việc s n xuất dược phẩm an tồn có nguồn gốc tự nhiên Kết qu kh o sát sơ thành phần hóa cho thấy, thân rễ Sùng th o nh m hợp chất carotenoid, tinh dầu, triterpenoid tự do, coumarin, proanthocyanidin, polyphenol, polyuronic nồng độ 100 μg/mL, mẫu cao chiết có kh gây độc dịng tế bào ung thư phổi MDA-MB-231, ung thư g n Hep3B ung thư cổ tử cung Hela mức độ trung bình Kết qu nghiên cứu góp phần xác định dược liệu Sùng th o Việt Nam b ng đặc điểm hình thái vi h c, cung cấp thông tin quan tr ng thành phần dược chất hoạt tính kháng lại mơt số dịng tế bào ung thư Từ khóa: Sùng thảo; Rhizoma Stachys affinis; stachyose; độc tính tế bào INVESTIGATION OF MICROSCOPIC CHARACTERISTICS, PRELIMINARY CHEMICAL CONSTITUENTS AND CYTOTOXICITY ACTIVITY ON CANCER CELL LINES OF RHIZOMA STACHYDIS AFFINIS Nguyen Thanh Hoang1, Nguyen Thi Vy Phuong2, Dang Thi Xuan Quyen2, Vo Van Leo1, Nguyen Viet Kinh1, Vo Thi Bach Hue3, Ma Chi Thanh1,* Faculty of Pharmacy, University of Medicine and Pharmacy 41 Dinh Tien Hoang, District 1, Ho Chi Minh City 70000, Vietnam Tipharco Pharmaceutical Joint Stock Company Street 3, My Tho, Tien Giang 860000, Vietnam Faculty of Pharmacy, Lac Hong University 10 Huynh Van Nghe, Bien Hoa, Dong Nai 810000, Vietnam * Corresponding author: mcthanh@ump.edu.vn Received: November 24, 2021, Accepted: December 20, 2021, Published: March 30, 2022 ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 57 Số 01, 57-66, 2022 ABSTRACT: The rhizoma Stachydis affinis is used as a food as well as a medicinal herb in traditional medicine to treat infections, colds and pneumonia In this study, we carried out morphological analysis, preliminary survey of chemical composition and tested the cytotoxic activity of this rhizome The morphological characteristics had been clarified, and this information will contribute to the standardization of herbal ingredients for the production of safe pharmaceutical products of natural origin Preliminary investigation results showed that this rhizome contains carotenoid compounds, essential oils, triterpenoids, coumarins, proanthocyanidins, polyphenols, and polyuronics At a concentr tion of 100 μg/mL, the extr cts were c p ble of c using moder te toxicity to lung c ncer MDA-MB-231, liver cancer Hep3B and cervical cancer Hela cell lines The results of this study contribute to the correct identification of this rhizome in Vietnam by the morphology characteristics, and provide important information on the medicinal ingredients as well as the activity against some cancer cell lines Keywords: Sùng thảo; Rhizoma Stachydis affinis; morphology; cytotoxicity I ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Sùng th o (Stachys affinis Bunge, L mi ce e dược liệu giàu dinh dưỡng, v i nhiều hoạt tính sinh h c có lợi cho sức khỏe (Goren cộng sự, 2011; Rosa cộng sự, 2010) Thân rễ S ng th o Rhizom Stachydis affinis c ng c o chiết sử dụng y h c cổ truyền nh m điều trị chứng nhiễm trùng, c m lạnh, bệnh tim, bệnh lao viêm phổi (Alessandro cộng sự, 2016) Tuy nhiên, nghiên cứu thành phần hóa h c lồi Sùng th o trồng Việt N m theo phương pháp nuôi cấy mô hạn chế, Việt N m chư c nghiên cứu đặc điểm vi h c, thành phần hóa h c tác dụng sinh h c củ loài Do đ , việc kh o sát đặc điểm hình thái vi h c để giúp định danh, phân biệt nh m tránh nh m lẫn sử dụng kh o sát thành phần hoá h c góp phần làm rõ cơng dụng củ dược liệu Các kh o sát hoạt tính sinh h c nh m góp phần chứng minh tính an toàn củ dược liệu sử dụng Trong nghiên cứu trư c nhóm tác gi thành phần hoá h c củ dược liệu Sùng th o phân lập hợp chất stachyose, ethyl-α-galactopyranose, 8-O-acetyl harpagid h rp gid, đ st chyose xem chất đánh dấu củ dược liệu (Nguyễn Thanh Hoàng cộng sự, 2021) Nghiên cứu thực nh m xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho dược liệu Sùng th o kh o sát tính an tồn củ dược liệu sử dụng s n xuất s n phẩm có liên quan Trong nghiên cứu dược liệu Sùng th o tiến hành kh o sát chi tiết đặc điểm hình thái, vi phẫu bột dược liệu Sùng th o Thành phần hóa thực vật thân rễ Sùng th o c nh m hợp chất: carotenoid, tinh dầu, triterpenoid tự do, coumarin, proanthocyanidin, polyphenol, chất khử, hợp chất polyuronic Các phân đoạn cao chiết hợp chất stachyose, ethyl-α-g l ctopyr nose tiến hành thử độc tính tế bào dòng tế bào MDA-MB-231, Hel , Hep3B Các c o phân đoạn cao chiết (ở nồng độ 100 μg/mL hợp chất tinh khiết phân lập (ở nồng độ 100 μM thể độc tính mức độ trung bình dịng tế bào thử nghiệm II ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng Nguyên liệu d ng cho kh o sát hố h c thân rễ sấy khơ củ S ng th o Rhizom Stachydis affinis , khối lượng 700 g m Thân rễ khô s u đ x y thành bột thô 0,5 mm Nguyên liệu cho kh o sát vi h c thân rễ S ng th o tươi 50 g C dạng nguyên liệu Công ty Cổ phần Dược phẩm TIPH RCO cung cấp Tháng Tháng năm 2018, Hình 1) ĐẠI HỌC ĐƠNG Á 2022 58 Số 01, 57-66, 2022 (A) (B) Hình Thân rễ S ng th o tươi (A) sấy khô (B) 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Khảo hực vật học Quan sát cấu tử củ bột thân rễ khơ Stachys affinis dư i kính hiển vi Kh o sát cấu tạo vi h c thân rễ tươi S ng th o b ng phương pháp cắt nhuộm qu n sát dư i kính hiển vi 2.2.2 Phân ích hành phần hóa hực vậ Thực 25 g dược liệu, chiết kiệt hoạt chất v i dung môi c độ phân cực tăng dần (ether ethylic, cồn 95% nư c thu dịch chiết tương ứng Xác định nhóm hoạt chất dịch chiết b ng ph n ứng hoá h c đặc trưng 2.2.3 Nghiên cứu phương ph p chiế xuấ , phân lập inh chế hợp chấ Cao cồn 96o (Et9) cao cồn 60o (Et6) thân rễ sùng th o tách thành phân đoạn đơn gi n b ng cách d ng k thuật phân bố lỏng - lỏng v i dung môi hữu Phân lập hợp chất dược liệu b ng phương pháp sắc ký cột (SKC) SKC cổ điển, SKC Diaion HP20 Theo dõi trình tách phân đoạn b ng sắc ký l p mỏng (SKLM), phát b ng UV, thuốc thử vanilin sulfuric kiểm tr độ tinh khiết b ng hệ thống HPLC-ELSD Xác định cấu trúc hóa h c hợp chất phân lập dựa liệu phổ IR, MS phổ NMR chiều, chiều (1H, 13 C-CPD, DEPT; HSQC, HMBC, COSY, NOESY) 2.2.4 Thử nghiệm độc tính tế bào Ba cao chiết ET9, ET6, Et-CF c ng hợp chất st chyose ethyl g l ctose tiến hành thử độc tính dịng tế bào ung thư vú MD -MB-231, ung thư g n Hep3B ung thư cổ tử cung Hela (Mosmann, 1983) B mẫu c o chiết pha thành dung dịch gốc v i nồng độ 100 mg/mL DMSO Hợp chất tinh khiết pha thành dung dịch gốc v i nồng độ 100 mM DMSO, s u đ ph loãng thành nồng độ khác nh u sử dụng thử nghiệm Phương pháp MTT (3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) phương pháp so màu, đo độ gi m màu vàng MTT (Mosmann, 1983) MTT tham gia ph n ứng oxy hoá khử v i ty thể tế bào tạo thành formazan dạng tinh thể Có thể dùng số dung mơi hữu isoprop nol để vừa phá huỷ màng tế bào hoà tan tinh thể form z n, s u đ đo độ hấp thu quang dung dịch bư c sóng 570 nm III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát thực vật học 3.1.1 Đặc điểm dược liệu Bột thân rễ s ng th o khô c màu trắng ngà, mịn, m i thơm, vị ng t Qu n sát dư i kính hiển vi gồm c thành phần mơ t H nh ĐẠI HỌC ĐƠNG Á 2022 59 Số 01, 57-66, 2022 Bột dược liệu Tế bào lỗ khí Khối nhự Lơng tiết đ bào M nh biểu bì c lơng tiết Mạch mạng M nh biểu bì c tế bào tinh dầu Mạch vạch Mạch v ng Hình Đặc điểm bột cấu tử bột thân rễ S ng th o M nh tế bào biểu bì c lỗ khí M nh tế bào biểu bì c lơng tiết M nh biểu bì hình đ giác chứa tinh dầu Lông tiết chân đ bào, đầu đ bào, đầu lơng tiết c hình tr n, gồm tế bào M nh mạch vòng, mạch xoắn, M nh mạch mạng M nh mạch vạch Khối nhựa màu 3.1.2 Đặc điểm vi phẩu Mặt cắt ng ng thân rễ S ng th o c tiết diện gần tr n, cạnh lõm, có nhiều lơng tiết cạnh lõm L p biểu bì bên ngồi, l p tế bào, hình chữ nhật xếp nhau, mang l p cutin mỏng Hạ bì 1-2 l p tế bào hình chữ nhật, vách mỏng, kích thư c không Mô dày - l p, loại mô dày phiến Mô mềm vỏ đạo gồm nhiều tế bào tr n, để hở kho ng gian bào, có vách mỏng, kích thư c khơng đều, xếp lộn xộn Nội bì hình đ giác, to nhỏ khơng đều, c đai caspary rõ, trụ bì gồm ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 60 Số 01, 57-66, 2022 l p, tế bào hình đ giác, vách cellulose, kích thư c b ng 1/2 xếp xen kẽ tế bào nội bì Vịng tế bào mơ dày góc khơng liên tục, tập trung nhiều góc Bó libe gỗ nhiều phát triển góc Mỗi bó gồm: libe hợp thành bó, xếp lộn xộn Libe kho ng l p tế bào, hình chữ nhật xếp đồng tâm, xuyên tâm Tầng phát sinh libe gỗ không liên tục Gỗ mạch gỗ xếp rời rạc, lộn xộn Gỗ xếp Bó libe gỗ phần cạnh không phát triển, hợp thành bó nhỏ, đơi có libe khơng thấy gỗ Mô mềm tủy mô mềm đạo, mô mềm tủy chứa gi t tinh dầu (H nh 3, 4) (A) (B) Hình Đặc điểm vi phẫu tổng thể Lơng tiết đ bào Biểu bì Mơ mềm vỏ Nội bì đ i c sp ry chi tiết B thân rễ S ng th o Trụ bì B libe gỗ Mơ mềm tủy Hình Đặc điểm vi phẫu thân rễ s ng th o ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 61 Số 01, 57-66, 2022 Lông tiết đ bào Biểu bì Mơ mềm vỏ Libe Libe Gỗ Gỗ 3.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật Bột thân rễ S ng th o khô chiết v i dung môi c độ phân cực tăng dần: Ether ethylic, cồn 96 % nư c theo Sơ đồ Thân r ng o (25 g b t khô) Et2O (Soxhlet) d c li u (1) ch chi t Et2O (50 ml) Đ nh nh ch chi t c n (50 ml) Đ nh nh C n 96% (h i l u) d c li u (2) N d c( ch c li u (3), y) ch chi t n c (50 ml) Đ nh nh Sơ đồ Sơ đồ chuẩn bị dịch chiết Kết qu phân tích sơ thành phần hóa h c cho thấy thân rễ Sùng th o có chứa nhóm hợp chất carotenoid, tinh dầu, triterpenoid tự do, coumarin, proanthocyanidin, polyphenol, chất khử, hợp chất polyuronic Ngồi ra, thành phần hợp chất alkaloid tìm thấy dịch chiết cồn (Bảng 1) Bảng Kết qu định tính sơ thành phần hóa h c thân rễ Sùng th o Nhóm hợp chất Chất béo Carotenoid Tinh dầu Triterpenoid / Steroid Alkaloid Coumarin Thuốc thử / Cách thực Nhỏ dd lên giấy Carr-Price Bốc t i cắn LiebermannBurchard Bertrand Bouchardat (Wagner) Valse Mayer Hager Dragendorff Antraglycosid Phát quang kiềm NaOH 10% Flavonoid Bột Mg/HCl đđ Phản ứng dƣơng tính C vết mờ Xanh chuyển sansg đỏ C m i thơm V ng sậm, l p có màu xanh lục Kết tủ trắng Kết tủ nâu đỏ Kết tủ trắng Kết tủ vàng Kết tủ vàng c m, đỏ cam Phát quang mạnh DD kiềm có màu hồng t i đỏ DD có màu hồng t i đỏ ết uả định tính t ên dịch chiết Ether Cồn Nƣớc + ++ +++ - ết uả định tính chung Khơng Có Có Có + - ++ + - - + - - + +++ - Có - - - Khơng - - - Khơng Nghi ngờ có ĐẠI HỌC ĐƠNG Á 2022 62 Số 01, 57-66, 2022 Glycosid tim Anthocyanosid Proanthocyanidin Tannin TT vòng lacton TT Xanthydrol HCl KOH HCl / to DD FeCl3 DD gelatin muối TT Liebermann Saponin Lắc mạnh dd nư c Acid hữu Na2CO3 Chất khử TT Fehling Pha loãng v i cồn 96% Hợp chất polyuronic Pha lỗng v i aceton * Khơng qu n sát dịch chiết c Ghi chú: (- Khơng c , + C ít, +++ Tím Đỏ mận Đỏ Xanh Đỏ Xanh rêu hay xanh đen polyphenol Tủa trắng (Tannin) C v ng nhẫn màu nâu, đỏ đến tím Tạo b t bền +++ - * +++ +++ - Không - - - Không - +++ - Khơng Có Có Khơng - - - Sủi b t Tủ đỏ gạch ++++ Tủa trắng-vàng ++++ nâu Tủa trắng-vàng ++++ nâu pro nthocy nidin gặp HCl/to chuyển s ng đỏ C nhiều Khơng Có Có 3.3 Nghiên cứu phƣơng pháp chiết xuất, phân lập tinh chế hợp chất Các q trình chiết xuất c o phân đoạn phân lập hợp chất tinh khiết thực trình bày nghiên cứu trư c Nguyễn Thanh Hoàng cộng (Nguyễn T H cộng sự, 2021) Tóm tắt trình phân tách phân đoạn s u: từ 500 g bột thân rễ Sùng th o chiết n ng v i 10 lít EtOH 96% 15 lít EtOH 60% thu dịch cồn 96% dịch cồn 60% Cô quay thu hồi dung môi thu c o cồn 96% Et9; 35,4 g c o cồn 60% Et6; 358 g Et9 lắc phân bố v i CHCl3, cô qu y thu cao CHCl3 (Et-CF; 5,6 g C o Et6 hòa v i lượng tối thiểu nư c, kết tủa b ng cồn 96% thu phần t n Et6N phần tủ , giàu polysaccharid (Et6S; 200 g) Qua trình sắc ký l p mỏng so sánh v i stachyose chuẩn (Sigm , US , kết qu cho thấy thành phần củ dược liệu Sùng th o oligos cch rid Phân tích đặc điểm hóa lý, so sánh giá trị NMR hoạt chất cho thấy, hoạt chất chủ yếu Sta-1 (stachyose) (Bảng 2) Đây chất đánh dấu (biomarker) Sùng th o phục vụ cho việc kiểm nghiệm tiêu chuẩn hóa nguyên liệu Sùng th o Độ tinh khiết hợp chất st chyose tiến hành xác định b ng HPLC-ELSD Kết qu cho thấy hợp chất st chyose c độ tinh khiết tính theo diện tích đỉnh 100% (Hình 5) (A) ĐẠI HỌC ĐƠNG Á 2022 63 Số 01, 57-66, 2022 (B) Hình Độ tinh khiết củ hợp chất Sta-1 kiểm tr b ng hệ thống HPLC-ELSD (A), phổ khối MS củ hợp chất (B) Bảng So sánh liệu phổ 1H 13C NMR củ Sta-1 Stachyose Đường C vị trí Sta-1 (D2O, thực đo *δc δH, m, (J /Hz) **δc ***δc δH, m, (J /Hz) 4,99 d (3,0) 3,81 m 3,82 m 3,98 m 3,98 m 3,73 m 4,99 d (4,0) 3,81 m 3,89 m 4,02 m 4.14 dd (7,0; 5,0) 3,71 m 3,84 m 5.42 d (3,5) 3,55 dd (10,0; 3,5) 3,74 m 3,51 t (9,5) 4,04 m 3,66 m 4,02 m 3,66 m − 4.22 d (8.5) 4,04 m 3,87 dd (7,0; 3,5) 7,76 m 3,81 m 100.6 71.0 72.2 72.0 73.7 63.9 101.1 71.2 72.1 72.1 71.5 69.2 97.9 68.3 69.5 69.3 70.0 61.2 98.4 68.5 69.4 69.4 68.8 66.5 94.8 73.7 75.5 72.2 74.0 68.6 92.1 71.0 72.8 69.5 71.3 65.9 64.2 106.5 79.1 76.8 84.1 65.2 61.5 103.8 76.4 74.1 81.4 62.5 4.99 d (4.0) 3.81 d (10.0) 3.84 d (3.0) 3.98 d (1.0) 4.00 m (7.0) 3.74 d (13.0, 2H) 4.99 d (4.0) 3.83 d (10.0) 3.91 d (3.0) 4.04 d (1.0) 4.14 dd (8; 5) 3.72 d (11.0) 3.87 d (11.0) 5.42 d (4.0) 3.57 d (10.0) 3.75 d (9.0) 3.53 d (10.0) 4.06 dd (9; 4) 3.67 d (13.0) 4.05 d (13.0) 3.67 m − 4.22 d (9.0) 4.06 d (9.0) 3.89 dd (7.0; 4.0) 3.77 d (12.0) 3.83 d (12.0) 19 20 21 22 23 24 13 14 15 16 17 18 6 98.1 68.3 69.6 69.3 71.0 61.2 98.4 68.5 69.4 69.4 68.8 66.5 αD-Glc.p 10 11 12 92.1 71.0 72.8 69.6 71.3 65.9 βD-Fru.f 6 61.5 103.8 76.5 74.1 81.4 62.5 αD-Gal.p (terminal) αD-Gal.p (internal) Stachyose (D2O) *δC củ Sta-1 (ppm, thực đo D2O, 125 MHz), J = Hz, d ng chuẩn TMS **δC củ St chyose ppm, đo D2O, 100 MHz , chuẩn TSP (MyIntyre, D D cộng sự, 1989) ***δC củ St chyose hiệu chỉnh theo chuẩn TMS ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 64 Số 01, 57-66, 2022 3.4 Đánh giá hoạt tính độc tế b Ba cao chiết ET9, ET6, Et-CF c ng hợp chất stachyose (MyIntyre cộng sự, 1989) ethyl galactose (Yang cộng sự, 2013 tiến hành sàng l c hoạt tính gây độc tế bào ung thư vú MDA-MB-231, ung thư g n Hep3B ung thư cổ tử cung Hela Kết qu trình bày Bảng Hình Bảng Kết qu thử độc tính tế bào củ mẫu Tỷ lệ sống sót tế bào (CV%) MDA-MB-231 Hep3B % TB % TB Sai số Sai số sống sống 100.0 1.15 100.0 1.34 72.93 0.37 64.85 1.50 64.16 1.09 59.11 0.65 78.91 1.34 95.35 0.74 69.66 0.29 60.23 0.59 69.94 1.40 81.44 1.78 55.13 0.19 75.98 0.81 64.61 0.50 70.51 1.49 56.76 1.66 65.07 0.62 85.70 0.93 77.97 0.44 67.30 1.27 59.03 1.15 69.56 1.27 57.06 1.35 37.65 1.21 18.61 0.56 Nồng độ Mẫu Control (-) 30 Et9 (µg/mL) 100 30 Et6 (µg/mL) 100 30 Et-CF (µg/mL) 100 30 Stachyose (µM) 100 30 Ethyl galactose (µM) 100 0.1 Camptothecin* (µM) Hela % TB sống 100.0 64.85 59.11 95.35 60.23 81.44 75.98 70.51 65.07 77.97 59.03 67.68 26.74 Sai số 1.36 1.50 0.65 0.74 0.59 1.78 0.81 1.49 0.62 0.44 1.15 2.88 2.16 *C mptothecin: sử dụng làm chất đối chứng Hep3B MDA-MB-231 100 Cell viability (%) 100 50 30 10 30 10 Et6 30 10 30 10 Et9 camthothecin ethyl galactose EtCF Stachyose C camthothecin ethyl galactose EtCF Stachyose camthothecin ethyl galactose Stachyose C EtCF 30 10 30 10 Et6 30 10 30 10 Et9 30 10 30 10 0 C 30 10 Et6 30 10 30 10 Et9 30 10 30 10 0 50 on tr ol Cell viability (%) 50 on tr ol Cell viability (%) 100 on tr ol Hela Hình Kết qu thử độc tính dòng tế bào MDA-MB-231, Hep3B, Hela Kết qu từ Bảng Hình cho thấy, nồng độ 100 μg/mL, mẫu cao chiết Et9, Et6, EtCF hai hợp chất tinh khiết stachyose, ethyl galactose có kh gây độc tế bào ung thư phổi MDA-MB-231, ung thư g n Hep3B, ung thư cổ tử cung Hela mức độ trung bình nồng độ 30 μg/mL, c o chiết Et-CF hoạt tính ức chế thể tế bào ung thư phổi MDA-MB-231 Cao chiết Et9 cho thấy hoạt tính ức chế c dịng tế bào ung thư g n Hep3B, ung thư cổ tử cung Hela ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 65 Số 01, 57-66, 2022 mức trung bình nồng độ 30 μM, hợp chất tinh khiết hoạt tính gây độc c dịng tế bào ung thư g n Hep3B ung thư cổ tử cung (Hela) IV KẾT LUẬN Từ dược liệu thân rễ Sùng th o tươi khô kh o sát chi tiết đặc điểm hình thái, vi phẫu cấu tử bột dược liệu Sùng th o Đã xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm cho dược liệu Sùng th o dự đặc điểm thực vật h c Qua kh o sát sơ thành phần hóa thực vật cho thấy thân rễ Sùng th o (Rhizoma Stachydis affinis c chủ yếu nhóm hợp chất: carotenoid, tinh dầu, triterpenoid tự do, coumarin, proanthocyanidin, polyphenol, chất khử, hợp chất polyuronic Tất c cao chiết chất tinh khiết thể độc tính mức độ trung bình dịng tế bào thử nghiệm nồng độ thử nghiệm 100 μg/mL đối v i cao chiết 100 μM đối v i chất tinh khiết nồng độ thấp hầu hết cao chiết chất tinh khiết khơng thể độc tính tế bào Điều cho thấy dược liệu Sùng th o có tính an tồn sử dụng làm ngun liệu dược cho chế phẩm có liên quan TÀI LIỆU THAM KHẢO Alessandro, V., Claudio, F., Diana, C., Armandodoriano, B., Mauro, S., Kevin, C., Dennis, F., Stefano, F., Filippo, M., Anna, R.L., & Giuseppe, C (2016) Polar constituents, protection against reactive oxygen species, and nutritional value of Chinese artichoke (Stachys affinis Bunge) Food Chemistry, 221, 473-481 Goren, C., Piozzi, F., kỗicek, E., Klc, T., C rkc, S., Mozioglu, E., & Setzer, W.N (2011) Essential oil composition of 24 Stachys species and their biological activities Phytochemistry Letters, 4, 448-453 Mosmann, T (1983) Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays Journal of Immunological Methods, 65 (1-2), 55-63 MyIntyre, D D., & Vogel, H J J J o N P (1989) Complete assignment of the 1H-NMR spectrum of stachyose by two-dimensional NMR spectroscopy Journal of Natural Products, 52(5), 1008-1014 Nguyen, T H., Vo, V L., Nguyen, V K., Vo, T B H, Pham, Q B., Nguyen, T V P., & Ma, C T (2021) Chemical constituents from chinese artichoke rhizome (Stachys affinis Bunge) and their anti-microbial activities Journal of Medicinal Materials, 26 (1-2), 15-19 Rosa, T., Lorenzo, P., & Francesco, M (2010) Phytochemical and biological studies of Stachys species in relation to chemotaxonomy: A review Phytochemistry, 102, 7-39 Yang, S.J., Liu, M H., Liang, N., Xiang, H M., & Yang, S (2013) Chemical constituents of Cyrtomium fortumei (J.) Smith Natural Product Research, 27 (21), 2066-2068 ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 66 ... hoạt tính gây độc tế bào ung thư vú MDA-MB-231, ung thư g n Hep3B ung thư cổ tử cung Hela Kết qu trình bày Bảng Hình Bảng Kết qu thử độc tính tế bào củ mẫu Tỷ lệ sống sót tế bào (CV%) MDA-MB-231... có kh gây độc tế bào ung thư phổi MDA-MB-231, ung thư g n Hep3B, ung thư cổ tử cung Hela mức độ trung bình nồng độ 30 μg/mL, c o chiết Et-CF hoạt tính ức chế thể tế bào ung thư phổi MDA-MB-231... hoạt tính ức chế c dòng tế bào ung thư g n Hep3B, ung thư cổ tử cung Hela ĐẠI HỌC ĐÔNG Á 2022 65 Số 01, 5 7-6 6, 2022 mức trung bình nồng độ 30 μM, hợp chất tinh khiết khơng thể hoạt tính gây độc