Xây dựng bộ tiêu bản nấm mốc phục vụ công tác giảng dạy.pdf

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chù trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỔNG KÉT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2018 Tên đề tài: XÂY DỤNG BỘ TIÊU BẢN NÁM MỐC PHỤC VỤ CÔNG TÁC GIẢNG DẠY Số hợp đồng: 2018.01.30/HĐ-KHCN Chù nhiệm đề tài: ThS Lê Quang Hạnh Thư Đơn vị công tác: Khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành Thời gian thực hiện: 01/04/2018 - 30/09/2018 TP Hồ Chí Minh, ngày 28 thảng 05 năm 2019 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỐNG KÉT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 201 Tên đề tài: XÂY DỤNG BỘ TIÊU BẢN NÁM MỐC PHỤC VỤ CÒNG TÁC GIẢNG DẠY Số hợp đồng : 2018.01.30/HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: ThS Lê Quang Hạnh Thư Đơn vị công tác: Khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành Thời gian thực hiện: 01/04/2018 - 30/09/2018 Các thành viên phối họp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành Nguyễn CNSH Thanh Tố Nhi Cơ quan công tác Khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành Ký tên MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU - CÁC CHỮ VIẾT TẮT V DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC Sơ ĐỊ - HÌNH ẢNH vii TÓM TẤT KẾT QUẢ NGHIÊN cứu viii MỎ ĐÀU ix CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỒNG QUAN VỀ NẤM MÓC 1.1.1 Đặc điếm vi nấm sợi 1.1.2 Tác động nấm mốc đời sống người .2 1.1.3 Vi nấm biến đất 1.1.4 Vi nấm biến khơng khí 1.2 THỰC TẾ VỀ CÒNG TÁC GIẢNG DẠY VI SINH - KÝ SINH TRÙNG TẠI KHOA DƯỢC - ĐẠI HỌC NGUYỀN TÁT THÀNH CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cúu 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CÚƯ, TRANG THIẾT BỊ, HÓA CHÁT 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.2 Dung mơi - hóa chất .8 2.1.3 Môi trường nuôi cấy 2.1.4 Trang thiết bị 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 2.2.1 Phương pháp thu xử lý mầu từ đất 2.2.2 Phương pháp thu xử lý mẫu từ khơng khí 2.2.3 Phân lập tinh vi nấm 10 2.2.4 Định danh vi nấm sợi 11 2.2.5 Xây dựng tiêu lưu chủng vi nấm 12 2.2.5.1 Xây dựng tiêu 12 2.2.5.2 Lưu chủng vi nấm 13 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN cúu 14 3.1 PHÂN LẬP VI NẤM 14 3.2 ĐỊNH DANH NÁM Mốc 14 3.2.1 Penicillium sp 15 3.2.2 Aspergillus sp 20 3.2.3 Paecỉlomyces sp 26 3.2.4 Trichodertna sp 28 3.2.5 Fusarium sp 29 3.2.6 Phoma sp 31 3.2.7 Mucor sp 31 3.2.8 Botrytis sp 32 3.2.9 Cladosporium sp 33 3.2 ]S3.Bipolaris sp 34 3.2.1 X.Nigrospora sp 35 3.2A2.Curvularia sp 35 3.2A3.Alternaria sp 37 3.2A4.Corynespora sp 38 3.2.15.Các mầu chưa định danh 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 Kết luận 40 Kiến nghị 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: Danh mục vi nấm phân lập từ đất khơng khí PL-1 PHỤ LỤC 2: Môi trường nuôi cấy PL-2 PHỤ LỤC 3: Hình ảnh mẫu Penicillium sp PL-3 PHỤ LỤC 4: Các mầu không đủ sở định danh PL-4 PHỤ LỤC 5: Hợp đồng - Thuyết minh đề cương PL-5 iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU - CÁC CHỮ VIÉT TẮT PCA Potato Carrot Agar PDA Potato Dextrose Agar SDA Sabouraud Dextrose Agar Tp.HCM Thành phố Hồ Chí Minh V DANH MỤC BẢNG • Bảng 2.1 Bảng ký hiệu mầu vi nấm phân lập 10 Bảng 3.1 Số lượng vi nấm phân lập từ đất khơng khí .14 Bảng 3.2 Số lượng chi nấm phân lập từ đất khơng khí 15 Bảng 3.3 Hình thái khóm nấm đặc điểm hiển vi Penicillium sp 16 Bảng 3.4 So sánh đặc điểm bào tử mầu Fusariumsp .30 VI DANH MỤC • Sơ ĐƠ - HÌNH ẢNH Sơ đồ 2.1 Các bước tiến hành phân lập định danh vi nấm 11 Sơ đồ 2.2 Sơ đồ định danh nấm sợi [16] 12 Hình 3.1 Một số mẫu Peniciỉlium sp dien hình (400x) 20 Hình 3.2 Các mầu phân lập thuộc nhóm Nigri 21 Hình 3.3 Các mẫu phân lập thuộc nhóm Flavi 23 Hình 3.4 Các mầu phân lập thuộc nhóm Aspergillus fumigatus 24 Hình 3.5 Aspergillus GD5-3 25 Hình 3.6 Aspergillus GD5-4 25 Hình 3.8 Aspergillus 402-6 402-8 26 Hình 3.9 Paecilomyces sp 27 Hình 3.10 Khóm nấm Trichoderma sp PDA 28 Hình 3.11 Đặc diêm hiên vi Trichoderma sp 29 Hình 3.12 Một so mẫu Fusarium sp 30 Hình 3.13 Phoma sp TD2-3 31 Hình 3.14 Mucor sp TD1-3 32 Hình 3.15 Botrytis sp 402-11 33 Hình 3.16 Cladosporium sp 33 Hình 3.17 Bipolaris sp 406-11 34 Hình 3.18 Nigrospora sp 403-8 35 Hình 3.19 Curvularia sp 406-6 36 Hình 3.20 Curvularia sp 403-7 37 Hình 3.21 Alternaria sp 406-12 38 Hình 3.22 Corynespora sp 402-5 38 vii TÓM TẤT KÉT QUẢ NGHIÊN cứư Sản phâm đăng ký thuyêt minh Sản phấm thực đạt - Xây dựng 139 tiêu nấm - Xây dựng tiêu nấm mốc phù mốc thuộc 14 chi phù hợp nội hợp nội dung chương trình đào tạo dung chương trình đào tạo - Xây dựng chùng 139 mầu - Xây dựng chủng nấm mốc phục vụ nấm mốc thuộc 14 chi Mồi mẫu giảng dạy Mồi mầu lưu hai điều kiện: lưu hai điều kiện: + Nước cất vô trùng điều kiện nhiệt độ phịng; + Nước cất vơ trùng điều kiện nhiệt độ phòng; + Glycerol 20% điều kiện + Glycerol 20% điều kiện nhiệt độ phòng nhiệt độ phòng - Hướng dần 01 sinh viên Đại học - Hướng dần 01 sinh viên thực Dược thực đề tài nghiên cứu khoa nghiên cứu học sinh viên - Bài báo kỷ yếu trường - Bài báo kỷ yếu trường Thời gian đăng ký: từ ngày 01/04/2018 - 30/09/2018 Thời gian nộp báo cáo: tháng 05/2019 viii MỞ ĐẦU Mục tiêu đề tài Xây dựng tiêu mẫu nấm mốc phục vụ công tác giảng dạy môn Ký sinh trùng - Dược - Thực hành; Xây dựng chủng nấm mốc phục vụ công tác giảng dạy nghiên cứu Nội dung thực Thu thập phân lập vi nấm từ mơi trường tự nhiên gồm: - Khơng khí so phịng thí nghiệm khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành co sở 300A; - Đất từ số cơng viên địa bàn Tp Hồ Chí Minh Định danh vi nấm đến tên chi phương pháp thường quy dựa vào hình thái khóm nấm đặc điếm hiển vi Xây dựng tiêu lưu chùng vi nấm Ket đạt - Phân lập 139 mầu vi nấm gồm 103 mầu từ đất 36 mẫu từ khơng khí - Định danh 101 mầu thuộc 14 chi gồm Penicillium (43 mẫu), Aspergillus (25 mầu), Trichoderma (06 mẫu), Mucor (03 mẫu), Fusarium (04 mầu), Phoma (01 mầu), Paecilomyces (03 mầu), Bipolaris (03 mầu), Curvularia (04 mẫu), Nigrospora (01 mầu), Alternaria (01 mẫu), Botrytis (02 mầu), Cladosporium (04 mầu) Corynespora (01 mầu) Có 38 mầu khơng đủ sở để định danh - Xây dựng tiêu 139 mẫu nấm mốc thuộc 14 chi phù hợp đe sử dụng cho chương trình đào tạo Dược sĩ đại học hành phong phú nội dung giảng dạy - Xây dựng chủng gồm 139 mầu nấm mốc thuộc 14 chi Mồi mầu lưu hai điều kiện: + Nước cất vô trùng điều kiện nhiệt độ phòng; + Glycerol 20% điều kiện nhiệt độ phòng ix CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÓNG QUAN VỀ NẤM MÓC 1.1.1 Đặc điểm vi nấm sợi Vi nấm xếp loại giới Nam (Fungi) Vi nấm nhóm nấm có kích thước hiển vi thuộc nhóm sinh vật nhân thật (Eukaryote) Vi nấm sinh vật dị dưỡng, có đời sống hoại sinh ký sinh Te bào vi nấm khơng có diệp lục nên khơng tự quang họp có hệ thống enzym dồi (cellulase, protease, catalase ) tham gia chuyển hóa chất Chúng tiết enzym môi trường giúp phân giải họp chất phức tạp thành họp chất đơn giản để hấp thu Tùy theo cấu tạo, chia vi nấm thành hai nhóm gồm dạng nấm men (yeast) có cấu trúc đơn bào nấm sợi (hyphae) có cấu trúc đa bào Vi nấm sinh sản bào tử, gồm bào tử hừu tính bào tử vơ tính Hầu hết nấm men phân chia theo kieu nẩy chồi, số lồi khác phân chia theo kiểu nhân đơi giống vi khn hình thành sợi nấm giả Nấm sợi sinh sản dạng bào tử vô tính bào tử đính, bào tử đốt sinh sản hữu tính đảm, túi Bào tử đặc điểm quan trọng định danh nấm sợi [5], [7] Dựa vào phương thức sinh sản bào tử hữu tính nấm người ta chia giới nấm thành ngành 01 nhóm sau đây: - Ngành nấm roi (Chytridiomycota) - Ngành nấm tiếp họp (Zygomycota) - Ngành nấm túi (Ascomycota) - Ngành nấm đảm (Basidiomycota) - Nhóm nấm bất tồn (Fungi Imperfect!) Nấm mốc thuộc nhóm vi nấm sợi, thường xuất nơi ngoại cảnh đất, nước, khơng khí Đa phần nấm mốc sống ngoại hoại sinh, nhiên số trường họp vi nấm có the xâm nhập gây bệnh lý người ... 05/2019 viii MỞ ĐẦU Mục tiêu đề tài Xây dựng tiêu mẫu nấm mốc phục vụ công tác giảng dạy môn Ký sinh trùng - Dược - Thực hành; Xây dựng chủng nấm mốc phục vụ công tác giảng dạy nghiên cứu Nội... - Xây dựng 139 tiêu nấm - Xây dựng tiêu nấm mốc phù mốc thuộc 14 chi phù hợp nội hợp nội dung chương trình đào tạo dung chương trình đào tạo - Xây dựng chùng 139 mầu - Xây dựng chủng nấm mốc phục. .. DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 201 Tên đề tài: XÂY DỤNG BỘ TIÊU BẢN NÁM MỐC PHỤC VỤ CÒNG TÁC GIẢNG DẠY Số hợp đồng : 2018.01.30/HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: ThS Lê Quang Hạnh Thư Đơn vị công tác: Khoa