NGHIÊN cứu TÍNH đa DẠNG NGUỒN cây THUỐC đƣợc sử DỤNG TRONG CỘNG ĐỒNG các dân tộc ở TỈNH THÁI NGUYÊN NHẰM bảo tồn và PHÁT TRIỂN bền VỮNG

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN LÊ THỊ THANH HƢƠNG NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG NGUỒN CÂY THUỐC ĐƢỢC SỬ DỤNG TRONG CỘNG ĐỒNG CÁC DÂN TỘC Ở TỈNH THÁI NGUYÊN NHẰM BẢO TỒN VÀ PHÁT TRIỂN BỀN VỮNG Chuyên ngành: Thực vật học Mã số: 62420111 DỰ THẢO TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI – 2015 Cơng trình hồn thành tại: Bộ mơn Thực vật, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Trung Thành GS.TSKH Nguyễn Nghĩa Thìn Phản biện: Phản biện: Phản biện: Luận án bảo vệ trước Hội đồng cấp Đại học Quốc gia chấm luận án tiến sĩ họp vào hồi ngày tháng năm 20 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Trung tâm Thông tin - Thư viện, Đại học Quốc gia Hà Nội MỞ ĐẦU Việt Nam nằm vành đai khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng ẩm châu Á, đánh giá nước đứng thứ 16 giới phong phú đa dạng sinh vật Hệ thực vật Việt Nam biết đến đa dạng phong phú Theo ghi nhận Phạm Hoàng Hộ (1999) có khoảng 10.500 lồi thực vật bậc cao có mạch dự đốn có đến 12.000 lồi; đó, số loài dùng làm thuốc chiếm khoảng 36% Theo kết điều tra Viện Dược liệu, Bộ Y tế xác định Việt Nam có 3.948 lồi thuốc Võ Văn Chi (2012) thống kê Việt Nam có gần 4.700 lồi thực vật làm thuốc Đồng thời, Việt Nam Quốc gia đa dạng văn hóa với 54 dân tộc anh em sinh sống khắp lãnh thổ Mỗi dân tộc vùng miền khác lại có tri thức khác cách sử dụng cỏ để phục vụ sống họ Với mức độ đa dạng hệ thực vật, văn hóa vậy, kế thừa kho tàng tài nguyên thuốc quý giá dân tộc cơng tác chăm sóc sức khỏe cộng đồng phát triển kinh tế Việt Nam Quốc gia có 3/4 diện tích rừng, nơi có đa dạng nguồn tài nguyên thuốc nơi cư trú 54 dân tộc mà phần lớn dân tộc thiểu số với khoảng 24 triệu người, chiếm 1/3 dân số Quốc gia Chính đa dạng tộc người với khác biệt điều kiện thổ nhưỡng, khí hậu, phong tục tập qn, văn hóa cộng đồng dân tộc dẫn đến đa dạng kinh nghiệm gia truyền việc chữa bệnh cách sử dụng cỏ xung quanh làm thuốc chữa bệnh Việc sử dụng kinh nghiệm dân gian nghiên cứu thực vật học dân tộc Việt Nam nói chung dân tộc thiểu số nói riêng cần thiết để góp phần phát triển kinh tế đồng bào dân tộc Tỉnh Thái Nguyên, trung tâm trị, kinh tế vùng trung du miền núi Đông Bắc, cửa ngõ giao lưu kinh tế xã hội vùng trung du miền núi với vùng đồng Bắc Bộ Đồng thời, Thái Nguyên nơi có hệ sinh thái đa dạng có nhiều đồng bào dân tộc thiểu số sinh sống như: Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay, Dao Từ lâu đời, đồng bào dân tộc Thái Nguyên có truyền thống chữa bệnh thuốc, dân tộc lại có kinh nghiệm riêng, đặc trưng cho dân tộc Do đó, kho tàng tri thức sử dụng thuốc đồng bào dân tộc nơi phong phú Nhưng tri thức địa thuốc dân tộc chưa hệ thống cách đầy đủ, tồn diện, chưa có nghiên cứu tổng thể nguồn tài nguyên thuốc đồng bào dân tộc địa bàn tồn tỉnh Chính vậy, chúng tơi lựa chọn đề tài luận án:“Nghiên cứu tính đa dạng nguồn thuốc sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên nhằm bảo tồn phát triển bền vững” tiến hành thực với mục tiêu lớn sau: Đánh giá đa dạng nguồn thuốc sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên đề xuất giải pháp bảo tồn, phát triển bền vững Kiểm chứng giá trị thực tiễn khả ức chế tế bào ung thư dày từ dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) Những điểm đóng góp luận án: - Lần đưa tư liệu tương đối đầy đủ nguồn thuốc tri thức sử dụng thuốc đồng bào dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên - Xây dựng sở liệu loài thuốc cần bảo tồn tỉnh Thái Nguyên - Bổ sung thêm dẫn liệu khả điều trị ung thư dày lồi Lá khơi (Ardisia gigantifolia Stapf.) Nội dung luận án chia thành phần chương sau: Mở đầu (2 trang), Chương Tổng quan tài liệu (34 trang), Chương Nội dung, đối tượng phương pháp nghiên cứu (12 trang), Chương Điều kiện tự nhiên xã hội khu vực nghiên cứu (11 trang), Chương Kết nghiên cứu thảo luận (90 trang), Kết luận Kiến nghị (2 trang), Danh mục cơng trình khoa học tác giả liên quan đến luận án (1 trang), Tài liệu tham khảo (18 trang), Phụ lục (104 trang) CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tài nguyên thuốc giới 1.1.1 Lịch sử nghiên cứu sử dụng tài nguyên thuốc giới Các kinh nghiệm dân gian sử dụng thuốc chữa bệnh nghiên cứu mức độ khác tùy thuộc vào phát triển châu lục, quốc gia dân tộc Hầu hết quốc gia biên soạn chuyên khảo thuốc quy mơ tồn quốc vùng lãnh thổ Nhiều cơng trình nghiên cứu thuốc nước sử dụng rộng rãi có giá trị khoa học thực tiễn lớn 1.1.2 Tình hình nghiên cứu thuốc dân tộc giới Những kiến thức truyền thống thuốc kinh nghiệm địa việc sử dụng thuốc khơng góp phần quan trọng công tác bảo tồn giá trị văn hóa đa dạng sinh học mà cịn mở triển vọng cho việc phát triển thuốc Vì vậy, việc nghiên cứu ứng dụng kiến thức địa cỏ làm thuốc cộng đồng dân tộc mang lại tương lai đầy hứa hẹn cho việc chăm sóc sức khỏe cộng đồng 1.2 Tài nguyên thuốc Việt Nam 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu sử dụng tài nguyên thuốc Việt Nam Việt Nam có y học cổ truyền đa dạng, đặc sắc với bề dày lịch sử hàng nghìn năm từ hình thành nên y học dân tộc khơng ngừng phát triển qua thời kỳ lịch sử Trong đó, nhiều thuốc, thuốc áp dụng chữa bệnh dân gian có hiệu cao Các kinh nghiệm dân gian quý báu dần đúc kết thành sách có giá trị lưu truyền rộng rãi nhân dân 1.2.2 Tình hình nghiên cứu thuốc dân tộc Việt Nam Nghiên cứu thuốc dân tộc khơng góp phần sử dụng bền vững nguồn tài nguyên thuốc đất nước, làm phong phú thêm tri thức sử dụng cỏ làm thuốc chữa bệnh dân tộc mà sở để sản xuất loại dược phẩm để điều trị bệnh hiểm nghèo Đây thực hướng nghiên cứu có triển vọng lớn tương lai Hiện nay, nhiều loài thuốc quý phân bố chủ yếu miền núi, có nguy bị tàn phá dẫn đến tuyệt chủng lạm dụng khai thác q nhiều Vì cần phải có biện pháp tiến hành điều tra, tư liệu hoá thực trạng sử dụng thuốc dân tộc tri thức địa cỏ làm thuốc để xây dựng giải pháp quản lý sử dụng hiệu nhằm góp phần giữ gìn, bảo tồn sắc văn hóa cộng đồng dân tộc Việt Nam 1.2.3 Tình hình nghiên cứu thuốc tỉnh Thái Nguyên Thái Nguyên tỉnh có nhiều đồng bào dân tộc sinh sống với kinh nghiệm dân gian độc đáo việc sử dụng cỏ hoang dại để làm thuốc chữa bệnh Tuy nhiên, nghiên cứu thuốc Thái Ngun cịn ít, chưa sâu tìm hiểu cách đầy đủ hệ thống vốn tri thức địa cộng đồng dân tộc sinh sống tỉnh Việc tiến hành điều tra, nghiên cứu tổng thể nguồn thuốc phạm vi tồn tỉnh góp phần bổ sung tư liệu quý vào kho tàng y học cổ truyền Việt Nam giới nhằm phục vụ công tác bảo tồn nghiên cứu khoa học 1.3 Bảo tồn tài nguyên thuốc 1.3.1 Bảo tồn tài nguyên thuốc giới Để phục vụ cho mục đích chăm sóc bảo vệ sức khỏe người, cho phát triển xã hội để chống lại bệnh nan y cần thiết phải kết hợp Đông - Tây y, y học đại với y học cổ truyền dân tộc vấn đề cấp thiết Chính từ kinh nghiệm y học cổ truyền giúp cho nhân loại khám phá loại thuốc có ích tương lai Cho nên, việc khai thác kết hợp với bảo tồn loài thuốc điều quan trọng Các nước giới hướng thực chương trình Quốc gia kết hợp sử dụng, bảo tồn phát triển bền vững thuốc 1.3.2 Bảo tồn tài nguyên thuốc Việt Nam Hình thức bảo tồn tri thức sử dụng thuốc thực cách điều tra, thu thập tư liệu hóa vốn tri thức địa sử dụng thuốc nhóm cộng đồng dân tộc Việt Nam Khuyến khích sử dụng bền vững, an tồn, hiệu cộng đồng thông qua hoạt động đa dạng đưa vào giáo dục trường phổ thông, thêm nội dung y học dân gian trường đại học y dược, xuất sách thuốc y học dân tộc Việt Nam, 1.3.3 Công nghệ GIS ứng dụng nghiên cứu bảo tồn thuốc Nhìn chung GIS bắt đầu ứng dụng nhiều bảo tồn đa dạng sinh học, nhiên để ứng dụng vào việc quản lý liệu loài, đồ mật độ phân bố lồi,… cịn hạn chế Trong cơng nghệ thích hợp có hiệu để giám sát lồi tổ chức quản lý bảo tồn Chính cần tích cực ứng dụng cơng nghệ đại giúp cho việc bảo tồn loài cách hiệu nhất, đặc biệt loài quý có nguy bị tuyệt chủng 1.4 Vai trị thuốc dân tộc nghiên cứu thuốc kháng ung thƣ Cùng với công tác điều tra, thống kê lồi có tác dụng làm thuốc, nhà khoa học cịn sâu tìm hiểu, nghiên cứu chế hợp chất hóa học cỏ có tác dụng chữa bệnh Việc nghiên cứu chiết xuất chất có hoạt tính dược học từ thực vật trở thành trọng điểm y dược học đại nhiều quốc gia giới Thực vật học dân tộc đóng vai trị quan trọng việc chăm sóc sức khỏe cho người dân Giá trị y học ghi nhận qua hàng ngàn đời tri thức lưu giữ ngày Trong số nhiều bệnh điều trị cỏ theo phương pháp truyền thống có bệnh hiểm hiểm nghèo ung thư Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng, vật liệu thời gian nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Là lồi thực vật bậc cao có mạch dùng làm thuốc vốn tri thức địa việc dùng thuốc số cộng đồng dân tộc thiểu số tỉnh Thái Nguyên gồm: Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao 2.1.2 Vật liệu nghiên cứu 2.1.2.1 Mẫu tiêu Vật liệu nghiên cứu mẫu tiêu tươi khô loài thuốc thu thập trình nghiên cứu Hiện có khoảng 1.000 tiêu thuộc khoảng 800 số hiệu lưu trữ phòng thí nghiệm Sinh học, trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Ngun Ngồi ra, vật liệu nghiên cứu cịn bao gồm tài liệu, hình ảnh, hình vẽ liên quan đến thuốc có Việt Nam lưu giữ thư viện, phòng tiêu bản, bảo tàng thực vật, website nước 2.1.2.2 Mẫu vật dịng tế bào ung thư, mơi trường nuôi cấy sinh phẩm Mẫu vật: mẫu Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) thu thập tỉnh Thái Nguyên PGS TS Nguyễn Tập (Viện Dược liệu, Bộ Y tế) định danh Sau đó, mẫu cắt nhỏ, sấy khô 500C 72 đóng gói hút chân khơng chuyển đến phịng thí nghiệm INSERM U853 Đại học Bordeaux, Pháp 2.1.3 Trang thiết bị nghiên cứu Bao tải dứa, túi nilon, giấy báo, etyket, kéo cắt cây, bút chữ A, dây đay, dây dứa, cồn, sổ ghi chép, tủ sấy mẫu, máy ảnh, máy định vị Garmin GPS V – 37087960 Hệ thống máy móc dùng phân tích thực nghiệm: Kính hiển vi soi ngược Olympus; Kính hiển vi huỳnh quang ZOE; Máy đo quang phổ SPECTROstar Nano; Hệ thống phân tích dịng tế bào Flow cytometry; Tủ ni cấy tế bào CO2; Box ni cấy an tồn sinh học cấp 2.1.4 Địa điểm thời gian điều tra nghiên cứu Công tác điều tra tiến hành 25 xã thuộc huyện (Định Hóa, Phú Lương, Đồng Hỷ, Võ Nhai, Đại Từ, Phổ Yên, Phú Bình) tỉnh Thái Nguyên, nơi cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao cư trú Các nghiên cứu thực địa nghiên cứu Bảo tàng Thực vật học, khoa Sinh học, trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội phịng thí nghiệm Sinh học, khoa Khoa học Sự sống, trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên tiến hành từ tháng năm 2011 đến tháng năm 2013 Nghiên cứu thực nghiệm tiến hành phịng thí nghiệm Helicobacter Ung thư – INSERM U853 thuộc Viện Y học Quốc gia, Đại học Bordeaux, Pháp từ tháng năm 2013 đến tháng năm 2014 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Điều tra thuốc cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay, Dao tỉnh Thái Nguyên - Điều tra thu thập thuốc, với kinh nghiệm sử dụng theo cách truyền thống cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao số vùng tỉnh Thái Nguyên - Kết hợp trình điều tra khảo sát trên, tiến hành thu thập thêm thông tin phong tục tập qn, tín ngưỡng, văn hố, phân bố dân cư số thơng tin khác có liên quan đến vốn tri thức địa thuốc cộng đồng dân tộc địa phương - Bước đầu điều tra thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên 2.2.2 Phân tích, tổng hợp, đánh giá phong phú nguồn thuốc ghi nhận tỉnh Thái Nguyên - Xác định tên khoa học xây dựng Danh lục thuốc tỉnh Thái Nguyên, Danh lục thuốc có tiềm khai thác sử dụng phổ biến cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Danh lục loài thuốc thuộc diện bảo tồn Việt Nam ghi nhận được, có tỉnh Thái Nguyên - Phân tích, đánh giá tính đa dạng nguồn thuốc sử dụng cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên - Phân tích phân bố tình hình sử dụng thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên 2.2.3 Vốn tri thức địa việc sử dụng thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên - Đánh giá chung phong phú vốn tri thức địa cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên - Tìm hiểu vốn tri thức địa với phong tục tập qn, tín ngưỡng, văn hố, phân bố dân cư dân tộc Thái Nguyên - Ảnh hưởng giao thoa dân tộc đến vốn tri thức địa việc dùng cỏ làm thuốc cộng đồng dân tộc 2.2.4 Kiểm chứng sở khoa học khả kháng tế bào ung thư dày Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) Đánh giá khả ức chế dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia) đến: (1) Sự phân chia tế bào; (2) Q trình apoptosis; (3) Sự điều hịa chu kỳ tế bào (4) Các đặc tính tế bào gốc ung thư dày 2.2.5 Vấn đề bảo tồn thuốc khu vực nghiên cứu - Vấn đề xói mịn, mai vốn tri thức địa việc dùng cỏ làm thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh - Vấn đề bảo tồn thuốc có nguy bị tuyệt chủng trạng chúng 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp điều tra cộng đồng Điều tra nghiên cứu tri thức địa thuốc thuốc tỉnh Thái Nguyên tiến hành theo phương pháp nghiên cứu thực vật dân tộc học [Gary J Martin, 2002] 2.3.2 Phương pháp thu mẫu xử lý mẫu thực địa Sử dụng phương pháp thu mẫu thực địa theo Nguyễn Nghĩa Thìn (1997, 2007): - Phương pháp thu mẫu: Mẫu vật thu hái theo danh lục vấn theo dẫn thầy thuốc địa Các mẫu thu có phận dinh dưỡng phận sinh sản; trường hợp mẫu thu không đủ đặc điểm phân loại (do khơng vào mùa hoa, quả) tiến hành thu thay mẫu đợt thu mẫu Mỗi mẫu gắn nhãn (etyket) ghi số hiệu mẫu, địa điểm nơi lấy, đặc điểm quan trọng: gỗ hay dây leo; màu sắc lá, hoa, quả; mùi vị đặc trưng (nếu có); có nhựa mủ hay khơng; mơi trường sống - Cách xử lý mẫu: Mẫu vật xử lý sau đợt thu mẫu, ép tạm thời giấy báo, buộc chặt, cho vào túi nilon tẩm cồn 70% - Chụp ảnh: sử dụng máy ảnh để ghi lại hình ảnh lồi thuốc, cách sơ chế, sử dụng hoạt động tập thể trình nghiên cứu (Phụ lục Phụ lục 7) 2.3.3 Phương pháp xử lý mẫu phịng thí nghiệm Sử dụng phương pháp xử lý mẫu phịng thí nghiệm theo Nguyễn Nghĩa Thìn (2007): - Ép mẫu: Mẫu ép phẳng tờ báo gập làm bốn, đảm bảo phiến duỗi, không bị quăn; mẫu có sấp, ngửa để quan sát dễ dàng hai mặt mà khơng phải lật mẫu Đối với hoa dùng mảnh báo nhỏ gói riêng; cắt thành lát ngang lắt dọc để tiện cho việc phân tích, ép sấy mẫu Sau xếp mẫu thành chồng dùng ép gỗ ép chặt mẫu bó lại - Sấy mẫu: Sau ép mẫu tiến hành sấy ngay, mẫu sấy tủ sấy điều kiện nhiệt độ 60 – 800C, khoảng thời gian từ – ngày tùy thuộc vào lượng mẫu 2.3.4 Phương pháp xác định tên khoa học Xác định tên khoa học thuốc sử dụng phương pháp so sánh hình thái truyền thống kết hợp với kinh nghiệm chuyên gia số tài liệu chun ngành như: Thực vật chí Đơng Dương (Flore générale de l'Indo-Chine); Bộ Thực vật chí Việt Nam (The Flora of Vietnam); Cây cỏ Việt Nam;… Kiểm tra tên khoa học: Khi có đầy đủ tên lồi, tiến hành kiểm tra lại tên khoa học để đảm bảo tính hệ thống, tránh sai sót Điều chỉnh tên họ, tên chi tên loài theo “Danh lục loài thực vật Việt Nam” [Trung tâm Nghiên cứu Tài nguyên Môi trường, Đại học Quốc gia Hà Nội, Tập I – 2001], [Nguyễn Tiến Bân (chủ biên), Tập II – 2003], [Nguyễn Tiến Bân (chủ biên), Tập III – 2005] Tiến hành lập Danh lục thuốc số dân tộc tỉnh Thái Nguyên, bao gồm thông tin: Tên khoa học, tên phổ thông, tên dân tộc, số hiệu mẫu, dạng cây, phận sử dụng, công dụng chữa bệnh 2.3.5 Phương pháp trình bày bảo quản mẫu Sử dụng phương pháp trình bày mẫu bảo quản mẫu theo Nguyễn Nghĩa Thìn (2007) Các tiêu mẫu khơ thuốc trình bày khổ giấy Duplex khổ 28 x 42 cm, dùng để khâu phận đính chặt lên bìa mẫu, dùng băng dính giấy để dán đường mặt lưng bìa tránh khơng bị vướng làm hỏng mẫu phía Mỗi tiêu mẫu dán etyket bao gồm thông tin như: tên khoa học, tên phổ thông, tên dân tộc, thuộc họ, nơi phân bố, công dụng chữa bệnh 2.3.6 Phương pháp kế thừa Kế thừa cơng trình nghiên cứu khoa học xuất liên quan đến thuốc tỉnh Thái Nguyên; kinh nghiệm sử dụng thuốc, thuốc ông lang, bà mế cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên, tài liệu khác có liên quan đến đề tài nguyên tắc có chọn lọc phê phán 2.3.7 Phương pháp đánh giá tính đa dạng nguồn tài nguyên thuốc Các tiêu đánh giá tính đa dạng nguồn tài nguyên thuốc dựa phương pháp đánh giá Nguyễn Nghĩa Thìn (1997, 2007), bao gồm: - Đa dạng phân loại - Đa dạng dạng loài thuốc Đánh giá đa dạng phân loại: Dựa theo phương pháp Nguyễn Nghĩa Thìn (1997, 2007) tiến hành đánh giá tính đa dạng thành phần taxon Đánh giá đa dạng dạng loài thuốc 2.3.8 Phương pháp xác định thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác, sử dụng Xác định thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác, sử dụng dựa vào tài liệu: “Danh mục thuốc thiết yếu Y học cổ truyền”, ban hành theo Quyết định số 17/2005/QĐ-BYT [Bộ Y tế, 2005]; “40 loài thuốc trọng tâm khai thác phát triển”, ban hành theo Quyết định số 15/2012/QĐ-BYT [Bộ Y tế, 2012]; “Dẫn liệu thống kê dược liệu thuốc từ dược liệu” [Cục Dược, Bộ Y tế, 2012] Đồng thời, dựa vào việc khai thác thu mua thuốc ghi nhận trình điều tra nghiên cứu tỉnh Thái Nguyên 2.3.9 Phương pháp xác định loài thuốc thuộc diện bảo tồn Danh sách thuốc nằm diện bảo tồn Việt Nam có tỉnh Thái Nguyên tài liệu chủ yếu sau: Nghị định số 32/2006/NĐ-CP Thủ tướng Chính phủ, ngày 30/03/2006; Danh lục đỏ thuốc Việt Nam (Nguyễn Tập, 2007); Sách đỏ Việt Nam, phần II – Thực vật (2007) Nhìn chung, khí hậu tương đối thuận lợi cho việc phát triển hệ sinh thái đa dạng, thuận lợi cho phát triển ngành nơng, lâm nghiệp nói chung 3.1.5 Chế độ thủy văn Thái Ngun tỉnh có mạng lưới sơng suối dày đặc phân bố tương đối Cần phải tăng cường biện pháp trồng bảo vệ rừng đầu nguồn, nhằm hạn chế phân tán tốc độ dịng chảy… góp phần vào việc bảo vệ đất, ổn định chế độ nước, đáp ứng yêu cầu sản xuất sinh hoạt địa phương 3.1.6 Tài nguyên rừng Thái Nguyên có hệ sinh thái đa dạng với nguồn tài nguyên thực vật dồi dào, phong phú đặc biệt nguồn dược liệu 3.2 Điều kiện xã hội 3.2.1 Dân cư Dân cư Thái Nguyên phân bố không đều, vùng cao vùng núi dân cư thưa thớt, thành thị đồng dân cư lại dày đặc Dân cư tập trung đông đúc thành phố, thị xã, thị trấn thưa thớt nông thôn, vùng sâu, vùng xa vùng cao 3.2.2 Dân tộc Thái Nguyên tỉnh có nhiều dân tộc sinh sống, địa bàn tỉnh có 46 tổng số 54 dân tộc sinh sống Việt Nam có dân tộc sinh sống chủ yếu nơi bao gồm: Kinh, Tày, Nùng, Sán Dìu, Dao, H’mơng, Sán Chay Hoa Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 Nguồn tài nguyên thuốc đƣợc sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên 4.1.1 Sự đa dạng bậc taxon 4.1.1.1 Đa dạng bậc ngành Kết nghiên cứu đến ghi nhận 745 lồi thực vật bậc cao có mạch, phân bố ngành: ngành Thông đất (Lycopodiophyta), ngành Cỏ tháp bút (Equisetophyta), ngành Dương xỉ (Polypodiophyta), ngành Thông (Pinophyta) ngành Mộc lan (Magnoliophyta), thể Bảng 4.1 Bảng 4.1 Sự phân bố taxon ngành Tên Việt Nam Thông đất Cỏ tháp bút Dương xỉ Thông Tên ngành Tên khoa học Lycopodiophyta Equisetophyta Polypodiophyta Pinophyta SL 11 Họ Tỉ lệ % 1,38 0,68 7,59 1,38 SL 13 Chi Tỉ lệ % 0,45 0,22 2,92 0,45 SL 16 Loài Tỉ lệ % 0,40 0,27 2,15 0,54 Mộc lan Magnoliophyta Tổng 129 88,97 427 95,96 720 96,64 145 100 445 100 745 100 4.1.1.2 Tỉ lệ hai lớp ngành Mộc lan Sự phân bố không đồng taxon thể qua chiếm ưu lớp ngành Mộc lan (Magnoliophyta), kết Bảng 4.3 Bảng 4.3 Số lƣợng họ, chi, loài lớp ngành Mộc lan Bậc phân loại Lớp Mộc lan (Magnoliopsida) Lớp Hành (Liliopsida) Ngành Mộc lan (Magnoliophyta) Tỉ lệ lớp Mộc lan/lớp Hành Họ SL 102 27 129 Chi Tỉ lệ % 79,07 20,93 100 3,78 SL 353 74 427 Loài Tỉ lệ % 82,67 17,33 100 4,77 SL 603 117 720 Tỉ lệ % 83,75 16,25 100 5,15 4.1.1.3 Các họ đa dạng Những nét đặc trưng hệ thực vật thường xem xét 10 họ đa dạng nhất, xét đến số họ thuốc thu khu vực nghiên cứu dù chiếm 6,90% tổng số họ lại có tới 250 lồi chiếm 33,55% tổng số loài chiếm tới 139 chi tương ứng với 31,23% số chi toàn khu vực Bảng 4.5 Các họ đa dạng khu vực nghiên cứu TT 10 Tên họ Tên Việt Nam Tên khoa học Thầu dầu Euphorbiaceae Cúc Asteraceae Cà phê Rubiaceae Đậu Fabaceae Cam Rutaceae Cỏ roi ngựa Verbenaceae Ơ rơ Acanthaceae Đơn nem Myrsinaceae Hòa thảo Poaceae Thiên lý Asclepiadaceae 10 họ đa dạng (6,90%) Số loài Số loài Tỷ lệ % 42 5,64 35 34 33 21 19 18 16 16 16 250 4,68 4,56 4,43 2,82 2,55 2,42 2,15 2,15 2,15 33,55 Số chi Số chi Tỷ lệ % 21 4,72 22 21 21 12 15 11 139 4,94 4,72 4,72 1,8 1,12 2,7 0,67 3,37 2,47 31,23 4.1.1.4 Các chi đa dạng Nguồn thuốc tỉnh Thái Nguyên với 10 chi giàu loài chiếm 2,25% tổng số chi với số loài 65 loài tương đương với 8,73% tổng số loài tồn hệ Chi có số lồi nhiều chi Ficus thuộc họ Moraceae với loài Tiếp theo chi Ardisia (Myrsinaceae) chi Piper (Piperaceae) có lồi; chi Solanum (Solanaceae) có lồi; chi Dioscorea, Vernonia, Clausena có lồi; chi cịn lại Maesa, Melastoma, Smilax có lồi Bảng 4.7 Các chi có nhiều lồi thuốc KVNC TT 10 Tên chi Họ thực vật Ficus Moraceae Ardisia Myrsinaceae Piper Piperaceae Solanum Solanaceae Dioscorea Dioscoreaceae Vernonia Asteraceae Clausena Rutaceae Maesa Myrsinaceae Melastoma Melastomaceae Smilax Smilaceae 10 chi đa dạng (2,25%) Tổng số loài Số loài 8 6 5 65 745 Tỉ lệ (%) 1,21 1,07 1,07 0,94 0,81 0,81 0,81 0,67 0,67 0,67 8,73 100 4.1.2 Đa dạng dạng loài thuốc Các loại đồng bào dân tộc tỉnh Thái Nguyên sử dụng làm thuốc có dạng đa dạng phong phú Phân tích tính đa dạng dạng thuốc định hướng việc gây trồng, bảo vệ khai thác sử dụng bền vững nguồn tài nguyên thuốc Bảng 4.8 Sự đa dạng dạng loài thuốc Dạng Số loài Tỷ lệ (%) Cây gỗ Cây bụi Cây thảo Cây leo Tổng 176 213 233 123 745 23,62 28,59 31,28 16,51 100 4.2 Tiềm khai thác sử dụng thuốc tỉnh Thái Nguyên Căn vào tài liệu như: Danh sách “40 loài thuốc trọng tâm khai thác phát triển”, ban hành theo Quyết định số 15/2012/QĐ-BYT, Bộ trưởng Bộ Y tế, 04/01/2012; “Danh mục thuốc thiết yếu Y học cổ truyền”, ban hành theo Quyết định số 17/2005/QĐ-BYT, v/v Ban hành danh mục thuốc thiết yếu Việt Nam, lần thứ V, 01/07/2005) “Dẫn liệu thống kê dược liệu thuốc từ dược liệu”, Cục Dược, Bộ Y tế, năm 2012 (tài liệu nội bộ, Cục Dược, Bộ Y tế) Đồng thời, dựa vào việc khai thác thu mua thuốc ghi nhận trình điều tra nghiên cứu tỉnh Thái Nguyên Kết thống kê Danh sách thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác, sử dụng (Bảng 4.9) 4.3 Những thuốc thuộc diện cần bảo tồn Việt Nam ghi nhận đƣợc tỉnh Thái Nguyên 4.3.1 Số loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn tỉnh Thái Nguyên Căn vào tài liệu bảo tồn Nghị định số 32/2006/NĐ – CP Chính phủ ngày 30/3/2006; Danh lục đỏ thuốc Việt Nam Cẩm nang thuốc cần bảo vệ Việt Nam Nguyễn Tập (2007) Sách đỏ Việt Nam – Phần II Thực vật (2007), tiến hành xác định loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn Bảng 4.10 Các thuốc thuộc diện bảo tồn ghi nhận Thái Nguyên Tên Việt Nam TT - Tên khoa học Tình trạng Thuộc họ NĐ số SĐVN DLĐCT 32/2006 2007 2007 VU VU Tắc kè đá - Drynaria bonii H Christ Polypodiaceae Tuế ba lăng sa - Cycas balansae Warb Cycadaceae IIA VU Cycadaceae IIA VU 10 11 12 13 14 Tuế xẻ đôi - Cycas bifida (ThiseltonDyer) K D Hill Bổ béo đen - Goniothalamus vietnamensis Ban Mã đậu linh to - Aristolochia kaempferi Willd Quảng phòng kỷ - Aristolochia westlandii Hemsl Hoa tiên - Asarum glabrum Merr Tế hoa petelot - Asarum petelotii O C Schmidt Nấm đất - Balanophora laxiflora Hemsl in F Forbrs & Hemsl Bát giác liên - Podophyllum tonkinense Gagnep Trám đen - Canarium tramdenum Dai ex Yakovl Cát sâm - Callerya speciosa (Champ ex Benth.) Schot Gù hương - Cinnamomum balansae Lecomte Vù hương - Cinnamomum parthenoxylon (Jack) Meisn Annonaceae VU Aristolochiaceae VU Aristolochiaceae VU Aristolochiaceae IIA Aristolochiaceae IIA VU Berberidaceae EN EN Burseraceae VU Fabaceae VU Lauraceae IIA VU Lauraceae IIA CR Loganiaceae 16 Củ dòm - Stephania dielsiana C.Y Wu Menispermaceae IIA Menispermaceae IIA kwangsiensis H S Lo EN EN Mã tiền láng - Strychnos nitida G Don Bình vôi quảng tây - Stephania VU Balanophoraceae 15 17 VU EN VU EN VU Tên Việt Nam TT 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 - Tên khoa học Hoàng đằng - Fibraurea tinctoria Lour Củ gió - Tinospora sagittata (Oliv.) Gagnep Lá khôi – Ardisia gigantifolia Stapf Thiên lý hương - Embelia parviflora Wall Rau sắng - Melientha suavis Pierre Hà thủ ô đỏ - Fallopia multiflora (Thunb.) Haraldson Thổ sâm - Talinum paniculatum (Jacq.) Gaertn Ba kích - Morinda officinalis How Hồi nước - Limnophilla rugosa (Roth) Merr Trầm - Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte Hoàng tinh hoa trắng -Disporopsis longifolia Craib Kim tuyến tơ - Anoectochilus setaceus Blume Thanh thiên quỳ - Nervilia fordii (Hance) Schlechter Phá lủa - Tacca subflabellata P P Ling & C T Ting Trọng lâu hải nam - Paris hainanensis Merr Tình trạng Thuộc họ Menispermaceae NĐ số SĐVN DLĐCT 32/2006 2007 2007 IIA Menispermaceae VU Myrsinaceae VU Myrsinaceae VU Opiliaceae VU Polygonaceae VU 4.3.2.1 Cơ sở liệu thuộc tính EN Portulacaceae VU Rubiaceae EN Scrophulariaceae VU VU Thymelaeaceae EN EN EN Convallariaceae IIA VU Orchidaceae IA EN Orchidaceae IIA EN EN VU VU Taccaceae Trilliaceae 4.3.2 Ứng dụng công nghệ GIS xây dựng sở liệu loài thuốc cần bảo tồn tỉnh Thái Nguyên VU VU Dữ liệu thuộc tính giúp nắm bắt rõ đặc tính đối tượng nghiên cứu Dữ liệu thuộc tính Mapinfor lưu trữ dạng bảng (Browser), gồm trường liệu: Ky_hieu, Ten_khoa_hoc, Ten_Viet_Nam, Thuoc_ho, Dia_diem_phan_bo, Tinh_trang, Cong_dung_chua_benh (Bảng 4.11) 4.3.2.2 Cơ sở liệu không gian Qua trình điều tra nghiên cứu tiến hành định vị loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn xây dựng đồ phân bố 32 loài thuốc tỉnh Thái Nguyên nhằm tạo sở cho việc tìm kiếm, khai thác, phân vùng trồng trọt lồi thuốc q, từ đó, tạo sở liệu cho công tác bảo tồn nghiên cứu thuốc (Hình 4.3) 4.3.3 Thực trạng loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn tỉnh Thái Nguyên Xác định 32 loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn Nghị định 32/NĐ-CP (2006) có 12 lồi, đó: lồi mức độ nghiêm cấm khai thác sử dụng (IA) 11 loài hạn chế khai thác sử dụng (IIA) Sách đỏ Việt Nam (2007) có 23 lồi: lồi mức độ nguy cấp (CR), loài mức độ nguy cấp (EN) 16 loài mức độ nguy cấp (VU) Danh lục đỏ thuốc Việt Nam (2007) có 20 lồi, đó: lồi mức độ nguy cấp (EN) 12 loài mức độ nguy cấp (VU) 4.4 Vốn tri thức địa việc sử dụng thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên 4.4.1 Một số kinh nghiệm đồng bào dân tộc tỉnh Thái Nguyên 4.4.1.1 Kinh nghiệm nhận biết, thu hái thuốc Mỗi dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay, Dao tỉnh Thái Nguyên có niềm tin, tri thức kinh nghiệm việc sử dụng thuốc khác nhau, mang nhiều nét độc đáo đặc trưng cho dân tộc Những kinh nghiệm thể cách gọi tên, nhận biết thu hái thuốc dân tộc 4.4.1.2 Kinh nghiệm thuốc chữa bệnh cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Bảng 4.12 Kết thu thập thuốc kinh nghiệm số cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Cộng đồng dân tộc thiểu số tỉnh Thái Nguyên Cộng đồng dân tộc Tày Cộng đồng dân tộc Nùng Cộng đồng dân tộc Sán Dìu Cộng đồng dân tộc Sán Chay (Sán Chí, Cao Lan) Cộng đồng dân tộc Dao Số lƣợng thuốc thu thập Số lƣợng Bài thuốc kinh nghiệm theo nhóm bệnh Bệnh đường tiêu hóa: 9; Bệnh đường tiết liệu: 6; Bệnh phụ nữ, sinh sản: 6; Bệnh da: 6; Bệnh thần kinh: 5; Bệnh xương – khớp: 5; Bệnh trẻ em: 5; Bệnh gan: 4; Bệnh 57 đường hô hấp: 2; Chữa ngộc độc: 2; Ung bướu: 2; Bệnh miệng: 2; Bệnh mắt: 1; Bệnh mũi: bài; Chữa động vật cắn: Bệnh xương – khớp: 6; Bệnh đường tiêu hóa: 3; Bệnh da: 2; Bệnh đường tiết liệu: 2; Bệnh gan: 2; Bệnh đường hô 21 hấp: 2; Thuốc bổ: 1; Cảm cúm: 1; Cầm máu: 1; Chữa động vật cắn: Bệnh xương – khớp: 2; Bệnh đường tiêu hóa: 1; Bệnh đường hơ hấp: 1; Bệnh sỏi mật: 1; Bệnh da: Bệnh da: 9; Bệnh trẻ em: 6; Bệnh đường tiêu hóa: 6; Bệnh đường tiết liệu: 6; Bệnh phụ nữ: 5; Bệnh đường hô hấp: 5; Bệnh xương – khớp: 3; Bệnh thần kinh: 3; Bệnh 43 gan: 3; Thuốc bổ: 2; Răng miệng: 2; Bệnh tim: 1; Bệnh mắt: 1; Chữa động vật cắn: Bệnh xương – khớp: 7; Bệnh đường tiết liệu: 6; Bệnh phụ nữ: 5; Bệnh thần kinh: 4; Bệnh gan: 3; Bệnh trẻ em: 3; Bệnh da: 2; Ung bướu: 2; Bệnh đường tiêu hóa: 2; 44 Thuốc bổ: 2; Cảm cúm, đậu lào: 2; Bệnh tim mạch: 2; Bệnh đường hô hấp: 1; Răng miệng: bài; Bệnh mắt: 1; Chữa động vật cắn: 4.4.2 Ảnh hưởng giao thoa dân tộc đến vốn tri thức địa việc sử dụng thuốc Trải qua trình sinh sống lâu dài, với lịch sử chinh phục thiên nhiên phòng chống bệnh tật, cộng đồng dân tộc thể sáng tạo riêng Mỗi dân tộc tìm phương thức ứng xử khác để vượt qua khắc nghiệt thiên nhiên, có việc sử dụng nguồn tài nguyên cỏ có sẵn tự nhiên để chăm sóc sức khỏe cho cộng đồng Khai thác sử dụng nguồn tài nguyên thuốc để đáp ứng nhu cầu chữa bệnh chăm sóc sức khỏe cộng đồng tập quán lâu đời dân tộc cư trú tỉnh Thái Nguyên Kinh nghiệm chữa bệnh thuốc tích lũy từ đời qua đời khác, lưu truyền gia đình cộng đồng dân tộc 4.4.3 Kinh nghiệm sử dụng phận làm thuốc đồng bào dân tộc tỉnh Thái Nguyên Kết thống kê phận sử dụng làm thuốc theo kinh nghiệm người dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên trình bày Bảng 4.16 Bảng 4.16 Sự đa dạng phận sử dụng làm thuốc theo kinh nghiệm dân tộc tỉnh Bộ phận làm thuốc Lá Thân R Cả Hoa Quả Hạt V Nhựa Tổng số loài SL 155 85 65 52 11 20 21 323 Tày Tỉ lệ % 48,0 26,3 20,1 16,1 3,40 6,20 2,50 6,50 0,60 Thái Nguyên Dân tộc Nùng Sán Dìu SL Tỉ lệ % SL Tỉ lệ % 31 27,9 70 54,7 37 33,3 56 43,8 30 27,0 34 26,6 26 23,4 20 15,6 1,80 0,00 0,90 6,30 1,80 0,80 3,60 1,60 0,90 0,80 111 128 Sán Chay SL Tỉ lệ % 154 49,4 162 51,9 62 19,9 53 17,0 0,60 1,60 1,60 14 4,50 0,30 312 SL 152 106 73 54 5 297 Dao Tỉ lệ % 51,2 35,7 24,6 18,2 1,70 0,30 1,70 2,40 0,70 4.4.4 Vấn đề truyền thụ kiến thức thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Tiến hành vấn, tư liệu hóa số liệu liên quan đến vấn đề truyền thụ kiến thức cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên, kết người làm nghề thầy lang chủ yếu nam giới thuộc nhóm tuổi từ 50 – 70 4.5 Kiểm chứng sở khoa học khả kháng tế bào ung thƣ dày Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) 4.5.1 Kết đánh giá khả ức chế dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia) đến phân chia dòng tế bào ung thư dày Để đánh giá khả ức chế DCLK ethanol tuyệt đối lên phân chia tế bào ung thư dày, tiến hành xử lý dòng tế bào AGS, MKN45 MKN74 nồng độ từ 10 – 500 µg/ml dịch chiết 48 (Phụ lục 11) Sau đó, mật độ tế bào sống phương pháp MTT Kết dịch chiết Lá khơi (Ardisia gigantifolia) có khả ức chế mạnh so với số loại dịch chiết ethanol từ thực vật khác lên sinh trưởng dòng tế bào ung thư dày báo cáo AGS MKN45 MKN74 Đối chứng + 100 µg/ml DCLK Hình 4.43 Ảnh hƣởng DCLK lên kiểu hình tế bào ung thƣ dày Đồng thời, kết phân tích hình ảnh kính hiển vi soi ngược (Hình 4.43) thay đổi kiểu hình tế bào xử lý nồng độ 100 µg/ml Cụ thể hầu hết tế bào AGS MKN45 thấy rõ tăng kích thước đáng kể so với tế bào khơng xử lý (đối chứng) Sự tăng kích thước tế bào cho đặc điểm tế bào biệt hóa (differentiation) [Zouboulis et al., 1994], [Sankaran et al., 2012] tế bào bị già hóa (senescence) [Sherwood et al., 1988], [Pospelova et al., 2013] Bên cạnh đó, sau xử lý DCLK, tế bào MKN45 có dạng hình cầu giảm rõ rệt khả bám dính lên bề mặt đĩa ni cấy Mất khả bám dính ngun nhân dẫn tới giảm khả phân chia tế bào 4.5.2 Kết đánh giá tác động dịch chiết Lá khơi (Ardisia gigantifolia) lên q trình apoptosis tế bào ung thư dày Mức độ ảnh hưởng dịch chiết Lá khôi lên apoptosis khác dịng tế bào Trong đó, tỷ lệ apoptosis cao ghi nhận dòng AGS 11,5 ± 5,2%, dòng MKN45 với tỷ lệ 6,5 ± 0,5%; thấp dòng MKN74 với tỷ lệ 3,3 ± 1,1% (Hình 4.44) Như vậy, nồng độ 100 µg nồng độ có khả ức chế 70 – 80% khả sinh trưởng tế bào khả cảm ứng apoptosis dòng tế bào đạt từ 3,3 – 11,5%; tỷ lệ thấp so với số nghiên cứu khác Kết dịch chiết Lá khơi độc cho tế bào khả ức chế cao phân gây apoptosis, chế sinh học khác biệt hóa tế bào gốc (stem cell differentiation), già hóa (cell senesence) Hình 4.44 Khả cảm ứng apoptosis DCLK dòng tế bào ung thƣ dày: AGS, MKN45 MKN74 (*p ˂ 0,05; n = 5) 4.5.3 Ảnh hưởng dịch chiết Lá khơi (Ardisia gigantifolia) đến điều hịa chu kỳ tế bào ung thư dày Kết dòng tế bào KMN45 MKN74 quan sát thấy có tích lũy cao tế bào phase G0/G1 Cụ thể dòng tế bào ung thư dòng MNK45 sau xử lý với DCLK giảm mạnh pha S pha G2/M lại có tăng tỷ lệ tế bào phase G0/G1 lên tới 71,2% so với đối chứng 54% Tương tự vậy, dòng MKN74, tế bào tích lũy pha G0/G1 với tỷ lệ 73,2% so với 62,3% đối chứng, đồng thời điều hòa giảm số lượng tế bào phase S G2/M Như vậy, ức chế phân chia tế bào hai dịng tế bào giải thích dừng chu kỳ tế bào pha G0/G1 – pha nghỉ hai lần phân chia tế bào Một số báo cáo mối liên hệ tích lũy tế bào pha nghỉ hai lần phân chia tế bào với tế bào có kiểu hình biệt hóa [Gunji et al., 1992], [Minami et al., 2003] già hóa tế bào [Afshari & Barrett, 1994], [Terao et al., 2001] Do giả thuyết DCLK làm giảm khả phân chia cảm ứng q trình già hóa, biệt hóa tế bào gốc ung thư dày 4.5.4 Ảnh hưởng dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia) đến điều hịa giảm đặc tính tế bào gốc ung thư dày dòng MKN45 Kết miễn dịch huỳnh quang (Hình 4.46a) rằng, tế bào biểu hoạt tính enzyme ALDH (màu xanh) giảm mạnh sau xử lý với DCLK so với đối chứng Sự điều hòa giảm số lượng tế bào biểu marker CD44 (màu đỏ) không rõ rệt so với trường hợp marker ALDH, thấy rõ giảm mức độ biểu marker dựa vào cường độ phát huỳnh quang CD44 tế bào Hình 4.46 Ảnh hƣởng DCLK lên pha chu kỳ tế bào dòng MKN45 (a) Sự biểu marker tế bào gốc ALDH (màu xanh cây) CD44 (màu đỏ) quan sát kính hiển vi huỳnh quang Nhân tế bào nhuộm Heostch (màu xanh da trời) (b) % tế bào gốc ung thư dày biểu marker ALDH xác Flow cytometry Tiếp theo đó, kết phân tích Flow cytometry (Hình 4.46b) lần khẳng định DCLK làm giảm rõ rệt tỷ lệ tế bào gốc ung thư biểu marker ALDH từ 22,6% (đối chứng) xuống 14,2% (mẫu xử lý với DCLK) Như vậy, môi trường nuôi cấy lớp (2D), DCLK điều hòa giảm số lượng các tế bào gốc ung thư dày Kết nghiên cứu rằng, DCLK làm dừng chu kỳ phân chia tế bào pha G0/G1 dòng tế bào ung thư dày khác gồm AGS, MKN45 MKN74 Điều nhấn mạnh DCLK độc cho tế bào thể mức độ cảm ứng apoptosis thấp, điều có ý nghĩa quan trọng việc phát triển loại thuốc kháng ung thư với độc tính thấp so với loại thuốc lưu hành Điều quan trọng nghiên cứu chứng minh khả ức chế tế bào ung thư dày DCLK thơng qua chế điều hịa giảm số lượng đặc tính tế bào gốc ung thư 4.6 Một số giải pháp việc bảo tồn, phát triển bền vững nguồn thuốc vốn tri thức địa cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên 4.6.1 Bảo tồn thuốc có nguy bị tuyệt chủng, đôi với phát triển trồng thêm  Bảo tồn thuốc (i) Bảo tồn chỗ (in situ): Hiện tỉnh Thái Nguyên có khu Bảo tồn thiên nhiên Thần Sa, Võ Nhai vùng đệm Vườn quốc gia Tam Đảo xã Quân Chu, huyện Đại Từ Đây vùng rừng đặc dụng có chức bảo tồn nguyên trạng nguồn gen động, thực vật rừng có, có thuốc (ii) Bảo tồn chuyển chỗ (ex situ): Kết hợp việc xây dựng Vườn thuốc nam ông lang, bà mế Vườn thuốc phục vụ cho yêu cầu giảng dạy trường chuyên nghiệp địa bàn tỉnh như: Đại học Khoa học, Đại học Y Dược, Đại học Nông lâm thuộc Đại học Thái Nguyên; Cao đẳng Y tế tỉnh Thái Nguyên Tiến hành đưa số thuốc thuộc diện quý có nguy bị tuyệt chủng trồng, với mục đích bảo tồn chuyển chỗ (ex situ)  Phát triển trồng thuốc (i) Trồng thêm chỗ số thuốc thuộc diện quý hiếm: Song song với hai hình thức bảo tồn trên, cần xúc tiến nghiên cứu đưa vào trồng thêm chỗ số thuốc quý hiếm, có nhu cầu sử dụng kinh tế cao (ii) Phát triển trồng số thuốc có nhu cầu cao: Bên cạnh thuốc quý trên, Thái Nguyên phát triển trồng Sa nhân tím (Amomum longiligulare) (lồi trồng vùng đệm Vườn quốc gia Tam Đảo), đất lâm nghiệp, để xuất Các loài Đinh lăng (Polysciasfruticosa), Nghệ (Curcuma domestica) thuốc có thị trường tiêu thụ lớn hồn tồn thích hợp để sản xuất nhiều địa phương tỉnh 4.6.2 Khai thác hợp lý, ý đến bảo vệ tái sinh (i) Xây dựng Quy trình khai thác hợp lý: (ii) Hướng dẫn quy trình khai thác đến cộng đồng 4.6.3 Bảo tồn vốn tri thức địa cộng đồng, nghiên cứu kế thừa phát huy Cần có kế hoạch / chương trình riêng điều tra vốn tri thức địa dân tộc, ghi chép đầy đủ, chọn lọc xuất (được đồng thuận theo quy chế sở hữu trí tuệ) Chọn lọc, nghiên cứu, đánh giá số thuốc độc đáo, đưa ứng dụng rộng rãi (được đồng thuận theo quy chế sở hữu trí tuệ) 4.6.4 Tuyên truyền nâng cao nhận thức cộng đồng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Qua trình điều tra nghiên cứu tính đa dạng nguồn thuốc sử dụng cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên, kết thu được: Xây dựng danh lục gồm 745 loài thuốc thuộc 445 chi, 145 họ ngành thực vật bậc cao có mạch (ngành Thông đất (Lycopodiophyta), ngành Cỏ tháp bút (Equisetophyta), ngành Dương xỉ (Polypodiophyta), ngành Thông (Pinophyta) ngành Mộc lan (Magnoliophyta)) Trong đó, dân tộc Tày sử dụng 323 lồi, dân tộc Nùng sử dụng 111 loài, dân tộc Sán Dìu sử dụng 128 lồi, dân tộc Sán Chay (gồm Cao Lan Sán Chí) sử dụng 312 lồi dân tộc Dao sử dụng 297 loài để chữa bệnh Kết đánh giá đa dạng phân loại đa dạng dạng sử dụng làm thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Xây dựng danh lục gồm 41 loài thuốc mọc tự nhiên có tiềm khai thác, sử dụng tỉnh Thái Ngun; với 22 lồi có tiềm trữ lượng giá trị kinh tế Trong có ghi vùng mọc tập trung thuộc huyện tỉnh để giới thiệu cho khai thác Xác định 32 loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn Nghị định 32/NĐ-CP (2006) có 12 lồi, đó: lồi mức độ nghiêm cấm khai thác sử dụng (IA) 11 loài hạn chế khai thác sử dụng (IIA) Sách đỏ Việt Nam (2007) có 23 loài: loài mức độ nguy cấp (CR), loài mức độ nguy cấp (EN) 16 loài mức độ nguy cấp (VU) Danh lục đỏ thuốc Việt Nam (2007) có 20 lồi, đó: lồi mức độ nguy cấp (EN) 12 loài mức độ nguy cấp (VU) Xây dựng Bản đồ phân bố điểm 32 loài thuốc thuộc diện cần bảo tồn tỉnh Thái Nguyên, tỉ lệ 1: 350.000 phục vụ cho công tác bảo tồn Điều tra vốn tri thức địa việc sử dụng thuốc cộng đồng dân tộc Tày, Nùng, Sán Dìu, Sán Chay Dao tỉnh Thái Nguyên kinh nghiệm nhận biết, thu hái thuốc; phận sử dụng làm thuốc; tư liệu hóa thuốc truyền thống Dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) ethanol tuyệt đối làm dừng chu kỳ phân chia tế bào pha G0/G1 dòng tế bào ung thư dày AGS, MKN45 MKN74 Dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) độc cho tế bào thể mức độ cảm ứng apoptosis thấp Chứng minh khả ức chế tế bào ung thư dày (gồm ức chế khả phân chia dừng chu kỳ tế bào pha G0/G1) dịch chiết Lá khôi (Ardisia gigantifolia Stapf.) thơng qua chế điều hịa giảm số lượng đặc tính tế bào gốc ung thư Đề xuất số giải pháp nhằm khai thác hợp lý, bảo vệ phát triển nguồn thuốc tỉnh Thái Nguyên bao gồm: Bảo tồn thuốc có nguy bị tuyệt chủng, đơi với phát triển trồng thêm; Khai thác hợp lý, ý đến bảo vệ tái sinh; Bảo tồn vốn tri thức địa cộng đồng, nghiên cứu kế thừa phát huy; Tuyên truyền nâng cao nhận thức cộng đồng Đề nghị Để thực yêu cầu cần khoanh vùng bảo vệ khai thác lâu dài nguồn thuốc tỉnh Thái Nguyên Bảo tồn thuốc tỉnh Thái Nguyên cần song song với công tác nghiên cứu phát triển trồng thêm Triển khai việc ứng dụng tri thức địa sử dụng thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên việc phát triển thuốc phục vụ cho cơng tác chăm sóc sức khỏe cộng đồng DANH MỤC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Lê Thị Thanh Hương, Nguyễn Thị Phượng, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Nghĩa Thìn (2012), “Điều tra thuốc kinh nghiệm sử dụng thuốc đồng bào dân tộc Sán Chí huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Dược liệu – Viện Dược liệu, tập 17, số 1, tr 3-8 Lê Thị Thanh Hương, Trần Thị Ngọc Anh, Nguyễn Thị Ngọc Yến, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Nghĩa Thìn (2012), “Thực trạng loài thuốc quý tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học – Đại học Quốc gia Hà Nội, tập 28, tr 173-194 Lê Thị Thanh Hương, Chu Thành Huy, Trần Thị Ngọc Anh, Nguyễn Thị Ngọc Yến, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Nghĩa Thìn (2012), “Ứng dụng công nghệ GIS xây dựng sở liệu thuốc thuộc diện cần bảo vệ tỉnh Thái Nguyên phục vụ công tác bảo tồn”, Tạp chí Dược liệu – Viện Dược liệu, tập 17, số 3, tr 131-137 Lê Thị Thanh Hương, Dương Thị Ngọc Chi, Phạm Thị Lan Huệ, Hoàng Thị Tươi, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Nghĩa Thìn (2013), “Điều tra thuốc tắm đồng bào dân tộc Dao tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Dược liệu – Viện Dược liệu, tập 18, số 3, tr 127-132 Lê Thị Thanh Hương, Nguyễn Nghĩa Thìn, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Thị Ngọc Yến (2012), “Điều tra loài thuốc giá trị sử dụng chúng theo kinh nghiệm đồng bào dân tộc Nùng xã Tân Thành, huyện Phú Bình, tỉnh Thái Ngun”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ - Viện Khoa học Việt Nam, tập 50, số 3E, tr 1226-1234 Lê Thị Thanh Hương, Ngô Đức Phương, Hoàng Thị Tươi, Đinh Thế An, Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Nghĩa Thìn (2014), “Điều tra thuốc giá trị sử dụng theo kinh nghiệm đồng bào dân tộc Sán Dìu tỉnh Thái Ngun”, Tạp chí Khoa học – Đại học Quốc gia Hà Nội, tập 30, số 3, tr 14-23 ... dân tộc tỉnh Thái Nguyên nhằm bảo tồn phát triển bền vững? ?? tiến hành thực với mục tiêu lớn sau: Đánh giá đa dạng nguồn thuốc sử dụng cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên đề xuất giải pháp bảo tồn, ... nghiệm thuốc chữa bệnh cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Bảng 4.12 Kết thu thập thuốc kinh nghiệm số cộng đồng dân tộc tỉnh Thái Nguyên Cộng đồng dân tộc thiểu số tỉnh Thái Nguyên Cộng đồng dân tộc. .. nguồn thuốc tỉnh Thái Nguyên Bảo tồn thuốc tỉnh Thái Nguyên cần song song với công tác nghiên cứu phát triển trồng thêm Triển khai việc ứng dụng tri thức địa sử dụng thuốc cộng đồng dân tộc tỉnh Thái