BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, ĐỘC TÍNH VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ VIÊM LOÉT DẠ DÀY TÁ TRÀNG CỦA LÁ CÂY XĂNG XÊ (Sanchezia nobilis Hook f[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, ĐỘC TÍNH VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ VIÊM LOÉT DẠ DÀY TÁ TRÀNG CỦA LÁ CÂY XĂNG XÊ (Sanchezia nobilis Hook.f.) LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, ĐỘC TÍNH VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ VIÊM LOÉT DẠ DÀY TÁ TRÀNG CỦA LÁ CÂY XĂNG XÊ (Sanchezia nobilis Hook.f.) CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU – DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 9720206 LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học TS Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác i LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu hồn thiện luận án, tơi nhận giúp đỡ vô quý báu thầy cô giáo, nhà khoa học thuộc nhiều lĩnh vực đồng nghiệp, bạn bè gia đình Trước hết, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới , người Thầy, Cô trực tiếp hướng dẫn, hết lịng bảo tận tình động viên tơi q trình học tập nghiên cứu khoa học Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới PGS.TS người thầy giúp bắt đầu thực nghiên cứu Trong trình thực luận án, tơi ln nhận giúp đỡ quan, đơn vị cá nhân Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo, Khoa, Phòng đồng nghiệp phòng thí nghiệm trung tâm - Viện Dược liệu, Bộ mơn Dược lý – Trường Đại học Y Hà Nội, Phòng thí nghiệm trung tâm – ĐHQGHN giúp đỡ, tạo điều kiện để giúp tơi suốt q trình thực nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn Bộ mơn Y Dược cộng đồng Y Dự phịng, trường ĐH Y Dược - ĐHQGHN, nơi công tác, động viên tinh thần tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Cuối tơi xin cảm ơn sâu sắc tới người thân yêu gia đình; cảm ơn bạn bè thân thiết dành cho tơi tình cảm, động viên, giúp đỡ suốt thời gian qua Xin trân trọng cảm ơn tất giúp đỡ quý báu này! ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ix ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại, đặc điểm thực vật phân bố chi Sanchezia 1.1.1.Vị trí phân loại chi Sanchezia 1.1.2 Thành phần loài phân bố chi Sanchezia 1.1.3 Đặc điểm thực vật 1.2 Thành phần hóa học chi Sanchezia 1.3 Tác dụng sinh học chi Sanchezia 18 1.3.1 Độc tính cấp 18 1.3.2 Tác dụng chống viêm 19 1.3 Tác dụng giảm đau 20 1.3.4 Tác dụng kháng vi sinh vật 20 1.3.5 Tác dụng hệ tiêu hóa 22 1.3.6 Các tác dụng khác 22 1.4 Công dụng 24 1.5 Bệnh lý viêm loét dày, tá tràng 25 1.5.1 Định nghĩa 25 1.5.2 Nguyên nhân gây viêm loét dày tá tràng 25 1.5.3 Những tác nhân gây tăng tiết giảm khả bảo vệ dày tá tràng 27 1.5.4 Triệu chứng chẩn đoán viêm loét dày tá tràng 28 1.6 Các mơ hình gây lt dày, tá tràng thực nghiệm 28 1.6.1 Mơ hình gây viêm loét phương pháp vật lí 28 1.6.2 Mơ hình gây viêm lt phương pháp hóa học 30 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 Nguyên vật liệu nghiên cứu 35 iii 2.1.1 Nguyên liệu 35 2.1.2 Hóa chất – dụng cụ 35 2.1.3 Động vật thí nghiệm 37 2.2.Phương pháp nghiên cứu 38 2.2.1 Phương pháp giám định tên khoa học 38 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học 38 2.2.3 Đánh giá độc tính tác dụng sinh học 39 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 46 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 47 3.1 Đặc điểm thực vật Xăng xê 47 3.1.1 Đặc điểm hình thái Xăng xê 47 3.1.2 Kết giám định tên khoa học 48 3.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa học 49 3.2.1 Kết chiết xuất phân lập hợp chất 49 3.2.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 56 3.3 Kết nghiên cứu độc tính tác dụng sinh học 88 3.3.1 Kết thử độc tính cấp 88 3.3.2 Kết thử độc tính bán trường diễn 89 3.3.3 Kết nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dày 97 3.3.4 Kết đánh giá tác dụng giảm đau 107 CHƯƠNG IV BÀN LUẬN 111 4.1 Về đặc điểm thực vật 111 4.2 Về thành phần hóa học lồi Sanchezia nobilis Hook.F 112 4.3 Về độc tính tác dụng sinh học loài Sanchezia nobilis Hook.F 126 4.3.1 Về độc tính 126 4.3.2 Về tác dụng sinh học 128 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 137 KẾT LUẬN 137 Về thành phần hóa học lồi Sanchezia nobilis Hook.F 137 Về độc tính tác dụng sinh học loài Sanchezia nobilis Hook.F (Xăng xê) 137 KIẾN NGHỊ 138 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt δ H-NMR 13 C-NMR AChE ALT AST CHCl3 cs CTPT COSY d DCM Dd DD-TT DĐVN V DEPT DMSO DPPH DL ED50 EDTA ESI-MS EtOAc FT-IR H.P HMBC Nội dung viết tắt Nghĩa tiếng Việt Độ dịch chuyển hóa học Proton nuclear magnetic resonance Carbon (13) nuclear magnetic resonance Acetylcholinesterase Alanine Transaminase Aspartate transaminase Chloroform Correlation Spectroscopy Doublet Dichloromethan Dung dịch Dạ dày tá tràng Dược điển Việt Nam V Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Dimethyl sulfoside 2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl Dược liệu Effective Dose 50% Ethlylene Diamine Tetracetic Acid Electron Spray Ionization Mass Spectrometry Ethyl acetate Fourier-transform infrared spectroscopy Helicobacter pylori Heteronuclear Multiple Bond Correlation v Phổ cộng hưởng từ proton 1HNMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13CNMR Acetylcholinesterat Cộng Công thức phân tử Phổ COSY tương tác H-H cạnh Đỉnh đôi phổ 1H-NMR Phổ DEPT Liều có hiệu 50% Phổ khối phun mù điện tử Ethyl acetat Phổ hồng ngoại Vi khuẩn Helicobacter pylori Phổ tương tác di hạt nhân qua nhiều liên kết HPLC HSQC HR-ESI MS IC50 LC50 LD50 MeOH M.I.C MS MTT Nxb NMR NOESY ORAC P-HPLC s SKC SKLM t δH, δC High-performance liquid chromatography Heteronuclear Single Quantum Coherence High Resolution electrospray ionsation mass Spectrometry Half maximal inhibitory concentration Half maximal Lethal Concentration Half maximal Lethal Dose Methanol Minimum Inhibitory Concentration Mass Spectroscopy 3-[4,5-dimetylthiazol-2-yl]2,5-điphenyltetrazol brom Nuclear Magnetic Resonance Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy Oxygen radical absorbance capacity Preparative High Performance Liquid Chromatography Singlet Triplet J vi Sắc ký lỏng hiệu cao Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết Phổ khối phân giải cao phun mù điện tử Nồng độ ức chế 50% Nồng độ gây chết 50% Liều lượng gây chết 50% Nồng độ ức chế tối thiểu Phổ khối lượng Nhà xuất Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Phổ tương tác không gian H-H Khả hấp thụ gốc oxy hóa Sắc ký lỏng hiệu cao điều chế Pic đơn phổ 1H NMR Sắc ký cột Sắc ký lớp mỏng Pic ba đỉnh phổ 1H-NMR Độ chuyển dịch hóa học proton cacbon Hằng số tương tác (đơn vị Hz) DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần loài phân bố chi Sanchezia Bảng Các công bố thành phần hóa học chi Sanchezia Thế giới Việt Nam 16 Bảng Các mức liều thử tác dụng sinh học cao tổng cao phân đoạn Xăng xê 40 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất SXH1 chất tham khảo 56 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất SXH2 chất tham khảo 58 Bảng 3.3 Dữ liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất SXH3 chất tham khảo 60 Bảng 3.4 Dữ liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất SXH4 61 Bảng 3.5 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXH6 chất tham khảo 63 Bảng 3.6 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXH7 chất tham khảo 65 Bảng 3.7 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE8 chất tham khảo 67 Bảng 3.8 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE9 69 Bảng 3.9 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE10 chất tham khảo 71 Bảng 3.10 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE11 chất tham khảo 72 Bảng 3.11 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE12 chất tham khảo 73 Bảng 3.12 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE13 chất tham khảo 74 Bảng 3.13 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE14 chất tham khảo 76 Bảng 3.14 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE15 chất tham khảo 77 Bảng 3.15 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE16 chất tham khảo 79 Bảng 3.16 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE17 chất tham khảo 80 Bảng 3.17 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE18 chất tham khảo 82 Bảng 3.18 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE19 chất tham khảo 84 Bảng 3.19 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE20 chất tham khảo 85 Bảng 3.20 Dữ liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất SXE22 chất tham khảo 87 Bảng 3.21 Kết thử độc tính cấp cao phân đoạn dịch chiết từ Xăng xê 88 Bảng 3.22 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến thể trọng chuột 90 Bảng 3.23 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến khả tạo máu 91 vii Bảng 3.24 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến số lượng bạch cầu công thức bạch cầu 92 Bảng 3.25 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến số lượng tiểu cầu máu chuột 93 Bảng 3.26 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến mức độ hủy hoại tế bào gan (AST/ALT) 93 Bảng 3.27 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến chức gan (bilirubin, albumin, cholesterol toàn phần máu chuột) 94 Bảng 3.28 Ảnh hưởng cao ethyl acetat đến chức thận 95 Bảng 3.29 Hình ảnh vi thể gan chuột 95 Bảng 3.30 Hình ảnh vi thể thận chuột 96 Bảng 3.31 Tỷ lệ chuột có lt sau thắt mơn vị 97 Bảng 3.32 Ảnh hưởng mẫu cao toàn phần đến mức độ nặng tổn thương loét 97 Bảng 3.33 Ảnh hưởng mẫu cao tồn phần đến điểm số lt trung bình, số loét 98 Bảng 3.34 Ảnh hưởng mẫu cao toàn phần đến thể tích dịch vị, 99 Bảng 3.35 Hình ảnh đại thể, vi thể dày chuột lô 100 Bảng 3.36 Tỷ lệ chuột có lt sau thắt mơn vị 102 Bảng 3.37 Ảnh hưởng mẫu cao phân đoạn đến mức độ nặng tổn thương loét 102 Bảng 3.38 Ảnh hưởng mẫu cao phân đoạn đến điểm số loét 103 Bảng 3.39 Ảnh hưởng mẫu cao phân đoạn đến thể tích dịch vị, độ acid tự do, độ acid toàn phần pH dịch vị 104 Bảng 3.40 Hình ảnh đại thể, vi thể dày chuột lô 105 Bảng 3.41 Ảnh hưởng mẫu thử cao toàn phần cao phân đoạn lên thời gian phản ứng với nhiệt độ chuột nhắt trắng 107 Bảng 3.42 Ảnh hưởng mẫu thử cao toàn phần cao phân đoạn lên lực gây đau máy đo ngưỡng đau 108 Bảng 3.43 Ảnh hưởng mẫu thử cao toàn phần cao phân đoạn lên 109 viii ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC, ĐỘC TÍNH VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ VIÊM LOÉT DẠ DÀY TÁ TRÀNG CỦA LÁ CÂY XĂNG XÊ (Sanchezia nobilis Hook. f. ). .. độc tính số tác dụng sinh học hỗ trợ điều trị viêm loét dày, tá tràng Xăng xê (Sanchezia nobilis Hook. f. )? ??’ với mục tiêu: Mục tiêu 1: Phân lập xác định cấu trúc hóa học số hợp chất từ Xăng xê. .. khoa học mẫu nghiên cứu Về thành phần hóa học - Chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất theo hướng phân đoạn có tác dụng sinh học Xăng xê Về độc tính tác dụng sinh học - Xác định độc tính