PHÁT HIỆN một số đột BIẾN GEN và đối CHIẾU KIỂU GEN với KIỂU HÌNH của BỆNH NHI THALASSEMIA tại BỆNH VIỆN TRẺ EM hải PHÒNG

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y-DƯỢC HẢI PHÒNG ĐỖ THỊ QUỲNH MAI PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘT BIẾN GEN VÀ ĐỐI CHIẾU KIỂU GEN VỚI KIỂU HÌNH CỦA BỆNH NHI THALASSEMIA TẠI BỆNH VIỆN TRẺ EM HẢI PHÒNG LUẬN ÁN TIẾN SY Y HỌC HẢI PHÒNG - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y-DƯỢC HẢI PHÒNG ĐỖ THỊ QUỲNH MAI PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘT BIẾN GEN VÀ ĐỐI CHIẾU KIỂU GEN VỚI KIỂU HÌNH CỦA BỆNH NHI THALASSEMIA TẠI BỆNH VIỆN TRẺ EM HẢI PHÒNG LUẬN ÁN TIẾN SY Y HỌC Chuyên ngành : Nhi Mã số : 97.20.106 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS NGUYỄN NGỌC SÁNG TS BẠCH THỊ NHƯ QUỲNH HẢI PHÒNG - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi Đỗ Thị Quỳnh Mai, nghiên cứu sinh khóa Trường Đại học Y Dược Hải Phòng, chuyên ngành Nhi, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn của: PGS.TS Nguyễn Ngọc Sáng TS Bạch Thị Như Quỳnh Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hải Phòng, ngày 08 tháng 11 năm 2022 Đỗ Thị Quỳnh Mai LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, trước hết tơi xin bày tỏ lịng kính trọng, biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Ngọc Sáng TS Bạch Thị Như Quỳnh, người thầy tận tụy dạy dỗ, bảo hết lòng hướng dẫn giúp đỡ, động viên tơi q trình học tập nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng biết Đảng uỷ, Ban Giám hiệu Trường Đại học Y Dược Hải Phòng, Thầy, Cô Bộ môn Nhi, Thầy, Cô cán bộ, nhân viên Phòng quản lý Đào tạo Sau Đại học, Trường Đại học Y Dược Hải Phòng dành thuận lợi, giúp đỡ tận tình dành cho động viên quý giá q trình học tập nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn Ban Giám đốc, phịng Kế hoạch Tổng hợp, Thầy, Cơ, cán bộ, nhân viên khoa Thận – Máu – Nội tiết, Khoa Sinh hóa, Huyết học phịng, ban Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng nhiệt tình tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc Giáo sư, Phó giáo sư, Tiến sỹ, thầy, cô thành viên Hội đồng bảo vệ luận án cấp Bộ môn, cấp Trường, cho ý kiến góp ý bảo quý báu để tơi hồn thiện luận án Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới gia đình bao gồm cha mẹ, người có cơng sinh thành, chồng thân yêu động viên nhiều, anh chị em bạn bè đồng nghiệp chia sẻ, giúp đỡ, động viên giành cho nhiều tình cảm tình làm việc, học tập nghiên cứu Hải Phòng, ngày 08 tháng 11 năm 2022 Đỗ Thị Quỳnh Mai DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT A Adenosine ARMS-PCR Amplification Refractory Mutation System – Polymerase Chain Reaction (Hệ thống khuyếch đại đột biến trơ - Phản ứng chuỗi polymerase) ASO Allele-specific Oligonucleotide (Oligonucleotide đặc trưng alen) β0 Không tổng hợp chuỗi Beta β+ Giảm tổng hợp chuỗi Beta β++ BC Giảm nhẹ tổng hợp chuỗi Beta BVTEHP Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng C Cytidine CS Cộng DNA Desoxyribonucleic acid ĐBG Đột biến gen G Guanin GAP-PCR GAP-Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi polymerase Bạch cầu cách đoạn) Hb Hemoglobin HBA Gen quy định tổng hợp chuỗi alpha globin HBB Gen quy định tổng hợp chuỗi beta globin HC Hồng cầu HbE Hemoglobin E HbF Hemoglobin Fetal HbCs Hemoglobin Constant Spring IVS Intervening sequence (Trình tự chèn hay Intron) LIC Liver iron concentration (Nồng độ sắt gan) mRNA MCH message Ribonucleotic acid (RNA thông tin) Mean Corpuscular Hemoglobin (Lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu) MCHC Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (Nồng độ hemoglobin trung bình hồng cầu) MCV Mean Corpuscular Volume (Thể tích trung bình hồng cầu) MLPA Multiplex Ligationdependent Probe Amplification (Khuếch đại đa đoạn dò) NST Nhiễm sắc thể PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng khuyếch đại chuỗi) RNA RNA: Ribonucleic acid TIF Thalassemia Intermedia Federation (Liên đoàn Thalassemia quốc tế) T Thymidine TC Tiểu cầu TVDT Tư vấn di truyền 3’ UTR 3’ Untranscriptional Region (Vùng 3’ không mã) 5’ UTR 5’ Untranscriptional Region (Vùng 5’ không mã) MỤC LỤC Trang ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm dịch tễ học bệnh Thalassemia 1.2 Đặc điểm lâm sàng xét nghiệm 16 1.3 Tổng quan phương pháp lập phân tích phả hệ bệnh Thalassemia 28 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 34 2.2 Phương pháp nghiên cứu 35 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 49 3.1 Đột biến gen gây bệnh Thalassemia bệnh nhi Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng 49 3.2 Đối chiếu kiểu gen với kiểu hình bệnh nhi Thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng 60 3.3 Mô tả đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng theo gen đột biến bước đầu xây dựng số phả hệ 67 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN .80 4.1 Xác định đột biến gen gây bệnh Thalassemia bệnh nhi Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng 80 4.2 Đối chiếu kiểu gen với kiểu hình bệnh nhi Thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng Error! Bookmark not defined 4.3 Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng theo gen đột biến bước đầu xây dựng số phả hệ 107 KẾT LUẬN 113 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN .115 NHỮNG HẠN CHẾ CỦA ĐỀ TÀI 116 KHUYẾN NGHỊ 117 PHƯƠNG HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO .117 TÀI LIỆU THAM KHẢO .118 DANH SÁCH BỆNH NHÂN 136 DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1 Tỷ lệ người mang gen Thalassemia Việt Nam .5 Bảng 1.2 Đột biến gen Hb (tổng hợp từ nhiều nghiên cứu) Bảng 1.3 Tỉ lệ người mang gen nước ta (tổng hợp từ nhiều nghiên cứu) .7 Bảng 1.4 Cấu trúc globin Hb sinh lý Bảng 1.5 Các loại allen đột biến bệnh α-Thalassemia .11 Bảng 1.6 Các đột biến gây bệnh β-Thalassemia .13 Bảng 1.7 Các kiểu gen kiểu hình bệnh α-Thalassemia 17 Bảng 2.1 Trình tự mồi kích thước đột biến thường gặp .40 Bảng 2.2 Các thông số phản ứng GAP-PCR đột biến thường gặp 41 Bảng 2.3 Trình tự mồi kích thước đột biến điểm thường gặp .42 Bảng 2.4 Các thông số phản ứng ARMS-PCR 43 Bảng 3.1 Đặc điểm tuổi vào viện tuổi phát bệnh 49 Bảng 3.2 Phân bố bệnh nhi α β-Thalassemia theo nhóm tuổi vào viện .49 Bảng 3.3 Phân bố bệnh nhân theo tuổi phát bệnh 50 Bảng 3.4 Đặc điểm giới đối tượng nghiên cứu 50 Bảng 3.5 Đặc điểm địa dư đối tượng nghiên cứu 51 Bảng 3.6 Phân bố đột biến gen hemoglobin bệnh nhân α-Thalassemia 52 Bảng 3.7 Phân loại bệnh nhân α-Thalassemia theo kiểu đột biến gen .52 Bảng 3.8 Phân bố đột biến gen β-globin bệnh nhân β-Thalassemia .55 Bảng 3.9 Phân loại đột biến β-globin theo vị trí gen bị đột biến 57 Bảng 3.10 Phân bố bệnh nhân β-Thalassemia theo chức gen bị đột biến 58 Bảng 3.11 Phân bố bệnh nhân β-Thalassemia theo kiểu gen đột biến .59 Bảng 3.12 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo lý vào viện 60 Bảng 3.13 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo triệu chứng lâm sàng vào viện 61 Bảng 3.14 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo mức độ lách to vào viện 62 Bảng 3.15 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo triệu chứng mặt Thalassemia 62 Bảng 3.16 Đặc điểm niêm mạc lợi đối tượng nghiên cứu vào viện .63 Bảng 3.17 Phân bố bệnh nhân theo tuổi bắt đầu truyền máu 63 Bảng 3.18 Phân bố bệnh nhân theo số lần truyền máu năm 64 Bảng 3.19 Đặc điểm lệ thuộc truyền máu bệnh nhân Thalassemia 64 Bảng 3.20 Đặc điểm huyết học đối tượng nghiên cứu .65 Bảng 3.21 Đặc điểm sắt ferritin huyết bệnh nhân Thalassemia 66 Bảng 3.22 Đặc điểm GOT, GPT, ure, creatinin bệnh nhân Thalassemia 67 Bảng 3.23 Hội chứng tán huyết theo gen đột biến α-Thalassemia 68 Bảng 3.24 Đặc điểm lâm sàng theo gen đột biến α-Thalassemia .68 Bảng 3.25 Đặc điểm huyết học theo số lượng gen đột biến α-Thalassemia (n=27) 69 Bảng 3.26 Đặc điểm điện di huyết sắc tố theo số lượng gen đột biến 69 Bảng 3.27 Đặc điểm lâm sàng theo đột biến gen HBB β-Thalassemia 70 Bảng 3.28 Đặc điểm huyết học theo đột biến gen HBB β-Thalassemia .71 Bảng 3.29 Đặc điểm điện di HST theo đột biến gen HBB β-Thalassemia 71 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1.1 Gen α β globin (trên nhiễm sắc thể 16 11) .14 Hình 3.1 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo kiểu hình bệnh (n=83) 51 Hình 3.2 Hình ảnh điện di thu đột biến SEA, 3.7 .53 Hình 3.3 Hình ảnh điện di thu đột biến c2delT 53 Hình 3.4 Hình ảnh điện di thu đột biến HbCs 54 Hình 3.5 Phân loại bệnh nhân α-Thalassemia theo số lượng gen đột biến (n=27) 54 Hình 3.6 Hình ảnh điện di thu đột biến CD17, CD41/42 55 Hình 3.7 Hình ảnh điện di thu đột biến CD95 56 Hình 3.8 Hình ảnh điện di thu đột biến CD26 56 Hình 3.9 Hình ảnh điện di thu đột biến CD71/72 .57 Hình 3.10 Hình ảnh điện di đột biến IVS1.1 57 Hình 11 Phả hệ gia đình số 72 Hình 12 Phả hệ gia đình số 72 Hình 13 Phả hệ gia đình số 73 Hình 14 Phả hệ gia đình số 74 Hình 15 Phả hệ gia đình số 74 Hình 16 Phả hệ gia đình số 75 Hình 17 Phả hệ gia đình số 76 Hình 18 Phả hệ gia đình số 76 Hình 19 Phả hệ gia đình số 77 Hình 20 Phả hệ gia đình số 10 78 Hình 21 Phả hệ gia đình số 11 78 Hình 22 Phả hệ gia đình số 12 79 Hình 4.1 Kết phát đột biến CD95 gia đình phả hệ số 11 108 63 Lê Gia Phong (2019), Kết sơ tổng điều tra dân số nhà năm 2019, Tổng cục thống kê - Cục thống kê thành phố Hải Phòng 64 Shelth S (2017) Alpha-thalassemia BMJ Best Practice 65 Shelth S (2017) Beta-thalassemia BMJ best practice 66 Chong S.S., Boehm C.D., Higgs D.R., et al (2000) Single-tube multiplex-PCR screen for common deletional determinants of alphathalassemia Blood, 95(1), 360–362 67 Ngô Diễm Ngọc (2018), Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, kiểu gen bệnh HbH chẩn đoán trước sinh bệnh anpha-thalassemia, Luận văn Tiến sĩ y học, Trường Đại học Y Hà Nội 68 Nguyễn Quốc Cường, Bạch Khánh Hịa (2006) Tìm hiểu số đột biến gây beta-thalassemia người Miền Bắc Việt Nam Tạp chí nghiên cứu Y học, 40(1), 15–17 69 Phan Hùng Việt (2016) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng xét nghiệm bệnh Thalassemia trẻ em khoa nhi Bệnh viện Trung ương Huế Tạp chí y dược học - Trường Đại học Y Dược Huế, Tập 6, số 5-tháng 10/2016, 104–110 70 Nguyễn Việt Hà, Nguyễn Ngọc Sáng, Vũ Văn Quang (2018) Biến đổi tim mạch bệnh nhân β- thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng năm 2016 Tạp chí Y học Việt Nam, 466, 481–485 71 Nguyễn Thị Xuân Hương CS (2021) Đánh giá biến đổi hình thái chức tim bệnh nhân Thalassemia trung tâm Nhi khoa – Bệnh viện Trung ương Thái Nguyên Tạp chí Y học Việt Nam , 100, 259– 262 72 Nouri N., Naderi M., Rajaie S., et al (2013) Evaluation of Cardiac Function in Patients with Thalassemia Intermedia Iran J Pediatr Hematol Oncol, 3(1), 193–199 73 Nguyễn Ngọc Việt Nga, Lâm Thị Mỹ (2012) Đặc điểm bệnh Thalassemia bệnh viện Nhi đồng Cần Thơ từ 12/2010 đến 06/2011 Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 16(1), 51–56 74 Nguyễn Hoàng Nam (2019), Nghiên cứu kiểu hình kiểu gen bệnh nhi beta-thalassemia, Luận án Tiến sĩ y học, Trường Đại học Y Hà Nội 75 Hoàng Thị Thanh Nga (2021), Nghiên cứu hiệu truyền máu hồ hợp số kháng ngun nhóm máu hồng cầu bệnh nhân thalassemia viện huyết học - truyền máu trung ương, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 76 Võ Thế Hiếu, Tơn Thất Minh Trí CS (2019) Tình hình chăm sóc điều trị bệnh Thalassemia khoa Huyết học lâm sàng - bệnh viện Trung ương Huế Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 23(6), 305–309 77 Nguyễn Bá Chung, Bạch Quốc Khánh CS (2019) Khảo sát đặc điểm mang gen Thalassemia bệnh huyết sắc tố dân tộc thuộc vùng Nam Trung Bộ Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 23(3), 280–285 78 Hockham C., Ekwattanakit S., Bhatt S., et al (2019) Estimating the burden of α-thalassaemia in Thailand using a comprehensive prevalence database for Southeast Asia eLife, 8, e40580 79 Phanmany S., Chanprasert S., Munkongdee T., et al (2019) Molecular prevalence of thalassemia and hemoglobinopathies among the Lao Loum Group in the Lao People’s Democratic Republic Int J Lab Hematol, 41(5), 650–656 80 Lai K., Huang G., Su L., et al (2017) The prevalence of thalassemia in mainland China: evidence from epidemiological surveys Sci Rep, 7(1), 920 81 Huang H., Xu L., Chen M., et al (2019) Molecular characterization of thalassemia and hemoglobinopathy in Southeastern China Sci Rep, 9(1), 3493 82 Vũ Hải Toàn, Nguyễn Thị Thu Hà and Bạch Quốc Khánh CS (2018) Bước đầu phân tích số số sàng lọc Thalasemia cộng đồng Tạp chí Y học Việt Nam , 466(tháng – số đặc biệt), 435–443 83 Keikhaei B., Slehi-fard P., Shariati G., et al (2018) Genetics of Iranian Alpha-Thalassemia Patients: A Comprehensive Original Study Biochem Genet, 56(5), 506–521 84 Souza A.E., Cardoso G.L., Takanashi S.Y., et al (2009) Alphathalassemia (3.7 kb deletion) in a population from the Brazilian Amazon region: Santarem, Para State Genet Mol Res, 8(2), 477–481 85 Bạch Quốc Khánh, Nguyễn Thị Thu Hà, Ngô Mạnh Quân CS (2021) Nghiên cứu tình hình mang gen bệnh Thalassemia huyết sắc tố dân tộc thiểu số thuộc khu vực Tây Bắc Việt Nam Tạp chí Y học Việt Nam , 502(5-số chuyên đề), 58–65 86 Bạch Quốc Khánh, Nguyễn Thị Thu Hà, Ngô Huy Minh (2021) Thực trang mang gen bệnh Thalassemia học sinh dân tộc Kinh số tỉnh thành phố năm 2017 Tạp chí Y học Việt Nam , 502(5-số chuyên đề), 96–102 87 Bạch Quốc Khánh, Hoàng Thị Thuỳ Linh, Nguyễn Thị Thu Hà CS (2019) Thực trạng mang gen bệnh Thalassemia dân tộc Chơ Ro sống tỉnh Đồng Nai Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 23(6), 274–279 88 Fucharoen S, Viprakasit V (2009) HbH disease: clinical course and disease modifiers Hematol Am Soc Hematol Educ Program, 26–34 89 Ngô Thị Tuyết Nhung, Lý Thị Thanh Hà, Ngô Diễm Ngọc CS (2016) Ứng dụng kỹ thuật phân tử phát đột biến gen α-globin gây bệnh hemoglobin H Tạp Chí Nhi Khoa, 9(5), 80–84 90 Nguyễn Thị Thu Hà (2017), Nghiên cứu đặc điểm đột biến gen globin theo dõi điều trị thải sắt bệnh nhân thalassemia Viện Huyết học Truyền máu Trung ương giai đoạn 2013 - 2016, Luận văn Tiến sĩ y học, Trường Đại học Y Hà Nội 91 Phạm Thị Ngọc Nga, Nguyễn Minh Tuấn, Nguyễn Trung Kiên (2017) Các kiểu đột biến gen gây β-thalasasemia bệnh nhân điều trị Bệnh Viện Nhi Đồng năm 2016 Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 245–251 92 Lê Hồng Thu, Nguyễn Thị Hồng, Bạch Thị Như Quỳnhvà CS (2017) Nghiên cứu đặc điểm gen đột biến bệnh nhân thalassemia Hải Phòng Tạp chí Y học Việt Nam, 458, 144–150 93 Đỗ Thị Thu Giang, Phạm Quang Thanh, Hồ Phương Thúy (2021) Nghiên cứu thực trạng mang gen Thalassemia trẻ em người dân tộc Tày, Dao tỉnh Tuyên Quang Tạp chí khoa học nghiên cứu sức khỏe phát triển, 5(3), 102 109 94 Nguyễn Văn Sơn, Nguyễn Thị Hà, Nguyễn Kiều Giang CS (2016) Nghiên cứu đặc điểm gene đột biến nhóm bệnh nhân điều trị thiếu máu tan máu bẩm sinh khoa nhi bệnh viện đa khoa Trung ương Thái Nguyên Kỷ yếu hội nghị KHCN tuổi trẻ trường ĐH-CĐ y dược Việt Nam lần XVIII-2016, 414–417 95 He S., Li J., Li D.M., et al (2018) Molecular characterization of α- and β-thalassemia in the Yulin region of Southern China Gene, 655, 61–64 96 Bùi Thị Minh Phượng, Tạ Thành Văn (2014) Phát đột biến gen gây bệnh alpha thalassemia kỹ thuật multiplex-PCR Kỷ yếu hội nghị KHCN tuổi trẻ trường ĐH-CĐ y dược Việt Nam, 555–560 97 Renzo G., ADNroulla E., Joanne T., et al (2008) Prevention of thalassemia and other haemoglobin disorders, Volume I Thalass Int Ferderation, 2nd edition 98 Thein S.L (2013) The molecular basis of β-thalassemia Cold Spring Harb Perspect Med, 3(5), a011700 99 Viprakasit V., Tyan P., Rodmai S., et al (2014) Identification and key management of non-transfusion-dependent thalassaemia patients: not a rare but potentially under-recognised condition Orphanet J Rare Dis, 9(1), 131 100.Galanella R, Perseau L, Satta S, Dematis FR, Campus S (2011) Phenotype – Genotype correlation in β-thalassemia Thalass Rep, 1, 16– 20 101.Asadov C., Abdulalimov E., Mammadova T., et al (2017) GenotypePhenotype Correlations of β-Thalassemia Mutations in an Azerbaijani Population Turk J Hematol, 34(3), 258–263 102.Cappellini MD., Cohen A., Androulala E et al (2013) Guidelines for the Clinical Management of Thalassaemia Thalass Int Fed, 2nd 103.Hoàng Văn Ngọc (2007), Nghiên cứu thực trạng bệnh Beta-Thalassemia số yếu tố liên quan trẻ em dân tộc Tày Dao huyện Định hóa tỉnh Thái Nguyên, Luận văn Thạc sĩ y học, Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên 104.Lê Vũ Thức, Nguyễn Thị Phương Mai, Lê Thị Đỗ Quyên CS (2019) Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, điều trị số yếu tố liên quan đến tình trạng ứ sắt bệnh nhi thalassemia Bệnh viện Đa khoa tỉnh Kon Tum năm 2018 Viện sức khỏe cộng đồng, 4(51), 27–31 105.Mã Phương Hạnh, Lâm Thị Mỹ (2009) Đặc điểm bệnh nhân thalassemia thể nặng có ứ sắt Bệnh viện Nhi Đồng Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 13(1), 1–5 106.Cappellini MD, Farmakis D, Porter J, et al (2021), 2021 Guidelines for the management of transfusion dependent thalassemia (TDT), TIF 107.Musallam K.M., Bou-Fakhredin R., Cappellini M.D., et al (2021) 2021 update on clinical trials in β-thalassemia Am J Hematol, 96(11), 1518– 1531 108.Taher AT , Musallam KM , Cappellini MD (2021) β-thalassemias N Engl J Med, 384, 727–743 109.Viprakasit V and Ekwattanakit S (2018) Clinical Classification, Screening and Diagnosis for Thalassemia Hematol Oncol Clin North Am, 32(2), 193–211 110.Fibach E and Rachmilewitz E.A (2017) Pathophysiology and treatment of patients with beta-thalassemia – an update F1000Research, 6, 2156 111 Taher A., Vichinsky E., Musallam K., et al (2013) Guidelines for the Management of Non Transfusion Dependent Thalassaemia (NTDT 112.Bou-Fakhredin R., Tabbikha R., Daadaa H., et al (2020) Emerging therapies in β-thalassemia: toward a new era in management Expert Opin Emerg Drugs, 25(2), 113–122 113.Nguyễn Thị Huyền, Nguyễn Thị Mai Hương Phan Tuấn Hưng (2021) Mối tương quan Ferritin huyết với nồng độ sắt gan T2* tim cộng hưởng từ bệnh nhi thalassemia Tạp chí Nhi khoa, 14(1), 66– 70 114.Modell B., Khan M., and Darlison M (2000) Survival in β-thalassaemia major in the UK: data from the UK Thalassaemia Register The Lancet, 355(9220), 2051–2052 115.Rogers M., Phelan L & Bain B (1995) Screening criteria for beta thalassaemia trait in pregnant women J Clin Pathol, 48(11), 1054–1056 116.Pranpanus S., Sirichotiyakul S., Srisupundit K & Tongsong T (2009) Sensitivity and specificity of mean corpuscular hemoglobin (MCH): for screening alpha- thalassemia-1 trait and beta-thalassemia trait J Med Assoc Thai, 92(6), 739–743 117.Phạm Hải Yến, Nguyễn Thị Thu Hà, Nguyễn Ngọc Dũng (2021) Giá trị cut-off số hồng cầu người mang gen bị bệnh AlphaThalassemia thể nhẹ Tạp chí Y học Việt Nam, 502(5-số chuyên đề), 120– 125 118.Hoàng Thị Ngọc Lan, Trần Vân Quỳnh, Nguyễn Vân Anh, et al (2019) Giá trị MCV, MCH sàng lọc bệnh α-Thalassemia thai phụ Trung tâm Chẩn đoán trước sinh - Bệnh viện Phụ sản trung ương Tạp Chí Phụ Sản, 16(3), 28–34 119.Trần Thị Ánh Loan, Trần Thành Vinh, Hồ Trọng Toàn CS (2019) Nghiên cứu thông số hồng cầu hồng cầu lưới bệnh nhân thiếu máu thiếu sắt Thalassemia Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 23(6), 343–348 120.Trang Thanh Minh Châu, Lâm Thị Mỹ, Trần Thái Bình (2007) Đặc điểm hội chứng thiếu máu huyết tán trẻ em bệnh viện Nhi đồng I từ 01/06/2005 - 01/06/2006 Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 11(1), 56–62 121.Phạm Thị Thanh Nga, Nguyễn Quang Tùng, Nguyễn Chí Thành (2021) Ý nghĩa số số xét nghiệm hồng cầu lưới lâm sàng Tạp chí nghiên cứu Y học, 147(11), 1–6 122.Thein S L (2004) Genetic insights into the clinical diversity of beta thalassaemia Br J Haematol, 124, 164–174 123.Lekshminarayanan A., Bhatt P., Linga V.G., et al (2018) National Trends in Hospitalization for Fever and Neutropenia in Children with Cancer, 2007-2014 J Pediatr, 202, 231-237.e3 124.Cappellini MD, Vip Viprakasit, Cohen A et al (2014) Guidelines for management of transfusion dependent thalassemia (TDT) Thalass Int Fed 125.Betts M., Flight P.A., Paramore L.C., et al (2020) Systematic Literature Review of the Burden of Disease and Treatment for Transfusiondependent β-Thalassemia Clin Ther, 42(2), 322-337.e2 126.Madmoli, Y., Akhaghi Dezfuli, S.M., Beiranvand, R et al (2017) An epidemiological and clinical survey of patients with β-thalassemia in dezful in 2015 Iran J Epidemiol, 13(2), 145–152 127.Arch G Mainous, James M Gill, Charles J Everett (2005) Transferrin Saturation, dietary iron intake and risk of cancer Ann Fam Med, 3, 131– 137 128.Taher A.T., Weatherall D.J., and Cappellini M.D (2018) Thalassaemia The Lancet, 391(10116), 155–167 129.Motta I., Bou-Fakhredin R., Taher A.T., et al (2020) Beta Thalassemia: New Therapeutic Options Beyond Transfusion and Iron Chelation Drugs, 80(11), 1053–1063 130.J C Wood (2011) Impact of Iron Assessment by MRI Hematol Am Soc Hematol Educ Program, 443–450 131.Taher A.T and Cappellini M.D (2018) How I manage medical complications of β-thalassemia in adults Blood, 132(17), 1781–1791 132.Lý Thị Thanh Hà, Ngô Diễm Ngọc CS (2010) Ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử chẩn đoán trước sau sinh bệnh α-thalassemia bệnh viện Nhi Trung ương Tạp chí Nhi khoa, 3(3–4), 337–342 133.Galanello R., Sollaino C., Paglietti E., Barella S., Perra C., Doneddu I., et al (1998) a-Thalassemia Carrier Identification by DNA Analysis in the Screening for Thalassemia Am J Hematol, 59(4), 273–278 134.Li D., Liao C., Li J., Xie X., Huang Y & Zhong H (2006) Detection of alpha- thalassemia in beta-thalassemia carriers and prevention of Hb Bart’s hydrops fetalis through prenatal screening Haematologica, 91(5), 649–651 135.Vichinsky E.P (2013) Clinical manifestations of alpha-thalassemia Cold Spring Harb Perspect Med, 3(5)-a011742 136.Chen F.E., Ooi C., Ha S.Y., et al (2000) Genetic and clinical features of hemoglobin H disease in Chinese patients N Engl J Med, 343(8), 544– 550 137.Viprakasit V (2013) Alpha-thalassemia syndromes: from clinical and molecular diagnosis to bedside management Hematol Educ Programme Educ Programme Annu Congr Eur Hematol Assoc, 7: 11-19, 10 138.Asadov C., Alimirzoeva Z., Mammadova T., et al (2018) β-Thalassemia intermedia: a comprehensive overview and novel approaches Int J Hematol, 108(1), 5–21 139.Nguyễn Thị Mai, Bùi Văn Viên (2010), Nghiên cứu thực trạng bệnh thalassemia bệnh viện Trẻ em Hải Phòng, Luận văn Thạc sĩ y học, Đại học Y Hà Nội 140.Khan A.M., Al-Sulaiti A.M., Younes S., et al (2021) The spectrum of beta-thalassemia mutations in the 22 Arab countries: a systematic review Expert Rev Hematol, 14(1), 109–122 141.Phạm Thị Ngọc Nga (2017), Nghiên cứu di truyền đột biến gây bệnh bệnh nhân Beta thalassemia vùng Đồng sông Cửu Long kỹ thuật sinh học phân tử, Luận án Tiến sĩ y học, Trường Đại học Y Dược Cần Thơ 142.Moghaddam Z.K., Bayat N., Valaei A., Kordafshari et al (2012) Coinheritance of β and α: challenges in prenatal diagnosis of thalassemia Iran J Blood Cancer, 4(2), 51–97 143.Nguyễn Hoàng Nam, Lý Thị Thanh Hà, Dương Bá Trực, et al (2017) Đột biến gen bệnh nhân beta-thalassemia Bệnh viện Nhi Trung ương Tạp chí Nhi khoa, 10(5), 46–51 144.Nguyễn Thị Vân Anh, Hoàng Thị Ngọc Lan, Vũ Hương Ly, et al (2019) Đặc điểm đột biến gen Globin đối tượng nguy cao sinh mắc Thalassemia Trung tâm chẩn đoán trước sinh Bệnh viện Phụ Sản Trung ương năm 2018 Tạp chí phụ sản, 16(3), 22–27 145.Trịnh Văn Bờ Em, Nguyễn Vạn Thông, Nguyễn Thị Thanh Kiều CS (2017) Bước đầu nghiên cứu ứng dụng DNA tự thai máu mẹ (cffDNA) xét nghiệm trước sinh không xâm lấn bệnh beta thalassemia Tạp chí khoa học ĐHQGHN, 33(1S), 97–103 146.Nguyễn Thị Thu Hà, Ngô Mạnh Quân, Bạch Quốc Khánh CS (2021) Khảo sát nguy di truyền gen bệnh huyết sắc tố Thalassemia dân tộc sống số tỉnh miền bắc Tạp chí Y học Việt Nam , 502(5-số chuyên đề), 103–111 147.Vũ Hải Toàn, Nguyễn Thị Thu Hà, Đặng Thị Vân Hồng (2021) Kết chẩn đoán trước sinh cho thai nhi có nguy bị bệnh Thalassemia viện huyết học truyền máu TW từ 2018 đến 2020 Tạp chí Y học Việt Nam , 502(5-số chuyên đề), 142–149 148.Phạm Thị Ngọc Nga, Nguyễn Trung Kiên (2017) Sự di truyền bệnh beta thalassemia 12 gia đình khu vực Đồng sơng Cửu Long Tạp chí Y học Việt Nam , 452(1), 197–201 BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU I Hành Họ tên: Tuổi: Giới tính: Địa chỉ: Điện thoại: Nghề nghiệp: Dân tộc: Tình trạng nhân: Số con: Khi cần báo tin cho: II Tiền sử Bản thân: Lúc nhỏ: Khỏe mạnh Thiếu máu Phát bệnh Thalassemia từ khi: Đã phẫu thuật cắt lách Số lần truyền máu:…… Thể tích máu truyền/lần: Đã sử dụng thuôc thải sắt Bệnh lý kèm theo: Sức khỏe tại: Gia đình: Bố mắc Thalassemia Mẹ mắc Thalassemia Anh, chị em mắc Thalassemia Vợ/chồng mắc Thalassemia Con mắc Thalassemia Chưa có thơng tin III Triệu chứng Hoa mắt chóng mặt Xuất huyết Vàng da Đau nhức xương Sốt Ngất Gãy xương IV Khám lâm sàng Cân nặng: Chiều cao: BMI: Lâm sàng Có/khơng Xuất huyết Gan to Lách to Hạch to Niêm mạc nhợt nhạt nhẹ (+), vừa (++), nặng (+++) Khuôn mặt Thalassemia Vàng da V.Cận lâm sàng Huyết đồ RBC: T/L MCH pg MCHC: g/L Hb g/L RDW: WBC: G/L HCT .l/l MCV fL Điện di Hemoglobin HbA % HbH % HbE % HbA2 % HbF: % Hb khác (S, D, Barts, ) Sinh hóa máu Sắt huyết g/L Ferritine huyết ng/ml Transferrin ng/ml Bilirubin toàn phần u/L Bilirubin trực tiếp u/L AST u/L ALT u/L GGT u/L Chức đông máu Xét nghiệm Kết PT % APTT Fibrinogen giây g/L Kết chụp X-quang Kết chẩn đoán gen VI Chẩn đoán VII Điều trị Hải Phòng, ngày tháng năm Người tham gia nghiên cứu (Ký ghi rõ họ tên) DANH SÁCH BỆNH NHÂN TT Mã BN Họ tên Ngày sinh Giới Địa 74492 BÙI NGỌC M 01.02.2005 Nữ 96168 NGUYỄN HỮU GIA B 09.07.2015 Nam Hồng Bàng - HP 13987 NGUYỄN ANH KH 20.09.2015 Nam An Dương - HP 13986 NGUYỄN VĂN B 19.11.2013 Nam An Dương - HP 266491 NGUYỄN NGỌC TƯỜNG S 12.02.2020 Nữ Hải An - HP 58362 NGUYỄN HÀ G 01.08.2005 Nữ An Dương - HP 79713 NGUYỄN VĂN PH 29.07.2017 Nam Vĩnh Bảo - HP 19523 NGUYỄN VĂN C 01.06.2002 Nam Thủy Nguyên - HP 146125 ĐẬU THÁI THÙY L 12.04.2015 Nữ 10 206217 LÊ GIA B 09.03.2018 Nam Tứ Kỳ - HD 11 5509 ĐỒNG GIA KH 11.01.2010 Nam Dương Kinh - HP 12 260140 ĐỖ BÀN THÀNH TR 30.09.2017 Nữ Dương Kinh - HP 13 261559 ĐÀO NGỌC A 09.08.2019 Nữ Thủy Nguyên - HP 14 59875 CÙ VĂN H 04.02.2019 Nam Thủy Nguyên - HP 15 12857 NGUYỄN DIỆU Q 05.12.2007 Nữ An Dương - HP 16 202789 NGUYỄN PHƯƠNG TH 02.11.2013 Nữ An Dương - HP 17 5494 PHẠM HOÀI A 08.06.2015 Nữ Dương Kinh - HP 18 48005 VŨ MINH D 18.04.2008 Nam An Lão - HP 19 139101 NGUYỄN THỊ PHƯƠNG A 22.11.2003 Nữ 20 71748 NGUYỄN MINH PH 25.09.2017 Nam Tiên Lãng - HP 21 103939 HOÀNG KHÁNH N 22.01.2012 Nam Thủy Nguyên - HP 22 89852 LẠI GIA PH 16.09.2016 Nam An Dương - HP 23 122192 NGUYỄN GIA H 19.03.2018 Nam Tiên Lãng - HP 24 52607 NGUYỄN DUY NH 28.12.2003 Nam Kiến Thụy - HP 25 12573 DỖ BINH M 24.11.2006 Nữ 26 5586 NGUYỄN TIẾN D 27.09.2008 Nam Ngô Quyền - HP 27 1611 PHẠM QUANG H 23.05.2008 Nam An Dương - HP 28 1533 VŨ QUỐC Đ 29.05.2011 Nam Thủy Nguyên - HP 29 5471 NGUYỄN THỊ NGỌC M 14.08.2013 Nữ Lê Chân - HP Quỳnh Lưu - NA Ngô Quyền - HP An Dương - HP Hải An - HP 30 1573 NGUYỄN TRỌNG H 22.11.2010 Nam Tiên Lãng - HP 31 32629 LÊ HUYỀN A 20.12.2014 Nữ Hồng Bàng - HP 32 1656 ĐỖ ÁNH D 07.12.2011 Nữ Lê Chân - HP 33 8952 ĐỖ THỊ THU TH 17.04.2007 Nữ An Lão - HP 34 218220 NGUYỄN TÙNG L 21.05.2019 Nam Thái Thụy - TB 35 112867 ĐỖ THÙY L 20.07.2011 Nữ 36 48124 LÊ VĂN D 04.11.2011 37 104662 ĐINH THỊ KHÁNH L 28.08.2008 Nữ Kiến Thụy - HP 38 1677202 LÊ THỊ MỸ V 24.11.2015 Nữ Kiến An - HP 39 19529 NGUYỄN VĂN K 17.10.2011 Nam Thủy Nguyên - HP 40 39282 LÊ THẾ B 22.08.2009 Nam Thủy Nguyên - HP 41 12544 PHẠM THỊ THU Q 28.02.2002 Nữ 42 12714 TRINH DUY H 20.09.2012 Nam Thủy Nguyên - HP 43 648844 ĐỖ KIM C 10.10.2015 Nữ An Lão - HP 44 16356 ĐỖ HỒNG G 10.10.2015 Nữ An Lão - HP 45 1696885 BÙI MINH Q 21.06.2016 Nam Kiến An - HP 46 35631 PHÙNG KHÁNH NG 26.09.2015 Nữ 47 32676 HÀ DUY H 25.08.2007 Nam Thủy Nguyên - HP 48 5453 ĐỖ ĐĂNG C 23.01.2001 Nam Thủy Nguyên - HP 49 5612 NGUYỄN TIẾN TH 17.08.2010 Nam An Lão - HP 50 19590 VŨ NGỌC D 11.07.2013 Nữ 51 1464 VŨ TÙNG L 07.10.2015 Nam An Lão - HP 52 24920 HOÀNG MINH NH 02.11.2002 Nam Thủy Nguyên - HP 53 24969 ĐẬU HẢI Y 28.08.2007 Nữ Ngô Quyền - HP 54 5329 PHẠM THẢO A 10.10.2009 Nữ Kiến Thụy - HP 55 1635 NGUYỄN TUẤN H 28.10.2006 Nam Dương Kinh - HP 56 1561 BÙI THỊ H 31.01.2009 Nữ Thủy Nguyên - HP 57 5389 BÙI THỊ KHÁNH CH 21.02.2007 Nữ An Lão - HP 58 30282 LƯU ĐỨC CH 10.09.2015 Nam An Lão - HP 59 59302 LƯU NGỌC LAN V 11.08.2015 Nữ An Dương - HP 60 206968 LÊ THỊ NG 18.08.2013 Nữ Tứ Kỳ - HD Kim Thành - HD Nam Dương Kinh - HP Lê Chân - HP Kiến An - HP An Lão - HP 61 202414 NGUYỄN HOÀNG PH 14.03.2011 Nam Cát Hải - HP 62 70517 VŨ ĐỨC TH 09.12.2012 Nam Hải An - HP 63 5426 TRẦN ĐỨC TH 02.04.2005 Nam An Lão - HP 64 19417 VŨ HOÀNG QUỲNH A 16.04.2011 Nữ Ngô Quyền - HP 65 1643955 TRẦN QUỲNH TR 05.06.2015 Nữ Vĩnh Bảo - HP 66 285260 PHẠM NGUYỆT NHI 17.04.2015 Nữ Kiến Thụy - HP 67 19436 ĐÀO THỊ KHÁNH NG 24.08.2004 Nữ An Lão - HP 68 1757 NGUYỄN THÙY A 18.11.2004 Nữ Lê Chân - HP 69 1383 ĐẶNG CHÂU A 26.01.2004 Nữ Hồng Bàng - HP 70 1717 LÊ QUANG B 19.04.2011 Nam Thủy Nguyên - HP 71 1730 LÊ QUANG Đ 20.08.2008 Nam Thủy Nguyên - HP 72 234504 VŨ THÀNH Đ 03.10.2019 Nam An Dương - HP 73 37072 LẠI GIA B 13.11.2010 Nam An Dương - HP 74 212690 NGUYỄN MAI PH 10.02.2008 Nữ 75 261756 NINH GIA H 30.03.2020 Nam Kim Thành - HD 76 16140 VŨ NGỌC TH 18.01.2003 Nam Vĩnh Bảo - HP 77 12795 BÙI ANH V 11.05.2006 Nam Lê Chân - HP 78 121646 LÝ THIÊN NH 23.09.2017 Nam Lục Ngạn - BG 79 188348 VŨ QUỲNH A 12.02.2019 Nữ An Lão - HP 80 27675 NGHIÊM MINH TH 21.08.2015 Nữ Lê Chân - HP 81 8969 PHẠM THỊ LAN A 23.06.2007 Nữ Kiến An - HP 82 318658 TRẦN MINH CH 02.03.2021 Nữ Ngơ Quyền - HP 83 319496 NGUYỄN CƠNG Đ 15.07.2011 Nam Hải An - HP 84 12684 PHẠM VĂN H 14.07.2015 Nam An Lão - HP 85 12690 PHẠM VĂN CH 14.07.2015 Nam An Lão - HP Hồng Bàng - HP ... đột biến gen đối chiếu kiểu gen với kiểu hình bệnh nhi Thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng? ?? với mục tiêu sau: 1, Xác định số đột biến gen bệnh nhi Thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng từ... 49 3.1 Đột biến gen gây bệnh Thalassemia bệnh nhi Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng 49 3.2 Đối chiếu kiểu gen với kiểu hình bệnh nhi Thalassemia Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y-DƯỢC HẢI PHÒNG ĐỖ THỊ QUỲNH MAI PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘT BIẾN GEN VÀ ĐỐI CHIẾU KIỂU GEN VỚI KIỂU HÌNH CỦA BỆNH NHI THALASSEMIA TẠI BỆNH VIỆN TRẺ EM HẢI PHÒNG