VẮC XIN PHÒNG BỆNH lở mồm LONG MÓNG

SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Bài tiểu luận: VẮC XIN PHỊNG BỆNH LỞ MỒM LONG MĨNG Giáo viên hướng dẫn: Nguyễn Ngọc Hải Sinh viên thực hiện: Nguyễn Hải Linh MSSV: 06126072 21 2  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải LỜI MỞ ĐẦU Bệnh lở mồm long móng (tiếng Anh: Foot-and-mouth disease, viết tắt FMD; tiếng Latin: Aphtae epizooticae), loại bệnh bệnh truyền nhiễm nguy hiểm virus gây động vật móng guốc chẵn lợn, bò, trâu, hươu, dê Bệnh nguy hiểm bệnh lây lan nhanh qua nhiều đường khác tiếp xúc trực tiếp động vật với nhau, truyền qua khơng khí Chính mà Tổ chức Y tế Thế giới xếp bệnh lở mồm long móng đứng đầu bệnh truyền nhiễm động vật Dịch bệnh lở mồm long móng xảy nhiều châu lục châu Á, châu Phi, châu Âu Nam Mỹ.Ở châu Âu, bệnh bùng phát Anh, Hà Lan Pháp vào năm 2001 Hàng triệu gia súc bị thiêu hủy gây tổn thất lớn cho ngành chăn ni nói riêng kinh tế quốc gia nói chung.Cùng năm đó, dịch xảy Hàn Quốc, Nhật Bản Đài Loan Đến cuối năm 2003, dịch xảy vùng Đông Nam Á (Thái Lan, Lào, Campuchia, Malaysia, Myanma, Philippines Việt Nam Một năm sau, dịch lan tới Trung Quốc, Nga, Mông Cổ tiếp tục Myanma.Trong năm 2005 2006, dịch tràn tới Nam Mỹ quốc gia Brasil, Argentina Paraquay châu Phi (Nam Phi) Năm 2006 năm bệnh dịch lở mồm long móng xảy mạnh hầu hết tỉnh thành Việt Nam với hàng chục nghìn gia sục bị nhiễm bệnh Tuy nhiên, điều kiện ý thức người dân, trình độ thiếu trách nhiệm cán thú y quyền địa phương mà dịch bệnh khống chế dễ dàng Một số nơi, sử dụng vật chết làm thức ăn Nếu vùng có bệnh lở mồm long móng xảy tất hàng hóa có nguồn gốc từ gia súc thịt, da lơng sừng, móng… hàng nông sản trồng vùng gạo, bắp, đậu… khơng phép xuất sang nước khác Do tỉnh vùng có dịch khơng thiệt hại mặt thương mại mà ảnh hưởng dây chuyền đến tỉnh vùng lân cận Tùy điều kiện mà nơi có nhiều cách phịng chống với hiệu khác Cách tốt để phòng bệnh sử dụng vắc xin Tuy nhiên, vật nhiễm bệnh, hữu hiệu tiêu hủy toàn số gia súc bị bệnh, điều nước châu Âu thực hoàn hảo đầu năm 2001 Bài tiểu luận giới thiệu vaccine phòng bệnh lở mồm long móng sản phẩm vaccine thị trường 3  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải TỔNG QUAN I GIỚI THIỆU BỆNH LỞ MỒM LONG MĨNG Bệnh lỡ mồm long móng bệnh truyền nhiễm cấp tính lây lan nhanh mạnh, rộng cho nhiều loài gia súc, loài nhai lại, heo người Bệnh virus hướng thượng bì, thủy hóa tế bào thượng bì hình thành mụn nước niêm mạc miệng, lưỡi, da, móng… Bệnh gây tổn thất lớn kinh tế Nguyên nhân: Do virus thuộc giống Aphthovirus, họ Picornaviridae có type virus gây bệnh lỡ mồm long móng: O, A, C, S.A.T–1, S.A.T- 2, S.A.T- ASIA-1 Hiện nước ta có type gây bệnh A, O Sức đề kháng virus - Virus có sức đề kháng mạnh Ở 600C tồn 5-15 phút, 1000C virus chết, từ 040C tồn 425 ngày, đất ẩm virus sống hàng năm, thịt ướp lạnh virus tồn lâu phân virus tồn ngày, nước tiểu virus tồn 39 ngày Phương thức truyền lây: - Bệnh lây qua đường tiêu hóa, đường hơ hấp sinh dục đường xâm nhập phụ Sự truyền bệnh trực tiếp nuôi nhốt chung, chăn thả chung… lây gián tiếp qua thức ăn, nước uống, dụng cụ chăn nuôi mang mầm bệnh, người, phương tiện vận chuyển - Loài mắc bệnh: Trâu bị mắc bệnh nhiều nhất, đến lồi sau: heo, dê cừu, thú hoang dã… Bệnh lây qua cho người, lồi móng, ngựa, gia cầm không mắc bệnh Triệu chứng: Thời gian nung bệnh từ 2-7 ngày, trung bình 3-4 ngày, gồm thể bệnh 4.1 Thể thông thường: - Bệnh hay gặp vùng nhiệt đới, thú ủ rũ, lông dựng, da mũi khô, thú sốt cao 40-41 0C kéo dài ngày - Xuất mụn nước da, vành móng kẻ chân, lưỡi, vú làm thú ăn, nhai khó khăn - Ở miệng: lưỡi có mụn to đầu lưỡi gốc lưỡi hai bên lưỡi, xoang miệng má, lỗ chân răng, mơi có mụn lấm hạt ké, hạt bắp Sau mụn vỡ tạo thành vết loét đáy nhỏ phủ màu xám Nước dãi chảy nhiều bọt xà phịng - Ở mũi: niêm mạc có mụn nước, đặt biệt vành mũi có mụn loét, nước mũi lúc đầu sau đục dần - Ở chân, kẽ móng có mụn nước từ trước sau, mụn vỡ làm long móng - Ngồi da : xuất mụn loét vùng da mỏng bụng, bẹn, vú, đầu núm vú … Thú giảm sản lượng sữa, sau sữa đổi thành màu vàng, vắt sữa khó gây viêm vú - Sau hàng loạt mụn nước vỡ dần dẫn đến nhiễm trùng máu, nhiễm trùng da, thú sốt cao, suy nhược dần 4  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải 4.2 Thể biến chứng - Những biến chứng xảy điều kiện vệ sinh, chăm sóc làm mụn vỡ dẫn đến nhiễm trùng, chân bị long móng, thối móng, thối xương làm thú q Vú bị viêm tắt sữa Các mụn khác vỡ gây nhiễm vi khuẩn kế phát, bại huyết - Bệnh lỡ mồm long móng ghép với bệnh ký sinh trùng hay vi khuẩn khác có sẵn máu (tiêm mao trùng, lê dạng trùng ) làm vật mau chóng chết 4.3 Thể ác tính - Trên bê nghé triệu chứng sốt cao, thú bị tiêu chảy chết đột ngột trước xuất mụn nước thượng bì viêm ruột cấp tính, viêm phổi cấp viêm tim cấp tính Bệnh tích: Chủ yếu đường tiêu hóa miệng có vết loét lưỡi, lỗ chân răng, hầu, thực quản, dày… Ở đường hô hấp gây viêm phế quản Bên phủ tạng: tim bị viêm cấp, van tim bị sùi loét, lách bị sưng đen, niêm mạc ruột non ruột già xuất huyết điểm, long móng, rụng xương bàn chân Khi khỏi bệnh vết loét để lại sẹo (1) (2) ( 3) (4) (5) 5  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải (6) (7) Hình 1.1: Một số hình ảnh triệu chứng, bệnh tích FMD bò: (1) Miệng chảy nhiều nước bọt, (2) Vết loét lưỡi, (4) Vết loét móng (5) Vết lt móng bị, (7) miệng lt lưỡi mơi, nưới Phịng bệnh - Khi phát dịch phải khai báo với quan thú y quyền địa phương, cách ly thú bệnh, tránh tiếp xúc với thú khỏe loài thú khác - Phòng bệnh vệ sinh quan trọng, thường xuyên sát trùng chuồng trại, dụng cụ chăn nuôi, bãi chăn thả, loại thuốc sát trùng - Khi xảy bệnh phải xử lý thật kỹ tồn chuồng trại, dụng cụ chăn ni loại thuốc sát trùng, gia súc mắc bệnh phải tích cực điều trị phụ nhiễm tránh lây lan bệnh, xác chết phải xử lý theo quy định ngành thú y Không phép bán chạy tự ý giết mổ bán thịt gia súc mắc bệnh - Định kỳ tiêm phòng bệnh lỡ mồm long móng vaccin (1 năm tiêm 1-2 lần tùy theo vaccin) Vaccin dùng nên lựa chọn vaccin đa giá có type O A II LỊCH SỬ RA ĐỜI CỦA VACCINE Sau thí nghiệm thành cơng Jenner, phương pháp chủng đậu triển khai rộng rãi Tính đến năm 1801, Anh có 100.000 người chủng Bỏ qua huyền thoại lẻ loi không chắn trên, vắc-xin gắn với tên tuổi Edward Jenner, bác sĩ người Anh Năm 1796, châu Âu có dịch đậu mùa, Jenner thực thành công thử nghiệm vắc-xin ngừa bệnh Kinh nghiệm dân gian cho thấy nông dân vắt sữa bị bị lây bệnh đậu bị, sau khỏi bệnh, họ trở nên miễn nhiễm bệnh đậu mùa Dựa vào đó, Jenner chiết lấy dịch từ vết đậu bò cánh tay cô bệnh nhân Sarah Nelmes cấy dịch vào cánh tay cậu bé tuổi khỏe mạnh làng tên James Phipps Sau Phipps có triệu chứng bệnh đậu bị 48 ngày sau, Phipps khỏi hẳn bệnh đậu bò, Jenner liền tiêm chất có chứa mầm bệnh đậu mùa cho Phipps, Phipps không mắc 6  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải bệnh Cách làm Jenner xét theo tiêu chuẩn y đức ngày thật không ổn, rõ ràng hành động có tính khai phá: đứa trẻ chủng ngừa đề kháng bệnh Thời Jenner, virus chưa khám phá, cịn vi khuẩn tìm vai trò gây bệnh chúng chưa biết Thời điểm 1798, Jener cơng bố kết thí nghiệm mình, người ta hình dung có "mầm bệnh" gây nên truyền nhiễm Lần lịch sử, người toán bệnh hiểm nghèo Ảnh chụp năm 1977, Ali Maow Maalin, người Somalia, xem bệnh nhân cuối mắc bệnh đậu mùa Tám mươi năm sau, Louis Pasteur nghiên cứu bệnh tả dịch tả tàn sát đàn gà Ông cấy 7  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải vi khuẩn tả phịng thí nghiệm đem tiêm cho gà: bị tiêm chết Mùa hè năm 1878, ơng chuẩn bị bình dung dịch ni cấy vi khuẩn dạng huyền phù, để đó, nghỉ mát Khi trở về, ơng lại trích lấy huyền phù đem tiêm cho gà Lần bầy gà bị bệnh nhẹ đàn khỏe lại Pasteur hiểu ông vắng, đám vi khuẩn huyền phù bị biến tính, suy yếu Ơng lấy vi khuẩn tả (bình thường) đem tiêm cho gà vừa trải qua thí nghiệm chưa bị chích vi khuẩn Kết chích vi khuẩn (biến tính) có khả đề kháng lại mầm bệnh, bọn lại chết hết Qua đó, Pasteur xác nhận giả thuyết Jenner mở đường cho khoa miễn dịch học đại Từ đó, chủng ngừa đẩy lùi nhiều bệnh: triệt tiêu bệnh đậu mùa tồn cầu, tốn gần hoàn toàn bệnh bại liệt, giảm đáng kể bệnh sởi, bạch hầu, ho gà, bệnh ban đào, thủy đậu, quai bị, thương hàn uốn ván v.v Ngun tắc khơng có thay đổi: gây miễn dịch vi khuẩn virus giảm độc lực, với proteinđặc hiệu có tính kháng ngun để gây đáp ứng miễn dịch, tạo trí nhớ miễn dịch đặc hiệu, tạo hiệu đề kháng cho thể sau tác nhân gây bệnh xâm nhập với đầy đủ độc tính ĐỊNH NGHĨA Vaccine chế phẩm sinh học chứa vật chất mầm bệnh gọi "kháng nguyên".Khi đưa vào thể người động vật kích thích thể tạo trạng thái miễn dịch, giúp thể chống lại mầm gây bệnh (Outteridge,1985) Nhờ tiến khoa học kĩ thuật ngày vaccine chế tạo cơng nghệ cao có hiệu lực mạnh sử dụng tiện lợi hơn, đồng thời có gía thành hạ hợp với người tiêu dùng Dù chế tạo công nghệ vaccine phải bảo đảm bốn tiêu chuẩn sau: - Khơng gây phản ứng tồn thân.Có thể có phản ứng cục bộ, biểu lâm sàng phải biến 24 sau tiêm phòng - Hiệu lực phòng bệnh cao kéo dài 8  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh - GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Tiêm nhẹ tay, liều tiêm thấp bảo quản dễ dàng Giá thành hạ THÀNH PHẦN CHỦ YẾU CỦA VACCINE Có hai thành phần chủ yếu vaccine là:Kháng nguyên chất bổ trợ vaccine Kháng nguyên:kháng nguyên hiểu chất đưa vào thể kích thích thể vật chủ sản sinh kháng thể tạora mộ lớp tế bào mẫn cảm đặc hiệu chống lại xâm nhập gây bệnh mầm bệnh - Tính kháng ngun: Đó khả kích thích sinh miễn dịch thể miễn dịch tế bào kháng nguyên Tính kháng nguyên kháng nguyên vaccine mạnh hay yếu phụ thuộc vào tổng số nhóm định kháng nguyên, trọng lượng phân tử,thành phần hóa học, cấu trúc lập thể khả tích điện phân tử kháng nguyên - Tính đặc hiệu kháng nguyên: Một kháng nguyên taọ miễn dịch mạnh, tính kháng ngun cao cần phải có tính đặc hiệu rõ nét.Tính đặc hiệu phụ thuộc vào tính chất cấu trúc kháng nguyên Chất bổ trợ vaccine: Là chất bổ sung vào vaccine, có khả kích thích sinh miễn dịch khơng đặc hiệu nhằm nâng cao hiệu lực độ dài miễn dịch vaccine - Bổ trợ kết hợp với kháng nguyên làm tăng tính lạ kháng nguyên vào thể,nên đáp ứng miễn dịch mạnh hơn,quá trình tổng hợp protein cao hơn.Vaccine có bổ sung chất bổ trợ tạo miển dịch mạnh ,thời gian miễn dịch kéo dài 3.CƠ CHẾ HOẠT ĐỘNG CỦA VACCINE - Hệ miễn dịch nhận diện vắc-xin vật lạ nên hủy diệt "ghi nhớ" chúng Về sau, tác nhân gây bệnh thực thụ xâm nhập thể, hệ miễn dịch tư sẵn sàng để công tác nhân gây bệnh nhanh chóng hữu hiệu (bằng cách 9  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải huy động nhiều thành phần hệ miễn dịch, đặc biệt đánh thức tế bào lympho nhớ) Đây ưu điểm đáp ứng miễn dịch đặc hiệu 4.PHƯƠNG PHÁP SẢN XUẤT VACCINE Cách sản xuất cổ điển: Lấy vi khuẩn gây bệnh, làm giảm độc lực (tạm gọi kháng nguyên) tiêm vào người chúng khơng đủ sức gây bệnh mà kích thích thể tạo chất miễn dịch (gọi kháng thể) Lần sau gặp lại vi khuẩn, kháng thể chống lại nên thể không mắc bệnh Cách sản xuất đại: Chỉ lấy kháng nguyên vi khuẩn gây bệnh, “cấy” vào vi khuẩn lành tính, làm cho sinh sơi nảy nở, “chiết” kháng ngun từ vi khuẩn lành tính làm vacxin Cách điều chế “công nghệ sinh học” dùng lượng kháng nguyên nhỏ, đỡ tốn kém, cần dùng liều nhỏ Với hai nguyên lý sản xuất trên, khơng dùng vacxin mà mắc bệnh vi khuẩn gây Nhưng khơng phải vacxin điều chế theo “công nghệ sinh học” Virus cúm týp A hay biến đổi, lấy kháng nguyên chủng định để điều chế theo “công nghệ sinh học”, tạo loại vacxin có tính ổn định Khi tiếp xúc với chủng cúm týp A mới, biến dị vacxin ổn định lại khơng có hiệu lực Hàng năm WHO dự báo chủng cúm týp A gây dịch, khuyến cáo dùng loại vacxin chống cúm thích hợp III SỰ CHỌN GIỐNG VÀ PHÁT TRIỂN VACCINE FMD Có hai lý để phát triển chủng ngừa Trước hết, cơng nhận chuyên gia, bao gồm nhà sản xuất vắc xin tham khảo phịng thí nghiệm, mà virus khác đáng kể có xuất khu vực / đảm bảo phát triển chủng ngừa Điều công nhận lúc dựa khảo nghiệm huyết học kiểm tra trung hòa vi rút hỗ trợ theo trình tự phân tích protein VP1 Một ví dụ lên chủng A Iran vào năm 1996 Merial phản ứng cách phát triển chủng ngừa mới, gọi A Iran 96, mà sử dụng rộng rãi Trung Đông lựa chọn số ngân hàng kháng nguyên Lý thứ hai có liên quan với quốc gia nơi mà chương trình tiêm chủng thường xuyên tuyển dụng tình dịch tễ tương đối ổn định Tình hỗ trợ khái niệm rõ ràng việc chuẩn bị chủng ngừa từ trường địa phương để cô lập giống virus chủng ngừa kết hợp chặt chẽ Các serotype O phổ biến chắn cho thấy mức độ vừa phải biến thể chủng vùng, với biến thể khắc nghiệt Tuy nhiên, có hai dịng chủng vắc xin đại diện chủng O cũ (vượt 30 năm kể từ phát 10  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải triển chúng) châu Âu Mỹ Nam Mỹ (OBFS 1860, O Lausanne Campos O) chủng cũ Trung Đông châu Á (đại diện giống O Manisa O3039) Trong trường hợp nhóm thứ hai vi rút, có chủng có giá trị khác serotype O sử dụng Tuy nhiên, thành lập chủng vi rút chẳng hạn O Manisa cung cấp tốt cho tình xảy nhiều lần Các serotype A khác nhau, trưng bày loạt biến thể kháng nguyên A24 bao gồm giống điển hình Cruzeiro 1955 phân lập sử dụng rộng rãi Nam Mỹ, virus A22, thường A22 Iraq 24/64 sử dụng rộng rãi Viễn Đông, gần biến thể A Trung Đông (A Iran 94, 96, 99 2001) Châu Á (A Malaysia 97) Với serotype A, chắn nên sử dụng chủng văcxin thích hợp cho nơi địa phương lập Tuy nhiên, kiểm tra cẩn thận phân phối tồn giới serotype A khơng xuất biếtmột số tình hình ổn định Đơng Nam Á Nam Mỹ Trung Đông xuất lần đại diện cho 'hot-spot', gần đây, biến thể quan trọng lên cách hợp lý thường xuyên It is tempting để suy đoán tần số rõ ràng tăng cường lấy mẫu khu vực kết hành động tích cực quan thú y, đáng ý Iran Với serotype A, cịn vị trí cảnh giác nhiều Sự đa dạng kháng nguyên serotypes C Asia1 Trong trường hợp serotype C, thực hành phổ biến để sử dụng nhiều chủng C thời kỳ serotype phổ biến, ngày nay, báo cáo virus Trong trường hợp cô lập gần virus C Bắc Brasil, khơng có sở để giả định thường chủng vắc xin C Nam Mỹ không bao phủ tình hình IV CÁC LOẠI VACCINE Vaccine vơ hoạt: - Dùng toàn thân virus hay vi khuẩn làm kháng nguyên giết hóa chất ( formolđehyde….) nhiệt Đáp ứng miễn dịch khơng hồn chỉnh thời gian miễn dịch ngắn Phải có chất bổ trợ để tăng đáp ứng miễn dịch Đặc tính vaccine: Là vắc xin vô hoạt sản xuất từ virus lở mồm long móng chứa nhiều chủng huyết Chỉ đinh: dùng phịng bệnh lở mồm long móng gia súc 11  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Thành phần: Kháng ngun - - Virus lở mồm long móng vơ hoạt có chứa nhiều chủng huyết lưu hành vùng: typ O, A, C, Asia 1, SAT 1, SAT 2, SAT3 Mỗi liều chứa 3DP50 Ở Việt Nam thường vaccine loại tam giá O, A, Asia 1; typ O có chủng OManisa O3039; typ A có chủng A22 A Malaysia97, Asia Shamir -> phù hợp với điều kiện dịch tễ Chất bổ trợ: ƒ Nhũ dầu kép ( DOE): Nước dầu, tất nằm nước ƒ Hoặc Hydroxyde d’ Aluminium Saponine …… Tác dụng phụ: Sau tiêm ngừa viêm nhẹ chỗ tiêm / kèm sốt nhẹ thời gian ngắn Rất xảy trường hợp mẫn phương pháp sản xuất vaccine Chú ý: • Chỉ chủng ngừa cho thú khỏe mạnh Thao thác cản thận thú mang thai 12  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải • Bảo quản vắc xin điều kiện vô trùng thông thường, mở nắp lọ, vắc xin sử dụng vòng 36 với điều kiện bảo quản nhiệt độ 20C80C không đâm kim vào nút cao su nhiều lần Ưu điểm: • Kích thích thể đáp ứng miễn dịch tốt tiêm nhắc lại • Tính an tồn, khơng đột biến trở lại cường độc • Dễ bảo quản sử dụng Nhược điểm: • • • • • • Khó khăn tiêm phịng phải đưa vào cá thể Nhiều cá thể khơng có đáp ứng miễn dịch Phải tiêm nhắc lại -> bảo hộ bền Khơng có khả kích thích sinh đáp ứng miễn dịch cục Giá thành cao loại vaccine nhược độc loại Nếu vô hoạt không triệt để -> gây an toàn Vaccine nhược độc Kháng nguyên virus vi khuẩn tính độc bị làm yếu hẳn Vaccine nhược độc thường tạo đáp ứng miễn dịch dài Ưu điểm: - Hoạt hóa tất thành phần hệ thống miễn dịch Đáp ứng miễn dịch nhanh kéo dài Dùng cho uống/ phun khí chung -> để sử dụng với số súc vật lớn Dễ vận chuyển Nhược điểm: • Có thể đột biến trở lại dạng cường độc • Bảo quản phức tạp (lạnh 2-80C) Vaccine tái tổ hợp ( recombinant vector vaccine) 13  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Gắn đoạn gen mã hóa cho kháng nguyên quan tâm virus vào virus / vi khuẩn khác ( vật mang gene) -> lên men sau thu hoạch tinh chế lại đoạn gene mã hóa để sản xuất vaccine Vaccine DNA Chế từ DNA mầm bệnh, thân khơng phải kháng ngun xâm nhập vào thể vật chủ tiêm vào thể, tổ hợp loại protein tế bào cơ, sau số tế bào hệ thong miễn dịch nhận biết chống lại protein tế bào sinh nó, tế bào tồn thời gian dài, mầm bệnh có mang loại protein vào thể bị hệ thống miễn dịch thể tiêu diệt chúng Vắc xin ADN dùng chất liệu di truyền vi sinh vật; đặc biệt gen mã hố kháng ngun quan trọng Hình 6.6 Mơ hình sản xuất điều trị liệu pháp DNA vaccine 14  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Phân lập nhiều gen từ tác nhân gây bệnh (pathogen), đưa gen vào vòng DNA plasmid đóng lại (a) Các vịng DNA sau đưa vào nhóm tế bào nhỏ, thường cách tiêm vào tế bào (b) đẩy vào da nhờ súng bắn gen (c) Các gen chọn lựa mã hóa cho kháng nguyên, chất gây đáp ứng miễn dịch, thường sản xuất tác nhân gây bệnh Trong nghiên cứu “Recombinant Bivalent Vaccine against Foot-and-Mouth Disease Virus Serotype O/A Infection in Guinea Pig” nhóm nghiên cứu Trung Quốc, hai mảnh DNA mã hóa axit amin (141-160) - (21-40) - (141-160) củaVP1 FMDV (vi rút bệnh lở mồm long móng ) serotype O (138-160) - (21-40) - (138-160) FMDV serotype A tổng hợp hóa học Những hai đoạn lặp lại buộc lại chuyển vào vector biểu prokaryotic pTrcHis A để xây dựng PTH-viêm khớp Các vector khác gọi PTH-O-scIgG-A xây dựng tương tự hai đoạn DNA lặp lại liên kết chuỗi mã hóa trình tự bovine -IgG Lợn Guinea chích ngừa với PTH hai vắc xin hoӘa trị hai-viêm khớp PTH-O-scIgG-A cho thấy hai kháng thể hoạt động đặc biệt phản ứng gia tăng tế bào T Thử FMDV cho thấy, 85% 70% lợn guinea tiêm hai lần với 200 μg protein fusion PTH-O-A bảo vệ khỏi FMDV serotypeO serotype A lây nhiễm tương ứng 70% 57% lợn guinea chích ngừa với protein nhiệt hạch PTH-O-scIgG-A bảo vệ khỏi FMDV serotype O serotype A lây nhiễm tương ứng 15  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Fig The structure of the fusion protein and the construction of the expression plasmid pTH-O-A Fig The structure of the fusion protein and the construction of the expression plasmid pTH-O-scIgG-A Việc kiểm soát FMDV chủ yếu thực hóa học cách sử dụng vắc xin vi rút khơng hoạt động, mà chứa vi rút sống cịn sót lại gây nguy hiểm vi rút Trong quốc gia khơng có dịch , loại vắc-xin áp dụng cho tình khẩn cấp Vấn đề khác vắc xin cho bảy serotypes FMDV không gây miễn dịch bảo vệ chéo, đó, tiêm phịng với serotype khơng bảo vệ chống lại 16  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải nhiễm trùng serotypes FMDV khác Tuy nhiên khó để dự đoán mà serotype FMDV phá vỡ khu vực trước tiêm chủng Hơn nữa, nhiều serotypes lưu hành ổ dịch gây nhiều serotype Nhiều chương trình tiêm phịng FMDV thất bại lý này, đặc biệt nước phát triển thiếu nguồn kỹ thuật / tài nhanh chẩn đốn xác serotype Bảo vệ vật ni có hiệu từ FMDV, vaccine đa cần thiết để tiêm chủng loài động vật FMDV serotype O A thường xuyên xuất nhiều nước, chúng tơi nghiên cứu vắc xin tái tổ hợp hai hoӘa trị chống lại hai serotypes Chúng ta có trước phát triển chủng ngừa dịch tái tổ hợp biểu protein fusion gal-FMDV β-galactosidase phân đoạn gen miễn dịch protein FMDV VP1 chứa amino axit (141-160) - (21-40) - (141-160) Protein fusion gây phản ứng miễn dịch bảo hộ heo lợn guinea Tất loài động vật chích ngừa có hiệu bảo vệ chống lại FMDV Globulin miễn dịch (Ig) protein mang lý tưởng vaccine tái tổ hợp Kết quả: Phân tích gia tăng tế bào T Tế bào lách từ lợn guinea gây miễn dịch với pTH-OA PTH-O-scIgG-A cho thấy phản ứng tăng nhanh rõ ràng FMDV khơng hoạt động Sau kích thích pha lỗng khác FMDV khơng hoạt động, khơng có khác biệt rõ ràng SI (chỉ số kích thích) serotypes FMDV O A, SI gây protein fusion thấp mức gây bất hoạt vắc xin virus 17  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải 18  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Fig Proliferation of spleen cells of guinea pigs vaccinated with pTH-O-A (A) and pTH-O-scIgG-A (B) fusion proteins Vắc xin peptide tổng hợp: Kỹ thuật công nghệ gen sinh hóa ngày cho phép xác định trình diện kháng nguyên (epitope) protein virus tổng hợp chuỗi peptide tương ứng với yếu tố kháng nguyên Các peptide tổng hợp phối trộn với tá dược để sản xuất thành loại vắc xin peptide tổng hợp Đây loại vắc xin có triển vọng lớn với ưu điểm bật an toàn sản xuất sử dụng than chúng khơng tác nhân gây nhiễm, dễ bảo quản vận chuyển chúng bền Tuy nhiên loại vắc xin có nhược điểm khả gây đáp ứng miễn dịch thấp chuỗi peptide tổng hợp, tính đặc hiệu hẹp chuỗi peptide làm hạn chế khả bảo hộ vắc xin chủng virus gây bệnh tự nhiên Vắc xin chứa có trình diện kháng ngun nên dễ dàng có chủng virus biến dị đề kháng với hiệu bảo vệ vắc xin Gần thực vật chuyển gien sử dụng giải pháp thay cho phương pháp cổ truyền để sản xuất kháng nguyên phục vụ cho việc sản xuất vắcxin thực nghiệm Tuy nhiên hầu hết phương pháp sử dụng thực vật chuyển gien có hạn chế quan trọng kháng nguyên tái tổ hợp (recombinant antigen) tồn hàm lượng thấp mô thực vật, điều hạn chế khả áp dụng phương pháp vào thực tế sản xuất Nghiên cứu nhóm nhà khoa học Ác-hen-ti-na Tây Ban Nha thành công việc tạo thực vật chuyển gien có khả nãng tổng hợp epitope miễn dịch mức ðộ cao Trong nghiên cứu tác giả nối kết gien tổng hợp epitope có độ đáp ứng miễn dịch cao từ vi rút lở mồm long móng với gien báo cáo glucuronidase (gus A) Sự kết hợp cho phép chọn lọc thực vật chuyển gien dựa hoạt độ enzyme glucuronidase Các tác giả tạo alfalfa (cỏ linh lăng) chuyển gien có khả tổng hợp đoạn pép-tít từ a-xít amin 135 đến a-xít amin 160 protein cấu trúc VP1 (VP135-160) nối với (fused) protein GUS Sử dụng phương pháp Western Blot với VP135-160, tác giả cho thấy tổng hợp VP135-160 mức cao tương với có hoạt độ enzyme GUS mạnh Đoạn peptide tổng hợp thực vật có khả tạo đáp ứng miễn dịch chuột tạo kháng thể kháng vi rút lở mồm long móng (FMDV) Chuột gây miễn dịch VP135-160 có khả đề kháng tốt với vi rút lở mồm long móng Kết 19  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải nghiên cứu gợi phương pháp đơn giản hiệu để tạo thực vật chuyển gien có khả tổng hợp kháng nguyên mức độ cao dùng cho việc sản xuất vác-xin KẾT LUẬN Tình trạng bệnh lở mồm long móng nước ta ổn định năm 2005-2006 (thời kỳ xuất bệnh nước ta) nhờ vào vaccine phịng bệnh lở mồm long móng Nước ta nước nông nghiệp nên thiệt hại đàn gia súc ảnh hưởng lớn đến kinh tế đời sống nhân dân Vì vậy, việc tiêm phịng vắc xin phịng bệnh lở mồm long móng cần thiết Tuy sơ sản xuất chưa điều chế vắc xin này, phần lớn nhập từ nước tương lai tiềm sản xuất vaccine phòng bệnh lở mồm long móng nói riêng phịng bệnh gia súc, gia cầm, thủy sản nói chung lớn Hiện nay, nước ta sử dụng vaccine vô hoạt nhược độc để phịng bệnh lở mồm long móng chủ yếu Trong tương lai nhờ vào phát triển công nghệ gen kỹ thuật tiên tiến khác có loại vaccine hiệu để phòng bệnh 20  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh GVHD: Nguyễn Ngọc Hải TÀI LIỆU THAM KHẢO Martinez-Salas E, Saiz M, Sobrino F (2008) " Foot-and-Mouth Disease Virus " Animal Viruses: Molecular Biology "Foot-and-Mouth Disease virus" Caister Academic Press Caister Academic Press pp 1–38 ISBN 978-1-904455-22-6 pp 1-38 ISBN 978-1-904455-22-6 http://www.scribd.com/ P.-P Pastoret, M Lombard & A.A Schudel “Animal vaccination – Part 1: development, production and use of vaccines Scientific and Technical Review 26 (1), 2007” http://tailieu.vn/ Nguyễn Ngọc Hải -Công nghệ sinh học thú y –, nhà xuất nông nghiệp M.J Grubman & P.W Mason” Prospects, including time-frames, for improved foot and mouth disease vaccines” S.J Barteling “Development and performance of inactivated vaccines against foot and mouth disease “ Foot-and-mouth disease vaccines from the Animal Sciences Group Dr Tim Doel.” Foot-and-Mouth Disease Vaccine Strain Selection and Development” 10 R.P Kitching “Identification of foot and mouth disease virus carrier and subclinically infected animals and differentiation from vaccinated animals” 11 Jian-Zhong YI1, Ming-Qiu LIU1, Cai-Zhu ZHU2, Qiang ZHANG1, Zu-Tian SHENG3, Qing-Yun DU3,Wei-Yao YAN1, and Zhao-Xin ZHENG1*.” Recombinant Bivalent Vaccine against Foot-and-Mouth Disease Virus Serotype O/A Infection in Guinea Pig” “ 21  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SVTH : Nguyễn Hải Linh PHỤ LỤC GVHD: Nguyễn Ngọc Hải Trang LỜI MỞ ĐẦU TỔNG QUAN I.Giới thiệu bệnh lở mồm long móng II Lịch sử đời vaccine Định nghĩa vaccine Thành phần chủ yếu vaccine Cơ chế hoạt động 10 Phương pháp sản xuất vaccine 10 III Sự chọn giống phát triển vaccine FMD 11 IV Các loại vaccine phòng bệnh lở mồm long móng 12 Vaccine vô hoạt 12 Vaccine nhược độc 14 Vaccine tái tổ hợp 14 Vaccine peptide tổng hợp 19 KẾT LUẬN 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO 21 22  LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... phịng vắc xin phịng bệnh lở mồm long móng cần thiết Tuy sơ sản xuất chưa điều chế vắc xin này, phần lớn nhập từ nước tương lai tiềm sản xuất vaccine phịng bệnh lở mồm long móng nói riêng phòng bệnh. .. dùng cho việc sản xuất vác -xin KẾT LUẬN Tình trạng bệnh lở mồm long móng nước ta ổn định năm 2005-2006 (thời kỳ xuất bệnh nước ta) nhờ vào vaccine phòng bệnh lở mồm long móng Nước ta nước nơng nghiệp... đáp ứng miễn dịch Đặc tính vaccine: Là vắc xin vơ hoạt sản xuất từ virus lở mồm long móng chứa nhiều chủng huyết Chỉ đinh: dùng phòng bệnh lở mồm long móng gia súc 11  LUAN VAN CHAT LUONG download