Ứng dụng của phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) trong ngành Dược Nhóm 6 Kết quả sắc ký cho thấy thời gian lưu của mẫu thử (viên nang) tương ứng trùng với thời gian lưu của pic Cefixim trong dung dịch mẫu chuẩn. ⇨ Có thể kết luận trong viên nang cefixim A100 có chứa Cefixim
Ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) ngành Dược Nhóm Nhóm Đỗ Hải Yến Triệu Thị Trang Đỗ Thị Thanh Hằng Phạm Hà Trang Vũ Thị Hải Vũ Thu Hiền Vũ Tú Tâm Lê Thị Thu Hà Trần Thị Thùy Linh Nguyễn Thị Trang Nội dung tắc Nguyên Ưu, nhược điểm 02 Cấu tạo máy 04 Ứng dụng Nguyên tắc • ⮚ ⮚ • • ⇨ Là phương pháp phân tách chất 02 pha áp suất cao (pha động pha tĩnh) Pha động: chất lỏng Pha tĩnh: hạt có kích thước cỡ μm nhồi cột Nhờ có áp suất cao mà pha động dịch chuyển qua pha tĩnh mang theo thành phần hỗn hợp cần phân tích Lực liên kết chất phân tích pha tĩnh khác Tách rời Chất phân tích F1 F2 Pha tĩnh Pha động F3 Cấu tạo máy Pha động Hệ dung môi Cột pha tĩnh Detector Máy tính điều khiển Buồng tiêm mẫu Bơm • • • • Ưu, nhược điểm • Chi phí đầu tư tương đối tốn Nhược điểmphân Ưu điểm • Thời gian Có thể phân tích nhiều loại chất khác tích tương đối Khả phân tách tốt Độ xác cao lâu Độ nhạy cao • Địi hỏi khắt khe độ tinh khiết Ứng dụng Kiểm soát ổn định thuốcWORDS Nghiên cứu dược động học dạng bào chế dược phẩmRDS Kiểm soát chất lượng dược phẩmRDS Định lượng viên nang Cefixim • Mẫu chuẩn: Cefixim hàm lượng nguyên trạng 86.17% (Viện kiểm nghiệm thuốc trung ương) • Mẫu thử: viên nang cứng A100 chứa hoạt chất cefixim, hàm lượng 100mg Định lượng viên nang Cefixim Định lượng viên nang Cefixim Chuẩn bị mẫu chuẩn 40mg cefixim chuẩn + 70mL dd đệm pH = Siêu âm, pha loãng dd đệm đến vạch Pha loãng đến vạch, trộn Lọc qua màng milipore 0.45um Hút 10mL V= 100mL V = 20mL Định lượng viên nang Cefixim Chuẩn bị mẫu thử 20 viên nang tương ứng với 300mg cefixim thử + 75mL dd đệm pH = Siêu âm, pha loãng dd đệm đến vạch Pha loãng dd đệm đến vạch, trộn Lọc qua màng milipore 0.45um Hút 10mL V= 100mL V = 50mL Định lượng viên nang Cefixim Kết Định lượng viên nang Cefixim Định tính Cefixim Kết sắc ký cho thấy thời gian lưu mẫu thử (viên nang) tương ứng trùng với thời gian lưu pic Cefixim dung dịch mẫu chuẩn ⇨ Có thể kết luận viên nang cefixim A100 có chứa Cefixim Định lượng viên nang Cefixim Định lượng Cefixim ⮚ Định lượng theo kỹ thuật ngoại chuẩn nhiều điểm (đường chuẩn) Định lượng viên nang Cefixim Định lượng Cefixim ⮚ Xây dựng đường chuẩn y=ax+b Trong đó, x biểu thị nồng độ Cefixim, y diện tích pic trung bình mẫu dung dịch chuẩn f(x) = 26141848.12x + 2039189.65 R² = Định lượng viên nang Cefixim Định lượng Cefixim Định lượng viên nang Cefixim Định lượng Cefixim Với lượng mẫu thử mT = 301.1 (mg) sau chạy HPLC ta có ST= 7315928.3 (mAu) Ta tính toán % hàm lượng cefixim mẫu thử so với hàm lượng nhãn: %Hàm lượng = 98.99% Định tính Stigmasterol Ráy (Alocasia odora (Roxb.) C.Koch • Mẫu chuẩn: stigmasterol chuẩn • Mẫu thử: bột dược liệu từ ráy Định tính Stigmasterol Ráy (Alocasia odora (Roxb.) C.Koch Định tính Stigmasterol Ráy (Alocasia odora (Roxb.) C.Koch Chuẩn bị mẫu chuẩn 20mg stigmasterol chuẩn/100mL MeOH Siêu âm min, lọc qua màng lọc 0.45um ... cột Nhờ có áp suất cao mà pha động dịch chuyển qua pha tĩnh mang theo thành phần hỗn hợp cần phân tích Lực liên kết chất phân tích pha tĩnh khác Tách rời Chất phân tích F1 F2 Pha tĩnh Pha động... Chi phí đầu tư tương đối tốn Nhược điểmphân Ưu điểm • Thời gian Có thể phân tích nhiều loại chất khác tích tương đối Khả phân tách tốt Độ xác cao lâu Độ nhạy cao • Đòi hỏi khắt khe độ tinh khiết... dung tắc Nguyên Ưu, nhược điểm 02 Cấu tạo máy 04 Ứng dụng Nguyên tắc • ⮚ ⮚ • • ⇨ Là phương pháp phân tách chất 02 pha áp suất cao (pha động pha tĩnh) Pha động: chất lỏng Pha tĩnh: hạt có kích thước