BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC *** *** BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP VI SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG MÃ HP CS113 NHÓM 01 (Chiều thứ 3 8/8 – 29/8) GIẢN[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC *** *** BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP VI SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG MÃ HP: CS113 NHÓM: 01 (Chiều thứ 3: 8/8 – 29/8) GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: NGUYỄN THỊ LIÊN NHÓM SINH VIÊN THỰC HIỆN: LÂM THỊ CẨM DUYÊN ĐẶNG THỊ MỸ HUYỀN PHẠM ĐÌNH KHANG ĐẶNG THỊ CẨM LINH TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat MS B2107 B2107 B2107 B2111 BÀI 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC I TRẢ LỜI CÂU HỎI: Thứ tự Câu hỏi Vai trị dầu cèdre sử dụng vật kính Câu trả lời Dầu cèdre có chiết xuất n=1,5 t tự thủy tinh nên tạo mộ trường ĐỒNG CHIẾT XUẤT X100 dầu ánh sáng bị khúc xạ tập vào độ vật kính X10 quan sát ảnh rõ Cách bảo quản vật kính X100 sau nhỏ Do dầu cèdre dễ bị oxi hóa kh đưa ánh sáng thời ngắn [10 – 15 phút] kết s vật kính X100 bị ố hỏng l nên vệ sinh vật kính X10 sử dụng để nhằm bảo kính X100 lâu Đầu tiên dùng giấy [giấ mặt] lau qua lớp dầu cèdre dính vật kính X100, Dùng tờ giấy thứ hai xylol (dung môi hữu hỡn hợp cồn cao độ + ethe cho hết dầu cịn sót lại vật X100, Cuối dùng tờ giấy th lau lại cho dầu xylol + ether hai loại làm ta keo dán thấu kính ống kín vật kính X100 Trong vật dụng KIM LOẠI, CAO Khử trùng nhiệt khô: thủy SU, THỦY TINH, NƯỚC CẤT, MÔI kim TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat TRƯỜNG NUÔI CẤY; đem khử trùng loại khử trùng loại khử trùng NHIỆT KHÔ khử trùng NHIỆT ƯỚT Khử trùng nhiệt ướt: Cao su, cất, môi trường nuôi cấy Lưu ý: Nên chọn loại cao su hợp để tránh bị nóng chảy kh trùng nhiệt ướt Tại bắt đầu khử trùng với nồi khử Vì: Nếu cịn khơng khí bên trùng nhiệt ướt phải xả hết khơng khí nồi khơng thể đạt nhi nồi ra? mà ta mong muốn Không đạt nhiệt độ đủ cao khơng loại bỏ tồn vi sinh vật có th nhiễm vào mẫu vật thí nghiệm ta nên xả hết khơng khí áp suất đạt mức thích hợp để c đạt nhiệt độ mà ta mong muốn Nếu môi trường lỏng nên KHỬ Ta nên khử trùng nồi TRÙNG thiết bị cho thích hợp? trùng nhiệt ướt Tại sao? Vì: Nếu khử trùng mơi trường tủ khử trùng nhiệt khơ, kh nhiệt độ q cao nước môi trường lỏng bốc hết v cháy mơi trường Cịn nồi khử nhiệt ướt lượng nước bố môi trường lỏng bão bốc ngưng nhiêu nên khơng làm ảnh h đến thành phần môi trường ta thường dùng nồi khử trùng ướt để khử trùng môi tr lỏng, môi trường nuôi cấy vi sin hay nước tinh khiết tiệt trùng TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat II THỰC HÀNH: Sinh viên thực tập sử dụng kính hiển vi để quan sát vẽ hình nhóm vi sinh vật: NẤM MỐC, NẤM MEN, VI KHUẨN Hình 1.1 Vi khuẩn Hình 1.2 Nấm men TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Hình 1.3 Nấm mốc BÀI 2: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY & CÁC NGUỒN VI SINH VẬT I.TRẢ LỜI CÂU HỎI: Th ứ tự Câu hỏi Câu trả lời Cho biết công dụng agar môi trường nuôi cấy Thử phân loại môi trường khoai tây – agar thuộc loại môi trường gì? Phân loại: - Vì có lồi vi sinh vật có khả phân hủy agar Vì agar sử dụng để làm chất chống đỡ trường nuôi cấy - Theo trạng thái vật lý: Môi trường đặc - Theo nguồn gốc vật liệu: Môi tr thiên nhiên - Theo công dụng: Môi trường Nếu môi trường khoai tây – agar khử trùng tủ khử trùng nhiệt khơ 121°C, có không? Tại sao? - Không thể khử trùng môi trường tủ khử trùng nhiệt khơ - Vì: nhiệt độ khử trùng cao gây nước môi trường dẫn đến TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat môi trường Tại phải mở cửa, mở quạt máy thí nghiệm lấy vi sinh vật từ khơng khí? Vì: Khi mở cửa mở quạt làm khơng khí bị xáo trộn khiến cho v vật dễ rơi vào dĩa petri II THỰC HÀNH Sinh viên thực làm nút gịn nắp giấy sử dụng mơi trường ni cấy vi sinh vật Hình 2.1 Nắp giấy Hình 2.2 Nút gòn TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Bài 3: QUAN SÁT VI SINH VẬT I TRẢ LỜI CÂU HỎI Th ứ tự Câu hỏi Câu trả lời TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Quan sát vẽ hình nhóm vi sinh vật mẫu giọt ép? Hình 3.1 Nấm men Hình 3.2 Nấm mốc Cho biết nhóm vi khuẩn - Nhóm vi khuẩn: có khả di chuyển thật (chuyển di chuyển thật hay động thật) di chuyển tạm thời (chuyển động Brown) - Nhóm nấm men: di chuyển tạm thời (chuyển động Brown) - Nhóm nấm mốc: không di chuyển III THỰC HÀNH Sinh viên quan sát khuẩn lạc dĩa petri chứa môi trường đặc, mô tả vẻ khuẩn lạc: khuẩn lạc vi khuẩn – nấm men khuẩn lạc nấm mốc với đặc trưng DẠNG, ĐỘ NỔI VÀ BÌA khuẩn lạc TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Th ứ tự Hình ảnh Ảnh kính hiển vi Mơ tả khuẩn Nấm men Hình dạng: k - Độ nổi: phẳng - Dạng bìa: chia thùy - Màu sắc: trắng đục - Kích thước: + Dài 25mm26mm + Ngắn 15mm16mm - Bề mặt: trơn, bóng Nấm mốc trịn Hình dạng: - Độ nổi: Mơ - Dạng bìa: bìa sợi - Màu sắc: màu trắng đen - Kích thước: đường kính từ 28-29mm - Bề mặt: khô, khuẩn ti xốp TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Bài 4: NHUỘM VI SINH VẬT I TRẢ LỜI CÂU HỎI Th Câu hỏi ứ tự Trả lời câu hỏi Nếu sau trải vi sinh vật không Nếu sau trải vi sinh vật không cố định mẫu cố định mẫu vật trước nhuộm, vật trước nhuộm thì: kết nào? - Vi sinh vật cịn sống, vi sinh vật không bắt màu nhuộm tốt (vi sinh vật chết bắt màu nhuộm tốt hơn) kép - Vi sinh vật khơng bám chặt vào phiến kính, bị trơi sau bước rửa nước Cho biết lợi ích việc nhuộm Nhuộm đơn nhằm làm cho mẫu vật ăn màu loại phẩm nhuộm để giúp ta quan sát kính hiển vi Cho biết lợi ích việc nhuộm Nhuộm kép nhằm giúp ta xác định mẫu đơn vật nghiên cứu Gram âm hay Gram dương Có kết luận vi sinh vật Tế bào vi sinh vật Gram dương: tế bào lên nhuộm phần thực hành (Gram màu tím xanh vách tế bào dày, iod dán dương hay Gram âm) crystal violet bám chặt vào vách tế bào, giai đoạn rửa cồn + aceton không tẩy Crystal violet, vách tế bào Crystal Tế bào vi sinh vật Gram âm: tế bào lên màu hồng đỏ vách tế bào mỏng hơn, Crystal violet không bám chặt vào vách tế bào, giai đoạn rửa cồn aceton tẩy Crystal violet khỏi vách tế bào, tế bào có màu hồng fuchsin 10 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat II THỰC HÀNH Sinh viên thực mẫu nhuộm đơn mẫu nhuộm kép vi sinh vật ống nghiệm có sẵn Th ứ tự Hình ảnh Mơ tả - Đánh giá trải mẫu: Sau cố định mẫu ta tiến hành bước: + Nhỏ 1-2 giọt phẩm nhuộm blue methylen hay fu phủ nơi cố định 30-60 giây + Rửa nước cho trôi hết phẩm nhuộm + Dùng giấy thấm chậm hay hơ lửa cho khơ Hình ảnh nấm men nhuộm đơn kính hiển vi +Quan sát kính hiển vi Quan sát kính hiể ta thấy: nấm men ăn màu phẩm nhuộm xanh methylen nên có màu xanh 11 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Hình ảnh nhuộm kép vi khuẩn (Gram dương) - Đánh giá trải mẫu: Sau cố định mẫu ta thực bước sau: + Nhỏ hay giọt Crystal violet cho phủ nơi cố định, để 60 giây + Rửa nước từ 2-3 giây, chậm nhẹ khô nước +Nhỏ dung dịch iod 60 giây + Rửa nước, chậm nhẹ + Rửa cồn + aceton thật nhanh để tẩy màu từ đầu đến cuối phiến kính, để giọt cồn + aceton khơng cịn giọt tím + Rửa nước vài giây, chậm nhẹ + Nhỏ Fuchsin hay Safranin từ – giọt để 60 giây + Rửa nước vài giây + Dùng giấy thấm chậm nhẹ hay hơ lửa cho khô nước + Quan sát kính hiển vi Hình ảnh nhuộm kép vi khuẩn (Gram âm) Quan sát kính hiển vi, ta thấy: mẫu vi khuẩn bắt màu tím xanh mẫu vi 12 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat khuẩn hồng đỏ + Mẫu vi khuẩn bắt màu tím xanh (Gram dương) + Mẫu vi khuẩn bắt màu hồng đỏ (Gram âm) BÀI 5: KỸ THUẬT GIEO CẤY (CHUYỂN) PHÂN LẬP (TÁCH RÒNG) VI SINH VẬT & I TRẢ LỜI CÂU HỎI Th ứ tự Câu hỏi Có thể định độ (ròng) vi 1sinh vật mắt không? Trả lời Không thể xác định độ (ròng) v vật mắt thường vi sinh vật có kích nhỏ mà mắt thường khơng nhìn thấy đư Tại phân lập cần phải vẽ thành Vì tế bào rời rạc nhiều đường?phát triển thành khuẩn lạc độc lập Tại phải hơ lửa miệng ống nghiệm Vì để giết chết vi sinh vật bám trước đưa kim cấy vào bên ốnglên thành ống nghiệm, để không bị nhiễm vào nghiệm? bên ống nghiệm II PHẦN THỰC HÀNH Sinh viên phân lập mẫu vi khuẩn hay nấm men: 13 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Hình 5.1: Mẫu cấy Đình Khang Hình 5.2: Mẫu cấy Mỹ Huyền Hình 5.3: Mẫu cấy Cẩm Duyên Hình 5.4: Mẫu cấy Cẩm Linh 14 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat BÀI 6: ĐO VÀ ĐẾM VI SINH VẬT I TRẢ LỜI CÂU HỎI Thứ tự II Câu hỏi Cho biết kích thước trung bình tế bào nấm men vi khuẩn Trả lời Kích thước trung bình tế bào nấm men là: 3-15µm Kích thước trung bình tế bào vi khuẩn là: 0,5-5µm Cho biết lý khác biệt Phương pháp đếm trực tiếp tất vi sinh vật mặt số cho phương pháp đếm thấy kể sống chết, phương pháp đếm gián gián tiếp trực tiếp tiếp ta đếm đơn vị hình thành nên khuẩn lạc Do mật số phương pháp đếm trực tiếp ln lớn phương pháp đếm gián tiếp Cho biết công dụng thước Thước trắc vi vật kính giúp ta xác định tr trắc vi vật kính khoảng thước trắc vi thị kính PHẦN THỰC HÀNH Thực hành đo tế bào nấm men: Hình 6.1: Kích thước chiều ngang tế bào nấm men Kích thước tế bao nấm men là: 2x2,5=5µm 15 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Thực hành đếm mẫu nấm men phương pháp đếm trực tiếp kính mang vật Hình 6.2 Thị trường Hình 6.3 Thị trường 16 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat ...BÀI 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC I TRẢ LỜI CÂU HỎI: Thứ tự Câu hỏi Vai trị dầu cèdre sử dụng vật kính Câu trả lời... trải vi sinh vật không Nếu sau trải vi sinh vật không cố định mẫu cố định mẫu vật trước nhuộm, vật trước nhuộm thì: kết nào? - Vi sinh vật cịn sống, vi sinh vật không bắt màu nhuộm tốt (vi sinh vật. .. quạt máy thí nghiệm lấy vi sinh vật từ khơng khí? Vì: Khi mở cửa mở quạt làm khơng khí bị xáo trộn khiến cho v vật dễ rơi vào dĩa petri II THỰC HÀNH Sinh vi? ?n thực làm nút gịn nắp giấy sử dụng mơi