BƢỚC đầu KHẢO sát mật độ VI KHUẨN cố ĐỊNH đạm và hàm LƢỢNG TINH dầu của rễ cỏ VETIVER

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT MẬT ĐỘ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÀM LƢỢNG TINH DẦU CỦA RỄ CỎ VETIVER (Vetiverria zizanioides L.) Ngành học: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 - 2007 Sinh viên thực hiện: LÊ MINH ĐỨC Thành phố Hồ Chí Minh 8/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT MẬT ĐỘ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÀM LƢỢNG TINH DẦU CỦA RỄ CỎ VETIVER (Vetiverria zizanioides L.) LUẬN VĂN KỸ SƢ Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGS.TS BÙI XUÂN AN LÊ MINH ĐỨC KS DƢƠNG THÀNH LAM Khóa: 2003 - 2007 Thành Phố Hồ Chí Minh 8/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY THE FIRSTSTEP RESEARCH DENSITY OF NITROGEN – FIXING BACTERIA AND THE ESSENTIAL OIL CONTENT OF VETIVER’S ROOTS (Vetiverria zizanioides L.) Graduation thesis Major: Biotechnology Advisor: Student: Dr BUI XUAN AN LE MINH DUC BSc DUONG THANH LAM Term: 2003 - 2007 HCMC 8/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM TẠ Với lịng biết ơn sâu sắc Tơi xin gửi lời cảm ơn Ban Giám hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công nghệ sinh học, tất quý thầy cô truyền đạt kiến thức cho suốt q trình học trƣờng Đặc biệt tơi xin chân thành cảm ơn thầy: PGS.TS BÙI XUÂN AN, KS DƢƠNG THÀNH LAM, tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Chân thành cảm ơn sâu sắc đến TS Phạm Nhƣ Liên Giám đốc sản xuất công ty CP Y - Dƣợc phẩm Vimedimex, cơng ty TNHH Cơng nghệ hóa học giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn thầy cô, anh chị Viện Công nghệ sinh học Môi trƣờng, Trung tâm Nghiên cứu Chuyển giao KHCN nhiệt tình hƣớng dẫn tơi thực khóa luận tốt nghiệp Xin gửi lời cảm ơn đến bạn bè nhƣ tập thể lớp Công nghệ sinh học 29 động viên giúp đỡ suốt q trình học Vơ biết ơn gia đình nuôi dạy, yêu thƣơng động viên suốt bốn năm qua TP Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2007 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TĨM TẮT KHĨA LUẬN Lê Minh Đức, Đại học Nơng Lâm Tp.Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 “BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT MẬT ĐỘ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÀM LƢỢNG TINH DẦU CỦA RỄ CỎ VETIVER (Vetiverria zizanioides L.)” Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm gồm phần  Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nƣớc rỉ rác đến khả sinh trƣởng phát triển cỏ Vetiver Gồm có 3NT trồng cỏ Vetiver nƣớc rỉ rác với nồng độ pha loãng khác nhau: 80%, 60% 40%  Thí nghiệm 2: Khảo sát mật độ vi khuẩn cố định đạm từ nốt sần bề mặt rễ cỏ Vetiver thí nghiệm rễ mơ hình trồng cỏ  Thí nghiệm 3: Khảo sát so sánh quy trình cơng nghệ chiết xuất tinh dầu từ rễ cỏ Vetiver (Vetiverria zizanioides L.) Địa điểm thực thí nghiệm: Trung tâm nghiên cứu Chuyển giao KHCN, ĐH Nông Lâm, Tp.HCM; Cơng ty TNHH Cơng nghệ hóa học, Tân Sơn Nhì, Tân Phú, Tp.HCM Thời gian tiến hành: 03/06/2007 - 17/08/2007 Mẫu nƣớc thải đƣợc lấy từ bãi chôn lấp rác Gị Cát, Tp.HCM Những kết thu đƣợc: Mùi thối chất lƣợng nƣớc thải đƣợc cải thiện Cỏ sinh trƣởng đƣợc nồng độ pha loãng 80% Khơng có xuất nốt sần rễ cỏ Hàm lƣợng tinh dầu thu đƣợc từ rễ cỏ Vetiver: 0,04% Sự khác phƣơng pháp chiết xuất tinh dầu v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC NỘI DUNG TRANG LỜI CẢM TẠ iv TÓM TẮT KHÓA LUẬN v MỤC LỤC vi DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH x DANH MỤC VIẾT TẮT xi Chƣơng MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 1.4 GIỚI HẠN PHẠM VI NGHIÊN CỨU .3 1.5 Ý NGHĨA KHOA HỌC 1.6 Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 CỎ VETIVER 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Phân loại .5 2.1.3 Đặc tính nơng học .6 2.1.4 Đặc tính sinh thái 2.1.5 Vi sinh vật hệ rễ 2.1.6 Lợi ích từ cỏ Vetiver 10 2.1.7 Khả cố định nitơ số loài thực vật 12 2.2 VI KHUẨN AZOTOBACTE 14 2.2.1 Phân loại 14 2.2.2 Đặc điểm sinh học 14 2.2.3 Các yếu tố ảnh hƣởng đến vi khuẩn Azotobacter .18 vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.2.4 Tác dụng vi khuẩn Azotobacter 24 2.3 VI KHUẨN BEIJERINCKIA 25 2.3.1 Phân loại 25 2.3.2 Đặc điểm sinh học 27 2.4 NƢỚC RỈ RÁC .28 2.4.1 Nguồn gốc 28 2.4.2 Đặc điểm 29 2.4.3 Bãi chôn lấp Gò Cát 31 2.5 TINH DẦU TỪ CỎ VETIVER .33 2.5.1 Bản chất tinh dầu .33 2.5.2 Các hợp phần tinh dầu .34 2.5.3 Tinh dầu vật liệu thực vật .34 2.5.4 Các phƣơng pháp lấy tinh dầu 35 2.5.4.1 Phƣơng pháp ép vật liệu thực vật 35 2.5.4.2 Dùng lỏng hay rắn để trích ly tinh dầu .35 2.5.4.3 Phƣơng pháp cất nƣớc 36 2.5.5 Tinh dầu cỏ Vetiver 37 2.5.6 Tác dụng tinh dầu từ cỏ Vetiver 38 2.5.7 Nhu cầu tinh dầu hƣơng liệu 39 2.6 CÁC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC LIÊN QUAN 40 2.6.1 Các nghiên cứu nƣớc 40 2.6.2 Các nghiên cứu giới 40 Chƣơng NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM THÍ NGHIỆM 42 3.2 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM 42 3.2.1 Thí nghiệm .42 3.2.2 Thí nghiệm .43 3.2.3 Thí nghiệm .43 3.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 43 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.3.1 Thí nghiệm .43 3.3.1.1 Giai đoạn tiền thí nghiệm 43 3.3.1.2 Giai đoạn thí nghiệm 44 3.3.2 Thí nghiệm .45 3.3.2.1 Mẫu 45 3.3.2.2 Điều kiện nuôi cấy 45 3.3.2.3 Môi trƣờng nuôi cấy 46 3.3.2.4 Quy trình ni cấy 46 3.3.3 Thí nghiệm .48 3.4 VẬT LIỆU .50 3.5 THIẾT BỊ PHỊNG THÍ NGHIỆM 50 3.6 PHƢƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU .50 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 51 4.1 THÍ NGHIỆM 51 4.2 THÍ NGHIỆM 54 4.3 THÍ NGHIỆM 56 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 60 5.1 KẾT LUẬN .60 5.2 ĐỀ NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC BẢNG BẢNG TRANG Bảng 2.1 : Sự khác loài Azotobacter 16 Bảng 2.2 : Thành phần nƣớc rỉ từ bãi chơn lấp Gị Cát 30 Bảng 2.3 : Thành phần chất thải rắn bãi chơn lấp Gị Cát 32 Bảng 2.4 : Các thông tin nƣớc rỉ rác bãi chơn lấp rác Gị Cát tính đến ngày 19/06/2004 33 Bảng 2.5 : Thành phần tinh dầu từ rễ cỏ Vetiver 38 Bảng 3.1 : Thành phần dung dịch Knop 44 Bảng 3.2 : Môi trƣờng Ashby’s Glucose Agar 46 Bảng 3.3 : Môi trƣờng Beijerinckia medium 46 Bảng 4.1 : Sự phát triển độ dài rễ NT q trình thí nghiệm 54 Bảng 4.2 : Sự thay đổi màu sắc NT q trình thí nghiệm 54 Bảng 4.3 : So sánh khác hai mơ hình trồng cỏ 55 Bảng 4.4 : Sự diện nốt sần bề mặt rễ cỏ qua NT 56 Bảng 4.5 : Hàm lƣợng tinh dầu theo quy trình chiết xuất 57 Bảng 4.6 : Hàm lƣợng tinh dầu chiết xuất chất theo quy trình CO 58 ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC HÌNH HÌNH TRANG Hình 2.1 : Hình thái cỏ Vetiver Hình 2.2 : Khuẩn lạc vi khuẩn Azotobacter 14 Hình 2.3 : Suối hình thành từ nƣớc rỉ rác 33 Hình 3.1 : Quy trình nuôi cấy vi khuẩn 47 Hình 3.2 : Mơ hình quy trình chiết xuất tinh dầu 48 Hình 3.3 : Mơ hình chiết xuất bể 49 Hình 4.1 : Chiều cao thân độ dài rễ cỏ NT1 51 Hình 4.2 : Nƣớc rỉ rác trƣớc sau thí nghiệm NT1 52 Hình 4.3 : Chiều cao thân cỏ NT2 52 Hình 4.4 : Chiều cao thân cỏ NT3 53 Hình 4.5 : Biểu đồ phát triển rễ qua NT 53 Hình 4.6 : Mơ hình trồng cỏ 55 Hình 4.7 : Biểu đồ so sánh hàm lƣợng tinh dầu qua quy trình 57 Hình 4.8 : Biểu đồ hàm lƣợng loại tinh dầu chiết xuất theo CO 58 Hình 4.9 : Tinh dầu Vetiver sau chiết xuất 59 x LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 50 Quy trình bể giống quy trình bể chỗ lƣợng khí CO2 sử dụng đƣợc thu hồi lại Lƣợng khí CO2 đƣợc dịch chuyển qua lại bể trình chiết xuất thông qua van Thông thƣờng, tổng số lần chiết xuất lần chạy lần, nghĩa thực chiết xuất tinh dầu lần/bể trƣớc thu hồi CO2 kết thúc quy trình 3.4 VẬT LIỆU Khung nhà tre mái che nhựa polyethylen Tấm xốp (dày cm) làm giá đỡ, vật liệu Xơ nhựa 25 lít dùng để đựng nƣớc rỉ rác (9 xô), dụng cụ đo thể tích nƣớc Cỏ Vetiver đƣợc cung cấp Trung tâm nghiên cứu Chuyển giao KHCN, ĐH Nông Lâm Tp.HCM Nƣớc rỉ rác đƣợc lấy bãi chôn lấp rác Gò Cát, trƣớc lấy mẫu nƣớc dụng cụ lấy mẫu bình đựng nƣớc rỉ rác phải tráng qua với nƣớc thải lần, lấy độ sâu từ 20 - 30 cm, đồng thời không gây bọt khí bình đựng nƣớc thải 3.5 THIẾT BỊ PHÕNG THÍ NGHIỆM Cân điện tử Đèn cồn Nồi hấp môi trƣờng Que trãi tam giác Tủ ấm Đĩa petri Máy vortex Ống nghiệm Đầu tip Bình tam giác Tủ lạnh Micropipette 3.6 PHƢƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU Số liệu đƣợc xử lý phần mềm Excel 2003 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 51 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 THÍ NGHIỆM Về cảm quan, sau thời gian 15 ngày nƣớc rỉ rác nghiệm thức khơng cịn mùi Trong nghiệm thức cịn lại (nghiệm thức 3) xảy tƣợng cỏ héo chết dần, đến ngày thứ 24 khơng cịn mùi từ nƣớc rỉ rác  Nghiệm thức 1: Sau ngày trồng nƣớc rỉ rác rễ cỏ khơng phát triển tiếp mà chết dần, thay vào phát triển rễ Chiều dài không tăng tƣợng úa héo vàng a b a b Hình Chiều cao thân độ dài rễ cỏ NT1 a) sau ngày; b) sau 42 ngày LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 52 Cho đến kết thúc q trình thí nghiệm có vài lấy lại màu xanh hoàn toàn, phát sinh chồi khơng ghi nhận đƣợc qua thí nghiệm Sự phát triển rễ không diễn liên tục mà tăng giảm theo số lƣợng phát triển rễ với chết rễ hình thành trƣớc Ở giai đoạn cuối q trình thí nghiệm số lƣợng chiều dài rễ đạt mức cao Ở nghiệm thức 1, khả sinh trƣởng phát triển cỏ trực tiếp làm cho chất lƣợng nƣớc thải đƣợc cải thiện đáng kể Chúng ghi nhận thay đổi thông qua màu sắc nƣớc số lƣợng chất lắng nƣớc thải Hình Nƣớc rỉ rác trƣớc sau thí nghiệm NT1  Nghiệm thức 2: a b Hình Chiều cao thân cỏ NT2 a) sau ngày; b) sau 42 ngày LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 53 Ở nghiệm thức sau ngày không thấy xuất rễ mới, thân chƣa chuyển hoàn toàn sang màu vàng héo Sau 21 ngày cỏ chết hoàn toàn, rễ cỏ bị thối mục rã nƣớc thải  Nghiệm thức 3: Tƣơng tự nhƣ nghiệm thức nhƣng sau 14 ngày cỏ chết hoàn toàn b a Hình 4 Chiều cao thân cỏ NT3 a) sau ngày; b) sau 42 ngày độ dài rễ (cm) 50 40 30 20 10 NT1 14 21 28 NT2 35 42 ngày thứ NT3 Hình Biểu đồ phát triển rễ qua NT LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 54 Bảng Sự phát triển độ dài rễ NT q trình thí nghiệm (cm) Ngày NT 14 21 28 35 42 40 46 48 - 0 0 10 0 14 0 Bảng Sự thay đổi màu sắc NT q trình thí nghiệm Ngày 14 21 28 35 42 NT xanh vàng vàng vàng xanh xanh xanh xanh vàng vàng khô khô khô khô xanh vàng khô khô khô khô khô  Biện luận: Sự sinh trƣởng phát triển cỏ Vetiver nồng độ pha loãng nƣớc rỉ rác bị ngừng lại tình trạng cỏ bị sốc chuyển từ môi trƣờng giàu chất dinh dƣỡng sang mơi trƣờng có nhiều chất độc hại Rễ đƣợc sinh phát triển cho thấy thích nghi cỏ nƣớc rỉ rác Sự phát triển không rễ thời gian thực thí nghiệm cỏ đƣợc trồng với mật độ thấp nên khả thích nghi cỏ chƣa đạt đƣợc mức cao Khả thích nghi cỏ đƣợc thấy rõ giai đoạn cuối q trình thí nghiệm, khơng cịn rễ bị chết số lƣợng nhánh phát sinh từ rễ tăng lên nhanh chóng 4.2 THÍ NGHIỆM Ngồi hai nghiệm thức khơng có sinh trƣởng phát triển cỏ nghiệm thức không nhận thấy xuất nốt sần bề mặt rễ LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 55  Mơ hình trồng cỏ 1: Ở mơ hình trồng cỏ sinh trƣởng phát triển cỏ tốt, nhiên kết thúc q trình thí nghiệm khơng ghi nhận đƣợc có mặt nốt sần bề mặt rễ cỏ Vetiver  Mơ hình trồng cỏ : Hình Mơ hình trồng cỏ Qua q trình khảo sát mơ hình trồng cỏ chúng tơi cho khả hình thành nốt sần rễ cỏ Vetiver khơng tồn Do đó, mục tiêu tìm hiểu mật độ vi khuẩn cố định đạm nốt sần chƣa đem đến số liệu mang ý nghĩa cụ thể Bảng So sánh khác hai mơ hình trồng cỏ Mơ hình Chiều cao thân (cm) Độ dài rễ (cm) Sự diện nốt sần 120 34 136 42 Mặc dù có khác biệt lớn hai mơ hình trồng cỏ nhƣng kết khảo sát diện nốt sần giống Kết nuôi cấy vi khuẩn từ mẫu rễ q trình thí nghiệm khơng cho thấy diện hai loại vi khuẩn cố định đạm Azotobacter spp Beijerinckia spp LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 56 Bảng 4 Sự diện nốt sần bề mặt rễ cỏ qua NT Nghiệm thức Sự diện nốt sần 0  Biện luận: Nhƣ vậy, câu hỏi đƣợc đặt có hay khơng có tồn nốt sần rễ cỏ Vetiver Thực câu hỏi chƣa thể trả lời cách chắn, cần có thêm nhiều nghiên cứu bổ sung khác, nhiên theo nghiên cứu sở lý thuyết tơi cho khả hình thành nốt sần rễ cỏ Vetiver có tồn Theo Giáo sƣ Nguyễn Lân Dũng (Vi sinh vật học, 1965) vi khuẩn Azotobacter Beijerinckia vi khuẩn sống tự đất nên khơng có khả tạo nốt sần Mặt khác, số nghiên cứu nƣớc ([15,18]) loại vi khuẩn không diện bề mặt rễ mà tồn khoảng gian bào tế bào rễ; chúng tơi nghĩ đến khả mật độ định vi khuẩn tạo thành nốt sần hay khối u bề mặt rễ cỏ Vấn đề cần đƣợc giải với mật độ có xuất nốt sần Chúng cho loại vi khuẩn tồn khoảng gian bào tế bào rễ nhƣng khơng đủ khả tạo thành nốt sần, nhƣ ta biết rễ cỏ Vetiver chứa hàm lƣợng tinh dầu cao đồng thời tinh dầu từ cỏ cịn có tác dụng nhƣ chất diệt khuẩn Vì vậy, khả hình thành nốt sần rễ cỏ Vetiver đƣợc ghi nhận đề tài khơng có 4.3 THÍ NGHIỆM Khối lƣợng vật liệu ban đầu đƣợc sử dụng có trọng lƣợng kg, sau chiết xuất theo quy trình cơng nghệ, sản phẩm đƣợc thu nhận vào ống eppendoff Thể tích sản phẩm thu đƣợc: 0,44 ml Tinh dầu cỏ Vetiver có màu nâu vàng Hàm lƣợng tinh dầu tính theo phần trăm: 0,04% So sánh hàm lƣợng tinh dầu đƣợc chiết xuất từ quy trình khác nhau: LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 57 CO: quy trình chiết xuất sử dụng khí CO2 S.D: quy trình chƣng cất tinh dầu nƣớc (Steam Distillation) H.D: quy trình chƣng cất lỏng (Hydrodistillation) LT: hàm lƣợng tinh dầu theo lý thuyết Bảng Hàm lƣợng tinh dầu theo quy trình chiết xuất Nguồn Thí nghiệm Parameters of Vetiver Oil Distillation, 1999 Parameters of Vetiver Oil Distillation, 1999 Phƣơng pháp Hàm lƣợng (%) CO 0,04 S.D 0,23 H.D 0,28 LT hàm lượng tinh dầu (%) Nguyễn Lân Dũng, 2005 2.5 2 1.5 0.5 0.04 0.23 0.28 S.D H.D CO LT Hình Biểu đồ so sánh hàm lƣợng tinh dầu qua quy trình Thơng qua biểu đồ ta thấy hàm lƣợng tinh dầu chiết xuất theo quy trình sử dụng khí CO2 cho sản phẩm thấp nhiều so với phƣơng pháp khác LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 58 Theo quy trình chƣng cất tinh dầu nƣớc, khoảng biến động hàm lƣợng tinh dầu lớn Số liệu hình 4.8 đƣợc lấy từ nguồn, nhƣng nhiều tài liệu khác hàm lƣợng tinh dầu lại mức cao Có thể dao động khoảng 0,15 - 0,29% (trọng lƣợng khô) 0,3 - 1%, giá trị khác nhƣ 0,5 - 4% Nhƣ vậy, số liệu khác nhau, cần có nghiên cứu cụ thể xác Ngay quy trình chiết xuất cho thấy khác biệt hàm lƣợng loại tinh dầu đƣợc chiết xuất Bảng Hàm lƣợng tinh dầu chiết xuất chất theo quy trình CO Cơ chất Hàm lƣợng (%) Rễ cỏ Vetiver 0,04 Gừng 0,3 Nghệ 0,2 hàm lượng tinh dầu (%) 0.35 0.3 0.3 0.25 0.2 0.2 0.15 0.1 0.05 0.04 Vetiver Gừng Nghệ Hình Biểu đồ hàm lƣợng loại tinh dầu chiết xuất theo CO Để giải thích cho khác biệt hàm lƣợng tinh dầu biểu đồ trên, xin đƣa nguyên nhân sau: Khối lƣợng nguyên liệu đầu vào q ít, khơng đủ để thực quy mô lớn nhằm giảm bớt tỷ lệ hao hụt sản phẩm LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 59 Không đảm bảo đƣợc số lần lặp lại cần thiết để đƣa số liệu khoa học Vì vậy, việc khảo sát hàm lƣợng tinh dầu từ rễ cỏ Vetiver đề tài dừng lại việc bƣớc đầu đánh giá hàm lƣợng tinh dầu có rễ cỏ Nhƣng khẳng định rễ cỏ Vetiver chứa hàm lƣợng tinh dầu mức cao, cần có kế hoạch thiết bị khai thác hiệu để nâng cao giá trị kinh tế Hình Tinh dầu Vetiver sau chiết xuất LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 60 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Cỏ Vetiver trồng thủy canh nƣớc rỉ rác có khả sống phát triển tốt nồng độ pha loãng 80% Sự xuất nốt sần rễ cỏ Vetiver không đƣợc ghi nhận trình thực đề tài Hàm lƣợng tinh dầu thu đƣợc áp dụng quy trình chiết xuất sử dụng khí CO2 0,04% Với mật độ trồng cỏ 170 tép cỏ/1m2 trình sinh trƣởng phát triển cỏ diễn chậm, phục hồi tăng trƣởng nhƣ phát sinh chồi không xảy liên tục Mặt khác, phát triển rễ có lúc bị gián đoạn nhƣng nhìn chung sức sống cỏ mạnh mẽ, chịu dựng tốt với môi trƣờng nƣớc thải chứa nhiều thành phần gây ô nhiễm 5.2 ĐỀ NGHỊ Để khả xử lý nƣớc thải cỏ Vetiver đạt hiệu cao, trƣớc đƣa cỏ vào quy trình xử lý cần dƣỡng cỏ dung dịch dinh dƣỡng Knop giúp cỏ tăng khả hút chất dinh dƣỡng chất hữu khác, đồng thời áp dụng mơ hình lớn cần thay cỏ theo định kỳ để chất lƣợng nƣớc đƣợc xử lý theo hiệu mong muốn Kết thu đƣợc từ thí nghiệm cho thấy khả sử dụng cỏ Vetiver theo phƣơng pháp thủy canh để xử lý nguồn ô nhiễm từ nƣớc rỉ rác Tuy nhiên cần có nghiên cứu cụ thể mật độ trồng cỏ thích hợp để hiệu xử lý cao nhƣ xây dựng đƣợc mơ hình áp dụng thực tế LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 61 Khả xử lý ô nhiễm từ nƣớc rỉ rác cỏ Vetiver mang lại hiệu cao, cần đƣợc nghiên cứu quy mô rộng ghi nhận đƣợc thay đổi thông số liên quan đến nƣớc thải Sự hình thành nốt sần rễ cỏ Vetiver khơng ghi nhận đƣợc nhƣng nghiên cứu thêm theo hƣớng khác, sau dƣỡng cỏ dung dịch Knop gây nhiễm cho rễ cách ngâm chúng vào dung dịch có chứa vi khuẩn Azotobavter spp vi khuẩn Beijerinckia spp để theo dõi mật độ hai vi khuẩn khoảng gian bào tế bào rễ, từ khảo sát khả hình thành nốt sần đem cỏ trồng đất Nghiên cứu giống cỏ Vetiver chứa khơng chứa tinh dầu, để ghi nhận khả hình thành nốt sần rễ nhƣ tác động hàm lƣợng tinh dầu từ rễ cỏ đến vi khuẩn Azotobacter spp Beijerinckia spp Định lƣợng hàm lƣợng tinh dầu rễ cỏ Vetiver phƣơng pháp khác nhau, xác định đƣợc thành phần chất tinh dầu cỏ Vetiverria zizanioides L Việt Nam LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Nguyễn Lân Dũng Vi sinh vật học Nhà xuất Đại học Quốc Gia, Hà Nội, Việt Nam Tập II Trang 354 – 371 Phạm Động Điện, 2006 Chƣng cất tinh dầu nƣớc Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội, Việt Nam 75 trang Dƣơng Thành Lam, 2005 Thử nghiệm cỏ Vetiver (Vetiveria zizanioides L.) xử lý nƣớc thải sinh hoạt từ ký túc xá sinh viên Trung tâm Nghiên cứu Chuyển giao KHCN Đại học Nơng Lâm, Tp.Hồ Chí Minh, Việt Nam Lê Nguyễn, 2006 Ảnh hƣởng mật độ trồng đến sinh trƣởng khả xử lý nƣớc cỏ Vetiver (Vetiverria zizanioides L.) trồng nƣớc kênh Nhiêu Lộc - Thị Nghè Trung tâm Nghiên cứu Chuyển giao KHCN, Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, Việt Nam Nguyễn Nguyên Thắng, 2006 Khảo sát ảnh hƣởng chế phẩm sinh học Enchoice Sanjiban trình xử lý nƣớc rỉ rác bãi chơn lấp rác Phƣớc Hiệp, Củ Chi Khóa luận tốt nghiệp ngành Công nghệ sinh học, Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, Việt Nam 55 trang Trƣờng Đại học Cần Thơ Giáo trình vi sinh vật đất (Chƣơng 5) 19 trang TIẾNG NƢỚC NGOÀI K K Aggarwal, Aparbal Singh, A P Kahol and Man Singh, 1999 Parameters of Vetiver Oil Distillation Journal of Herbs, Spices & Medicinal Plants Volume Issue ISSN 1049 - 6475 Benjar Chutintrasri, Somnuk Promdaeng and Teeranud Romphophak Extraction and analysis of volatile compounds and post harvest treatment of Ya Prak Hin roots Scientific Equipment Center, Kasetsart University Research and Development Institute, Thailand LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 63 Narong Chomchalow, 2001 The ultilization of Vetiver as medicinal and aromatic plants Office of the Royal Development Projects Board, Thailand 27 pages 10 Stephen V Dowthwaite and Samjamjaras Rajani Vetiver: Perfumers’ liquid gold Thai - China Flavours and Fragrances Co Ltd Bangkok pages 11 Xia Hanping, Ao Huixiu, Liu Shizhong and He Daoquan A preliminary study on Vetiver’s purification for garbage leachate South China Institute of Botany, Academia Sinica, Guangzhou 510650, China 12 Tri Levan and Duc Vuthiminh; 2005 Preliminary results of isolation of nitrogen fixing bacteria in sugar-cane (Saccharum officinarum L.) VietNam Information for Science and Technology Advance Vol 43 - No p 93-97 -(vie) -ISSN 0866-708X 13 A Muthusankaranarayanan, U Solaiappan and S Senthivel Planting techniques for Vetiver slips in rainfed Vertisols Regional Research Station, Agricultural University, Arnppukkottan 626107, Tamilnadu, India 14 Ngwainmbi Simon, 2000 Utilization of Vetiver grass roots for medicinal and other purposes Cameroon Vetiver Network (CAVN) 15 Settha Siripin Microbiology associated with the Vetiver plant Maejo University, Chiang Mai, Thailand pages 16 Sinkangam, B Siripin, S Teeratorn and A Pintarak; 1999 Evaluation of plant growth regulators and effect of nitrogen fixing bacteria on growth of vetiver grass The 37th Kasetsart University Annual Conference, - February, 1999: 40 - 44, Thailand pages 17 Sirinan Thubthimthed, Krittiya Thisayakorn, Ubon Rerk-am, Sinn Tangstirapakdee and Taweesak Suntorntanasat Vetiver oil and its sedative effect Thailand Institute of Scientific and Technological Research (TISTR, Bangkok, Thailand) pages LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 64 18 Office of The Royal Development Projects Board in cooperation with Fund Donated by The Heineken Breweries Co.ltd, 19 - 30 November 2000 The Vetiver System Bangkok, Thailand 139 pages TRANG WEB 19 http://www.biotechvnu.edu.vn 20 http://www.himedialabs.com 21 http://sonongnghiep.angiang.gov.vn 22 http://www.vetiver.org 23 http://www.wikipedia.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... 08/2007 “BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT MẬT ĐỘ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÀM LƢỢNG TINH DẦU CỦA RỄ CỎ VETIVER (Vetiverria zizanioides L.)” Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm gồm phần  Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh... dân Vi khuẩn cố định đạm có tác dụng cố định nitơ khơng khí, làm giàu cho đất Các vi khuẩn diện hệ rễ cỏ Vetiver, nhiên chƣa có đánh giá xác số lƣợng nhƣ mật độ vi khuẩn cố định đạm rễ cỏ Vetiver. .. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** BƢỚC ĐẦU KHẢO SÁT MẬT ĐỘ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÀM LƢỢNG TINH DẦU CỦA RỄ CỎ VETIVER (Vetiverria