Câu hỏi Câu 1 Khi xác định Vibrio trong sản phẩm thủy sản, chúng ta nên phân tích định tính hay định lượng? Ở mỗi hướng thì sẽ có ưu nhược điểm gì? Câu 2 Một chế phẩm probiotic muốn ứng dụng vào thủy. Câu hỏi thi ứng dụng trong nuôi thủy sản
Câu hỏi: Câu 1: Khi xác định Vibrio sản phẩm thủy sản, nên phân tích định tính hay định lượng? Ở hướng có ưu nhược điểm gì? Câu 2: Một chế phẩm probiotic muốn ứng dụng vào thủy sản cần tiêu nào? Kể tên tiêu chí theo thứ tự ưu tiên từ xuống Câu 3: Điều kiện để phát triển chế phẩm vi sinh phịng bệnh NTTS gì? Kể tên điều kiện theo thứ tự ưu tiên từ xuống? Câu 4: LD50, ID50 ED50 gì? Tại phải xác định số đó? Quy trình thực nào? Bài làm Câu 1: - Khi xác định Vibrio sản phẩm thủy sản, nên phân tích định lượng Vibrio lượng định thể triệu chứng - Ưu nhược điểm phân tích định lượng : *Ưu điểm: Xác định số lượng Vibrio có mẫu *Nhược điểm: Khơng thể phân lập vi sinh vật có mẫu - Ưu nhược điểm phân tích định tính *Ưu điểm: Có thể phân lập vi sinh vật có mẫu *Nhược điểm: Khơng biết số lượng vi sinh vật có mẫu Câu 2: Một chế phẩm probiotic muốn ứng dụng vào thủy sản cần tiêu: - Tính an tồn (chủng vi sinh vật có nguồn gốc rõ ràng, có lịch sử an tồn khơng kháng kháng sinh): - Cơng nghệ ( lên men ổn định, bền bảo quản ) - Chức ( chịu dịch dày, kháng acid mật, tính bám dính tốt ) - Những tiêu chuẩn dùng để chọn lọc dòng vi khuẩn probiotic: + Tính an tồn: chủng phải cơng nhận an toàn + Nguồn gốc chủng vi sinh: phân lập định dnah đến dòng ( strain ) + Kháng với điều kiện thí nghiệm in vitro in vivo: sau sử dụng probiotic vi sinh chế phẩm không bị giết thể bảo vệ vật chủ kháng lại điều kiện bất lợi đường ruột pH, dịch mật,… + Hoạt tính kháng vi khuẩn bệnh: vi khuẩn lactic có đặc tính kháng khuẩn lực sản sinh acid lactic làm giảm pH đường ruột, giảm lực oxy hóa khử, sản sinh hydrogen peroxide điều kiện hiếu khí, sản sinh chất ức chế bacteriocin Các lồi Bacillus có khả sản sinh số lớn kháng khuẩn bacteriocin, subtilin, coagulin + Khả đáp ứng miễn dịch: kích thích tế bào biểu mơ ruột tăng tiết niêm dịch (mucins) để bảo vệ hàng rào biểu mơ, kích thích mơ lympho gắn với ruột (GALT: Gut Associated Lymphoid Tisues) tăng tiết kháng thể để tiêu diệt vi khuẩn bệnh + Khả bão toàn mật độ: vi khuẩn probiotic phải sống có nồng độ cao (≥ 107 CFU/g chế phẩm) Câu 3: Điều kiện để phát triển chế phẩm vi sinh phòng bệnh NTTS : - Cần phải có ý tưởng chế phẩm vi sinh phịng bệnh NTTS - Cần có sở khoa học công nghệ phụ vụ cho việc tạo chế phẩm - Nhu cầu thị trường sản phẩm chế phẩm - Cần có kinh phí phụ vụ cho q trình nghiên cứu hồn thiện chế phẩm - Nếu nhân thực cần có quan đứng sau để hỗ trợ - Cần có đội ngũ hỗ trợ với phòng chức thiết bị Câu 4: - LD50 ( lethal dose ) liệu lượng gây chết tối thiểu 50% - ID50 ( infectious dose ) nồng độ gây nhiễm 50% mẫu thí nghiệm - ED50 ( effective dose ) liều tạo phản ứng mong muốn 50% mẫu thí nghiệm - Phải xác định số để đánh giá tiềm gây độc hại sản phẩm đó, biết liều lượng gây chết, nồng độ gây nhiễm sử dụng liều lượng để đạt mong muốn - Quy trình thực xác định số: * Quy trình thực xác định số LD50: + Chuẩn bị vi khuẩn gây bệnh vật chủ ( tôm ) +Các thí nghiệm bố trí khay với 10 tôm bệnh lặp lại lần + Tôm ngâm với Vibrio mật độ khác nhau, đối chứng không bổ sung vi khuẩn Mật độ vi khuẩn thực nghiệm xác định thông qua đường đưuòng tương quan giá trị OD610nm mật độ vi khuẩn vibrio thử nghiệm Tôm nhịn đố 12 sau nhiễm Ghi nhận số tôm chết ngày tôm ngừng chết liên tục ngày chết hoàn toàn LD50= 10lũy thừa nồng độ gây chết nhỏ 50% - PD Trong PD (tỷ lệ tơm chết thấp 50% - 50%) × ( tỷ lệ tơm chết thấp 50 % - tỷ lệ tơm chết cao 50% )-1 *Quy trình thực xác định số ID50: + Chuẩn bị vi khuẩn gây bệnh vật chủ ( tôm ) + Ngâm tôm với vi khuẩn gây bệnh mật độ khác nhau, đối chứng có vi khuẩn gây bệnh mẫu cịn lại có vi khuẩn gây bệnh chủng vi khuẩn cần khảo sát + Không cho ăn thời gian thí nghiệm ID50= Phần trăm bịchết độ phaloãng trên50 %−50 % Phàn trăm bị chết độ pha loãng 50 %− phần trăm bị chết độ pha loãng 50 % Áp dụng số tính cơng thức cho độ pha loãng tạo tỷ lệ nhiễm trùng 50 phần trăm = Sự pha loãng huyền phù vi rút chứa đơn vị EID 50 vi rút 0,1 mL mL huyền phù vi rút chứa gấp mười lần nghịch đảo độ pha lỗng tính tốn Do tính lây nhiễm Chuẩn độ huyền phù vi rút / mL = ... trường sản phẩm chế phẩm - Cần có kinh phí phụ vụ cho q trình nghiên cứu hồn thi? ??n chế phẩm - Nếu nhân thực cần có quan ? ?ứng sau để hỗ trợ - Cần có đội ngũ hỗ trợ với phòng chức thi? ??t bị Câu 4:... khuẩn lực sản sinh acid lactic làm giảm pH đường ruột, giảm lực oxy hóa khử, sản sinh hydrogen peroxide điều kiện hiếu khí, sản sinh chất ức chế bacteriocin Các lồi Bacillus có khả sản sinh số... lethal dose ) liệu lượng gây chết tối thi? ??u 50% - ID50 ( infectious dose ) nồng độ gây nhiễm 50% mẫu thí nghiệm - ED50 ( effective dose ) liều tạo phản ứng mong muốn 50% mẫu thí nghiệm - Phải